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LABORATORIOS
ABC
CONTENIDO
1.0
INTRODUCCIN
2.0
OBJETIVOS
3.0
MTODOS ANALTICOS
1.0 INTRODUCCIN
La problemtica de la medicin analtica de los Compuestos Orgnicos Persistentes y de los
metales y metaloides txicos en matrices complejas como son las ambientales, se incrementa
cuando se utilizan mtodos analticos no estandarizados, ya que muchos de los mtodos
publicados en la bibliografa cientfica no cuentan con los sustentos de validacin necesarios o no
los publican para que otros tcnicos o cientficos los puedan utilizar confiablemente. No solo por
que no tengan los datos de desempeo completos, sino que en muchas ocasiones tienen defectos
en su redaccin lo que los hace poco robustos.
Un mtodo estandarizado no solo consiste en que haya sido probado y validado por varios
laboratorios competentes, sino que sea entendido por todos de la misma forma, en eso consiste la
robustez de un mtodo analtico, que tenga un formato uniforme y que todos los que lo lean,
entiendan lo mismo.
Los mtodos analticos se clasifican en:
1.- Mtodos primarios: Son mtodos de la ms alta calidad metrolgica, cuya operacin
est completamente descrita y entendida en trminos de las unidades SI y cuyos resultados son
aceptados sin referencia a un patrn de la misma cantidad (Gravimetra, Volumetra,
Espectrometra de masas con dilucin isotpica, etc.).
2.- Mtodos Racionales o No Empricos: Son mtodos estandarizados perfectamente
caracterizados para una matriz especfica, expresados usualmente en masa o fraccin mol y en
principio cualquier efecto sistemtico debido al sesgo del mtodo o de la matriz debe ser corregido,
aunque es mas usual que stos sean mnimos, normalmente el resultado del mensurando no
depende del mtodo utilizado (p.ej. Contenido de Nquel en una aleacin).
3.- Mtodo Empricos: Son mtodos en los cuales el resultado del mensurando depende del
mtodo utilizado (p. ej. Grasas y Aceites en aguas residuales), normalmente son mtodos
acordados para propsitos de mediciones comparativas dentro de un particular campo de
aplicacin, donde el mensurando depende caractersticamente del mtodo utilizado. En estos
mtodos no se pueden utilizar correcciones por sesgo del mtodo o de la matriz y los resultados
del mensurando se deben referir al mtodo utilizado. En el caso de los anlisis del medio
ambiente, las variaciones del sustrato y de la matriz tienen efectos significativos y desconocidos
(p. ej. No existen 2 aguas residuales industriales o dos suelos o dos residuos peligrosos
exactamente iguales), por lo que los mtodos analticos que se utilizan, se consideran en este
rubro.
Los mtodos que se utilizan para la medicin de metales, metaloides , Plaguicidas
Organoclorados, los Hidrocarburos Poliaromticos, los Bifenilos Policlorados, los PBDEs y los
PFOS son de tipo Racional, por lo que tericamente, sin importar la tcnica que lo conforme, debe
dar resultados comparables dentro de las incertidumbres que cada mtodo tenga. Sin embargo,
existen factores intrnsecos en cada mtodo como son las columnas analticas en el caso de las
separaciones cromatogrficas, la respuesta de los detectores utilizados, los procedimientos de
2.0 OBJETIVOS
Contar con los mtodos analticos estandarizados y con sus datos homologados de desempeo y
control de calidad para determinar las Sustancias Persistentes y Bioacumulables, dentro de los
cuales se incluyen a los Compuestos Orgnicos Persistentes en un formato uniforme para que
sean utilizados por los integrantes del PRONAME.
10
12
Todos los mtodos son basados en desempeo, es decir, pueden ser modificados con la condicin
de que se alcancen los mismos parmetros de desempeo, este desempeo debe ser evaluado en
matrices reales y no con muestras de control de calidad de matriz simple.
Las referencias obtenidas que se tradujeron para cada uno de los mtodos de extraccin fueron
las siguientes:
MATRICES
Metales
Mercurio
Congneres de
PCBs
HPAs, Clordecon y
Pentaclorobenceno
Plaguicidas
Organoclorados
PBDEs
PFOS
Aire Ambiente
EPA IO-2.1
EPA IO-5
EPA TO-4A
EPA TO-13A
EPA TO-4A
Suelos y
Sedimentos
Aguas
Marinas
Aguas
Superficiales
epicontinental
es
Aguas
Estaurinas y
de Lagunas
Costeras
Aguas
Subterrneas
EPA 3051A
EPA 3051A
EPA 3550C
/EPA 3620C
/EPA 3660C
EPA 1614
Perfluorinated
Organic Chemical
in the European
enviroment.
Scientific Report.
Faculty of Science.
Univ. of
Amsterdam,
Holland
EPA 200.10
EPA 3015-A
EPA 3510C
/EPA 3620C
EPA 1614
ISO 25101:2009
EPA 3015A
EPA 3015A
EPA 3510C
/EPA 3620C
EPA 1614
ISO 25101:2009
EPA 200.10
EPA 3015-A
EPA 3510C
/EPA 3620C
EPA 1614
ISO 25101:2009
EPA 3015A
EPA 3015-A
EPA 3510C
/EPA 3620C
EPA 1614
ISO 25101:2009
NIOSH 8004
Mathur, H. B, et al,
Analysis of Pesticide
Residues in Blood
Samples
from
Villages of Punjab;
India: Centre for
Science
and
Environment, 2005.
L.
Zainieri,
et.
al,
Polyciclyc
aromatic
hydrocarbons (HPAs) in
human milk from Italian
women: Influence of
cigarette smoking and
residential
area.
Chemosphere 2007. Vol.
67(7). p1265-1274
Sangre
Humana
NIOSH 8005
Leche
Materna
Morales I, Reyes
R, Alvarado J,
Domnguez
J,
Mijares R (2007)
Diagnstico de la
Contaminacin de
Mercurio en el
Personal de una
Unidad
Odontolgica de
Caracas,
Venezuela. Acta
Odontol
Venez
45, N 3/2007
Stewart A. et. al,
Measurement of
Total Mercury in
Biological
Specimens
by
Cold
Vapor
Atomic
Fluorescente
Spectrometry.199
4
Clinical
Chemistry.
Vol
40(2). p206-210.
13
Alimentos,
tejidos y
Organismos
Bajo
contenido de
Grasas
Higado y
Tejidos
Alto
contenido de
Grasas
FDA-EAM4,4-2010
FDA-EAM4,4-2010
FDA-EAM4,4-2010
FDA-EAM-4,5-2008
FDA-EAM-4,5-2008
FDA-EAM-4,5-2008
NOAA Technical
Memorandum
NOS ORCA 130.
nacional Status
and Trenes
Prrogam for
Marine
Environmetal
Quality.
Extraction of
biological
Tissues of trace
organic analisis
Pag. 98-101. US
Department of
Commerce.
Silver Spring
Maryland. March
1998.
Survey of PFOS
and related
fluorochemicals in
food. Report
number: FD
08/04. Central
Science
Laboratory. York
UK. 2008
Extraction of
Potassium
Perfluorooctanes
ulfonate or other
anionic
fluorochemical
surfactants from
liver for analysis
using HPLCES/MS. 3M
Environmental
Laboratory.
Method FACT.1.0 1998
Extraction of
Potassium
Perfluorooctanes
ulfonate or other
anionic
fluorochemical
surfactants from
liver for analysis
using HPLCES/MS. 3M
Environmental
Laboratory.
Method FACT.1.0 1998.
A continuacin se presentan los esquemas de trabajo que se deben utilizar para el anlisis de
muestras ambientales para evitar retrabajos:
MTODOS DE ANLISIS (CUALITATIVOS Y CUANTITATIVOS)
MATRICES
Aire Ambiente
Suelo y
Sedimentos
Metales
Hg
Congneres
de PCBs
HPAs
Plaguicidas
Organoclorados
PBBEs
PFOS
EPA IO-3.4
EPA IO-5
EPA 8082A
EPA 8270D
EPA 8081B
EPA
1614/
EPA
527
Perfluorinated
Organic
Chemical in the
European
enviroment.
Scientific
Report. Faculty
of Science.
Universidad de
Amsterdam
Holland
EPA 6010C
EPA-7474A
EPA 8082A
EPA 8270D
EPA 8081B
14
Aguas Marinas
EPA 200.10
EPA-7470A
EPA 8082A
EPA 8270D
EPA 8081B
Aguas
Superficiales
epicontinentales
EPA 6010C
EPA-7470A
EPA 8082A
EPA 8270D
EPA 8081B
Aguas
Estuarinas y de
Lagunas
Costeras
EPA 200.10
/EPA 200.13
EPA-7470A
EPA 8082A
EPA 8270D
EPA 8081B
Aguas
Subterrneas
EPA 6010C
EPA-7470A
EPA 8082A
EPA 8270D
EPA 8081B
Sangre
Humana
NIOSH 8005
Morales I, Reyes
R, Alvarado J,
Domnguez J,
Mijares R (2007)
Diagnstico de la
Contaminacin de
Mercurio en el
Personal de una
Unidad
Odontolgica de
Caracas,
Venezuela. Acta
Odontol Venez 45,
N 3/2007
NIOSH 8004
Ken,
Sexton
et
al,
Polycyclic
Aromatic
Hydrocarbons in Maternal
and Umbilical
Cord Blood from Pregnant
Hispanic Women Living in
Brownsville, Texas; Int. J.
Environ.
Res.
Public
Health 2011, 8, 33653379;
doi:10.3390/ijerph8083365
Mathur, H. B, et
al, Analysis of
Pesticide
Residues
in
Blood Samples
from Villages of
Punjab; India:
Centre
for
Science
and
Environment,
2005.
(esta
metodologa se
refiere al EPA
8081B)
Leche Materna
Paulo R. et.
al,
Multielement
Determination
in Small
Samples of
Human Milk
by Inductively
Coupled
Plasma
Atomic
Emission
Spectrometry.
Brasil.
Biological
Trace
element
research.
1997. vol.23.
p57-62
K Norn, et.
al,
Methylsulfonyl
metabolites of
PCBs
and
DDE
in
human milk in
Sweden,19721992. Environ
Health
Perspect.
1996
vol.104(7).
P766-772.
L.
Zainieri,
et.
al,
Polyciclyc
aromatic
hydrocarbons (HPAs) in
human milk from Italian
women:
Influence
of
cigarette smoking and
residential
area.
Chemosphere 2007. Vol.
67(7). p1265-1274
EPA
1614/
EPA
527
Analysis of
Fluorochemicals
in Liver Extracts
Using HPLCElectrospray/MS
3M
Environmental
Laboratory.
Method FACT.1.0 1998.
Alimentos,
organismos y
tejidos
FDA-EAM4,4-2010
FDA-EAM-4,52008
ISO 25101:2009
ISO 25101:2009
ISO 25101:2009
ISO 25101:2009
15
16
NOTA: Este mtodo est basado en su desempeo, se permite que el laboratorio omita cualquier
paso o modifique cualquier procedimiento, suponiendo que todos los requerimientos de
desempeo especificados se cumplan. Al laboratorio no se le permite omitir cualquier punto de
control de calidad, ni los parmetros que se especifiquen como NO MODIFICABLES. Los
trminos debe, puede y deber son mencionados a travs de los mtodos y estn destinados
a ilustrar la importancia de los procedimientos para producir datos verificables en los rangos de
trabajo del mtodo. El trmino debe es usado para indicar que los desarrolladores de este
mtodo encontraron ciertos procedimientos esenciales en muestras analizadas exitosamente; de
todas maneras, estos procedimientos pueden ser modificados u omitidos si el laboratorio puede
demostrar fehacientemente que la calidad de los resultados no resulta afectada.
PARMETROS NO MODIFICABLES
Aldrin
Clordano
DDT (y metabolitos DDD y DDE)
Dieldrin
Endrin
17
-Endosulfan
-Endosulfan
Endosulfan sulfato
Heptacloro
Heptacloro epxido
Hexaclorobenceno
Lindano ( -BCH)
-BCH
-BCH
Mirex
Toxafeno
Este mtodo puede ser aplicado a otros analitos de la misma familia de plaguicidas
organoclorados, se debe validar la aplicacin para cada uno de los analitos que quiera ser
analizado.
3.1.1.3 Matrices Este mtodo es aplicable para el anlisis de los plaguicidas
organoclorados mencionados en el inciso anterior en las siguientes matrices ambientales:
Aire Ambiente
Suelos
Sedimentos Marinos
Sedimentos Epicontinentales
Aguas Marinas
Aguas Estaurinas y de Lagunas Costeras
Aguas Superficiales Epicontinentales
Aguas Subterrneas
Alimentos procesados y sin procesar, Organismos y Tejidos animales
Sangre
Leche Materna
3.1.1.4 Limitaciones Los lmites de deteccin en las muestras reales dependern de las
interferencias presentes en las mismas, por lo que es muy importante tener en cuenta que pueden
variar hasta en magnitudes de 10 a 1,000 veces (factores de concentracin de las muestras e
interferencias presentes en el extracto purificado).
Este mtodo est restringido para utilizarse slo bajo la supervisin de analistas expertos en el uso de
cromatografa de gases y en la interpretacin de sus resultados. Cada analista debe demostrar la
habilidad para generar resultados aceptables con este mtodo.
3.1.2 Resumen
AIRE AMBIENTE
Se utiliza un muestreador alto volumen modificado (Hi-Vol), con un filtro de fibra de vidrio
y un cartucho absorbente con espuma de poliuretano (PUF). El muestreo se lleva a cabo
a una flujo de ~ 200-280 L/min durante 24 h.
18
19
20
21
3.1.3.3 Matrices
3.1.3.3.1 Aire Ambiente
3.1.3.3.1.1 Equipo y Materiales
La mencin de marcas, modelos y proveedores de equipos y materiales en este mtodo se citan
debido a que fueron los utilizados para desarrollarlo y solamente tienen propsitos ilustrativos.
Su mencin no implica ninguna aprobacin oficial. Puede obtenerse un desempeo equivalente
usando otros equipos y materiales que no hayan sido especificados en este mtodo, pero la
demostracin del desempeo equivalente de otros equipos y materiales es responsabilidad del
laboratorio que utilice este mtodo.
Slo se mencionan los equipos y materiales que son relevantes en este mtodo
analtico.
Muestreador de altos volmenes con cartucho PUF Disponible de General Metal
Works (Modelo PS-1).
Cabeza de Muestreo para contener cartucho de vidrio con tapn PUF Disponible
de General Metal Works.
Orificio de calibracin Disponible de General Metal Works
Manmetro Para usarse con el orificio de calibracin.
22
24
Kuderna Danish con capacidad de 500 y 1,000 mL con columna de destilacin Snyder
y matraces de 5 10 mL Kontes
Embudos de separacin de 2 L
Sulfato de sodio anhidro - Granular anhidro (purificado por lavado con cloruro de
metileno seguido por calentamiento a 400 C por 4 horas).
Agua A menos que otra forme se indique, el agua de referencia debe entenderse como
agua grado reactivo tipo I ASTM.
25
3.1.3.3.3 Suelos
3.1.3.3.3.1 Equipo y Materiales
La mencin de marcas, modelos y proveedores de equipos y materiales en este mtodo se citan
debido a que fueron los utilizados para desarrollarlo y solamente tienen propsitos ilustrativos.
Su mencin no implica ninguna aprobacin oficial. Puede obtenerse un desempeo equivalente
usando otros equipos y materiales que no hayan sido especificados en este mtodo, pero la
demostracin del desempeo equivalente de otros equipos y materiales es responsabilidad del
laboratorio que utilice este mtodo.
Slo se mencionan los equipos y materiales que son relevantes en este mtodo
analtico.
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Extractor ultrasnico
Bao de agua Calentador, con cobertura con anillos concntricos, capaz de control la
temperatura (+ 5 C). El bao debe utilizarse en una campana.
3.1.3.3.3.2 Reactivos y Materiales de Referencia
Los reactivos que requiere el mtodo deben ser tipo ACS grado reactivo o pesticida, a menos
que otra cosa se indique.
Agua A menos que otra forme se indique, el agua de referencia debe entenderse como
agua grado reactivo tipo I ASTM.
ter etlico
Sulfato de sodio Granular anhidro (purificado por lavado con cloruro de metileno
seguido por calentamiento a 400 C por 4 horas).
Grnulos de cobre
27
28
29
Acetonitrilo CH3CN
ter de petrleo
ter etlico
Acetonitrilo saturado con ter de petrleo Sature CH3CN con ter de petrleo.
Sulfato de sodio anhidro - Granular anhidro (purificado por lavado con cloruro de
metileno seguido por calentamiento a 400 C por 4 horas).
