UNIVERSIDAD NACIONAL

SANTIAGO ANTNEZ DE MAYOLO

FACULTAD DE CIENCIAS DEL AMBIENTE

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE

INGENIERIA AMBIENTAL

INFORME DE LA PRCTICA N1
BIOENSAYOS CON CEBOLLAS

CURSO:

BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL

DOCENTE:

PALOMINO CARDENAS EDWIN

ALUMNOS:

CAMILO MAURICIO ABRAHAM

COSME COVEAS OMAR
TITO HUERTA ESTIF

HUARAZ ANCASH PER

2014

INDICE
1. INTRODUCCION
2. OBJETIVOS
3. MARCO TEORICO
3.1. BIOINDICADOR
3.2. TOXICIDAD
3.3. CEBOLLA
3.4. ASPECTOS GENERALES DE LA CEBOLLA
3.5. EFECTOS DEL CONTAMINANTE SOBRE EL BIOINDICADOR
3.5.1. EFECTOS DE LOS DETERGENTES
3.5.2. EFECTOS DEL BICLORURO DE MERCURIO
3.5.3. EFECTOS DEL DESIFECTANTE (SAPOLIO)
4. MATERIALES
5. METODOLOGIA Y PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
5.1. PREPARACION DE LOS CONTAMINANTES EN DISOLUCION CON
AGUA
5.2. BIOENSAYOS CON CEBOLLA
6. RESULTADOS
6.1. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y
DETERGENTE
6.2. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y
DESINFECTANTE SAPOLIO
6.3. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y AGUA DE
MESA
6.4. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS PINESOL
6.5. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y ETANOL
6.6. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y LEJIA
6.7. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y RELAVE
MINERO
7. DISCUSIN DE RESULTADOS
8. CONCLUSIONES
9. BIBLIOGRAFIA
10. ANEXOS

I.

INTRODUCCION

Los bioensayos son mtodos estandarizados empleados para la calidad el

agua, sobre todo para confirmar y evidenciar la toxicidad de diferentes aguas
contaminadas por diferentes sustancias dainas para la vida; por tal razn en
esta prctica se utiliz la cebolla ( Allium Cepa) sustancia muy sensible a
cualquier indicacin de contaminacin ambiental, que afecta a sus diversas
funciones vitales. Y en el caso de la Allium Cepa ;el grado de prejuicio de
estas sustancias dainas, se determin segn el nmero y el tamao de
meristemos que se pudieron desarrollar en el transcurso del tiempo ( 7 das )
al que fueron expuestas las cebollas( Allium Cepa)
Es por ello que la presente practica busca determinar la toxicidad de diferentes
tipos de aguas contaminadas, para ello realizamos bioensayos que son
pruebas basadas en organismos vivos, que nos proporcionaran informacin
sobre lo que deseamos investigar. En este caso, los organismos que vamos a
usar son la cebolla (Allium Cepa) y la anterior practica realizada la trucha
(OncorhynchusMikiss).
Los cuales nos indicaran si el agua est contaminada o no. Esto se podr
determinar debido a que la cebolla al desarrollar sus races es muy sensible a
la presencia de contaminantes. En otras palabras, las races no pueden crecer
(o crecen mucho menos) en un ambiente contaminado, y esto lo
determinaremos al medir la longitud de las races jvenes de cebollas que
crecieron en los diversos ambiente como son agua destilada, leja, detergente,
HgCl2, pinesol, etanol y agua de relave.

II.

OBJETIVO
Utilizar la cebolla como bioindicador para determinar la toxicidad de
diferentes tipos de contaminantes.

III.

MARCO TEORICO

III.1.

Bioindicador:

El concepto de organismo indicador se refiere a especies seleccionadas por su

sensibilidad o tolerancia (normalmente es la sensibilidad) a varios parmetros.
Usualmente los bilogos emplean bioindicadores de contaminacin debido a su
especificidad y fcil monitoreo.
La denominacin de una especie como indicadora requiere de conocimiento
previo respecto a su composicin comunitaria bajo condiciones normales,
incluyendo el ciclo de vida de las especies, su estacionalidad y sus variaciones
naturales, de manera que sea posible comparar las condiciones antes y
despus de una perturbacin ambiental
III.2.

