Grmenes

del tracto
respiratorio
Actualizamos el tema 24

24
tema

Tcnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud

NDICE

1. Introduccin

2. Infecciones del tracto respiratorio superior (faringe y nasofaringe)

2.1. Faringitis

2.2. Laringitis

2.3. Epiglotis

2.4. Sinusitis

2.5. Angina fusoespiralar de vincent:

2.6. Traqueobronquitis:

2.7. Recoleccin y transporte de muestras trs

2.8. Otitis media

2.9. Otitis externa

3. Grmenes del tracto respiratorio inferior (tri).

3.1. Introduccin

3.2. Etiologa de las infecciones del tri

3.3. Obtencin de muestras del tri

4. Transporte

5. Conservacin

6. Anlisis macroscpico

7. Anlisis microscpico

Grmenes del tracto respiratorio

1. Introduccin
El tracto respiratorio comienza en la nariz y boca, extendindose a travs de la
nasofaringe hasta la traquea y pulmones. La traquea se divide en bronquios y stos
en bronquiolos finalizando en los alvolos pulmonares. Nuestro organismo est dotado de mecanismos de proteccin frente a infecciones, como mucus, pelo, pasajes
tortuosos, IgA secretora para impedir que posibles microorganismos alcancen los
pulmones (que en condiciones normales son estriles).
Los huspedes sanos presentan una flora continua en el tracto respiratorio superior que previene la colonizacin de posibles microorganismos patgenos, aunque
en determinadas circunstancias pueden provocar la enfermedad. En cambio, existen
otros microorganismos que, en caso de aislarse en tracto respiratorio se consideran
causantes de enfermedad.

2. Infecciones del tracto respiratorio superior

(faringe y nasofaringe)
En multitud de ocasiones los microorganismos causantes de infecciones en el tracto
respiratorio superior (TRS) son transportados por aerosoles a partir de las secreciones
del individuo infectado que llegan al husped por contacto ntimo, hacinamiento o malas condiciones higinicas. Al entrar en contacto con la mucosa se adhieren a ella y se
multiplican. El nmero de microorganismo que se aslan en los cultivos de TRS es muy
elevado, aunque las patologas son ocasionadas por un pequeo porcentaje de ellos.
Las infecciones del tracto respiratorio superior ms frecuentes son: laringitis, faringitis, epiglotitis, sinusitis, otitis externa y media, difteria, tos ferina, angina de Vincent y candidiasis oral.
La flora normal de las vas respiratorias altas se deben conocer para la interpretacin
de los resultados de laboratorio. Son comensales de las vas respiratoria superiores:
Streptococcus sp (alfa, beta, no hemoltico).
Neisseria spp.
Haemophilus sp.
Corynebacterium sp.
Staphylococcus sp.
Micrococus sp.
Veillonella sp.
Peptostreptococcus sp.
Actynomyces sp.
Mycoplasma sp.
Bacteroides sp.
Fusobacterium sp.
Candida sp.

Tcnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud

Un estudio microscpico de un frotis farngeo es una prueba bastante solicitada

sobre todo para la poblacin infantil, siendo de utilidad para:
Diagnosticar angina estreptoccica (estreptococo hemoltico del grupo ASBHA-), difteria, muguet, angina de Vincent e infecciones por Haemophilus.
Establecer focos de infeccin en casos de fiebre reumtica, glomerulonefritis
hemorrgica aguda, escarlatina (causada por SBHA), endocarditis o tos ferina.
Detectar portadores de SBHA, S. Aureus, N. meningitidis, C. diphteriae.
Entre las patologas del TRS destacan:

2.1. Faringitis
La principal causa de faringitis es por Streptococcus pyogenes (grupo A). Otras
bacterias que pueden ocasionar esta patologa son: Streptococcus grupo C, G y
Corynebacterium haemolyticum.
El estudio de laboratorio incluye los mtodos para el diagnstico de Streptococcus grupo A que sean sensibles ya que un nmero bajo de estas bacterias pueden
indicar infeccin, tambin se debe considerar la importancia de su deteccin por la
reemergencia de la fiebre reumtica aguda y la posibilidad de shock txico like.
El estudio de Neisseria meningitidis se realiza generalmente para estudios epidemiolgicos.
El estudio de faringitis gonoccica debe ser solicitado en forma especfica por el
mdico.
Corynebacterium diphtheriae se debe buscar slo cuando se solicita expresamente.

