MONOGRAFIA

Terapia gentica con citosinas para el cncer cervicouterino

Doctor: nagamani balagurusami

Alumno: Jonathan Alejandro molina Carranza

Materia: biotecnologa

Escuela: ciencias biolgicas

Fecha de entrega: 20 de abril del 2015

ndice general

1.-Prologo

pg. 3

2.-Introduccin

pg. 4

3.-Objetivos de terapias genticas. pg. 5

4.- Terapia gentica contra el cncer pg. 6

5.- Citosinas como terapia gnica en cncer cervical pg. 7

6.- terapia gentica in vivo ex vivo y transferencia gnica... pg. 8

7.- Sistemas para la introduccin de material gentico en las clulas.. pg. 9

8.- vacunas y terapias genticas Pg. 10

9.-nuevas terapias en el tratamiento de cncer ...

pg. 11

10.- conclusiones

. Pag. 12

11.- bibliografas

pg. 13

Prologo
El motivo por el cual me llevo a investigar este tema es porque me llamo mucho la atencin
siendo sincero lo escog al azar pero cuando me puse a leer cada artculo me fue interesante
en como se trabaja e investiga mucho para encontrar la vacuna que pueda evitar esa
enfermedad principalmente en las mujeres el cncer es muy comn lamentablemente an
no se ha generado una vacuna como tratamiento de cncer , muchas de las veces la mayora
de las enfermedades son de cncer de mama o son hereditarias por lo cual por lo que leeo se
investiga todas las posibilidades para encontrar la cura.
la terapia gentica es una investigacin muy interesante en este mundo en el cual se dedica
al tratamiento, prevencin o eliminacin de alguna enfermedad mediante la transferencia de
DNA o el uso de genes para reemplazar algn gen que est alterado al igual que codifiquen
para un antgeno de origen infeccioso, tumoral, o para molculas inmunoreguladoras de la
respuesta inmune como: citocinas y quimiocinas.
por esas razones me llamo la atencin cuando empec a investigar los artculos sobre las
terapias geneticas que existen contra el cancer, espero que pronto o no se si ya est en
exististencia esa formula que evite esa enfermadad del cancer ya sea por medio del ADN o
el uso de un gen para remplazarlo como avia dicho anteriormente espero y esta
investigacin que estoy haciendo sirva de mucho para mi como alumno de ciencias
biolgicas

Introduccin
El estudio de la gentica permite comprender qu es lo que exactamente ocurre en la
reproduccin de los seres vivos y cmo puede ser que, por ejemplo, entre seres humanos se
transmitan caractersticas biolgicas, fsicas, de apariencia y hasta de personalidad. Existen
enfermedades graves e incurables cuya causa es un solo gen defectuoso. Este gen ocasiona
que un rgano o un tipo de clula sea incapaz de funcionar normalmente. A partir de este
punto surge nuestra primera pregunta:
Qu es la terapia gnica?
La terapia gnica es una excelente alternativa para el tratamiento de muchas enfermedades.
La capacidad para manipular el DNA ha permitido dirigir la terapia gnica para corregir la
funcin de un gen alterado, aumentar la expresin de un gen o activar la respuesta inmune.
As, se puede proponer el uso del DNA como un medicamento capaz de controlar, corregir
o curar una enfermedad. La terapia gnica contra cncer tiene un potencial enorme, y en la
ltima dcada se han obtenido resultados muy alentadores del uso del DNA para controlar
diversas neoplasias en modelos animales, lo cual ha permitido su aplicacin en protocolos
experimentales en humanos. Esta revisin concentra una resea de los fundamentos de la
terapia gnica y su aplicacin en cncer cervical, desde el punto de vista de las alteraciones
de la respuesta inmune enfocadas al microambiente tumoral y el uso de las citocinas como
moduladores de la respuesta inmune.Este tipo de terapia an no alcanza su total
estabilizacin, sin embargo, su desarrollo ha sido excepcional y sin duda, estudios se siguen
haciendo alrededor del mundo1,3..
El cncer es un problema de salud pblica cuya incidencia y mortalidad se han
incrementado durante las ltimas dcadas. Segn estudios realizados por la Agencia
Internacional para la Investigacin en Cncer, en el ao 2015, aproximadamente 7.564.802
personas morirn por esta enfermedad1. A pesar de los avances quirrgicos y del desarrollo
de nuedisearvos frmacos, el pronstico de los pacientes con cncer no ha mejorado
significativamente, por lo cual se requiere el desarrollo de nuevas intervenciones
teraputicas como la terapia gnica, una aproximacin viable y segura para el tratamiento
de pacientes con cncer. Esta terapia se basa en la introduccin de genes funcionales en
clulas somticas para corregir defectos genticos o ejercer un efecto teraputico. Se utiliz
por primera vez con intencin teradisearputica en 1990 para el tratamiento de la
inmunodeficiencia severa combinada ADA-SCID, y posteriormente, para la
inmunodeficiencia severa combinada SCID-X1. Pese a que los resultados no fueron muy
alentadores en su momento, se demostr que la terapia gnica humana es factible y puede
ser til para el tratamiento de enfermedades genticas, por lo cual se han
Desarrollado estrategias para aplicarla en el tratamiento de enfermedades complejas como
el cncer2,4,5.