Toxicidad:

La toxicidad es la capacidad de cualquier sustancia qumica de producir

efectos perjudiciales sobre un ser vivo, al entrar en contacto con el. Txico es
cualquier sustancia, artificial o natural, que posea toxicidad (es decir, cualquier
sustancia que produzca un efecto daino sobre los seres vivos al entrar en
contacto con ellos). El estudio de los txicos se conoce como toxicologa.
Ninguna sustancia qumica puede ser considerada no txica, puesto que
cualquier sustancia (agua, oxgeno) es capaz de producir un efecto txico si se
administra la dosis suficiente. Esto queda representado en la famosa frase de
Paracelso "slo la dosis hace al veneno". Todas las sustancias poseen
toxicidad, sin embargo unas tienen mayor toxicidad que otras. La intoxicacin
es el estado de un ser vivo en el que se encuentra bajo los efectos
perjudiciales de un txico.
III.3.

Cebolla:

Allium cepa, comnmente conocida como cebolla, es una planta herbcea

bienal perteneciente a la familia de las amarilidceas. Es la especie ms
ampliamente cultivada del gnero Allium, el cual contiene varias especies ms
que se denominan cebollas y que se cultivan como alimento. Ejemplos de
las mismas son la cebolla de verdeo (Allium fistulosum), la cebolla escaloena
(Allium ascalonicum) y la cebolla de hoja o ciboulette (Allium schoenoprasum).
La gran mayora de los cultivares de A. cepa pertenece al "grupo de la cebolla
comn" (grupo typicum) y se les conoce comnmente como cebollas. El

grupo aggregatum de cultivares comprende a la cebolla multiplicadora, que

se distingue por los bulbos que aparecen y quedan envueltos por las escamas
exteriores, y al chalote que forma un racimo o grupo de bulbos laterales
unidos por la base. El grupo viviparum, finalmente, est compuesto por las
cebollas que forman conjuntamente bulbillos y flores en las inflorescencias;
este tipo de cebolla se conoce como cebolla perenne o egipcia.
III.3.1. Aspectos Generales de la Cebolla:
En cuanto su morfologa, la cebolla presenta un sistema radicular formado por
numerosas raicillas fasciculadas, de color blanquecino, poco profundas, que
salen a partir de un tallo a modo de disco, o disco caulinar. Este disco caulinar
presenta numerosos nudos y entrenudos (muy cortos), y a partir de ste salen
las hojas. Las hojas tienen dos partes claramente diferenciadas: una basal,
formada por las vainas foliares engrosadas como consecuencia de la
acumulacin de sustancias de reserva, y otra terminal, formada por el "filodio",
que es la parte verde y fotosintticamente activa de la planta. Las vainas
foliares engrosadas forman las "tnicas" del bulbo, siendo las ms exteriores
de naturaleza apergaminada y con una funcin protectora, dando al bulbo el
color caracterstico de la variedad. Los filodios presentan los mrgenes foliares
soldados, dando una apariencia de hoja hueca. Las hojas se disponen de
manera alterna.
En el primer ao de cultivo tiene lugar la "bulbificacin" o formacin del bulbo.
Dicha bulbificacin tiene lugar como consecuencia de un aumento del
fotoperiodo (periodo de iluminacin diurna) acompaado de un ascenso de las
temperaturas, ya que la cebolla es una planta de da largo.
El segundo ao, al producirse unas condiciones ambientales favorables, tiene
lugar la fase reproductiva. Esto se traduce en la emisin de un tallo o escapo
floral que alcanza en torno a 1 m de altura, hueco en su interior y abombado en
su parte basal. Este escapo culmina en un "capuchn" formado por tres
brcteas que, en el momento de la floracin, se abren dejando al descubierto la
inflorescencia. sta es de tipo umbela y presenta numerosas flores
monoclamdeas de color blanco-verdoso. Las flores estn formadas por 6
tpalos, 6 estambres y un gineceo tricarpelar sincrpico con ovario spero y
trilocular, con dos primordios seminales por cada lculo. La polinizacin es
entomfila. El fruto es de tipo cpsula, conteniendo semillas pequeas (1 g =
250 semillas), de color negro, que presentan una cara plana y la otra convexa.
Su viabilidad desciende un 30% el segundo ao, y un 100% el tercero.
III.4.