3.1.3.3.5.1 TEJIDOS Y ALIMENTOS CON GRASA ( 2% GRASA)
3.1.3.3.5.1.1 LECHE
Extraccin de grasa
Coloque 100 mL de leche (diluya leche evaporada 1:1 con agua) en un tubo de
centrifuga de 500 mL, adicione 100 mL de metanol, aproximadamente 1 g de oxalato
de sodio o de potasio y agite fuertemente. Adicione 50 mL de ter etlico y agite
vigorosamente 1 min abriendo el tubo para liberar la presin generada y deje reposar
30
31
YEMA
DE
HUEVO
HUEVO
3.1.3.3.5.1.4 HIGADO
Pese de 25 a 50 g de muestra y triture en un mezclador de alta velocidad (si el
contenido de grasa es conocido o puede estimarse, ajuste el tamao de la muestra
de tal forma que el mximo de grasa extrada sea de 3 g). Adicione 100 g de Na 2SO4
anhidro y mezcle con esptula hasta la obtencin de un polvo homogneo, retire la
muestra de las orillas del vaso de mezclado con una esptula. Adicione 150 mL de
ter de petrleo y mezcle a una alta velocidad durante 2 min. Decante el ter de
petrleo sobrenadante en un embudo Bchner de 12 cm (con papel filtro) en un
matraz kitazato de 500 mL. Reextraiga los residuos contenidos en el vaso de
mezclado con dos porciones de 100 mL de ter de petrleo y mezcle durante 2 min
en cada ocasin (mezcle 1 min pare la mezcladora, limpie las orillas del vaso con una
esptula y continu mezclando durante 1 min mas). Decante el ter de petrleo
sobrenadante de los mezclados en el embudo Bchner combinando todos los
extractos, enjuague el vaso de mezclado y el Bchner con tres porciones de 25 a 50
mL ter de petrleo. Inmediatamente despus del ltimo enjuague, presione el
residuo del embudo Bchner con el fondo de un vaso para forzar a salir el ter de
petrleo remanente. Rena los extractos y pselos a travs de una columna de 40x25
32
33
3.1.4 MTODO
INSTRUMENTAL
DE
IDENTIFICACIN
CUANTIFICACIN
3.1.4.3.1 Equipo
Cromatgrafo de gases Sistema analtico completo con cromatgrafo de
gases para inyeccin split-spltless, inyector automtico, 2 detectores de
captura de electrones (ECD) para operacin simultnea, divisor de flujo 1:1
posterior al inyector, sistema de integracin digital y estacin de manejo de
datos (Agilent 7890 o equivalente).
Columna 1 (columna analtica) DB-35MS de 30 m x 0.25 mm de D.I. x 0.25
m de espesor de fase o equivalente.
Columna 2 (columna confirmativa) DB-XLB DE 30 m X 0.25 mm D.I. x 0.25
m de espesor de fase o equivalente.
3.1.4.3.2 Material
Matraces volumtricos clase A de 1, 5 y 10 mL para preparacin de
estndares y curvas de calibracin.
37
Concentracin (mg/L)
0.1
0.1
39
Identificacin de la muestra
Nmero del lote analtico en el cual se analiz la muestra
Fecha del anlisis
Procedimiento cronolgico utilizado
Cantidad de muestra utilizada
Nmero de muestras de control de calidad analizadas en el lote
Trazabilidad de las calibraciones de los instrumentos de medicin
Registros de bitcoras, en cintas de respaldo o en otros respaldos de
informacin
i) Informacin cruda reportada por los equipos o por los analistas
j) Evidencia de la aceptacin o rechazo de los resultados del lote analtico.
3.1.4.5.1
El criterio de resolucin es tal que la profundidad del valle entre dos picos
adyacentes en la mezcla de verificacin de resolucin debe ser mayor o igual
a 60.0% de la altura del pico ms corto.
La verificacin del detector de ECD se realiza segn el instructivo del
fabricante.
Verificar que el flujo de los gases y condiciones cromatogrficas sean las
adecuadas, segn se menciona posteriormente.
Verificacin de blanco electrnico: Se realiza una corrida con las condiciones
cromatogrficas del mtodo, pero sin inyectar nada. Si el cromatograma
presenta picos a cualquier tiempo de retencin, se purga el sistema poniendo
40
Ecuacin 1:
A B
% Degradacin DDT
x100
A BC
Donde:
A = rea del DDE
B = rea del DDD
C = rea del DDT
Ecuacin 2:
A B
% Degradacin Endrin
x100
A BC
Donde:
A = rea del Endrin aldehdo
B = rea del Endrin cetona
C = rea del Endrin
Si la degradacin del DDT o del endrin es mayor al 15%, se debe proceder a
cambiar el inserto de vidrio, limpieza del puerto de inyeccin, cambio del sello
de oro y de la precolumna que se conecta con el inyector y a las dos columnas
(30 cm).
3.1.4.5.2.Verificacin de la calibracin inicial.
La curva de la calibracin inicial deber realizarse inyectando los estndares
de calibracin preparados y se considera lineal, si el por ciento de la
desviacin estndar relativa (%RSD) de los factores de calibracin (CF) es
menor o igual al 20%, los clculos se realizan con las siguientes ecuaciones:
CF
total de rea
masa inyectada en nanogramos
SDCF
% RSD
x100
CF
Donde:
SDCF = Desviacin estndar de los factores de calibracin
CF = Promedio de los factores de calibracin
La verificacin de la calibracin inicial puede tambin efectuarse mediante la
regresin por mnimos cuadrados, en la cual el criterio de aceptacin es que el
factor de correlacin "r2" sea mayor o igual a 0.997.
41
CC CT
Diferencia de concentracin % D
x100
CT
Donde:
CC = concentracin calculada
CT = concentracin terica
O si se utiliza el factor de calibracin
CFv CF
Diferencia porcentual %
x100
CF
Donde:
CFv = factor de calibracin de cada compuesto en el estndar de
verificacin.
CF = media del factor de calibracin del compuesto de la calibracin inicial.
Si el criterio de aceptacin para la diferencia porcentual es mayor al 15% se
proceder a la revisin del sistema cromatogrfico y a la preparacin de la
solucin estndar utilizada.
3.1.4.5.3 Verificacin de contaminacin de los reactivos.
Los blancos de reactivos no deben presentar ningn tipo de contaminante al
tiempo de retencin de los plaguicidas medidos, por lo que es importante que
los reactivos utilizados cumplan con las especificaciones mencionadas.
Si los resultados de los blancos no cumplen con el criterio mencionado, se debe
localizar la fuente de contaminacin, extraer y analizar nuevamente las muestras
asociadas al blanco contaminado.
Use tambin los blancos de reactivos para verificar la contaminacin por arrastre de
muestras con altas concentraciones en anlisis secuenciales
3.1.4.5.4 Verificacin del lote analtico
Por cada lote analtico de muestras analice al menos una muestra sinttica de
control de calidad o preferentemente un material de referencia certificado de la
misma matriz de las muestras analizadas en el lote analtico, calcule el % de
recuperacin (%R) de cada analito y surrogados de la muestra control, los
cuales debern estar dentro del rango de 80 a 120 %R. De no ser as se debe
revisar la preparacin de la muestra control y el sistema cromatogrfico.
42
DPR
C1 C 2200
C1 C 2
Donde:
C1 = concentracin de la primera muestra
C2 = concentracin de la segunda muestra (muestra duplicada)
La DPR de cada analito obtenido entre la muestra y la duplicada debe ser
<20%
Si los valores no cumplen con los especificados, el sistema analtico est fuera
de control, determine las causas y corrija el problema, documente las
incidencias y acciones correctivas e inclyalas en el expediente del resultado
analtico.
Repita el anlisis del lote asociado con la muestra y la duplicada que provoc
que la prueba del DPR fallara.
3.1.4.5.6 Verificacin de la estabilidad de la curva de calibracin
43
FC1 FC2
Diferencia porcentual
FC1
x100
Donde:
FC1 = Factor de calibracin promedio para cada plaguicida en la curva de
calibracin, o la concentracin nominal de del estndar de verificacin.
FC2 = Factor de calibracin promedio para cada plaguicida en el estndar de
concentracin media, o la concentracin calculada en el estndar de
verificacin.
El valor obtenido del % de la diferencia (%D) deber ser menor al 15%, de no
ser as verifique su vigencia, revis tambin el sistema cromatogrfico y
determine la causa de la falla y corrija, de no lograr corregir la falla, recalibre
nuevamente el sistema y en le caso de que la falla del estndar de verificacin
sea en un lote mayor de 20 muestras reanalice las 10 muestras anteriores al
estndar de verificacin que fall.
3.1.4.5.7 Verificacin de estndares surrogados
Evale los datos de recobro de los surrogados de las muestras.
Calcule el % de recuperacin de los estndares surrugados en blancos,
muestras control, muestras adicionadas (si se realizaron), muestras
duplicadas (si se realizaron) y muestras reales, con la siguiente ecuacin:
Re cuperacin % R
C1
100
C2
Donde:
C1=Concentracin calculada de surrugados en la muestra.
C2=Concentracin nominal del surrugado adicionado a la muestra.
El %R debe estar entre el 70 y el 130 % de recuperacin de no ser as
verifique la preparacin de la muestra que fallo y el sistema cromatogrfico,
determine la causa de la falla y corrija, de no encontrarla, repita la
extraccin de la muestra y vuelva a analizar si el %R esta fuera del rango
de aceptacin llene hoja de incidencia y reporte como interferencia de
matriz y los resultados obtenidos.
44
45
46
Punto de verificacin
Criterio
Punto de verificacin
Criterio
Menor al 15%
47
Criterio
Blanco de reactivos
Punto de verificacin
Criterio
% de Recuperacin de 70 / 130
% de Recuperacin de 70 / 130
Punto de verificacin
Criterio
% de Recuperacin 70 / 130
Punto de verificacin
Criterio
3.1.4.6 Calibracin
PRECAUCIN: El endrin Y el DDT se degradan fcilmente en el puerto de inyeccin si
ste o el frente de la columna estn sucios. Esto se da como resultado de la
acumulacin de residuos de alto punto de ebullicin que se inyectan con las muestras.
Verifique si hay problemas de degradacin inyectando el estndar de verificacin del
sistema. Busque los productos de degradacin (DDD, DDE, endrincetona y
endrinaldehido). Si la degradacin del DDT o del endrin excede el 15 %, tome acciones
correctivas antes de proceder con la calibracin.
Se necesitan al menos 5 estndares de calibracin. Uno debe contener analitos a una
concentracin cercana, pero superior a la del lmite prctico de cuantificacin para
cada analito; los otros deben estar a concentraciones que cubran el intervalo esperado
en las muestras. Por ejemplo, si el LDM es 0.01g/L y el LPC es de 0.05 g/L, se
espera que la muestra contenga concentraciones mayores de 0.05 g/L.
Una vez establecidas las condiciones de operacin inyecte un volumen adecuado (2 L) de cada
48
RF
AsCis
AisCs
Donde:
As = Respuesta para el analito que ser medido.
Ais = Respuesta del estndar interno.
Cis = Concentracin del estndar interno, g/L.
Cs = Concentracin del analito a ser medido, g/L.
Si el valor RF sobre el rango de trabajo es constante (< 20% RSD), el RF puede usarse para
clculos. Alternativamente, los resultados pueden usarse para graficar una curva de
calibracin de la relacin de respuesta, As/Ais contra RF.
3.1.4.7 Procedimiento Analtico
3.1.4.7.1 Anlisis de los extractos de las muestras
Condiciones cromatogrficas:
Anlisis por doble columna DB-35MS y DB-XLB
Gas acarreador
Hidrgeno
49
15 psi
140 C
2 min
10C/min
240C
25C/min
300C
5 min
250C
320C
0.3 min
20mL/min
4mL/min
3.1.4.7.3 Clculos
3.1.4.7.3.1 AIRE AMBIENTE
El volumen total de la muestra se calcula de las lecturas de flujo peridico
(Magnehelic) con la siguiente ecuacin:
Q Q2 ... Qn T
V m 1
1000
Donde:
50
P A 298
V s V m
760 273 t a
Donde:
V(s)= volumen total de la muestra a 25C y 760 mm Hg (m3).
V(m)= volumen total de flujo a condiciones ambientales (m3).
P(A)= presin ambiental (mm Hg).
t(a)= temperatura ambiental (C).
C A
A * V E
V i * V s
Donde:
C(A)= concentracin del analito en la muestra (g/m3).
A = cantidad calculada de material inyectado al cromatgrafo, basada en la curva de
calibracin para estndares inyectados (nanogramos).
V(i) = volumen inyectado del extracto (L).
V(E)= volumen final del extracto (mL).
V(s)= volumen total de la muestra de aire corregido a condiciones estndar (m3).
Determine la concentracin de compuestos individuales en la muestra.
Toxafeno Los clculos cuantitativos de toxafeno son difciles, pero una
exactitud razonable puede obtenerse. Para calcular la cantidad de toxafeno en
GC/ECD lleve a cabo los siguientes pasos: (a) ajuste el tamao de la muestra
tal que el pico mayor del toxafeno sea del 10 70% en la escala completa de
desviacin (FSD); (b) inyecte un estndar de toxafeno que se estime esta
dentro de +10 ng de la muestra; (c) usando la cuantificacin de los 5 picos
mayores o el rea total del patrn de toxafenos.
Para medir el rea total, construya la lnea de base del estndar de toxafeno
entre sus extremos y construya la lnea de base bajo la muestra, usando la
distancia de los picos a la lnea de base en el estndar como una gua. Este
procedimiento se hace difcil por el hecho de la altura y amplitud relativa de los
picos en la muestra probablemente no ser idntica a los estndares.
51
52
Concentracing / L C i
Volumen de muestra
53
54
Concentracing / Kg C i
Peso
de
muestra
g S*
F P
*
T 100
Donde:
g = gramos de muestra pasados por columna de florisil
S = muestra extrada (g)
P = el volumen del extracto de ter de petroleo en mL
F = volumen filtrado del extracto de acetonitrilo
100 = mL de ter de petrleo en los cuales los residuos fueron particionados.
T = volumen total (mL agua en muestra (buscar en tablas el % humedad del
alimento) + mL acetonitrilo aadido - la correccin en mL de la contraccin
del volumen)
Cuando se adicionan 50 mL de agua al acetonitrilo para la extraccin de
productos con alto contenido de azcar (3.1.3.3.5.3.1) el volumen total (T)
se incrementa en 45.
Para 25 g de huevo y 200 mL de acetonitrilo el valor del volumen total (T) es
215.
La concentracin final se obtiene:
55
Concentracing / Kg C i
Peso de muestra pasado x columna florisil
Peso
de
la
grasa
extrada
Concentracing / Kg C i
Peso de muestra pasado x columna florisil
57
Parmetro
Aldrin
Clordano
4,4-DDD
4,4-DDE
4,4-DDT
Dieldrin
Endrin
Endrin aldehdo
Heptacloro
Heptacloro epxido
Toxafeno
Hexaclorobenceno
NOTA: El lmite de deteccin del mtodo fue determinado a partir del anlisis
de 7 replicas de cada matriz procesada a travs del mtodo analtico
completo.
58
Concentracin en el
aire, ng/m3
0.3-3.0
0.6-6.0
1.8-18
15-150
% de recuperacin
2.0-20
0.2-2.0
0.2-2.0
0.2-2.0
0.2-2.0
0.2-2.0
62
36
86
94
92
86
28
89
83
73
59
Analito
Aldrin
Aldrin
alfa-clordano
gama-clordano
0.012
Clordano
0.14
Dieldrin
0.012
Endrin
0.063
Heptacloro
0.003
Heptacloroepxido
0.004
Hexaclorobenceno
0.002
Lindano
0.003
Cis-nonacloro
0.027
Trans-nonacloro
0.011
Toxafeno
NA
(a)
(b)
(c)
(d)
*
-
LDM (b)
g/L
0.075
0.007
0.006
1.0
Concentracin*
g/L
0.15
0.05
0.06
0.35
0.06
0.35
0.17
3.4
0.10
3.6
0.10
3.6
0.032
1.2
0.04
1.4
0.003
0.09
0.03
1.2
0.06
0.45
0.06
0.35
10
80
9.5
20.0
3.5
17.0
0.4
18.5
8.0
3.6
17.1
9.1
29.8
6.5
10.2
7.4
15.6
6.6
13.5
6.6
6.5
5.0
15.2
21.3
9.6
21.8
12.6
15.3
100
86
83
94
86
95
67
94
94
100
37
71
90
103
91
101
88
109
101
93
83
94
-
11.0
16.3
4.4
10.2
5.3
14.3
10.1
8.6
20.2
11.3
6.8
9.8
14.2
6.9
10.9
4.4
7.7
3.4
7.2
18.3
7.1
17.2
-
69
85
91
83
91
105
95
92
81
106
85
200
106
112
81
100
88
103
93
9
87
73
86
110
114
9.0
7.1
2.4
14.7
6.0
12.4
9.6
15.7
14.0
14.0
12.4
22.6
16.8
5.9
15.6
15.6
13.4
8.1
18.4
14.3
5.4
4.1
5.1
9.5
13.5
= No aplica. No se analiz por separado un juego de estndares acuosos, y el factor de respuesta para agua grado reactivo se
us para calcular una recuperacin para la matriz de agua corriente.