Objetivos de la terapia gnica

1.
2.
3.

1.
2.
3.

La terapia gnica se concibi en sus inicios como una tcnica para tratar nicamente
enfermedades genticas hereditarias como se ava mencionado al principio en introduccin,
pero en la actualidad se investiga y se aplica de forma experimental en el tratamiento de
otros padecimientos. Entre los objetivos que persigue la terapia gnica se pueden referir:
Tratar de complementar o sustituir un gen defectuoso introduciendo otra copia
normal de ste en las clulas.
Inhibir o bloquear el funcionamiento de aquellos genes cuya intervencin
contribuye al desarrollo de la enfermedad.
Introducir material gentico que permita a la clula sintetizar una protena que tenga
un efecto teraputico nuevo (por ejemplo introducir en las clulas copia de un gen que
obstaculice la replicacin de un virus, o que estimule el sistema inmune para que acte
frente a tumores, enfermedades infecciosas, acelerar la reparacin de heridas, etc.)
Para utilizar la terapia gnica como alternativa teraputica se requiere el cumplimiento de
ciertos requisitos que la justifiquen, se pueden mencionar entre ellos los siguientes: 12
No debe existir ningn otro tipo de tratamiento para la cura de la patologa tratada,
pues se necesita una gran inversin de recursos tanto humanos como econmicos en
investigaciones que conduzcan a una teraputica slida y cientficamente viable.
Es evidente que si se pretende intervenir a nivel molecular, es indispensable contar
con el conocimiento detallado del efecto, o los efectos.
Para llegar a la aplicacin clnica de la terapia gnica, se debe contar con amplia y
slida evidencia cientfica que demuestre que la intervencin a nivel molecular podra
resultar en la mejora de la salud del paciente, o en la solucin del problema de salud que se
est tratando. 8,9

Terapia gnica contra el cncer

5

La terapia gnica contra el cncer propone reemplazar o alterar la expresin de algunos

genes que promueven el proceso tumoral ya que la prdida
de genes supresores de tumor como el gen p53 y la
sobreexpresin de oncogenes que es el K-ras, se han
identificado en varias neoplasia (es una alteracin de la
proliferacin y, muchas veces, de la diferenciacin celular,
que se manifiesta por la formacin de una masa o tumor).
Esto ha permitido corregir una anormalidad gentica por la
insercin de una copia del gen normal y la reversin del
fenotipo maligno asociado con la muerte de la clula
tumoral. Sin embargo, aunque estos resultados son
alentadores, esta alternativa no ha tenido an el xito
esperado en su aplicacin en modelos in vivo. As, con la
finalidad de incrementar la eficiencia teraputica de este tipo
de procedimientos, ser necesario implementar nuevas
estrategias para poder transferir genes a las clulas malignas,
y evitar que las clulas normales sean afectadas.
Se ha considerado una lista de genes que podrn ser usados
en el tratamiento contra el cncer mediante terapia gnica en
el cual incluyen: genes que codifican para citosinas y
molculas coestimuladoras de superficie celular. Las
quimiocinas, las cuales son necesarias para activar la
respuesta inmune sistmica contra antgenos especficos de
tumor; genes que codifican para antgenos especficos de tumor. Por otro lado, se han
publicado varios trabajos donde se usan genes que codifican para prodrogas o tambin
llamados genes suicidas, como la timidina cinasa del virus Herpex simples, la
nitroreductasa, la citocina desaminasa de Escherichia coli, la hidrogenasa de Clostridium
acetobutylicum, la timidina fosfatasa, diferentes isoformas de citocromo P450,
deoxicitidina cinasa y la flavodoxina. Adicionalmente, diversas estrategias y vehculos se
han propuesto para transportar los genes teraputicos hasta su sitio blanco, en el cuadro 1
se ve las estrategias de vacunas mediante el uso de terapia gentica1