2.1.1. Tipo de faringitis

Faringitis exudativa: 15-30% causados por SBHA, virus, estreptococos del grupo
C, N. Gonorroheae...
Faringitis membranosa: causados por C. diphteriae, virus Epstein-Barr
H. influenzae, S. aureus y S. Pneumoniae se aslan frecuentemente de este tipo
de cultivos aunque no se ha demostrado que causen faringitis, excepto el S. aureus
en pacientes inmunosuprimidos.

2.1.2. Toma de muestra

De forma general se introduce en la garganta un hisopo en un tubo estril con o
sin medio de transporte. Este tipo de cultivo se realiza para SBHA, aunque tambin
puede detectarse por medio de test rpidos como aglutinacin en ltex, ELISA...
La faringitis estreptoccica habitualmente se trata para prevenir tanto las secuelas
supurativas como las no supurativas, as como para disminuir la morbilidad.
Presencia de Neisseria: se cultiva en agar chocolate o Thayer-Martin
Presencia de C. diphteriae: se cultiva en agar sangre.
Otros Corynebacterium pueden provocar faringitis con o sin formacin de membrana o exantema asociado. Tambin N. gonorrhoeae puede provocar faringitis exudativa., Sobretodo en varones homosexuales, aunque esta faringitis no siempre es
sintomtica.

Grmenes del tracto respiratorio

2.1.2.1. Toma de muestra de secrecin farngea

A) Cultivo corriente
Deprimir la lengua con bajalengua.
Frotar con hisopo la pared posterior de la faringe y las amgdalas tocando cualquier exudado.
Evitar tocar la lengua, vula y pared de la boca.
B) Cultivo para Carynebacterium diphtheriae
Deprimir la lengua con bajalengua, si se advierte la presencia de pseudomembrana, tomar dos muestras con hisopo del borde de la misma presionndola
sin romper.
Si el transporte de las muestras al laboratorio es superior a cuatro horas, se recomienda que las muestras se enven en un tubo con silica gel. Una de las muestras
se usar para la tincin de gram. en caso de sospecha de difteria cutnea, se toma
muestra de la zona de piel afectada adems de una muestra farngea.
Realizar la tincin de gram. en el caso de observar bacilos gram positivos de
morfologa caracterstica, el laboratorio debe entregar un informe preliminar
que diga bacilos gram+ difteromorfos.
C) Cultivo para Neisseria meningitidis
Tomar la muestra con hisopo por detrs de la vula en la porcin nasal de la faringe.
FARIGITIS
(S. GRUPO A)
Hisotopo

Amies Stuar o Silica Gel

PAS

Incubacin 35-37 C
18-24 h
Observacin - hemlisis

T. Gram

Inc. 18=24 h -

Catalasa Dig. Presuntivo:

Suscep, bacitracina

Diag. Definitivo:
serologa

Tcnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud

DIFTERIA
2 Hisopos

Silica gel

PAS
Agar sangre telurito

Incubar 35 C 18-24 h

Observacin colonias
T. Gram
Pruebas bioqumicas

Diagnstico definitivo
FARINGITIS GONOCCICA

Hisopo

Amies Stuart
Transporte nutritivo
Thayer-Martin
35 C CO2 72 h

Observ. Colonias

Dig. Presuntivo: gram, oxidasa.

Dig. Definitivo: utilizacin CH, b-lactamasa.