Datos corregidos por cantidades detectadas en el blanco, representan la media de 5-8 muestras.
MDL = g/L; calculado de multiplicar la desviacin estndar (S) por el valor de la t de Student apropiado para un nivel de
confianza de 99% y un estimado de desviacin estndar con n-1 grados de libertad.
R = Porcentaje de recuperacin promedio.
SR = Desviacin estndar sobre el porcentaje de recuperacin.
Se refiere a las concentraciones usadas para generar R y SR para las matrices de los tres tipos de agua, no para las
determinaciones de MDL.
No se realiz anlisis.
60
Hexaclorobenceno
Lindano
Heptacloro
Aldrin
Heptacloroepxido
Dieldrin
Endrin
Clordano
Toxafeno
Rango de trabajo
(g/L)
(0.01-0.37)
(0.04-1.39)
(0.04-1.41)
(0.04-1.42)
(0.04-1.42)
(0.10-7.53)
(0.10-7.50)
(0.51-50.90)
(5.63-70.40)
Exactitud como
recuperacin X
(g/L)
1.028C+0.00
1.009C+0.00
1.002C+0.02
1.066C+0.00
0.952C+0.00
1.027C+0.00
0.958C+0.01
1.037C+0.06
1.087C+0.24
Precisin de un
analista SR
(g/L)
0.108x+0.00
0.0577x+0.01
0.107x+0.01
0.031x+0.02
0.032x+0.02
0.091x+0.01
0.116x+0.01
0.084x+0.06
0.131x-0.031
Precisin total
(g/L)
0.227x+0.00
0.142x+0.00
0.211x+0.02
0.264x+0.00
0.129x+0.02
0.198x+0.02
0.136x+0.02
0.125x+0.19
0.269x+0.69
61
VALIDACIN DE MTODO
METODO FUENTE:
TECNICA:
PARMETRO
HEXACLOROBENCENO
EPA 8081A-1996
GC/ECD
LDM
METODO
FUENTE
INTERVALO DE TRABAJO
DEL MTODO ABC
VALIDADO
ug/L
ug/L
MATRIZ:
AGUA
CRITERIO DE
CRITERIO DE
PRECISION PRECISION EXACTITUD EXACTITUD
OBTENIDA DEL METODO OBTENIDA DEL METODO
FUENTE
FUENTE
LDM
OBTENIDO
LPC
METODO
ABC
ug/L
ug/L
ug/L
%R
%R
NE
0.0005
0.02
0.00006
0.0003
0.40
20.00
112.48
70-130
HEPTACLORO
0.56
0.0005
0.02
0.00005
0.0003
0.45
20.00
95.49
70-130
ALDRIN
0.83
0.0005
0.02
0.00007
0.0003
0.49
20.00
121.63
70-130
HEPTACLORO EPOXIDO
0.34
0.0005
0.02
0.00006
0.0003
0.50
20.00
100.58
70-130
4-4'-DDE
0.59
0.0005
0.02
0.00006
0.0003
0.59
20.00
108.45
70-130
DIELDRIN
0.49
0.0005
0.02
0.00008
0.0004
0.47
20.00
99.06
70-130
ENDRIN
0.82
0.0005
0.02
0.00008
0.0004
0.56
20.00
95.45
70-130
4-4'-DDD
0.85
0.0005
0.02
0.00005
0.0003
0.56
20.00
95.45
70-130
4-4'D-DDT
0.71
0.0005
0.02
0.00006
0.0003
0.70
20.00
92.33
70-130
ENDRIN ALDEHIDO
0.36
0.0005
0.02
0.0002
0.0008
1.63
20.00
101.65
70-130
CLORDANO
0.58
0.0005
0.02
0.0001
0.0005
0.55
20.00
96.89
70-130
TOXAFENO
0.1
0.05
1030
0.005
0.025
2.45
20.00
94.35
70-130
62
Aldrin
Alfa-Clordano
Gamma44-DDD
44-DDE
44-DDT
Dieldrin
Endrin
Aldehdo de Endrin
Heptacloro
Epxido de heptacloro
Toxafeno (MR)
LDM
Liquido
(g/L)
0.034
0.037
0.050
0.058
0.081
0.044
0.030
0.050
0.040
0.032
0.025
0.150
LDM
Slido
(g/Kg)
2.2
1.5
4.2
2.5
3.6
NA
2.1
1.6
2.0
2.1
1.7
9.5
LPC
Lquido
(g/L)
0.255
0.270
0.350
0.410
0.600
0.300
0.225
0.350
0.275
0.240
0.165
1.250
LPC
Slido
g/Kg
15.5
11.2
30.5
15.6
21.5
28.5
15.2
10.2
14.5
15.0
11.5
90.5
63
Compuesto
Heptacloro
Aldrin
Heptacloro epxido
Alfa-clordano
Gama-clordano
4,4-DDE
Dieldrin
Endrin
4,4-DDD
Endrin aldehdo
4,4-DDT
109.2 (92)
334.0 (15)
8818 (21)
824.3 (5.3)
653.1 (4.7)
4316 (37)
C
958.0 (8.4)
9516 (17)
824.3 (5.3)
653.1 (4.7)
7616(21)
C
8818 (21)
64
NOTA: Este mtodo est basado en su desempeo, se permite que el laboratorio omita cualquier
paso o modifique cualquier procedimiento, suponiendo que todos los requerimientos de
desempeo especificados se cumplan. Al laboratorio no se le permite omitir cualquier punto de
control de calidad, ni los parmetros que se especifiquen como NO MODIFICABLES. Los
trminos debe, puede y deber son mencionados a travs de los mtodos y estn destinados
a ilustrar la importancia de los procedimientos para producir datos verificables en los rangos de
trabajo del mtodo. El trmino debe es usado para indicar que los desarrolladores de este
mtodo encontraron ciertos procedimientos esenciales en muestras analizadas exitosamente; de
todas maneras, estos procedimientos pueden ser modificados u omitidos si el laboratorio puede
demostrar fehacientemente que la calidad de los resultados no resulta afectada.
PARMETROS NO MODIFICABLES
PCBs totales
Los congneres con los que se cuenten materiales de referencia y que puedan ser
separados adecuadamente por la columna cromatogrfica.
3.2.1.3 Matrices Este mtodo es aplicable para el anlisis de los PCBs mencionados en el
inciso anterior en las siguientes matrices ambientales:
Aire Ambiente
Suelos
Sedimentos Marinos
Sedimentos Epicontinentales
65
Aguas Marinas
Aguas Estaurinas y de Lagunas Costeras
Aguas Superficiales Epicontinentales
Aguas Subterrneas
Alimentos procesados, sin procesar, Organismos y Tejidos animales
Sangre
Leche Materna
3.2.1.4 Limitaciones Los lmites de deteccin en las muestras reales dependern de las
interferencias presentes en las mismas, por lo que es muy importante tener en cuenta que pueden
variar hasta en magnitudes de 10 a 1,000 veces (factores de concentracin de las muestras e
interferencias presentes en el extracto purificado).
Este mtodo est restringido para utilizarse slo bajo la supervisin de analistas expertos en el uso de
cromatografa de gases y en la interpretacin de sus resultados. Cada analista debe demostrar la
habilidad para generar resultados aceptables con este mtodo.
3.2.2 Resumen
AIRE AMBIENTE
Se utiliza un muestreador alto volumen modificado (Hi-Vol), con un filtro de fibra de vidrio y
un cartucho absorbente con espuma de poliuretano (PUF). El muestreo se lleva a cabo a
una flujo de ~ 200-280 L/min durante 24 h.
El filtro y el cartucho PUF se colocan en contenedores limpios y sellados, para luego
trasladarse al laboratorio para su anlisis. Los PCBs se recuperan por extraccin Soxhlet
con ter al 5% en hexano.
El volumen de los extractos se reduce con la tcnica Kuderna-Danish (K-D) y se someten a
una limpieza con cido sulfrico diseado especficamente para este tipo de anlisis.
Los extractos se someten a cromatografa de gases con detector selectivo de masas
(GC/MSD) en el modo SIM y SCAN simultneamente para la deteccin y cuantificacin de
PCBs totales y de los congneres calibrados.
Generalmente se alcanzan lmites de deteccin <1 ng/m3 con un periodo de muestreo de
24 horas.
AGUAS (Marinas, Costeras, Estaurinas, Lagunas Costeras, Superficiales Epicontinentales y
Subterraneas)
Este mtodo est diseado para muestras de agua sin contaminacin aparente (no aplica
para aguas residuales o aguas naturales altamente contaminadas con materia orgnica,
principalmente grasas y aceites).
Los analitos se extraen en 1 L de muestra a travs de una extraccin liquido-liquido. El
volumen de los extractos se reduce con la tcnica Kuderna-Danish (K-D). Los extractos
para el anlisis de PCBs se someten a una limpieza cida con cido sulfrico Se inyectan 2
L de fase orgnica al GC/MSD en modo SIM y SCAN simultneamente.
66
67
3.2.3.3 Matrices
3.2.3.3.1 Aire Ambiente
3.2.3.3.1.1 Equipo y Materiales
VER PARA PLAGUICIDAS CLORADOS
68
No. CAS
2051-60-7
16605-91-7
37680-65-2
16606-02-3
41464-39-5
35693-99-3
32598-10-0
38380-02-8
37680-73-2
38380-03-9
35065-28-2
52712-04-6
52663-63-5
35065-27-1
35065-30-6
35065-29-3
52663-69-1
52663-68-0
40186-72-9
# IUPAC
1
5
18
31
44
52
66
87
101
110
138
141
151
153
170
180
183
187
206
Estndares Internos
Se debe utilizar como estndar interno el decaclorobifenilo, adicionado en
cada muestra extrada antes del anlisis e incluido en cada estndar inicial
de calibracin.
Estndares surrogados
Cuando sean determinados los congneres de PCBs, se utiliza el
tetracloro-meta-xileno como un surrogado.
3.2.3.3.1.3 Procedimiento de Extraccin
69
3.2.3.3.3 Suelos
3.2.3.3.3.1 Equipo y Materiales
VER PARA PLAGUICIDAS CLORADOS
70
71
Hexano
ter etlico
Acetona
Hidrxido de potasio
Silica gel
Sulfato de sodio anhidro
Hidrxido de sodio 2% en metanol
3.2.3.3.6.3 Procedimiento de Extraccin
La muestra de sangre se centrifuga para separar el suero, este es aislado y congelado hasta su uso.
En un tubo de ensayo colocar 4 mL de metanol y 5 mL de suero, mezclar durante 4 minutos, agregar
5mL de una mezcla de hexano-ter etlico (1:1) agitar durante 15 minutos y centrifugar por 5 minutos
a 2000 rpm.
Transferir la fase superior a un tubo concentrador Kuderna-Danish y repetir los pasos anteriores dos
veces ms combinando los extractos en el concentrador.
Concentrar los extractos a 0,5mL bajo una corriente suave de nitrgeno, agregar 2mL de hidrxido de
potasio metanlico en al concentrador y agregar una piedra de ebullicin. Colocar una columna
Micro-Synder, llevar el contenido a ebullicin suave y reducir el volumen a 0,3 mL.
Dejar enfriar y agregar 2 mL de una mezcla metanol-agua (1:1), cuando llegue a temperatura
ambiente, agregar 2 mL de n-hexano, tapar y agitar el tubo vigorosamente.
74
75
No. CAS
2051-60-7
16605-91-7
37680-65-2
16606-02-3
41464-39-5
35693-99-3
32598-10-0
38380-02-8
37680-73-2
38380-03-9
35065-28-2
52712-04-6
52663-63-5
35065-27-1
35065-30-6
35065-29-3
52663-69-1
52663-68-0
40186-72-9
# IUPAC
1
5
18
31
44
52
66
87
101
110
138
141
151
153
170
180
183
187
206
Disolucin Patrn
Preparar a partir de 3.2.4.4.1.3 una mezcla de congneres de PCBs en una
concentracin de 10 mg/L, se deben incluir el decaclorobifenilo como estndar
interno y el tetracloro-m-xileno como surrogado. El disolvente es hexano..
Disolucin intermedia de 1 mg/L
A partir de la disolucin de 10 mg/L, tome 500 L con una microjeringa en un
matraz aforado de 5 mL y afore a la marca con hexano y agite para
homogenizar. Guarde la disolucin en viales de 2 mL.
76
Identificacin de la muestra
Nmero del lote analtico en el cual se analiz la muestra
Fecha del anlisis
Procedimiento cronolgico utilizado
Cantidad de muestra utilizada
Nmero de muestras de control de calidad analizadas en el lote
Trazabilidad de las calibraciones de los instrumentos de medicin
Registros de bitcoras, en cintas de respaldo o en otros respaldos de
informacin
Informacin cruda reportada por los equipos o por los analistas
Evidencia de la aceptacin o rechazo de los resultados del lote analtico.
3.2.4.5.1 Verificacin del equipo
3.2.4.5.1.1 Verificacin de la sintona del espectrmetro de masas
(Autotune)
Realice una autosintona (autotune y DFTPP tune), siguiendo las
actividades descritas en el instructivo de la calibracin del
espectrmetro de masas correspondiente. Esta es una autosintona
(autotune) que hace el instrumento con respecto a una sustancia de
referencia llamada Perfluorotributilamina PFTBA
Si no se cumple con las especificaciones siguientes, determine las
causas y corrija el problema, de acuerdo al instructivo de
mantenimiento preventivo del instrumento, documente las incidencias
y acciones correctivas e inclyalas en el expediente del sistema
GC/MS.
Especificaciones para el autotune
Masa
69
Especificacin
100%
78
51
68
< 2% DE LA MASA 69
70
< 2 % DE LA MASA 69
127
40 A 60 % DE LA MASA 198
197
198
199
5 A 9% DE LA MASA 198
275
10 A 30 % DE LA MASA 198
365
441
442
443
17 A 23 % DE LA MASA 442
79
CF
total de rea
masa inyectada en nanogramos
% RSD
SDCF
x100
CF
Donde:
SDCF= Desviacin estndar de los factores de calibracin
CF = Promedio de los factores de calibracin
La verificacin de la calibracin inicial puede tambin efectuarse mediante la
regresin por mnimos cuadrados, en la cual el criterio de aceptacin es que
el factor de correlacin "r2" sea mayor o igual a 0.997.
Si los criterios para el % RSD o r no se cumplen se procede a la revisin del
sistema cromatogrfico y la preparacin de las disoluciones de calibracin.
Posteriormente la curva de calibracin ser vigente, si el anlisis de un punto
intermedio de la curva no presenta una variacin de la concentracin mayor
al 15% y que ser calculada de la siguiente manera.
80
Diferencia de concentracin % D
CC CT
x100
CT
Donde
CC= concentracin calculada
CT= concentracin terica
O si se utiliza el factor de calibracin
Diferencia porcentual %
CFv CF
x100
CF
Donde:
CFv= Es el factor de calibracin de cada compuesto en el estndar de
verificacin.
CF = Es la media del factor de calibracin del compuesto de la calibracin
inicial.
Si el criterio de aceptacin para la diferencia porcentual es mayor al 15% se
proceder a la revisin del sistema cromatogrfico y a la preparacin de la
solucin estndar utilizada.
3.2.4.5.3 Verificacin de contaminacin de los reactivos.
Los blancos de reactivos no deben presentar ningn tipo de contaminante al
tiempo de retencin de los analitos, por lo que es importante que los
reactivos utilizados cumplan con las especificaciones mencionadas.
Si los resultados de los blancos no cumplen con el criterio mencionado, se debe
localizar la fuente de contaminacin y extraer y analizar nuevamente las muestras
asociadas al blanco contaminado
Use tambin los blancos de reactivos para verificar la contaminacin por arrastre de
muestras con altas concentraciones en anlisis secuenciales
3.2.4.5.4 Verificacin del lote analtico
Por cada lote analtico de muestras analice al menos una muestra sinttica
de control de calidad o preferentemente un material de referencia certificado
de la misma matriz de las muestras analizadas en el lote analtico, calcule el
% de recuperacin de cada analito y surrogados de la muestra control, los
cuales debern estar dentro del rango de 80 120 %R, de no ser as se debe
revisar la preparacin de la muestra control y el sistema cromatogrfico.
Realizar la correccin necesaria y reanalizar la muestra control, si el
problema persiste, se deben reanalizar todas las muestras del lote analtico.