Efectos del Contaminante sobre el Bioindicador:

III.4.1. Efectos de los detergentes:

Debido a su gran utilidad tanto en la industria como en los hogares, se

usan en gran cantidad constituyendo una fuente contaminante del agua
muy importante.
Los problemas ambientales que causan los detergentes radican,
fundamentalmente, en los aditivos que contienen como los
blanqueadores, abrillantadores pticos, perfumes, bactericidas y agentes
espumantes. Los aditivos que contienen en mayor proporcin son los
sulfatos (tripolifosfato de sodio).
III.4.2. Efectos del bicloruro de mercurio:
La sustancia es muy txica para los organismos acuticos. Puede
producirse una bioacumulacin de esta sustancia a lo largo de la cadena
alimentaria, por ejemplo en los organismos acuticos. La sustancia
puede causar efectos prolongados en el medio acutico.
III.4.3. Efectos del Desinfectante (Sapolio):
El desinfectante posee sustancias quimicas capaces de neutralizar y
destruir la formacin de grmenes que causan el mal olor.
El uso prolongado de este producto en estado puro, produce irritacin
sobre la piel y mucosas.

IV.

MATERIALES

Vasos de plstico rotulados

Cebollas
Pinesol
Leja
Sapolio (desinfectante)
Etanol
Bicloruro de Mercurio (HgCl2)
Relave Minero
Detergente
Agua
Probeta
Matraz Enlermeyer
Balanza Analtica

V.

METODOLOGIA Y PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

V.1.

Preparacin de los contaminantes en disolucin con agua:

a) Detergente:
Se disolvi 5 gr de detergente para 1000ml de agua, por lo tanto la
concentracin del detergente en la muestra ser de 0.5%
b) Relave Minero:
Se disolvi 20 gr de relave minero para 1000ml de agua, por lo tanto la
concentracin del relave en la muestra ser de 2%
c) Lejia:
Se disolvi 48 ml de leja para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin de
la leja en la muestra ser de 4.8%
d) Bicloruro de Mercurio (HgCl2):
Se disolvi 1 gr de HgCl 2 para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin de
HgCl2 en la muestra ser de 0.1%

e) Pinesol:
Se disolvi 15,6 ml de pinesol para 1000ml de agua, por lo tanto la
concentracin de pinesol en la muestra ser de 1.56%
f) Etanol:
Se disolvi 72 ml de pinesol para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin
del etanol en la muestra ser de 7.2%
g) Sapolio (desinfectante):
Se disolvi 15 ml de sapolio para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin
de pinesol en la muestra ser de 1.5%
V.2.

Bioensayos con Cebolla:

Se preparan las disoluciones de los contaminantes en 6 matraces.

Cada una de los 6 matraces contena muestras en disolucin relave

minero, etanol, leja, desinfectante sapolio, detergente y bicloruro de
mercurio.

Vaciar las disoluciones de los contaminantes en vasos de plstico (3

vasos por cada contaminante).

Luego incrustar mondadientes a travs de las cebollas.

Despus se coloca las cebollas encima de los vasos que contiene los
contaminantes (3 cebollas por cada contaminante).

Observar y anotar los resultados despus de 7 das de realizada la

prctica.

VI.