ANGINA VINCENT

Hisopo

Gram

Grmenes del tracto respiratorio

2.1.2.2. Toma de muestra de aspirado Nasofarngeo

a) Lavarse cuidadosamente las manos y luego colocarse guantes estriles.
b) Romper el sobre que contiene el kit de aspiracin y conectar el final del tubo
con dimetro menor a una sonda de aspiracin.
c) Conectar el otro extremo de dimetro mayor a la bomba de vaco.
d) Introducir la sonda, sin aspirar, por una fosa nasal hasta la nasofaringe y retirarla aspirando.
e) Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal.
f) Aspirar el suero fisiolgico a travs del tubo colector para arrastrar toda la
secrecin.
g) Homogeneizar la muestras agitando el tubo con la mano.
h) Colocar la tapa al tubo que contiene la muestra.
i) Procesar.
BORDETELLA
PERTUSSIS

Aspirado nasofarngeo
Aspiracin

Cultivo
Sembrar inmediatamente
Regan-Lowe 35
Humedad
Hasta 7 das
Observacin colonias
T. gram
Diagnstico definitivo
Inmunofluorescencia
Serologa
Envo al laboratorio de referencia para confirmacin

Tcnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud

N. MENINGITIDIS
PORTADORES

Nasofarngea
Sembrar en Thayer-Martin
35 Co2
24-48 h
Observacin colonias
T. de Gram
oxidasa
Diagnstico definitivo
Envo al laboratorio
HAEMOPHILLUS INFLUENZAE
Sembrar

Amies Stuart
Agar chocolate

Incubar 35 C CO2
18-24 h
Gram
Factores X y V
Oxidasa
b-lactamasa
Identificacin definitiva:
serologa

Grmenes del tracto respiratorio

2.2. Laringitis
En un 90% es de origen vrico, siendo el 10% restante debida a SBHA. En adultos
tambin puede ser causado por Moraxella catarrhalis. El diagnstico suele hacerse
por la clnica.
a) Laringitis aguda de etiologa viral.
b) Los cultivos bacterianos raramente son orientados excepto para descartar difteria o infeccin estreptoccica (segn clnica).

2.3. Epiglotis
En nios ocasionada por H. influenzae tipoB y en adultos por SBHA y H. Influenzae. Es una infeccin peligrosa ya que puede ocasionar una obstruccin de vas
areas. En periodos de inmunosupresin puede verse favorecida la aparicin de
candidiasis oral (muguet), que podra extenderse y llegar a producir esofagitis.

2.4. Sinusitis
a) Sinusitis bacteriana causa por organismos comensales del tracto respiratorio
superior. Ej.: S. pneumoniae. H. influenzae, Neisseria, B. catarrhalis. S. aureus.
b) La muestra apropiada es el aspirado mediante jeringa de la cavidad sinusal. Se
realiza cultivo aerobio y anaerobio.
c) Rechazar lquidos de lavado o trulas de fosas nasales o nasofaringe, ya que
stas contienen mucha flora normal.

2.5. Angina fusoespiralar de vincent

Es una infeccin pseudomembranosa y ulcerativa de boca, encas o faringe. Esta
asociada por la accin conjunta de cierta flora anaerobia. Uno de los patgenos mas
relacionados con ste estado es el Fusobacterium necrophorum.

2.6. Traqueobronquitis
En nios es de etiologa vrica exclusiva, mientras que en adolescentes aparecen
tanto virus como M. pneumoniae, Chlamydia pneumoniae, B. pertussi.

2.7. Recoleccin y transporte de muestras TRS

La toma de muestra se realizara con un hisopo de algodn, Dacrn o alginato de
calcio. Se emplea un depresor de lengua para evitar rozaduras con la lengua o los
labios. Se toca el fondo de la garganta, amgdalas y cualquier lugar donde exista
inflamacin, exudado o secrecin. Si el hisopo se siembra antes de 4 horas no es
necesaria ninguna precaucin adicional, en cambio si transcurre mas tiempo hasta
el cultivo hay que aadir algn medio de transporte. Los SBHA son bastantes resis-

10

Tcnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud

tentes pudiendo mantenerse viables en un hisopo hasta 48 horas. Los materiales

para el cultivo de B. Pertussi deben inocularse directamente en los medios de cultivo
frescos en el momento de la toma.
Haemophilus, Bordetella o N. Meningitidis pueden predominar mas en nasofaringe por lo que la toma en estos casos se realiza con un escobilln flexible introducindolo por la nariz hasta la faringe posterior. Tambin puede hacerse por va oral.

