Pontificia Universidad Catlica de Chile

Facultad de Ciencias Biolgicas

Biologa de la clula
BIO-141C Seccin 1

LABORATORIO N5
Divisin Celular

Integrantes
Olga Marn Cousio
Carla Montenegro Prez
Fernanda Muoz Baeza
Ayudante: Osvaldo Contreras
Profesor: Enrique Brandan
Grupo 2 seccin 2A

Fecha de entrega: martes 19 de mayo de 2015

Objetivos

Los objetivos de este prctico de laboratorio son conocer e identificar las distintas
etapas de la mitosis, adems de analizar el significado biolgico de la mitosis del
ciclo celular.

Metodologa
A partir de un bulbo de cebolla enraizada en agua, se tom una raz nueva
(blanca) desde su base y se cort de 1 a 2 mm de la punta de la raz con un bistur
y se puso en un portaobjetos. Con una pipeta se agregaron dos gotas de cido
clorhdrico y se dej actuar durante cuatro minutos. Luego se removi el cido
clorhdrico con papel absorbente, se agregaron cinco gotas de agua destilada para
lavar el cido y se removi el agua con papel absorbente. Se cubri la raz con
una gota de Azul de Toluidina, y se dej actuar durante dos minutos; luego,
cuidadosamente se absorbi con papel el exceso de solucin de tincin que
estaba alrededor de la raz. Se lav agregando abundante agua con el gotero y se
volvi a absorber el lquido que rode a la raz, se repiti este paso cinco veces Se
agreg una gota de agua sobre la raz y se cubri con un cubreobjetos utilizando
un papel absorbente aplicando una fuerte presin sobre el cubreobjeto con el fin
de esparcir las clulas. Se mont el portaobjetos en el microscopio y se usaron
objetivos de bajo poder para detectar la ubicacin de la raz y posteriormente el
objetivo con poder 40x para observar los estados mitticos de las clulas.
Despus, se identificaron las diferentes etapas de la mitosis segn el
ordenamiento de los cromosomas recin teidos.
Se dispuso a responder las actividades propuestas en la gua prctica entregada
en clases, la cual contena preguntas conceptuales, clculo de ndice mittico (IM),
clculo del ndice de fases (IF), y el tiempo de fase (TF).

Resultados
1.- Etapas de la mitosis segn lo observado:

Figura 1. Cromosomas condensados

desordenados.

Figura 2. Cromosomas alineados en el

ecuador de la clula.

Figura 4. DNA descondensado en los

extremos de la clula.

Figura 3. Cromtidas hermanas

siendo separadas

2.- Respecto de la variacin de la cantidad de ADN de una clula que ha sufrido

un ciclo celular completo (figura de la gua prctica), responda:
a. A qu perodo del ciclo celular corresponde cada una de las letras
sealadas en la figura?
A

G1

G2

Profase y metafase.

Telofase y citocinesis.

b. Cules letras corresponden a la interfase y cul es su importancia en el

ciclo celular? Qu sucedera si esta etapa no ocurriese?

Las letras A, B y C corresponden a la interfase, y su importancia en el ciclo celular

es que en la interfase la clula aumenta su tamao, realiza actividades
metablicas, replica su material gentico, produce nuevos organelos como
ribosomas y mitocondrias y se prepara para la fase M [1]. Si esta etapa no
ocurriese y la clula entrara a la fase M, se produciran dos clulas haploides y no
tendran los organelos ni el tamao necesario para ser viables.
3.- Clculo del ndice mittico (IM)
IM = (n clulas en mitosis/ n clulas totales) x 100
IM = (27/100) x 100 = 27
4.- Clculo de ndice de fases (IF)
IF = (n clulas en x fase / n total de clulas en mitosis) x 100
IF para interfase = (16/27) x 100 = 59
IF para profase = (3/27) x 100 = 11
IF para metafase = (2/27) x 100 = 7
IF para anafase = (1/27) x 100 = 4
IF para telofase = (5/27) x 100 = 19
5.- Tiempo de fase (TF).

ETAPA

n clulas

% clulas

IF

TF

INTERFASE

16

59

59

59

PROFASE

11

11

11

METAFASE

ANAFASE

TELOFASE

19

19

19

TOTAL

27

100

100

100

6.- Qu ocurre con la mitosis en clulas cancergenas? Investigue y discuta con

sus compaeros las diferencias de estas clulas con clulas normales.
En clulas cancergenas el sistema de control del ciclo celular (basado en
protenas como las CDK y la p53) falla, produciendo una desregulacin del ciclo y
la divisin celular se descontrola [2].
La diferencia entre las clulas cancergenas y las clulas normales es que en las
primeras el gen p35 sufre una mutacin o por otra parte los protooncogenes sufren
mutaciones e inducen instneamente una desregulacin del ciclo, pasando a ser
oncogenes [3]. Las clulas cancergenas tienen ciclos celulares ms rpidos y
cortos.

