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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

INTRODUCCIN

La embriaguez, o conjunto de fenmenos psquicos y somticos de la intoxicacin


aguda, posee una extraordinaria importancia sociolgica, criminolgica y mdico legal.
No es posible silenciar la importancia crimingena de la embriaguez, que es motivo
de investigacin policial -para el pesquisa y para el perito en criminalstica- y del que se
derivan frecuentes actuaciones periciales (toxicolgicos y mdico legales) en los que se
dan -con alguna frecuencia- variados y difciles problemas, por ejemplo en la
interpretacin de resultados en el diagnstico de la embriaguez; estos problemas derivan
de la debilidad en los conocimientos cientficos hasta hoy aportados respecto al alcohol
etlico -en la comunidad policial- que ayuden:

Primero, a tener confianza en el laboratorio de dosaje etlico, en la validacin de


los mtodos analticos de dosaje etlico, en la garanta de la calidad de los
resultados, etc.

Segundo, a orientar la investigacin concurrente con los hechos: la pertinencia de


las muestras para el anlisis de dosaje etlico, prontitud para la toma de muestra,
uso de sustancias que aceleran () la eliminacin del alcohol, etc.

Tercero, a orientar la investigacin posterior al hecho que ayuden al


esclarecimiento: investigacin del alcohol etlico en el cadver, variaciones de la
alcoholemia posmortem, uso de mtodos especficos para estos casos, clculo
retrospectivo de los resultados de dosaje etlico, dosaje etlico en cadveres, etc.

Se connota, que la respuesta a estas interrogantes deben encontrarse fundamentadas


por la literatura cientfica respecto a la investigacin forense del alcohol etlico y,
siendo nuestro lector objetivo el polica, priorizaremos y sistematizaremos la evidencia
bibliogrfica que tiene que ver con: la absorcin, la distribucin, el metabolismo, la
eliminacin, los mtodos de laboratorio y la crtica a los mismos, el diagnstico de la
intoxicacin alcohlica en el cadver; las deducciones mdico legales de la curva de
alcoholemia, el clculo retrospectivo de una alcoholemia, etc.
Lo que hemos querido probar es que existe abundante investigacin forense del
alcohol etlico efectuada por expertos empeados en dilucidar esos problemas.
Desarrollando un proceso lgico de conocimiento en estos temas, en muchos casos,
citamos a los investigadores tal y como se encuentran sus ponencias, para no
desvirtuarlas y para que el lector las interprete.
Es evidente hasta aqu, que lo que nos ha motivado a escoger este tema es la
relevancia que el mismo tiene en la investigacin policial y en el inters que tiene para
nuestros hermanos policas de la Dcima Direccin Territorial de Polica y
especialmente de nuestro querido Cusco.
Como participantes en el I Curso Descentralizado en Peritajes Criminalsticos,
ponemos a vuestra consideracin la investigacin bibliogrfica que hemos efectuado con
el fin de aportar luces que ayuden a los investigadores y a los tomadores de decisin
respecto a la investigacin forense del alcohol etlico.
I CURSO DESCENTRALIZADO EN PERITAJES CRIMINALSTICOS 2005

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

CAPITULO I
LA PROBLEMTICA DEL DOSAJE ETLICO

1.1. ANTECEDENTES.
A continuacin presentamos algunos de los problemas periciales que hicieron
necesaria la emisin de informes ampliatorios por parte del Servicio de Dosaje
Etlico de la Divisin de Salud PNP Cusco; ellos grafican de alguna manera la
justificacin del tema a desarrollar.
_________________________________________________________________
Informe N

-2002-DIRSAN-OFISAN-X-RPNP-UDE.

Asunto

Aclaracin
CLNICA".

sobre

resultado

de

Dosaje

Ref.

Of.N330-SRC-PNP-CSJ-ST.
Resolucin de Fiscala N271-2002-5FPP-CS.

Etlico,"EBRIEDAD

A mrito del documento de la referencia con el que se solicita: "...


que Ud., aclare y explique en forma detallada en que consiste la EBRIEDAD
CLNICA, cual es su relacin con la cantidad de alcohol que tena en la sangre el
denunciado MERCADO CAMPOS Jos, ms o menos de 0.5 gramos por litro y
cual es la base legal para ello...(Sic)"; tengo a bien informar lo siguiente:
_________________________________________________________________
Informe N

-2002-DIRSAN-OFIRESAN-X-RPNP-SDE.

Asunto

Absolucin de consulta sobre resultado de Dosaje Etlico.

Ref.

Solicitud presentada por el recurrente Jess PALOMINO


OVIEDO.

A mrito del documento de la referencia con el que se solicita se


informe respecto al resultado de Dosaje Etlico del recurrente, que:"... arroja
como resultado del mismo: (0.12) razn por la que fui denunciado penalmente
por Juez Provincial... (Sic)"; tengo a bien informar lo siguiente:

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Informe N

-2003-DIRSAL-OFISAL-UDE-X-DIRTEPOL-CUSCO.

Asunto

Absolucin de consulta sobre resultado de Dosaje Etlico en


cadver.

Ref.

Dcto. N782-2003-DRISAL/JEFSAL-X-DIRTEPOL.
Of. N 2771-03-X-DIRTEPOL-JEFICAJ-DIVINCRI.

A mrito de los documentos de la referencia, tengo a bien


informar lo siguiente:
1.-

Se analiza el certificado de D.E. N 311-C, practicado en muestra de sangre


extrada del cadver de Asunta CAHUANTICO ROJAS, No se indica hora
de infraccin (muerte) ni hora de extraccin; El Servicio de Dosaje Etlico
-por ende el suscrito- da fe del procedimiento de anlisis y del resultado del
mismo, con respecto a la muestra recibida en esta unidad, estando ajena en
conocimiento de las circunstancias y hechos concurrentes en la intervencin
policial.

_________________________________________________________________
Informe N

-2003-DIRSAL-OFISAL-UDE-X-DIRTEPOL-CUSCO.

Asunto

Informacin periodstica sobre resultado de dosaje etlico.

Ref.

Orden superior.

A mrito de la informacin periodstica propalada en el programa


"Ronda Poltica" del canal local CTC., tengo a bien informar lo siguiente:
1.-

Siendo que se refieren al resultado de Dosaje Etlico (D.E.) N 517-D, del


infractor: Jess Aquiles CALVO TORRES, en el sentido de que "se
encontraba ebrio al momento del accidente y el resultado arroja 0.00 g/L; se
hacen las siguientes precisiones en lo que nos concierne como unidad
especializada -estando ajenos en conocimiento de las circunstancias y
hechos concurrentes en la investigacin policial-.

2.-

Se recepcion el Of.N134-X-DIRTEPOL-PNP-RC-JPQU-CH, con muestra


de sangre (en sobre cerrado) proveniente de la comisara PNP Huaro, con
los siguientes datos relevantes en este caso:
Clase de accidente
:
Atropello.
Fecha
:
30-MAR-03.
Hora
:
23:40
Lugar de extraccin
:
Centro de Salud Urcos.
Hora y fecha
:
23:00 31-MAR-03.

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Informe N

-2003-DIRSAL-OFISAL-UDE-X-DIRTEPOL-CUSCO.

Asunto

Absolucin de consulta sobre resultado de Dosaje Etlico.

Ref.

Dcto. N931-2003-DIRSAL/JEFSAL-X-DIRTEPOL.
Of. N 510-2003-JMA.MHP.

A mrito de los documentos de la referencia, tengo a bien


informar lo siguiente:
1.-

Se analiza el certificado de D.E. N 1820-D, practicado en muestra de


sangre extrada a: Wilbert CALDERN ZARZANAULA, remitida de la
comisara PNP Limatambo; el Servicio de Dosaje Etlico -por ende el
suscrito- da fe del procedimiento de anlisis y del resultado del mismo, con
respecto a la muestra recibida en esta unidad, estando ajena en
conocimiento de las circunstancias y hechos concurrentes en la intervencin
policial.

2.-

Se analiza, tambin, los oficios Nros. 244 y 262-02-JCSL/GRSS/Cusco Norte, (fotocopias autenticadas) firmadas por el Dr. Csar TAMAYO
CAPAR, mdico Jefe del Centro de Salud de Limatambo. Se connota lo
siguiente:
La apreciacin clnica del paciente Wilbert CALDERN ZARZANAULA...
"EN ESTADO ETLICO PUPILAS ANISOCRICAS, NO REACTIVAS
(Sic).
Medicamentos
suministrados:
Dextrosa
5%,
dexametazona...
posteriormente otros.
" ... y a los 50 minutos aproximadamente se le extrajo la muestra de
sangre, por medio de la Alita N 21 por el apuro y urgencia de Vida que
presentaba el paciente y dificultad para cogerle la vena... Al paciente
tambin se le not Aliento Alcohlico (Sic)"

_________________________________________________________________
Informe N

-2003-DIRSAL-OFISAL-UDE-X-DIRTEPOL-CUSCO.

Asunto

Absolucin de consulta sobre resultado de Dosaje Etlico en


cadver.

Ref.

Of. N 4149-03-X-DIRTEPOL-JEFICAJ-DIVINCRI.
A mrito del documento de la referencia, tengo a bien informar lo

siguiente:
1.-

Se analiza el certificado de D.E. N 264-C, practicado en muestra de sangre


extrada del cadver de Bridget Louisa RIEDL LAING, cuyo resultado es
0.74 g/L. (cero gramos setenta y cuatro centigramos. de alcohol por litro de
sangre o lo que es lo mismo 0.740 miligramos/L) Considerando que han
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transcurrido 28 das desde la desaparicin de la persona hasta el hallazgo


del cadver (en el ro)

Informe N

-2003-JEFSAL-X-DIRTEPOL-SDE.

Asunto

Absolucin de consulta sobre resultado de Dosaje Etlico.

Ref.

Of.N175-DIRIG-PNP-DIRINDES/INSREG-CUS/INV.

A mrito del documento de la referencia con el que se solicita: se


emita informe sobre el resultado de Dosaje Etlico practicado a los SOT2 PNP
Rubn PEA QUISPE y SO2 PNP Wilbert MOISS SALAS, debiendo explicarse
a que causas posibles se deba los resultados de 0.14 y 0.12 cg. Por g/l... (Sic)";
tengo a bien informar lo siguiente:
_________________________________________________________________
Informe N

-2003-JEFSAL-X-DIRTEPOL-SDE.

Asunto

Absolucin de consulta sobre resultado de Dosaje Etlico.

Ref.

Dcto. N1293-2003-DIRSAL/JEFSAL-X-DIRTEPOL.
Of. N 4997-03-X-DIRTEPOL-JEFICAJ-DIVINCRI.

A mrito de los documentos de la referencia con el que se


solicita: se sirva emitir un pronunciamiento y absolucin del dosaje etlico Nro.
370.C. para cuyo efecto deber precisar y establecer el examen clnico la
importancia que lleg a embriagarse... (Sic)"; tengo a bien informar lo siguiente:
1.-

El Servicio de Dosaje Etlico -por ende el suscrito- da fe del procedimiento


de anlisis y del resultado del mismo, con respecto a la muestra recibida en
esta unidad, estando ajena en conocimiento de las circunstancias y hechos
concurrentes en la intervencin policial.

2.-

Con respecto al resultado (2.20 gr/L), Citamos de Gisbert C. En su libro


Medicina Legal y Toxicologa (pg. 773 y 776)

_________________________________________________________________
Informe N

-2004-DIVSAL-X-DIRTEPOL-SERDOETI.

Asunto

Absolucin de consulta sobre Dosaje Etlico.

Ref.

Dcto. N2680-04-DIRSAL/DIVSAL-X-DIRTEPOL-CUSCO.
Of. N 509-DIVPOL-LC-DEINCRI.

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A mrito de los documentos de la referencia con los que se


solicita informacin relativa ... al Dosaje Etlico N 1121-D... del en vida fue Javier
Nicols HUERTA BENITES... cuyo resultado es 1.02 g/L... la extraccin de la
muestra se realiz 03 das y 13 horas despus del accidente... asi como observa
que el Alcohol consumido... ha podido evaporarse por encontrarse el cadver
sumergido bajo el agua por el espacio del tiempo sealado, lo cual deber ser
explicado adecuadamente... (Sic) y otros; tengo a bien informar lo siguiente:
_________________________________________________________________
Informe N

-2004-DIVSAL-X-DIRTEPOL-SERDOETI.

Asunto

Aclaracin
CLNICA".

sobre

resultado

de

Dosaje

Etlico,"EBRIEDAD

Ref.

Dcto.N 3302-04-DIRSAL/DIVSAL-X-DIRTEPOL.Cs.
Of.N1546-2004-JMA-PJ-YOT.

A mrito de los documentos de la referencia con que se solicita:


"... INFORMAR... la conducta de desobediencia a la autoridad del encausado
Miguel Baca Ccoscco... por el que se le solicit muestras de dosaje etlico, y cul
fue la respuesta de ste......(Sic)"; tengo a bien informar lo siguiente:
1.-

El citado infractor fue sometido a pedido de la autoridad policial- a los


procedimientos para el examen de dosaje etlico (se adjunta la hoja de
datos N 729); habindose negado a la extraccin de la muestra y siendo
calificado el resultado como EBRIEDAD CLNICA.

_________________________________________________________________
Informe N

-2005-CAR FOSPOLI-X-DIRTEPOL-OA.

Asunto

Evaluacin de incompatibilidad de resultados periciales de


Dosaje Etlico.

Ref.

Dcto. N 2605-2005-DIRSAL/DIVSAREG.PNP-CUSCO.
Of. N 516-2005-MP-5TAFPP-CUSCO-FN.

A mrito de los documentos de la referencia con que se solicita


... un informe debidamente sustentado... (Sic) respecto a la incompatibilidad
de los resultados del Examen del Dosaje Etlico practicados por la Sanidad
PNP Cusco y el Instituto de Medicina Legal Lima, realizado en muestras de
sangre e hgado respectivamente- del cadver de Flor de Mara VIVANCO
CARDENAS; tengo a bien informar lo siguiente:
1.-

Se analiza el certificado de D.E. N 277-C. De fecha 17.ABR.2003,


practicado en muestra de sangre extrada del cadver de Flor de Mara
VIVANCO CARDENAS, cuyo resultado es 0.00 g/L. y el Protocolo de
anlisis N 200303007431 de fecha 23.ABR.2003, que informa el
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resultado de dosaje etlico en hgado de la misma occisa por el Instituto


de Medicina Legal Lima, cuyo resultado es: 2.13 G 0/00.

Lo que sigue aqu es desarrollar los aspectos de la literatura cientfica que


ayuden a entender estos aspectos problemticos.
1.2. TOXICOCINTICA DEL ALCOHOL ETLICO:
El comportamiento del txico en el organismo est determinado por los
procesos de absorcin, distribucin, biotransformacin y excrecin (ADME).
La interaccin dinmica de todos los procesos que constituyen el ADME,
determina el tiempo que permanecer un agente dentro del organismo despus de
que ste ha sido expuesto a una dosis determinada. Al estudio de la velocidad de
cambio de la concentracin de las sustancias txicas dentro del organismo se
le conoce como toxicocintica.
Sobre el Alcohol

La estructura molecular del alcohol etlico se compone de carbono, hidrgeno y


oxgeno: C2H5OH
1.2.1.

ABSORCIN
Cuando se consume una bebida alcohlica, pasa a lo largo del esfago,
atraviesa del estmago y dentro del intestino delgado. Aunque una
pequea cantidad de alcohol se absorbe a la corriente sangunea a travs
de la membrana mucosa, la mayora del alcohol entra en la corriente
sangunea a travs de las paredes del intestino delgado. El alcohol es
soluble en agua y la corriente sangunea lleva el etanol rpidamente a
todas partes del cuerpo, donde se absorbe en los tejidos en proporcin a
su contenido de agua.
El alcohol se absorbe en un 20 30% en el estmago y el resto, en el
intestino delgado (duodeno principalmente) todo el alcohol que se ingiere
es absorbido no encontrndose nada del mismo en las heces.
La absorcin del alcohol etlico se da por un mecanismo de difusin
pasiva . La velocidad a la que ocurre la absorcin esta determinada por la
ley de Fick, de forma que la absorcin es mas rpida cuanto mayor es el
gradiente de concentracin a ambos lados de la membrana digestiva y

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

ms amplia la superficie por la que se va a realizar, e inversamente


proporcional al grosor de la membrana a atravesar . otros factores son el
tiempo que permanece en contacto con la mucosa digestiva, el flujo
sanguneo en la zona donde se produce la difusin y el contenido
alimenticio anterior o actual respeto de la ingesta alcohlica.
Uno de los principales factores que modifican la absorcin de alcohol es
la presencia de alimentos en el estomago el cual prolonga el vaciamiento
gstrico y adems facilita que parte del alcohol sea metabolizado por la
pared gstrica. Segn algunos trabajos, la presencia de alimentos en el
estomago es capaz de disminuir el pico sanguneo de alcoholemia desde
9% a 23% (20).
Un elemento a considerar en la rapidez de la absorcin es el grado
alcohlico de la bebida ingerida. Las bebidas que tienen entre 10 y 30 %
v/v de etanol se absorben mas rpidamente que las cervezas (3 a 5 %
V/V) o los vinos ( 10 a 12 % v/v). Las bebidas de muy alta graduacin
(+ 35% v/v) irritan la mucosa gstrica y el ploro produciendo abundante
secrecin mucosa y retrazan la evacuacin.
Factores que Afectan la Absorcin del Etanol (20)
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Concentracin de etanol
Flujo sanguneo al sitio de absorcin
Propiedades irritantes del etanol
Velocidad de la ingesta
Tipo de bebida alcohlica
Alimentos

La absorcin del etanol en el duodeno y en el yeyuno es mucho ms rpida que en el


estmago, por lo que la velocidad de vaciamiento gstrico es un factor determinante
importante en la velocidad de absorcin del etanol administrado por va oral. El etanol
atraviesa membranas biolgicas mediante difusin pasiva, segn su gradiente de
concentracin. Por lo tanto, cuanto mayor es la concentracin de etanol, mayor es el
gradiente de concentracin resultante y ms rpida es la absorcin.
La eliminacin rpida del etanol desde el sitio de absorcin, mediante un flujo sanguneo
eficaz, ayudar a mantener el gradiente de concentracin y as favorecer la absorcin.
El etanol tiene propiedades irritantes y las concentraciones altas pueden causar
erosiones superficiales, hemorragias y parlisis de la musculatura lisa del estmago, lo
que disminuir la absorcin del etanol.
La mxima concentracin sangunea de etanol se alcanza ms lentamente si la bebida
alcohlica se ingiere con rapidez, quizs como reflejo de las propiedades irritantes del
etanol. No obstante, los niveles mximos de etanol sanguneo son ms altos si se
ingiere una dosis de etanol de una sola vez y no en varias dosis pequeas,
probablemente porque en el primer caso el gradiente de concentracin del etanol ser
ms alto.
Ciertos congneres presentes en las bebidas alcohlicas pueden disminuir la absorcin
del etanol; pero no se trata de un efecto significativo. En general, hay poca diferencia en
la velocidad de absorcin de la misma dosis de etanol, administrada en forma de
diferentes bebidas alcohlicas. Esto es importante en
aspectos forenses, esto es, la concentracin sangunea de etanol no vara
significativamente con el tipo de bebida alcohlica consumida.
La presencia de alimentos en el estmago retarda el vaciamiento gstrico y as
disminuye la absorcin de etanol; es el concepto de no beber con el estmago vaco.
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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Estudios recientes indican que las comidas ricas en grasas, hidratos de carbono o
protenas tienen la misma eficacia para retardar el vaciamiento gstrico.

TASAS DE ALCOHOLEMIA SEGN LA DOSIS INGERIDA


(Datos aprox.)
Hombre 70 Kg
0.3 g/l en sangre
0.5 g/l en sangre
Cerveza
Vino
Whisky

1 lata (de 333ml)


1,5 vasos (de 100ml)
1 vaso (de 45ml)

Mujer 60 Kg

0.3 g/l en sangre

Cerveza
Vino
Whisky

0.5-1 lata (de 333ml)


1 vaso (de 100ml)
0.5-1 vaso (de 45ml)

2 latas
2,5 vasos
2 vasos
0.5 g/l en sangre
1.5-2 latas
2 vasos
1-1.5 vasos

http://www.todocamion.com/Contenidos/Legislacion/trafico/Tasasdealcoholemia.htm

35,4 cl 177 ml 44,5 ml (5% p/v 40% 10% p/v)

1.2.2.

LA DISTRIBUCIN
ORGANISMO, (13)

DEL

ALCOHOL

ETLICO

EN

EL

Una vez que el alcohol es absorbido se distribuye por todo el organismo,


se establece un proceso de difusin hstica que vendr regulado por dos
factores, la concentracin de agua y la de alcohol, con respecto a la
sangre. El proceso de reparto se realiza a velocidades muy distintas y no
siempre la concentracin de alcohol responde a la que tericamente le
debera corresponder en funcin de su riqueza de agua.
Dado que la determinacin de alcoholemia es el estudio mas importante
en toxicologa forense y no siempre es posible obtener sangre en buenas
condiciones para el anlisis, se hace preciso conocer cual es la relacin
existente entre alcoholemia y la concentracin del alcohol en otros tejidos
1.

Distribucin del alcohol en el sistema vascular. En las fases de


absorcin se pueden producir grandes diferencias entre la sangre

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

arterial y la venosa. En el cadver la sangre se toma del lado


derecho del corazn que tiene una gran cantidad de sangre
procedente de la vena porta, muy rica en alcohol. Una vez
concluida la fase de absorcin y establecido el equilibrio, las
diferencias no deberan existir.
2.

Distribucin en la sangre. El cociente plasma/ sangre total es de


1.18.

3.

Distribucin en el cerebro. El tejido cerebral tiene menor contenido


de agua (76%) que la sangre (78%) por tanto, el cociente cerebro
sangre es de 0.86.

4.

