1.

BIOREACTOR DE INNMERSION TEMPORAL

El sistema de Inmersin Temporal es un mtodo que consiste en humedecer de manera intermitente y por un
corto periodo de tiempo el tejido de una planta con medio lquido seguido por el secado por gravedad, todo
esto ocurre dentro de un biorreactor.
Ofrece las ventajas de ser una tecnologa importante en el incremento considerable de la velocidad de
produccin de biomasa en los explantes cultivados, reduccin de la mano de obra, ofrece bajos costos de
produccin, automatizacin del proceso, permite controlar las condiciones de operacin y es suficiente para el
establecimiento de un sistema prctico para la propagacin masiva

FUNCIONAMIENTO
El BIT, se compone de dos frascos de vidrio cilindricos de 10
los embriones somticos ( 20 cm de dimetro x 30 cm de
botella de 5 litros que contiene el medio y se coloca por
jarra de 10 -L y conectado a una bomba de aire.
Cuando la bomba est encendida, la presin
empuja el medio lquido a la parte superior
Cuando la bomba se apaga , el medio fluye
hacia abajo debido a la gravedad.

litros que contiene

altura) y una
debajo de la

La principal caracterstica de este BIT es un

disco
de
espuma
de
poliuretano
establecido en el fondo de la jarra 10 -L.
Entre los perodos de inmersin este disco
asla los embriones a partir de la capa delgada
del medio lquido que permanece en el
recipiente.
Conserva 1 L de medio lquido dentro del
recipiente , y por lo tanto mantiene una suficiente
humedad relativa (85-90 %).
Durante la inmersin,
este disco tiene la funcin de un
rociador de aire y facilita la buena ventilacin del espacio de cabe cera.
Figura. Funcionamiento de un Biorreactor
de Inmersin Temporal (Dupta, Ibaraki, 2006).
Fuente: Centro de Bioplantas Universidad de Ciego de vila, Cuba

VENTAJAS

Evita la inmersin continua de los

explantes en el medio lquido.
Garantiza el intercambio gaseoso.
Limita los cortes.
Facilita cambios secuenciales del
medio.
Permite la semi-automatizacin del
proceso.
Reduce la contaminacin.
Bajos costos.
Asegura una adecuada
transferencia de oxgeno debido
a que los tejidos no estn
inmersos permanentemente en
medios lquidos en la que el
oxgeno es poco soluble.

DESVENTAJAS

El tamao de los vasos y su

desechabilidad.
Problemas con la mezcla
insuficiente que llevaron a la
acumulacin de embriones de
caf formar agregados
compactos.
Clones de Robusta, la parte
superior de la biomasa alcanza
la tapa del recipiente
alrededor de 20.000 embriones
trasplantables se pueden
recoger a partir de tales
cultivos.
Los embriones presentan una
gran heterogeneidad en
tamao, desde precoz (1 mm) a
la
estadio de cotiledones
completamente expandida (20
mm).
Una distribucin de luz no
uniforme dentro de la TIB
pueden ser responsables de las
diferencias en el crecimiento y
la calidad entre embriones.
Cuando los brotes se hacen
crecer a una alta densidad en
un biorreactor y se iluminan
externamente, la luz se
convierte en un factor limitante
de la velocidad, ya que slo
puede penetrar unos pocos
centmetros a travs de la
biomasa compacta

Fuente: Laboratory for Plant Cell and Tissue Culture Centro de Bioplantas Universidad de
Ciego de vila, Cuba

Figura A) Frasco de vidrio de un biorreactor de inmersin temporal. un diagrama. B) Vista de un biorreactor

de 10 L en el final de la fase de pre germinacin.
Fuente: Advances in Biochemical, Engineering/Biotechnology, Series Editor: T. Scheper

OPERACIONES DEL BIT (Sistema doble de

frascos)
1- Dos frascos de cultivo conectados entre s,
uno para los explantes y otro para el medio de
cultivo.
2. Inicio de la inmersin, el medio de cultivo
es impulsado por el aire del compresor al
frasco que contiene los explantes.
3. Fin de la inmersin, la segunda vlvula
solenoide se abre y el medio de cultivo regresa
al frasco que lo contiene.

Fuente: Laboratory for Plant Cell and Tissue Culture Centro de Bioplantas Universidad de Ciego
de vila, Cuba

Efecto del BIT en el rendimiento biolgico de la micro propagacin.

Proliferacin de brotes, segmentos nodales y microbulbos

Microtuberizacin
Embriognesis somtica

2. BIORREACTORES DE CAJA EN BOLSA (BOX-IN-BAG BIOREACTORS)

Se trata de un diseo
horizontal pues es ms
conveniente de uno
vertical que se utiliza para
producir micro- plantas
que pueden trasplantarse
directamente del
biorreactor al invernadero.
Sin embargo hay una gran
preocupacin acerca de
cmo mantener
un espacio de cabeza
entre los perodos de
inmersin en un TIB
grande y horizontal hecha
plstico de flexible.
Este punto puede ser
resuelto mediante el
desarrollo de tres tipos de
recipientes :
( 1 ) estructuras 3D tales como cubos,
( 2 ) bolsos 2D con un marco externo
( 3 ) bolsas 2D con un marco interno.
Bolsas estn hechas de una pelcula de plstico transparente compuesto de polietileno y
nylon
En 2006 , en la 27 Congreso Internacional de Horticultura ( Sel) , nos present la
colocacin de una caja rgida dentro de una bolsa de plstico
Fuente: Advances in Biochemical, Engineering/Biotechnology, Series Editor: T. Scheper

Figura. a)Detalles para la preparacin de un biorreactor de10 litros cuadro de

inmersin temporal en bolsa. la
Bolsa. b) Caja c) Cierre del biorreactor y la preparacin para la esterilizacin. d) La
inoculacin y la conexin
al recipiente de medio.
Fuente: Advances in Biochemical, Engineering/Biotechnology, Series Editor: T. Scheper

APLICACIONES
Propagacin de la pia (Ananas comosus L. (Mer) )
Propagacin de Musa sp en BIT
Propagacin de caa de azcar en BIT
Propagacin in vitro del guayabo (Psidium guajava L.) cv. EEA 18- 40 en BIT
Propagacin de Stevia rebaudiana en BIT

Figura. Centro Bioplantas, tecnologas para agricultura moderna

Empleo del BIT en la microtuberizacin de variedades de papa.

Empleo del BIT en la microtuberizacin de ame (Dioscorea sp)

Fuente: Centro de Bioplantas Universidad de Ciego de vila, Cuba

Tipos de Frascos de los BIT

g
Figura1. Diagrama de control de Bioreactor de inmersion neumatica automatizado
Figura 2 Diseo del bioreactor de Inmersion Temporal neumatico
Fuente. Expociencias Nacional 2011

Mxico, Distrito Federal