Citosinas como terapia gnica en cncer cervical

El gran avance de las investigaciones en la terapia gnica contra el cncer cervical est
enfocado principalmente a los oncogenes E6 y E7 del virus del papiloma humano (VPH),
como antgenos especficos del tumor para generar inmunogenicidad tumoral. Estos genes
se han usado en vacunas profilcticas y teraputicas en diversas estrategias de terapia
gnica. Recientemente se demostr que las protenas virales E5, E6 y E7 del VPH regulan
la expresin de genes heterlogos celulares y pueden contribuir al desarrollo del cncer
cervical. 1

Los interferones (IFN), as como las citosinas IL-2, IL-12, y GM-CSF, se consideran como
los principales inmunomoduladores de la respuesta inmune celular. Los primeros tienen
propiedades antivirales, antiproliferativas e inmunomoduladores. Las lesiones cervicales
asociadas al VPH y que se tratan con interfern recombinante pueden eliminar el virus y, en
algunos casos, la infeccin latente. El IFN- es ms efectivo que el IFN- y generalmente
el IFN- es el que tiene mayor efectividad contra neoplasias. Sin embargo, la actividad
txica del IFN- es muy alta comparada con drogas quimoteraputicas, como el cisplatino,
taxol y gemcitabine.
La IL-2 es un potente activador de los
linfocitos T, activa a las clulas NK, a los
macrfagos, a los linfocitos B y estimula la
liberacin de varias citosinas. Se ha
demostrado que el tratamiento con la protena
recombinante y con el gen de IL-2,
administrados por va intratumoral, reduce
significativamente el avance de los tumores
asociados al VPH e inhibe la formacin de
tumores recurrentes despus de ser eliminados
por ciruga.
El uso del GM-CSF como adyuvante en la
terapia gnica contra cncer cervical ha sido
probado mediante el diseo ex vivo, es decir,
fuera del organismo, de lneas celulares
tumorales, transformadas con las protenas de
VPH y transfectadas con el gen de GM-CSF. El
tratamiento en modelos tumorales en ratn
asociados al VPH y con la terapia gnica ex vivo ha permitido determinar que el GM-CSF
es capaz de inhibir el desarrollo tumoral de una manera dosis dependiente.
Por sus propiedades como inmunomodulador de la respuesta celular y de la actividad
antitumoral, se ha utilizado a la IL-12 ampliamente en esta terapia. El tratamiento con el
gen de dicha citosina IL- 12 se ha empleado usando la terapia gnica no viral (DNA
desnudo), terapia gnica viral con el uso de adenovirus, terapia gnica ex vivo y en
combinacin con los oncogenes E6 y E7, as como con genes de molculas
inmunomoduladoras de la respuesta inmune celular como B7.El efecto de represin del
crecimiento tumoral se observa en todos los casos. Aumentar la proteccin contra tumores
recurrentes despus de ser eliminados por ciruga y se inhibir la formacin de metstasis si
el GM-CSF se trata con la IL-2 en conjunto, y se requiere de IL-12 para inhibir este
proceso1,7
Terapia Gnica in vivo
La terapia gnica in vivo aborda la modificacin gentica de la clula en el interior del
organismo, o sea, la introduccin del gen teraputico en el lugar normal de residencia de
la clula en un organismo, sin que se produzca su extraccin ni manipulacin in vitro. El
tratamiento est basado en la administracin sistemtica de la construccin gentica de

