Instituto Tecnolgico de

Celaya

Prcticas de Bioqumica de Nitr

PRactica 5. Obtencion de acidos nucleicos.

Alonso Serrano Adrin.

Bibriesca Snchez Rebeca.
Medrano Villagmez Carlos Alejandro.
Rojas Reyes Guadalupe.

INTRODUCCION.
Los cidos nucleicos son compuestos nitrogenados de elevado peso molecular
que se encuentran en las clulas asociados con protenas. Los complejos cido
nucleico-protena se conocen con el nombre de ncleo-protenas, que pueden
separarse en sus componentes (protenas y cidos nucleicos) al ser tratados con
cido o con concentraciones altas de sales. Las sales proteicas tienen carcter
bsico mientras que los cidos nucleicos son cidos.
Desde el punto de vista qumico, los cidos nucleicos son polmeros lineales de
nucletidos; a su vez, cada nucletido est formado por cido fosfrico (H3PO4),
un azcar de tipo pentosa (ribosa o desoxirribosa) y una base nitrogenada
(derivada de la piramidita o de la purina). Segn el tipo de azcar que contienen,
los cidos nucleicos se dividen en
ribonucleicos (RNA) que contienen
ribosa- y desoxirribonucleicos (DNA), que
contienen desoxirribosa. Ambos tipos de
cidos nucleicos se encuentran presentes
en todo tipo de clulas: animales,
vegetales o bacterianas; en cambio los
virus solo contienen DNA o RNA.
Los nucletidos se pueden polimerizar y formar un cido nucleico. La secuencia
de nucletidos es el almacn de toda la informacin gentica aportada por los
cromosomas. A pesar de esto, no todo el cido nucleico transmite informacin, ni
todo se encuentra en los cromosomas.
Dentro de un organismo, los cidos nucleicos permiten la diferenciacin de tejidos
y clulas, que adquieren una estructura y funcin caractersticas por la expresin
selectiva de ciertos genes.
Otros cidos nucleicos, que no contienen informacin sobre secuencias proteicas,
constituyen la maquinaria molecular necesaria para la sntesis de la protena.

Existen diferentes clases de cidos nucleicos: acido desoxirribonucleico (DNA) y

diferentes tipos de cidos ribonucleicos (RNA). En la secuencia de cidos
nucleicos reside la informacin gentica. Una de las diferencias entre los
nucletidos que forman uno y otro tipo de cidos, radica en la pentosa que sirve
de soporte a las bases y al acido fosfrica. Los ADN tienen como azcar a la D-2desoxirribosa y los ARN a la D-ribosa.
Los ARN pueden ser hidrolizados por los lcalis y esta labilidad es til para su
deteccin en los procesos analticos. La identificacin de una pentosa, confirma el
diagnostico.
El ADN es un polmero lineal de residuos de 2-desoxinucleotidos unidos por
enlaces fosfodiester entre las posiciones 3 y 5 de las molculas 2 desoxirribosa.
La parte variable de ADN es el orden en que se acomodan las bases (adenina,
guanina, timina y citosina).
Objetivo.
Demostrar la presencia de cidos nucleicos en la levadura.
Material y Reactivos.
Materiales
1 Agitador
1 Vidrio de reloj
1 Embudo de plstico
1 Embudo de Buchner
2 Matraces Erlenmeyer de 125 mL
1 Matraz kitazato
2 Pipetas de 5 mL
2 Pipetas de 10 mL
6 Tubos Falcon
1 Perilla
2 Vasos de precipitados de 250 mL
1 Tubo de ensaye de 15 x 100
Algodn
1 Abate lenguas

Reactivos
cido clorhdrico concentrado
Cloruro frrico al 10%
Hidrxido de sodio al 30%
Etanol
Reactivo de Bial
Ayudante de filtracin
Barra de levadura

Discusin y Resultados.
Para determinar la presencia de los cidos nucleicos en la levadura, se requiri
llevar a cabo en dos etapas la prctica, a primera fue la
ruptura de los mismos. Primero por medio de la hidrolisis
alcanina en este caso fueron los 5 ml de NaOH, se puede
lograr la separacin o ruptura del ARN en nucletidos, ya
que este cido nucleico es ms reactivo por su grupo
hidroxilo en 2'.
Ya rota la cadena principal se debera encontrar nucletidos
libres como el ARN. Obtiene la presencia del ARN y que
permite la ruptura fosfodiester, debera ser ms fcil
fraccionar nuevamente la molecula. Ya que se obtuvieron
los nucletidos despus de filtrar la solucin con ayuda del
succionado de Buchner y ayuda de una gasa para quitar los
residuos de levadura, se agreg cido clorhdrico
(HCl) lo suficiente para obtener una acidez. Una
hidrolisis acida remueve todas las bases puricas
(hidrolisis de uniones N-glicosidicas entre pentosa
y las bases puricas) sin afectar las uniones
fosfodiester del esqueleto nucleosidoco por lo
tanto obtenemos como producto cidos nucleicos
sin bases puricas.
Una vez obteniendo la acidez de la solucin se
colocan en tubos de Falcon para centrifugar y utilizar
el sobrenadante y realizar la segunda etapa de la
practica que es la reaccin Bial invirtiendo acido
clorhdrico (HCl) y ponerla en agua hirviendo.
La ribosa con la hidrolisis acida sufre una
deshidratacin dando furfural que reacciona para dar
un color verde. Como ultimo la presencia de la
pentosa nos indica los cidos nucleicos.