RESULTADOS

Despus de 7 das de realizado el bioensayo se procedi a observar los

resultados, adems de realizarse tambin el conteo de races.
VI.1. Resultados del bioensayo con cebolla y detergente:

cebolla 1
cebolla 2
cebolla 3
Promedio
Desv. Estand.
C1

N de meristemos
31
49
0
26.66666667
24.78574859

C2
0.3
0.3
0.2
0.4
0.2
0.4
0.4
0.5
0.5
0.4
0.2
0.5
0.3
0.3
0.3
0.2
0.3
0.4
0.3
0.3
0.2
0.2
0.1

C1
0.4
0.6
0.3
0.5
0.5
0.3
0.3
0.2
0.2
0.3
0.5
0.3
0.4
0.3
0.2
0.2
0.2
0.5
0.2
0.4
0.2
0.2
0.4

C2
0.2
0.15
0.2
0.1
0.2

0.5
0.4
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.6
0.4
0.4
0.2
0.3
0.2
0.4
0.3
0.25
0.2
0.2
0.25
0.5
0.2
0.5
0.3

meristemos
c.1
1
2
3
40.3
50.3
60.1

tamao
meristemos tamao
mm
c.1
mm
3
32
0.6
2.5
33
1
2
34
0.7
0.5
2
35
1
0.5
2
36
1.2
0.4
3
37
1.3
7
2.5
38
0.6
VI.2.
y sapolio (desinfectante):
8 Resultado
2 del bioensayo
39 con cebollas
0.8
9
2
40
0.7
N de meristemos 1.496774
cebolla10
1
40
2.8
prom
194
0.806839
cebolla 2
30
2.5
desvt
047
cebolla11
3
10
12
1.5 26.66666667
Promedio
1.5 15.27525232
Desv. 13
Estand.
14
2
15
2
tamao
mm 1
16
17
1.1
18
0.5
19
0.5
20
0.5
21
0.6
22
1
23
1.2
24
1.3
25
1
26
0.9
27
0.5
28
1
29
0.8
30
0.7
31
0.5
meristemos
c.2
tamao mm
1
3
2
3
3
1.5
4
1.5
5
2.5
6
1.5
7
1.2
8
1.2
9
2
10
1
11
1.2
12
2
13
1.5
14
2
15
1
16
1
17
1

meristemo
s c.3
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
prom
devest

3.5
4
3
3
2
2
2
2.5
3
2
2.7
0.714920
35

VI.3. Resultado del bioensayo con cebollas y Agua de Mesa

# de
Meristemas
Prom
Desv. Estan.
C1
2.1
1.2
1.9
1.5
1.4
0.9
1.9
1.6
1.1
0.7
1.4

C2
0.4
2.9
3.2
4.7
6.0
2.6
3.0
4.0
4.9
5.3
0.8

C1

C2

C3

10.0

29.0

54.0

1.4
0.5

2.9
1.8

3.6
1.6

C3
1.9
3.7
3.2
2.4
4.7
4.4
1.6
3.5
3.6
4.2
5.5

C3
1.0
1.0
3.5
3.1
3.4
4.1
4.8
4.7
5.7
5.0
6.0

4.3
0.9
0.5
3.0
5.5
2.5
1.1
0.4
2.5
0.9
2.4
6.0
2.8
5.3
0.5
1.5
4.0
2.9

2.2
5.2
4.9
4.4
4.0
0.5
0.6
4.1
5.4
4.9
5.2
4.5
3.2
2.6
4.4
3.0
4.5
4.8
4.7
2.0
2.2
0.7
0.2

5.5
3.4
1.0
0.5
5.9
4.5
4.0
4.6
5.3
3.4

VI.4. Resultado del bioensayo con cebollas y pinesol

cebolla 1
cebolla 2
cebolla 3
Promedio
Desv. Estand.

Columna1
promedio
desviacion
estandar
Columna1

promedio
desviacion
Estandar

N de meristemos
0
5
20
8.333333333
10.40833
M2
M1(longitud
(longitud
mm) mm)
0
0
0
2
3
2.5
0.71

Columna1

promedio
desviacion
estandar

M3(longitud
mm)
4
3
4
3
3
2
5
5
4
5
4
5
4
3
5
4
3
5
3
5
3.95
0.94

VI.5. Resultados del Bioensayo con cebollas y etanol

No se observo crecimiento de races en ninguna de las 3 cebollas

VI.6. Resultados del bioensayo con cebollas y leja

No se observo crecimiento de races en ninguna de las 3 cebollas

VI.7. Resultados del bioensayo con cebollas y relave minero

VII.