81
DPR
C1 C 2 * 200
C1 C 2
Donde:
C1 Concentracin de la primera muestra
C2 concentracin de la segunda muestra (muestra duplicada)
La DPR de cada analito obtenido entre la muestra y la duplicada debe
ser:<20%
Si los valores no cumplen con los especificados, el sistema analtico est
fuera de control, determine las causas y corrija el problema, documente las
incidencias y acciones correctivas e inclyalas en el expediente del resultado
analtico.
Repita el anlisis del lote asociado con la muestra y la duplicada que provoc
que la prueba del DPR fallara.
3.2.4.5.6 Verificacin de la estabilidad de la curva de calibracin
En cada lote analizado, si ms de 20 muestras van a ser analizadas durante
el da, verifique la curva de calibracin analizando un estndar de
82
FC1 FC2
Diferencia porcentual
FC1
x100
Donde:
FC1 = Factor de calibracin promedio para cada plaguicida en la curva de
calibracin, o la concentracin nominal de del estndar de verificacin.
FC2 = Factor de calibracin promedio para cada plaguicida en el estndar de
concentracin media, o la concentracin calculada en el estndar de
verificacin.
El valor obtenido del % de la diferencia (%D) deber ser menor al 15%, de
no ser as verifique su vigencia, revis tambin el sistema cromatogrfico y
determine la causa de la falla y corrija, de no lograr corregir la falla, recalibre
nuevamente el sistema y en le caso de que la falla del estndar de
verificacin sea en un lote mayor de 20 muestras reanalice las 10 muestras
anteriores al estndar de verificacin que fall.
3.2.4.5.7 Verificacin de estndares surrogados.
Evale los datos de recobro de los surrogados de las muestras.
Calcule el % de recuperacin de los estndares surrugados en blancos,
muestras control, muestras adicionadas (si se realizaron), muestras
duplicadas (si se realizaron) y muestras reales, con la siguiente ecuacin:
Re cuperacin % R
C1
x100
C2
Donde:
C1=Concentracin calculada de surrugados en la
muestra.
C2=Concentracin nominal del surrugado adicionado a
la muestra.
El %R debe estar entre el 70 y el 130 % de recuperacin de no ser as
verifique la preparacin de la muestra que fallo y el sistema cromatogrfico,
determine la causa de la falla y corrija, de no encontrarla, repita la extraccin
de la muestra y vuelva a analizar si el %R esta fuera del rango de aceptacin
llene hoja de incidencia y reporte como interferencia de matriz y los
resultados obtenidos.
83
que corresponda al
84
85
Punto de verificacin
Criterio
Autotune
DFTTP tune
Puerto de inyeccin libre de suciedad y baja
degradacin
Punto de verificacin
Criterio
Menor al 15%
86
Punto de verificacin
Criterio
Blanco de reactivos
Punto de verificacin
Criterio
% de Recuperacin de 70 / 130
% de Recuperacin de 70 / 130
Punto de verificacin
Criterio
% de Recuperacin 70 / 130
Punto de verificacin
Criterio
3.2.4.6 Calibracin
Se necesitan al menos 5 estndares de calibracin. Uno debe contener analitos a una
concentracin cercana, pero superior a la del lmite prctico de cuantificacin para cada analito;
los otros deben estar a concentraciones que cubran el intervalo esperado en las muestras. Por
ejemplo, si el LDM es 0.01g/L y el LPC es de 0.05 g/L, se espera que la muestra contenga
concentraciones mayores de 0.05 g/L.
Una vez establecidas las condiciones de operacin inyecte un volumen adecuado (2 L) de cada estndar de
calibracin por triplicado y al final realice un promedio de las tres curvas y agrguelo a la tabla de
calibracin del mtodo.
Si la DSR de cada PCB es 20%, entonces la respuesta del instrumento es considerada lineal y el
factor de calibracin promedio FC puede utilizarse para la cuantificacin de los resultados de las
87
RF
As * Cis
Ais * Cs
Donde:
As = Respuesta para el analito que ser medido.
Ais = Respuesta del estndar interno.
Cis = Concentracin del estndar interno, g/L.
Cs = Concentracin del analito a ser medido, g/L.
Helio
100 C
5 min
10C/min
88
200C
15C/min
300C 1 min
250C
300C
splitless
50 mL/min
3 mL/min
89
Slido
Por ciento de
slidos
Muestras Monofsicas
Agua Potable
Agua subterrnea
<1
Aguas tratadas
Suelos seco
>20
Composta
Ejemplo
Fase
Cantidad
extrada
(3)
1000 mL
Solida
10 g
90
Tejidos
Cenizas
Solventes residuales
Aceites gastados
<1
Organic polymer
Peces
Humano adiposo
Muestras Multifsicas
Organica
10 g
Organica
10 g
1-30
Slida
10 g
1-100
Ambas
10 g
<1
Orgnica
10 g
>1
Orgnica
y slida
10 g
Liquida/Solida
Acuosa/Slida
Orgnica/slida
Suelos hmedo o
sedimentos
Efluentes no tratados
Lodos municipales
digeridos
Lodos tratados secos
Pulpa de papel
Lodos Industriales
Residuos Aceitosos
Liquida/Liquida
Acuosa/orgnica
Acuosa/slida/sl
ida
Efluentes de proceso
Efluentes no tratados
Residuos lquidos
orgnicos
Efluentes industriales no
tratados
Residuos industriales
1. La cantidad de muestra a extraer se debe ajustar para proporcionar 10 g de slidos en base seca o 1 litro acuoso.
2. En general, cuando los PCBs estn en contacto con sistemas multifsicos, en el cual una de las fases es acuosa, los PCBs se dispersarn
preferentemente en la fase orgnica debido a la baja solubilidad de los mismos.
3. Las muestras acuosas se deben filtrar despus de su adicin de surrogados o de haberla fortificado, el filtrado y los slidos se deben extraer
separadamente y los extractos combinados antes de su purificacin y anlisis.
91
TABLA 2
Nmero
IUPAC
1
5
12
28*
44
66*
110
118*
153
138
180
170
1016
X
X
X
X
1221
1232
1242
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
1248
X
X
X
X
X
1254
X
X
X
X
X
1260
X
X
X
X
X
X
X
92
No.
CAS
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
2051-60-7
2051-61-8
2051-62-9
13029-08-8
16605-91-7
25569-80-6
33284-50-3
34883-43-7
34883-39-1
33146-45-1
2050-67-1
2974-92-7
2974-90-5
34883-41-5
2050-68-2
38444-78-9
37680-66-3
37680-65-2
38444-73-4
38444-84-7
55702-46-0
38444-85-8
55720-44-0
55702-45-9
55712-37-3
38444-81-4
38444-76-7
7012-37-5
15862-07-4
35693-92-6
16606-02-3
38444-77-8
38444-86-9
37680-68-5
37680-69-6
38444-87-0
38444-90-5
53555-66-1
38444-88-1
38444-93-8
52663-59-9
36559-22-5
70362-46-8
41464-39-5
ANALOGO MARCADO
No.
CAS
C12-2-MoCB2
1L
234432-85-0
C12-4-MoCB2
13C12-2,2'-DiCB2
3L
4L
208263-77-8
234432-86-1
C12-2,5-DiCB4
9L
250694-89-4
C12-4,4'-DiCB2
15L
208263-67-6
C12-2,2',6-TrCB2
19L
234432-87-2
C12-2,4,4'-TriCB5
28L
208263-76-7
C12-3,4,4'-TrCB2
37L
208263-79-0
13
13
13
13
13
13
13
93
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
70362-45-7
41464-47-5
2437-79-8
70362-47-9
41464-40-8
62796-65-0
68194-04-7
35693-99-3
41464-41-9
15968-05-5
74338-24-2
41464-43-1
70424-67-8
41464-49-7
74472-33-6
33025-41-1
33284-53-6
54230-22-7
74472-34-7
52663-58-8
33284-54-7
32598-10-0
73575-53-8
73575-52-7
60233-24-1
32598-11-1
41464-46-4
41464-42-0
74338-23-1
32690-93-0
32598-12-2
70362-48-0
32598-13-3
70362-49-1
41464-48-6
33284-52-5
70362-50-4
52663-62-4
60145-20-2
52663-60-2
65510-45-4
55312-69-1
38380-02-8
55215-17-3
73575-57-2
68194-07-0
68194-05-8
52663-61-3
73575-56-1
13
C12-2,2',5,5'-TeCB4
52L
208263-80-3
13
C12-2,2',6,6'-TeCB2
54L
234432-88-3
C12-3,3',4,4'-TeCB2,7
77L
105600-23-5
C12-3,4,4',5-TeCB7
81L
208461-24-9
13
13
94
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
73575-55-0
38379-99-6
73575-54-9
41464-51-1
60233-25-2
38380-01-7
39485-83-1
37680-73-2
68194-06-9
60145-21-3
56558-16-8
32598-14-4
70424-69-0
70424-68-9
70362-41-3
74472-35-8
38380-03-9
2,3,3',5,5'-PeCB
111 39635-32-0
2,3,3',5,6-PeCB
2,3,3',5',6-PeCB
112 74472-36-9
113 68194-10-5
2,3,4,4',5-PeCB6
114 74472-37-0
2,3,4,4',6-PeCB
2,3,4,5,6-PeCB
2,3,4',5,6-PeCB
115 74472-38-1
116 18259-05-7
117 68194-11-6
2,3',4,4',5-PeCB3,6
118 31508-00-6
2,3',4,4',6-PeCB
2,3',4,5,5'-PeCB
2,3',4,5,'6-PeCB
2',3,3',4,5-PeCB
2',3,4,4',5-PeCB6
2',3,4,5,5'-PeCB
2',3,4,5,6'-PeCB
3,3',4,4',5-PeCB3,6
3,3',4,5,5'-PeCB
2,2',3,3',4,4'-HxCB3
2,2',3,3',4,5-HxCB
2,2',3,3',4,5'-HxCB
2,2',3,3',4,6-HxCB
2,2',3,3',4,6'-HxCB
2,2',3,3',5,5'-HxCB
2,2',3,3',5,6-HxCB
2,2',3,3',5,6'-HxCB
2,2',3,3',6,6'-HxCB
2,2',3,4,4',5-HxCB
2,2',3,4,4',5'-HxCB3
2,2',3,4,4',6-HxCB
2,2',3,4,4',6'-HxCB
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
56558-17-9
68194-12-7
56558-18-0
76842-07-4
65510-44-3
70424-70-3
74472-39-2
57465-28-8
39635-33-1
38380-07-3
55215-18-4
52663-66-8
61798-70-7
38380-05-1
35694-04-3
52704-70-8
52744-13-5
38411-22-2
35694-06-5
35065-28-2
56030-56-9
59291-64-4
13
C12-2,2',4,5,5'-PeCB4
101L
104130-39-4
13
13
C12-2,2',4,6,6'-PeCB2
C12-2,3,3',4,4'-PeCB7
104L
105L
234432-89-4
208263-62-1
13
C12-2,3,3',5,5'-PeCB5
111
L
235416-29-2
C12-2,3,4,4',5-PeCB7
114
L
208263-63-2
13
C12-2,3',4,4',5-PeCB7
118
L
104130-40-7
13
C12-2',3,4,4',5-PeCB7
123L
208263-64-3
C12-3,3',4,4',5-PeCB2,7
126L
208263-65-4
C12-2,2',3,4,4',5'-HxCB4
138L
208263-66-5
13
13
13
95
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
52712-04-6
41411-61-4
68194-15-0
68194-14-9
74472-40-5
51908-16-8
68194-13-8
74472-41-6
38380-04-0
68194-08-1
52663-63-5
68194-09-2
35065-27-1
60145-22-4
33979-03-2
38380-08-4
69782-90-7
74472-42-7
39635-35-3
41411-62-5
74472-43-8
39635-34-2
74472-44-9
74472-45-0
74472-46-1
41411-63-6
52663-72-6
59291-65-5
32774-16-6
35065-30-6
52663-71-5
52663-74-8
68194-16-1
38411-25-5
40186-70-7
52663-65-7
52663-70-4
52663-67-9
52663-64-6
35065-29-3
74472-47-2
60145-23-5
52663-69-1
74472-48-3
52712-05-7
74472-49-4
52663-68-0
74487-85-7
39635-31-9
C12-2,2',4,4',6,6'-HxCB2
C12-2,3,3',4,4',5-HxCB7
13C12-2,3,3',4,4',5'-HxCB7
155L
156L
157L
234432-90-7
208263-68-7
235416-30-5
C12-2,3',4,4',5,5'-HxCB7
167L
208263-69-8
C12-3,3',4,4',5,5'-HxCB2,7
13C12-2,2',3,3',4,4',5-HpCB
169L
170L
208263-70-1
160901-80-4
C12-2,2',3,3',5,5',6-HpCB5
178L
232919-67-4
C12-2,2',3,4,4',5,5'-HpCB
180L
160901-82-6
188L
189L
234432-91-8
208263-73-4
13
13
13
13
13
13
C12-2,2',3,4',5,6,6'-HpCB2
13C12-2,3,3',4,4',5,5'-HpCB2,7
13
96
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
203
204
205
41411-64-7
74472-50-7
74472-51-8
69782-91-8
35694-08-7
52663-78-2
42740-50-1
33091-17-7
68194-17-2
52663-75-9
52663-73-7
40186-71-8
2136-99-4
52663-76-0
74472-52-9
74472-53-0
2,2',3,3',4,4',5,5',6-NoCB3
206 40186-72-9
2,2',3,3',4,4',5,6,6'-NoCB
207 52663-79-3
2,2',3,3',4,5,5',6,6'-NoCB
208 52663-77-1
DeCB3
209
2051-24-3
13
C12-2,2',3,3',4,4',5,5'-OcCB4 194L
208263-74-5
13
C12-2,2',3,3',5,5',6,6'-OcCB2 202L
105600-26-8
C12-2,3,3',4,4',5,5',6-OcCB2 205L
13C12-2,2',3,3',4,4',5,5',6206L
NoCB2
234446-64-1
13
13
C12-2,2',3,3',4,5,5',6,6'NoCB2
C12-DeCB2
208263-75-6
208L
234432-92-9
209L
105600-27-9
97
E2
M-1668A-5
1
3
4
15
19
16
37
54
43
44
74
56
77
104
98
98
187
185
181
192
197
199
203
83
54
15
28
1. Congneres presentes en cada solucin estndar se listan en orden de elusin para cada nivel de cloracin identificada
por su nmero IUPAC.
99
Congnere No.
IUPAC
1
5
31
52
44
66
81
77
101
87
110
118
114
105
126
151
141
138
167
156
183
180
170
206
100
NOTA: Este mtodo est basado en su desempeo, se permite que el laboratorio omita cualquier
paso o modifique cualquier procedimiento, suponiendo que todos los requerimientos de
desempeo especificados se cumplan. Al laboratorio no se le permite omitir cualquier punto de
control de calidad, ni los parmetros que se especifiquen como NO MODIFICABLES. Los
trminos debe, puede y deber son mencionados a travs de los mtodos y estn destinados
a ilustrar la importancia de los procedimientos para producir datos verificables en los rangos de
trabajo del mtodo. El trmino debe es usado para indicar que los desarrolladores de este
mtodo encontraron ciertos procedimientos esenciales en muestras analizadas exitosamente; de
todas maneras, estos procedimientos pueden ser modificados u omitidos si el laboratorio puede
demostrar fehacientemente que la calidad de los resultados no resulta afectada.
PARMETROS NO MODIFICABLES
Acenafteno
Acenaftileno
Antraceno
Benzo(a)antraceno
Benzo(a)pireno
Benzo(b)fluoranteno
Benzo(ghi)perileno
Benzo(k)fluoranteno
Criseno
Dibenzo(a,h)antraceno
Fenantreno
101
Fluoranteno
Fluoreno
Indeno(1,2,3-cd)pireno
Naftaleno
Pireno
Clordecone
Pentaclorobenceno
Aire Ambiente
Suelos
Sedimentos Marinos
Sedimentos Epicontinentales
Aguas Marinas
Aguas Estaurinas y de Lagunas Costeras
Aguas Superficiales Epicontinentales
Aguas Subterrneas
Alimentos procesados, sin procesar, organismos y tejidos animales
Sangre
Leche Materna
3.3.1.4 Limitaciones Los lmites de deteccin en las muestras reales dependern de las
interferencias presentes en las mismas, por lo que es muy importante tener en cuenta que pueden
variar hasta en magnitudes de 10 a 1,000 veces (factores de concentracin de las muestras e
interferencias presentes en el extracto purificado).
Este mtodo est restringido para utilizarse slo bajo la supervisin de analistas expertos en el uso de
cromatografa de gases y en la interpretacin de sus resultados. Cada analista debe demostrar la
habilidad para generar resultados aceptables con este mtodo.