2.7.1. Examen microscpico directo

Mediante la tincin de Gram puede observarse la flora existente, levaduras (muguet) o formas fusiformes (angina de Vincet).
Tambin debe estudiarse la presencia de leucocitos.
Los hongos pueden visualizarse mediante tratamiento con KOH al 10% o tincin
fluorescente Blanco de calcoflor.
Por medio de tinciones con Anticuerpos fluorescentes puede detectarse Bordetella p. E incluso SBHA.

2.7.2. Cultivo de muestras de TRS

Se frota el hisopo en un extremo de la placa y se extiende con un asa de platino
previamente esterilizado. El agar sangre es un medio que proporciona los nutrientes
requeridos por la mayora de los patgenos usuales, aunque no permite el crecimiento de H. Influenzae (cuando quiere detectarse se siembra en agar chocolate).
El gnero Streptococcus est siempre presente en nasofaringe por lo que es de
gran importancia saber diferenciar las especies patgenas de las que no lo son. La
investigacin de hemlisis es de gran importancia, ya que los estreptococos hemolticos son los ms patgenos de todos, sobre todo los del grupo A (S. pyogenes)
que es el agente causante de la escarlatina, erisipela, fiebre reumtica...
Si se asla S. pyogenes (SBHA) se observa en el agar sangre un crecimiento de colonias hemolticas (cocos gram positivos y catalasa negativos). Si se realiza la prueba
de la bacitracina ser positiva. Tambin puede hacerse pruebas de deteccin de antgeno. El S. pneumoniae ( hemoltico) se encuentra en gran proporcin en gargantas
normales y slo cuando existe un gran predominio se considera preocupante.

2.8. Otitis media

Se denomina media a la inflamacin del revestimiento mucoso del odo medio.
En nios los agentes causantes de manifestaciones agudas ms frecuentes son el
neumococo y el H. Influenzae, y luego el SHA. Tambin pueden encontrarse B.
catarrhalis, S. aureus, bacilos gram negativos y anaerobios.
La otitis media es una enfermedad propia de la inflamacin relacionada con infecciones rinofarngeas. Generalmente el comienzo de una otitis media es debido a
una infeccin de origen viral y que se sobreagrega con una infeccin bacteriana. La
bacteria produce inflamacin de la mucosa, se llena el espacio de lquido purulento
taponndose entonces el orificio de entrada. Esto produce un aumento de presin
y hace que el lquido tienda a romper la membrana del tmpano, a travs de donde
saldr un lquido mucoso purulento.

Grmenes del tracto respiratorio

11

2.8.1. Recoleccin y transporte de muestras

Si ha existido rotura de membrana se toma muestra mediante un hisopo. Si no existe
rotura, la muestra se toma mediante jeringa y aguja, aspirando el lquido mucoso.
En primer lugar debe realizarse una observacin microscpica para investigar
tanto la presencia de leucocitos como el tipo de flora existente.
Se realiza la siembra en los medios ms adecuados:
Agar sangre (permite aislamiento de S. aureus, S. pneumoniae, SHA, Pseudomonas, enterobacterias).
Agar chocolate (Haemophilus).
Sabouraud (hongos y levaduras).
Los microorganismos sospechosos (por el tipo de colonias, oxidasa y catalasa) aislados deben identificarse mediante el uso de tcnicas apropiadas de identificacin.
Si se sospecha la presencia de anaerobios deben realizarse pruebas para su aislamiento e identificacin preliminar.

2.9. Otitis externa

El canal auditivo es estrecho y tortuoso lo que representa un problema en cuanto
a la toma de este tipo de muestra. Existen varios tipos de otitis externa:
Infeccin aguda localizada, ocasionada por S. aureus y que se presenta en
forma de pstula o fornculo.
Erisipela que afecta al odo, SHa.
Otitis externa difusa, tambin denominada odo del nadador, originada por bacilos gram negativos, entre los que destaca Pseudomonas aeruginosa y enterobacterias y tambin por hongos. Es frecuente en verano asilar Pseudomonas
y Proteus en otitis de nios que practican la natacin.
Otitis externa hemorrgica. Tambin ocasionada por P. aeruginosa, por baos
con inmersin.
Otitis externa crnica: en pacientes con otitis media purulenta crnica y perforacin del tmpano se puede producir una irritacin por el drenaje que proviene del odo medio, causando este tipo de otitis.
Otitis externa maligna: es frecuente su aparicin en individuos con diabetes.
Es una infeccin necrosante que se extiende hacia reas adyacentes y que
puede diseminarse a SNC o canales vasculares. Est originada por P. aeruginosa y bacterias anaerobias.
Por tanto, y resumiendo, las infecciones externas del odo generalmente estn
producidas por S. aureus, P. Aeruginosa y S. pyogenes. Suelen ser infecciones secundarias a pequeas heridas o a alguna infeccin de tipo vrico.

