Diferenciao Celular e Sistema Nervoso

Profa Mariana S. Silveira

Figure 22-94 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

NEURNIO
Unidade estrutural e funcional do Sistema
Nervoso;
Responde a estmulos fsicos e qumicos;
Produz e conduz impulsos eletroqumicos;
Libera reguladores qumicos;

SISTEMA NERVOSO
2 tipos de clulas
- neurnios
- clulas gliais
. sustentao
. constituem ponte metablica
. regulao da concentrao de ons
. bainha de mielina
(oligodendrcitos-SNC; clulas de Schwann- SNP)
. modulao sinptica

Teoria Neuronal
Camillo Golgi & Ramon y Cajal
(Nobel em Fisiologia e Medicina, 1906)
Teoria Reticular X Teoria Celular
CONTINUIDADE X CONTIGIDADE

ORGANIZAO ANATMICA

(mesencfalo)
(ponte)
(bulbo)

Padres so semelhantes
entre as espcies

INDUO NEURAL/NEURULAO

Xenopus

Figure 22-78 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

INDUO NEURAL/NEURULAO

Mamferos

INDUO NEURAL/NEURULAO

INDUO NEURAL/NEURULAO
Placa neural

Clulas da
crista neural
G nglio
espinhal

Sulco
neural
Melancitos
da pele

G nglios
autonmicos

Notocrdio
(formado por
invaginao do
mesoderma)

Clulas
da crista
neural
Tubo
neural

Diviso
gastroentrica
do sistema nervoso
autnomo

CEM BILHES DE NEUR NIOS by Roberto Lent

Tubo neural - SNC.

Crista neural- SNP.

G lndula
suprarrenal
(medula)

Tubo neural d origem s Vesculas Enceflicas Primitivas,

preenchidas por um fluido (formar ventrculos e canais de comunicao):

Prosencfalo

Mesencfalo

Rombencfalo

Medula primitiva

Logo que o tubo neural se

fecha, no final do primeiro
ms de gestao, podemse identificar as trs
vesculas primitivas que
formam o sistema nervoso
do embrio. Depois, o tubo
vai se retorcendo, as
vesculas crescem
desigualmente, e apenas
no quarto ms o SNC do
embrio comea a se
parecer com o do adulto,
embora o crtex cerebral e
o cerebelo ainda no
apresentem os giros e
folhas que mais tarde se
formaro. Note que os
desenhos da fileira de
cima esto feitos em uma
escala muito ampliada, em
relao aos de baixo. Se a
escala fosse a mesma, o
embrio de 25 dias teria a
dimenso ilustrada no
pequeno quadro
esquerda. Aos 25 dias, o
sistema nervoso do
embrio no mede mais
que 2 milmetros.

Resumo das Estruturas provenientes do Tubo Neural

(crtex, nucleos da base, hipocampo,
amgdala)

bulbo

Crista Neural

Sist. Nervoso Perifrico

Clulas da Crista neural originam:

=Neurnios e glia de ganglios sensoriais e motores
viscerais (SNA)
=Cls neurosecretoras da gland. Adrenal
=Neurnios do Sist. Nervoso Entrico
=E tambm estruturas no-neurais, como:
Clulas pigmentadas
Cartilagem
Ossos

Figure 22-84 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Desenvolvimento do Sistema Nervoso:

- proliferao celular;
- migrao celular;
- diferenciao celular com aquisio de forma e propriedades da
clula madura:
- diferenciao de neurnios X clulas gliais
- comprometimento com destinos neuronais especficos
- determinao neuroqumica
- projeo de axnios
- formao de circuitos neurais (sinaptognese);
- Eventos regressivos, como morte celular .
Molculas que atuam na Induo Neural e nas diversas fases do
desenvolvimento:
LOCALIZAO CRTICA!!!

- molculas difusveis
- molculas de membrana
- molculas de transduo (receptores e cascatas de sinalizao)
- fatores de transcrio
- genes regulados especificamente

O QUE REGE A INDUO NEURAL?

Posio um fator
fundamental!
Dissociao leva a
destino neural

Todo o ectoderma se tornaria neuroectoderma se no fosse a ao intercelular

bloqueadora desse caminho ontogentico, por parte das BMPs (acima). Na regio da
placa neural, entretanto (abaixo), o mesoderma subjacente libera fatores indutores que
bloqueiam os bloqueadores, fazendo com que essa regio se transforme
gradativamente em tecido nervoso.

O QUE REGE A INDUO NEURAL?

QUAIS MECANISMOS DESENCADEIAM A FORMAO

DA PLACA NEURAL? INDUO NEURAL.
Importncia de sinais do Mesoderma adjacente.

