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Presidente Prudente
2009
Presidente Prudente
2009
A221c
Paulista,
Agradecimentos
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W||w| xw? |vxxt x |xzttAAA `t t x|t? yt x txz|tAAA ft xxt
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tuxzt? wxw|vt? xxztA bu|ztw t wvx x ytv|tx txw|tw wt |wtA
Agradeo a minha famlia, Dourival, Ftima F, Flvia e Diego por acreditarem que
seria capaz de chegar a esta etapa, e pelos intensos conflitos que encontrei durante esta
jornada. A Clinha, que j faz parte da famlia a um bom tempo, obrigado por ter me
suportado por todo este tempo.
Ao Prof. Dr. Aldo Eloizo Job pela orientao neste trabalho e grande amizade. Pessoa
que tem o poder de cativar a todos e mudar a vida destas, mostrando um mundo muito
melhor. Dizem que bares no um lugar para quem quer procurar uma vida melhor,
mas se naquele ano de 2001, se no tivesse ido at o bar Marlia em Adamantina-SP
no teria conhecido esta pessoa maravilhosa, que mudou drasticamente a minha vida.
A ngela, esposa do Prof. Aldo, que sempre dava conselhos e motivao para seguir
este caminho. Agradeo tambm aos seus filhos Neto e Pepe.
Ao Prof. Dr. Giacometti pelos conhecimentos, amizade e orientao provisria
enquanto o Prof. Dr. Aldo estava realizando Ps-doutorado em Windsor-Canad.
A banca, Prof. Dr. Ana Maria Pires e Prof. Dr. Grabriel de Souza Pinto, pelo tempo
dedicado a correo de minha dissertao e pela contribuio na melhoria da qualidade
deste trabalho. Toda a minha considerao e amizade.
As secretrias Andressa (PosMat) e Juvanir (DFQB) pela alta eficincia e rapidez
quando precisvamos de algum documento, sempre de ultima hora.
Ao Prof. Dr. Carlos Jos Leopoldo Constantino (Cas) pela amizade, contribuio em
minha formao desde a iniciao cientifica e pelo suporte tcnico nas medidas de
Raman.
A Prof. Dr. Maria de Lourdes Corradi Custodio da Silva e seu aluno Nilson pela
caracterizao de protenas e discusso do resultado do mtodo de Bradford.
Ao Prof. Dr. Eduardo Ribeiro de Azevedo, da USP de So Carlos, pelo auxilio nas
medidas e discusses dos resultados de RMN.
Ao Prof. Dr. Adonilson dos Reis Freitas pelas medidas auxilio nas medidas e
discusses dos resultados de MEV.
Ao Prof. Dr. Pedro Iris pelas medidas de AFM.
SUMRIO
LISTA DE FIGURAS............................................................................................................ I
LISTA DE TABELAS ......................................................................................................... III
RESUMO ..................................................................................................................... IV
ABSTRACT ...................................................................................................................V
INTRODUO ............................................................................................................. 1
OBJETIVOS ................................................................................................................. 6
CAPTULO 1 - REVISO BIBLIOGRFICA ................................................................. 7
1.1 - Polmeros ...................................................................................... 7
1.2 - Ltex e Borracha Natural............................................................... 8
1.2.1 - Composio do ltex...........................................................11
1.2.1.1 - Partculas de borracha ..............................................12
1.2.1.2 - Lutides e complexos de Frey-Wyssling ...................13
1.2.1.3 - Soro e constituintes inorgnicos ...............................14
1.2.2 - Clone RRIM 600..................................................................15
1.2.3 - Preservao do ltex...........................................................15
1.3 - Biomateriais..................................................................................16
CAPTULO 2 - MTODOS EXPERIMENTAIS.............................................................18
2.1 - Materiais.......................................................................................18
2.2 - Coleta do Ltex ............................................................................18
2.3 - Ltex Centrifugado .......................................................................19
2.4 - Preparao das Membranas de Borracha Natural ........................20
2.5 - Liofilizao....................................................................................21
2.6 - Mtodos de Caracterizao ..........................................................22
2.6.1 - Espectroscopia por FT-IR modo ATR..................................23
2.6.2 - Espectroscopia Raman .......................................................24
2.6.3 - Ressonncia Magntica Nuclear (RMN)..............................25
2.6.4 - Difrao de raios X (DRX) ...................................................26
2.6.5 - Microscopia Eletrnica de Varredura (MEV)........................26
2.6.6 - Microscopia de Fora Atmica (AFM) .................................28
2.6.7 - TG acoplado com infravermelho (TG/FT-IR) .......................29
2.6.8 - Calorimetria Exploratria Diferencial (DSC) ........................30
2.6.9 - Anlise Dinmico Mecnico (DMA) .....................................30
2.6.10 - Mtodo de Bradford...........................................................31
CAPTULO 3 - RESULTADOS E DISCUSSO ...........................................................32
3.1 - Espectroscopia no infravermelho (FT-IR) no modo ATR...............32
i
Lista de Figuras
Figura 1 - Estrutura qumica da parte isoprnica da borracha natural. ............................ 10
Figura 2 Modelo de uma partcula de borracha em ltex envolvida por uma camada de
fosfolipdio e outra mais externa de protenas, proposto por Blackley. Adaptado de [6]... 13
Figura 3 - Coleta do Ltex................................................................................................... 19
Figura 4 Trs fases constituintes do ltex centrifugado. .................................................. 20
Figura 5 Curva de DSC para resfriamento e aquecimento do ltex................................. 22
Figura 6 Analisador Temogravimtrico NETZSCH modelo 209...................................... 29
Figura 7 - Espectros na regio do infravermelho das amostras de ltex, F1, F2, F3, e das
membranas de borracha natural tratadas termicamente a 60, 85 e 120C, liofilizados. .... 33
Figura 8 Ampliao dos espectros na regio do infravermelho das amostras de ltex, F1,
F2, F3, e das membranas de borracha natural tratadas termicamente a 60, 85 e 120C,
liofilizados............................................................................................................................ 35
Figura 9 Espectros Raman das amostras de Ltex, F1, F2, F3 e das membranas tratadas
termicamente a 60, 85 e 120oC, liofilizados......................................................................... 37
Figura 10 Espectro de RMN 13C DP/MAS das amostras F1, F3 e das membranas tratadas
a 60, 85 e 120oC................................................................................................................... 39
Figura 11 - Espectro de RMN 13C CP/MAS das amostras F2, F3 e das membranas tratadas
a 60, 85 e 120oC................................................................................................................... 40
Figura 12 - Espectro de RMN 1H das amostras F1, F3 e das membranas tratadas a 60, 85 e
120oC.................................................................................................................................... 41