3.3.2 Resumen
AIRE AMBIENTE
Se utiliza un muestreador alto volumen modificado (Hi-Vol), con un filtro de fibra de vidrio y
un cartucho absorbente con espuma de poliuretano (PUF). El muestreo se lleva a cabo a
una flujo de ~ 200-280 L/min durante 24 h.
El filtro y el cartucho PUF se colocan en contenedores limpios y sellados, para luego
trasladarse al laboratorio para su anlisis. Los HPAs se recuperan por extraccin Soxhlet
con ter al 5% en hexano.
El volumen de los extractos se reduce con la tcnica Kuderna-Danish (K-D) y se someten a
una limpieza con cido sulfrico diseado especficamente para este tipo de anlisis.
Los extractos se someten a cromatografa de gases con detector selectivo de masas
(GC/MSD) en el modo SIM y SCAN simultneamente para la deteccin y cuantificacin de
HPAs, Clordecone y Pentaclorobenceno.
102
103
104
3.3.3.3 Matrices
3.3.3.3.1 Aire Ambiente
3.3.3.3.1.1Equipo y Materiales
3.3.3.3.1.1.1 Equipos
VER PARA PLAGUICIDAS CLORADOS
3.3.3.3.1.2 Reactivos y Materiales de Referencia
3.3.3.3.1.2.1 Reactivos
Silica Gel malla 100/120 (Davison Chemical grado 923 o equivalente),
active la slica gel durante 16 horas a 130C antes de su uso.
Ciclohexano grado pesticida o equivalente
Pentano grado pesticida o equivalente
VER PARA PLAGUICIDAS CLORADOS
CAS
83-32-9
208-96-8
120-12-7
56-55-3
50-32-8
105
200-99-2
191-24-2
207-08-9
218-01-9
53-70-3
85-07-8
206-44-0
86-73-7
193-39-5
91-20-3
129-00-0
608-93-5
143-50-0
Estndares internos
Estndares surrogados
106
3.3.3.3.3 Suelos
3.3.3.3.3.1 Equipo y Materiales
VER PARA AIRE AMBIENTE Y PLAGUICIDAD CLORADOS
109
111
112
113
Identificacin de la muestra
Nmero del lote analtico en el cual se analiz la muestra
Fecha del anlisis
Procedimiento cronolgico utilizado
Cantidad de muestra utilizada
Nmero de muestras de control de calidad analizadas en el lote
115
Especificacin
100%
30% respecto a la masa 69
1% respecto a la mas 69
51
68
< 2% DE LA MASA 69
70
< 2 % DE LA MASA 69
127
40 A 60 % DE LA MASA 198
197
198
116
5 A 9% DE LA MASA 198
275
10 A 30 % DE LA MASA 198
365
441
442
443
17 A 23 % DE LA MASA 442
117
CF
Total de rea
Masa inyectada en nanogramos
% RSD
SDCF
x100
CF
Donde:
SDCF= Desviacin estndar de los factores de calibracin
CF = Promedio de los factores de calibracin
La verificacin de la calibracin inicial puede tambin efectuarse mediante la regresin por
mnimos cuadrados, en la cual el criterio de aceptacin es que el factor de correlacin "r 2"
sea mayor o igual a 0.997.
Si los criterios para el % RSD o r no se cumplen se procede a la revisin del sistema
cromatogrfico y la preparacin de las disoluciones de calibracin.
Posteriormente la curva de calibracin ser vigente, si el anlisis de un punto intermedio de
la curva no presenta una variacin de la concentracin mayor al 15% y que ser calculada
de la siguiente manera.
Diferencia de concentraciones % D
CC CT
x100
CT
Donde
CC= concentracin calculada
CT= concentracin terica
O si se utiliza el factor de calibracin
Diferencia porcentual %
CFv CF
x100
CF
Donde:
CFv= Es el factor de calibracin de cada compuesto en el estndar de
verificacin.
CF = Es la media del factor de calibracin del compuesto de la calibracin
inicial.
Si el criterio de aceptacin para la diferencia porcentual es mayor al 15% se proceder a la
revisin del sistema cromatogrfico y a la preparacin de la solucin estndar utilizada.
3.3.4.5.3 Verificacin de contaminacin de los reactivos.
Los blancos de reactivos no deben presentar ningn tipo de contaminante al tiempo de
retencin de los analitos medidos, por lo que es importante que los reactivos utilizados
cumplan con las especificaciones mencionadas.
Si los resultados de los blancos no cumplen con el criterio mencionado, se debe localizar la fuente de
118
DPR
C1 C 2
x 200
C1 C 2
Donde:
C1= Concentracin de la primera muestra
C2= Concentracin de la segunda muestra (muestra duplicada)
La DPR de cada analito obtenido entre la muestra y la duplicada debe ser: <20%
119
Diferencia porcentual
FC1 FC2
FC1
x100
Donde:
FC1 = Factor de calibracin promedio para cada plaguicida en la curva de
calibracin, o la concentracin nominal de del estndar de verificacin.
FC2 = Factor de calibracin promedio para cada plaguicida en el estndar de
concentracin media, o la concentracin calculada en el estndar de
verificacin.
El valor obtenido del % de la diferencia (%D) deber ser menor al 15%, de no ser as
verifique su vigencia, revis tambin el sistema cromatogrfico y determine la causa de la
falla y corrija, de no lograr corregir la falla, recalibre nuevamente el sistema y en le caso de
que la falla del estndar de verificacin sea en un lote mayor de 20 muestras reanalice las
10 muestras anteriores al estndar de verificacin que fall.
3.3.4.5.7 Verificacin de estndares surrogados.
Evale los datos de recobro de los surrogados de las muestras.
Calcule el % de recuperacin de los estndares surrugados en blancos, muestras control,
muestras adicionadas (si se realizaron), muestras duplicadas (si se realizaron) y muestras
reales, con la siguiente ecuacin:
Re cuperacn % R
C1
x100
C2
Donde:
C1=Concentracin calculada de surrugados en la muestra.
C2=Concentracin nominal del surrugado adicionado a la muestra.
El %R debe estar entre el 70 y el 130 % de recuperacin de no ser as verifique la
preparacin de la muestra que fallo y el sistema cromatogrfico, determine la causa de la
120
121
1
2
122
Punto de verificacin
Criterio
Autotune
DFTTP tune
Puerto de inyeccin libre de suciedad y baja
degradacin
Punto de verificacin
Criterio
Menor al 15%
Punto de verificacin
Criterio
Blanco de reactivos
123
Criterio
% de Recuperacin de 70 / 130
% de Recuperacin de 70 / 130
Punto de verificacin
Criterio
% de Recuperacin 70 / 130
Punto de verificacin
Criterio
3.3.4.6 Calibracin
Se necesitan al menos 5 estndares de calibracin. Uno debe contener analitos a una
concentracin cercana, pero superior a la del lmite prctico de cuantificacin para cada analito;
los otros deben estar a concentraciones que cubran el intervalo esperado en las muestras. Por
ejemplo, si el LDM es 0.01g/L y el LPC es de 0.05 g/L, se espera que la muestra contenga
concentraciones mayores de 0.05 g/L.
Una vez establecidas las condiciones de operacin inyecte un volumen adecuado (2 L) de cada estndar de
calibracin por triplicado y al final realice un promedio de las tres curvas y agrguelo a la tabla de
calibracin del mtodo.
Si la DSR de cada HAP es 20%, entonces la respuesta del instrumento es considerada lineal y el
factor de calibracin promedio FC puede utilizarse para la cuantificacin de los resultados de las
muestras. Si la DSR es mayor que 20%, entonces no puede asumirse linealidad y se debe repetir la
curva de calibracin.
Si se utiliza regresin lineal por mnimos cuadrados, deber obtener el factor de correlacin r2 para
cada analito, el cual deber ser mayor o igual a 0.997 si r es menor a este valor, la curva de
calibracin no es lineal y deber verificarse la preparacin de los estndares de calibracin y el
sistema cromatogrfico y repetir la calibracin.
3.3.4.6.1 Calibracin por Estndar Interno:
El analista debe seleccionar uno o ms estndares internos que sean similares en
comportamiento analtico a los compuestos de inters. El analista debe adems
demostrar que la medicin del estndar interno no es afectada por el mtodo o
interferencias de la matriz.
124
RF
As * Cis
Ais * Cs
Donde:
As = Respuesta para el analito que ser medido.
Ais = Respuesta del estndar interno.
Cis = Concentracin del estndar interno, g/L.
Cs = Concentracin del analito a ser medido, g/L.
Si el valor RF sobre el rango de trabajo es constante (< 20% RSD), el RF puede
usarse para clculos. Alternativamente, los resultados pueden usarse para graficar una
curva de calibracin de la relacin de respuesta, As/Ais contra RF.
3.3.4.7 Procedimiento Analtico
3.3.4.7.1 Anlisis de los extractos de las muestras
Condiciones cromatogrficas:
Gas acarreador
Temperatura inicial
Tiempo inicial
Programa 1
Temperatura final 1
Programa 2
Temperatura final 2
Temperatura del inyector
Temperatura del detector
Modo splitless
Flujo de split
Purga de septa
Helio
50 C
3 min
8C/min
180C
15C/min
300C 6 minutos
250C
300C
0.3 min
20 mL/min
2 mL/min
125
126
127
TABLA 1
MASAS DE LOS IONES PRIMARIOS Y SECUNDARIOS DE LOS
COMPUESTOS ANALIZADOS
Parmetro
Iones secundarios
del espectro de
masas (SIM)
Naftaleno d-5
Naftaleno
Acenafteno d-10
2-Fluorobifenilo
Acenaftileno
Acenafteno
Fluoreno
Fenantreno d-10
Fenantreno
Antraceno
Fluoranteno
Criseno d-10
Pireno
p-Terfenilo d-14
Benzo (a) antraceno
Criseno
Pireno d-12
Benzo (b) fluoranteno
Benzo (k) fluoranteno
Benzo (a) pireno
Indeno (1, 2, 3cd)pireno
Dibenzo (a, h) perileno
Benzo (g, h, i) perileno
136
128
164
172
152
153
166
188
178
178
202
240
202
244
228
228
264
252
252
252
276
278
276
108,54
129,127
162,160
171,170
151,153
154,152
165
187,184
176,179
176,179
200,203
236,120
200,203
243,245
226,229
226,229
260,132
250,253
250,253
250,253
138,277
276,279
138,277
128
129
VALIDACIN DE MTODO
METODO FUENTE:
TECNICA:
HRGC/MS
PARMETRO
Unidades
INTERVALO
LDM
DE TRABAJO
METODO
DEL MTODO
FUENTE
ABC
****
VALIDADO
LDM
OBTENIDO
LDM
METODO
ABC
VALIDADO
LPC
METODO
ABC
VALIDADO
g/L
CRITERIO DE
CRITERIO DE
PRECISION PRECISION EXACTITUD EXACTITUD
OBTENIDA DEL METODO OBTENIDA DEL METODO
FUENTE
FUENTE
g/L
g/L
g/L
Naftaleno
1.0
0.1-25
0.025
0.025
0.074
2.18
<20
%R
97.54
70-130
%R
Acenaftileno
1.0
0.1-25
0.017
0.017
0.052
2.64
<20
104.57
70-130
Acenafteno
1.0
0.1-25
0.011
0.011
0.033
3.36
<20
102.18
70-130
Fluoreno
1.0
0.1-25
0.015
0.015
0.046
2.00
<20
104.88
70-130
Fenantreno
1.0
0.1-25
0.014
0.014
0.042
2.78
<20
100.16
70-130
Antraceno
1.0
0.1-25
0.013
0.013
0.038
2.50
<20
97.95
70-130
Fluoranteno
1.0
0.25-25
0.012
0.012
0.036
3.14
<20
95.99
70-130
Pireno
1.0
0.25-25
0.023
0.023
0.069
2.39
<20
101.95
70-130
Benzo(a)antraceno
1.0
0.1-25
0.028
0.028
0.085
4.02
<20
98.29
70-130
Criseno
1.0
0.25-25
0.024
0.024
0.072
3.15
<20
100.19
70-130
Benzo(b)fluoranteno
1.0
0.1-25
0.025
0.025
0.076
2.11
<20
108.34
70-130
Benzo(k)fluoranteno
1.0
0.25-25
0.020
0.020
0.059
2.87
<20
105.45
70-130
Benzo(a)pireno
1.0
0.1-25
0.027
0.027
0.080
1.10
<20
108.44
70-130
Indeno(1,2,3cd)pireno
1.0
0.25-25
0.020
0.020
0.061
3.53
<20
102.01
70-130
Dibenzo(a,h)antraceno
1.0
0.25-25
0.016
0.016
0.047
3.21
<20
107.43
70-130
Benzo(g,h,i)perileno
1.0
0.25-25
0.014
0.014
0.042
2.28
<20
106.53
70-130
130
VALIDACIN DE MTODO
METODO FUENTE:
TECNICA:
GC/MS
PARMETRO
Unidades
MATRIZ:
INTERVALO
DE TRABAJO
DEL MTODO
VALIDADO
LDM
OBTENIDO
LPC
METODO
ABC
VALIDADO
m g/Kg
SUELO
CRITERIO DE
CRITERIO DE
PRECISION PRECISION EXACTITUD EXACTITUD
OBTENIDA DEL METODO OBTENIDA DEL METODO
FUENTE
FUENTE
m g/Kg
m g/Kg
Naftaleno
0.02-5
0.0049
0.015
2.18
<20
%R
97.54
70-130
%R
Acenaftileno
0.02-5
0.0035
0.010
2.64
<20
104.57
70-130
Acenafteno
0.02-5
0.0022
0.007
3.36
<20
102.18
70-130
4-Nitrofenol
0.05-5
0.0056
0.017
1.68
<20
107.71
70-130
Fluoreno
0.02-5
0.0031
0.009
2.00
<20
104.88
70-130
Fenantreno
0.02-5
0.0028
0.008
2.78
<20
100.16
70-130
Antraceno
0.02-5
0.0026
0.008
2.50
<20
97.95
70-130
Fluoranteno
0.05-5
0.0024
0.007
3.14
<20
95.99
70-130
Pireno
0.05-5
0.0046
0.014
2.39
<20
101.95
70-130
Bencidina
0.05-5
0.0091
0.027
3.19
<20
100.19
70-130
Benzo(a)antraceno
0.02-5
0.0057
0.017
4.02
<20
98.29
70-130
Criseno
0.05-5
0.0048
0.014
3.15
<20
100.19
70-130
Benzo(b)fluoranteno
0.02-5
0.0050
0.015
2.11
<20
108.34
70-130
Benzo(k)fluoranteno
0.05-5
0.0039
0.012
2.87
<20
105.45
70-130
Benzo(a)pireno
0.02-5
0.0054
0.016
1.10
<20
108.44
70-130
Indeno(1,2,3cd)pireno
0.05-5
0.0041
0.012
3.53
<20
102.01
70-130
Dibenzo(a,h)antraceno
0.05-5
0.0031
0.009
3.21
<20
107.43
70-130
Benzo(g,h,i)perileno
0.05-5
0.0028
0.008
2.28
<20
106.53
70-130
131
NOTA: Este mtodo est basado en su desempeo, se permite que el laboratorio omita cualquier
paso o modifique cualquier procedimiento, suponiendo que todos los requerimientos de
desempeo especificados se cumplan. Al laboratorio no se le permite omitir cualquier punto de
control de calidad, ni los parmetros que se especifiquen como NO MODIFICABLES. Los
trminos debe, puede y deber son mencionados a travs de los mtodos y estn destinados
a ilustrar la importancia de los procedimientos para producir datos verificables en los rangos de
trabajo del mtodo. El trmino debe es usado para indicar que los desarrolladores de este
mtodo encontraron ciertos procedimientos esenciales en muestras analizadas exitosamente; de
todas maneras, estos procedimientos pueden ser modificados u omitidos si el laboratorio puede
demostrar fehacientemente que la calidad de los resultados no resulta afectada.
PARMETROS NO MODIFICABLES
2,2,4,4,5,5-Hexabromobifenil
2,2',4,4'-Tetrabromobifenil ter (PBDE 47)
2,2',4,4',5-Pentabromobifenil ter (PBDE 99)
2,2',4,4',5,5'-Hexabromobifenil ter (PBDE 153)
2,2',4,4',5,6'-Hexabromobifenil ter (PBDE 154)
2,2',3,3',4,5',6-Heptabromobifenil ter (PBDE 175)
132
Aguas Marinas
Aguas Estaurinas y de Lagunas Costeras
Aguas Superficiales Epicontinentales
Aguas Subterrneas
Suelos
Sedimentos Marinos
Sedimentos Epicontinentales
Alimentos procesados, sin procesar, Organismos y Tejidos animales
3.4.1.4 Limitaciones
Los lmites de deteccin en las muestras reales dependern de las interferencias presentes en las
mismas, por lo que es muy importante tener en cuenta que pueden variar hasta en magnitudes de 10 a
1,000 veces (factores de concentracin de las muestras e interferencias presentes en el extracto
purificado).