Experimento de Spemann e
Mangold
(vdeo The Cell)

Uma regio do mesoderma retirada e transplantada na

regio ventral de um embrio hospedeiro.
O embrio hospedeiro desenvolve um eixo dorsal
secundrio, que se torna evidente pela observao de uma
placa neural secundria.

Embrio que contem dois eixos dorsais seccionado:

-O eixo dorsal secundrio contem os mesmos tecidos do eixo
dorsal primrio.
-Esse tecido nervoso secundrio derivado do receptor! O
que significa que o transplante promoveu a induo.

Modelo padro de induo neural

Balano entre agonistas e antagonistas!
Importncia da inibio como um mecanismo de
regulao do desenvolvimento.

RESUMINDO

Diferenciao Celular e Sistema Nervoso

Profa Mariana S. Silveira

IDENTIDADE REGIONAL NO SISTEMA NERVOSO:

EIXO ANTERO-POSTERIOR
POLARIDADE DORSAL-VENTRAL

2.21

Resumo das Estruturas provenientes do Tubo Neural

(crtex, nucleos da base, hipocampo,
amgdala)

bulbo

Rombmeros- segmentos que constituem excelente modelo para

padronizao antero-posterior de vertebrados.

3) Crtex cerebral

4) Mesencfalo

1) Rombencfalo
tronco enceflico

2) tubo
neural/Medula
espinhal

IDENTIDADE REGIONAL NO SISTEMA NERVOSO:

EIXO ANTERO-POSTERIOR
POLARIDADE DORSAL-VENTRAL

3) Crtex cerebral

4) Mesencfalo

1) Rombencfalo
tronco enceflico

2) tubo
neural/Medula
espinhal

IDENTIDADE REGIONAL NO SISTEMA NERVOSO:

EIXO ANTERO-POSTERIOR
POLARIDADE DORSAL-VENTRAL
Genes homeobox-Hox
(inic. descritos em Drosophila)
E que fatores regulam este
padro de expresso dos
genes Hox?
Transformer activity
(interferem na tendncia de
anteriorizao do SN pelos
indutores)
-cido retinico produzido
pelo mesoderma (age em
funo da concentrao; >
na regio posterior)
-- Wnt/beta catenina (na
regio posterior;
antagonistas na poro
anterior)
-- BMP e antagonistas BMP
--FGF (na regio posterior)

mandbula

Expresso
facial

Msc. oculares
deglutio

Rombmeros- rombencfalo
Prosmeros- prosencfalo!

IDENTIDADE REGIONAL NO SISTEMA NERVOSO:

EIXO ANTERO-POSTERIOR
POLARIDADE DORSAL-VENTRAL

Anteriorizao x Posteriorizao

normal

3) Crtex cerebral

4) Mesencfalo

1) Rombencfalo
tronco enceflico

2) tubo
neural/Medula
espinhal

IDENTIDADE REGIONAL NO SISTEMA NERVOSO:

EIXO ANTERO-POSTERIOR
POLARIDADE DORSAL-VENTRAL

Holtfreter, 1934.

Shh- importante
morfgeno para a
definio de
identidade ventral.

Shh
Marcador de motoneurnios

IDENTIDADE REGIONAL NO SISTEMA NERVOSO:

EIXO ANTERO-POSTERIOR
POLARIDADE DORSAL-VENTRAL

2.23
Shh- importante
morfgeno para a
definio de
identidade ventral.

IDENTIDADE REGIONAL NO SISTEMA NERVOSO:

EIXO ANTERO-POSTERIOR
POLARIDADE DORSAL-VENTRAL

TUBO NEURAL (dorsal)

E CRISTA NEURAL

2.25

IDENTIDADE REGIONAL NO SISTEMA NERVOSO:

EIXO ANTERO-POSTERIOR
POLARIDADE DORSAL-VENTRAL

TUBO NEURAL
E CRISTA NEURAL

Exemplo de diferenciao de neurnios a partir da crista neural (SNP)

Sinais recebidos durante a migrao tm papel central.

Figure 53-5 The main pathways of

neural crest cell migration in a chick
embryo. The diagram shows a section
through the middle part of the trunk.
A. Neural crest cells that take a
superficial migratory pathway, just
beneath the ectoderm, form pigment
cells of the skin. Those that take an
intermediate pathway
via the somites form sensory ganglia,
and those that take a more medial
pathway form sympathetic ganglia
and the cells of the adrenal medulla.
B. Positions at which melanocytes,
the sympathetic and sensory ganglia,
and the adrenal gland are located
after neural crest migration is
complete.
C. Scanning electron micrograph
showing neural crest cells migrating
away from the dorsal surface of the
neural tube of a chick embryo.
(Courtesy of K. Tosney.)

Marmigre et al., 2007.