Liquido cefalorraqudeo. El liquido cefalorraqudeo contiene mas


agua que la sangre por lo que tendr mas alcohol que esta, el
cociente lquido cefalorraqudeo/ sangre es de 1.18.

5.

Concentracin en bilis. Existe una buena correlacin entre sangre y


bilis. El cociente es de 0.92.

6.

Concentracin en humor vtreo. En la fase absortiva de preequilibrio, las concentraciones de alcohol son mayores en sangre
que en humor vtreo; a las dos horas de la ingesta, la concentracin
es idntica; finalmente, la concentracin en el humor vtreo se hace
mayor que en la sangre

Distribucin del Etanol en el Organismo (20)


La concentracin de equilibrio del etanol en un tejido depende del contenido relativo de
agua de ese mismo tejido. La velocidad de equilibrio del etanol con un tejido depende de
lo siguiente:
Permeabilidad (contenido de agua)
Velocidad del flujo sanguneo
Masa del tejido
El etanol es prcticamente insoluble en grasas y aceites, aunque, como el agua, puede
atravesar rpidamente las membranas biolgicas. El etanol se distribuye desde la
sangre a todos los tejidos y fluidos, en proporcin a su contenido relativo de agua. La
concentracin del etanol en un tejido depende del contenido relativo de agua de ste y
alcanza con rapidez el equilibrio con respecto a la concentracin de etanol en el plasma.
No existen protenas plasmticas transportadoras de etanol.
La misma dosis de etanol por unidad de peso corporal puede producir concentraciones
sanguneas de etanol muy diferentes en individuos diferentes, debido a las grandes
variaciones en las proporciones de grasa y agua de sus cuerpos, y el bajo coeficiente de
particin de lpidos:agua en el etanol. Las mujeres generalmente presentan un volumen
de distribucin ms bajo que los hombres debido a su mayor porcentaje de grasa
corporal. En las mujeres, el nivel mximo de etanol sanguneo ser ms alto que en los
hombres al ingerir la misma dosis de etanol en gr por kg de peso corporal, pero no habr
diferencias cuando se administra la misma dosis por litro de agua corporal. El
metabolismo de primer paso del etanol ocurre en el estmago, que puede ser mayor en
hombres y tambin puede contribuir a los niveles sanguneos ms altos de etanol que se
encuentran en las mujeres.
La prueba del aliento para estimar las concentraciones de etanol sanguneo depende de
la difusin del etanol desde la sangre arterial pulmonar hacia el aire alveolar. El vapor del
etanol en el aliento est en

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

equilibrio con el etanol disuelto en el agua de la sangre con un coeficiente de particin


sangre: aliento de 2100:1, aproximadamente.
La interaccin entre la cintica de absorcin, distribucin y eliminacin, determina la
magnitud de la exposicin sistmica al etanol.

El volumen de distribucin es de 0,6 litro/kg. Por lo tanto si se quiere


calcular la cantidad de bebida consumida por un individuo
conociendo la concentracin sangunea podemos aplicar la siguiente
frmula: (7)

CBC (ml / kg )

CS ( gr / l )
PE ( gr / ml ) / VD (l / kg )

Donde CBC es la Cantidad de Bebida Consumida expresada en ml/kg. CS


es la Concentracin Sangunea del alcohol (alcoholemia) expresada en
gr/l. PE es el Peso Especfico del alcohol de 90% donde 1 ml equivale a
0.8 gr. VD es el Volumen de Distribucin del etanol = 0.6 l/kg.
Luego
CBC ( ml / kg )

o sea

CBC

CS ( gr / l )
0.8 gr / ml / 0.6l / kg

CS ( gr / l )
1.3 gr / ml kg / l

Si la alcoholemia (CS) es de por ejemplo 2 gr/l.


Luego ser:

CBC (ml / kg )

2 gr / l
1,5ml / kg
1,3 gr / ml kg / l

Para un adulto de 70 kg ser:


1,5 ml/kg x 70 kg = 105 ml de alcohol.
Esto equivale a 100 ml de alcohol a 90 grados; 200 ml de whisky al 50%
1 litro de vino al 10% y 3 a 5 litros de cerveza al 2 al 3%.
Cmo el alcohol pasa de la sangre al aliento

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

El etanol es un voltil y, como resultado, una cantidad de alcohol, en


proporcin a la concentracin de la sangre, pasa de la sangre a los sacos
de aire alveolar en los pulmones. Esto ocurre de forma parecida a como el
dixido de carbono sale de la sangre alveolar y entra en los pulmones
para ser exhalado del cuerpo. Por lo tanto, es posible analizar una muestra
de aire alveolar para determinar la concentracin alcohlica del aliento y
predecir, con mucha precisin, la concentracin en la sangre en ese
mismo momento.

1.2.3.

METABOLISMO (BIOTRANSFORMACIN).
Metabolismo del Etanol Principios Generales (20)
Los principales sistemas enzimticos responsables de la oxidacin del etanol, que son el
sistema de la alcohol-deshidrogenasa (ADH) y, en menor medida, el sistema de
oxidacin del etanol dependiente del citocromo p450, estn presentes, en mxima
medida, en el hgado. El dao heptico retarda la velocidad de oxidacin del etanol y,
por tanto, su eliminacin del cuerpo. El etanol es un nutriente y tiene valor calrico
(alrededor de 7 kcal/gr; los hidratos de carbono y las protenas producen 4 kcal por gr y
la grasa, 9 kcal por gr); pero, al contrario de los hidratos de carbono (glicgeno en el
hgado y msculo) y las grasas (triglicridos en el tejido adiposo e hgado), que se
pueden almacenar y luego utilizar en caso de necesidad, por ejemplo, en ayuno, el
etanol no se almacena y permanece en el agua corporal hasta que se elimina. Si bien el
metabolismo de los principales nutrientes se realiza bajo control hormonal, por ejemplo,
con insulina/glucagn, leptinas, catecolaminas, hormonas tirodeas, en general, hay
escaso control hormonal que regule la velocidad de eliminacin del etanol. En vista de
estas consideraciones, pesa sobre el hgado una carga importante para oxidar el etanol
y eliminarlo del organismo.
En general, los animales cuyo peso corporal es bajo metabolizan el etanol a velocidades
ms rpidas que los animales ms grandes. Por ejemplo: la velocidad de eliminacin del
etanol en ratones es cinco veces mayor que en seres humanos.
Estas velocidades del metabolismo del etanol se correlacionan con la tasa metablica
basal de estas especies, lo que indica que la capacidad de oxidar etanol es paralela a la
capacidad de oxidar los nutrientes tpicos. Con todo, es importante notar que las caloras
derivadas del etanol se producen a expensas del metabolismo de nutrientes comunes,
puesto que el etanol se oxidar con preferencia sobre
otros nutrientes.

http://www.waisberg.com/Informo4/embriaguez.htm

El metabolismo es el proceso corporal de convertir las sustancias


ingeridas en otros compuestos. El metabolismo tiene que ver con un
nmero de procesos, uno de los cuales es conocido como la oxidacin. A
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17

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

travs de la oxidacin en el hgado, el alcohol se desintoxica y se elimina


de la sangre. Una cantidad muy pequea de alcohol evita el metabolismo
y se elimina, sin cambios, en el aliento, en el sudor y en la orina.
No importa la cantidad que haya sido consumida, el hgado slo puede
metabolizar cierta cantidad de alcohol por hora. La velocidad del
metabolismo del alcohol depende parcialmente de la cantidad de enzimas
metabolizantes en el hgado que vara entre las personas. El alcohol se
metaboliza ms lentamente de lo que se absorbe.
http://www.mifarmacia.es/RecursosyDirecciones/medicamentos
%20alcohol%201.htm
El alcohol se elimina principalmente por biotransformacin a nivel del
hgado. El 90% del alcohol es biotransformado en el hgado, y el otro
10% es biotransformado en otros tejidos como el corazn, cerebro y
pulmn, siendo una pequea parte excretado como tal por el sudor y
orina.
Metabolismo de Primer Paso del Etanol en el Estmago (20)
Una parte del etanol que se ingiere por la va oral no entra en la circulacin sistmica
sino que puede oxidarse en el estmago por accin de isoformas de la ADH, como la s(o m)- ADH-s y la ADH clase I y ADH clase III. Este metabolismo de primer paso podra
modular la toxicidad del etanol, pues su eficacia determina la biodisponibilidad del
etanol.
El etanol pasa rpidamente al duodeno desde el estmago en ayunas. Este hecho
reducir al mnimo el metabolismo de primer paso, por lo que cumple un papel en las
altas concentraciones sanguneas de etanol que se observan en estado de ayuno frente
a cuando se ha comido.
Se ha descrito que este metabolismo de primer paso es bajo en los alcohlicos,
especialmente en las mujeres alcohlicas, debido a baja actividad de la ADH. Lo anterior
puede tener importancia en la mayor sensibilidad al etanol y en las concentraciones
sanguneas de etanol ms altas en mujeres que en hombres, despus de una dosis
equivalente de etanol oral.
Diversos frmacos, entre ellos los bloqueadores de los receptores H2, como la
cimetidina o ranitidina, o la Aspirina, inhiben la actividad de la ADH estomacal. Con esto
disminuir el metabolismo de primer paso estomacal y se elevarn las concentraciones
de etanol sanguneo.
La importancia global del metabolismo de primer paso por el estmago es discutible.
Tambin puede ocurrir metabolismo de primer paso en el hgado, especialmente cuando
el paso del alcohol hacia la vena porta es lento, como ocurre en el estado postprandial.
La contribucin relativa del metabolismo de primer paso del estmago y del hgado no
est definida. La velocidad del vaciamiento gstrico modula el metabolismo de primer
paso gstrico y heptico del etanol.
Frezza y cols. N. Engl. J. Med. 322, 95-9, 1990.
Gentry y cols. J. Lab. Clin. Med. 123, 21-6, 1994; discussion 27.
Ammon y cols. Clin. Pharmacol. Ther. 59, 503-13, 1996.
Levitt y cols. Alcohol Clin. Exp. Res. 21, 293-7, 1997.

METABOLISMO HEPATICO DEL ETANOL. (10)


El hepatocito posee tres vas metablicas para el etanol, cada una de ellas
localizada en un distinto compartimento subcelular (ver esquema):

ADH (alcohol dehidrogenasa), en el citosol

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sistema oxidativo microsomal, en el retculo endoplsmico liso.

catalasa, en los peroxisomas.

El producto metablico de cada una de estas vas es el mismo: el


acetaldehido. En cada va, el receptor de las molculas de hidrgeno es
diferente, as como tambin las consecuencias metablicas.
El acetaldehido es oxidado a acetato en las mitocondrias del hepatocito.
El acetato difunde a la sangre y es metabolizado en los tejidos perifericos
a CO2 y agua.
VAS METABLICAS OXIDATIVAS DEL ETANOL
1.

Va ADH.
La principal va de biotransformacin es a travs de la
alcoholdeshidrogenasa (adh), que es una enzima citoslica que
trabaja con NAD el cual transforma a NADH. Este sistema se satura
rpidamente con el alcohol porque la cantidad de alcohol que se
ingiere es muy alta (10)
La oxidacin del etanol est limitada, generalmente, por la capacidad mxima de
la ADH. La cantidad de
ADH en el hgado es ms alta en estado postprandial que en ayunas, lo que
desempea un papel
principal en la velocidad de oxidacin ms alta en el estado postprandial (20).

Caractersticas
Su funcin es metabolizar la pequea cantidad de alcohol que se
ingiere en alimentos fermentados o por fermentacin en el
intestino.
Tiene alta afinidad, pero baja capacidad: metaboliza la mayor
parte del alcohol, cuando su concentracin sangunea es baja.
No es inducible: no hay adaptacin.
Mayor concentracin en la periferia del acino.
Tambin existe en el estmago y el rin.
La oxidacin mediada por ADH produce acetaldehido,
transfiriendo hidrgenos al cofactor NAD, que es convertido a
su forma reducida NADH.
ADH gstrica: importantes implicancias.
Alto Km: es efectiva a alta concentracin de alcohol; influyen la
graduacin del alcohol y su dilucin con alimentos.
Disminuye la biodisponibilidad del alcohol: barrera protectora en
bebedores moderados.
Efecto del ayuno: vaciamiento gstrico rpido, con menor efecto
protector de la enzima gstrica.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Disminuye en gastrectoma, alcohlicos, medicamentos (aspirina,


bloqueadores H2,) y con la edad.
Efectos metablicos del exceso de NADH (ver esquema):
La gran cantidad de equivalentes reductores sobrepasa la
capacidad del hepatocito para mantener la homeostasis redox y
se producen numerosas alteraciones metablicas:
Hiperlacticidemia: contribuye a la acidosis y reduce la
capacidad del rin para excretar cido rico.
Hiperuricemia: a lo anterior se suma el aumento de la
sntesis de purinas.
Hipoglicemia: bloqueo de la neoglucognesis por
substraccin del piruvato.
Aumento de la sntesis de triglicridos:
a. Aumento del -glicerofosfato y
b. Aumento de la sntesis de cidos grasos.

2.

Ketosis: aumento de ketonas en la mitocondria por exceso


de cidos grasos y depresin del ciclo ctrico por dficit de
NAD.

Aumento del consumo de oxgeno por la mitocondria:


los H2 en exceso provenientes del alcohol son
transferidos a la cadena de transporte de electrones.

Va sistema oxidativo microsomal


Una segunda va pero de importancia menor, es el sistema
microsomal semejante al que se vio con relacin a los otros
frmacos; en este caso se denomina MEOS por Microsomal
Hepato? Oxidation Sistem, y este sistema como todo sistema
microsomal requiere de NADPH que se transforma en NADP y
existe consumo de oxgeno. Este sistema microsomal se induce por
el consumo crnico de alcohol, por lo tanto, adquiere importancia
cuando el consumo de alcohol es crnico o cuando las ingestas son
muy altas (10).
Oxidacin Microsomal (Citocromo P450) del Etanol (20)
El citocromo P450 es una familia de enzimas con grupo hem que participan en la
oxidacin de esteroides, cidos grasos y muchos xenobiticos ingeridos del
ambiente. Los niveles ms altos de citocromo P450 se encuentran en el hgado,
donde se ubican principalmente en el retculo endoplsmico (fraccin
microsomal). Tambin se puede encontrar en las mitocondrias. El P450 funciona
en conjunto con otras enzimas microsomales, como la NADPH-citocromo P450
reductasa y citocromo b5.
Hay varias isoformas de P450; se han identificado ms de 100 familias de genes.
Los P450 se ordenan en familia con base en secuencias homlogas. CYP2E1 es
el P450 con la mayor actividad para oxidar etanol a acetaldehdo. Aparte del
etanol, la CYP2E1 puede oxidar otros mltiples compuestos, tales como la

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20

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

acetona, el benceno y otros alcoholes. No se ha identificado una funcin


fisiolgica clara para el CYP2E1, aunque finalmente puede metabolizar acetona a
glucosa.
La Km de CYP2E1 para el etanol es aproximadamente 10 mM, alrededor de 10
veces mayor que la Km de la ADH para el etanol. A concentraciones bajas de
etanol, la CYP2E1 da cuenta de alrededor de 10% de la capacidad oxidativa total
de etanol del hgado. Sin embargo, considerando su elevada Km, la importancia
de CYP2E1 en la oxidacin del etanol aumenta ante concentraciones sanguneas
de etanol mayores. La oxidacin del etanol aumenta con mayores
concentraciones de ste y probablemente gran parte de este aumento se deba a
su metabolismo por CYP2E1.
Muchos P450 se inducen por sus sustratos; esto ayuda a eliminar xenobiticos
del organismo. Los niveles de CYP2E1 aumentan ante el consumo crnico de
etanol, mediante un mecanismo que se basa principalmente en la proteccin de la
enzima contra la proteolisis de un complejo proteosoma macromolecular. La
CYP2E1 tambin est inducida en diabticos en estado de ayuno y ante el
consumo de ciertos medicamentos, como los pirazoles inhibidores de ADH, y 4metilpirazol. Debido a su inducibilidad, la CYP2E1 puede cumplir un papel
importante en el metabolismo del etanol posterior al consumo crnico, es decir, en
alcohlicos. Se han identificado 13 diferentes polimorfismos de CYP2E1.
Algunos de ellos pueden ser importantes como factores de riesgo de
carcinognesis del tabaco y otrastoxinas, pero no hay evidencia que asocie estos
polimorfismos con la frecuencia de dao heptico alcohlico.
Lieber, C.S. Alcoholism: Clin. Exp Res. 23: 991-1007, 2000.
Koop y Tierney Bio Essays 12: 429-435, 1990.

Caractersticas
Es el sistema de oxidacin del alcohol que pose capacidad
adaptativa: el consumo prolongado de etanol determina la
induccin de una P450 (CYP2E1) especfica (5-10 veces).
Una vez inducido, el sistema oxidativo microsomal constituye la
va metablica principal cuando la concentracin sangunea de
alcohol es alta: si bien el etanol tiene una mayor afinidad por la
ADH, sta se satura rapidamente.
La oxidacin de alcohol en el sistema microsomal produce
acetaldehido, mediante la transferencia de hidrgenos al
cofactor NADP, que es convertido a su forma reducida NADPH.
La proliferacin del retculo endoplsmico liso por consumo
prolongado de alcohol es mayor en la periferia del acino.

Interaccin del alcohol con otros substratos del sistema


microsomal:
La induccin microsomal por consumo prolongado de alcohol no
slo aumenta la oxidacin del alcohol, sino tambin aumenta el
metabolismo de muchos otros susbstratos microsomales,
particularmente medicamentos.
Esto determina una menor efectividad de la dosis habitual de
los medicamentos (cumarnicos, fenitona, tolbutamida,
benzodiazepinas, propranolol, rifampicina, etc.), efecto que
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21

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

se prolonga das o semanas despus de la suspensin de la


ingesta de alcohol.
En contraste, la ingesta aguda de alcohol inhibe el metabolismo
heptico de los medicamentos, por competencia en un proceso
comn con el citocromo P450.
As, por ejemplo, la combinacin de alcohol y
tranquilizantes produce un aumento de la concentracin
sangunea de la droga.
3.

Va Catalasas
Un tercer sistema es el sistema de la catalasa el que slo adquiere
importancia cuando las ingestas de alcohol son muy altas.
Genera H2O2. Su efecto fisiolgico es insignificante.
Cuando se ingiere alcohol, prcticamente no se encuentra
acetaldehdo en la sangre y esto es debido a la gran eficiencia
que posee la aldehidodeshidrogenasa.
Otras Vas Posibles del Metabolismo del Etanol (20)
1.
2.
3.

Reacciones de conjugacin
Etil steres de cidos grasos
Reacciones dependientes de radicales de oxgeno

1.

El etanol puede reaccionar con cido glucurnico o con sulfato para formar
etilglucuronido o etilsulfato.
Estos conjugados solubles se excretan fcilmente. La disponibilidad de
cofactores y la poca afinidad por el etanol que hay en la mayora de las
enzimas de conjugacin limitan estas vas. Se ha propuesto el etilglucuronido
como marcador de consumo alcohlico, porque puede persistir y se puede
detectar por largo tiempo despus de que el alcohol se haya eliminado
completamente del organismo. La deteccin de este metabolito conjugado
del etanol puede servir como marcador para el control de las recadas.

2.

Las enzimas conocidas con el nombre de sintetasa de etilsteres de cidos


grasos (FAEES) pueden catalizar la siguiente reaccin:
CH3CH2OH + RCOOH --> CH3CH2-O-C/R=O
Las FAEES se encuentran en el cerebro, corazn, pncreas y tejido adiposo.
La Km para el etanol es generalmente muy alta. Algunas FAEES son
isoformas de la glutatin transferasa. Las FAEES pueden romper membranas
biolgicas y podran contribuir a la toxicidad del etanol en tejidos carentes de
ADH o CYP2E1.

3.

El etanol es un agente eliminador de radicales del oxgeno y se puede oxidar


a acetaldehdo al reaccionar ante especies con radicales del tipo hidroxilo o
ferrilo:
CH3CH2OH + HO. (or [FeI V=O]) CH3CH(.)OH
Aun cuando no es probable que tengan importancia metablica por su
toxicidad, con estas reacciones es posible generar radicales de etanol, como
el radical 1-hidroxietilo.
Wurst y cols. (2000) Alcohol 20, 111-6.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Laposata, M. Prostaglandins, Leukotrienes and Essential Fatty Acids. 60,


313-5, 1996.
Cederbaum, A. I. (1987) Ann N. Y. Acad. Sci. 492, 35-49.

1.2.4.

Excrecin (13)
La mayor parte del etanol (95%) es metabolizado por la alcohol
deshidrogenasa (ADH), el sistema microsomal de oxidacin de etanol
(MEOS) y por el sistema peroxidasa-catalasa. Una escasa cantidad de lo
absorbido (5%) se elimina de forma no modificada por aire espirado,
orina y saliva. (11 nicarag)
Eliminacin pulmonar. Esta fase es posible gracias a la volatilidad del
alcohol, que sigue un proceso inverso al de la absorcin. Como
mecanismo de eliminacin tiene escaso inters, pues slo un 2 3 % del
alcohol ingerido se elimina por esta va. Pero desde el punto de vista
analtico y judicial es de gran importancia, pues los mtodos de anlisis
incruentos se basan en este principio: determinacin del alcohol presente
en el aire espirado. Se ha calculado que el alcohol presente en 2.000 ml
de aire espirado equivale al que hay en 1 ml de sangre arterial.
Eliminacin urinaria el alcohol difunde a travs del glomrulo y no sufre
proceso de reabsorcin tubular. La concentracin de alcohol en orina
depender de la alcoholemia, pero esta cambia continuamente y la de la
orina no lo hace: la correlacin alcoholemia / alcoholuria no es de 1, sino
inferior.
Eliminacin por la saliva. La cantidad excretada por esta va es nfima,
con todo, el volumen de secrecin salival tiene el mismo inters analtico
que la orina.
El alcohol se elimina por el rin en una proporcin que equivale a 130%
de la sangunea, pero muy diluda. Tambin se elimina por el pulmn y de
all el caracterstico aliento alcohlico, pudiendo realizarse la prueba
denominada Alcotest, utilizada para el control de los automovilistas por
la variacin del color al soplar en un circuito cerrado (prueba
colorimtrica) teniendo presente que existe una relacin entre la
concentracin sangunea y la pulmonar del 1/2000 o sea 0,05% de la
concentracin sangunea. (curci)

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

CAPTULO II
FACTORES, CONDICIONES Y CIRCUNSTANCIAS QUE CAMBIAN LA
RESPUESTA DEL ETANOL EN NUESTRO ORGANISMO Y VICEVERSA.