Este mtodo est restringido para utilizarse slo bajo la supervisin de analistas expertos en el uso de
cromatografa de gases y en la interpretacin de sus resultados. Cada analista debe demostrar la
habilidad para generar resultados aceptables con este mtodo.
3.4.2 Resumen
AGUAS (Marinas, Costeras, Estaurinas, Lagunas Costeras, Superficiales Epicontinentales
y Subterrneas)
Este mtodo est diseado para muestras de agua sin contaminacin aparente (no
aplica para aguas residuales o aguas naturales altamente contaminadas con materia
orgnica, principalmente grasas y aceites).
Los analitos se extraen en 1 L de muestra a travs de una extraccin liquido-liquido. El
volumen de los extractos se reduce con la tcnica Kuderna-Danish (K-D). Los extractos
para el anlisis de PBBs y PBDEs se someten a una limpieza cida con cido sulfrico
Se inyectan 2 L de fase orgnica al GC/MSD en modo SIM y SCAN simultneamente.
El tiempo total del anlisis es de 30 a 50 minutos por muestra, dependiendo de los
analitos y las condiciones analticas que se escojan.
Los lmites de deteccin del mtodo se encuentran entre 0.005 a 0.01 g/L.
SUELOS Y SEDIMENTOS
Aproximadamente de 10 g de muestra se extraen con cloruro de metileno-acetona (1:1)
con ayuda un brazo ultrasnico. Distintos procedimientos de limpieza pueden aplicarse
al extracto, dependiendo de la naturaleza de las interferencias de la matriz coextraida y
de los analitos. Despus de la limpieza, el extracto se analiza inyectando una alcuota de
2 L en el GC/MSD en modo SIM y SCAN simultneamente.
133
134
3.4.3.3 Matrices
3.4.3.3.1 Aguas (marinas, estaurinas y de lagunas costeras, superficiales
epicontinentales y subterrneas)
3.4.3.3.1.1 Equipo y Materiales
VER PARA PCBs
3.4.3.3.1.2 Reactivos y Materiales de Referencia
3.4.3.3.1.2.1 Reactivos
VER PARA PCBs
3.4.3.3.1.2.2 Materiales de referencia
Estndares de calibracin
Estndares puros o en disolucin certificados de:
Compuestos
2,2,4,4,5,5-Hexabromobifenil
2,2',4,4'-Tetrabromobifenil ter
2,2',4,4',5-Pentabromobifenil ter
2,2',4,4',5,5'-Hexabromobifenil ter
2,2',4,4',5,6'-Hexabromobifenil ter
2,2',3,3',4,5',6-Heptabromobifenil ter
2,2',3,4,4',5',6-Heptabromobifenil ter
No. CAS
36355-01-8
5436-43-1
60348-60-9
68631-49-2
207122-15-4
446255-22-7
207122-16-5
# IUPAC
PBDE 47
PBDE 99
PBDE 153
PBDE 154
PBDE 175
PBDE 183
Estndares internos
Se debe utilizar como estndar interno el criseno-d12, adicionado en cada
muestra extrada antes del anlisis e incluido en cada estndar inicial de
calibracin.
135
3.4.3.3.2 Suelos
3.4.3.3.2.1 Equipo y Materiales
VER PARA PCBs
136
137
3.4.4 MTODO
INSTRUMENTAL
DE
IDENTIFICACIN
CUANTIFICACIN
3.4.4.3.1 Equipo
138
139
Compuestos
2,2,4,4,5,5-Hexabromobifenil
2,2',4,4'-Tetrabromobifenil ter
2,2',4,4',5-Pentabromobifenil ter
2,2',4,4',5,5'-Hexabromobifenil ter
2,2',4,4',5,6'-Hexabromobifenil ter
2,2',3,3',4,5',6-Heptabromobifenil ter
2,2',3,4,4',5',6-Heptabromobifenil ter
No. CAS
36355-01-8
5436-43-1
60348-60-9
68631-49-2
207122-15-4
446255-22-7
207122-16-5
# IUPAC
PBDE 47
PBDE 99
PBDE 153
PBDE 154
PBDE 175
PBDE 183
Disolucin Patrn
Preparar a partir de 3.2.4.4.1.3 una mezcla de Hexabromobifenilo, Tetra,
penta, hexa y heptabromobifenilo ter
en una concentracin de 10 mg/L, se deben incluir el criseno-d12 como estndar
interno y el perileno-d12 como surrogado. El disolvente es hexano.
Disolucin intermedia de 1 mg/L
A partir de la disolucin de 10 mg/L, tome 500 L con una microjeringa en un
matraz aforado de 5 mL y afore a la marca con hexano y agite para
homogenizar. Guarde la disolucin en viales de 2 mL.
Disoluciones de calibracin
Prepare 5 niveles como mnimo de diferente concentracin de las
disoluciones estndar para cada analito de inters en matraces volumtricos.
El punto de concentracin ms bajo de la curva de calibracin debe ser 3 a 10
veces mayor que el valor del LDM. Las otras concentraciones corresponden
al intervalo esperado de las concentraciones encontradas en las muestras
reales o bien estarn definidas por el intervalo lineal del detector.
Estndar de calibracin de 0,05 mg/L. En un matraz aforado de 1 mL ponga
50 L de la solucin de 1 mg/L y afore a la marca con Hexano. Guarde esta
disolucin en viales de 2 ml y rotule con etiqueta que contenga mtodo, fecha
de preparacin, concentracin, solvente utilizado, persona que lo prepar
Estndar de calibracin de 0,1 mg/L. En un matraz de 1 ml ponga 100 L de
la solucin de 1 mg/L y afore a la marca con Hexano. Guarde esta disolucin
en viales de 2 ml y etiquete.
140
141
Identificacin de la muestra
Nmero del lote analtico en el cual se analiz la muestra
Fecha del anlisis
Procedimiento cronolgico utilizado
Cantidad de muestra utilizada
Nmero de muestras de control de calidad analizadas en el lote
Trazabilidad de las calibraciones de los instrumentos de medicin
Registros de bitcoras, en cintas de respaldo o en otros respaldos de
informacin
Informacin cruda reportada por los equipos o por los analistas
Evidencia de la aceptacin o rechazo de los resultados del lote analtico.
3.4.4.5.1 Verificacin del equipo
3.4.4.5.1.1 Verificacin de la sintona del espectrmetro de masas
(Autotune)
Realice una autosintona (autotune y DFTPP tune), siguiendo las
actividades descritas en el instructivo de la calibracin del espectrmetro de
masas correspondiente. Esta es una autosintona (autotune) que hace el
instrumento con respecto a una sustancia de referencia llamada
Perfluorotributilamina PFTBA
Si no se cumple con las especificaciones siguientes, determine las causas y
corrija el problema de acuerdo al instructivo de mantenimiento preventivo del
instrumento, documente las incidencias y acciones correctivas e inclyalas
en el expediente del sistema GC/MS.
Especificaciones para el autotune
Masa
69
219
502
Especificacin
100%
30% respecto a la masa 69
1% respecto a la mas 69
51
68
< 2% DE LA MASA 69
70
< 2 % DE LA MASA 69
142
40 A 60 % DE LA MASA 198
197
198
199
5 A 9% DE LA MASA 198
275
10 A 30 % DE LA MASA 198
365
441
442
443
17 A 23 % DE LA MASA 442
143
CF
total de rea
masa inyectada en nanogramos
% RSD
SDCF
x100
CF
Donde:
SDCF= Desviacin estndar de los factores de calibracin
CF = Promedio de los factores de calibracin
La verificacin de la calibracin inicial puede tambin efectuarse mediante la
regresin por mnimos cuadrados, en la cual el criterio de aceptacin es que
el factor de correlacin "r2" sea mayor o igual a 0,997.
Si los criterios para el % RSD o r no se cumplen se procede a la revisin del
sistema cromatogrfico y la preparacin de las disoluciones de calibracin.
Posteriormente la curva de calibracin ser vigente, si el anlisis de un punto
intermedio de la curva no presenta una variacin de la concentracin mayor
al 15% y que ser calculada de la siguiente manera.
Diferencia de concentracin % D
CC CT
x100
CT
Donde
CC= concentracin calculada
CT= concentracin terica
O si se utiliza el factor de calibracin
Diferencia porcentual %
CFv CF
x100
CF
Donde:
CFv= Es el factor de calibracin de cada compuesto en el
estndar de verificacin.
CF = Es la media del factor de calibracin del compuesto de
la calibracin inicial.
144
145
DPR
C1 C 2 * 200
C1 C 2
Donde:
C1 Concentracin de la primera muestra
C2 concentracin de la segunda muestra (muestra duplicada)
La DPR de cada analito obtenido entre la muestra y la duplicada debe
ser:<20%
Si los valores no cumplen con los especificados, el sistema analtico est
fuera de control, determine las causas y corrija el problema, documente las
incidencias y acciones correctivas e inclyalas en el expediente del resultado
analtico.
Repita el anlisis del lote asociado con la muestra y la duplicada que provoc
que la prueba del DPR fallara.
3.4.4.5.6 Verificacin de la estabilidad de la curva de calibracin
En cada lote analizado, si ms de 20 muestras van a ser analizadas durante
el da, verifique la curva de calibracin analizando un estndar de
concentracin media del intervalo de trabajo al principio del lote y despus
de cada 20 muestras 12 horas de anlisis continuo.
Calcule el factor de calibracin o la concentracin para cada analito del
estndar de concentracin media, y el por ciento de la diferencia (%D) con la
siguiente ecuacin:
FC1 FC2
Diferencia porcentual
FC1
x100
Donde:
FC1 = Factor de calibracin promedio para cada plaguicida en la curva de
calibracin, o la concentracin nominal del estndar de verificacin.
FC2 = Factor de calibracin promedio para cada plaguicida en el estndar
de concentracin media, o la concentracin calculada en el estndar de
verificacin.
El valor obtenido del % de la diferencia (%D) deber ser menor al 15%, de
no ser as verifique su vigencia, revis tambin el sistema cromatogrfico y
determine la causa de la falla y corrija; de no lograr corregir la falla, recalibre
nuevamente el sistema y en le caso de que la falla del estndar de
146
Re cuperacin % R
C1
x100
C2
Donde:
C1=Concentracin calculada de surrugados en la muestra.
C2=Concentracin nominal del surrugado adicionado a la
muestra.
El %R debe estar entre el 70 y el 130 % de recuperacin. De no ser as
verifique la preparacin de la muestra que fallo y el sistema cromatogrfico,
determine la causa de la falla y corrija; de no encontrarla, repita la extraccin
de la muestra y vuelva a analizar si el %R esta fuera del rango de
aceptacin, llene hoja de incidencia y reporte como interferencia de matriz y
los resultados obtenidos.
Si los valores no cumplen con los especificados, determine las causas y
corrija el problema, documente las incidencias y acciones correctivas e
inclyalas en el expediente del resultado analtico.
3.4.4.5.8 Verificacin de estndares internos.
Compare el rea de el o los estndares internos de las muestras con el rea
promedio de los estndares internos obtenidos de los puntos de calibracin,
el valor obtenido en el o los estndares internos de la muestra no deben ser
menores a 50% ni mayores a 200% del valor promedio obtenido en la curva
de calibracin para cada estndar interno.
Si los valores no cumplen con los especificados, el sistema analtico est
fuera de control, determine las causas y corrija el problema, documente las
incidencias y acciones correctivas e inclyalas en el expediente del resultado
analtico.
3.4.4.5.9 Control de Calidad Estadstico En esta seccin se especifica
como debe realizarse el control de calidad estadstico obligatorio para este
mtodo:
3.4.4.5.9.1 Preparacin de las Muestras de Control de Calidad
(MCC) Prepare la MCC de la siguiente forma:
147
148
149
Punto de verificacin
Criterio
Autotune
DFTTP tune
Puerto de inyeccin libre de suciedad y baja
degradacin
Punto de verificacin
Criterio
Menor al 15%
Punto de verificacin
Criterio
Blanco de reactivos
Punto de verificacin
Criterio
% de Recuperacin de 70 / 130
% de Recuperacin de 70 / 130
150
Criterio
% de Recuperacin 70 / 130
Punto de verificacin
Criterio
3.4.4.6 Calibracin
Se necesitan al menos 5 estndares de calibracin. Uno debe contener analitos a una
concentracin cercana, pero superior a la del lmite prctico de cuantificacin para
cada analito; los otros deben estar a concentraciones que cubran el intervalo
esperado en las muestras. Por ejemplo, si el LDM es 0,01g/L y el LPC es de 0,05
g/L, se espera que la muestra contenga concentraciones mayores de 0,05 g/L.
Una vez establecidas las condiciones de operacin inyecte un volumen adecuado (2 L) de
cada estndar de calibracin por triplicado y al final realice un promedio de las tres curvas y
agrguelo a la tabla de calibracin del mtodo.
Si la DPR de cada analito es 20%, entonces la respuesta del instrumento es
considerada lineal y el factor de calibracin promedio FC puede utilizarse para la
cuantificacin de los resultados de las muestras. Si la DSR es mayor que 20%, entonces
no puede asumirse linealidad y se debe repetir la curva de calibracin.
Si se utiliza regresin lineal por mnimos cuadrados, deber obtener el factor de
correlacin r2 para cada analito, el cual deber ser mayor o igual a 0,997 si r es
menor a este valor, la curva de calibracin no es lineal y deber verificarse la
preparacin de los estndares de calibracin y el sistema cromatogrfico, y repetir la
calibracin.
3.4.4.6.1 Calibracin por Estndar Interno:
El analista debe seleccionar uno o ms estndares internos que sean similares en
comportamiento analtico a los compuestos de inters. El analista debe adems
demostrar que la medicin del estndar interno no es afectada por el mtodo o
interferencias de la matriz.
Prepare los estndares de calibracin a un mnimo de cinco concentraciones para cada
analito de inters por adicin de volmenes. Para cada estndar de calibracin, adicione
una cantidad conocida constante de uno o ms estndares internos y afore con un
solvente apropiado. Uno de los estndares debe estar a una concentracin cercana, pero
por arriba del LPC. Las otras concentraciones deben corresponder al rango de trabajo.
151
RF
As * Cis
Ais * Cs
Donde:
As = Respuesta para el analito que ser medido.
Ais = Respuesta del estndar interno.
Cis = Concentracin del estndar interno, g/L.
Cs = Concentracin del analito a ser medido, g/L.
Si el valor RF sobre el rango de trabajo es constante (< 20% RSD), el RF puede usarse
para clculos. Alternativamente, los resultados pueden usarse para graficar una curva de
calibracin de la relacin de respuesta, As/Ais contra RF.
3.4.4.7 Procedimiento Analtico
3.4.4.7.1 Anlisis de los extractos de las muestras
Condiciones cromatogrficas:
Gas acarreador
Helio
Temperatura inicial
150 C
Tiempo inicial
0 min
Programa 1
8C/min
Temperatura final 1
180C 0 min
Programa 2
15C/min
Temperatura final 2
320C 6 min
Temperatura del inyector 250C
Volumen inyeccion:
2L
Modo
splitless
Flujo purga septum
2 mL/min
Solvent delay
4.4 min
Detector:
Modo de adquisicin:
SIM/SCAN
Rango de masas:
100-900
Temperatura de la fte:
230 C
Temperatura cuadrupolo: 150 C
Grupos SIM
Grupo 1 iones 219, 241, 236, 326, 240 y 486. Minuto 0-11,5
Grupo 2 iones 297, 403,8 y 566 Minuto 11-12,4
Grupo 3 iones 260, 264, 264,300,307,9, 468, 483, 628 y 644 Minuto 12,4
a 13
Grupo 4 iones 290, 300, 483,8, 561,7, 644 y 722. Minuto 13 a 19
152
153
154
PFOS
Aguas Marinas
Aguas Estaurinas y de Lagunas Costeras
Aguas Superficiales Epicontinentales
Aguas Subterrneas
Suelos
Sedimentos Marinos
Sedimentos Epicontinentales
Alimentos procesados, sin procesar, Organismos y Tejidos animales
3.5.2 Resumen
AGUAS (Marinas, Costeras, Estaurinas, Lagunas Costeras, Superficiales Epicontinentales
y Subterrneas)
Una muestra de agua es extrada por extraccin en fase slida (SPE) y posteriormente
analizada por LC/MS
SUELOS Y SEDIMENTOS
Una muestra de suelo es tratada con NaOH y HCl en metanol y extrada con metanol
y finalmente se realiza una segunda extraccin con Carbono grafitado no poroso.