2.9.1. Recoleccin transporte de muestras

Debe limpiarse y desinfectarse bien la zona para evitar la contaminacin de la
muestra con la flora cutnea contaminante (S. epidermidis, Micrococcus o corynebacterium). Si existe supuracin la muestra se toma con un hisopo, y si se trata de
un fornculo se realiza un drenaje con aguja y jeringa.

12

Tcnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud

3. Grmenes del tracto respiratorio inferior (TRI)

3.1. Introduccin
Las infecciones del TRI, es decir las que comprometen: trquea, bronquios, bronquiolos, alvolos y/o parnquima pulmonar, constituyen una de las primeras causas
de mortalidad infantil tarda y una de las primeras causas de muerte por enfermedad
nosocomial.
El diagnstico etiolgico de estas infecciones no es fcil debido a que la muestra
clnica necesariamente pasa a travs de la orofaringe, lugar donde se contamina con
numerosas especies bacterianas, salvo aquellas muestra obtenidas directamente de
la lesin.

3.2. Etiologa de las infecciones del TRI

Neumona: inflamacin del espacio y del parnquima pulmonar (ej.: S. pneumoniae y S. aureus).
Bronquitis: inflamacin de las vas areas medias (ej.: S. pneumoniae, H. influenzae, M. catarrhalis, enterobacterias).
Bronquiestasia: dilatacin excesiva y dao en los bronquios (ej. Fibrosis qustica).
Bronquiolitis: proceso infeccioso que provoca infeccin de los bronquios.
Los agentes etiolgicos segn los procesos infecciosos son:
Neumona aguda:
S. pneumoniae.
H. influenzae.
S. aureus.
M. catarrhalis.
Legionella pneumophila.
Micobacterium pneumoniae.
Pseudomona sp.
H. capsulatum.
Criptococcus neoformans.
Ch. pneumoniae.
Bronquitis:
H. influenzae.
H. parainfluenzae.
S. pneumoniae.
M. catarrhalis.
Klebsiella sp.

Grmenes del tracto respiratorio

13

C. pneumoniae.
Bordetella pertusis.
Micobacterium pneumoniae.
Neumona por aspiracin:
Peptoestreptococos sp.
Fusobacterium sp.
Enterobacterias.
Pseudomonas sp.
Bacterias relacionadas a neumona por aspiracin intrahospitalaria.
Acinetobacter sp.
Neumona nosocomial:
S. aureus.
S. pneumoniae.
Pseudomona aeruginosa.
Serratia marcescens.
Acinetobacter sp.
Infecciones de TRI nios:
Virus:
Virus de la influenza A v.
Virus Syncytial respiratorioi.
Human Metapneumovirus.
Varicella zoster.
Bacterias:
S. pneumoniae.
H. influenzae.
S. aureus.
K. pneumoniae.
Enterobacterias.
Anaerobios.
Microorganismos atpicos; micoplasmas, Legionella, Chlamydia, Coxiella Burnetti.
La patognesis de las infecciones del TRI se caracterizan por los diversos mecanismos del agente invasor para burlar las defensas del husped entre ellas:
Mecanismos para evitar la fagocitosis:
Produccin de cpsula (S. pneumoniae, H. capsulatum, Neumoniae, N. meningitidis).
Produccin de toxinas (leucocidinas y citotoxinas por S. aureus).

14

Tcnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud

Parsitos y hongos son ms grandes que los fagocitos.

