los telmeros son complejos funcionales especializados que protegen los
extremos de los cromosomas eucariotes, los que sufren un acortamiento
progresivo en cada divisin hasta alcanzar un tamao crtico en el que el ciclo celular se detiene y se inicia el proceso de senescencia replicativa. En condiciones normales la longitud de los telmeros es mantenida dentro de un rango determinado, como resultado de un equilibrio dinmico entre acortamiento y elongacin en el que la telomerasa, enzima capaz de adicionar secuencias telomricas en los extremos cromosmicos, juega un rol determinante. Adems de constituir la va principal de mantenimiento de la longitud de los telmeros, la telomerasa puede estabilizar rupturas dobles del ADN mediante la adicin de secuencias telomricas en los extremos de cromosomas rotos. Los telmeros estn protegidos por cromatina densamente compacta y son sitios particularmente apropiados para actuar como reservorio de protenas de deteccin y reparacin del ADN1, tanto destinadas a mantener su propia integridad como para ser liberadas hacia sitios de dao en el ADN genmico en respuesta a estrs genotxico
Estructura y funcin de los telmeros El telmero es una estructura altamente
conservada a travs de la evolucin, cuyas funciones ms relevantes son proteger el extremo cromosmico confirindole estabilidad y protagonizar interacciones con el ncleo celular. Si las clulas no pudieran distinguir entre una ruptura doble inducida por un agente genotxico y un extremo cromosmico normal, la ocurrencia de fusiones y recombinaciones conducira a un gran nmero de aberraciones cromosmicas. La interaccin con la envoltura y la matriz nuclear, por otra parte, contribuye a la organizacin tridimensional del ncleo, implicada en procesos tales como replicacin, transcripcin y segregacin6, 7. Los telmeros humanos estn formados por secuencias repetitivas de 6 nucletidos del tipo (TTAGGG)n. En el telmero pueden identificarse tres regiones que se asocian a protenas especficas, las que a su vez interaccionan con otras protenas implicadas en la maquinaria de reparacin: una porcin distal, formada por un extremo 3de ADN de cadena simple rico en guanina, una regin intermedia de cadena doble no nucleosomal inmediatamente adyacente a la anterior, y una regin proximal con nucleosomas de disposicin irregular (Figura 1). El extremo distal del complejo telomrico adopta una conformacin particular en forma de bucle en t cuya estabilizacin est dada por los denominados factores de unin a las repeticiones telomricas (telomeric repeat binding factors: TRF1 y TRF2). Esta estructura en forma de bucle impide el acople de la telomerasa y debe por tanto ser desplegada durante la replicacin del ADN telomrico (Figura 2). El mantenimiento de la compleja organizacin tridimensional del ADN telomrico con plegamiento de las cadenas ricas en guanina, denominada cuadrplex G, involucra la participacin de protenas especficas8
La regin sub-telomrica, contigua al telmero, est constituida por
heterocromatina con secuencias repetitivas que exhiben una gran variabilidad interindi-vidual11,12. Teniendo en cuenta que la regin telomrica est sujeta a procesos dinmicos de erosin y elongacin, la regin subtelomrica podra estar operando como zona intermedia entre el telmero y el ADN genmico para la proteccin y aislamiento de los genes funcionales adyacentes
Mantenimiento de los telmeros
Debido a la incapacidad de las ADN polimerasas para replicar en forma completa el extremo 5de la cadena de ADN, los telmeros sufren un acortamiento de entre 50 y 200 pares de bases en cada divisin13. Este acortamiento telomrico opera como un reloj mittico que regula el potencial proliferativo celular y, alcanzado un cierto nivel crtico de longitud, predispone a asociaciones telomricas (TAS) e inestabilidad cromosmica verificables en clulas transformadas y en desrdenes genticos14. Ciertas clulas con alto potencial replicativo disponen de vas compensatorias de elongacin telomrica que bsicamente consisten en: 1- sntesis de novo de secuencias telomricas, y 2- mecanismos alternativos de intercambios homlogos no recprocos. La sntesis de novo de secuencias telomricas como resultado de la accin de la telomerasa es el mecanismo prevalente de mantenimiento de la longitud de los telmeros7. La telomerasa humana posee una subunidad cataltica con accin de trancriptasa reversa (TERT) y una protena asociada (TP1) que interacta con TERT y modula la actividad de la enzima. Un fragmento de ARN de secuencia complementaria al telmero (TR) opera como templado interno para iniciar la transcripcin reversa (Figura 3). Mientras que TR y TP1 se expresan en todas las clulas, la expresin de TERT est limitada a las clulas en las que la telomerasa est activa, por lo que se la considera un factor limitante para el control de la actividad de esta enzima15,16. La disquerina es una protena que facilita el ensamblaje del TR dentro del complejo telomrasico. Su mutacin en la disqueratosis congnita induce acortamiento telomrico acentuado e inestabilidad genmica17.
Metabolismo telomrico y protenas de reparacin
Una significativa fraccin del genoma est destinada a velar por su propia integridad. Numerosas protenas vinculadas directa o indirectamente a la
deteccin y reparacin del dao al ADN se encuentran en estrecha asociacin
con el complejo telomrico, tales como ATM38, sis La protena ATM, localizada en el ncleo celular como parte del sistema de deteccin de rupturas dobles, juega un rol esencial en el anclaje de los telmeros a la matriz nuclear y participa en la regulacin del metabolismo telomrico38.
e han identificado dos variantes de PARP denominadas
tankirasas (TANK1 y TANK2) que participan en la elongacin de los telmeros a travs de su interaccin con la protena telomrica TRF. La TANK impide la unin de TRF1 al ADN telomrico, permitiendo que se despliegue la estructura terminal y posibilitando as el acceso de la telomerasa para iniciar la elongacin30. Una vez elongado el telmero, los polmeros son degradados y la unin del TRF1 al telmero vuelve a conferirle su estructura original en bucle, por lo cual la actividad de telomerasa es inhibida. Transcurrida la etapa de rpida respuesta de los sensores de dao, comienza una compleja secuencia de interacciones entre protenas asociadas a la reparacin genmica y protenas telomricas . El complejo RAD50-MRE11-NBS1, que participa en la reparacin de rupturas dobles mediante la alineacin de los extremos del ADN previa a la accin de las ligasas42, colocaliza con TRF1 y TRF2 a nivel de los telmeros, permitiendo la apertura de la estructura en bucle en t de su extremo terminal40
Estabilizacin de rupturas del ADN
Se ha postulado que las secuencias telomricas pueden intervenir en el proceso de estabilizacin de rupturas de ADN a travs de mecanismos telomerasa dependientes y no dependientes. La telomerasa puede adicionar secuencias telomricas en sitios de ruptura doble del ADN en otras regiones del genoma, esto es, fuera de los telmeros, estabilizando los extremos rotos mediante un proceso denominado cicatrizacin cromosmica44. Una vez estabilizados estos extremos ya no son reparables mediante el mecanismo NHEJ y persisten como tales45 pero, a diferencia de los extremos rotos no estabilizados, ya no plantean el riesgo de fusiones que podran conducir a la produccin de aberraciones cromosmicas tales como anillos o dicntricos.