Figura 13 Difrao de raios X das fraes F2 e F3, liofilizadas. .................................... 42
Figura 14 Micrografia da membrana de borracha natural tratada a 60C..................... 43
Figura 15 - Micrografia da membrana de borracha natural tratada a 85C. .................... 44
Figura 16 - Micrografia da membrana de borracha natural tratada a 120C ................... 45
Figura 17 Micrografias por AFM das membranas tratadas a 60, 85 e 120oC................. 46
Figura 18 Curvas de TG e DTG do ltex, das fases, F1, F2 e F3, e das membranas
produzidas a 60, 85 e 120C, liofilizados............................................................................. 48
Figura 19 Imagem 3D de TG/FT-IR acoplado do ltex liofilizado. ................................. 53
Figura 20 - Espectros extrados da imagem de 3D do TG/FT-IR do ltex liofilizado......... 54
Figura 21 Imagem 3D de TG/FT-IR da F1 do ltex centrifugado e liofilizado................ 55
Figura 22 - Espectros extrados da imagem de 3D de TG/FT-IR da F1 do ltex
centrifugado. ........................................................................................................................ 56
Figura 23 Imagem 3D de TG/FT-IR da F2 do ltex centrifugado e liofilizado................ 57
Figura 24 - Espectros extrados da imagem de 3D de TG/FT-IR da F2 do ltex
centrifugado e liofilizado. .................................................................................................... 58
Figura 25 Imagem 3D de TG/FT-IR da F3 do ltex centrifugado e liofilizado................ 59
Figura 26 - Espectros extrados da imagem de 3D de TG/FT-IR da F3 do ltex
centrifugado e liofilizado. .................................................................................................... 60
Figura 27 Imagem 3D de TG/FT-IR para a membrana de borracha natural obtida a 60C
liofilizada. ............................................................................................................................ 61
Figura 28 - Espectros extrados da imagem de 3D do TG/FT-IR da membrana de borracha
natural obtida a 60C liofilizada.......................................................................................... 62
Figura 29 - Imagem 3D de TG/FT-IR para a membrana de borracha natural obtida a 85C
liofilizada. ............................................................................................................................ 63
Figura 30 Espectros extrados da imagem de 3D do TG/FT-IR da membrana de borracha
natural obtida a 85C liofilizada.......................................................................................... 64
Figura 31 Imagem 3D de TG/FT-IR para a membrana de borracha natural obtida a
120C liofilizada................................................................................................................... 65
Figura 32 - Espectros extrados da imagem3D de TG/FT-IR para a membrana de borracha
natural obtida a 120C liofilizada........................................................................................ 66
Figura 33 Absorbncia versus Temperatura (oC), em 1643 cm-1 para a amostra F2 e
membranas tratadas a 60 e 120oC. ...................................................................................... 67
ii
Figura 34 - Absorbncia versus Temperatura (oC), em 1588 cm-1 para a amostra F2 e
membranas tratadas a 60 e 120oC. ...................................................................................... 68
Figura 35 - Absorbncia versus Temperatura (oC), em 1544 cm-1 para a amostra F2 e
membranas tratadas a 60 e 120oC. ...................................................................................... 69
Figura 36 - Curva de DSC da amostra de ltex, F1, F2, F3 e das membranas de borracha
natural tratadas termicamente a 60, 85 e 120C, liofilizados.............................................. 70
Figura 37 Curva de DMA das membranas tratada a 60, 85 e 120oC............................... 72
Figura 38 Curva de Calibrao com BSA. ....................................................................... 74
iii
Lista de Tabelas
Tabela 1 - Composio mdia do ltex recm coletado. ..................................................... 12
Tabela 2 - Principais modos vibracionais do cis 1,4-poli-isopreno. ................................... 34
Tabela 3 Atribuies das bandas nos espectros de FT-IR para grupos funcionais
observados nas amostras de ltex, F1, F2, F3, e das membranas de borracha natural
tratadas termicamente a 60, 85 e 120C, liofilizados. ......................................................... 36
Tabela 4 Valores obtidos por meio das curvas termogravimtricas, das fases, F1, F2 e F3
do ltex centrifugado e liofilizado........................................................................................ 51
Tabela 5 - Atribuies das bandas caractersticas nos espectros de FT-IR extrados da
imagem 3D do ltex liofilizado. ........................................................................................... 54
Tabela 6 Massa e volume de BSA para a curva de Calibrao........................................ 73
Tabela 7 Valores da absorbncia para cada diluio do soro......................................... 74
iv
AGOSTINI, Deuber Lincon da Silva. Caracterizao do ltex e da borracha
natural que estimulam a angiognese: 2009. 87 f. Dissertao (Mestre em
Cincias e Tecnologia de Materiais) UNESP, Faculdade de Cincias e
Tecnologia, Presidente Prudente, 2008.
RESUMO
As membranas de borracha natural so usadas freqentemente como material
biolgico na induo de angiognese e neoformao. Neste trabalho foram
realizados estudos com objetivo de identificar os componentes do ltex que so
responsveis pelo processo de angiognese e neoformao. O ltex, as fases
centrifugadas do ltex e as membranas da borracha natural, tratados termicamente
em 60, 85 e 120C, foram liofilizados para a reduo de gua nos mesmos. A
caracterizao de tais materiais foi realizada por espectroscopia infravermelha (FTIR), micro-Raman, ressonncia magntica nuclear (NMR - 1H e
13
C), difrao de
13
v
ABSTRACT
Natural latex and natural rubber membranes are frequently used as biomaterial in
the angiogenesis induction and neoformation of biological tissues. Our studies
aimed to study and identify the latex components that are responsible for
angiogenesis and neoformation processes. The natural latex, the centrifuged latex
phases and the natural rubber membranes were thermally treated at 60, 85 and
120C and afterward all samples were lyophilized. The characterization of such
materials were carried out using infrared (FT-IR), micro Raman spectroscopy,
nuclear magnetic resonance (NMR - 1H e
electronic
microscopy
(SEM)
and
13
atomic
force
microscopy
(AFM),
C), X-rays and TG/FT-IR the chemical components present in the latex, in the
Introduo_______________________________________________________
INTRODUO
Introduo_______________________________________________________
Introduo_______________________________________________________
Introduo_______________________________________________________
Introduo_______________________________________________________
Objetivos________________________________________________________
OBJETIVOS
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________7
1.1 - Polmeros
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________8
apesar de apresentar qualidades desejveis para agir como um biomaterial, se o
polmero apresentar toxidade, o processo inflamatrio se mostrar muito acentuado
provocando necrose no tecido receptor. Geralmente a toxicidade dos polmeros
considerada maior que a dos metais e das cermicas. A presena de cargas
superficiais no polmero outro fator que influencia a formao do tecido fibroso.