2.1. FACTORES QUE MODIFICAN LA CINETICA DE ETANOL. (13)

Reuniendo los factores mas habitualmente manejados en la practica toxicolgico


forense que se cuestionan como modificadores de la concentracin de alcohol en
sangre podemos describir los que siguen.
Edad. Entre mayor edad debido a mayor acumulo de tejido adiposo, hay un
volumen de distribucin menor, lo cual facilita que se incremente la alcoholemia
respecto a los sujetos jvenes.
En los que tienen una edad inferior a 13 aos el efecto suele ser el contrario,
disminucin de alcoholemia, por tener un metabolismo de etanol mas eficiente que
el que presentan los sujetos mayores(13).
Los animales muy jvenes presentan velocidades bajas de eliminacin del etanol,
porque la ADH (y CYP2E1) no
estn completamente desarrolladas. El hgado fetal elimina muy mal el etanol, lo
que puede tener consecuencias en el
sndrome alcohlico fetal. Puede haber un pequeo descenso en la eliminacin de
etanol con la edad, quiz debido a una
disminucin de la masa heptica, o del contenido de agua corporal.(20)
Consumo Crnico de Alcohol. Aquellos que tienen una severa afectacin
funcional heptica disminuyen el metabolismo del etanol y tienden a incrementar
la alcoholemia. Mientras que los sujetos metabolitamente acostumbrados con
activacin del MEOS facilitan la biotransformacin y alcanzan niveles sanguneos
menores que los esperados.
Ayuno. La ingesta alcohlica en ayunas origina una alcoholemia superior a la que
se produce con el estomago lleno por una mayor absorcin de etanol en el intestino
al facilitar la evacuacin gstrica y permanecer menos tiempo en el estomago, con
la consiguiente menor actividad metablica de la ADH gstrica.
Sexo. Los niveles de alcohol sanguneo en mujeres son superiores a los alcanzados
por varones a causa de que tienen una mejor absorcin porque presentan escaso
metabolismo gstrico, adems por su mayor proporcin relativa de tejido adiposo
(13).
Las primeras publicaciones, en general, no comunicaron efectos del sexo en la
velocidad de eliminacin del etanol.

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24

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Estudios recientes demuestran una eliminacin ms rpida del etanol en mujeres,


cuando los ndices se corrigen por
masa corporal magra. Como el tamao corporal de las mujeres es ms pequeo y,
por tanto, la masa corporal magra es
menor, la eliminacin del etanol por unidad de masa magra es ms alta en las
mujeres. En hombres y mujeres, en
general, las velocidades de eliminacin son similares cuando los resultados se
expresan en gr/hr o gr/lt de volumen
heptico. Debido al metabolismo de primer paso gstrico, es posible que una dosis
oral de etanol pueda producir una
concentracin sangunea de etanol ms alta en mujeres que en hombres (20).
Tabaquismo. El consumo de cigarrillos disminuye el nivel de alcoholemia al
facilitar el metabolismo del etanol.
Peso. La presencia de abundante tejido adiposo origina una disminucin en el
volumen de distribucin del sujeto lo que conlleva un incremento de la
alcoholemia en comparacin con los sujetos delgados (13).
Raza: La literatura es poco clara. La eliminacin del etanol puede ser ms alta en individuos
portadores de la isoforma b3 de la ADH I, comparada con la isoforma b1(vase diapositiva de los
alelos de la ADH). Algunos estudios, pero no todos, plantean que la velocidad de eliminacin del
etanol sera ms alta en los indios americanos, comparados con los caucsicos. La velocidad de
eliminacin de etanol en chinos es similar a la de los caucsicos. Un estudio comunic que la
velocidad de eliminacin etlica de los afroamericanos es ms baja que en los caucsicos, lo que
refleja un peso heptico ms bajo por unidad de peso corporal. La masa heptica puede explicar las
diferencias tnicas y sexuales en la velocidad de eliminacin del etanol (vase diapositiva relativa al
Metabolismo del Acetaldehdo, en lo referente a las variantes activas e inactivas de la ALDH.
Alimentacin: El metabolismo del etanol es ms alto en estado postprandial que en estado de
ayuno, porque los niveles de ADH son ms altos y la capacidad de los mecanismos de transporte
de sustratos, para llevar equivalentes reductores hacia las mitocondrias, es alta. La comida tambin
puede aumentar el flujo sanguneo heptico. Los alimentos ricos en hidratos de carbono son ms
eficaces para aumentar la eliminacin del etanol que los que son ricos en grasas o en protenas.
Una explicacin de este fenmeno es efecto de la fructosa. La fructosa aumenta el metabolismo
del etanol porque proporciona substratos que ayudan a convertir el NADH a NAD+, y produce ADP,
lo que aumenta la captacin mitocondrial de oxgeno. Los alimentos tambin afectan la absorcin
del etanol (diapositiva).
Ejercicio: Literatura poco clara. En la mayora de los estudios referentes al tema se describe un
leve aumento de la velocidad de eliminacin etlica, tal vez secundaria a un aumento de la
temperatura o de la liberacin de catecolaminas.(20)

Frmacos. La interaccin de frmacos y etanol es habitualmente argumentada


como motivo de modificacin de la alcoholemia, en pocas ocasiones se interpreta
la interaccin en el sentido de potenciar los efectos psicofsicos del etanol.
Las que poseen mayor inters medico legal estn relacionadas con los mecanismos
farmacolgicos que potencian el efecto neurodepresor del alcohol, as ocurre con:
-

Anestsicos.
Antihistaminicos, facilita depresin neurolgica
Barbitricos, aumentan la depresin del SNC.
Benzodiacepinas.
Narcticos (opiceos), potencian depresin respiratoria .
Fenotiacinas, potencia neurotoxicidad de etanol (13).
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25

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Los agentes que inhiben la ADH (pirazoles, isobutiramida) o compiten con el etanol por la ADH
(metanol,
etilenglicol), o los que inhiben la cadena respiratoria mitocondrial disminuirn la velocidad de
eliminacin etlica. En la mayora de los casos, las hormonas no afectan significativamente el
metabolismo del etanol; puede haber un pequeo aumento producido por las hormonas
tirodeas(20).
Interacciones del Alcohol con Drogas (20)
El sistema CYP2E1 puede explicar lo siguiente:
Mayor sensibilidad de los consumidores activos de etanol a determinados frmacos;
Resistencia de los alcohlicos, en ausencia de etanol, a determinados frmacos;
Mayor toxicidad de algunos compuestos qumicos en alcohlicos;
Estrs oxidativo dependiente de etanol;
Puesto que el etanol y ciertos frmacos compiten por el metabolismo del CYP2E1, los bebedores
activos muestran con frecuencia una sensibilidad aumentada a ciertos frmacos, ya que el etanol
inhibe el metabolismo del frmaco y, por lo tanto, prolonga su vida media; .Al contrario, debido a
que la CYP2E1 se induce tras el consumo crnico de etanol, aumentar el metabolismo de ciertos
frmacos que tambin son sustratos de la enzima. Esto disminuir la vida media del frmaco y
reducir su eficacia cuando no hay presencia de etanol;
La CYP2E1 es muy activa y oxida muchos compuestos qumicos a intermediarios reactivos, por
ejemplo,
tetracloruro de carbono, benceno, nitrosaminas, acetaminofeno, halotano. La toxicidad de estos
agentes
est aumentada en alcohlicos;
El ciclo cataltico de recambio de la CYP2E1 lleva a la produccin de una cantidad relativamente
grande
de intermediarios del oxgeno, como el radical superxido y el perxido de hidrgeno. Esto puede
ser
importante en los mecanismos de dao heptico alcohlico en que hay estrs oxidativo.
Lieber, C.S. Physiol Rev 77: 517-544, 1994.
Koop, D.R. Faseb J. 6: 724-730, 1992.
Dai. et. al. Biochemistry 32: 6928-6937, 1993.
Cintica de Eliminacin del Etanol in vivo (20)
En un principio se pens que la eliminacin del etanol era un proceso de orden cero, lo que significa
que el etanol se elimina del organismo a velocidad constante, independiente de la concentracin del
etanol.
Numerosos estudios han demostrado un descenso lineal de la concentracin sangunea de etanol
en el tiempo. Ya que el Km de la ADH es bajo en el etanol (aproximadamente 1 mM), la ADH se
satura a concentraciones relativamente bajas de etanol; por esto, el proceso global de eliminacin
procede a velocidad mxima y es independiente de la concentracin del etanol.
Esta linealidad no se observa con concentraciones bajas de etanol, ya que en estas condiciones la
ADH no se encuentra saturada de etanol. En este caso, la eliminacin del etanol sigue la cintica de
Michaelis-Menten; la velocidad de cambio en la concentracin del etanol depende de la
concentracin del etanol y de las constantes cinticas Km y Vmx.
Adems, puesto que el metabolismo del etanol mediante CYP2E1 refleja una Km alta del sistema
etlico, se puede observar una velocidad de eliminacin etlica dependiente de la concentracin, con
velocidades ms altas de eliminacin a concentraciones sanguneas ms altas. Estas ltimas estn
exageradas luego del consumo crnico de etanol, ya que se induce el sistema CYP2E1 con Km
alta. Debido a esta dependencia de la concentracin, no es posible estimar un valor nico de la
velocidad del metabolismo etlico.
En algunos estudios referentes a eliminacin, pero no en todos, se ha observado metabolismo de
etanol dependiente de la concentracin. Algunos estudios han comunicado un descenso ms rpido
de la concentracin sangunea de etanol con inicio ms precoz, inmediatamente despus de haber

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26

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

alcanzado la concentracin sangunea mxima de etanol, lo que puede reflejar ya sea un


metabolismo etlico dependiente de concentracin o bien una reoxidacin ms rpida del NADH.
Si bien las velocidades varan ampliamente, la capacidad metablica promedio de eliminar el
etanol del organismo es aproximadamente 170 a 240 g/da en una persona que pesa 70 kg. Esta
cifra sera equivalente a una velocidad metablica promedio de alrededor de 7 g/hr, lo que equivale
a un trago por hora. Como los alcohlicos pueden consumir 200 a 300 g de etanol/da, el
equivalente de 1400 a 2100 kcal, disminuye significativamente el consumo de nutrientes normales
(generalmente 2000-3000 kcal consumidas por da).

2.2. LOS FACTORES QUE INFLUYEN SOBRE LA ABSORCIN Y EL


METABOLISMO
Un nmero de factores influye sobre el proceso de la absorcin, como la presencia
de comida y el tipo de comida dentro de las vas gastrointestinales cuando se
consume alcohol. La velocidad a la cual se absorbe el alcohol depende de lo rpido
que el estmago vaca su contenido al intestino. Cuanto ms alto sea el contenido
de grasas, ms tarda el estmago en vaciarse y ms largo es el proceso de
absorcin. Un estudio encontr que los sujetos que beban alcohol despus de una
comida que inclua la grasa, la protena y los hidratos de carbono absorban el
alcohol alrededor de tres veces ms lentamente que cuando consuman alcohol con
el estmago vaco.
El gnero Las mujeres absorben y metabolizan el alcohol de una manera diferente
de los hombres. Tienen concentraciones de alcohol en la sangre ms altas despus
de consumir la misma cantidad de alcohol que los hombres y son ms susceptibles
a las enfermedades del hgado y daos a los msculos del corazn y al cerebro
relacionados con el alcohol. La diferencia entre las concentraciones de alcohol en
la sangre de las mujeres y de los hombres ha sido atribuida a la menor cantidad de
agua del cuerpo femenino, y es comparable a verter la misma cantidad de alcohol
en un cubo de agua ms pequeo. Otro factor que contribuye a la diferencia de la
concentracin de alcohol en la sangre puede ser que las mujeres tienen una
actividad ms baja de la encima HDA en el estmago, lo cual hace que una
proporcin ms elevada del alcohol ingerido alcance la sangre. La combinacin de
estos factores puede hacer a las mujeres ms vulnerables que los hombres a los
daos de hgado y corazn relacionados con el alcohol.
Si la cantidad de etanol ingerido no es grande, la oxidacin del alcohol puede ir a
la misma velocidad que el etanol en la corriente sangunea, y la concentracin
alcohlica no subir (la velocidad aproximada de oxidacin del etanol de un ser
humano de 75 kg es 14,8 ml de etanol por hora, que corresponde a 35,4 cl de
cerveza, 177 ml de vino o 44,5 ml de licor). No obstante, si la ingestin de alcohol
es mayor que la a la que el bebedor puede metabolizar, subirn las concentraciones
alcohlicas de la sangre y del aliento de dicho bebedor.
2.3. INTERACCIN ENTRE EL ALCOHOL Y LOS MEDICAMENTOS
En medicina legal los letrados suelen solicitar informes a los forenses sobre la
posible influencia de medicamentos en el resultado de la prueba de alcohol a que
se han sometido sus defendidos.
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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

El consumo de alcohol esta muy difundido entre la poblacin. Es sabido que no se


puede beber alcohol cuando se toman medicamentos. Estos pueden aumentar la
absorcin del alcohol, inhibir las enzimas que lo metabolizan y as aumentar su
concentracin o pueden interactuar farmacodinmicamente y generar efectos
perjudiciales.
Todo con graves consecuencias para la salud...
La asociacin entre el alcohol (etanol) y los medicamentos puede tener 3 tipo de
alteraciones principalmente: aumentar la concentracin de alcohol en la sangre.
interferir en la absorcin y accin del medicamento en el organismo. provocar
interacciones entre ambos y alterar la accin del medicamento. Las alteraciones
pueden ser agudas cuando ambos se ingieren juntos o producirse como
consecuencia de la ingesta crnica de alcohol
La tasa de absorcin depende de la velocidad de vaciado gstrico entre otras cosas.
Por lo tanto la farmacocintica del alcohol se puede modificar por medicamentos
que alteren la velocidad del vaciado gstrico o por aquellos que interfieran en su
metabolismo.
2.3.1.

MEDICAMENTOS QUE ALTERAN LA ACCIN DEL ALCOHOL


AL MODIFICAR LA VELOCIDAD DE VACIADO GSTRICO.
Los medicamentos que reducen la velocidad del vaciado gstrico, como
los antiespasmdicos u opioides (analgsicos potentes), reducen la
absorcin del alcohol. Los medicamentos que aceleran el vaciado
gstrico, pero prolongan el trnsito intestinal aumentan su absorcin. En
este grupo encontramos algunos antibiticos, antialrgicos y anticidos.

2.3.2.

MEDICAMENTOS QUE ALTERAN LA ACCIN DEL ETANOL


POR CAMBIOS EN EL METABOLISMO DEL MISMO.
Hay medicamentos que inhiben la enzima deshidrogenasa alcohlica que
lo metaboliza, aumentando su concentracin y permanencia en la sangre.
El efecto ocurre cuando se ingieren juntos o con varias horas de
diferencia. Entre ellos se destaca, cido acetil saliclico, y el
metronidazol.
Hay otros que aumentan la concentracin de acetaldehdo (resultado del
metabolismo del alcohol), este metabolito causa una sensacin de intenso
calor, sofocos, y malestar general. Entre ellos encontramos algunos
antibiticos del tipo de las cefalosporinas, antimicticos, antidepresivos y
algunos hipoglucemiantes usados en el tratamiento de la diabetes tipo 2.
En el caso de los hipoglucemiantes potencia sus efectos, llevando a una
hipoglucemia grave y prolongada que puede llevar a la muerte.

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28

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

2.3.3. MEDICAMENTOS CUYA ABSORCIN, TRASFORMACIN Y


ELIMINACIN ESTA ALTERADA POR EL ALCOHOL.
En este aspecto la ingesta aguda tiene diferentes consecuencias a la
ingesta crnica.
Si una persona que no bebe toma una dosis txica de paracetamol junto a
un exceso de alcohol, el riesgo de intoxicacin es mnimo por que se
inhiben mutuamente. En cambio si un alcohlico crnico recibe una dosis
alta de paracetamol aumenta la toxicidad y el riesgo de insuficiencia
heptica grave.
Tambin en este grupo encontramos algunos antibiticos, analgsicos,
anticoagulantes, antidepresivos y anestsicos.
Es sabido que los alcoholistas son muy difciles de sedar y se necesitan
mayores dosis de drogas anestsicas. Las mujeres posmenopusicas que
reciben tratamiento hormonal de sustitucin con estrgenos, aumentan la
concentracin de estos en sangre cuando ingieren alcohol.
Los medicamentos que actan en el sistema nervioso central,
benzodiacepinas y antidepresivos, entre otros, tambin tienen interaccin
con el alcohol. El efecto con ellos puede durar hasta varios das. En
algunos pacientes se potencian al sumar sus efectos, en cambio en otros
pueden provocar depresin.
EN CONCLUSIN, las interacciones medicamentosas con el alcohol
pueden ser graves.
Nuestro consejo es prevenir estos riesgos y no ingerir bebidas alcohlicas
cuando se reciben medicamentos.
La etanolemia varia segn diferentes factores dietticos, genticos,
hormonales y farmacolgicos. En general aumentan la absorcin y su
nivel sanguneo: el mayor flujo sanguneo esplcnico, la bebidas de
moderada graduacin (vinos), la motilidad intestinal aumentada, el
ayuno, la ingestin de alimentos en pequea cantidad, los alimentos ricos
en hidratos de carbono, despus de ciruga gstrica. Por otro lado
disminuyen la absorcin o los niveles de etanol: las bebidas de alta
graduacin (inhiben la motilidad intestinal), el aumento del pH gstrico,
la ingestin de grandes comidas, algunos aminocidos (asparagina,
alanina, fenilalanina, glutamina a etc), el aumento de la diuresis.
Tambin la actividad de la alcoholato deshidrogenasa est disminuida tras
ayunos prolongados, los regmenes hipocalricos o pobres en protenas,
carencias de zinc, la ingestin de pirazolonas. El glucagn, la
hipofisectoma y la tiroidectoma aumentan la actividad de la alcoholato
deshidrogenasa. El sistema microsomal de oxidacin del etanol es
I CURSO DESCENTRALIZADO EN PERITAJES CRIMINALSTICOS 2005

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

inducible por la ingestin crnica de alcohol etlico y por la toma regular


de ciertos inductores enzimticos (fenobarbital, fenitoina, rifampicina).
La actividad de la acetaldehido-deshidrogenasa disminuye en caso de
enfermedad heptica con el consiguiente aumento de la concentracin
sangunea de acetaldehido. La oxidacin del alcohol esta aumentada
cuando aumenta la regeneracin de NAD como sucede tras la ingestin
de glucosa o por el esfuerzo muscular.
Tambin existen factores genticos: en extremo oriente existen
poblaciones con dficit de ALDH2 mitocondrial (el 40% de los Japoneses
tienen dficit y son mas susceptibles a los efectos del alcohol,
especialmente el enrojecimiento facial), que tiene una alta afinidad por el
acetaldehido con el consiguiente aumento de los niveles de este lo que
provoca un efecto antabus.