ORGANISMOS, TEJIDOS ANIMALES, ALIMENTOS PROCESADOS Y SIN PROCESAR
Se pesa una cantidad de muestra a la cual se le adiciona un reactivo de par inico y
se extrae con acetato de etilo. Se evapora a sequedad y se reconstituye con
acetonitrilo y se pasa para su anlisis por LC/MS.
156
157
Acido actico
Hidrxido de amonio al 25%.
Acetato de amonio
Metanol
Agua A menos que otra forme se indique, el agua de referencia debe entenderse como
agua grado reactivo tipo I ASTM.
3.5.3.3.2.2.1 Reactivos
Metanol (CH3OH)
Hidrxido de sodio (NaOH)
Acido actico glacial (CH3COOH)
Acetato de amonio (CH3COO NH4)
Acido Clorhdrico concentrado (HCl)
Metanol
Agua A menos que otra forme se indique, el agua de referencia debe entenderse como
agua grado reactivo tipo I ASTM.
159
160
3.5.3.3.3.1.2.1 Reactivos
Sulfato acido de Tetrabutilamonio (TBA)
Hidrxido de sodio (NaOH)
Carbonato de sodio (NaCO3)
Bicarbonato de sodio (NaHCO3)
Metanol
Acetato de etilo (CH3COOCH2CH3)
Agua A menos que otra forme se indique, el agua de referencia debe entenderse como
agua grado reactivo tipo I ASTM.
NaOH 10 N: Pesar 200g de NaOH en un vaso de precipitados de 500 mL, agregar
250mL de agua desionizada, agitar hasta disolver los slidos. Pasar a un matraz
aforado de 500 mL y llevar al aforo con agua. Debe almacenarse en una botella de
polietileno con capacidad de 500 mL.
NaOH 1 N: Colocar 10mL de la disolucin 10N preparada anteriormente en un
matraz volumtrico de 100mL y llevar al aforo con agua desionizada Debe
almacenarse en una botella de polietileno con capacidad de 125mL
161
Compuesto
PFOS
3.5.3.3.3.2.2.1 Reactivos
Hidrxido de potasio (KOH)
Metanol
Acetato de amonio (CH3COO NH4)
Hidrxido de amonio (NH4OH)
Agua A menos que otra forme se indique, el agua de referencia debe entenderse como
agua grado reactivo tipo I ASTM.
KOH 0.01 M: Pesar 0.2805 g de KOH en un vaso de precipitados de 500 mL,
agregar 250mL de agua desionizada, agitar hasta disolver los slidos. Pasar a un
163
164
2.0 Columna Thermo Keystone Betasil C18 HPLC Column 4.6 x 150mm
5m
165
166
167
Identificacin de la muestra
Nmero del lote analtico en el cual se analiz la muestra
Fecha del anlisis
Procedimiento cronolgico utilizado
Cantidad de muestra utilizada
Nmero de muestras de control de calidad analizadas en el lote
Trazabilidad de las calibraciones de los instrumentos de medicin
Registros de bitcoras, en cintas de respaldo o en otros respaldos de
informacin
Informacin cruda reportada por los equipos o por los analistas
Evidencia de la aceptacin o rechazo de los resultados del lote
analtico.
3.5.4.5.1 Verificacin del equipo
La verificacin del equipo debe realizarse de acuerdo a las instrucciones del
fabricante. En general:
Verificar que se tiene fase mvil necesaria en los reservorios.
Estabilizar el sistema con la columna por al menos 10 min.
Abrir la alimentacin de nitrgeno
3.5.4.5.2 Verificacin de la calibracin inicial.
La curva de la calibracin inicial deber realizarse inyectando los estndares
de calibracin preparados y se considera lineal, si el por ciento de la
desviacin estndar relativa (%RSD) de los factores de calibracin (CF) es
menor o igual al 20%, los clculos se realizan con las siguientes ecuaciones:
CF
total de rea
masa inyectada en nanogramos
% RSD
SDCF
x100
CF
Donde:
168
Diferencia de concentracin % D
CC CT
x100
CT
Donde
CC= concentracin calculada
CT= concentracin terica
Diferencia porcentual %
CFv CF
x100
CF
Donde:
CFv= Es el factor de calibracin de cada compuesto en el estndar de
verificacin.
CF = Es la media del factor de calibracin del compuesto de la
calibracin inicial.
Si el criterio de aceptacin para la diferencia porcentual es mayor al 30% se
proceder a la revisin del sistema cromatogrfico y a la preparacin de la
solucin estndar utilizada.
3.5.4.5.3 Verificacin de contaminacin de los reactivos.
Los blancos de reactivos no deben presentar ningn tipo de contaminante al
tiempo de retencin de los analitos, por lo que es importante que los
reactivos utilizados cumplan con las especificaciones mencionadas.
Si los resultados de los blancos no cumplen con el criterio mencionado, se debe
localizar la fuente de contaminacin y extraer y analizar nuevamente las muestras
asociadas al blanco contaminado
Use tambin los blancos de reactivos para verificar la contaminacin por arrastre de
muestras con altas concentraciones en anlisis secuenciales
3.5.4.5.4 Verificacin del lote analtico
169
DPR
C1 C 2 * 200
C1 C 2
Donde:
C1 Concentracin de la primera muestra
C2 concentracin de la segunda muestra (muestra duplicada)
La DPR de cada analito obtenido entre la muestra y la duplicada debe
ser:<20%
170
FC1 FC2
Diferencia porcentual
FC1
x100
Donde:
FC1 = Factor de calibracin promedio para cada plaguicida en la curva
de calibracin, o la concentracin nominal de del estndar de
verificacin.
FC2 = Factor de calibracin promedio para cada plaguicida en el
estndar de concentracin media, o la concentracin calculada en el
estndar de verificacin.
El valor obtenido del % de la diferencia (%D) deber ser menor al 15%, de
no ser as verifique su vigencia, revis tambin el sistema cromatogrfico y
determine la causa de la falla y corrija, de no lograr corregir la falla, recalibre
nuevamente el sistema.
3.5.4.5.7 Verificacin de estndares surrogados.
NO APLICA
3.5.4.5.8 Verificacin de estndares internos.
NO APLICA
3.4.4.5.9 Control de Calidad Estadstico En esta seccin se especifica
como debe realizarse el control de calidad estadstico obligatorio para este
mtodo:
3.5.4.5.9.1 Preparacin de las Muestras de Control de Calidad (MCC)
Prepare la MCC de la siguiente forma:
171
que corresponda al
172
173
Criterio
Punto de verificacin
Criterio
Menor al 30%
Punto de verificacin
Criterio
Blanco de reactivos
Punto de verificacin
Criterio
% de Recuperacin de 70 / 130
Punto de verificacin
Criterio
% de Recuperacin 70 / 130
Punto de verificacin
Criterio
3.5.4.6 Calibracin
174
40 C
Acetato de amonio 2 mM
Metanol
% FM B
45
90
90
45
Volumen inyeccin
Flujo
MS Ionizacin
Modo MS
Voltaje del capilar
Temperatura de la fuente
Temperatura desolvatacion
Flujo del gas
Flujo del gas desolvatacion
m/z monitoreada
% FM A
55
10
10
55
10 L
3 mL/min
ESI negativo
SIM
3 kV
150 C
350 C
140 L/min
460 L/min
499
175
3.5.4.7.3.1 AGUA
Calcule la concentracin como:
Concentracing / L C i
Volumen de muestra
Donde
Ci = concentracin obtenida del cromatograma
Hay software en los cuales es posible introducir el factor de correccin para obtener el
resultado expresado en muestra.
3.5.4.7.3.3 SUELOS Y SEDIMENTOS
Calcule la concentracin como:
Concentracing / Kg C i
Peso
de
muestra
Donde
Ci = concentracin obtenida del cromatograma
176
Concentracing / Kg C i
Peso
de
muestra
Donde
Ci = concentracin obtenida del cromatograma
Hay software en los cuales es posible introducir el factor de correccin para obtener el
resultado expresado en muestra.
177
NOTA: Este mtodo est basado en su desempeo, se permite que el laboratorio omita cualquier
paso o modifique cualquier procedimiento, suponiendo que todos los requerimientos de
desempeo especificados se cumplan. Al laboratorio no se le permite omitir cualquier punto de
control de calidad, ni los parmetros que se especifiquen como NO MODIFICABLES. Los
trminos debe, puede y deber son mencionados a travs de los mtodos y estn destinados
a ilustrar la importancia de los procedimientos para producir datos verificables en los rangos de
trabajo del mtodo. El trmino debe es usado para indicar que los desarrolladores de este
mtodo encontraron ciertos procedimientos esenciales en muestras analizadas exitosamente; de
todas maneras, estos procedimientos pueden ser modificados u omitidos si el laboratorio puede
demostrar fehacientemente que la calidad de los resultados no resulta afectada.
PARMETROS NO MODIFICABLES
Espectrmetro de Emisin Atmica con Plasma Inductivamente Acoplado (ICP/AES)
Aire Ambiente
Suelos
Sedimentos Marinos
Sedimentos Epicontinentales
Aguas Estaurinas y de Lagunas Costeras
178
3.6.1.4 Limitaciones: Este mtodo est restringido para utilizarse slo bajo la supervisin de analistas
expertos en el uso de ICP/AES y en la interpretacin de sus resultados. Cada analista debe demostrar
la habilidad para generar resultados aceptables con este mtodo.
3.6.2 Resumen
Una porcin homogenizada de una muestra lquida o slida es pesada con exactitud para su
procesamiento. Para un anlisis de elementos totales, los analitos son solubilizados o digeridos
utilizando el mtodo de preparacin de muestras apropiado, quedando esta lista para ser
analizada por ICP-AES utilizando un instrumento secuencial de plasma axial, dicho instrumento
mide espectros de emisin caractersticos por espectrometra ptica. Los espectros son
dispersados por una rejilla de difraccin y las intensidades de las lneas de emisin son
monitoreadas por dispositivos fotosensitivos.
AIRE AMBIENTE
Se determina la concentracin de partculas suspendidas totales en el aire ambiente, por
medio de un muestreador de alto volumen adecuadamente localizado, que succiona a
travs de un filtro una cantidad entre 1 600 y 2 400 m3 de aire ambiente, a un flujo entre
1,13 y 1,70 m3/min durante un perodo de muestreo de 24 hrs. La velocidad de flujo del aire
ambiente y la geometra del muestreador son tales que favorecen la recoleccin de
partculas hasta de 50 micrmetros (m) de dimetro aerodinmico, dependiendo de la
velocidad del viento y su direccin. Los filtros usados deben tener una eficiencia de
recoleccin mnima del 99 % para partculas de 0.3 m.
El filtro se pesa en el laboratorio bajo condiciones de humedad y temperatura controladas,
antes y despus de su uso, para determinar su ganancia neta de peso (masa). El volumen
total de aire muestreado, corregido a las condiciones de referencia, se determina a partir
del flujo de aire ambiente medido y del tiempo de muestreo. La concentracin de partculas
suspendidas totales en el aire ambiente se calcula dividiendo la masa de las partculas
recolectadas entre el volumen de aire muestreado y se expresa en microgramos por metro
cbico patrn (g/ m3 ptn), corregidos a las condiciones de referencia.
En muestras tomadas a temperaturas y presiones baromtricas que difieren
significativamente de las condiciones de referencia, las concentraciones corregidas pueden
variar de las concentraciones reales (g/ m3 real), sobre todo a elevadas altitudes. Las
concentraciones reales de partculas pueden ser calculadas a partir de las concentraciones
corregidas, utilizando las temperaturas y presiones que se hayan presentado durante el
perodo de muestreo.
El filtro es dividido en tiras y se digiere una de ellas por el mtodo de microondas, se afora a
un volumen conocido y de analiza por ICP/AES para metales y metaloides..
AGUAS (Superficiales, Epicontinentales y Subterrneas)
179
180
181
3.6.3.3 Matrices
3.6.3.3.1 Aire Ambiente
3.6.3.3.1.1 Equipo y Materiales
Solo se mencionan los equipos y materiales que no son de uso comn en el
laboratorio analtico.
3.6.3.3.1.1.1 Equipo
Muestreador de aire de alto volumen (HV)
Filtros de medio o super alta eficiencia de recoleccin para partculas muy
pequeas ( tamao submicrometro)
Cmara ambiental de acondicionamiento para filtros: La temperatura
controlada debe ser entre 15 y 30C con un mximo de 3C de variacin
durante el perodo de equilibrio. La humedad debe controlarse en un nivel
menor del 50% de humedad relativa constante dentro de 5%.
Balanza analtica: La sensibilidad de la balanza analtica debe ser de 0.01
mg. La cmara de pesado debe estar diseada para que pueda ser
introducido un filtro sin doblar
Unidad luminosa de inspeccin. La fuente de luz debe ser similar a la de un
visor de pelculas de rayos X para la inspeccin de los filtros.
Se debe disponer de un foliador para numerar los filtros antes de que se
coloquen en la cmara de acondicionamiento ambiental, en caso de no
estar numerados por el fabricante.
La unidad de microondas marca CEM modelo MARS-5, MARSX o equivalente
que proporcione una energa de 1600 W, que pueda programarse dentro de + 10 W
de la energa requerida. Y que cuente con sensor de temperatura y presin y un
controlador de microondas.
El sistema requiere de vasos de digestin de tefln PFA marca CEM modelo ACV,
HP 500 de 100 mL de capacidad o vasos marsxpress de 75 mL de capacidad o
equivalentes, capaces de resistir presiones de 500 psi y una temperatura mxima de
210C.
182
184
POTENCIA
RAMPA PSI
TEMP.
MANT.
185
1 a 3 vasos 300 W
4 a 6 vasos 600 W 100
7 a 14 vasos 1200 W
10:00
100
200C
5:00
ETAPA
1
POTENCIA
1 a 3 vasos 300 W
4 a 6 vasos 600 W
7 a 14 vasos 1200 W
1 a 3 vasos 300 W
4 a 6 vasos 600 W
7 a 14 vasos 1200 W
RAMPA
PSI
MAN
100
10:00
250
160
0:00
100
10:00
250
170
00:00
estar siempre en
es para darle un
muestras debe de
lento de 160C a
-Al final del programa del microondas permita que los vasos se enfren al
menos 5 min en la unidad antes de remover el carrusel, para evitar
posibles daos en el sistema de ventilacin de los vasos. Asegrese que
estn fras para evitar prdidas de mercurio.
NOTA: Las muestras pueden enfriarse fuera de la unidad, si se desea que el
enfriado sea ms rpido se puede meter en refrigeracin.
186
187
Flujo
(mL/min)
Eluyente
Vlvula A,
B
Vlvula C
188
4,0
4,0
1,0
1,0
4,0
4,0
4,0
4,0
0.0
1M Acetato de Amonio
1,25M cido Ntrico
1,25M cido Ntrico
1,25M cido Ntrico
1,25M cido Ntrico
1M Acetato de Amonio
1,25M cido Ntrico
1M Acetato de Amonio
Abierta
Abierta
Cerrada
Cerrada
Cerrada
Cerrada
Cerrada
Cerrada
Cerrada
Abierta
Abierta
Abierta
Cerrada
Abierta
Abierta
Abierta
Abierta
Abierta
Repetir la secuencia usando cido ntrico 1,25M, y despus usando agua ASTM en
lugar del cido oxlico 0,2M.
Enjuague los recipientes con agua ASTM, llnelos con los reactivos designados y
corra la secuencia de la tabla anterior. Inicie el ICP-MS y reconecte el sistema de
preconcentracin.
Con las vlvulas A y B cerradas y la vlvula C abierta, corra la muestra hacia los
desechos con la bomba (P4) por 4 minutos a un flujo de 4mL/min. Encienda la
bomba acarreadora (P3) y bombe cido ntrico 1% al nebulizador del ICP-MS a un
flujo de 0,8 1,0mL/min. Encienda la bomba del buffer de acetato de amonio 2M
(P2) a un flujo de 1,0mL/min.
La preconcentracin de la muestra puede ser corrida a travs de una secuencia de
bombeo de eluyente como en la tabla anterior. El tiempo exacto de esta secuencia
debe ser modificada de acuerdo al volumen interno y al hardware.
Inyeccin de la muestra con las vlvulas A, B y C abiertas, correr la muestra hacia
la columna usando acetato de amonio 1M por 4,5min a 4,0mL/min. Los analitos son
retenidos en la columna mientras que la mayor parte de la matriz es llevada a los
desechos,
Elusin de los analitos cierre las vlvulas A y B y comience la elusin de los
analitos b
bombeando cido ntrico 1,25M a travs de la columna a 4,0mL/min; cierre la
vlvula C y bombe los analitos eludos al ICP-MS a 1,0mL/min, e inicie el software.