No caso de carga superficial positiva pode atrair eritrcitos, que possuem carga
superficial negativa; e o contato das clulas com o material potencialmente
citotxico pode destru-las [33].
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________9
importao de aproximadamente 60% da borracha consumida no pas [38,39,40,41].
Contudo, o interesse pela produo de borracha natural est sendo recuperado, com
o Estado de So Paulo atuando como o maior produtor do pas [42,43]. O Estado de
So Paulo conta hoje com cerca de 45.000 hectares plantados com seringueira. Duas
regies do Estado so aptas para o cultivo desta planta: a regio do Oeste Paulista e
a regio litornea [38,42].
O ltex um sistema coloidal polifsico, sendo a parte dispersa
constituda de micelas de borracha, protenas, lutides e partculas Frey-Wyssling e
o meio dispersivo constitudo do soro aquoso [44]. As partculas Frey-Wyssling,
que ocorrem em pequena quantidade (cerca de 1%), so constitudas de
carotenides e lipdios conferindo borracha uma colorao amarelada [35,56].
A borracha natural obtida por coagulao do ltex por rvores do
gnero Hevea brasiliensis, com cerca de 10 15 metros de altura, tronco retilneo,
com dimetro aproximado de 30 centmetros. As plantaes de seringueiras
apresentam uma densidade de aproximadamente 450 rvores por hectare e comeam
a produzir aps 7 a 8 anos de plantio. A obteno de espcies de alta produtividade
conseguida atravs de processos de enxertia de borbulhas, de rvores reconhecidas
como de alta produo, em mudas obtidas a partir de sementes; estas mudas, assim
enxertadas, so denominadas clones [45].
Embora a borracha sinttica obtida do petrleo possua quase a
mesma composio qumica da borracha natural, suas propriedades fsicas so
inviveis para alguns manufaturados, como por exemplo: para luvas cirrgicas,
preservativos, pneus de automveis e revestimentos diversos [42], alm de ser uma
fonte no renovvel. A borracha natural tambm matria prima essencial para a
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________10
fabricao de vrios artefatos em transportes, indstrias e materiais blicos
[4,42,46].
O polmero natural sintetizado pela espcie Hevea tem um peso
molecular mdio prximo a um milho. composto de aproximadamente trs
unidades trans isoprnicas, responsvel pela parte cristalina, seguidas de cerca de
10.000 unidades cis isoprnicas, responsvel pela parte amorfa, do tipo cabeacalda [47], combinadas por ligaes 1,4 e um grupo terminal, conforme mostrado
na Figura 1. Esse grupo terminal varia com a origem da borracha [35,48]. Como a
unidade de repetio da parte cis isoprnica existe em uma proporo muito maior
que a parte trans isoprnica a borracha natural se mostra um polmero amorfo.
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________11
1.2.1 - Composio do ltex
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________12
em gua em virtude do intumescimento e ruptura dos lutides [apud. 54,6]. A
composio mdia do ltex natural recm coletado apresentada na Tabela 1.
Tabela 1 - Composio mdia do ltex recm coletado.
Constituinte
Borracha
Protena
Carboidratos
Lipdios neutros
Lipdeos polares
Inorgnicos
Aminocidos, aminas, etc.
gua
% em massa no ltex
25-45
1-1,8
1-2
0,4-1,1
0,5-0,6
0,4-0,6
0,4-0,6
49-71
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________13
possvel explicar a forte adsoro de protenas na superfcie das partculas
considerando que os fosfolipdios tm carga positiva, enquanto as protenas tm
carga negativa, levando a associao inica entre dois tipos de molculas [6,54].
Assim podemos representar em um modelo proposto por Blackley [54], conforme a
Figura 2.
Figura 2 Modelo de uma partcula de borracha em ltex envolvida por uma camada de
fosfolipdio e outra mais externa de protenas, proposto por Blackley.
Adaptado de [6].
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________14
que tem ao floculante muito rpida sobre partculas de borracha no ltex,
resultando na formao de microflocos.
Os complexos de Frey-Wyssling so constitudos de carotenides
e lipdios conferindo borracha sua colorao, mais ou menos amarela [54,58].
Estes complexos so aproximadamente esfricos, tendo um tamanho que varia de
3.000 a 6.000 nm de dimetro e so ligados por uma dupla membrana. Acredita-se
que estes complexos tenham uma funo vital nas atividades metablicas, sendo
possveis stios da biossntese da borracha.
Os lutides e complexos de Frey-Wyssling dissolvem quando o
ltex recm coletado estabilizado com amnia, de tal forma que temos no ltex
amoniacal um sistema de duas fases, constituindo das partculas de borracha e do
soro [5, apud.55].
espcies
qumicas
como
carboidratos,
eletrlitos,
protenas
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________15
cobre, magnsio, ferro e zinco [13,27]. Estes elementos so absorvidos do solo,
transportados na seiva e participam de reaes que envolvem a biossntese do ltex
[5].
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________16
borracha, diminuindo seu poder de estabilizao. A segunda hiptese atribui esse
efeito liberao de nions de cidos graxos atravs da hidrlise de vrias
substncias lipdicas presentes no ltex. Estes nions so ento adsorvidos na
superfcie das partculas de borracha, possivelmente removendo parte das protenas
adsorvidas. Estes nions ento interagem com ctions metlicos divalentes como
clcio e magnsio, presentes no ltex ou gradualmente liberados de complexos pela
ao de enzimas.
Dois fatos so considerados com estas teorias: o pH reduzido
durante a coagulao espontnea, de 6 para 5 e este processo pode ser acelerado
pela adio de pequenas quantidades de sabes carboxilados. Como se pode esperar,
grandes quantidades de sabo retardam este efeito de coagulao. Isto justificado
pela dependncia da concentrao de clcio e magnsio presentes no ltex. Alm
disso, o tempo no qual o ltex pode ser mantido sem coagular muito aumentado se
estes ctions so removidos.
O preservativo mais utilizado a amnia, quando se necessita
preservar o ltex a longo prazo, sem a adio de preservativos auxiliares. A amnia
um bactericida muito eficiente em concentraes acima de 0,35% em massa,
enquanto que baixas concentraes, 0,05% em massa, podem acelerar o crescimento
de bactrias, devido ao aumento do pH de 6,5 para 8, pH este ideal para a
multiplicao de muitas formas comuns de bactrias [6].
1.3 - Biomateriais
Reviso Bibliogrfica_______________________________________________17
um sistema, para melhorar, aumentar ou substituir, parcial ou inteiramente tecidos,
rgos ou funes do corpo humano [61,62]. A classificao dos biomateriais
depende da sua natureza qumica, dividindo-se em biomateriais naturais que se
subdividem homlogos (quando originados do prprio indivduo, como o caso das
pontes de safena), autlogos (quando originados de outras pessoas) e heterlogos
(quando originados de animais e aproveitados em implantes ou cirurgias) ou
biomateriais sintticos que incluem implantes cirrgicos, e que se dividem em
metlicos (ferrosos e no ferrosos), cermicos, polmeros e compsitos, e que
venham a substituir parcial ou integralmente a funo original dos materiais
biolgicos [63].
