PRINCPIOS DE BIOLOGIA MOLECULAR E

GENTICA BACTERIANA

Prof. Dra. Daiani Kochhann

Princpios de biologia molecular e gentica bacteriana

Os microrganismos apresentam uma grande diversidade

muitos ainda desconhecidos
Mas como surgiu toda essa
diversidade?

Variedade das caractersticas morfolgicas, fisiolgicas e

ecolgicas dos diversos grupos de microrganismos
controlada pela sua constituio gentica dos organismos em
interao com o ambiente do qual fazem parte.

Engenharia gentica e Biotecnologia

DNA, RNA e protenas

Onde encontramos a informao gentica???

Nos cromossomos!
Cromossomo = DNA

Trecho de DNA que ser transcrito em uma protena ou outro

produto= GENE

DNA, RNA e protenas

Uma molcula de DNA que consiste de duas longas cadeias

polinucleotdicas constitudas por quatro tipos de subunidades de
nucleotdeos

Nucleotdeos

Adenina e Timina
Guanina e Citosina

Cadeias so
complementares

DNA, RNA e protenas

Os nucleotdeos so compostos de um acar de cinco
carbonos ao qual esto ligados um ou mais grupos de fosfato e uma
base contendo nitrognio.
Nucleotdeos do DNA o acar desoxirribose est ligado a um grupo
fosfato simples (da o nome de cido desoxirribonucleico), e a base
pode ser adenina (A), citosina (C), guanina (G), ou timina (T).

Pontes de hidrognio

Ligao covalente

DNA, RNA e protenas

DNA codifica a informao atravs da

ordem, ou sequencia, dos nucleotdeos ao
longo de cada cadeia.
Cada base A, C, T ou G letra de um
alfabeto de quatro letras

O conjunto completo de
informaes
no DNA de um organismo
chamado de genoma, e
carrega as informaes de
todas as protenas que o
organismo vai sintetizar.

Repplicao do DNA

Todos os organismos devem duplicar o seu DNA com extrema preciso e em altas taxas (at mil nucleotdeos por
segundo), antes de cada diviso celular

Replicao

Replicao do DNA
A replicao do DNA envolve a separao das duas fitas parentais e a produo de duas novas fitas, tendo as
parentais como molde.
Cada nova molcula de DNA contm uma fita parental e uma fita recm-sintetizada replicao semiconservativa.
DNA polimerase: adiciona nucleotdeos na fita em crescimento possui capacidade de verificar se a adio foi
correta e corrigir erros.

Transcrio do RNA

A transcrio a sntese de uma molcula de

cido ribonucleico (RNA) complementar a um
filamento molde de cido desoxirribonucleico
(DNA)

Os RNAs tm papis essenciais na sntese de protenas

As trs classes de molculas de RNA so encontradas

em clulas procariticas e eucariticas: RNA
ribossmico (RNAr), RNA de transferncia (RNAt) e
RNA mensageiro (RNAm).

Traduo de protenas
A sntese de protenas corresponde etapa final da transferncia
de informao gentica, armazenada no DNA, para as molculas de protenas,
que so os principais componentes estruturais e funcionais das clulas vivas
A traduo envolve trs componentes principais:
o RNA mensageiro (RNAm) que contm a informao
necessria para direcionar a sntese de protenas,
o RNA de transferncia (RNAt) que carregam os
aminocidos que sero incorporados protena
os ribossomos que renem o RNAm e o RNAt, de modo
a permitir que o aminocido correto seja incorporado
protena.

Gentica bacteriana

Comparado ao genoma eucarioto o genoma bacteriano

relativamente pequeno
Se encontra em contato direto com o citoplasma (ausncia de
carioteca).
Informaes genticas das bactrias esto contidas
em um nico cromossomo.

Outras informaes tambm so encontradas em

plasmdios, DNA frgil e transposons.

Gentica bacteriana

O cromossomo bacteriano uma nica molcula de DNA de

fita dupla, geralmente circular
Associada a protenas nunca histonas
Quando condensado forma o nucleide
Tem somente uma cpia de cada gene haplides.
A replicao semiconservativa, os genes esto organizados
em operons, no apresenta ntrons, tem alto contedo G + C
e possui baixa frequncia de sequncias repetidas.

Gentica bacteriana

Plasmdeos: DNA extracromossomial, circular

Conferem propriedades especiais s clulas: fatores de
resistncia a antimicrobianos (Fator - R), fatores sexuais (Fator F) e produo de enzimas e toxinas
No so essenciais para a sobrevivncia da bactria, embora
possa proporcionar vantagens seletivas
Podem ser transferidos de uma bactria para outra por
conjugao
A maioria carrega de um a mais tipos.
So capazes de autoduplicao independente da replicao
cromossmica.