inters, para lo cual es necesario el uso de vectores que posibiliten el proceso de traslado
del gen y proporcione la entrada y ubicacin intracelular de este.
Terapia Gnica ex vivo
En el caso de la terapia gnica ex vivo, se usan clulas modificadas genticamente in
vitrocon el sistema de expresin de inters, que portan la informacin gentica deseada y
luego se implantan en el organismo receptor. Es decir, la manipulacin gentica ocurre
fuera del organismo
Transferencia Gnica
El problema de cmo hacer llegar un gen teraputico a una clula diana (Clula
diana o clula blanca (del ingls target cell), bsicamente es una clula que recibe una
sustancia; es un trmino aplicado a cualquier clula en la cual una hormona se une a
su receptor, se haya determinado o no una respuesta bioqumica o fisiolgica) deficitaria de
esa funcin es el mayor obstculo de la transferencia gnica. Ambos tipos de terapia, in
vivo y ex vivo, usan vectores, virales o no virales, que expresan el gen o los genes de inters
teraputico.
La capacidad de los virus para transferir genes de manera natural, es la cualidad ms
atractiva para convertirlos en una herramienta eficiente en los modelos de transgnesis in
vivo y ex vivo. El conocimiento de su biologa ha permitido el diseo de vectores
recombinantes no replicativos o replicativos, acorde a las necesidades de cada modelo para
la transferencia de genes. Entre los virus recombinantes con aplicaciones en transgnesis se
encuentran los adenovirus, los retrovirus, los virus adeno-asociados, los lentivirus, adems
de otros ADN o ARN virus. Los vectores no virales incluyen liposomas, ADN desnudo y
complejos ADN-protenas11, 12,13

TRANSFERENCIA
GNICA IN VIVO
MTOD MTOD
OS NO
OS
VIRALE VIRAL
S
ES
Inespecfi Retroviru
cos
s
DNA
Adenovir

TRANSFERENCIA GNICA
EX VIVO
MTODOS NO
MTOD
VIRALES
OS
VIRALE
S
Qumicos: Fosfato
Adenovi
clcico
rus
Fsicos:
Retrovir
9

desnudo

us

Complejo
DNAliposoma
s
Especfic
os

Virus
adenoasociado
s
Herpes
virus

Electroporacin,
Microinyeccin,
Bombardeo de
partculas.
Fusin: Complejos
ADN - liposomas

Endocitosis mediada
por receptor:
Complejos ADNprotena, Complejos
ADN-cpsida/
envoltura viral ,
Inmunoliposomas/lip
osomas destinados

us

Virus
adenoasociados
Herpes
virus

Aqu en este cuadro muestra algunos mtodos de transferencia gentica in vivo y ex vivo.

Sistemas para la introduccin de material gentico en las clulas

La transferencia de genes teraputicos en clulas eucariotas puede realizarse por mtodos
fsicos o qumicos (transferencia no viral), y biolgicos (transferencia viral). La
transferencia gnica no viral se denomina transfeccin que es infeccin de una clula con
un cido nucleico libre y depende de los sistemas de transporte celulares para internalizar el
cido nucleico y expresar el gen teraputico. Los mtodos ms empleados para la
transfeccin son: electroporacin, bomdisearbardeo de partculas y liposomas catinicos.
En contraste, la transferencia gnica viral depende de un virus para transferir el material
gentico en el interior celular, se denomina transduccin el cual es el virus conduce el gen
teraputico a travs de la membrana al interior celular o infeccin, y el gen teraputico se
denomina transgn
Aunque los sistemas no virales para la transferencia de genes al interior celular tienen
muchas ventajas, en endisearsayos clnicos se emplean ms los sistemas virales por su
tamao, su cpside proteica que protege al gen teraputico de la degradacin enzimtica, y
sus mecanismos de internadisearlizacin eficientes. Adems, el genoma viral se puede
manipular para eliminar los genes de patognesis y disear virus con alta capacidad de
infeccin y con espacio suficiente para el transgn teraputico, en la tabla siguiente se ve
las ventajas y desventajas del viral- no viral.1, 2

10

Vacunas y terapia gentica

El cncer cervicouterino es un grave problema en la salud es un trabajo demasiado
complicado para el que trabaja con esta
investigacin por lo que en la universidad
de UANL realiz una investigacin de
una vacuna proteica para el tratamiento
del cncer cervicouterino, en el cual se
trabaja con una protena llamada E7 que
permita inducir de tipo celular y humoral,
ya que nos habla que las bacterias acido
lcticas puedes ser administradas a travs
de las mucosas, la protena E7 es como un
blanco potencial para dirigir el desarrollo
de una vacuna teraputica contra el
cncer cervicouterino.
El VIH o sida en las mucosas que le
llaman tambin puerta del VHI ya que es
el tejido ms sensible o sistema inmune
local con funciones o propiedades por
ello la investigacin se enfoca ms en la
mucosa por el principal acceso a este virus el cual se usa bacterias lcticas modificadas en
el cual representa una vacuna de desarrollo contra el sida efectiva y segura, en si muchas
11