Replicacin dentro de la clula (virus y clamidias son intracelulares obligados).
Mecanismos para sobrevivir dentro del fagocito:
Inhibicin de la fusin del Lisosoma con el Fagosoma (ej.: toxoplasma gondii,
Aspergillus sp).
Escape del fagosoma (M. leprae. Tripanosoma cruzi).
Resistencia a la muerte en el fagolisosoma (ej.: M. tuberculosis, Nocardias).
Crecimiento en la clula fagoctica (M. tuberculosis, Legionella, Citomegalovirus).
Mecanismos de defensa del husped:
Al inicio del proceso infeccioso, el husped inicia su defensa, son mecanismos
que utiliza:
Filtracin: vello nasal, barreras anatmicas.
Saliva.
Complemento.
Tos.
Reflejo epigltico.
Interferencia bacteriana-flora normal.
Sistema mucociliar.
Macrfagos alveolares.
Complementos.
Fluidos alveolares: defensinas, lisozimas.
Inmunidad celular: clulas B y T.
Fisiologa de la secrecin.
Las secreciones traquio-bronquiales son una mezcla inconstante de agua, electrolitos y mucina (moco que segrega las clulas calciformes). A medida que dichas secreciones atraviesan las vas respiratorias inferiores o superiores se le unen clulas
de descamacin de la mucosa del aparato respiratorio, secreciones nasales, de las
glndulas salivales y la flora bacteriana normal de la cavidad bucal.
La secrecin de las glndulas mucosas y las clulas del epitelio de la mucosa son
el componente ms abundante en las secreciones traquio-bronquiales.
A pesar de que se inhalan elevadas cantidades de microorganismos, las vas respiratorias inferiores se mantienen virtualmente estriles, gracias a dos mecanismos:
El sistema macrfago-alveolar.
El sistema mucociliar.
Esputo.
Cualquier alteracin en el aparato respiratorio puede dar lugar a un aumento de
estas secreciones (traqueo-bronquiales), que se eliminan al exterior (fuera de las vas
areas inferiores) mediante un golpe de tos o con la expectoracin; a estas secreciones se les denominan esputos.

Grmenes del tracto respiratorio

15

Composicin qumica del esputo.

La composicin qumica del esputo muestra que est compuesto aproximadamente de un 95% de agua y de un 5% de slidos. Los slidos son principalmente
hidratos de carbono, protenas, lpidos, y ADN.

3.3. Obtencin de muestras del TRI

Expectoracin o esputo.
Aspirado traqueal.
Lavado bronquial.
Broncoscopia (cepillado bronquial, lavado broncoalveolar).
Biopsia bronquial.
Biopsia pulmonar.

3.3.1. Esputo
Precauciones
Las muestras designadas como esputos, pocas veces contienen slo las secreciones de las vas respiratorias bajas, sino que con frecuencia se hayan contaminadas
por la saliva, secreciones naso-farngeas, bacterias o restos de alimentos.
El enjuague de la boca y limpieza de los dientes antes de la toma de muestra eliminar la mayora de estos contaminantes sin afectar el resultado analtico.
Para la mayora de los anlisis, las muestras de las primeras horas de la maana
son las mejores puesto que representan las secreciones pulmonares acumuladas
durante la noche.

Material
La muestra debe recogerse en un recipiente estril, desechable, de boca ancha
y con tapn. Si el paciente est hospitalizado se puede recoger en una placa Petri;
aunque sta cada vez se utiliza menos, es muy aconsejable para algunos anlisis,
como por ejemplo en la bsqueda de cuerpos extraos.
Si se recoge las secreciones de 24 horas se utiliza una copa graduada. No se debe
tomar muestra para anlisis microbiolgico de estas secreciones (24 horas).
La obtencin de la muestra no resulta muy complicada en adultos pero s en los
nios. Para su obtencin en nios pequeos o que no colaboran se utiliza varios
mtodos diferentes:
1. Se realiza un frotis nasofarngeo en los nios que sufren enfermedad bronquial, el cual se considerar representativo de los microorganismos patolgicos bronquiales.
2. Mantener delante de la boca del nio una placa de petri y pedirle que tosa.

16

Tcnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud

3.3.2. Aspirado bronquial

La tcnica se denomina broncoscopia. La realiza el neumlogo con anestesia general. Es imprescindible para el diagnstico de los tumores.

4. Transporte
La muestra debe remitirse inmediatamente al laboratorio ya que no es aconsejable guardarla ni refrigerarla, puesto que la citlisis es rpida.