Discusin
En la imgenes expuestas en los resultados, es posible visualizar las fases de la
mitosis pues se observa en las cuatro figuras, el material gentico condensado y
organizado en cromosomas, teidos con Azul de Toluidina, el cual se une al
material gentico, pues es un tinte metacromtico acidoflico que selectivamente
tie componentes cidos de tejidos [4] por lo que tiene una gran afinidad con los
cidos nuclicos y se une al material nuclear de los tejidos con un alto contenido
de DNA y RNA [5]. Tambin podemos distinguir las etapas de la mitosis. En la
figura 1, se observa el material gentico condensandose, las cromtidas estn
desorganizadas y la carioteca est desintegrada, distinguiendo as la Profase [6].
En la figura 2, se ven los cromosomas dirigidos hacia el centro de la clula, a esto
se le llama ordenamiento en el plano ecuatorial [7], caracterstica propia de la
Metafase. Luego, en la figura 3 se observa claramente la separacin de
cromtidas hermanas, gracias al acortamiento y alargamiento de las fibras del
huso mittico [8], este hecho ocurre en la etapa de la mitosis llamada Anafase.
Finalmente, en la figura 4, se logra observar con notable claridad que el material
gentico ubicado a los extremos de la clulas, se comienza a descondensar y se
reintegra la carioteca por lo que se pueden observar los dos ncleos de las futuras
clulas hijas, que sin embargo, an no estn diferenciadas como dos clulas
independientes y separadas, esta etapa se identifica como Telofase [9].

Conclusin
En este prctico se logr conocer e identificar las distintas etapas de la mitosis
observando al microscopio ptico clulas, obtenidas de la punta de la raz de una
cebolla, teidas con azul de toluidina y fijadas con cido clorhdrico. Algunas de
ellas es posible observarlas durante el proceso mittico. Adems se analiz el
significado biolgico de la mitosis en el ciclo celular investigando los sucesos que
ocurren en cada una de sus etapas. Se observaron clulas en proceso mittico en
todas sus etapas: Profase, Metafase, Anafase y Telofase, identificadas gracias a la
ubicacin de los cromosomas en cada una de ellas. Se aprendi a calcular el
ndice mittico, el ndice de fases y el tiempo de fase a partir de un campo ptico
del microscopio.
La mitosis es muy importante en el ciclo celular, pues gracias a ella es posible que
a partir de una clula diploide, se formen dos clulas diploides hijas, similares su
progenitora. As el rol biolgico del proceso mittico es el crecimiento en caso de
organismos pluricelulares y la reproduccin en organismos unicelulares.

Bibliografa
[1] Patricia Campos, Biologa 2, 2002, segunda edicin, Editorial Limusa, pgina
56.
[2] Neil A. Campbell, Jane B. Reece, Biologa, 2007, sptima edicin, Editorial
Mdica Panamericana, captulo 12, pgina 234.
[3] ngel Herrez, ngel Herrez Snchez, Biologa molecular e ingeniera
gentica, 2012, Segunda Edicin, Editorial Elsevier Health Sciences, pgina 454.
[4] Epstein JB, Scully C, Spinelli J. Toluidine blue and Lugol's iodine application in
the assessment of oral malignant disease and lesions at risk of malignancy,1992,
Editorial Oral Pathol Med, pgina 60.
[5] Epstein JB, Oakley C, Millner A, Emerton S, van der Meij E, Le N, The utility of
toluidine blue application as a diagnostic aid in patients previously treated for
upper oropharyngeal carcinoma, 1997, Editorial Oral Medicine, pgina 537.
[6] Karp Gerald, Cell and Molecular Biology: Concepts and Experiments, 2010,
Sexta edicin, Ed. John Wiley & Sons, pginas 571-572.
[7] Karp Gerald, Cell and Molecular Biology: Concepts and Experiments, 2010,
Sexta edicin, Ed. John Wiley & Sons, pginas 573-574.
[8] Karp Gerald, Cell and Molecular Biology: Concepts and Experiments, 2010,
Sexta edicin, Ed. John Wiley & Sons, pginas 575-576.