As
principais
caractersticas
dos
biomateriais
so
Mtodos Experimentais_____________________________________________18
2.1 - Materiais
Toda vidraria foi, primeiro, lavada antes de ser utilizada para cada
experimento, com soluo sulfocrmica, em seguida com gua e detergente neutro e
enxaguada em gua corrente. Por ltimo foi feito um enxge com gua deionizada
e seca em estufa.
Mtodos Experimentais_____________________________________________19
Mtodos Experimentais_____________________________________________20
inclinao fixa de 45 e rotao mxima de 1400 rpm. A frao menos densa que a
gua contm partculas de borracha, migrando para a superfcie do tubo [66]. A
frao aquosa, logo abaixo da frao superior, um soro que contm ons,
protenas, carboidratos, acares e outras substncias solveis [66,67]. A frao de
fundo contm os lutides, organelas ricas em soro catinico, que promovem a
coagulao do ltex, alm de funes bioqumicas como o controle do pH e de
patgenos [4,68]. Portanto existem trs fases, conforme Figura 4, distintas
resultantes da centrifugao do ltex, estas fases esto representadas, neste trabalho
como:
F1
F2
F3
Mtodos Experimentais_____________________________________________21
(NH4OH). Na preparao dos filmes foram utilizadas placas de petri de 9,5 cm de
dimetro interno e de fundo reto, para obter filmes de espessura uniforme e
controlada. Ento a soluo de ltex foi depositada sobre a placa de petri, em
seguida a placa foi colocada em uma estufa, com temperatura mantida em 60, 85 e
120C, em um perodo de 6 horas, com sistema de exausto ligado, para evaporao
mais rpida do soro.
2.5 - Liofilizao
Mtodos Experimentais_____________________________________________22
obtidos para o ltex, Figura 5, sendo que a presena de sais no ltex altera o ponto
de fuso e congelamento, mas no significantemente como consta na literatura.
Atravs destas medidas de DSC verifica-se que o ponto de congelamento e de fuso
no corresponde a um nico valor e sim a valores distintos.
8
aquecimento
resfriamento
exo
DSC
2
o
-24,2 C
-9 C
-40
-30
-20
-10
Temperatura ( C)
o
10
Mtodos Experimentais_____________________________________________23
membranas de borracha natural, tratadas termicamente a 60, 85 e 120C,
liofilizados.
Mtodos Experimentais_____________________________________________24
2.6.2 - Espectroscopia Raman
Mtodos Experimentais_____________________________________________25
2.6.3 - Ressonncia Magntica Nuclear (RMN)
Em
conseqncia
da
complexidade
de
suas
estruturas
Mtodos Experimentais_____________________________________________26
sobrepem. Em outras palavras, nos espectros de DPMAS e
H os sinais
Mtodos Experimentais_____________________________________________27
dimenses relativamente grandes, possui alta profundidade de foco, podendo obter
diferentes relevos da superfcie da amostra simultaneamente em foco. O MEV
tambm produz imagens de alta resoluo, o que garante obter alta ampliao de
detalhes sem perder a nitidez [72].
O princpio de funcionamento do MEV so eltrons gerados por
um dispositivo chamado canho de eltrons, neste canho os eltrons so gerados
pelo aquecimento resistivo de um filamento de tungstnio em forma de V utilizando
uma fonte de alta tenso. A tenso de operao pode variar de 1 kV at 40 kV e,
quanto maior a tenso de acelerao, mais fino se torna o feixe de eltrons, o que
resulta em uma maior resoluo [78], porm nem todo tipo de material resiste a
tenses elevadas.
A preparao da amostra feita sobre suportes metlicos,
utilizando adesivos condutivos, como fitas de carbono ou suspenses coloidais de
prata ou carbono. O revestimento da amostra por um filme condutor tem como
objetivo evitar o acmulo de carga negativa, no caso da mesma ser formada por um
filme no condutor, como no caso de polmeros. A camada de metal deve ser
contnua e fina (menor que 20 nm) para no mascarar a topografia. Geralmente
utiliza-se a tcnica de sputtering para a evaporao do metal, sendo o ouro, liga
ouro-paldio, platina, alumnio e carbono os materiais mais utilizados.
Apesar da relativa facilidade de preparao da amostra, a
investigao de polmeros por MEV requer que sejam considerados problemas
como a sensibilidade irradiao de eltrons e ao baixo contraste da estrutura, uma
vez que estes materiais so constitudos por elementos leves (C, H e O) [72].
Neste trabalho foi utilizado um microscpio eletrnico de
varredura (MEV) marca Shimadzu, modelo SSX-550 pertencente ao Laboratrio de
Mtodos Experimentais_____________________________________________28
Microscopia da Central Analtica da Universidade Estadual de Maring UEM. As
amostras foram colocadas em suporte de alumnio e fixadas atravs de uma fita de
carbono condutora. Sobre estes filmes foi pulverizada uma fina camada de ouro por
sputtering em um aparelho da marca Shimadzu, modelo IC-50.
Mtodos Experimentais_____________________________________________29
Digital Instrument modelo Nanoscope IV com ponta de nitrato de silicio e uma
constante de mola de 0,12 N/m.
Mtodos Experimentais_____________________________________________30
2.6.8 - Calorimetria Exploratria Diferencial (DSC)
Mtodos Experimentais_____________________________________________31
amortecimento mecnico (tan = E/E) de um material, quando sujeito a uma
solicitao dinmica. Uma das utilizaes mais comuns da tcnica de DMA a
determinao da temperatura de transio vtrea (Tg) que apresenta a grande
vantagem de ser um mtodo direto de medio.
Neste trabalho foi utilizado um DMA marca Netzsch, modelo 204,
no modo tenso, utilizando ar como atmosfera, freqncia de 10 Hz, razo de
aquecimento de 5C/min num intervalo de temperatura de 100 a 180C.
Para a realizao do mtodo de Bradford utilizou-se 40 mg de BG250 que foi dissolvido em 20 mL de etanol absoluto. Em seguida adicionou-se 40
mL de acido fosfrico 85% agitando com basto de vidro. Finalizando, adicionou-se
gua deionizada para completar 100 mL de soluo em balo volumtrico. Esta
soluo foi deixada em repouso e sob abrigo da luz por 24 h, sendo aps este tempo
filtrada utilizando papel de filtro. No momento da realizao das medidas foi feita
uma diluio (1:4, v/v) da soluo em gua. Uma curva padro para protenas foi
realizada utilizando-se uma soluo diluda de protenas de Albumina de soro
bovino (BSA) na concentrao de 1 mg/mL. Foi dissolvido 0,25 g de BSA para 50
mL da seguinte soluo: 0,5 mL de soluo tampo de fosfato de sdio 0,1 M e 49,5
mL de gua deionizada. Cada 1 mL desta soluo contm 5 mg de protenas. Esta
soluo espuma muito, por este motivo no deve ser agitada fortemente.