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30

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

CAPITULO III
ALCOHOL Y ALTURA

(8) El alcohol forma parte del grupo de los frmacos depresores, compartiendo
por ende las propiedades fisicoqumicas y funcionales de otros componentes del grupo,
como los anestsicos voltiles. Estos deben administrarse en la altura en mayor
concentracin que a nivel del mar, para mantener presiones parciales arteriales
suficientes para producir anestesia. Esta condicin no es vlida para los opiceos como
medicacin pre anestsica, pues su efecto supresor de la hiperventilacin puede
producir cianosis y taquicardia significativas Tampoco es vlida para otros
neurodepresores como el Pentobarbital que, administrado a cobayos de Cerro de Pasco, a
igualdad de dosis que a nivel del mar, produjo una anestesia ms prolongada y profunda
lo que hara suponer que el efecto depresor del alcohol se produce a menores dosis
en la altura. Esto ultimo, estara en abierta contradiccin con la afirmacin popular
que los efectos del alcohol son menores en la altura que a nivel del mar.
A pesar del efecto de anoxia histotxica del alcohol no se observa que esto se
vea favorecido en la altura por el efecto aditivo de la hipoxia. Por el contrario, a la
observacin comn del menor efecto del alcohol en la altura, se suma el hallazgo de
menores niveles de alcoholemia en sujetos expuestos a la hipoxia con relacin a los del
nivel del mar, a dosis equivalentes por va oral.
Experimentos con alcohol y altura se han realizado en animales y humanos
usando alturas simuladas (cmaras de baja presin), en exposiciones agudas a la altura
y en sujetos o animales aclimatados; encontrndose algunas explicaciones parciales
con resultados contradictorios.
Los primeros estudios se remontan a 1936 en que MAC FARLAND y FORBES
estudian las concentraciones de alcohol en sangre a nivel del mar y en la exposicin
aguda a la altura en dos individuos de la costa, encontrando una elevacin ms rpida y
niveles ms altos en la altura.
NEWMAN en 1949 afirma que los efectos intoxicantes del alcohol pueden
acrecentarse por una baja tensin de oxigeno, pues encuentra que una concentracin de
alcohol en sangre, incapaz de producir signos visibles a nivel del mar, puede
producirlos a una altura simulada de 18,000 pies, a pesar que la alcoholemia a este nivel
es menor que a nivel del mar.
HIGGINS y col. en 1970 encuentran que a altas dosis de alcohol (2.5 mi de 100
Proof Bourbon por Kg de peso) se producan mayores concentraciones en sangre a
20,000 pies que a 12,000 pies. Adems hay trabajos sobre exposicin aguda a la altura y
consumo de alcohol, pero relacionados a performance durante vuelos en avin,
encontrando que niveles muy por debajo de 150 mg/dL tienen efectos adversos, los que
comparados con el comportamiento de automovilistas, muestran que solo la cuarta parte

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31

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

de la cantidad de alcohol que afecta a un automovilista seria capaz de alterar el


comportamiento de vuelo en avin.
Trabajos posteriores (19) encuentran que administrando iguales dosis de
alcohol a carneros a nivel del mar y altura, por va endovenosa para suprimir la
influencia de la absorcin gastrointestinal, las concentraciones de alcohol son menores
en altura que a nivel del mar, atribuyendo las diferencias encontradas a una
hipervolemia de los carneros de altura (19). En humanos se trabaj con dosis iguales de
alcohol por va oral (11), sugiriendo una diferencia en la distribucin del alcohol en la
altura, como causa de las menores concentraciones encontradas.
El alcohol se distribuye en proporcin al contenido de agua de los diferentes
rganos y tejidos, este proceso es mucho ms rpido en los rganos con mayor
vascularizacin y flujo sanguneo como el cerebro y los pulmones, donde se alcanza las
mayores concentraciones iniciales.
No esta claro aquello de que hay una mayor dilucin en el individuo de altura
como causa de las menores concentraciones encontradas, pues se ha reportado que la
media del agua total en un grupo de personas a nivel del mar es 55% de su peso
ligeramente diferente al 60% del total del peso en los sujetos de altura (46) (51).
Los componentes del medio ambiente en altura como el bajo suministro de
oxigeno, el fri y lo escabroso del terreno, condicionaran un estado de stress en la
fisiologa del organismo animal, pudiendo alterar los estados metablicos. La
aclimatacin al fro induce a una mayor actividad de la succinatodeshidrogenasa y
succinoxidasa
en
animales aclimatados, lo que indica un potencial de oxidacin
aumentado de los intermediarios del Ciclo de Krebs.
El stress induce cambios en el metabolismo; en trabajos con ratas se encontr
altos niveles de actividad de ADH como respuesta al stress, observndose en hgado y
pulmn niveles incrementados de NADH y ADP.
Sin embargo, la exposicin a la altura simulada y/o alcohol en ratas, no tiene
efecto significativo sobre la ADH . Por otro lado, la actividad de la ALDH heptica
disminuye con la altura simulada, efecto que es abolido por el consumo de etanol. Los
cambios hepticos de la ALDH por la altura simulada pueden explicarse como resultado
de una reduccin inadecuada del cofactor NAD+ por una baja oxigenacin durante la
hipoxia.
Tambin se ha demostrado que la exposicin aguda a la altura causa niveles
elevados de piruvato y lactato que disminuyen significativamente con la aclimatacin
Los tejidos de animales de altura tienden a poseer una mayor capacidad
oxidativa que los del nivel del mar. La actividad de ciertas enzimas esta favorecida
desde el punto de vista cintico por el incremento en la concentracin de pigmentos
respiratorios. As, el sistema DPNH-oxidasa presenta un incremento de actividad en
msculo de animales en altura, dependiendo del carcter rojo del tejido.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Los trabajos descritos revelan en la mayora de los casos un incremento en la


actividad enzimtica en la altura, aunque cuando se trata de ADH, enzima que oxida en
mayor proporcin al etanol, no hay cambio significativo con la altura y el consumo de
etanol .

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

CAPITULO IV
ASPECTOS IMPORTANTES PARA EL DIAGNSTICO DE LA
INTOXICACIN ETLICA

CONSIDERACIONES FORNSICAS:
La concentracin del alcohol en la sangre o el aire expirado tiene gran
importancia para determinar el grado de intoxicacin alcohlica de un individuo y su
habilidad de conducir un automvil. En algunos casos es necesario calcular la
concentracin de alcohol dos horas antes que la obtencin de la muestra.
Existe un desfase en el tiempo desde que un individuo ha consumido alcohol
hasta que se llega a su concentracin mxima en la sangre o aliento. Existen varios
factores que pueden determinar la absorcin, y en un estudio los niveles mximos de
alcohol se encontraron entre los 17 minutos y 130 minutos con una media de 57 minutos
en hombres y 42 en mujeres. Si absorcin no es completa, es probable que los valores
sanguneos mximos no hayan sido logrados.
Debido a diferencias genticas y medioambientales la velocidad de eliminacin
del alcohol puede variar hasta 3-4 veces. En un estudio controlado, que la disminucin
de la cantidad de etanol en mg/hora se determin en 230 litros de aire expirado esta vari
entre 5.9 y 27.9. La ingesta de comida tanto como el sexo determinan la velocidad de
absorcin. La relacin entre la concentracin de alcohol en sangre y el aire expirado es
1:2300, es decir en este estudio 230 litros de aire corresponden a 0.1 lt de sangre (100
ml).
4.1. COEFICIENTE DE ETILOXIDACION
Cuando se estudian las alcoholemias se ve que van aumentando los niveles de
alcohol obtenindose una concentracin mxima alrededor de los 60 a 90 minutos
despus de su ingesta y luego desciende en forma lineal hasta llegar a una
concentracin sangunea de 0.1gr/lt, y en este momento la curva se hace
asinttica. Esto se debe a que el alcohol satura el sistema de enzimas ya que la
cantidad de alcohol que se toma para poder tener efecto es muy alta.
El hecho de que la curva de descenso sea lineal indica que el alcohol es eliminado
siguiendo una cintica de orden 0, lo que significa que se est eliminando una
cantidad constante de alcohol que se estima en alrededor de 7 a 10 gramos de
alcohol por hora, los que en un individuo son 100 a 120 mg/kg./hr. Basta con que
se desature la enzima para que la eliminacin siga una cintica de primer orden.
La determinacin de las alcoholemias se basa en que el alcohol es eliminado
siguiendo una cintica de orden 0, de tal forma que si hay un accidente de trfico
en un determinado momento (t1), y la determinacin de la alcoholemia se le
realiza un tiempo despus (t2) por extrapolacin se podr saber que alcoholemia

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34

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

tena en t1. Importante es recalcar que este mtodo es slo una medida de
aproximacin ya que puede ser que los niveles plasmticos aun no se encuentren
en la parte lineal de la curva, pero nosotros lo interpretamos como si as fuera.
ATA. Boletn de la Asociacin Toxicolgica Argentina. Versin grfica: ao 17, N
63. Abril 2004.

MINIREVISIN.
Alcohol etlico. Aspectos toxicolgico-forenses, clculos retrospectivos y
modificaciones postmortem.
Luis Alberto Ferrari
Jefe del Laboratorio de Toxicologa y Qumica Legal, Direccin General de
Asesoras Periciales de la Suprema Corte de Justicia de Buenos Aires. 41 y 119,
(1900) La Plata.
E-mail: laferrari@unimoron.edu.ar
La determinacin de alcohol etlico en humores y tejidos humanos es una de las
prcticas analticas ms frecuente en un laboratorio forense.
Su determinacin posee consecuencias legales importantsimas, tanto en
individuos vivos (conductores de vehculos bajos los efectos del alcohol,
accidentes laborales y lesiones graves, entre otros) como en casos postmortem
(muertes violentas, incluidos suicidios, violaciones o abusos deshonestos).
Se sabe desde hace siglos que el etanol puede producir en el hombre formas
clnicas del estado de inconsciencia, hallndose abundantes datos estadsticos que
avalan su importancia crimingena. (Ferrari et al, 1997; Folino, 2004). En Estados
Unidos el 50% de los accidentes automovilsticos fatales involucraban personas
que conducan bajo los efectos del alcohol (Garriot, 1998). En nuestro medio,
Goldaracena y col. (2001) ofrecieron una contribucin donde se determin el
tenor de etanol en aire espirado en conductores de vehculos, comprobando que el
16 % de los casos presentaban positividad al test.
Cabe sealar que los efectos txicos del alcohol no se limitan a consideraciones
meramente forenses. A los ya conocidos efectos clnicos adversos, agudos y
crnicos, se agregan estudios epidemiolgicos recientes, donde se vincula
inequvocamente el consumo de alcohol con un incremento en el riesgo de cncer
y otras patologas en distintas localizaciones extrahepticas.
Curvas de absorcin-eliminacin de etanol en sangre y clculos de alcoholemia
retrospectiva.
Widmark en 1932, haba enunciado que el metabolismo del alcohol transcurra
orgnicamente a una velocidad constante, pero lentamente; agregando el clebre
Nicloux, que suceda independientemente de la concentracin. Widmark haba
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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

calculado adems que la velocidad de metabolizacin era de 0.15 gramos de


alcohol por litro de sangre y hora (Abel, 1934). La ecuacin generada a partir de
sus estudios es, ampliamente utilizada con fines forenses.
Principalmente se aplica para: 1) Estimar la cantidad de bebida alcohlica ingerida
a partir del conocimiento de la concentracin etlica en sangre. 2) Conocer el tenor
de alcohol en sangre en un tiempo t anterior a la toma de muestra (clculo
retrospectivo o retrgrado) y 3) Efectuar proyecciones sobre el guarismo en
sangre segn las cantidades de etanol ingeridas.
A continuacin describimos brevemente aspectos toxicocinticos que nos
ayudarn a interpretar la curva de absorcin - eliminacin
El alcohol contenido en las bebidas alcohlicas se absorbe preferentemente por el
yeyuno-ileon, alcanzando rpidamente el torrente sanguneo dada su fcil difusin
por las membranas biolgicas. La ingestin anterior o simultnea de alimentos
slidos hace ms lenta la absorcin y el ayuno la acelera.
La desintoxicacin metablica es progresiva, y dura aproximadamente unas 18
horas. El ritmo de eliminacin depende del coeficiente de etiloxidacin, que
expresa la cantidad de alcohol eliminado por minuto y por kilogramo de peso en
un sujeto dado, cualquiera sea su concentracin: este coeficiente es llamado
constante de Widmark.
El siguiente grfico ilustra una curva tpica de absorcin - eliminacin, mediante
las determinaciones de etanol en sangre (alcoholemia), y el tiempo transcurrido
desde el acto de ingesta.

La primer parte indica una alcoholemia ascendente, que se manifiesta en la etapa


de absorcin de alcohol desde el tracto gastrointestinal a la sangre. Si la absorcin
es rpida (como sucede con las bebidas de alta graduacin alcohlica o la libacin
en estado de ayunas) la curva de absorcin semejar ms una vertical (lnea trazos
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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

cortados). Caso contrario, por ejemplo cuando se encuentran alimentos en el


estmago al momento de la libacin, poseer menor pendiente (lnea de puntos).
La zona de meseta indica un equilibrio entre el ingreso por difusin y eliminacin
oxidativa.
Prolongando hacia atrs la lnea correspondiente a la eliminacin, hasta cortar el
eje de ordenadas, obtendremos el valor Co, correspondiente a la alcoholemia
mxima terica, suponiendo absorcin inmediata y total de todo el alcohol. Este
valor debera ser igual a la dosis de etanol tomada por kilogramo de peso del
individuo. Pero experimentalmente se comprob que esto no sucede sino que la
relacin D/Co es 0.7 para hombres y 0.6 para mujeres, debido a la desigual
distribucin del etanol en los diferentes tejidos corporales. Esta relacin D/Co
suele referirse como el volumen de distribucin. El coeficiente (en el grfico)
puede obtenerse mediante la relacin: C/t, es decir, = C/t.
La importancia del coeficiente radica en que permite efectuar clculos
retrgrados de alcoholemia y determinar el alcohol ingerido por un individuo.
Repetto (1995) considera que para aplicar los clculos de alcoholemia
retrospectiva, conforme al espritu del Derecho y no perjudicar al acusado se
puede tomar el valor mnimo de = 0.1 gramo por mil, si esta expresado en horas;
o bien 0.002, si esta expresado en minutos.
En un principio se crey que era constante, pero con el tiempo, los estudios
experimentales arrojaron nueva luz, en relacin con la verdadera cintica que
presenta el alcohol etlico. Hoy se admite que los ejercicios, la sudoracin, la
concentracin de alcohol que se alcanza en sangre y la habituacin, las lesiones
hepticas y renales, entre otros factores, pueden variar el valor de la constante .
Es importante tener en cuenta que los clculos donde involucramos , slo tienen
validez en la etapa de eliminacin, es decir, en la rama descendente de la curva
absorcin - eliminacin.
Existe discrepancia entre los autores sobre la exactitud de los clculos
retrospectivos. Algunos (Dubowski et al, 1990; Simpson, 1992) indican que los
numerosos factores que influyen en , no proporcionan datos fidedignos para
aplicarlos matemticamente con exactitud. En cambio Montgomery y Reasor
(1992) apoyan la validez del clculo pero advierten la necesidad de efectuar dos
determinaciones de alcoholemia sucesivas, para asegurar que se est en la etapa
neta de eliminacin.
Guldberg & Jones (1994), ofrecen una contribucin interesante donde reevalan la
ecuacin de Widmark. Sobre la base de una medicin simple de etanol en sangre
entera, los autores estiman la cantidad de alcohol ingerida con un error de +/-20%,
utilizando un mtodo basado en la propagacin del error que baja el rango de
incertidumbre respecto del mtodo original de Widmark. Otro aporte que parece
oportuno consignar en este trabajo es que los clculos de las constantes beta y r,
deducido del estudio en 108 bebedores con cantidades conocidas de alcohol
etlico, arrojan resultados promedio similares a los que son utilizados en nuestro

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

medio para el anlisis retrospectivo. Esto es r = 0.68 0.061 y = 13.3 2


mg/dl/h (o como es usado en nuestro laboratorio: 0.0022 0.0003 g/L/min.),
poniendo nfasis en la necesidad de reportar el grado de incertidumbre (error) en
el clculo para propsitos legales.
Antes de entrar en las expresiones matemticas y los procedimientos que se
realizan para obtener el resultado de una alcoholemia un tiempo t anterior a la
toma de muestra, cabe sealar que en realidad la eliminacin no sigue una cintica
lineal de orden cero o lineal sino slo para concentraciones de etanol en sangre
superiores a 0.5 ml de alcohol etlico por litro de sangre. En el rango indicado, es
decir para alcoholemias bajas, la cintica es un proceso exponencial o con cintica
de Michaelis-Menten (Jones, 1991; Repetto, 1995).
En el primer caso, por saturacin del sistema ADh-NAD, la ecuacin viene dada
por:
Ct = Cm - kt
En el segundo,
-C / t = Vmx C (Km + C)
siendo Ct: alcoholemia al tiempo t, con Cm: alcoholemia mxima y, Km:
Constante de Michaelis, que oscila entre 2 y 2.4 mM.
En juicios por homicidio, lesiones graves, etc. el magistrado y ahora en nuestra
provincia tambin el fiscal (quien dirige la investigacin preliminar preparatoria
antes de su elevacin a juicio) suele requerir del perito el clculo de alcoholemia
retrospectiva al momento del hecho.
Esto evidentemente es as por una circunstancia que se da con mucha frecuencia:
el imputado es detenido varias horas despus del hecho delictivo por lo que las
muestras sanguneas no reflejarn el tenor real de alcohol al momento del hecho.
Si la alcoholemia supera el valor de 1 por mil, bien puede simplificarse el clculo
aplicando la ecuacin correspondiente a una eliminacin de orden cero, es decir,
lineal.
Si observamos la curva de eliminacin podemos aplicar el concepto geomtrico de
la tangente del ngulo (cateto opuesto / cateto adyacente) es decir:
Ct - Cm
= tg =
t2 - t1
despejando:
Ct = Cm + t
siendo Ct: alcoholemia en el momento del hecho, Cm: alcoholemia en el momento
de la toma de muestra y t: tiempo transcurrido desde el momento del hecho al de
la toma de muestra (t2 - t1).
Respecto de la cantidad de alcohol A en el organismo al momento del hecho:
A = Ct p r
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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

siendo p: peso del individuo, r: constante que relaciona la concentracin de etanol


en el cuerpo / concentracin en sangre.
Sustituyendo en la ecuacin la expresin correspondiente a Ct, hallada ms arriba:
A = (Cm + t) p r
A continuacin, mediante un ejemplo hipottico, procederemos a calcular la
alcoholemia retrospectiva y la cantidad de alcohol en el cuerpo, que nos permitir
inferir cuanta bebida alcohlica de una graduacin determinada pudo haber
incorporado el imputado a su organismo en el momento = del hecho delictivo.
Supongamos que se trata de un caso de lesiones graves. El imputado es detenido y
la muestra de sangre extrada seis horas despus del hecho. El informe de
laboratorio arroja el siguiente valor: 1.2 g de alcohol etlico por litro de sangre.
Aplicando la frmula para obtener la alcoholemia en un tiempo t de seis horas:
Ct = Cm + t
Cm: en gramos por 1000
: 0.0025 en g / min kg
t: tiempo en minutos.
Ct = 1.20 + 0.0025 360
Ct = 1.20 + 0.90
Ct = 2.10 g por 1000 g de sangre
Este valor de 2.10 g por 1000 ser la alcoholemia terica en el momento del
hecho, si aseguramos que estamos en la etapa de eliminacin, mediante una
segunda extraccin
sangunea a la hora aproximadamente.
Si ahora aplicamos la ecuacin para A (cantidad de alcohol), sabiendo que el
imputado pesa 70 kilos y posee una constitucin atltica (r = 0.67):
At = 2.10 70 0.67
At = 98.49 gramos de alcohol etlico absoluto o 123 ml (pasando a ml por la
densidad de etanol
=0.8)
Este ltimo dato es interesante cuando queremos referir la cantidad de bebida que
supuestamente habra ingerido. Si se tratara de vino (considerando una graduacin
para vinos de 10 grados) implica que debi haber ingerido 1.230 ml, es decir casi
una botella y cuarto de vino comn. Debe recordarse que el modelo es
aproximado, algunos autores han expresado que el error con que se trabaja en la
prctica es de 20%. No obstante, si la alcoholemia es superior a 1.5 g/1000, a los
efectos de la interpretacin el guarismo no ser objetable.
Factores involucrados en la prdida y generacin de etanol en tejidos y humores
humanos.
En todas las estimaciones y clculos de alcoholemia, hay que considerar las
prdidas de etanol que pueden operarse por la preservacin indebida de la sangre.
En el laboratorio, nosotros hemos podido comprobar que las mayores prdidas se
deben a la existencia de una cmara de aire importante entre la muestra contenida
I CURSO DESCENTRALIZADO EN PERITAJES CRIMINALSTICOS 2005

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

en el recipiente y la capacidad de ste. Es decir, que las matrices hemticas


escasas en recipientes de gran volumen pierden etanol por evaporacin. La misma
apreciacin tienen Anderson y Prouty (1996) y Parsons (2002). Por tanto, debe
tenerse muy en cuenta este hecho a la hora de evaluar guarismos de alcohol
emanados del anlisis qumico.
Los trabajos sobre prdidas por fenmenos putrefactivos son controvertidos.
Algunos autores, entre otros el toxiclogo estadounidense Charles Winek, opinan
que dichos fenmenos no influyen tanto como se crea aos atrs. Sin embargo en
nuestro medio Coloccia y Argeri publicaron una experiencia donde observaban
prdidas de alcohol a una tasa diaria del 6%, es decir con prdidas totales a los
quince o veinte das posteriores a la toma de muestra. En la actualidad, un
respetable nmero de publicaciones indican que las prdidas de etanol con el
transcurrir de das, incluso semanas, no son relevantes, si las muestras son
extradas convenientemente y colocadas en recipientes adecuados y bien sellados.
Esto ltimo es advertido especialmente por Sreerama y Hardin (2003), quienes
evidenciaron una disminucin del 30% en los guarismos de alcohol, en 345
muestras de orina conservadas en recipientes sellados con styrofoam, notando
que el cambio del recipiente utilizado por uno ms hermtico evitaba la sealada
prdida.
El uso de sustancias preservantes (como el fluoruro de sodio) en sangre de
individuos vivos no mejora mucho los resultados, ms an si la muestra fue
tomada con jeringa estril y mantenida a bajas temperaturas. En estas condiciones
las sangres de personas vivas pueden analizarse an despus de dos semanas sin
variaciones apreciables respecto de la alcoholemia que se hubiera obtenido en el
primer da (Winek y Paul, 1989). Winek (1996) efectu estudios en muestras de
sangre entera y suero que haban sido mantenidas por varias semanas a
temperaturas bajas y altas, notando que las muestras resguardadas a temperatura
ms alta, mostraban prdidas significativas a partir de treinta das y
particularmente en las de sangre entera, no observando prdida considerable en
muestras de suero. Esta apreciacin se halla en consonancia con nuestros estudios
en el Laboratorio de la Asesora Pericial de Tribunales. Hemos observado en
innumerables muestras de sangre mantenidas a temperatura ambiente y tambin
refrigeradas (4C) que las prdidas en quince das son insignificantes si los
recipientes son resguardados tapados hermticamente y sin contener cmara de
aire; si en cambio poseen espacio de aire importante, las prdidas son
considerables.
En relacin con la produccin de alcohol etlico postmortem, ONeal y Poklis
(1996) notan que existen unas 58 especies de bacterias que son capaces de
producir alcohol in vivo e in vitro. Si bien es cierto que la preservacin de las
muestras a temperaturas inferiores a los 4C y la incorporacin de fluoruro de
sodio inhiben la produccin de etanol por la mayora de las bacterias, no sucede
as con la Candida albicans, levadura que ha demostrado ser una importante
especie productora de alcohol (Blume et al, 1973).
Muchos productos voltiles se han reportado como producidos por fenmenos
postmortales (npropanol, butanol, feniletanol, etc.) por lo que se deber poner
especial atencin en el estndar interno utilizado en los mtodos de valoracin por
I CURSO DESCENTRALIZADO EN PERITAJES CRIMINALSTICOS 2005

40

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

cromatografa gasesosa. Sera deseable la utilizacin de tert-butanol, por ser un


compuesto no generado en los fenmenos postmortales.
Algunos autores opinan que no deberan informarse alcoholemias postmortem
inferiores a 0.3 g/L, con el objeto de evitar conclusiones sujetas a discusiones
controvertidas sobre el origen del etanol hallado. En este sentido Levine et al
(1993) sugieren que en ausencia de informacin adicional, concentraciones de
alcohol etlico en sangre entera de 0.4 g/L o ms, probablemente provengan de un
consumo de alcohol.
Recientemente Leikin y Watson (2003), notan en su revisin que la produccin de
etanol a travs de la fermentacin, puede ocurrir sustancialmente en cuerpos
descompuestos resultando niveles sanguneos en el orden de 0.5 g/L. Por otro
lado, Garriot (1996) consigna que los procesos putrefactivos que generan etanol
llevan entre 3 y 10 das en desarrollarse.
Nuestra opinin en este punto es que cuando los valores hallados son superiores a
1 g/L y habindose mantenido las muestras en condiciones apropiadas de
resguardo, puede tenerse una mayor certeza que el alcohol detectado tenga su
origen en una ingesta.
Hoy da se considera al humor vtreo como una matriz complementaria o bien
suplementaria, cuando no se dispone de sangre o esta posee un alto grado de
putrefaccin. En nuestro medio, Garca Fernndez et al (1994) efectuaron un
estudio con 30 muestras de humor vtreo. En doce muestras con screening
cualitativo positivo, se determin conjuntamente alcoholemia, obtenindose
correlacin de la concentracin de etanol en ambos fluidos. La relacin entre
ambos especmenes oscila entre 0.7 y 0.95. La concentracin mayor se encuentra
en humor vtreo. Una ventaja que posee esta matriz es ser bastante indemne a
contaminaciones bacterianas o susceptible de transformaciones postmortem que
origine productos complejos.
La implementacin de mtodos instrumentales de alta performance, permiten en la
actualidad analizar con gran exactitud el contenido de alcohol etlico, y
discriminar as sustancias reductoras u otros compuestos que interfieren con los
mtodos colorimtricos. Por otro lado los controles de calidad son aconsejables
como una forma de validar los resultados emitidos. En este sentido, haber
participado en el ejercicio de intercomparacin de etanol que se realiza
anualmente y por perodos de tres meses en el Instituto Nacional de Toxicologa
de Espaa, nos ha resultado til para evaluar la calidad de trabajo en nuestro
laboratorio. La metodologa utilizada por nosotros es la cromatografa gasesosa
con detector FID con muestreo espaciocabeza (Ramsay et al, 1982). Esta tcnica
sencilla y altamente reproducible puede aplicarse adems para el anlisis de otros
alcoholes, como el metanol e inclusive al de su metabolito de mayor relevancia
toxicolgica, el cido frmico (Ferrari et al, 2003)
Referencias bibliogrficas

Abel, J.C. (1934). Proc. Exp. Biol., P.med. 34: 346.