CUESTIONARIO

1.un

Cules son las partes que constituyen

nucletido simple?

Las
grupos fosfatos.

pentosas, las bases nitrogenadas y los

a Los grupos fosfatos le brindan la caracterizacin cida al ADN y al ARN, al

tener nucletidos con un solo radical se dice que son estables
(monofosfatos), esto es que el cido fosfrico: une dos pentosas a travs
de una unin fosfoester, entre el carbono 3 de una pentosa y con el carbono
5 la otra pentosa
b La pentosa como se trata de un compuesto cclico su funcin principal es
unirse a la vez con una base nitrogenada y con el cido fosfrico, por lo que
en diferencia del ADN y del ARN es la posicin en el que la pentosa se
encuentra situada en la molcula ya sea que la Beta-D-ribofuranosa es uno
de los constituyentes del (RNA), MIENTRAS QUE LA Betadesoxirribofuranosa forma parte del cido desoxirribonucleico (DNA). Es
decir que la diferencia en la posicin 2 de la pentosa, un grupo OH ha sido
sustituido por un H. Esta pequea alteracin supone que la molcula del
DNA es ms resistente a la hidrolisis que el RNA.
c Las bases nitrogenadas se mantienen enlazadas a una pentosa, este
compuesto constituye una parte fundamental de los nucletidos,
nuclesidos y cidos nucleicos. Biolgicamente existen seis bases
nitrogenadas principales (en realidad hay muchas ms), que se clasifican
en tres grupos, bases isoaloxaznicas, bases pricas o purinas (derivadas
de la estructura de la purina) y bases pirimidinas (derivadas de la estructura
de la pirimidina). La flavina (F) es isoaloxaznica, la adenina (A) y
la guanina (G) son pricas, y la timina (T), la citosina (C) y el uracilo (U) son
pirimidnicas.
2.- Qu diferencia hay entre nucleosido y nucletido?
La unidad repetitiva de un cido nucleico es, as, la combinacin de una base
nitrogenada, de un azcar y de cido fosfrico, denominado a este conjunto
nucletido, el cido nucleico es de hecho un polinucleico. La combinacin baseazcar, sin el cido fosfrico, es un nucleosido, de forma que un nucletido puede
considerarse como un nucleosido fosfato.
Los nuclesidos son los precursores de los nucletidos; el ADN (cido
desoxirribonucleico) y el ARN (cido ribonucleico) consisten en cadenas, o