Resultados e Discusso_____________________________________________32
Absorbncia
837
1738
Ltex
1643
1588
1544
1450
1371
1305
1240
1128
1070
2855
2911
2724
2960
3036
3285
Resultados e Discusso_____________________________________________33
F1
F2
F3
o
BN 60 C
o
BN 85 C
o
BN 120 C
4000
3500
3000
2500
2000
1500
-1
1000
espcies
qumicas
como
carboidratos,
eletrlitos,
protenas
Resultados e Discusso_____________________________________________34
Tabela 2 - Principais modos vibracionais do cis 1,4-poli-isopreno.
Experimental
Literatura [80]
3036
2960
2911
2855
2724
1450
1371
1305
1240
3036
2962
s (=CH)
s C-H no CH3 [83]
s CH no CH3
s C-H no CH2 [84]
CH2C=(CH3) [85]
CH2
s CH3
CH2 twist
CH2 twist
2912
2854
2726
1450
1375
1309
1244
1125 ou 1128
1128
[146,158]
837
837
837
1070
1128
1305
1240
1371
1450
1588
1544
1738
Absorbncia
1643
Resultados e Discusso_____________________________________________35
Ltex
F1
F2
F3
o
BN 60 C
o
BN 85 C
o
BN 120 C
1800
1600
1400
1200
1000
-1
800
600
Resultados e Discusso_____________________________________________36
as outras amostras como apenas um ombro. Esta regio entre 1800-1500 cm-1
apresentou-se muito semelhante entre F3 e BN 120oC.
A Tabela 3 mostra um grupo de freqncias referentes aos grupos
funcionais presentes na borracha que no so atribudos ao cis 1,4-poli-isopreno [6].
Tabela 3 Atribuies das bandas nos espectros de FT-IR para grupos funcionais
observados nas amostras de ltex, F1, F2, F3, e das membranas de borracha
natural tratadas termicamente a 60, 85 e 120C, liofilizados.
Freqncia
Experimental
Literatura
[87]
Atribuio
[88, 89,90]
3400
3200-3400
s NH livre
s OH (ligao de hidrognio)
3285
3280-3300
1643
1640
1630
1588
1565-1585
1544
1530-1560
1259
1176-1080
CO de ter aliftico
CO de ter
3500-3200
1070
1080-1040
Resultados e Discusso_____________________________________________37
3.2 - Espectroscopia Raman
3030
2913
1668
2715
1440
1371
998
picos.
Intensidade
Ltex
F1
F2
F3
o
BN 60 C
BN 85 C
o
BN 120 C
Resultados e Discusso_____________________________________________38
Em 998 cm-1 observa-se um pico caracterstico de ligaes =C-H,
j em 1371 cm-1, tem-se a deformao de grupos CH3 e em 1440 cm-1 nota-se um
pico referente a ligaes do tipo H-C=O. A vibrao do C=C est particularmente
desobstruda e sensvel a seu ambiente em uma maneira similar vibrao do
C=O no infravermelho. As vibraes da cadeia tipo cis, do C=C, podem ser vistas
em 1668 cm-1. As vibraes entre 2715 e 3030 cm-1 corresponde ao estiramento CH,
sendo pertencente ao grupo CH2 e CH3 [92].
Resultados e Discusso_____________________________________________39
c d
ae b
F1
F3
B N 60 0 C
B N 85 0 C
B N 120 0 C
140
120
100
80
ppm
60
40
20
Figura 10 Espectro de RMN 13C DP/MAS das amostras F1, F3 e das membranas
tratadas a 60, 85 e 120oC.
Resultados e Discusso_____________________________________________40
Pela anlise de RMN de
13
um sinal na regio de 172 ppm, certamente das carboxilas da cadeia lateral, sinais
relacionados a grupos C=C em 134,05 e 123,7 ppm dos carbonos (c) e (d),
respectivamente.
F2
F3
B N 60 0 C
B N 8 5 0C
B N 12 0 0 C
240 210 180 150 120
ppm
90
60
30
Figura 11 - Espectro de RMN 13C CP/MAS das amostras F2, F3 e das membranas tratadas
a 60, 85 e 120oC.
Resultados e Discusso_____________________________________________41
correspondentes a regio de CH2, CH, CH3 de cadeias alifticas dos carbonos
(a),(e),(b), que podem ser constituintes tanto de ramificaes quanto da cadeia.
Os espectros de RMN 1H, Figura 12, tambm apresentaram duas
regies bem distintas, sendo uma de 4-6 ppm e outra de 0,5-2 ppm.
ae b
c d
F1
F3
B N 6 0 0C
B N 8 5 0C
B N 1 2 0 0C
6
ppm
Figura 12 - Espectro de RMN 1H das amostras F1, F3 e das membranas tratadas a 60, 85
e 120oC.
Resultados e Discusso_____________________________________________42
do grupo metlico (-CH3) [95]. Os sinais de prton metlico (-CH3) do 1,4- cisisopreno foram observados em 1,75 e 1,61 ppm, nas membranas tratadas a 60 e
120oC e em 1,55 ppm nas amostras F1, F3 e na membrana tratada a 85oC.
O espectro da membrana tratada termicamente a 85oC
apresentou-se muito diferente das outras membranas, tal fato pode estar associado
as condies experimentais no qual foi realizada a coleta dos dados, onde pode ser
detectado somente a parte isoprnica que compe a membrana.
Intensidade (u.a.)
F3
F2
10
20
30
2 (graus)
40
50
Resultados e Discusso_____________________________________________43
pico de espalhamento centrado em 2=19o atribudo a difrao de raios x nas
regies amorfas das amostras, portanto a frao F2 no apresenta estrutura cristalina
bem definida. J na frao F3 o difratograma apresenta alguns picos de difrao
caractersticos de material com certa estrutura cristalina, tais picos podem estar
associados a ctions metlicos que compe esta fase, pois Ca, Zn e Rb formam o
segundo grupo mais abundante de elementos, enquanto que as concentraes de
Mn, Fe, Ni, Cu e Br so muito baixas [6].