5. Conservacin
Cuando la muestra se ha de enviar, se utiliza el bromuro de cetil- piridinium, que
permite la descontaminacin y la fluidez.

6. Anlisis macroscpico
Preparacin de la muestra para el anlisis macroscpico.
La muestra debe transferirse a una placa de petri esterilizada. Se utilizan asas o
varillas de madera desechables para extender la muestra en una capa muy delgada,
posteriormente se podr examinar a simple vista, con lupa o llevar al microscopio.
En el anlisis macroscpico se incluye:
a) Consistencia y aspecto:
Normal

En condiciones normales la mayora de las muestras de esputos presentan

un aspecto acuoso y claro; la pequea opacidad que pueden presentar
procede del material celular en suspensin.

Anormal

En condiciones patolgicas el esputo presenta diferentes aspectos.

Seroso-----------------lquido.

Mucoso---------------predomina el moco.

Purulento-------------contiene pus.

Sanguinolento--------contiene sangre en pequea cantidad.

Existe tambin la combinacin de cada uno de ellos; por ejemplo sanguinolento y purulento (tuberculosis), seroso purulento, mucoso purulento,
etc. En general, las enfermedades especficas presentan esputos con consistencia y aspectos caractersticos; ejemplo, en el edema agudo de pulmn, el esputo es con frecuencia seroso y sanguinolento.

Grmenes del tracto respiratorio

17

b) Color
Normal

El color del esputo est determinado por las sustancias que contiene y con
qu frecuencia indica el proceso patolgico. La secrecin normal es transparente e incolora.

Anormal

En condiciones patolgicas el esputo puede ser:

* Amarillo: nos indica que contiene una gran cantidad de clulas epiteliales y con frecuencia pus. Se observa en las bronquitis crnicas y en el
fumador.
* Marrn: el esputo herrumbroso de debe a la hemoglobina descompuesta. Se observa en la neumona producida por el neumococo o en la
gangrena pulmonar (o gaseosa).
* Rosado: aparece en el edema agudo de pulmn, un constipado comn
(debido a un golpe de tos fuerte se produce la rotura de algn vaso o
capilar sanguneo.).
* Rojo brillante: se denomina tambin hemoptisis; y se detecta en hemorragia reciente, secundaria a diversas enfermedades como la tuberculosis o el cncer de pulmn. Siempre que en un paciente aparezca este
tipo de esputo es necesario averiguar la causa.
* Gris negruzco: aparece en cualquier tipo de neumoconiosis (silicosis,
siderosis, etc.)

c) Olor

Generalmente en los esputos normales y patolgicos no se detecta ningn

olor; pero si se ha producido una descomposicin bacteriana tanto dentro del
cuerpo como despus de la expectoracin pueden presentar diferentes olores. La gangrena pulmonar y los abscesos pulmonares pueden presentan un
olor putrefacto.

d) Masas gaseosas

Estn constituidas por fragmentos de tejido pulmonar necrtico, observado

principalmente en enfermedades como el cncer de pulmn, la gangrena pulmonar y, a veces, en la tuberculosis.

e) Broncolitos.

Generalmente se forman por calcificacin del tejido infectado o necrtico en

el interior de un bronquio. Son ms frecuentes en el cncer de pulmn y en la
tuberculosis.

f) Tapones Dittrich.

Se observan a menudo en las bronquiectasias. A veces se expulsan por s solos al toser. Aparecen en forma de cuerpos amarillentos o grisceos que varan
de tamao desde la cabeza de un alfiler a un haba. Al aplastarlos y examinarlos
al microscopio se ve que estn compuestos de restos celulares, cristales de
cido y bacterias.

18

Tcnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud

g) Cuerpos extraos.

En algunos casos se pueden expulsar cuerpos extraos durante un ataque violentos de tos. En los nios pude ser cualquier objeto (botones, frutos secos...)
que se hayan llevado a la boca o inhalado. En adultos los cuerpos extraos
ms frecuentes son partculas de alimentos y contenido gstrico aspirados
durante convulsiones o anestesia quirrgica.