I CURSO DESCENTRALIZADO EN PERITAJES CRIMINALSTICOS 2005

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Press.

Este coeficiente puede ser expresado en las siguientes unidades:


mg. por minuto.
mg por hora.
cg por hora.
El coeficiente de etiloxidacin considerado a nivel mundial es de 15-30 mg por
hora. (curci o gisbert?)
4.2. ESTUDIOS PRELIMINARES DE ALCOHOL
COEFICIENTE DE ETILOXIDACION EN EL PER.
4.2.1.

ALTURA

INS GONZALES HUERTA 1972(11).

"Concentraciones de alcohol en sangre y a nivel del mar, y en las grandes


alturas, Estudio Comparativo".
Trabajo realizado en dos grupos de individuos, cuyos pesos fluctuaron
entre 55 y 80 Kg.
Un grupo estudiado en cerro de Pasco(4 230 m.s.n.m.), formado por 19
nativos y residentes.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Otro grupo estudiado en Lima(150 m.s.n.m.) integrado por 19 personas


nativas y residentes de dicha ciudad.
Se administr alcohol por va oral a una dosis de 0,80ml/kg de peso,
equivalente a 2ml/kg de pisco diluido con igual volumen de una bebida
gaseosa.
Se extrajeron muestras de sangre del pulpejo del dedo a los 30
60,90,120, y 180 minutos. El mtodo usado para estas determinaciones
fue el de Widmark que se basa en la oxidacin del alcohol en caliente
hasta cido actico con dicromato de Potasio no reducido, se determina
agregando yoduro de potasio y titulando el yodo liberado mediante
hiposulfito de Sodio 0,lN, en presencia de engrudo de almidn como
indicador. La concentracin del alcohol es directamente proporcional a la
cantidad de hiposulfito de sodio gastado.
Dentro de los resultados obtenidos estn:
Los niveles de alcoholemia son ms bajos en la altura que a nivel del
mar.

4.2.2.

Se encontraron curvas de alcoholemia de igual pendiente;


descartndose que esta diferencia de concentracin de alcohol en
sangre se deba a la mayor metabolizacin y ms bien se atribuye sta
a una mayor dilucin del alcohol en un mayor volumen efectivo/
decir que el espacio para la dilucin del alcohol seria mayor en los
sujetos de altura que en los del nivel del mar.

ANA CECILIA LIZRRAGA SILVA 1981(15).


"Alcoholemia a nivel del mar y en la altura".
Trabajo realizado con tres grupos humanos, cuyos pesos variaron entre
50 y 80 kg.
Dos grupos fueron estudiados en la ciudad de La Oroya (3700 m.s.n.m.),
uno de los grupos formado por 8 soldados nativos y residentes de la
altura; el segundo grupo compuesto por 8 internos de medicina
residentes en la altura por un lapso de 4 a 8 meses, nacidos en la costa.
El tercer grupo fue estudiado en la ciudad de Lima (150 m.s.n.m.)
compuesto por 8 estudiantes universitarios residentes y nacidos en la
misma.
Se administr alcohol por va oral a una concentracin de 1.15 ml/kg
para lo que se utiliz pisco en una concentracin de 2,875 ml/kg diluido
en partes iguales con gaseosa.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Se extrajeron muestras de sangre de la vena del pliegue del codo por


medio de un catter intravenoso a los 0, 15, 30, 45, 90, y 120 minutos
posteriores a la ingesta .
Para determinar los niveles de alcoholemia, se trabaj con el suero
proveniente de la centrifugacin directa de las muestras a 3000 r.p.m.
El mtodo empleado para las determinaciones de alcoholemia, fue el
mtodo enzimtico.
La determinacin se basa en el mtodo descrito por BUCHER y
REDESTSKY, modificado por Sigma Chemical, en el cual se usa un vial
reactivo que contiene tanto la enzima como la coenzima. De acuerdo al
mtodo, la ADH cataliza la conversin de etanol a acetaldehido.
Aproximadamente a un pH 9 el acetaldehido formado es removido por
un agente atrapador (Hidracina), haciendo que la reaccin se produzca
casi a totalidad. El incremento en la absorbancia a 34 0 nm ocurre
cuando el NAD+ es convertido en NADH. Las conclusiones a las que se
llegan son:

4.2.3.

A dosis equivalentes de alcohol por via oral, se obtienen niveles de


alcoholemia menores en sujetos nativos y residentes temporales de
altura que en los del nivel de mar, descartndose una menor
absorcin y una mayor metabolizacin en la altura.

La hiperventilacin inducida por la hipoxia, as como el consumo de


alcohol, hara incrementar la prdida de alcohol por va respiratoria,
en relacin directa a la aclimatacin a la altura.

MANUEL ALEJANDRO, ELIAS ESPINOZA 1992 (9).


"Determinacin del coeficiente de etiloxidacin en bebedores Sociales
en Lima Trabajo realizado con un grupo de 60 sujetos voluntarios de 17
a 60 aos, todos ellos bebedores sociales. Se les realizaron estimaciones
enzimticas hepticas: Transaminasas Glutmico Pirvica y Fosfatasa
Alcalina.
Se administr alcohol por via oral en dosis nica para todos los
voluntarios: 3 botellas de cerveza, que deban ingerirse en un mximo de
30 a 4 0 minutos.
Se extrajeron muestras de sangre por venipuntura usando agujas estriles
a los 0, 15, 60, 120, 180 y 240 minutos.
Para determinar los niveles de alcoholemia se utilizaron dos mtodos, el
de Schefftel modificado y el de Conway. Las conclusiones a las que se
llegaron son:

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44

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

4.2.4.

1.-

El coeficiente de etiloxidacin en bebedores sociales de la ciudad


de Lima es 32,877mg/dl/h con una desviacin estndar de 4,139.

2.-

Comparando el valor del factor de etiloxidacin en funcin del


peso, edad, talla, sexo, no difieren significativamente.

En el Cusco, DEL CARPIO y RAMIREZ, ( 8) encontraron:

Podemos observar que el coeficiente de etiloxidacin 21,34 mg/dl es


constante con respecto al tiempo en horas.

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45

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

CAPTULO V
LOS MTODOS DE LABORATORIO Y LA CRTICA A LOS MISMOS.
Iniciaremos aqu un viaje recorriendo los vericuetos de un laboratorio de anlisis
forense (ideal) que se precie de ser pertinente, ptimo en sus resultados, fiable y de
calidad absoluta. Para reunir todas estas condiciones debe estar a la altura de la
modernidad, manejndose dentro de parmetros de calidad total, siendo una unidad
analtica acreditada y aprobar auditorias internas y externas, por ejemplo. A continuacin
expondremos las tcnicas analticas ms comunes y lo que dicen los expertos (gurs) en
toxicologa respecto a este campo, contrastndolo con nuestra precaria realidad.
El etanol es un txico de uso generalizado y permitido socialmente, motivo por el
que es necesario contar con procedimientos analticos capaces no slo de detectar su
presencia sino de cuantificarla con un rango de precisin razonable. (12 NICARG)
Los mtodos analticos alcoholimtricos se dividen en dos grandes grupos segn
la naturaleza de la muestra analizada.
1. Mtodos sobre aire espirado o espirometritos.
2. mtodos sobre biofluidos.
MTODOS ESPIROMETRITOS. Se basa en los siguientes principios. A partir de 15
minutos de haber ingerido una bebida alcohlica, la concentracin en alcohol del aire
espirado refleja la concentracin alcohlica de la sangre circulante a travs de los
pulmones. Dos litros de aire alveolar, con una concentracin de anhdrido carbnico
igual a 190 mg. Contienen exactamente la misma cantidad de alcohol que un mililitro de
sangre. Se determina la cantidad de alcohol que existe en un volumen medido de aire ( o
que corresponde a una cantidad determinada de anhdrido carbnico), con la cual se
puede calcular la concentracin alcohlica de la sangre. Los sistemas son capaces de
ofrecer resultados preciso siempre que se manejen de forma adecuada y tienen la ventaja
de ser porttiles y no precisar condiciones de instalacin estrictas ni de manejo
especializado. Por otra parte la tcnica analtica no supone maniobras invasivas para el
sujeto analizado y tan solo requiere por su parte una mnima colaboracin.
MTODOS SOBRE BIOFLUIDOS. Los mtodos analticos que se realizan sobre
biofluidos tales como la sangre, orina, liquido cefalorraquideo, bilis, humor vtreo y la
saliva han sido propuestos y utilizados desde el siglo pasado. Bechamp en 1865
describi el primer mtodo oxidativo con dicromato potsico que era capaz de
cuantificar el alcohol en biofluidos, desde entonces miles de mtodos han sido descritos.
Este mtodo no es especfico, tambin da resultado positivo (o falso positivo) la
presencia en la muestra de sustancias como: metanol, ter, formol.
En nicaragua, en el laboratorio criminalstico de la Polica Nacional se utiliza el mtodo
de dicromato potsico y en el Instituto de Medicina Legal se utiliza la Cromatografa de
gas con tcnica de Headspace.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

MTODOS INSTRUMENTALES: Comprenden las tcnicas dotadas de un mayor grado


de especificidad lo que hace que en la practica sean las de eleccin con fines forenses.
En el instituto de Medicina Legal se realizan estudios toxicolgicos de etanol con las
tcnicas de cromatografa en fase gaseosa las que presentan un mayor grado de
sensibilidad y especificidad. La cromatografa gaseosa es capaz de separar el etanol del
resto de los alcoholes que con frecuencia estn presentes en las muestras fluidas . La
posibilidad de acoplar distintos sistemas de inyeccin y deteccin facilita la labor
analtica y la respetabilidad y reproducibilidad de los anlisis.
Entre los sistemas de inyeccin utilizados destacan los denominados tipo
Headspace. Este sistema de inyeccin calienta y presuriza los viales sellados en los que
se introducen las muestras problema inyectando una pequea porcin de la fase gaseosa
del vial. En dicha porcin los agentes voltiles se encuentran en equilibrio con respecto
a su concentracin en la fase liquida del vial, favoreciendo por tanto la posterior
separacin e identificacin cromatogrfica.
5.1. DOSAJE ETLICO
Prueba cuantitativa que consiste en la dosificacin de alcohol en la sangre o en
otros humores orgnicos, realizada en
el laboratorio, mediante el uso de
diferentes mtodos, basados por lo general en la accin reductora del etanol.
Factores que implican alteraciones en la cuantificacin:
Lugar de toma de muestra. Se ha demostrado que hay diferencias significativas
entre la sangre venosa y la sangre arterial.
Conservacin de la muestra. El alcohol puede ser oxidado por accin bacteriana,
no se debe dejar ninguna cmara de aire y debe de estar en un lugar fresco.
5.2. UNA HISTORIA BREVE DE LAS PRUEBAS DE ALCOHOL.
Los niveles de alcohol en el cerebro son difciles de medir. Por esta razn, los
niveles de alcohol en la sangre se utilizaban primeramente para determinar la
concentracin de alcohol en los tejidos cerebrales de la persona. Se ha determinado
que la mayora de la gente empieza a exhibir un impedimento mental medible de
alrededor de 0,05% de alcohol en la sangre. A alrededor del 0,10%, el impedimento
mental indicar signos fsicos evidentes, como el andar inestable. El habla
distorsionada se aprecia a partir del 0,15%. La inconsciencia aparece para el nivel
del 0,4%. Por encima del 0,5%, las partes del cerebro que dirigen la respiracin y
el latido del corazn pueden ser anestesiadas, causando la muerte.
Aunque hay ventajas en hacer pruebas con la sangre para determinar las
concentraciones de alcohol en el cuerpo humano, la recoleccin de la muestra
puede verse como invasiva, dolorosa y costosa en trminos de tiempo y dinero. En
los aos 1930, se cre la tecnologa que aprovecha el hecho de que el alcohol se
encuentra en el aliento alveolar en proporcin al alcohol que se encuentra en la
sangre. Los instrumentos de pruebas de alcohol en el aliento se fabricaron para
captar una muestra para el anlisis. El anlisis del aliento ha evolucionado desde
aquel entonces en una tecnologa que ofrece un anlisis econmico, rpido y
preciso de una muestra de aliento que se recoge sencillamente y sin dolor.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Las tecnologas que se han desarrollado para hacer una prueba de alcohol a una
muestra de aliento incluyen las siguientes:
La qumica hmeda
La fotoespectroscopia
La cromatografa de gas
La espectroscopia infrarroja
Los detectores de xido de latn
El anlisis electroqumico
Mtodos de dosaje (5)
a) Difusin en cmara de Comway (segn Feldstein y Klendshoj).
En una cmara tipo Obrink se coloca en el compartimiento externo K 2CO3, en
el medio K2CO3 y la muestra (sangre u orina) y en el interior K2Cr2O7, y luego
de un tiempo 10 hs a 25, 6 hs a 37, 2 hs a 50) el etanol pasa a actico y el
K2Cr2O7 a Cr3+, que se titula con iodo/tiosulfato. Este mtodo, si bien es
econmico, presenta interferencias por otros reductores y adems es lento y
laborioso, ya que demanda por lo menos dos horas de incubacin y la
necesidad de efectuar una titulacin (cuyo punto final es subjetivo, algo crtico
en una determinacin tan delicada) por lo que no se aconseja su empleo.
b) Enzimtico (con equipos comerciales).
Se basa en que la alcohol deshidrogenasa (ADH) cataliza la conversin:
CH3CH2OH + NAD+ CH3CHO + NADH + H+
Reaccin que se lleva a cabo a pH 9 y est desplazada hacia la derecha por un
atrapante del acetaldehdo; el incremento de la absorbancia a 340 es una
medida exacta de la cantidad de etanol presente. En realidad todos los
alcoholes alifticos reaccionan con la ADH, pero lo hacen ms lentamente que
el etanol; la literatura de referencia cita, para concentraciones similares y
siendo la respuesta para el etanol 100%, butanol 18% para el butanol, 3%
etilenglicol, 1% metanol y 0.2% para la acetona. La comparacin con el
mtodo de referencia (cromatografa gaseosa) tiene una correlacin de 0.98. Se
trata, pues, de un mtodo rpido y confiable que puede realizarse en los
autoanalizadores del Departamento Bioqumico (Vitalab Selectra I y II, Targa
BT-3000) con equipos comerciales (Abbott, Boehringer, Merck, Randox,
Sigma...) de los que dependern las condiciones particulares y el costo.

5.2. LA IDONEIDAD DE UN LABORATORIO DE DOSAJE ETILICO Y DEL


PERITO TOXICLOGO. (3) (4) (6)
Cul ser nuestro punto de referencia? contra qu o contra quines nos
comparamos? Qu dicen las sociedades o asociaciones en toxicologa? Veamos:
En estas ponencias presentadas en el XVI Congreso Espaol de Toxicologa se
hace referencia a la necesidad imperiosa de observar estndares de calidad y de ser
I CURSO DESCENTRALIZADO EN PERITAJES CRIMINALSTICOS 2005

48

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

monitoreados., Se dice, por ejemplo: Un Laboratorio de anlisis debe producir


datos analticos de alta calidad por medio del uso de mediciones que sean precisas,
confiables y apropiadas para tal fin la garanta de la calidad son las actividades
planeadas y diseadas para asegurar que las actividades de control de calidad se
ejecuten correctamente. Asegurar la calidad implica hacer bien las cosas, con el
mtodo adecuado y lograr en todo momento la satisfaccin del cliente (3)
En los ltimos aos, se ha producido un creciente inters de los laboratorios por
alcanzar la acreditacin, lo que demuestra el inters por la calidad. En nuestro
pas esta ocurriendo lo mismo?
La acreditacin es el reconocimiento de que un laboratorio es competente para
ejecutar las tareas solicitadas. La norma ISO 17025 a que se alude define el
conjunto de requisitos que debe cumplir un laboratorio de anlisis -el dosaje etlico
lo es- o de calibracin para demostrar su competencia y su capacidad de producir
resultados tcnicamente validados.
Un Sistema de Calidad en un laboratorio se basa en una serie de documentos
previos al trabajo analtico: Manual de calidad que describe este sistema de
calidad, PNT procedimientos normalizados de trabajo generales y de tcnicas de
manera que se puedan reconstruir los anlisis, registro de formacin, etc. Y
documentos que se generan en el curso de los anlisis (3)
- Se deben realizar peridicamente auditorias internas para comprobar que se
siguen cumpliendo los requisitos establecidos.
- El laboratorio debe estar equipado con todos los equipos de medida necesarios
para la correcta realizacin de los ensayos y calibraciones.
- La calibracin de un equipo permite calcular su incertidumbre, que es la
estimacin que caracteriza el intervalo de valores en que se sita, generalmente
con una alta probabilidad dada, el valor verdadero de la magnitud de la medida.
- El laboratorio tiene que validar sus mtodos.
- Se debe participar en ejercicios de intercomparacin, la repeticin de ensayos
utilizando los mismos o diferentes mtodos o la repeticin de ensayos de
muestras almacenadas (muestras ciegas) y almacenadas en condiciones de
estabilidad. (3)
Lo analizado, reflexionado y expuesto anteriormente nos lleva al siguiente punto:
La necesidad de un LABORATORIO TOXICOLGICO DE REFERENCIA (4).
Dice el ponente: Adems de los aspectos de calidad que se recogen en la norma
ISO 17025 para un laboratorio general de ensayo, es necesario contar con unos
criterios bien definidos sobre ciertos aspectos particulares de un laboratorio de
toxicologa forense (el dosaje etlico es parte de este entorno) El laboratorio de
referencia va a desempear un papel fundamental en la definicin de dichos
criterios, especialmente sobre aspectos de inters como: (4)
- La toma y etiquetado de las muestras.
- El manejo de las muestras (cadena de custodia).

I CURSO DESCENTRALIZADO EN PERITAJES CRIMINALSTICOS 2005

49

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

- Los criterios de eleccin de las muestras ms recomendables, segn el tipo de


anlisis.
- Las polticas sobre los procedimientos analticos que garanticen un resultado
fiable.
- La calibracin de los equipos.
- La validacin de los mtodos.
- Criterios mnimos para el material de referencia.
- Controles internos de calidad.
- Controles externos de calidad.
- Informacin mnima que ha de contener el informe de resultados.
Y dnde habilitamos un Centro de Referencia idneo. Tal vez en la
Universidad?
Tenemos la necesidad de observar la calidad y de tener un Centro de Referencia
y el personal?
Veamos la siguiente ponencia (6)
Un principio fundamental de toxicologa forense, es que el diagnstico de certeza
de una intoxicacin se hace con base al anlisis de laboratorio. En el laboratorio,
independientemente de los medios con se disponga, lo fundamental es la figura del
perito.
El perito, en el caso ms habitual, se va a encontrar con una solicitud de anlisis
(tan slo en ocasiones con la informacin necesaria), acompaada de unas
muestras, y con los medios disponibles, deber realizar los anlisis necesarios
siguiendo siempre unas normas de calidad. De estos anlisis obtendr unos
resultados que deber interpretar con el fin de elaborar un informe que en
ocasiones habr de ratificar, defender o ampliar en las diligencias judiciales.
El perito deber seguir un sistema de calidad, que va desde el control de los
patrones de referencia y material volumtrico de laboratorio, hasta el
mantenimiento y calibracin de los equipos, sin olvidar la preparacin y redaccin
de los mtodos de anlisis, incluida la validacin de los mismos y los controles
peridicos tanto internos como externos. Es el perito el que maneja la tcnica y por
lo tanto deber tener conocimientos suficientes en el campo de la estadstica, al
menos en lo referente al tratamiento de los resultados, ya que en el proceso de
validacin ser necesario el clculo de la incertidumbre de los resultados.
La acreditacin tiene la gran ventaja de dar al perito una gran tranquilidad en
cuanto a la reproducibilidad y exactitud de sus resultados, pero al mismo tiempo
supone un trabajo extra para obtener y mantener la acreditacin, pues supone una
dedicacin y control continuo, no slo de la tcnica en si, sino tambin de todo lo
que le rodea, desde la recepcin y custodia de las muestras hasta el control de los
proveedores de material y reactivos de laboratorio.
TF-5.

