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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA

DE MXICO
FACULTAD DE QUMICA

LABORATORIO DE INMUNOLOGA GENERAL

Tcnicas de Inmunoprecipitacin

Gpo: 4

Equipo: Conejo D

Casas Mara Fernanda


Fonte Lpez Dulce Ameyalli
Moreno Escobar Javier
Nicols Sols Anahi

12-mar-2015

Prctica 4. Cuantificacin de la concentracin de


albmina srica humana en dos muestras problema
por el mtodo de Inmunodifusin radial simple (RID)
OBJETIVOS:

Obtener la concentracin de albmina de las muestras problema.


Comparar las cantidades obtenidos con los valores de referencia para albmina en
suero y determinar si se encuentran alterados.

PREGUNTA DE INVESTIGACIN: Cul es la concentracin de ASH de las muestras


problema?
DESCRIPCIN DE RESULTADOS:

Muestra
Problema 1 derecho
Problema 1 izquierdo
Problema 2 derecho
Problema 2 izquierdo
Estndar 1 derecho
Estndar 1 izquierdo
Estndar 2 derecho
Estndar 2 izquierdo
Estndar 3 derecho
Estndar 3 izquierdo

Dimetro
del halo en
centmetros
1.3
1.4
1.0
1.0
1.3
1.5
1.3
1.2
1.0
1.0

DISCUSIN DE RESULTADOS:

Muestra
Estndar 1
Estndar 2
Estndar 3

Concentraci
n en
mg/mL
8
4
2

Tabla II: Datos de la concentracin


de cada muestra estndar.

St
St

FALTA ANEXAR GRFICAS

Tabla I: Dimetro del halo medido en la placa


de para la tcnica de RID.

Prctica 4. Mezcla de antgeno y anticuerpo. Prueba


de identidad a sueros de uso teraputico y
Determinacin del origen de manchas de sangre.

St
P1
St
P2
P2

OBJETIVOS:

Identificar de qu especie proviene un suero anti-alacrn por medio de la tcnica de


inmunoprecipitacin en capilar.

PREGUNTA DE INVESTIGACIN (1): Cul es el origen de la muestra con suero antialacrn?


DESCRIPCIN DE RESULTADOS:
-alacrn +
-rata
Negativo:
no hay
formacin
de pp.

-alacrn +
- equino

-alacrn +
BS

Positivo:
hay
presencia
de un pp.

(control
negativo)

DISCUSIN DE RESULTADOS:
Primeramente, las muestras control salieron correctamente por lo que no hubo una
contaminacin de las pruebas con la plastilina, ya que si las muestras hubiesen estado en
contacto con la plastilina generara un precipitado y por tanto obtendramos falsos
positivos.
En el caso de -alacrn hubo una formacin de precipitado en el caso del suero -equino,
lo cual nos dice que el suero extrado contra el veneno de alacrn provena del suero de
caballo; es decir, una parte de los anticuerpos de suero equino reconoci a una porcin Fc
del suero -alacrn.
PREGUNTA DE INVESTIGACIN (2): De qu origen es la mancha de sangre encontrada
en la bata de un compaero de la Facultad de Qumica?

DESCRIPCIN DE RESULTADOS:

-SH +
SH
control
positivo

-suero
ratn +
SR
control
positivo

PBS +
mancha
de sangre
control
negativo

-SH +
mancha de
sangre
muestra 1

-SR +
mancha de
sangre
muestra 2

La muestra de la mancha de sangre fue proporcionada por los profesores, para tenerla en
solucin le agregamos solucin salina y posteriormente la pusimos en la centrifuga para
que los eritrocitos quedaran en el fondo (pellet) y tuviramos nicamente en suspensin el
suero de dicha mancha problema.
DISCUSIN DE RESULTADOS:
Como en el caso anterior, se observ que las muestras control, salieron correctamente, en
caso de nuestros control positivo y negativo, lo cual nos garantiza que las muestras no se
contaminaron, ya que no estuvieron en contacto directo con la plastilina, ya que si hubiese
ocurrido esto tendramos falsos positivos (formacin de precipitado en diferentes
muestras, as como en la control negativo).
La precipitacin se observaba en forma de bandas en el capilar de suero -humano con
suero humano, y el de suero anti-rata con suero de rata, se utilizaron como control
positivo. El control positivo garantiza o no, la efectividad reactiva de las muestras y
reactivos que se usarn en la prctica. Por otro lado tambin se tiene el control negativo,
el cual tambin indica que nuestros reactivos sean los adecuados para realizar el
experimento de inmunoprecipitacin.
En el caso de la muestra 1 se observa que se form el precipitado, ya que el suero humano interacta con los componentes presentes en la mancha de sangre, por lo cual
podemos decir que la mancha de sangre provena de un humano, en este caso si hubo
interaccin de antgeno-anticuerpo, por lo que de esta manera se logr identificar la
procedencia de la mancha. Mientras que en el caso de suero -ratn no hubo formacin de
un precipitado, por lo que al no haber dicha interaccin antgeno-anticuerpo no hubo
formacin de dichas redes.
CONCLUSIONES:
El suero anti-alacrn proviene del suero del caballo, ya que hay formacin de un
precipitado.
La mancha de sangre que se encontr en la bata de un alumno de la Facultad de Qumica
corresponde a la de un humano, ya que form un precipitado al interaccionar con el suero
-humano.
En ambos casos, hubo una interaccin antgeno-anticuerpo, de esta manera podemos
conocer de donde provenan los diferentes sueros problema.

Bibliografa: Abbas, A.; et. al. Inmunologa celular y molecular, sexta edicin. Barcelona,
Espaa. Ed. El Sevier, 2008, p.47-64.