Resultados e Discusso_____________________________________________44
Na Figura 15 tem-se a micrografia da membrana de borracha
natural tratada termicamente a 85C. Nota-se maior homogeneidade nesta
membrana, no apresentando grandes partculas de borracha natural, como no caso
da membrana tratada a 60C. Vale destacar que membranas tratadas a temperatura
de 85 C esto no limiar para agir como indutores de angiognese, onde
possivelmente as partculas de borracha podem ligar-se com um maior nmero de
fosfolipdios e protenas no permitindo que estes grupos atuem na angiognese.
Resultados e Discusso_____________________________________________45
Resultados e Discusso_____________________________________________46
vascularizao, melhorando assim o processo de induo da angiognese, por este
motivo a membrana tratada a 60oC tem maior poder nesta induo, alm de ter
maior concentrao de subprodutos do ltex que tambm colaboram para esta
induo.
Resultados e Discusso_____________________________________________47
3.7 - Anlise Termogravimtrica (TG)
429C
40
-2
97%
-4
Ltex
100
14%
380C
200
300
400
-8
500
Temperatura (C)
428C
40
-2
99%
-4
-6
20
-8
F1
-10
378C
100
200
300
400
Temperatura (C)
500
100
200
300
400
500
600
7%
0
272C
445C
-4
60
77% 98% -8
40
-12
20
0
14%
393C
400
500
BN 60C
100
200
300
Temperatura (C)
-16
600
100
20%
-8
Temperatura (C)
80
600
100
-4
391C
Massa (%)
60
7%
430C
60
209C
74%
38%
-1
40
F2
100
200
300
400
500
Temperatura (C)
426C
60
98%
76%
40
-2
600
-4
-8
o
-2
-6
20
8%
250C
128C
281C 308C
247C
80
Massa (%)
Massa (%)
8%
DTG (%/min)
DTG (%/min)
80
20
F3
100
DTG (%/min)
Massa (%)
-2
-6
80
74%
58%
20
600
100
261C
40
-6
20
136C
60
DTG (%/min)
450C
265C
Massa (%)
60 68C
80
DTG (%/min)
Massa (%)
71%
8%
10%
80
100
9%
DTG (%/min)
3%
100
BN 85 C
100
369C
200
300
15%
400 o 500
Temperatura ( C)
-10
600
Resultados e Discusso_____________________________________________48
100
7%
80
Massa (%)
60
434C
40
77%
-2
99%
-4
-6
20
0
DTG (%/min)
254C
BN120C
100
200
300
15%
378C
400 500
Temperatura (C)
-8
600
Figura 18 Curvas de TG e DTG do ltex, das fases, F1, F2 e F3, e das membranas
produzidas a 60, 85 e 120C, liofilizados.
Resultados e Discusso_____________________________________________49
de 3%, podendo ser xidos, carbonatos, fosfatos e silicatos metlicos presentes no
ltex.
Na F1, frao superior resultado do processo de centrifugao,
uma nica perda de massa observada na curva de TG, de 99%, correspondendo na
curva de DTG a um pico em 378C e um ombro em 428C referente a degradao
de cadeias polimricas e tambm destas cadeias polimricas termicamente mais
estveis [99].Esta parte superior apresenta as mesmas propriedades trmicas do
isopreno, portanto foi denominada de frao borracha. J na frao F2, que uma
frao intermediria entre a borracha (F1) e a frao de fundo. Nota-se uma perda
de massa de 20% no intervalo de temperatura de 30-180C, formando um vale em
128C na curva de DTG e tambm outra perda, em 209C, de 8% em massa, em que
ambos podem estar associados parte protica (fosfolpidica) que possuem carga
negativa promovendo a estabilidade das partculas de borracha presentes no ltex.
Como no processo de centrifugao estes constituintes so separados das partculas
de borracha, a frao superior que foi denominada borracha se coagula tornando-se
um slido borrachoso. A F2 apresenta outra perda significativa de 38% em massa
no intervalo de 220-400C, a qual pode estar associada a triglicerdeos, esteris,
steres de esteris e outros lipdeos. Estes constituintes ocorrem predominantemente
dentro das partculas de borracha, portanto pode haver partculas de borracha
tambm neste soro. Devido densidade dos constituintes, estas partculas no
coagulam, no ficando na parte superior. A amostra F2 apresentou uma massa
residual de 26% podendo estar associada a nions inorgnicos (fosfatos e
carbonatos), sais minerais e outros de rubdio, mangans, sdio, potssio, cobre,
magnsio, ferro e zinco, pois estes produtos so constituintes do soro.
Resultados e Discusso_____________________________________________50
A amostra F3, frao de fundo, apresenta 3 perdas de massa
significativas. A primeira de 8% entre 30-180C corresponde aos constituintes no
borracha mencionados para a mesma regio soro (F2). As outras 2 perdas coincidem
com a degradao trmica da borracha. As partculas de borracha podem estar
fortemente ligadas com elementos de alta densidade, mencionados na regio de 220400C, e resduos do soro, fazendo com que as partculas de borracha fiquem no
fundo do tubo de centrifugao. A frao de fundo apresentou uma massa residual
de 26%, valor que coincide com o do soro, portanto associado aos mesmos
elementos.
Nota-se uma perda muito pequena de massa entre 30-120C, nas
membranas de borracha natural tratadas termicamente a 60 e 85C, que somada a
perda em 272C de 7%. Este valor inferior a quantidade de massa degradada no
ltex, de 12%, o que pode estar relacionado a menor quantidade de compostos no
borracha na membrana, os quais podem ter sido evaporados ou, ao contrrio, terem
se ligado mais fortemente s partculas de borracha durante o tratamento trmico em
estufa. A perda de massa em 393C, de 77%, evidencia que no tratamento trmico
em estufa os componentes no borracha se ligam s partculas de borracha,
degradando somente quando ocorre a degradao das cadeias polimricas [98]. A
degradao de cadeias polimricas termicamente mais estveis ocorre em 445C
apresentando a mesma porcentagem para o ltex, 14%. O resduo final aps a
completa degradao do polmero de 2%.
Resultados e Discusso_____________________________________________51
histria trmica da membrana produzida a 120oC. A degradao de cadeias
polimricas termicamente mais estveis, de 15%, ocorre em 434C e o resduo final
aps a completa degradao do polmero de 1%. Esta diminuio gradual dos
resduos pode estar associada a ligaes que podem ocorrer no tratamento trmico
em estufa, visto que o tratamento em estufa um processo isotrmico e nas medidas
de TG o processo dinmico.
A Tabela 4 apresenta os valores obtidos nas medidas de TG do
ltex, das fases, F1, F2 e F3, e das membranas produzidas a 60, 85 e 120C,
liofilizados.
Tabela 4 Valores obtidos por meio das curvas termogravimtricas, das fases, F1, F2 e
F3 do ltex centrifugado e liofilizado.