I CURSO DESCENTRALIZADO EN PERITAJES CRIMINALSTICOS 2005

50

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

CLCULO DE LA TRAZABILIDAD EN ALCOHOL ABSOLUTO.


J. Bueno, M.T. Contreras, R. Izquierdo, J.L. Valverde. ColaboXIVCongreso Espaol de Toxicologa
191
Rev. Toxicol. (2001) 18 Editadores: J.Martinez, M.T Mures, B. Guaabens. Instituto Nacional de
Toxicologa, Departamento de Barcelona, C/Merced 1 08002 Barcelona.
La calidad de los anlisis, requiere no solamente un resultado correcto, sino que este, para ser
vlido, deber de ir acompaado de su incertidumbre, inherente a toda medida. El primer paso ser
pues el conocimiento del material de referencia, necesario punto de partida, lo que implica que
estos materiales deben de ir acompaados por sus respectivos certificados de anlisis avalados por
la acreditacin del laboratorio o casa comercial, ante los organismos oficiales que corresponda
(ENAC en Espaa). En la actualidad, es muy difcil encontrar en el mercado patrones de alcohol
etlico que dispongan de este tipo de certificado. En este trabajo se expone un mtodo para el
clculo la incertidumbre de la concentracin del Alcohol Absoluto, usando como patrn de referencia
alcohol etlico en agua certificado (CAS Registry Numb 07732-18-5). El conocimiento de
la incertidumbre es imprescindible para a su vez conocer la incertidumbre de los patrones que
preparamos en el laboratorio y con los que procedemos a la calibracin de los equipos de medida
que utilizaremos para uno de los anlisis mas frecuentes en laboratorios de toxicologa como es el
caso del anlisis de alcohol etlico en sangre.

5.4. VALIDACIN Y CLCULODE INCERTIDUMBRE (10)


La validacin de los mtodos analticos en toxicologa es cada vez ms frecuente, siendo
necesaria en el anlisis de alcohol etlico debido a la gran importancia y consecuencias que
se derivan de cada uno de los resultados.
Validar un mtodo consiste en hacer constar por escrito unos cuantos parmetros:
- Rango
- Especificidad.
- Linealidad
- Lmite de deteccin.
- Lmite de cuantificacin
- Precisin interensayo (reproducibilidad)
- Repetibilidad
- Exactitud.
Los mtodos deben estar validados y adems hay que tener presente que cualquier medida
lleva asociada un error o incertidumbre El conocimiento de la incertidumbre de
nuestra medida asegura la calidad de nuestro ensayo y aporta un margen de confianza
sobre la calidad del resultado.
Segn la norma UNE-EN 30012-1, 3.7 1994, se define la incertidumbre como
Estimacin que caracteriza el intervalo de valores en el que se sita generalmente con alta
probabilidad el valor verdadero de la magnitud medida
La respuesta de los equipos empleados para la determinacin se basa en la medida de una
magnitud distinta a lo que queremos medir (concentracin de alcohol), se denominan
medidas indirectas y sea cual sea el mtodo utilizado, la respuesta del equipo ser
proporcional a la concentracin de alcohol en la muestra, respondiendo a una actuacin del
tipo:
y = mcx + b
Donde la pendiente y la ordenada la obtenemos mediante el anlisis previo de patrones de
concentracin conocida.
La incertidumbre del resultado depender de la incertidumbre de los patrones y de la
incertidumbre del proceso de clculo.
http://tox.umh.es/aetox/revista/Granada99/granada99_20html

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51

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

TF-07
ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE EN EL CALCULO DE LA
CONCENTRACIN DE ALCOHOL ETILICO EN SANGRE MEDIANTE
REGRESION LINEAL PONDERADA.
J. Bueno, M.T. Contreras, H. Bueno, J. L. Valverde
Instituto Nacional de Toxicologa, Departamento de Barcelona. C/ Merced 1 08002
Barcelona
La implantacin de los sistemas de calidad en los laboratorios, obliga al conocimiento del
grado de incertidumbre de las medidas realizadas. Uno de los anlisis ms frecuentes en
un laboratorio de Toxicologa es el del alcohol etlico en muestras de sangre, tanto en
personas vivas como en cadveres. Hasta ahora se ha informado el valor de la alcoholemia
con una cifra mas o menos exacta. Exactitud que se consigue mediante la validacin de los
mtodos analticos y realizacin de controles internos y externos. No cabe duda, que como
en toda medida, en el calculo de las alcoholemia, existe un error, que conocemos como
"Incertidumbre de la medida", que no es ms que la medida de la precisin procedimiento
utilizado. Se propone un sistema de tratamiento de datos, utilizando una hoja de calculo,
en la que introduciendo tan slo los valores de las reas obtenidas, nos devuelve adems
del resultado como ocurre con los integradores normalmente acoplados a los equipos de
medida, toda otra serie de datos imprescindibles para conocer la calidad de nuestra medida
como son: Calibracin del Sistema de Medida mediante Regresin Lineal Ponderada;
Resultado teniendo en cuenta el peso de la medida individual; Coeficiente de Correlacin
(R); Desviacin Standard; Intervalo de confianza de la medida.
XIII Congreso Espaol de Toxicologa. Granada, 22-24 de Septiembre, 1999. Rev.
Toxicol. 16: 192 (1999)
EJERCICIO DE INTERCOMPARACIN DE DOSAJE ETLICO? (8)
Para garantizar la calidad de los ensayos obtenidos , los laboratorios han de disponer, tal y
como recomienda la norma ISO 17025, de programas y aseguramiento de calidad que
recojan actividades planificadas y revisadas de control interno y externos. Estos controles
incluyen, entre otros, el uso de materiales de referencia, el anlisis de duplicados y
muestras ciegas y la participacin programada y peridica en ejercicios de
intercomparacin.
Los ejercicios de intercomparacin son una de las herramientas de evaluacin y mejora de
la calidad ms utilizadas por los laboratorios. Es una actividad de control externo en la
que participan varios laboratorios a la vez analizando muestras proporcionadas por un
laboratorio de referencia. Este ejercicio proporciona un medio para comparar el trabajo del
laboratorio con el de otros laboratorios, estimula la autoevaluacin, reduce errores y
proporciona la evidencia externa de la calidad de la tcnica analtica y asi como
competencia individual de los analistas.
En el ao 2003 se efectu en Espaa un ejercicio de este tipo (9) El Instituto Nacional de
Toxicologa y Ciencias Forenses de Espaa brida la oportunidad (para todo el pas
ibrico fueron 66 laboratorios) de efectuar este ejercicio como medio de evaluacin
continua de los laboratorios y de los especialistas que realizan estos anlisis.
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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

El ejercicio consta de 3 controles por ao y en cada control se envan 3 muestras de sangre


y/o plasma con una concentracin de alcohol etlico que oscila entre 0 y 4 g/L. Las
muestras podrn prepararse tambin con otras sustancias voltiles (alcohol metlico,
acetona, acetaldehdo, etc) con el propsito de evaluar las posibles interferencias del
mtodo. La periodicidad de los controles es cuatrimestral y los envos de muestra se
realizan segn el siguiente calendario: febrero, junio y octubre.
En este informe se indican los resultados obtenidos, los mtodos utilizados y los datos
estadsticos: media, desviacin estndar.
Como ejemplo y como motivacin para nosotros, se presenta a continuacin los resultados
del ejercicio de intercomparacin 2003. Observamos que el valor de la concentracin
terica es similar al correspondiente valor de la media depurada de cada una de las
muestras de los tres controles.
ALCOHOLEMIAS ARTEFACTUALMENTE AUMENTADAS. (7)
En Este artculo, el autor comenta sobre las implicancias analticas en el dosaje etlico,
sobre todo en lo que se refiere a la interpretacin de los resultados, en los que hay que
tener muy en cuenta algunos factores que puedan formar alcohol endgeno
(artefactualmente) en el cadver, por ello se plantea el objetivo de detectar alcoholemias
que pudieran encontrarse artefactualmente aumentadas; y especficamente dice: puede
darse el caso de formacin por fermentacin pos mortem, o verse degradado por accin
bacteriana y redistribuido por el organismo por traumas y otros procesos para ello, se
puede considerar el establecimiento de una correlacin entre las concentraciones de etanol
en sangre y humos vtreo Con respecto a esto se debe tener en cuenta las limitaciones de
espacio y/ o presupuesto que pueda darse
Despus de analizar comparativamente resultados de dosajes en ambas muestras en
cadveres dice: los resultados encontrados indican que existe una buena correlacin entre
las concentraciones de etanol en sangre y humor vtreo. Adems, esta matriz (el humor
vtreo) se encuentra razonablemente protegida, generalmente preservado tras accidentes
con politraumatismos mortales y permanece libre de cambios provocados por la
fermentacin postmortem durante un perodo de tiempo razonable despus de la muerte.
ESTABILIDAD DEL ETANOL EN MUESTRAS DE SANGRE (11)
En este trabajo se trat de comprobar la variabilidad del resultado debido a factores como
la cmara de aire presente en el tubo, la temperatura y el tiempo de almacenamiento. El
etanol se analiz por cromatografa gaseosa con detector FID del espacio en cabeza en el
rango de concentraciones 0.50 0.60 g/L. Se observ que la concentracin de etanol
permanece invariable en todas las muestras almacenadas a 4C. Por el contrario, a
temperatura ambiente se produce una disminucin de hasta el 27%, la cual es dependiente
del tiempo de almacenamiento e independiente de la cmara de aire presente en el tubo y
la concentracin de alcohol en el mismo.
http://tox.umh.es/aetox/Revista/Revista19_3/108.pdf
SYMPOSIO DES TOXICOLOGA EN HOMENAJE A MANUEL REPETTO Sesin V

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Rev. Toxicol. (2002) 19: 97-144 el Instituto Nacional de Toxicologa jugar, segn lo visto hasta
ahora, un papel relevante.
RELACIN DE ALCOHOL ETLICO EN AIRE ESPIRADO Y EN SANGRE EN LA CASUSTICA
DEL INSTITUTO NACIONAL DE TOXICOLOGA, DPTO. DE MADRID.
Gmez Fernndez J., Snchez de la Torre C. y Sancho M. C/ Luis Cabrera. 28002 Madrid.
Resumen: La determinacin de alcohol etlico en aliento en controles de Trfico es prctica habitual
en nuestro pas, siendo rutinariamente utilizada como prueba ante los Tribunales de Justicia. Su uso
suscita mltiples dudas relacionadas con el significado del resultado obtenido y con la prctica
operatoria de la medicin. Su utilizacin en controles de trfico conlleva el derecho de contrastar el
resultado con un anlisis de sangre.
En este trabajo se presentan los resultados de las concentraciones de etanol en muestras de
sangre obtenidas en estos controles rutinarios y analizadas en el Servicio de Qumica del
Departamento de Madrid del Instituto Nacional de Toxicologa y se comparan con los resultados
obtenidos en aire espirado con el etilmetro.
Para ello se han estudiado 157 casos en los que se conocen las concentraciones en sangre y aire
espirado, de los que se obtiene un subgrupo de 89 casos (57%) en los que se conocen las horas
de las medidas con el etilmetro y de la extraccin de sangre. Se estudia la razn obtenida entre
sangre y aliento que refleja una media de 2.100, unos lmites para un 95% de confianza entre
1559 y 2718 y una linealidad con un coeficiente de correlacin de 0,96. Se obtiene un resultado
compatible o se infravalora el grado de impregnacin alcohlica con el etilmetro en el 76%
de los casos.
Se valora asimismo la prctica operatoria, estudiando el perodo de tiempo transcurrido entre las
dos medidas del etilmetro y el tiempo trascurrido hasta la extraccin de sangre, comprobando
que se siguen, habitualmente, las pautas aconsejadas.
La finalidad de este trabajo es contestar las dudas suscitadas por la utilizacin de esta prueba en
condiciones reales, con muestras extradas de diferentes maneras, con distintos conservantes y se
analizan los datos relativos a la cadena de custodia de muestra, fundamentales para la posterior
interpretacin de los resultados, y que muchas veces no quedan convenientemente reflejados.
Como el grado de impregnacin alcohlica suele asociarse al nivel de alcoholemia, el uso del
aliento obliga, por un lado a establecer un factor de correlacin entre la concentracin de
alcohol etlico entre sangre y aliento y por otro al desarrollo de equipos capaces de determinar
etanol con un alto grado de fiabilidad.
Durante muchos aos los resultados de las medidas de los etilmetros se expresaba en g/L de
sangre, ocasionando a los peritos una dificultad aadida al tener que extrapolar la concentracin
obtenida en aliento a niveles en sangre, de aqu que actualmente se manejen cifras independientes
aunque basadas en asumir que existe una correlacin entre sangre y aliento de aproximadamente
2.000/1, es decir, la cantidad de alcohol presente en 2 litros de aire alveolar es equivalente al
alcohol contenido en 1 mililitro de sangre.
En Espaa la investigacin del alcohol etlico en aliento se est realizando desde hace varias
dcadas. Desde los aos 70 se estn empleando rutinariamente los etilmetros, que en la
actualidad estn regulados por la O M de 27 de julio de 1994 [1], estando las verificaciones sujetas
a lo establecido en la Norma UNE 26.443 [2].
Las dudas que plantea la utilizacin del aliento para investigacin del grado de impregnacin
alcohlica de un sujeto y la seguridad y fiabilidad del equipo de medida abarcan desde el nombre
del equipo, hasta cuestionar la base cientfica de su aplicacin, condiciones de uso, preparacin del
personal, interferencias, errores de los equipos, etc., dudas que pueden surgir en una prueba como
esta, que es, indudablemente, una de las ms habituales ante los Tribunales de Justicia.
Dado que en el Instituto Nacional de Toxicologa se reciben muestras de sangre de sujetos que, tras
el resultado positivo de las pruebas del etilmetro, solicitan contrastar dicho resultado con el anlisis
de alcohol en sangre, intentamos mediante este estudio resolver algunas de estas dudas.
MATERIAL Y MTODOS
El estudio se ha realizado sobre 157 casos de accidentes y/o controles de trfico enviados al
Instituto para la determinacin de la alcoholemia. La informacin necesaria para la realizacin de
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54

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

este estudio se ha conseguido por dos vas: parte de los casos se reciben con dicha informacin y
otra parte ha sido necesario recabarla. An as, nicamente en el 57% de los casos que se
presentan, disponamos de todos los datos. Con este subgrupo hemos realizado un estudio
retrospectivo de la posible concentracin de alcohol en la sangre en el momento de la prueba en
aire espirado y se ha estimado el factor de correlacin existente entre el alcohol en sangre y en aire
espirado y comparacin con los valores recogidos en la bibliografa. Para hacer el clculo
retrospectivo se ha utilizado una constante de eliminacin de 0,15 g/L.
Los datos recabados para el estudio fueron: la hora y resultado de la primera y segunda prueba
efectuadas con el etilmetro, hora de la extraccin de la sangre en el Centro Sanitario y marca y
modelo del etilmetro empleado.
La determinacin de la alcoholemia sobre la sangre se realiza en el Servicio de Qumica del
Departamento de Madrid del Instituto Nacional de Toxicologa, empleando la tcnica de
Cromatografa de Gases con espacio en cabeza y detector de ionizacin de llama. El anlisis se
realiza por duplicado, dando como resultado la media de ambas determinaciones.
RESULTADOS
Con los resultados en sangre en g/L y en aliento, en mg/L, sin excluir ningn dato, se calcula la
razn entre ambas concentraciones.
Las razones etanol en sangre:etanol en aliento son similares en todas las concentraciones,
observndose pequeas diferencias con una ligera tendencia a ser ms alta a concentraciones
superiores Analizando los cuatro casos en los que se ha obtenido un resultado negativo de alcohol
en sangre, observamos que en uno de los casos, con 0,39 mg/L en aire espirado transcurren casi 6
horas hasta la extraccin de muestra, por lo que el resultado es concordante. En el segundo de los
casos, con 0,36 mg/L en aire, se desconoce la hora de la extraccin de muestra, por lo que no se
puede interpretar la discordancia entre los resultados. En el tercer caso, con 0,47 mg/L transcurren
tan solo 20 minutos, pero la muestra es tratada en el Hospital con gel activador de la coagulacin,
no recomendado para la toma de muestras. El cuarto caso, con 0,36 mg/L y en el cual han
transcurrido tan solo 15 minutos, no tiene explicacin posible, aunque haba que ver si la extraccin
de la muestra se hizo a esta hora verdaderamente o la reflejada es la hora del ingreso.
En un caso con 0,14 g/L en sangre frente a los 0,52 mg/L en aire, (razn 272) aunque se indica la
hora de la toma de la muestra, al coincidir con la de la segunda prueba, cabe sospechar que ha sido
mal consignada. Por ltimo en uno de los casos se detecta una concentracin en sangre de 2,04
g/L frente a concentraciones en aire espirado de 0,40 mg/L en la primera medida y 0,32 mg/L en la
segunda (Etilmetro Drger 7110, 19 minutos despus), no encontrando ninguna justificacin, salvo
que estuviese el individuo en fase pre-absortiva, no pudiendo hacer mas interpretaciones dado que
la hora consignada como de toma de muestras coincide con la de la segunda medida del etilmetro,
por lo que evidentemente ha sido mal reflejada.
DISCUSIN
El resultado obtenido en aire espirado es altamente significativo del contenido en sangre y slo en
casos excepcionales se obtienen resultados aberrantes que no pueden justificarse con el estudio
de todos los datos contenidos en la cadena de custodia.
Las medidas efectuadas por los etilmetros, en exactitud y en precisin son correctas.
En la mayor parte de los casos estudiados se conoce las horas de las medidas con el etilmetro. El
tiempo transcurrido entre ambas pruebas es suficiente para garantizar que el resultado no es debido
a la presencia de alcohol en boca.
En menor porcentaje se conoce la hora de la toma de la sangre, que habitualmente se extrae antes
de transcurrida una hora tras la segunda prueba del etilmetro, factor fundamental para poder
realizar valoraciones retrospectivas. No obstante, en muchos casos no se ha podido conocer la hora
de la extraccin, bien por no constar en el oficio o por ser incorrecta. Esto posiblemente sea debido
a la dificultad de seleccionar un Centro Sanitario para la extraccin y, adems, en dichos Centros
con frecuencia indican la hora de ingreso pero no la de extraccin.
La muestra de sangre debe contener fluoruro sdico y oxalato potsico, pero tambin se pueden
obtener buenos resultados con otros anticoagulantes o conservantes siempre que el envo y el
anlisis se efecten con rapidez y no se rompa la cadena del fro.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Sin embargo convendra evitar el uso de aditivos como el gel activador de la coagulacin, no
recomendados para el anlisis de alcohol etlico dado que favorece la coagulacin de la sangre,
afectando esto a la interpretacin de los resultados, aunque en este trabajo no se han observado
diferencias significativas con respecto a otros aditivos.
Es conveniente tener consignados todos los datos necesarios para, en caso necesario, poder hacer
una correcta interpretacin de los resultados obtenidos en ambas pruebas.

ACTA TOXICOLGICA ARGENTINA. Vol.12 suplem. Set.2004.