polmeros de nucletidos. Un nuclesido tiene dos partes, una amina heterocclica,

llamada una base nitrogenada y una molcula de azcar; la molcula de azcar es
o bien ribosa o desoxirribosa. Cuando un grupo fosfato se enlaza con un
nuclesido, el nuclesido se convierte en un nucletido.
Nuclesidos de ARN. El ADN codifica nuestra informacin hereditaria. El ARN
mensajero (ARNm) copia la informacin de modo que los aminocidos en la
protena se pueden especificar. Otros tipos de ARN incluyen (ARNr) y ARN
ribosmico de transferencia (ARNt). Estos ARN estn implicados en la sntesis de
protenas y otros procesos celulares y tienen estructuras ms variadas que los
ARNm. Los precursores del ARN son nuclesidos que contienen una de cuatro
bases: adenina, guanina, citosina o uracilo. La adenina y la guanina pertenecen a
una clase de compuestos llamados purinas, mientras que la citosina y uracilo son
pirimidinas. Las purinas se distinguen por una estructura de doble anillo, mientras
que las pirimidinas tienen una estructura de anillo nico molecular. En cada
molcula de nuclesido, una base se enlaza a una molcula de azcar de ribosa.
Nuclesidos de ADN. Los precursores de nucletidos de ADN son nuclesidos que
contienen tambin cuatro bases, pero una base difiere entre el ADN y el ARN. Las
bases en los precursores de ADN de nuclesidos son adenina, guanina, citosina y
timina; los sustitutos de timina para la base uracilo en el ARN. Las molculas de
azcar desoxirribosa se enlazan en las bases de los precursores de nuclesidos
de ADN. La molcula de azcar desoxirribosa difiere de la molcula de azcar
ribosa en el ARN por tener un tomo de oxgeno menos.
Los nucletidos de ARN y ADN. Los nucletidos con tres grupos de fosfato, con
los grupos fosfato unidos en tndem, sirven como precursores del ARN y ADN.
Cuando el ARN o las formas de hebras de ADN, dos de los tres grupos fosfato de
los nucletidos se disocian, dejando a los nucletidos dentro del ARN y ADN con
un solo fosfato adjunto. Los nucletidos son los bloques de construccin bsicos
del ADN y ARN, y los cuatro nucletidos especficos se repiten en orden variable a
lo largo de la cadena de ADN o ARNm.
Cada nucletido es una molcula relativamente compleja, compuesta por la unin
de tres unidades: un monosacrido (una pentosa), una base nitrogenada y uno o
varios grupos fosfato. Tanto la base nitrogenada como los grupos fosfato se
encuentran unidos a la pentosa.
La pentosa siempre es una aldopentosa, ya sea b-D-ribofuranosa, y en este caso
el nucletido se denomina ribonucletido, o b-D-2-desoxirribofuranosa,
constituyente de los desoxirribonucletidos (el prefijo desoxi- indica que la pentosa
carece de un tomo de oxgeno).

La base nitrogenada puede ser de dos tipos: prica, derivada de la purina o

pirimidnica, derivada del anillo de la pirimidina.
La existencia de distintos radicales hace que puedan aparecer varias bases
nitrogenadas; concretamente, las presentes en los cidos nucleicos son dos bases
derivadas de la purina, la adenina (A) y la guanina (O), y tres derivadas de la
pirimidina, la citosina (C), la timina (T) y el uracilo (U).
3.- Mencione las funciones ms importantes del ADN y ARN.
Existen dos clases de cidos nucleicos, el cido desoxirribonucleico (DNA) y el
cido ribonucleico (RNA). El DNA es la molcula hereditaria de todas las formas
vivas celulares, as como de muchos virus. Tienen dos funciones:

Dirigir su propia replicacin durante la divisin celular.

Dirigir la transcripcin de molculas complementarias del RNA.

Por otro lado, el RNA presenta ms variedad de funciones biolgicas:

Los transcritos del RNA de las secuencias del DNA que especifican
polipptidos, los RNA mensajeros. (mRNA), dirigen las sntesis ribosmicas
de estos poliptidos en un proceso conocido como traduccin.
Las RNA de los ribosomas, compuestos en aproximadamente dos tercios
por RNA y en un tercio por protena, desempean papeles tanto funcionales
como estructurales.
Durante la sntesis de la protena los aminocidos son transferidos al
ribosoma por molculas de RNA de transferencia (nRNA).
Algunos RNA se asocian con protenas especficas para formar
ribonucleoprotenas que participan en el procesamiento postranscripcional
de otros RNA.
En muchos virus no es el DNA sino el RNA el que porta la informacin
hereditaria.

4.-Todo tipo de organismo contiene ambos tipos de cidos nucleicos:

Qumicamente se puede considerar a los cidos nucleicos como polmeros
lineales de nucletidos; a su vez, cada nucletido est formado por: cido fosfrico
(H3PO4), un azcar de tipo pentosa (ribosa o desoxirribosa) y una base
nitrogenada (derivada de la pirimidina o de la purina). Segn el tipo de azcar que
contienen, los cidos nucleicos se dividen en ribonucleicos (ARN) - que contienen
ribosa - y desoxirribonucleicos (ADN), que contienen desoxirribosa. Ambos tipo de
cidos nucleicos se hallan presentes en todo tipo de clulas: animales, vegetales o
bacterianas, en cambio, los virus slo contienen ADN o ARN.

CONCLUSIONES.
Como ya antes mencionado, todos los organismos estn formados por cidos
nucleicos (ADN y RNA), por lo que se pudimos confirmar que la levadura tambin
contiene cidos nucleicos.

FUENTES DE INFORMACION.

Bioqumica Humana; 2da Edicin, Jos M. Macarulla, Flix M. Goi;

Editorial Reverte, S.A; paginas 123, 125.
Conceptos Bioqumicos, Robert W. McGivery; Editorial Reverte, S.A;
PAGINA 25
Fundamentos de Biqumica; 2da Edicin; Voet, Voet, Pratt; Editorial mdica
Panamericana; Pgina 846.

CONSULTA EN INTERNET.

http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/Chp08.pdf