Reacondicionamiento de la columna abra la vlvula C para dirigir el eluyente de la
columna hacia los residuos, y bombe cido ntrico 1,25 M, acetato de amonio 1 M,
cido ntrico 1,25 M y acetato de amonio 1 M alternadamente a travs de la columna
a 4,0 mL/min. Durante este proceso, la siguiente muestra puede ser cargada usando
la bomba P4.
Repetir la secuencia para cada muestra a ser analizada. Al final de las corridas
analticas, dejar la columna llena del buffer de acetato de amonio 1M hasta el
siguiente uso.
NOTA: Las muestras que hayan sido concentradas de ms, deben ser diluidas con
HNO3 al 1% y reanalizadas.
3.6.3.3.4 Suelos
189
El sistema requiere de vasos de digestin de tefln PFA marca CEM modelo ACV,
HP 500 de 100 mL de capacidad o vasos marsxpress de 75 mL de capacidad o
equivalentes, capaces de resistir presiones de 500 psi y una temperatura mxima de
210C.
190
POTENCIA
% RAMPA PSI
1 a 3 vasos 300 W
4 a 6 vasos 600 W 100 10:00 100
7 a 14 vasos 1200 W
TEMP.
MANT.
200C
5:00
POTENCIA
RAMPA
PSI
MAN
191
100
05:00
250
175
5:00
Al final del programa del microondas permita que los vasos se enfren al menos
por 5 minutos en la unidad antes de remover el carrusel, para evitar posibles daos
en el sistema de ventilacin de los vasos. Las muestras pueden enfriarse fuera de
la unidad, si desea que el enfriado sea ms rpido puede meterlos a refrigeracin.
Asegrese que este fro para no perder mercurio.
Complete la preparacin de las muestras destapando cuidadosamente cada vaso
dentro de la campana de extraccin. Lleve la muestra a un volumen final de 50
mL, si la muestra digerida contienen partculas las cuales pueden obstruir el
nebulizador, pase la muestra a travs de filtro Whatman No. 41 y transfiera a un
matraz Erlenmeyer.
POTENCIA
% RAMPA PSI
1 a 3 vasos 300 W
4 a 6 vasos 600 W 100 10:00 100
7 a 14 vasos 1200 W
TEMP.
MANT.
200C
5:00
192
RAMPA
CONTROL PRESION
TEMPERATURA
DURANTE
1200 W
25 min
800 PSI
200 C
15 min
Al final del programa del microondas permita que los vasos se enfren al menos
por 5 minutos en la unidad antes de remover el carrusel, para evitar posibles daos
en el sistema de ventilacin de los vasos. Las muestras pueden enfriarse fuera de
la unidad, si desea que el enfriado sea ms rpido puede meterlos a refrigeracin.
Asegrese que este fro para no perder mercurio.
Complete la preparacin de las muestras destapando cuidadosamente cada vaso
dentro de la campana de extraccin. Lleve la muestra a un volumen final de 25
mL, si la muestra digerida contienen partculas las cuales pueden obstruir el
nebulizador, pase la muestra a travs de filtro Whatman No. 41 y transfiera a un
tubo para su anlisis por ICP/AES.
3.6.3.3.7 Sangre Humana
3.6.3.3.7.1 Equipo y Materiales
Slo se mencionan los equipos y materiales que son relevantes en este mtodo
analtico.
Balanza analtica
Parrilla de calentamiento
Vaso de pp de 125 mL
Vidrio de reloj
193
Agua desionizada
Agua doblemente destilada
cido ntrico concentrado SUPRAPUR o equivalente
cido perclrico concentrado SUPRAPUR o equivalente
Peroxido de hidrogeno SUPRAPUR o equivalente
194
195
196
0,5
2,0
5,0
1,0
5
10
25
Conc. Final**
mg/L
250
250
250
250
250
250
250
0,02
0,08
0,2
0,4
2,0
4,0
10,0
*La concentracin final de K, Ca, Mg y Na es el valor obtenido multiplicado por 10 ya que la concentracin inicial de estos
elementos es 10000 mg/L
197
Identificacin de la muestra
Nmero del lote analtico en el cual se analiz la muestra
Fecha del anlisis
Procedimiento cronolgico utilizado
Cantidad de muestra utilizada
Nmero de muestras de control de calidad analizadas en el lote
Trazabilidad de las calibraciones de los instrumentos de medicin
Registros de bitcoras, en cintas de respaldo o en otros respaldos de
informacin
Informacin cruda reportada por los equipos o por los analistas
Evidencia de la aceptacin o rechazo de los resultados del lote analtico.
3.6.4.5.1 Verificacin del equipo
Verifique que el equipo se encuentra en ptimas condiciones operativas, para lo cual debe
encender y permitir que se estabilice trmicamente por 30 min. Y realizar la verificacin
correspondiente de acuerdo a los instructivos de verificacin de la calibracin de acuerdo
al equipo a utilizar.
3.6.4.5.2 Verificacin de la calibracin inicial
La calibracin inicial debe tener un blanco y 4 estndares mnimo y debe cumplir
con un coeficiente de correlacin >= 0.997. Enseguida se analiza un estndar
para verificar la estandarizacin y este debe de ser el punto medio de dicha
estandarizacin y se debe de tener un por ciento de recobro de 90-110%.
3.6.4.5.3 Verificacin de contaminacin de reactivos
Blanco de reactivos (BR) Prepare un blanco de reactivos a la misma concentracin de
cido que las muestras para analizar, procese el blanco de reactivos al igual que las
muestras y verifique que el blanco de reactivos sea menor al Lmite de deteccin del
mtodo (LDM). En caso de no cumplir, verifique los reactivos, prepare nuevamente el
blanco de reactivos y reprocese el lote analtico con los nuevos reactivos.
3.6.4.5.4 Verificacin del Lote Analtico
198
199
200
Criterio
Ver instructivo de de equipo
correspondiente
Verificacin de la estandarizacin
Punto de verificacin
Criterio
>0.997
Correlacin
Verificacin de la calibracin
Punto de verificacin
CCV
Criterio
10%
Criterio
< limite de deteccin
Criterio
+- 20 %R
Criterio
+- 20 %
Criterio
+- 10 %
3.6.4.6 Calibracin
Dado que cada instrumento y modelo tienen diferentes especificaciones, siga las
instrucciones del fabricante para su calibracin, ver instructivo de equipo
correspondiente.
201
202
Q Q2 ... Qn T
V m 1
1000
Donde:
V(m)= Volumen total de la muestra (m3).
Q1,Q2,.,Qn= Flujos determinados al inicio, final y puntos intermedios durante el tiempo
muestreado (L/minuto).
n= Nmero de datos promediados.
T= Tiempo de muestreado (minutos).
El volumen de muestreado debe convertirse a condiciones estndar (760 mm Hg y
25C) con la siguiente ecuacin.
P A 298
V s V m
760 273 t a
Donde:
V(s)= Volumen total de la muestra a 25C y 760 mm Hg (m3).
V(m)= Volumen total de flujo a condiciones ambientales (m3).
P(A)= Presin ambiental (mm Hg).
t(a)= Temperatura ambiental (C).
La concentracin del elemento en la muestra se calcula con la siguiente ecuacin:
C A
A * V E
V i * V s
Donde:
C(A)= Concentracin del analito en la muestra (g/m3).
A= Cantidad calculada de material analizado, basada en la curva de calibracin para
estndares analizados (nanogramos).
V(i)= Volumen inyectado del extracto (L).
V(E)= Volumen final del extracto (mL).
V(s)= Volumen total de la muestra de aire corregido a condiciones estndar (m3).
Determine la concentracin de compuestos individuales en la muestra.
Informe los resultados en g/m3a condiciones STD.
Todos los datos de control de calidad obtenido debern ser informados junto con los
resultados de la muestra.
2.1.1.
3.6.4.7.3.2 AGUA
203
50 mL .vol.aforo
g
kg
C *V
P
Donde:
C= Concentracin en el extracto digerido (g/L)
V= Volumen del extracto digerido (L)
P= Peso de la muestra digerida
Reporte los resultados del anlisis en g/Kg con tres cifras significativas y
aclarando si son en Base Seca o Base Hmeda. Si reporta en base seca debe
considerar el valor de la humedad para obtener el resultado.
3.6.4.7.3.4 SEDIMENTOS (MARINOS Y EPICONTINENTALES)
VER CALCULOS PARA SUELOS
3.6.4.7.3.5 ALIMENTOS PROCESADOS, SIN PROCESAR, TEJIDOS, ORGANISMOS,
g
kg
C *V
P
204
ELEMENTO
Plata
Arsnico
Bario
Berilio
Cadmio
Nquel
Plomo
Selenio
Talio
Vanadio
Ag
As
Ba
Be
Cd
Ni
Pb
Se
Tl
V
2.1.4. S
I
M
BLONG. ONDA
O
L
O
328,07
193,70
455,40
313,04
226,50
231,60 x 2
220,35
196,03
190,86
292,40
LDI
ESTIMADOS**
g/L
4,7
35
0,87
0.18
2.3
10
28
50
27
5,0
1) Las longitudes de onda (nm) listadas son las recomendadas para obtener una adecuada sensibilidad, Cuando es (x 2) es de segundo
orden. Otras longitudes de onda pueden ser utilizadas (en caso de interferencias).
2) Los lmites de deteccin instrumental estimados muestran una gua sobre los lmites del instrumento, los lmites de deteccin del
mtodo son dependientes del tipo de matriz de las muestras.
3) Altamente dependiente de las condiciones y posicin del plasma.
205
Factor de Correccin
0,000540
0,000663
0,000029
0,0007340
0,0003940
0,0024000
INTERFERENCIA POR ALUMINIO
Metal
As
Pb
Se
Factor de Correccin
0,0005
0,0004
0,0012
Nota: Los datos anteriores son proporcionados por el fabricante del instrumento
206
Elemento
As
Ba
Be
Cd
Pb
Ni
Se
Ag
Tl
V
Concentracin
Media
(mg/L)
14,7
3,66
3,78
3,61
14,4
3,70
15,3
3,69
15,1
3,51
Nb
DSR b
Precisin c
(%)
7
7
8
8
7
7
8
6
7
8
6,4
3,1
5,8
7,0
5,9
5,7
7,5
9,1
8,5
6,6
99
99
102
97
97
100
104
100
102
95
207
Valor
(g/L)
Conc.
Media
(g/L)
DSR
(%)
A
(%)
Valor
(g/L)
Conc.
Media
(g/L)
DSR
(%)
B
(%)
Valor
(g/L)
Conc.
Media
(g/L)
DSR
(%)
C
(%)
Be
V
As
Cd
Ni
Pb
Zn
Se
750
750
200
50
250
250
200
40
733
749
208
48
245
236
201
32
6,2
1,8
7,5
12
5,8
16
5,6
21,9
98
100
104
96
98
94
100
80
20
70
22
2,5
30
24
16
6
20
69
19
2,9
28
30
19
8,5
9.8
2,9
23
16
11
32
45
42
100
99
86
116
93
125
119
142
180
170
60
14
60
80
80
10
176
169
63
13
55
80
82
8.5
5,2
1,1
17
16
14
14
9,4
8,3
98
99
105
93
92
100
102
85
208
3.7 MERCURIO
Existen 2 tcnicas analticas para analizar mercurio en muestras ambientales, la
Espectrofotometra de Absorcin Atmica con Vapor fro y la Espectrofotometra de Fluorescencia
Atmica con Vapor Fro, la primera es una tcnica utilizable para matrices de aguas, suelos,
sedimentos, organismos y alimentos, la segunda es una tcnica utilizable en aire ambiente
principalmente, la ventaja es que es un mtodo de medicin directa y es muy sensible (en el orden
de ng/m3), en la actualidad se han desarrollado equipos automticos que adems pueden medir
cantidades traza de mercurio en todas las matrices sin procesamiento de muestra alguno, lo que
representa grandes ventajas al elevar considerablemente la sensibilidad y eliminar las
interferencias y prdidas del analito por el procesamiento de las muestras.
En este documento se presentan los mtodos de AAEVP para todas las matrices de inters
excepto aire ambiente, en esta matriz la medicin se deber realizar por medicin directa con un
equipo EFAVP para aire ambiente, este mtodo an no est estandarizado por lo que quien lo
realice deber validarlo.
No se debe utilizar ICP/AES para analizar mercurio por las bajas sensibilidades que tiene esta
tcnica para este analito (en el orden de mg/kg).
NOTA: Este mtodo est basado en su desempeo, se permite que el laboratorio omita cualquier
paso o modifique cualquier procedimiento, suponiendo que todos los requerimientos de
desempeo especificados se cumplan. Al laboratorio no se le permite omitir cualquier punto de
control de calidad, ni los parmetros que se especifiquen como NO MODIFICABLES. Los
trminos debe, puede y deber son mencionados a travs de los mtodos y estn destinados
a ilustrar la importancia de los procedimientos para producir datos verificables en los rangos de
trabajo del mtodo. El trmino debe es usado para indicar que los desarrolladores de este
mtodo encontraron ciertos procedimientos esenciales en muestras analizadas exitosamente; de
todas maneras, estos procedimientos pueden ser modificados u omitidos si el laboratorio puede
demostrar fehacientemente que la calidad de los resultados no resulta afectada.
PARMETROS NO MODIFICABLES
Ninguno
209
# CAS
7439-97-6
3.7.1.3 Matrices Este mtodo es aplicable para el anlisis de metales en las siguientes
matrices ambientales:
Suelos
Sedimentos Marinos
Sedimentos Epicontinentales
Aguas Marinas
Aguas Estaurinas y de Lagunas Costeras
Aguas Superficiales Epicontinentales
Aguas Subterrneas
Alimentos procesados, sin procesar, organismos y tejidos animales
Sangre
Leche Materna
3.7.1.4 Limitaciones Este mtodo est restringido para utilizarse slo bajo la supervisin de
analistas expertos en el uso de AAEVF en la interpretacin de sus resultados. Cada analista debe
demostrar la habilidad para generar resultados aceptables con este mtodo.
3.7.2 Resumen
Una porcin bien homogenizada de una muestra lquida o slida es pesada con exactitud para su
procesamiento. Para el anlisis de Mercurio total, la muestra es solubilizada o digerida utilizando el
mtodo de preparacin de muestras apropiado, quedando esta lista para ser analizada por AAEVF
utilizando un espectrofotmetro de absorcin atmica con el aditamento para procesar muestras
por vapor fro.
3.7.3.3 Matrices
3.7.3.3.1 Aire Ambiente
3.7.3.3.1.1 Equipo y Materiales
Solo se mencionan los equipos y materiales que no son de uso comn en el
laboratorio analtico.
3.7.3.3.1.1.1 Equipo
BrCl
212
3.7.3.3.3 Suelos
3.7.3.3.3.1 Equipo y Materiales
VER EN METALES Y METALOIDES
3.7.3.3.3.2 Reactivos y Materiales de Referencia
VER EN METALES Y METALOIDES
3.7.3.3.3.3 Digestin de las muestras
VER EN METALES Y METALOIDES
213
Paso
T (C)
TM*(min)
T (min)
1
160
5
5
214
*Tiempo de mantenimiento
cido ntrico
cido sulfrico
cido clorhdrico
Bromato de Potasio
Bromuro de Potasio
215
216
217
Identificacin de la muestra
Nmero del lote analtico en el cual se analiz la muestra
Fecha del anlisis
Procedimiento cronolgico utilizado
Cantidad de muestra utilizada
Nmero de muestras de control de calidad analizadas en el lote
Trazabilidad de las calibraciones de los instrumentos de medicin
Registros de bitcoras, en cintas de respaldo o en otros respaldos de
informacin
Informacin cruda reportada por los equipos o por los analistas
Evidencia de la aceptacin o rechazo de los resultados del lote analtico.
3.7.4.5.1 Verificacin del equipo
Verifique que la succin en los capilares de la muestra y del cloruro estaoso sea
la adecuada (sin interrupciones) y que la bomba peristltica gire adecuadamente.
Verifique que el equipo se encuentra en ptimas condiciones operativas, para lo
cual debe encender y permitir que se estabilice trmicamente por 30 min. Y
realizar la verificacin correspondiente de acuerdo a los instructivos de
verificacin de la calibracin de acuerdo al equipo a utilizar.
3.7.4.5.2 Verificacin de la calibracin inicial
Se realiza la lectura de los estndares de calibracin, aceptando un 10% de
RSD. El coeficiente de correlacin debe ser >= 0.995 con un blanco y al menos 4
estndares.
3.7.4.5.3 Verificacin de contaminacin de reactivos
Blanco de reactivos (BR) Prepare un blanco de reactivos a la misma concentracin de
cido que las muestras para analizar, procese el blanco de reactivos al igual que las
218
219
220
Criterio
Ver instructivo de de equipo
correspondiente
Criterio
80 120 % Recobro
Criterio
< limite de deteccin
Criterio
80 120 % Recobro
Criterio
75 125 % Recobro
Criterio
80 120 % Recobro
221
222