ESTUDIO DE LA CORRELACIN ENTRE LA CONCENTRACIN DE ALCOHOL EN AIRE
ESPIRADO Y EN SANGRE
Study of the correlation between alcohol concentration in exhaled air and blood Girolami H. R.1 y
Alonso L. C.2
1. Laboratorio de Toxicologa Aplicada, Fac. de Ciencias Bioqumicas y Farmacuticas (UNR),
Suipacha 531 (2000) Rosario; 2. Instituto Mdico Legal, Poder Judicial de la Provincia de Santa, Bv.
Avellaneda y 3 de Febrero (2000) Rosario.
E-mail: rgirolam@fbioyf.unr.edu.ar
La Ley Nacional de Trnsito N 24.449 prohibe conducir cualquier tipo de vehculos automotores
con niveles de alcoholemia superiores a 0.5 g/l.
Numerosas municipalidades de nuestra provincia realizan controles sorpresivos de .alcoholemia. a
conductores de vehculos mediante el uso de instrumentos porttiles (alcoholmetros) que
determinan el contenido de alcohol en aire expirado. El objetivo de nuestro trabajo fue comparar los
datos informados por el instrumento con los valores ver- 21 - Acta Toxicol. Argent. (2004) 12 (Supl.):
1-46 daderos de alcoholemia obtenidos por cromatografa de gases en muestras de sangre
extradas en el mismo momento que se hicieron las alcoholimetras. El estudio se realiz con 15
voluntarios (12 hombres y 3 mujeres) con edades comprendidas entre 18 y 55 aos que ingirieron, a
voluntad, cantidades medidas, programadas y controladas de una bebida alcohlica a su eleccin
(vino o cerveza) durante 90 minutos. A todos ellos se les realizaron controles de alcohol en aire
expirado con tres aparatos porttiles de uso habitual en los controles urbanos y simultnea
extraccin de sangre a los 30 y 90 minutos de la ingesta.
Los resultados obtenidos mostraron diferencias significativas entre los valores informados en cada
uno de los instrumentos entre s y de los mismos respecto del valor obtenido en sangre por
cromatografa de gases (mtodo de referencia).
Conclusin: los valores obtenidos con los alcohol metros porttiles de control urbano de
alcoholemia, actualmente en uso son errticos, no confiables y de valor presuntivo altamente
conflictivo.
Se aconseja que, antes de su uso oficial, los alcoholmetros deben ser calibrados y homologados
por organismos tcnicos apropiados.
http://tox.umh.es/aetox/Revista/Revista19_3/108.pdf
Rev. Toxicol. (2002) 19: 97-144
DIAGNSTICO DEL CONSUMO CRNICO DE ALCOHOL: ANLISIS DE ETIL GLUCURNIDO
EN MUESTRAS DE CABELLOS.
C. Jurado, T. Soriano, M. P. Gimnez y M. Menndez. Instituto Nacional de Toxicologa. Apdo. 863.
41080 Sevilla.
En este trabajo se presenta un procedimiento para la deteccin y determinacin de etil glucurnido
(EtG) en cabellos. Durante el desarrollo del mtodo se ha comparado la eficacia de cinco mtodos
de extraccin distintos: a) metanol; b) metanol: agua (1:1); c) agua; d) ClH 01M y e)agua: anhdrido
trifuoroactico (9:1). As mismo, se han comparado tres reactivos derivatizantes:
bistrimetilsililtrifluoro-acetamida (BSTFA) y los anhdridos pentafluoropropinico (PFPA) y
heptafluorobutrico (HFBA).
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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Los mejores resultados se obtuvieron tras la extraccin con agua y la derivatizacin con PFBA, ya
que el rendimiento de extraccin fue el ms elevado, los extractos ms limpios y los derivados ms
estables. El mtodo definitivo consiste en: 100 mg de cabellos se lavan con agua y acetona, y una
vez eliminada la contaminacin externa, la muestra se trocea finamente y se le aade el patrn
interno deuterado y 2 mL de agua. Despus de sonicar durante dos horas, se deja a temperatura
ambiente durante una noche. El agua se evapora y el residuo seco se derivatiza con PFPA. El
anlisis se realiza en un sistema GC/MS en la modalidad de impacto electrnico. El mtodo es
lineal en el rango de concentraciones entre 0050 ng/mg y 5 ng/mg. Los lmites de deteccin y
cuantificacin son 0025 ng/mg y 0050 ng/mg, respectivamente. La recuperacin media para las
concentraciones estudiadas, baja, media y alta, es de 98.28%. En el estudio de la precisin, los
coeficientes de variacin fueron inferiores al 7%. El mtodo se est aplicando rutinariamente en
nuestro laboratorio para elucidar casos de consumo crnico de alcohol.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

CAPITULO VI
INVESTIGACIN FORENSE DEL ALCOHOL ETLICO EN EL
CADVER.
Probablemente el alcohol es el anlisis mas solicitado en toxicologa forense y las
cifras de alcoholemia, las que con ms frecuencia deben ser interpretadas.
(13) En el Instituto de Medicina Legal, a toda muerte sbita y/o violenta se le
realiza una necropsia siguiendo un protocolo, que incluye estudios toxicolgicos como la
deteccin de alcohol en sangre, entre otros. Para su anlisis la muestra es tomada del
lado derecho del corazn o de la vena femoral y del humor vtreo, para este
procedimiento se utilizan jeringas de 5 y 10 cc. Una vez obtenida la muestra esta se
guarda en tubos de ensayos preparados con fluoruro de sodio, que acta como
preservante, y cido etilendiaminotetractico (EDTA), que acta como anticoagulante.
Estos tubos se dejan en refrigeracin a 8 grados centgrados para conservar la muestra,
ya que los anlisis de alcoholemia solo se realizan una vez a la semana. Previo el
anlisis el cromatgrafo de gas tiene que ser equilibrado con estndares de soluciones de
etanol. La muestra se coloca en un tubo utilizando una jeringa de 1cc, luego se sella el
tubo y se calienta de tal manera que el etanol contenido en la muestra se vaporiza y
satura el espacio vaco, posteriormente se toma la muestra de ese vapor y se inyecta el
cromatgrafo de gas. La concentracin de etanol se calcula tomando en cuenta el rea
generada tanto por la muestra como por el vapor de la solucin estndar de etano. El
procedimiento es rpido y puede tardar entre media hora a una hora.
6.1. VARIACIONES POST MORTEM.
a.Difusin Pasiva: Esta suficientemente probado que el alcohol puede difundir
pasivamente post mortem desde el estomago y el intestino a los rganos y
tejidos circundantes. Cuando la concentracin del alcohol en el estomago es
superior a 5.0 g/l, quiere decir que la muerte sobrevino momentos despus de la
ingestin, cuando aun estaba en la primera fase de la absorcin. El alcohol
puede difundir al liquido pericarico, liquido pleural y posiblemente bilis, asi
como la vavidad peritoneal.
b. Alteracin Post Morten: Se pueden presentar dos tipos de alteraciones.
1. Perdida de alcohol: La perdida puede tener un mecanismo fisico, la
evaporacin. Se produce cuando el almacenamiento no es correcto y sedeja
un espacio lebre entre el nivel de la sangre en el tubo y el tapon. El alcohol
pasa a la camara de aire y si no se tiene precaucion se escapa al abrir el vial
tambien se puede perder por oxidacin microbiana, tanto aerobia como
anaerobia, aunque e mayo en el primer caso.
2. Ganancia de alcohol: El alcohol producido post mortem, denominado
engogeno, es alcohol etilico identico al de origen exgeno. No hay ningun
metodo analitico, por tanto, capaz de diferenciarlos, debiendose recurrir
para ello a metodos indirectos. El alcohol endogeno se forma por los

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58

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

microorganismo, a partir de la glucosa fundamentalmente. Deben, por


tanto, coexistir ambos elementos. La sangre cardiaca es la que contiene
mas glucosa y donde la bacteriemia es mayo, por lo que ser el lugar donde
se forma mas alcohol. Por el contrario la orna y el humor vitreo tienen
poca glucosa (en la practica, 0 g a partir de las 15 horas de la muerte) y la
contaminacin bacteriana es escasa. Por todio lo anterior, un metodo
valido para reconocer el origen endogeno del alcohol es comparar los
niveles de ste en los tres compartimentos.
En el proceso metabolico del alcohol hay tres fases:
1. Fase de abosorcion, que dira de 30-60 minutos y que estara concluida
con toda certez a las 3 horas.
2. Fase de equilibrio, en la que se alcanza la maxima concentracin de
alcohol en sangre.
3. Fase descendente o de desintoxicacion.
Una vez alcanzada la fase de equilibrio, las concentraciones de alcohol en
sangre y tejidos dependeran de sus concentraciones en agua, pero tambien
de la riquez en enzimas catalizadoras. De ah que la concentracin de
alcohol en el higado sea menor de lo que tericamente le corresponda en
funcion de su contenido en agua, dada su requeza de ADH.
En la mesa de autopsia nos encontramos con un cadver que puede haber
muerto cuando aun estaba en el periodo de absorcin con lo que que las
cifras de alcohol en la sangre no reflejarian las de otras estructuras.
Cuando se encuentra el alcohol en el estomago se plantean dos
posibilidades, que estamos ante la fase de absorcin, o que el alcohol haya
podido difundir pasivamente post mortem al corazon derecho ya a las
visceras contiguas. Por tanto siempre se debe analizar la concentracin de
alcohol en en contenido gastrico, corazon derecho, vena femoral y humor
vitreo.
Como han demostrado Backer y colaboradores, las correlaciones y los
cocientes del alcohol en los fluidos y tejidos con relacion a la sangre eran
mas exactos cuando la concentracin de alcohol en en en el estomago del
cadver era menor de 5.0 g/l que cuando era mayor que esta cifra . para
estos autores esta cifra marca el final del periodo de absorcin.
En ausencia de sangre, cuando las concentraciones en enstomago son
menores de 5.0 g/l, el liquido cefalorraquideo y el huimos vitreo pueden
ser igualmente til para calcular la alcoholemia.
Cuando la concentracin de alcohol en estomago es mayor de 5.0 g/l, se
utiliza la bilis la cual es facil de extraer. A pesar de todas estas variaciones
se cree que el lugar mas adecuado para la toma de muestra post mortem es
la vena femoral (9).

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

La investigacin de la alcoholemia en el cadver tiene implicancias muy fuertes y


de mucha importancia a nivel judicial, por la trascendencia en el mecanismo de la
muerte. La muerte por intoxicacin alcohlica es poco frecuente. Se ha de analizar
el alcohol en distintos fluidos, segn el estadio metablico en que pudiera
encontrarse y las diferencias entre unas muestras y otras a veces son importantes.
La sangre venosa y el humor vtreo son dos fluidos adecuados y con buena
correlacin en los resultados. No obstante hay fenmenos de difusin pasiva o
produccin de alcohol endgeno por putrefaccin que dificulta la interpretacin.
No obstante estas dificultades en medicina forense la valoracin post mortem de la
alcoholemia puede permitir llegara conclusiones sobre el mecanismo y etiologa
mdico legal de la muerte (puede investigarse muertes por homicidio, suicidio o
accidentales, donde el valor de la alcoholemia permite clarificar los hechos)
6.2. REVISIN DE ARTCULOS:
http://tox.umh.es/aetox/revista/Granada99/granada99_20html
TF-09
ESTUDIO DE LA CORRELACIN ENTRE NIVELES DE ALCOHOL
ETLICO EN SANGRE Y HUMOR VTREO EN MUESTRAS
PROCEDENTES DE AUTOPSIAS JUDICIALES. J. Gmez R. Carvajal
Instituto de Toxicologa. Luis Cabrera, 9. Madrid 28002.
La determinacin de alcohol etlico es una de las ms habituales en un laboratorio
de Toxicologa Forense, siendo la sangre la muestra habitualmente analizada. No
obstante no siempre se pude disponer de ella en buenas condiciones, por lo que es
necesario disponer de muestras adicionales con las que ratificar el resultado y ha
sido el humor vtreo el mas frecuentemente analizado. El anlisis de alcohol etlico
en humor vtreo ha sido objeto de inters toxicolgico-forense desde los estudios
realizados por Sturner and Coumbis en 1966. Desde entonces se han realizado
diferentes revisiones por diferentes autores con distintas conclusiones. En este
trabajo se ha estudiado la relacin en el contenido de alcohol etlico en ambas
muestras en un estudio retrospectivo de 197 casos procedentes de autopsias
judiciales, comparndose los resultados con los reflejados en la bibliografa. El
radio medio humor vtreo/sangre es de 1,25 con una SD de 0,27 y un 21% de CV.
En el estudio se tienen en cuenta la adiccin o no de FNa, envasado, cmara de
aire, tiempo transcurrido hasta el anlisis, etc. Con esta recopilacin, obtenida
sobre muestras reales, se trata de poder contestar a la pregunta de cual es el
significado del contenido de alcohol en ambas muestras cuando no se trabaja con
muestras especialmente recogidas y conservadas.
http://tox.umh.es/aetox/revista/Granada99/granada99_20html
TF-18
FIABILIDAD DE LOS RESULTADOS DE LAS TASAS DE ALCOHOLEMIA POSTMORTEM. J.
Esplugues, E. Mills1, A. Rodrguez Jerez2, J.D. Villalan.
Depto. Medicina Preventiva, Salud Pblica, Toxicologa,romatologa y Medicina Legal. Facultad de
Medicina. Universitat de Valncia. 1Servicio de Microbiologa. Hospital Clnico Universitario.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

Facultad de Medicina. Universitat de Valncia. 2Depto. de Fisiologa. Facultad de Medicina.


Universitat de Valncia.
La alcoholemia es uno de los anlisis ms solicitados en Toxicologa Forense, dada la importancia
que el grado de impregnacin alcohlica tiene en los distintos campos del Derecho. La
determinacin de alcoholemia en el cadver presenta limitaciones analticas condicionadas por la
ausencia de signos clnicos, disponibilidad de muestras biolgicas as como por la existencia de
fenmenos postmortem que podran modificar dichas tasas: fenmenos de redistribucin, cambios
fsico-qumicos, difusin de etanol desde el estmago, prdidas de etanol y procesos de
neoformacin, siendo estos ltimos los que poseen un origen ms definido (sntesis de etanol por la
actividad microbiana). Se han analizado 103 muestras de sangre de ventrculo derecho cardaco,
procedentes de cadveres judiciales con diferentes etiologas y datas de muerte, considerando
adems su estado de conservacin. Extrada la sangre se ha procedido, inmediatamente, a la
determinacin de la alcoholemia y a su cultivo microbiolgico, valorando el posible metabolismo
fermentativo de los microorganismos aislados mediante cromatografa gaseosa. No se ha
identificado flora caracterstica de la putrefaccin, ni una secuencia en la aparicin de la misma. Los
resultados obtenidos permiten afirmar que la etanolemia postmortem, determinada inmediatamente
despus de extrada la muestra, no depende de las horas de muerte, conservacin del cadver o
estado del mismo, aunque se observa una relacin entre determinadas causas de muerte y los
microorganismos aislados. Adems, se ha constatado que no existe una influencia significativa
entre la presencia de flora microbiana productora de etanol en la sangre del cadver y la etanolemia
detectada en la misma.
XIII Congreso Espaol de Toxicologa. Granada, 22-24 de Septiembre, 1999. Rev. Toxicol. 16:
(1999)

6.3. METODOLOGA
DE
LA
INVESTIGACIN
TOXICOLGICA,
INCLUYENDO AL DOSAJE ETLICO. CONSIDERACIONES MS
IMPORTANTES (16).
La investigacin toxicolgica comprende un conjunto de procedimientos analticos
que tienen por objeto el aislamiento, identificacin y determinacin cualicuantitativa de los txicos, tanto en el vivo como en el cadver, con el fin de
evidenciar sustancias qumicas, permitiendo el diagnstico y la correlacin de
evidencias para el esclarecimiento de los hechos delictuosos.
Es necesario las descripciones detalladas de procedimientos para el recibo de
muestras, la aceptacin y el acceso a ellas, la cadena de custodia, la eleccin de
mtodos, el anlisis propiamente dicho y la notificacin; adems las pautas bsicas
de garanta de calidad. Es indispensable mantener al da el manual con respecto a
mejoras de los mtodos, nuevo equipo, nuevas referencias a la literatura y nuevas
directrices interpretativas basadas en los conocimientos cientficos ms recientes o
la prctica legal de la regin.

MUESTRAS
Las muestras para el anlisis toxicolgico deben recogerse teniendo en cuenta
las condiciones particulares de cada caso y las referentes a la distribucin y
metabolismo.
Las muestras requeridas en Toxicologa son:

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CONTENIDO GSTRICO.
El aspirado gstrico, lquido del lavado gstrico (primeros 500 ml) o bien el
vmito son muestras que deben remitirse al laboratorio siempre que sea
posible. Se debe evitar adicionarles sustancias a excepcin de solucin salina.
Estas muestras son esenciales en el screening general de txicos, ya que no
presentan problemas tcnicos en su utilizacin, siendo bastante fcil la
separacin del compuesto txico. A menudo se pueden encontrar en ellas
cpsulas o tabletas enteras, de fcil identificacin. Adems, si el txico penetro
por va oral y no han transcurrido ms de 5 -6 horas desde la ingesta, las
concentraciones sern normalmente muy elevadas, lo cual facilita su deteccin.
Un resultado negativo en el screening de txicos partiendo del contenido
gstrico puede indicar que el txico no entr por va oral o ha transcurrido un
tiempo excesivo desde la ingesta, lo cual no descarta la posibilidad de una
intoxicacin. De cualquier forma, los resultados obtenidos con esta muestra no
son representativos del grado de intoxicacin, puesto que se refieren al txico
no absorbido.
SANGRE.
Es una de las muestra ms tiles para la identificacin de txicos y
especialmente para el anlisis cuantitativo. No hay que olvidar, sin embargo,
que los txicos orgnicos bsicos alcanzan concentraciones muy bajas en esta
muestra, siendo muchas veces difcil su deteccin por los mtodos usuales de
screening.
La sangre se utiliza normalmente para el screening de txicos cidos y neutros,
cuyas concentraciones en caso de intoxicacin son elevadas, as como para el
estudio de gases y sustancias voltiles, siempre que se conserven en recipientes
cerrados hermticamente. Una consideracin digna de mencin es la referente a
la conveniencia de obtener muestras de sangre que fluya libremente (p. Ej.
Vena femoral) sin necesidad de presionar ningn tejido para obtener muestra
suficiente. La razn es que, si se presiona, se recoger tambin fluido hstico
que puede tener concentraciones bastante diferentes del txico detectado en la
sangre. Este efecto ser siempre ms evidente en aquellos txicos que se unen a
los tejidos ms que a las protenas sanguneas.
En general tampoco se recomienda el uso de sangre recogida en la autopsia de
cavidades abiertas, por la posibilidad de que se contamine con otros fluidos que
pueden tener un efecto de concentracin o dilucin del txico segn los casos.
Tambin debe tenerse en cuenta el hecho de la distribucin del txico en la
sangre. Normalmente los txicos se distribuyen entre los eritrocitos y el plasma
en proporcin variable para cada sustancia. La mayor parte de los txicos
orgnicos van disueltos en el plasma o unidos a protenas, mientras que son
pocos los que se transportan unidos a los hemates. Por ello, la sangre total y el
plasma son las muestras ms representativas. Usando sangre total nos
aseguramos de que tanto los txicos que se concentran en los eritrocitos como
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los que se unen a las protenas van a estar presentes en la muestra analizada.
Sin embargo, el plasma resulta ms cmodo, ya que posee menos interferencias
y pigmentos que la sangre y evita la formacin de emulsiones con los
disolventes orgnicos, como sucede frecuentemente con la sangre total.
Lo ms recomendable es el envo de sangre total con adicin de un
anticoagulante adecuado. Tan pronto como sea posible, se centrifuga para
separar el plasma y evitar que la hemlisis de los eritrocitos interfiera con el
anlisis posterior.
Las muestras de sangre post mortem estn a menudo hemolizadas y
putrefactas, pero son las nicas disponibles. En estos casos puede dejarse la
muestra en reposos y utilizarse cualquier porcin de la misma prxima a la
superficie, ya que ser rica en plasma.
En general es mejor agitar la muestra vigorosamente para conseguir una mezcla
homognea, antes de tomar una porcin para el anlisis. Para romper o disolver
los cogulos, puede aplicarse un tratamiento con ultrasonidos (15 - 20 seg.)
ORINA.
Representa una muestra idnea para realizar una gran variedad de ensayos
preliminares en el screening de txicos. Las mayores ventajas de esta muestra
son la concentracin de un txico en este fluido puede llegar a ser 100 veces
mayor que en la sangre, adems, la orina est exenta de protenas, por lo que
las interferencias son mnimas.
Se recomienda entre 50 a 100 ml. Recoleccin de orina de 24 horas para
determinar por ej. metales pesados, se obtiene unos 150 ml representativos del
total de orina recolectada.
Una desventaja es que muchos txicos se eliminan prcticamente en su
totalidad como metabolitos, que a veces son comunes a varias sustancias
(benzodiacepinas por Ej.), por lo que en estos casos la identificacin del txico
requerir el anlisis de otro fluido o tejido. Por otra parte, si la muerte se
produce rpidamente, como en el caso de la inyeccin de un analgsico
narctico o por inhalacin de cido cianhdrico, la deteccin del txico o sus
metabolitos en orina ser imposible.
A pesar de todo, la orina sigue siendo la muestra de eleccin para la deteccin
de drogas psicotrpicas, ya que puede obtenerse fcilmente y en cantidades
suficientes, y generalmente contiene concentraciones detectables de txicos,
incluso cuando se han administrado a dosis teraputicas.
Es aconsejable no aadir conservadores que podran interferir en el anlisis
posterior, debiendo conservarse en fro hasta su anlisis. En casos necesarios
puede usarse fluoruro sdico o azida sdica.

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HUMOR VTREO.
Su fcil accesibilidad, el disponer de 2 ml en cada ojo, no contener demasiadas
protenas y estar hurtado a la circulacin general, por lo que posee pocas
enzimas y es ms resistente a la contaminacin bacteriana, hacen a este fluido
sumamente til para el anlisis de alcohol y otras drogas.
HGADO.
El hgado es el lugar donde se lleva a cabo la biotransformacin de la mayora
de txicos y, de hecho, los niveles de txicos en este tejido son en general
superiores a los de la sangre. En ocasiones el hgado puede ser el nico tejido
donde se encuentre una sustancia txica en concentracin adecuada para su
identificacin y cuantificacin. Todo ello unido a su gran tamao determina su
utilidad en los anlisis toxicolgicos post mortem.
Este tejido a sido valorado clsicamente como la muestra ms importante para
la deteccin de cualquier tipo de txico, sobre la base de las consideraciones
anteriores. Sin embargo, en la actualidad su uso ha decrecido, a medida que se
ha incrementado la sensibilidad de las tcnicas analticas, que permiten trabajar
satisfactoriamente con sangre. No obstante, el hgado es de gran utilidad
cuando se trata de cuerpos exhumados o en los que es de gran dificultad
obtener muestras de sangre.
Al extraer el hgado, es importante evitar la contaminacin por bilis, por lo que
es aconsejable extraer la vescula biliar antes de proceder a tomar la muestra de
hgado.
Al igual que con otras muestras de tejidos, no deben adicionarse conservadores
que puedan contaminar o producir interferencias en el anlisis, debiendo
mantenerse, en la medida de lo posible, a bajas temperaturas.
OTROS TEJIDOS Y FLUIDOS BIOLGICOS.
Adems del hgado, son muy utilizados otros tejidos, como cerebro y rin. El
cerebro es muy til cuando se trata de muertes por inhalacin de solventes
(tolueno, cloroformo, etc.), debido a las altas concentraciones que alcanzan
estas sustancias en el tejido cerebral, donde adems, son retenidas tras la
muerte. Esta muestra es especialmente til para determinar la concentracin de
alcohol en aquellos casos en que no se dispone de una muestra adecuada de
sangre.
El rin es el tejido de eleccin en intoxicaciones por metales y otros txicos
que se acumulan especficamente en l.
La bilis puede ser interesante para el anlisis de sustancias que se eliminan por
va biliar. Es particularmente til en las muertes por sobredosis de opiceos, ya
que contiene altas concentraciones de los glucornidos de dichos compuestos.