Amostra
Ltex
F1
F2
F3
BN 60C
BN 85C
BN 120C
T (C)
30-200
220-300
300-420
420-500
300-500
30-170
170-230
230-400
400-600
30-200
200-300
300-550
30-300
300-430
430-500
30-290
280-430
410-490
30-280
290-410
410-480
m (%)
3
9
71
14
99
20
8
38
8
8
10
58
7
77
14
7
76
15
7
77
15
dm (C)
68 e 147
265
380
429 e 450
428
128
209
250, 281 e 308
430
136
261
391
272
393
445
247
369
426
254
378
434
Resduo
3%
1%
26%
26%
2%
2%
1%
Resultados e Discusso_____________________________________________52
3.8 - TG acoplado com FT-IR
ocorrem dois picos para esta mesma freqncia caracterstica, tal fato ocorre pela
Resultados e Discusso_____________________________________________53
380 C
892
1680
1730
1648
1565 1527
1452
1375
3275
429 C
3043
3740
Absorbncia
Ltex
2860
2928
Resultados e Discusso_____________________________________________54
265 C
68 C
265C
380C
429C
Regio
Atribuio
3740
3740
3740
3740
3900-3500
3275
3280-3300
3043
2928
2928
2860
2860
1730
1730
1725-1730
1680
1680
1680
1648
1648
1545-1650
1648
1648
1565
1565
1527
1527
1527
1527
1530-1560
1452
1452
1452
1452
1450
Amida secundria
Estiramento (CN)+ deformao (NH)
Deformao CH2
1375
1375
1375
1375
1375
Deformao CH3
890
CH3 wagging
1565-1585
892
Resultados e Discusso_____________________________________________55
A Figura 21 apresenta a imagem 3D de TG/FT-IR da F1, resultado
da centrifugao do ltex. Esta frao formada por particulas de borracha, porm,
notam-se tambm picos de absoro caractersticos dos componentes no borracha,
como vapor de gua, componentes proticos do ltex e grupos funcionais.
Resultados e Discusso_____________________________________________56
891
795
428 C
1682
1570
3047
Absorbncia
2860
F1
378 C
4000
3500
3000
2500
2000
1500
1000
-1
Resultados e Discusso_____________________________________________57
Resultados e Discusso_____________________________________________58
picos em 1568 e 1530 cm-1, caractersticos do estiramento assimtrico C=O de
COO- de protenas e amidas secundrias, respectivamente, no apresentou variao
na intensidade relativa nos espectros conforme o aumento da temperatura. Em 1455
cm-1 tem-se um pico, com maior absoro no espectro em 430C, caracterstico de
deformao angular de CH2. O pico em 1060 cm-1 de estiramento C-O de ter
430 C
1060
1732
1680
1645
1568
1530
1455
2927
3272
F2
3740
mostrou-se evidente em 209, 250, 430C e com maior absorbncia em 280 e 308C.
Absorbncia
308 C
o
280 C
o
250 C
o
209 C
o
128 C
Resultados e Discusso_____________________________________________59
985
890
1525
1457
1375
1682
1644
1730
136 C
3047
391 C
3273
Absorbncia
2969
F3
2855
2928
Resultados e Discusso_____________________________________________60
Resultados e Discusso_____________________________________________61
893
1456
1375
1527
1562
393 C
o
1680
3279
455 C
3045
3742
Absorbncia
BN 60C
1643
2930
Resultados e Discusso_____________________________________________62
272 C
Resultados e Discusso_____________________________________________63
BN 85C
892
1740
1642
1549
1457
1373
2855
2927
Absorbncia
3280
2962
Resultados e Discusso_____________________________________________64
426C
369C
247C
4000
3500
3000
2500
2000
1500
1000
-1
Resultados e Discusso_____________________________________________65
2935
Resultados e Discusso_____________________________________________66
892
1456
1376
1643
3260
434 C
3085
3660
Absorbncia
2857
BN 120C
378 C
Resultados e Discusso_____________________________________________67
relevncia pois permite monitorar determinado grupo funcional em relao a
temperatura.
A Figura 33 apresenta as curvas em relao ao pico em 1643 cm-1,
referente a amida primaria, deformao C=O em ligao de hidrognio com gua,
para a amostra F2 e as membranas tratadas a 60 e 120oC.
Resultados e Discusso_____________________________________________68
Na Figura 34 tem-se as curvas em relao ao pico em 1588 cm-1
da Absorbncia versus a Temperatura (oC), tambm para a amostra F2 e membranas
tratadas a 60 e 120oC.
120oC; foram utilizadas somente estas amostras, para este tipo de anlise, pois so
Resultados e Discusso_____________________________________________69
as que apresentaram maiores discrepncias nas outras tcnicas de caracterizao e
acreditamos que estas amostras contm o grupo funcional indutor de angiognese.
Resultados e Discusso_____________________________________________70
caractersticas os indutores de angiognese. J na amostra a 120oC no notou-se
picos onde possa ser identificado a regio de degradao deste composto.
376
-65
Ltex
315
exo
F1
336
DSC
F2
-68
-68
F3
213
BN 60 C
120
BN 85 C
302
BN 120 C
97
-100
100
200
300
o
Temperatura ( C)
400
500
Figura 36 - Curva de DSC da amostra de ltex, F1, F2, F3 e das membranas de borracha
natural tratadas termicamente a 60, 85 e 120C, liofilizados.
Resultados e Discusso_____________________________________________71
amostras F3, BN 60oC, BN 85oC e BN 120oC sendo de -68oC. Os valores da Tg
observados esto dentro da faixa de valores encontrados na literatura
[101,102,103,104,105]. A amostra F2 no apresentou valor de Tg, fato que
comprova a pequena quantidade de partculas de borracha presente nesta fase.
A amostra BN 60oC e BN 120oC apresentam um pico largo,
endotrmico, em torno de 97oC, sendo que este pico se estende para temperaturas
mais altas na amostra de BN 60oC. Este pico pode estar relacionado a evaporao de
gua em ambas as amostras e tambm de subprodutos presentes no ltex.
Nas amostras F2 e F3, nota-se um pico endotrmico em torno de
120oC, responsvel pela degradao dos constituintes no isopreno, como,
protenas, aminocidos e nions inorgnicos (fosfatos e carbonatos), fato observado
nas medidas de TG acoplado ao FT-IR, em torno de 128oC. Na F2 nota-se tambm
um outro pico endotrmico em 213oC talvez pela degradao de constituintes
inorgnicos presentes nesta fase intermediria.
Nas amostras de BN 60oC, BN 85oC e BN 120oC h um pico
exotrmico em 302oC e na amostra de ltex e na F3 em torno de 315oC, responsvel
por estgios iniciais de degradao, podendo ser reaes de oxidao, reticulao e
ciso de cadeias.