7. Anlisis microscpico
Los anlisis microscpicos ms frecuentes que se realizan en el esputo son: anlisis citolgico, y microbiolgico.

Preparacin de la muestra para el anlisis citolgico y microscopia

directa del anlisis microbiolgico
1. Para el examen en fresco:
Poner la muestra (pequea cantidad de esputo) en el centro de un portaobjeto con un asa de platino o siembra.
El porta debe estar limpio y seco.
Aadir una gota de cido actico diluido.
Poner suavemente sobre el porta un cubreobjeto, procurando evitar las burbujas de aire. En algunos casos, las muestras se pueden colorear con azul de
metileno, aadiendo una gota del mismo antes de colocar el cubre.
2. Para el examen con tincin:
Diluir la muestra (esputo) si es muy espesa con una gota de agua destilada
estril, colocada en el porta.
Llevar la muestra con el asa de platino extendindolo sobre la superficie del
porta, consiguiendo una capa fina (frotis por estiramiento).
Dejar secar a temperatura ambiente o con la estufa a 37.
Fijar con calor en el mechero Bunsen (lmpara de alcohol).
Colorear o teir con el reactivo ms adecuado.

a) Anlisis citolgico
La muestra debe ser reciente para evitar la citlisis; a ser posible la obtencin de
la misma debe hacerse mediante broncoscopia, en especial para la determinacin
de clulas neoplsicas.
Las clulas que se analizan son:
Clulas neoplsicas.
Para la determinacin de tumores. El hallazgo de estas clulas es positivo en el
75% de los casos y permiten un diagnstico precoz del cncer. Teir la muestra con el mtodo de Papanicolau.
Un aumento de clulas epiteliales nos indica infecciones del aparato respiratorio. Teir la muestra con Panptico rpido o Papanicolau.

Grmenes del tracto respiratorio

19

Clulas hemticas.

La determinacin de eritrocitos tiene importancia en las hemptisis; la de leucocitos en todas las enfermedades infecciosas y la de eosinfilos en el asma
bronquial (alergias).

Como mtodo de tincin se utilizan: el mtodo Panptico, Giemsa, etc.

b) Anlisis Microbiolgico
Microscopia directa:

Para la determinacin de neumococos, estreptococos y estafilococos, teir la

muestra con la tincin diferencial de Gram. Su determinacin tiene importancia para hallar el microorganismo patgeno especfico causante de las infecciones del aparato respiratorio, en especial de la neumona.

El bacilo de Koch (B.K) tiene importancia para el diagnstico de la tuberculosis

pulmonar; el B.K presente en el esputo indica tuberculosis abierta. La tincin
utilizada es la de Ziehl.

Para determinar las micosis pulmonares, se puede analizar con tincin Gram
o preparar la muestra en fresco. Es necesario que el paciente adems de cepillarse los dientes y enjuagarse la boca, realice gargarismos con Lugol (antimictico), para evitar la contaminacin con los hongos de la boca.

Para la determinacin del equinococo causante del quiste hidatdico, se hace

un examen en fresco. La presencia de los mismos en la muestra es un valor
importante para el diagnstico.

Cultivo:

El ms usual es el de Lowenstein para determinar el B.K.

Preparacin de la muestra
Homogeneizar: es necesario homogeneizar el esputo antes de la siembra.
Existen diferentes tcnicas. Una de las ms utilizadas es la fluidificacin del esputo con Fluimicil (expectorante) u otro mucoltico, agitacin y centrifugacin
de la muestra a poca velocidad y poco tiempo.
Descontaminar: es necesario mezclar igual volumen de reactivo de descontaminacin (contiene citrato sdico al 2,94 % e hidrxido sdico al 4%) que
esputo (a partes iguales). Agitar durante 20 segundos en Mixer y centrifugar
15 minutos a 4000 rpm (las revoluciones pueden variar en funcin del radio de
la centrfuga).
Sembrar dos tubos Lowenstein con tres gotas de la muestra (se puede recoger
en una jeringa). Tambin se siembra en agar sangre y agar chocolate. De la
muestra homogeneizada se puede utilizar para hacer un examen en fresco y
tincin para la microscopia directa del B.K.
Incubar: se incuba durante 8 semanas a 37 C.