No se observo crecimiento de races en ninguna de las 3 cebollas

DISCUSIN DE RESULTADOS
Crecimiento de las races (medicin en mm):

En los resultados se puede observar que la sustancia que ms inhibe el

crecimiento de races es el agua de relave, por con siguiente etanol al
70%, luego la leja, luego el HgCl2, luego el pinesol y al final el agua de
mesa (san Carlos).

Para que un tejido funcione normalmente requiere estar saturado con agua,
manteniendo las clulas turgentes. Todas las sustancias que penetran en
las clulas vegetales deben estar disueltas, ya que en las soluciones se
efecta el intercambio de sustancias nutritivas entre clulas, rganos y
tejidos lo que contribuye al desarrollo vital.

En el caso de el etanol y el agua de relave .Fueron los que ms

inhibieron el crecimiento de las meristemos de la ( allium Cepa) esto se
debi a la razn , porque el etanol es un solvente y extractor de
pigmentos coloreados ,en compuestos inorgnicos insolubles en el agua.
El agua de relave lo volvi negro ya que este es capaz de destruir todo tipo
de vida (animales y plantas) lo cual gnero que la parte de la allium Cepa
expuesta a esta agua se haya llenado de mucosidad.

VIII.

CONCLUCIONES

Se pudo observar que todos los contaminantes tuvieron diversos efectos en

el crecimiento de las cebollas. En algunos casos inhibiendo de manera leve
el crecimiento de races y en otros inhibiendo totalmente el crecimiento de
races. Esto nos indica que estos contaminante poseen efectos
completamente nocivos que impactaran de gran manera si llegan a afectar
algn ecosistema.

La cebolla es un buen bioindicador de contaminacin ambiental, ya que es

muy sensible a los cambios efectuados en su medio, adems de ser
bastante econmica y tambin de que sus resultados se pueden obtener en
relativamente un periodo corto de tiempo.

IX.

BIBLIOGRAFIA

http://es.wikipedia.org/wiki/Allium_cepa

http://es.wikipedia.org/wiki/Bioindicador

http://www.cricyt.edu.ar/enciclopedia/terminos/Bioindic.htm

Universidad Nacional Autnoma de Mxico. 2005. Manual de prcticas de

gentica y cuaderno de trabajo. Mxico. Facultad de ciencias.
http://books.google.com.pe/books?
id=N23NDS2E7gC&pg=PA144&lpg=PA144&dq=bulbos+de+cebolla,
+inhibicion+del+crecimiento+de+raices&source=bl&ots=Ie0UdQwWh&sig=E
dcuw3gV76ZAxWeMyycMSlrYSC4&hl=es&sa=X&ei=2k5iUJHAIYGi9QSrpo
BA&ved=0CDYQ6AEwAg#v=onepage&q&f=true

X.

ANEXOS

Bioensayo de cebollas con pinesol

Bioensayo de cebolla con etanol

Bioensayo de cebolla con detergente

Bioensayo de cebolla con agua de mesa

Bioensayo de cebolla con relave minero

Grafico del crecimiento de meristemos en el bioensayo de cebollas con

agua de mesa

C1
2.0

1.5
C1
1.0

0.5

0.0

10

C2
6.5
5.5
4.5
3.5
2.5
1.5
0.5
-0.5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28

C3
6.5
6.0
5.5
5.0
4.5
4.0
3.5
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
0.0

Grafico del crecimiento de meristemos en el bioensayo de cebollas con

pinesol

MUETRA N 2
3.5
3
2.5
2
TAMAO DE LOS MERISTEMOS

1.5
1
0.5
0

MUESTRA N3
6
5
4
TAMAO DE LOS MERISTEMOS

3
2
1
0
CANTIDAD DE MERISTEMOS