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Debe extraerse la vescula biliar intacta y remitirse por separado en un


recipiente idneo.
Cuando un cuerpo est en un avanzado estado de descomposicin, puede ser
realmente difcil determinar la concentracin real de un txico en el momento
de la muerte.

MUESTRAS PROCEDENTES DE SUJETO VIVO.


Los objetivos que se persiguen en el terreno mdico legal mediante el anlisis
de este tipo de muestras son los siguientes:
1. Establecer el diagnstico de enfermedades que interesan con fines
judiciales.
2. Comprobar un estado toxicolgico o presencia de restos metlicos y su
pronstico o circunstancias.
3. Detectar el consumo de drogas estupefacientes .
En la prctica las muestras para estas investigaciones se reducen a sangre y
orina, que se remitirn en cantidad suficiente para llevar a cabo los anlisis
pertinentes y conservar una parte de aquellas en el laboratorio durante algn
tiempo para ulteriores comprobaciones.
La normativa recomendable es la siguiente:
1. SANGRE TOTAL SIN COAGULAR:
a) Agente conservante: dos gotas de heparina o de solucin al 10% de
fluoruro sdico o EDTA - K2 por cada 5 ml de sangre. Para la
determinacin de plomo por espectroscopia de absorcin atmica no se
debe usar FNa, ya que interfiere en el anlisis.
b) Cantidad: entre 5 a 10 ml para la investigacin toxicolgica general
(screening) y la posterior confirmacin y cuantificacin del txico.
2. ORINA:
a) Agente conservante: no debe aadirse ningn conservante o en todo
caso, azida sdica (1 % p/v). Conservar en fro.
b) Cantidad: entre 50 a 100 ml para el screening general de txicos y
posibles determinaciones especiales. En general no se requiere orina de
24 horas.
Las muestras se dispondrn en recipientes de tamao adecuado,
perfectamente limpios y secos, y cerrados hermticamente. Cada recipiente
debe llevar una etiqueta con indicacin de la muestra contenida, nombre del
paciente, fecha, procedencia de la muestra y cualquier advertencia sobre las
precauciones en su manipuleo (SIDA, hepatitis).

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En el caso particular de las drogas de abuso debe vigilarse estrechamente la


recogida de las muestras de orina y su envo al laboratorio para garantizar
que la muestra analizada corresponde al individuo en cuestin y no ha sido
adulterado en modo alguno.
3. SANGRE PARA ALCOHOLEMIA Y TXICOS VOLTILES.
Cuando las muestras de sangre vayan destinadas a la determinacin de
alcohol etlico y disolventes orgnicos, hay ciertas normas especiales que
deben ser observadas:
a) Desinfeccin del instrumental. Deber realizarse con agua en
ebullicin, nunca con alcohol ni desinfectantes.
b) Desinfeccin de la piel. Se efectuar con solucin acuosa de sublimado,
agua con jabn o agua pura. Nunca se emplear alcohol, tintura de yodo
ni otros disolventes con fracciones voltiles. Despus de la extraccin
se realizar la desinfeccin adecuada.
c) Cantidad de sangre que hay que extraer: unos 5 ml, con los cuales
pueden llevarse a cabo varias determinaciones paralelas.
d) Frasco para remitir la muestra. Debe utilizarse un frasco pequeo, de
los empleados para antibiticos o de los utilizados para la toma de
muestras clnicas, perfectamente lavados y absolutamente secos. La
sangre deber llenarlo totalmente y el cierre debe ser hermtico. No se
emplearn jams tubos de ensayo tapados con algodn.
e) Aditivos conservadores. Es recomendable adicionar a cada frasco unos
50 mg de fluoruro sdico slido para los 5 ml de muestra indicados;
mezclar bien despus de tapar. Se procurar evitar asimismo que la
muestra reciba calor. Si la muestra se prepar adecuadamente, puede
remitirse por correo.
f) Documentacin. Estas muestras debern ir acompaadas de un oficio
certificativo, firmado por el facultativo que realice la extraccin, en que
se consigne si la toma y preparacin de las muestras se verifica de
acuerdo con estas normas, adems de indicar el nombre de la persona a
quien se extrajo la sangre, hora y fecha de la extraccin. Tambin se
consignar que autoridad judicial orden la extraccin, cuando la
remisin se efecte directamente desde casas de socorro, centros
asistenciales, etc.

MUESTRAS PROCEDENTES DE NECROPSIA.


La seleccin, preparacin y remisin de estas muestras deben hacerse conforme
a las normas establecidas por el ATQF de la ORCRI. Aunque estas normas son
especficas para la preparacin y remisin de muestras , es recomendable que
sean fielmente observadas, aunque las muestras se remitan a otros laboratorios.
1. En los casos en que se desconoce totalmente la naturaleza del txico que
hay que investigar, es preciso remitir al laboratorio las muestras que a
continuacin se detallan:

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a) Un recipiente con estmago y su contenido, adems de los vmitos y


los lavados gstricos que en el tratamiento de urgencia se hicieran con
agua sola.
b) Un frasco seco con sangre en cantidad de unos 10 ml.
c) Un frasco de orina: toda cuanta sea posible extraer.
d) Un recipiente con, aproximadamente, 100 g de cerebro.
e) Un recipiente con hgado (alrededor de 100 g).
f) Un recipiente con la vescula biliar.
g) Un recipiente con unos 100 g de pulmn.
h) Cuando se sospechan intoxicaciones crnicas por arsnico, talio, uranio,
berilio, estroncio o flor, debern recogerse muestras de cabellos, uas
o huesos.
Observaciones:
i) Cuando interese la investigacin de txicos gaseosos o voltiles, es
necesario evitar que los frascos contengan cmara de aire, por lo que
debern llenarse en su totalidad y cerrarse hermticamente. Estos
frascos se mantendrn a baja temperatura el mayor tiempo posible.
j) Nunca se aadirn agentes conservadores a las muestras, excepto en la
sangre para la determinacin de alcohol etlico y disolventes, que
llevarn fluoruro sdico.
k) Nunca se conservarn en formol muestras de vsceras destinadas al
anlisis qumico - toxicolgico, reservndose aquel para muestras en
que interese el estudio histopatolgico.
Recipientes. Los recipientes recomendados para contener las muestras que
hay que remitir al laboratorio son los frascos de vidrio o plstico.
Preferentemente dichos recipientes sern nuevos y enjuagados. Si en alguna
ocasin debieran emplearse frascos ya utilizados anteriormente, se lavarn
profusamente con leja y acto seguido se volvern a lavar de forma
reiterada con agua corriente y agua destilada.
Los frascos destinados a contener sangre debern secarse perfectamente
para evitar su hemlisis.
Todos estos recipientes sern remitidos dentro de un
contenedor
impermeable, con preferencia nevera, cerrado hermticamente, sin que se
ejerza presin o violencia sobre ellos.
Etiquetado y precintado de la muestra. El contenedor que encierre las
muestras debe estar cerrado hermticamente y convenientemente
precintado: en l har constar el juzgado remitente (sello).
Cuando la muestra venga contenida en varios frascos o paquetes, todos y
cada uno de ellos estarn provistos de una etiqueta con expresin del
contenido, nombre de la vctima, si se trata de vsceras o lquidos
orgnicos, juzgado de instruccin, nmero de sumario y fecha.

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Cuando interesa la investigacin de un txico determinado, por existir


sospechas o conocimiento de su existencia, se pueden seleccionar las
muestras ms convenientes para cada caso, de acuerdo con las normas ya
descritas y la informacin recogida en la siguiente tabla :

Alcaloides
Alcohol etlico
Drogas estupefacientes
Medicamentos
Plaguicidas
Metales
CO y gases
Hongos y setas

Sangre

Orina

Contenido
gstrico, y
vmitos

X
X
X
X
X
X
X

X
X
X
X
X
X

X
X
X
X

Cerebro

X
X
X
X
X

Hgado

Ri
n

X
X

X
X

X
X
X

X
X
X

Bilis

Huesos,
uas y
pelos

Sustancias
sospechosas

X
X
X
X
X
X
X

Rtulo modelo

Nombre del dador______________________________________________________


Nro. de identificacin__________________________________________________
Fecha y hora de toma___________________________________________________
Lugar de toma________________________________________________________
Nombre del supervisor de la toma_________________________________________
Sustancia(s) que debe(n) buscarse_________________________________________
Nro. de muestras_______________________________________________________

Formas en que puede invalidarse la muestra

Pueden introducirse en la muestra diversas sustancias. La sal de cocina,


los detergentes y algunas sustancias de uso domstico, como el
hipoclorito (leja), pueden destruir las drogas o afectar el anlisis de
modo que produzca resultados negativos falsos.
Pueden aadirse sustancias ilcitas a la muestra para producir resultados
positivos.
Puede hacerse una pequea perforacin en el fondo del recipiente para
producir fuga de contenido.
Apretando una jeringa escondida debajo del brazo y provista de un tubo
que llegue a la regin genital, el sujeto puede introducir en la muestra
agua u otras sustancias que la diluyan o contaminen.
El sujeto puede hacer pasar como suya orina de amigos que no usan
drogas.

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El sujeto puede echar agua del retrete en el recipiente de la muestra para


diluir la orina.

Divisin del material destinado al anlisis


La divisin del material deber efectuarse teniendo en cuenta el nmero e
importancias de las operaciones a realizar.
*
*
*
*
*

Ensayos preliminares: cuerpos gaseosos y venenos voltiles.


Metales y no metales.
Txicos orgnicos fijos.
Contra prueba del perito.
Fraccin destinada a la cuantificacin del txico.

Esta divisin deber respetarse an en el caso de conocerse el txico


presente en las vsceras o material que se examina, slo que en estos casos
se efectuar su investigacin directa en la fraccin correspondiente,
prescindiendo de las operaciones restantes si el experto lo considera
conveniente.
1/2

1/2
1ro

Ensayos preliminares:
voltiles y gaseosos
2do Metales y no metales

Fraccin que se pone a

cuerpos

Anlisis cualitativo

3ro Txicos orgnicos fijos


4to Contraprueba del perito

Disposicin del Juez


Cuantificacin del
txico identificado

Anlisis cuantitativo

Extraccin de txicos voltiles


Se incluyen aqu los txicos que se volatilizan por debajo de los 100 C,
por lo cual son arrastrados por el vapor de agua cuando sta destila. Para la
extraccin de estos txicos puede recurrirse a los siguiente procedimientos:
1. Destilacin (en medio cido o bsico). Se utiliza para ello un
destilador. Se aslan por este procedimiento:

Destilacin cida: txicos minerales (cloro, bromo, yodo, cido


sulfhdrico, alcoholes, aldehdos, cetonas, cidos orgnicos,
hidrocarburos aromticos, etc.).
Destilacin bsica : anfetaminas, anilinas, alcaloides lquidos
voltiles, algunos gases solubles en agua.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

2. Microdifusin. Permite el aislamiento y la deteccin de los txicos


voltiles de forma rpida y fcil. El dispositivo ms usado es la clula
de Comway, que consiste en dos placas de petri concntricas, con una
base comn. La muestra se sita en el comportamiento exterior y el
absorbente o disolvente, segn los casos, en el interior. Despus
se
cierra hermticamente con una tapadera de vidrio, sobre cuyo borde
esmerilado se aplica una fina pelcula de silicona, o grasa similar, para
asegurar un perfecto cierre.
Cualquier sustancia voltil presente en la muestra se distribuye entre
los lquidos presentes y la cmara de aire que queda dentro de la clula.
Si el vapor es ms soluble en la solucin del compartimiento interior, se
disolver y concentrar en dicha solucin. Dejando transcurrir el tiempo
adecuado, todo el txico voltil habr pasado de la muestra contenida
en el compartimiento exterior a la solucin "captadora" dispuesta en el
pocillo central. A veces se puede adicionar un cido o una base para
favorecer la liberacin del txico de la muestra.
Las determinaciones hechas con esta tcnica requieren normalmente 1
ml de muestra e incluso pueden utilizarse muestras menores con
dispositivos ms reducidos. El anlisis por microdifusin elimina la
necesidad de hacer una destilacin, con el consiguiente ahorro de
tiempo y personal. Adems, se obtiene un producto concentrado, no
habiendo necesidad de concentrar, como ocurre en el caso de la
destilacin, si se quiere hacer un buen anlisis. Adicionalmente, con
esta tcnica se pueden procesar varias muestras a la vez. En la siguiente
tabla se muestran algunas aplicaciones de inters toxicolgico de esta
tcnica.

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

APLICACIONES DE LA TCNICA DE MICRODIFUSIN

Anlisis
Muestras

Compartimiento externo
Agente liberador

Compartimiento interior

Tiempo
de

difusin
Acetaldehido
3 horas
Acetona

3 ml de sangre

3-4 gotas de H2SO4 al 10 %

3.3 ml de sulfato de sodio 0.15 M

5 ml de tejido
3 ml de sangre

3-4 gotas de H2SO4 al 10 %


1 ml de H2SO4 al 10 %

3.3 ml de sulfato de sodio 0.15 M

5 ml de tejido
1 ml de sangre

1 ml de H2SO4 al 10 %

2 ml de cloruro de paladio 0.15 M

2-4 ml de sangre

3-4 gotas de H2SO4 al 10 %

3.3 ml de NaOH 0.1 M

1 ml de K2CO3

2 ml de dicromato potsico

3-4 gotas de H2SO4 al 10 %

3.3 ml de sulfato de sodio 0.15 M

---

1 ml de tolueno

3 horas

1 ml de K2CO3

3.3 ml de H2SO4 al 10 %

3 horas

1 ml de K2CO3

3.3 ml de H2SO4 al 10 %

3 horas

3-4 gotas de H2SO4 al 10 %

3.3 ml de NaOH 0.1 M

3-4 gotas de H2SO4 al 10 %

3.3 ml de NaOH 0.1 M

3 horas
Monxido de
1 hora
carbono
Cianuro
3 horas
Etanol
Formaldehido
3 horas

5 ml de tejido
0.8 ml de sangre
4 ml de tejido
3 ml de sangre
5 ml de tejido
1-4 de sangre
1-4 ml de tejido

Hidrocarburos
halogenados
Isopropanol

2 ml de sangre
5 ml de tejido
2 ml de sangre
5 ml de tejido
2-4 ml de sangre

Metanol
Fenoles

3 horas

3 horas
5 ml de tejido
2-4 ml de sangre

Sulfuro
3 horas

3. Tcnica de "espacio de cabeza". La muestra se deposita en un vial


cerrado con tapn perforable, en el que se deja una cmara de aire. Se
termostatiza a 60 C durante 30 minutos y se extrae con una jeringa
para gases una muestra de la parte superior del frasco para inyectarla en
un cromatgrafo de gases. Es la tcnica ms sencilla y actualmente la
de mayor uso para el anlisis de txicos gaseosos y voltiles.
Diferencias en los valores de concentraciones txicas en las distintas
muestras. sangre total, plasma, suero, hgado, etc. A veces se confunden
los datos de sangre total-suero-plasma, cuando en la prctica pueden ser
muy diferentes y, por tanto, no comparables. Algunos tratamientos
(diuresis forzada, hemoperfusin, etc.) influyen decisivamente en las
concentraciones del txico, dando una cifra difcilmente comparable
con los valores de referencia en ausencia de dichos tratamientos. En
este sentido es necesario precisar con exactitud la zona de donde se
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71

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

obtuvo la muestra, si se quiere hacer una correcta interpretacin del


resultado analtico.
Es bien conocido el fenmeno denominado redistribucin post mortem
de los txicos, segn el cual las concentraciones sanguneas post
mortem son funcin del sitio donde se toma la muestra, tambin se ha
evidenciado una dependencia temporal en las concentraciones
sanguneas post mortem, si bien el mecanismo exacto de estos cambios
no se conoce claramente. En la tabla se expone, a modo de ejemplo, la
variacin en la concentracin de antidepresivos tricclicos en funcin
del tiempo post mortem y el lugar de la toma de muestra.
Concentraciones de txicos (mg/l) de acuerdo con el sitio de
procedencia y el tiempo transcurrido desde la muerte.
3. Diferencias individuales en la sensibilidad a un txico, por causas
genticas, metablicas o circunstanciales.
4. Interacciones entre txicos. Este factor representa un obstculo
importante para la interpretacin del anlisis toxicolgico, ya que existe
la posibilidad de que haya una potenciacin de efectos (sinergismo) o
un antagonismo. La interaccin de dos o ms txicos con actividad
depresora del sistema nervioso central (benzodiacepinas + alcohol)
puede originar la muerte, aunque ninguno de los dos por separado
alcancen niveles considerados txicos.
5. Diferencias de sensibilidad y exactitud en las tcnicas analticas
empleadas.
Debe insistirse en la necesidad de un estudio minucioso de todos los
datos disponibles en un caso concreto y de la estrecha colaboracin
entre analista, anatomopatlogo forense e investigador para una
correcta interpretacin del resultado de un anlisis toxicolgico.

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72

ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

CONCLUSIONES:
1.-

Un Laboratorio de anlisis debe producir datos analticos de alta calidad por medio
del uso de mediciones que sean precisas, confiables y apropiadas para tal fin.

2.-

El procedimiento de dosaje etlico tiene implicancias y consecuencias legales, por


ello debe trabajar con un correcto sistema de calidad y, a la vez, con criterios
definidos y procedimientos estandarizados, instrumentos calibrados y mtodos
validados; controles internos y externos de calidad, etc.

3.-

Los niveles de alcoholemia estn alterados como funcin de la exposicin a la


altura por razones an no bien comprendidas; de la literatura estudiada se
desprende que las concentraciones de alcohol en sangre para los nativos de la
altura y los residentes en la altura, son menores que los encontrados en los hombres
que viven a nivel del mar.

4.-

El coeficiente de etiloxidacin, como consecuencia natural de lo expuesto


anteriormente, estudiado en otras realidades, no es aplicable al Cusco; por lo tanto,
tampoco es aplicable los clculos retrospectivos de alcoholema basados en estos
datos.

5.-

Del Carpio y otros, en su estudio del coeficiente de etiloxidacin para el Cusco


hall que era de 21.34 mg/dl/hora.

6.-

La alcoholemia en cadveres puede encontrarse artefactualmente aumentadas;


puede darse el caso de formacin por fermentacin pos mortem, o verse degradado
por accin bacteriana y redistribuido por el organismo por traumas y otros
procesos.

7.-

Los anlisis de dosaje etlico tienen implicancias distintas en dos circunstancias


diferentes: accidentes de trnsito e incidentes (homicidios, violaciones, etc)

I CURSO DESCENTRALIZADO EN PERITAJES CRIMINALSTICOS 2005

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

RECOMENDACIONES.
1.-

Adoptar las normas ISO 17025 (2000) Requisitos generales relativos a la


competencia de los laboratorios de ensayo y calibracin, referente a la garanta de
calidad en un laboratorio de toxicologa forense (el procedimiento de dosaje etlico
est incluido aqu)

2.-

Debe implementarse un Laboratorio Toxicolgico de referencia (puede ser de


carcter nacional o regional p.e. en el Cusco-) que uniformice criterios analticos,
realice ejercicios de intercomparacin de dosaje etlico, etc. que faciliten la
comparacin de resultados con los datos obtenidos en la bibliografa, y as poder
llegar a interpretaciones fiables; con la garanta de que el resultado analtico que se
presente ante un tribunal de justicia sea un resultado confirmado. Este laboratorio
de referencia debe contribuir a la unidad de criterio cientfico y a la calidad de la
pericia analtica, as como al desarrollo de las ciencias forenses.

3.-

las instituciones involucradas en anlisis qumico aplicado: Criminalstica, Dosaje


etlico, Universidad, etc., deben iniciar un programa de investigacin de alcohol y
altura.

4.-

Las Unidades Policiales de la X-DIRTEPOL Cusco, deben estudiar y analizar la


probabilidad de usar el coeficiente de etiloxidacin para el Cusco de 21.34 mg/dl/h
para efectuar clculos retrospectivos cuando las circunstancias lo exijan a fin de
afinar la investigacin policial.

5.-

Los anlisis de dosaje etlico en cadveres (puede haber produccin de alcohol


endgeno) debe efectuarse en muestra de humor vtreo ya que esta matriz
permanece libre de cambios provocados por la fermentacin postmortem durante
un perodo de tiempo razonable despus de la muerte.

6.-

La Oficina Regional de Criminalstica de la X-DIRTEPOL Cusco debe


implementar una seccin de dosaje etlico en atribucin de sus funciones de aportar
anlisis no relacionados con el trnsito: incidentes, homicidios, violaciones, etc., e
implementar una biblioteca especializada que rena bibliografa de investigaciones
y avances en este campo.

I CURSO DESCENTRALIZADO EN PERITAJES CRIMINALSTICOS 2005

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ASPECTOS E IMPLICANCIAS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA INVESTIGACIN FORENSE

BIBLIOGRAFA.
1.

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2.

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3.

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http://tox.umh.es/aetox/Revista/Revista22_2/ponencias/contreras.pdf

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5.

CONTRERAS M.T. Presentacin de los resultados del ejercicio de


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Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. Dpto. de Barcelona, Servicio de
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6.

CONTRERAS M.T. La garanta de calidad en un laboratorio de toxicologa


forense segn la norma ISO 17025. Servicio de garanta de calidad. Instituto
Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. Departamento de Barcelona.
http://tox.umh.es/aetox/Revista/Revista22_2/ponencias/contreras.pdf

7.

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8.

DEL CARPIO J., C; RAMREZ F., V. Estudio Del coeficiente de etiloxidacin en


bebedores sociales de la ciudad del Cusco tesis. C.P. Farmacia. Universidad
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Nacional
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