Gentica bacteriana

DNA frgil: vrus bacterianos basicamente constitudos de DNA

envoltos por uma capa protica.
Esses bacterifagos injetam seu material gentico na clula
bacteriana, a qual pode passar a transcrever essa nova
informao se ela for inserida no genoma.
Transposons (genes saltadores ou sequncias de
Insero): pequenos segmentos lineares de DNA que podem se
mover de uma posio para outra, cromossomo-plasmdio,
plasmdio-cromossomo ou plasmdio-plasmdio, deixando cpias
no stio de insero.

Gentica bacteriana
As bactrias podem apresentar variaes genticas que resultam em clones
com propriedades distintas da linhagem selvagem original.
A variabilidade gentica se d atravs de mutao ou
recombinao.
Mutaes: so alteraes na sequncia de bases do
DNA contidas no genoma de um organismo,
produzindo uma linhagem mutante.
Podem levar a mudanas na protena codificada,
sendo uma fonte de variabilidade gentica, permitindo
o processo de adaptao.
Elas podem ser detectadas por variaes fenotpicas
ou variaes em processo bioqumico e biofsico.

Gentica bacteriana

De acordo o agente, as mutaes podem ser espontneas ou

induzidas:
-Mutaes espontneas: ocorrem devido a erros durante a
replicao do DNA ou pela exposio radiao ou agentes
qumicos, sendo raras.
-Mutaes induzidas: so geradas pela exposio do
organismo ao de agentes genotxicos.
Podem ser neutras, desvantajosas, letais e at mesmo benficas.

Quando estveis, podem ser passadas de uma

gerao para outra.

Gentica bacteriana

Recombinao
Troca de material gentico entre duas clulas, formando novas
combinaes gnicas.
Diferentes processos que produzem rearranjos entre genes ou
parte desses.
Contribui para a diversidade gentica da populao, mas um
evento raro e no parte essencial do ciclo de
vida dos organismos procariotros.

Os mecanismos evolutivos que permitem a

recombinao so: transformao, transduo e conjugao.

Gentica bacteriana
Transformao

Processo pelo qual o DNA livre no meio liberado de uma clula

doadora incorporado por uma clula receptora, podendo esta
apresentar alteraes genticas.

A clula bacteriana deve apresentar alteraes fisiolgicas que

tornam a membrana celular permevel a molculas grandes de DNA.
Capacidade seja determinada geneticamente.

Somente os fragmentos de DNA de fita simples so incorporados ao

genoma por recombinao.

Gentica bacteriana

Transduo
Processo pelo qual o DNA bacteriano poder ser transferido
de uma clula a outra atravs da ao de um vrus.
Aps a penetrao do DNA do fago, inicia-se o processo de
replicao viral, quando protenas so sintetizadas e o
cromossomo bacteriano destitudo.
Eventualmente, fragmentos de DNA so empacotados dentro
do capsdio do fago no processo de montagem da partcula.
A clula doadora sofre lise e libera partculas virais contendo
o DNA bacteriano, at que estas infectem outras clulas e
ocorra a recombinao, gerando gentipos diferentes nas
clulas receptoras.

Gentica bacteriana
Conjugao
Processo de transferncia de genes envolvendo o contato
entre duas clulas.
Esse mecanismo codificado por plasmdeos, mas pode
haver a transferncia de outros elementos genticos.
A clula doadora possui o plasmdeo, designada de clula
macho, e a receptora, denominada de fmea, no possui
esse elemento.

Gentica bacteriana

Gentica bacteriana
A transposio o processo pelo qual genes ao longo do cromossomo bacteriano saltam de um local para outro
do genoma, sendo um evento raro.
Realizado por elementos genticos, chamados de elementos de transposio sequncias de insero,
transposons e alguns vrus especiais.

Gentica bacteriana

Os mecanismos de transposio conhecidos

so o conservativo e o replicativo.
Na transposio conservativa, no h
replicao, e o elemento transponvel
apenas realocado de um local para outro,
sendo que a quantidade de transposons
sempre permanece a mesma.
No caso dos transposons replicativos, eles
se duplicam e inserem uma nova cpia em
outro local, permanecendo o transposon
original sempre no seu stio de origem.

Gentica bacteriana
Todos esses mecanismos pode levar as bactrias a adquirir resistncia a antibiticos

Podem possuir uma resistncia inata a antibiticos: Organismos que no possuem um stio de reao compatvel
com o antibitico possuem uma membrana impermevel a drogas ou a genes que garantem resistncia, por
exemplo, modificando ou inativando a droga com uma enzima.
Tambm pode ser adquirida por uma populao de bactrias atravs de uma mutao e seleo ou por troca
de genes entre linhagens e espcies.

A resistncia a drogas pode ser cromossmica ou plasmidial.

A resistncia cromossmica quase sempre dirigida a uma s droga, dependendo da ocorrncia de mutaes
espontneas, e a transferncia de genes tem uma frequncia relativamente baixa.

Na plasmidial, pode ocorrer resistncia mltipla, os plasmdios podem ser transferidos por conjugao e
transferidos a outros gneros e espcies.