FATORES QUE AFETAM A DIFERENCIAO DE PROGENITORES

DERIVADOS DA CRISTA NEURAL

Howard, 2005.

PASSOS SUBSEQUENTES A INDUO NEURAL PARA O

DESENVOLVIMENTO DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL E PERIFRICO
- Controle de Proliferao Celular
-migrao celular

-Diferenciao neurnio x glia

- definio de subtipos neuronais
-aquisio de fentipo neuroqumico
- Direcionamento axonal
-Sinaptognese

- Eventos regressivos

Outras etapas

Diferenciao Celular e Sistema Nervoso

Profa Mariana S. Silveira

3) Crtex cerebral

4) Mesencfalo

1) Rombencfalo
tronco enceflico

2) tubo
neural/Medula
espinhal

CRTEX COMO MODELO

- Controle de Proliferao Celular
-migrao celular
-Diferenciao neurnio x glia
- definio de subtipos neuronais

-aquisio de fentipo neuroqumico

- Direcionamento axonal
-Sinaptognese

Diferenciao neurnio x glia

Crtex a regio mais estudada por vrias razes, pex.:
gnese das diferentes populaes celulares temporalmente
segregada; neurnios das diferentes camadas so gerados
sequencialmente de forma inside-out, seguidos da gerao de
astrcitos e oligodendrcitos
curso temporal reproduzido in vitro;
precursores comuns contribuem tanto para a gerao de
neurnios quanto clulas gliais, sendo que o repertrio de tipos
celulares gerados pelos precursores muda ao longo do tempo.
Alguns mecanismos so comuns a outras estruturas, mas h particularidades.

MODELO INSIDE-OUT DE DESENVOLVIMENTO CORTICAL

Figure 22-99 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Marcao com [3H]-timidina permite visualizar a posio dos

neurnios ao longo das camadas corticais e seu momento de gerao

Definio de subtipos

CRTEX COMO MODELO

- Controle de Proliferao Celular
-migrao celular
-Diferenciao neurnio x glia
- definio de subtipos neuronais

-aquisio de fentipo neuroqumico

- Direcionamento axonal
-Sinaptognese

Depois de gerados os neurnios migram para seus

destinos finais:
- migrao radial
- migrao tangencial (interneurnios)

Como ocorre a migrao?

Migrao Radial :
Prosencfalo e o desenvolvimento cortical

Figura 2.9. A parede do

tubo neural apresenta uma
p a l i a d a
d e
prolongamentos radiais
( A ), que pertencem a
clulas muito precoces
chamadas de glia radial (B,
em azul claro). Os
prolongamentos radiais
atuam como trilhos sobre
os quais migram alguns
dos neurnios psmitticos juvenis (B e C,
em amarelo). Nem todos
os neurnios migrantes
utilizam esses trilhos
radiais: alguns migram
obliquamente seguindo
pistas ainda mal
conhecidas.

Fatores na migrao neuronal

Migrao radial
Zona marginal
Placa cortical

Desligamento e
aquisio laminar
Relina, VLDRL, e DAB1
Relina,VLDLR
ApoER2 DAB1

Interao
neurnio-glia

Movimento
Lis1, Dcx

3 e 1-integrina

Zona ventricular

Marin, PhD course, 2005

Fatores extrnsecos na migrao tangencial

Neuroregulina1 e Erb4-Atividade
atrativa

Semaforinas 3- NeuropilinasAtividades repulsiva

MGE- medial ganglionic eminence (eminencia

ganglionar medial) origem de
interneurnios corticais.

Marin, PhD course, 2005

EVOLUO DO CONCEITO DE GLIA RADIAL

Rakic, 2006.

CRTEX COMO MODELO

- Controle de Proliferao Celular
-migrao celular
-Diferenciao neurnio x glia
- definio de subtipos neuronais

-aquisio de fentipo neuroqumico

- Direcionamento axonal
-Sinaptognese

Diferenciao Neurnio X glia no Crtex

roedores

Sauvageot & Stiles, 2002.

Diferenciao Neurnio X glia no Crtex

Mecanismos Moleculares
# Efeito de BMP e Notch depende do momento.
A) Neurogenina (Ngn) bloqueia a diferenciao astrocitria atravs da associao
com CBP/p300 em E14 = NEUROGNESE.
B) Diminuio dos nveis de Ngn: STAT interage com CBP/p300 = ativao de
promotores que induzem a diferenciao de ASTRCITOS. Sinalizao via Notch tb
modula positivamente a gliognese e negativamente a neurognese.
# Diferenciao de oligodendrcitos determinada pela expresso de Olig, induo
por Shh.

Neurognese

Neuregulin-1 tb
leva a represso
da gliognese

Metilao do
promotor de
GFAP.

Notch promove a manuteno de precursores neurais

neste perodo.
Miller & Gauthier, 2007.