universidades trabajan con vacunas que puedan controlar esta epidemia que cada vez es
ms contagiosa mundialmente pero gracias a la tecnologa existen vacunas en el centro de
salud en el cual puedes solicitar una vacuna es su mayora gratuita6. En el cuadro I y II
podemos ver las vacunas que se emplean en la terapia gentica..1
Nuevas terapias en el tratamiento de cncer
Durante los ltimos 20 aos ha habido una explosin de informacin sobre los cambios
moleculares que inducen cncer. En la actualidad, primero se identifica una diana
molecular que sea importante en la gnesis y desarrollo tumoral, posteriormente se disean
molculas que inactiven dichas dianas y por ltimo se valora su impacto en la clnica. Este
cambio de enfoque ha permitido obtener frmacos ms selectivos que daan a las clulas
tumorales y respetan en mayor medida los tejidos sanos si los comparamos con los
frmacos citotxicos clsicos. Es un gran reto para el mundo de la Oncologa obtener
molculas eficaces y selectivas sobre las clulas tumorales que no afecten o no produzcan
toxicidad en las clulas sanas..
Las terapias anti-diana: Los frmacos anti-diana trabajan en constituir conceptualmente
una familia de agentes diseados una vez que se identifica la molcula llamada DIANA que
est alterada en la clula tumoral o que participa de manera importante en el proceso
canceroso. En el cual son frmacos diseados para bloquear, inactivar qumicamente a la
molcula diana identificada, destruir la clula tumoral o impedir su crecimiento.
En paralelo al descubrimiento de nuevas dianas teraputicas estn apareciendo nuevas
estrategias para combatir el cncer como se muestra en la siguiente tabla13

12

Conclusiones
No cabe duda que la terapia gentica es algo muy importante en el mundo por lo que
concluyo que con el IFN, IL-2, IL-12 y GM-CSF son excelentes candidatos como
activadores de la respuesta inmune antitumoral y en su avanzado estudio podran resultar
idneos para la terapia gnica contra el cncer cervicouterino, aparte hay demasiadas
tcnicas y aplicaciones para el tratamiento de cncer que se trabajan mucho en ellos,las
investigaciones en terapia gnica tienen mayores oportunidades de xito despus que se
conoci la secuencia completa del genoma humano, porque a partir de la conformacin del
genoma se puede determinar cmo se constituye un ser humano desde el punto de vista
biolgico y gentico. En la actualidad se llevan a cabo distintos ensayos con terapia gnica
para curar enfermedades como el cncer y otras de tipo hereditarias, fundamentalmente.

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Bibliografa
1.-Salud pblica Mx vol.47 no.6 Cuernavaca nov./dic. 2005
2.-rev.colomb.cancerol. vol.18 no.1 Bogot Jan./Mar. 2014
3.-World Forum of Health
http://www.wfh.org/3/docs/Publications/Gene_Therapy/TOH17_Terapia_Genica_SP.pdf (20-11-2010)
4.-Ciencia UANL http://redalyc.uaemex.mx/pdf/402/40210312.pdf (2011-10)
5.-El Universal http://www.eluniversal.com.mx/articulos/59706.html (1911-10)
6.- Ghisela Osorio soto VACUNAS Y TERAPIA GENETICA ciencias UANL
mty, mexico pp.315-318
7.- Rodrguez Macip E. Terapias Gnicas. 2002 [Internet]. Disponible en:
http://sefh.interguias.com/libros/tomo2/Tomo2_Cap6.pdf
8.- Fillat C. Perspectivas actuales de la terapia gnica. Can Ped. 2004; 28
(2 y 3)
9. Segovia de Arana JM. Actualidad de la medicina genmica [Internet].
Disponible en: http://www.futuremedicine.com/toc/nnm/2/6
10. Soutullo D. Terapia Gnica Ayer y Hoy. [Internet]. Espaa; 2002 .
Disponible en: http://www.ugr.es/~eianez/Biotecnologia/tgdaniel.htm.
11. Grisolia S. El genoma humano. Anales [Internet]. May-agosto 2002 .
Disponible en:
http://www.cfnavarra.es/salud/anales/textos/vol24/n2/colab.htm
12. Martn Ross D, lvarez lvarez L, Chvez Viamontes JA, Prez LN,
Alberro M, Lezcano Gngora O. Genoma humano. Actualidades y
perspectivas bioticas. Rev Hum Med. Abril de 2002; 2 (1).

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13. Nuevas terapias en el tratamiento del cncer Martn Centeno A,

Grande E, Guzmn C, Jimnez G, Erustes M Departamento Mdico,
Oncologa Pfizer Espaa(2007)

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