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Passos do processo:
Preparao dos microorganismos adequados para o processo(inoculo)->faz-se
ativaes para mutiplicao at chegar na quantidade que voc precisa
Preparao do meio de cultura, alguns processos exigem que o meio de cultura seja
esterilizado (auto clave, e para preservao da esterilidade bico de bunsem).
O meio de cultivo um conjunto de nutrientes que devem ser fornecidos ao
microrganismo para que ocorra seu crescimento/manuteno (pode servir para
transporte). Tipos e sua funo: slido (isolamento), semisslido (avaliar motilidade),
lquidos (crescimento/produo de biomassa), diferencial (possui substncias mais
Procarioto: O prefixo pro, significa sem, ou seja, uma clula em que o ncleo no
est envolvido por uma carioteca. No tem delimitaes, a informao gentica est
no centro e chamada de nucleoide.
EUcarioto:O ncleo est envolvido por uma carioteca.
Mas o mais importante que nas clulas eucarioticas diferentes das procatiocas,
possuem organelas onde acontecem os procesos, ento por exemplo na respirao
eucariotica acontece na mitocondria, a fotosintese no cloroplasto a produo de
proteinas nos ribossomos. Nas celulas procarioticas tudo no citoplasma, pois ela
uma clula mais simples.
-Falamos sobre nomeclatura genero+especie
Bactrias: so organimos procatioticos, so os organismos mais simples que vamos
estudar. As bacterias podem ser patologicas ou no, mas na verdade a maioria delas
benefica ou inofensiva. E dentre as benficas esto aquelas que realizam bioprocesos
que utilizamos na industria.
As clulas alm da membrana citoplasmtica tem uma membrana mais externa
envolvendo estas celulas, formado de peptidioglicano(polissacarideos).
Bactrias gram positivas: As gram + tem maior quantidade de peptidioglicano, tendo
um envoltrio mais coeso, mais forte.
bactrias gram negativas: As gram negativas tem menor quantidade de
peptioglicano, tem uma parede mais fina, mais fraca. Alm disso a gram - tem depois
da camada de peptidioglicano de novo uma bicamada de fosfolipideos. Como ela tem
uma bi camada pode haver proteinas ou compostos, responsveis por algumas
caracteriscas da bacterias, externa talvez seja mais fcil entrar organismo patologicos
na bactria. Possiveis virulencias.
para diferencia-las faz se a colorao de gram, como as gram positivas tem uma
parede mais forte elas retem o corante violeta e as negativas no retem e ficam na
tolanidade de rosa.
MUITAS CARACTERISTICAS DAS CELULAS ESTO RELACIONADAS AO FATO
DELAS SEREM GRAM POSITIVAS OU GRAM NEGATIVAS. ENTO O PROCESSO
DE INDENTIFICAO DE UMA BACTRIA MUITO IMPORNTANTE, SENDO A
PRIMEIRA COISA A SER FEITA E DEPOIS FAZ-SE OUTROS TESTES PARA VER
QUAL BACTRIA AQUELA.
Como feita: Adiciona-se as bactrias o colorante cristal violeta e ento as bactrias
ficam violeta, aps utiliza-se uma soluo de iodo(lugol)e ento forma-se um composto
complexo CVI no interior das clulas que permacem violetas. Depois adiciona-se
alcool que faz com que desidrata as paredes as +, dimiuindo a porosidade e
permeabilidade das paredes da clula.Ento o composto CVI no consegue sair da
clula, j nas negativas h uma extrao de fosfolipideos da parede celular
aumentando a porosidade e assim o CVI removido da clula. Na ltima etapa
adiciona-se safarina ou fucsina e as + permanecem violetas como anteriormente(o
novo colorante no as afeta) e na - as clulas tomam o corante tornado-se vermelhas.
Leveduras e fungos: as leveduras e fungos so microorganismos eucariotos, ou seja
tem nucleo definido por membrana, e tem organelas. As leveduras so unicelulares
no tem parede celular s membrana citoplasmatica, fazem diversos procesos
Michaelis-mentem
enzima+substrato->formando um completo enzima + substrato (es)-> PRODUTO
O completo um produto intermediario, sendo uma reao rpida e reversvel.
No final a enzima liberada sem ser modificada, pois a enzima se liga ao substrato,
catalisa a reao, libera o produto e est nova para receber um novo substrato.
O complexo formado por alta espeficidade.
Ao fazer um estudo cinetico, obtem-se as curvas:
-concentrao de substrato caindo
-concentrao de produto aumentando
-concentrao de enzimar diminuindo(a enzima em tese no consumida, porm
como ela muito instavel, temos uma ligeira reduo de concentrao mais por perda
de atividade da enzima.)
- e o complexo ES aumenta um pouco e depois fica constante.(pois depois o tempo
todo teremos enzima ligando e desligando ao subtrato)
E com essas concentraes que trabalhamos para fazer um estudo cintico.
A concentrao de enzima influencia diretamente a velocidade da reao uma
funo linear, j a concentrao de susbtrato linear no inicio, mas depois de um
tempo no adianta aumentar a concentrao de susbtrato que a velocidade fica
constante, o que chamamos de velocidade mxima.
A velocidade de uma reao enzimtica, vai depender dessa Vmax que se atinge no
tempo, Km(constante de MM), e da concentrao do susbtrato.
km a [S] no qual V=vmax/2
Inibio da atividade enzimtica: inibio competitiva e no competitiva.
Na inibio compectitiva o inibidor competitivo se liga ao sitio ativo(no mesmo que o
substrato se ligaria) da enzima,ento teremos menos enzimar para se ligar com o
substrato diminuindo a velocidade da reao. (fc il dribla-la: adiciona-se muito
substrato, pois a probabilidade do inibidor se ligar a enzima cai muito). Ento Vmax
no se altera. S que como adicionei muito mais substrato o Km muda, ele aumenta.
E na no compectitiva o inibidor se liga em outro sitio ativo da enzima(no o mesmo
que o do subtrato). Diminuindo a quantidade de enzima disponivel para se ligar com o
substrato, porque mesmo se o subtrato ligar no outro sitio ativo, o produto no
formado se o inibidor estiver presente. Neste caso no adianta-se mexer na
quantidade de substrato, no altera a velocidade. Ento na no competitiva o Km no
se altera, porm o Vmax diminui.
Ento atravs do estudo cintico eu sei se est havendo uma competividade ou uma
inibio no competitiva.
Regulao alosterica: temos o inibidor e o regulador alostrico.
O inibidor reduz a atividade e o regulador melhora a atividade das enzimas.