Em 376oC nota-se um pico exotrmico para as amostras de ltex,
F1, F3, BN 60oC, BN 85oC e BN 120oC, responsvel pela degradao das cadeias
polimricas do isopreno.
Resultados e Discusso_____________________________________________72
possui o maior valor do mdulo de armazenamento (E), acima de 2,5 GPa, tal fato
pode estar associado a maior homogeneidade da membrana, conforme visto nas
micrografias (MEV).
1,2
BN 85 C
2,5
1,0
0,8
tan
2,0
E' (GPa)
-62oC
1,5 BN 60 C
-70oC
0,6
0,4
0,2
1,0
0,0
-100
-80
-60
-40
-20
0,5
o
BN 120 C
0,0
-100
-80
-60
-40
-20
Temperatura (oC)
Figura 37 Curva de DMA das membranas tratada a 60, 85 e 120oC.
Resultados e Discusso_____________________________________________73
Os picos apresentados na curva de tan esto associados a
transio vtrea (Tg) em -62oC para as membranas tratadas a 85 e 120 oC, sendo de 70oC para a membrana tratada a 60oC.
O estudo de anlise dinmico mecnico poder servir para
trabalhos futuros, onde ser possvel comparar o comportamento mecnico destas
membranas com tecidos ou parte de rgos para ser utilizado como implante deste
material.
Tubo
1
2
3
4
5
Massa BSA
(g)
5
10
20
40
50
Volume de gua
(L)
95
90
80
60
50
Volume BSA
(L)
5
10
20
40
50
Resultados e Discusso_____________________________________________74
0,8
0,6
0,4
0,2
soro
0,0
10
20
30
40
50
Massa (g)
Figura 38 Curva de Calibrao com BSA.
Tubo
1
2
3
4
5
Massa
Soro (g)
5
10
20
40
50
Volume de gua
Abs. (595 nm)
(L)
95
0,11
90
0,25
80
0,49
60
0,80
50
0,95
Resultados e Discusso_____________________________________________75
A proporo soro:gua de 1:50 foi o que mais se aproximou dos
valores de absoro da BSA, sendo de 0,80 a 595 nm. Substituindo este valor na
equao foi encontrado o valor de 40 g que, multiplicado por 50 (proporo de
gua no soro), resulta em 2000 g para cada 0,1 mL de soro. Simplificando os
valores tem-se que a quantidade de protenas totais de 20 mg/mL, o que
corresponde a 0,2% do volume total do soro.
Concluso________________________________________________________76
CAPTULO 4 - CONCLUSO
Concluso________________________________________________________77
detectados sinais, com maior relevncia nas amostras F2 e F3, referentes a grupos
C-O; CH-O, CH2-, sinais estes derivados de grupos tpicos de acares como,
monossacardeos, dissacardeos e polissacardeos. Ainda foram detectados sinais
correspondentes a regio de CH2, CH, CH3 de cadeias carbnicas alifticas.
Os espectros de RMN 1H, tambm apresentou duas regies bem
distintas. Os deslocamentos qumicos esto associado a prtons de C=C e a segunda
regio apresenta deslocamentos associado a prtons do grupo metlico (-CH3).
Nas medidas de difrao de raios x observou-se que a frao de
fundo (F3) possui picos de difrao caractersticos de materiais com certa estrutura
cristalina, sendo tais picos associados a ctions metlicos que compe esta frao,
como Ca, Zn, Rb, Mn, Fe, Ni, Cu e Br.
Concluso________________________________________________________78
lenta dos componentes no borracha, onde estudos realizados na USP de Ribeiro
Preto mostram que a quantidade de poros ou a induo de poros melhora a
vascularizao, melhorando assim o processo de induo da angiognese.
Concluso________________________________________________________79
Nas medidas de DSC foi possvel notar um pico endotrmico em
torno de 120oC para as amostras F2 e F3 responsvel pela degradao dos
constituintes no isopreno, como, protenas, aminocidos e nions inorgnicos
(fosfatos e carbonatos), fato tambm observado nas medidas de TG acoplado ao FTIR, em torno de 128oC. Em todas as amostras, com exceo da F2, notou-se a Tg
com valores que correspondem aos encontrados na literatura.
Em todas as amostras houve a presena de grupos funcionais
responsveis pela parte protica do ltex, ou seja, partes destes grupos ligam-se as
partculas de borracha, mas a frao mais rica em protenas est no soro (F2). Este
soro garante a estabilidade do ltex de borracha natural, pois no processo de
centrifugao a frao superior (F1) e a frao de fundo (F3) so slidos, resultado
da coagulao do ltex. Atravs do mtodo de Bradford calculou-se que a
quantidade de protenas totais no soro foi de 20 mg/mL que corresponde a 0,2% do
volume total.
As fraes F2 e F3 so as que apresentam maior quantidade de
compostos no isopreno, referentes a protenas, aminocidos e grupos funcionais
que podem induzir a angiognese. A frao F2 a mais recomendada para o uso
como frmaco, pois a frao F3 apesar de conter compostos semelhantes pode
apresentar contaminantes provenientes da coleta do ltex. A membrana tratada a
65oC apresenta-se como a mais eficiente no processo de induo de angiognese e
por possuir uma morfologia que favorece o processo de cicatrizao devido a
quantidade de poros colaborando na vascularizao.
Os trabalhos foram apresentados no ano de 2008 em eventos nacionais e
internacionais, como:
Concluso________________________________________________________80
(1) IIV Workshop Multidisciplinar de Materiais Polimricos (IMMP), na cidade
de Atibaia-SP, de 16 a 20 de maro, intitulado de Caracterizao por FTIR modo ATR, TG/FT-IR e DSC do ltex e das fases do ltex centrifugado,
liofilizados..
(2) VII Encontro da Sociedade Brasileira de Pesquisa em Materiais (SBPMat),
na cidade do Guaruj-SP, de 28 a 02 de outubro de 2008 intitulado de
Characterization by coupling TG/FTIR of the natural rubber membrane.
(3) Associao Brasileira de Anlise Trmica e Calorimetria (ABRATEC), que
neste ano foi realizado juntamente o 14th International Congress on
Thermal Analysis and Calorimetry (ICTAC) com o Congresso Brasileiro de
Anlise trmica e Calorimetria (VI CBRATEC) na cidade de So Pedro-SP,
de 14 a 18 de setembro de 2008, apresentando dois trabalhos intitulados de
Thermal Characterization of the Phases of the Centrifuged Latex by
TG/FT-IR
Coupled
and
DSC
Thermoplastic
Natural
sendo:
Thermal
and
Spectoscopic
Properties
of
Referncias Bibliogrficas___________________________________________81
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
Referncias Bibliogrficas___________________________________________82
Referncias Bibliogrficas___________________________________________83
Referncias Bibliogrficas___________________________________________84
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