Neurognese X Gliognese

CT-1
-pertence a familia
de LIF e CNTF, tb
associados a
gliognese, mas
predominantemente
expressos no
perodo psnatal
-ct-1-/- - deficit de
50-70% na
gliognese

Miller & Gauthier, 2007.

Gliognese

Papel de Notch na
gliognese
depende da
ativao
concomitante de
STAT

NICD
ou CSL

BMP nessas condies

tb leva a produo de Id,
que refora a
gliognese.

Miller & Gauthier, 2007.

# Diferenciao de oligodendrcitos determinada pela

expresso de Olig, induzida por Shh.

Wegner, 2008.

CRTEX COMO MODELO

- Controle de Proliferao Celular
-migrao celular
-Diferenciao neurnio x glia
- definio de subtipos neuronais

-aquisio de fentipo neuroqumico

- Direcionamento axonal
-Sinaptognese

PASSOS SUBSEQUENTES A INDUO NEURAL PARA O

DESENVOLVIMENTO DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL E PERIFRICO
- Controle de Proliferao Celular
-migrao celular

-Diferenciao neurnio x glia

- definio de subtipos neuronais
-aquisio de fentipo neuroqumico
- Direcionamento axonal
-Sinaptognese

Diferenciao neuronal:
1) aspectos morfolgicos:
- projeo de dendritos
- Emisso de axnios

2) aspectos bioqumicos:
- sntese de molculas para identidade neuroqumica a
ser adquirida: ex. enzimas do metabolismo de NTs,
receptores.
3) aspectos funcionais
- Aquisio da capacidade de gerar respostas eltricas
a estmulos
- sinaptognese

PASSOS SUBSEQUENTES A INDUO NEURAL PARA O

DESENVOLVIMENTO DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL E PERIFRICO
- Controle de Proliferao Celular
-migrao celular

-Diferenciao neurnio x glia

- definio de subtipos neuronais
-aquisio de fentipo neuroqumico
- Direcionamento axonal
-Sinaptognese

3) Crtex cerebral

4) Mesencfalo

1) Rombencfalo
tronco enceflico

2) tubo
neural/Medula
espinhal

MODELO:
DIFERENCIAO DOPAMINRGICA
(neurnios mesodienceflicos)

Enzimas de sntese,
transportadores
vesiculares e
transportadores de
membrana so usados
como marcadores.

Smidt & Burbach, 2007.

Gerao de Neurnios Dopaminrgicos Mesenceflicos

DIFERENCIAO DE NEURNIOS DOPAMINRGICOS

MESODIENCEFLICOS

Nurr1/

Downstream of the inductive signals Fgf8, Shh and Wnt1, expression of transcription factor genes and mdDA-specific genes is acquired at different stages of
differentiation: initially, the expression of the Otx1, Nkx2.2 and Sox2 genes, followed by Lmx1a, Msx1, Ngn2, Otx2 and Foxa2 transcription factors. As part of the
transcriptional code, several of these are repressed during further development (e.g. Sox2, Nkx2.2 and Nkx6.2). The early stage of mdDA-specific differentiation (at E9
E10 in mice) further involves Lmx1b, the engrailed factors En1 and En2, and Foxa1. At this stage, the first gene for dopamine synthesis, amino acid decarboxylase (Aadc),
is induced [18]. Subsequently, transcription factors for terminal differentiation are induced: Nr4a2 (Nurr1) at E10.5 and Pitx3 at E11.5. Pitx3 is required for survival of
some terminally differentiating subsets of mdDA neurons [5,18]. Ilf1 is a newly discovered forkhead factor, expressed at E12.5 [19]. Nurr2 is required for induction of
tyrosine hydroxylase (Th) at E11.5, of vesicular monoamine transporter 2 (Vmat2) at E12.5, and of the dopamine transporter (Dat) at E14 [20], at which point the cells are
mature mdDA neurons of the substantia nigra (SN) or ventral tegmental area (VTA). Aldehyde dehydrogenase A1 (Aldh1a1) is expressed in proliferating mdDA
progenitors [17]. In this figure, expression of transcription factors is linked to stages of mdDA development as marked by components of dopaminergic-neuron synthesis
and transmission, but no functional genetic relationship is inferred. Inductive signals are shown on a green background, transcription factors are on pink, and enzymes of
the dopaminergic neuron phenotype are on
yellow. During the transition of an uncommitted proliferating neuroblast (top) to a mature dopamine neuron (bottom), cells undergo phenotypic changes, symbolized
here by the different colour and morphology of cells. Burbach & Smidt, 2006.

Azul- TFs que promovem diferenciao

Verde- TFs que inibem diferenciao
Vermelho- fatores secretados envolvidos

Abeliovich & Hammond, 2007.