FOTOQUMICA

Desde hace muchos aos se ha usado el color como ayuda para reconocer las sustancias
qumicas; al reemplazar el ojo humano por otros detectores de radiacin se puede estudiar la
absorcin de sustancias, no solamente en la zona del espectro visible, sino tambin en
ultravioleta e infrarrojo.
Se denomina espectrofotometra a la medicin de la cantidad de energa radiante que absorbe
un sistema qumico en funcin de la longitud de onda de la radiacin, y a las mediciones a
una determinada longitud de onda.
La teora ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es un flujo de cuantos de
energa llamados fotones; la luz de una cierta longitud de onda est asociada con los fotones,
cada uno de los cuales posee una cantidad definida de energa.
La espectroscopia se relaciona en la mayora de los casos a la tercera interaccin. Estudia en
qu frecuencia o longitud de onda una sustancia puede absorber o emitir energa en forma de
un cuanto de luz.
La luz visible es fsicamente idntica a todas las radiaciones electromagnticas. Es visible
para nosotros porque nuestros ojos detectan esta estrecha banda de radiacin del espectro
electromagntico completo. Esta banda es la radiacin dominante que emite el Sol.
Las ondas electromagnticas suelen clasificarse en diferentes grupos, segn sea su frecuencia,
aunque esta clasificacin no permite establecer unos lmites precisos para cada grupo, al
existir fuentes que generan simultneamente o.e.m. de frecuencias muy diferentes. Se
denomina espectro electromagntico al conjunto de todos los tipos de o.e.m.
La radiacin electromagntica es una combinacin de campos elctricos y magnticos
oscilantes, que se propagan a travs del espacio transportando energa de un lugar a otro. A
diferencia de otros tipos de onda, como el sonido, que necesitan un medio material para
propagarse, la radiacin electromagntica se puede propagar en el vaco.
Las radiaciones electromagnticas se caracterizan por la existencia en cada punto del espacio
en que se transmiten de un campo elctrico y un campo magntico relacionados entre s. Las
ondas electromagnticas presentan una variacin peridica que se propaga en el vaco a una
velocidad de 300.000 km/seg.
El espectro electromagntico es amplio, sin embargo, un fotoqumico se encontrar
trabajando con algunas regiones clave. Algunas de las secciones ms ampliamente usadas del
espectro electromagntico incluyen:
Luz Visible: 400-700 nm
Ultravioleta: 100-400 nm
Infrarrojo cercano: 700-1000 nm
Infrarrojo lejano: 15-1000 m
TEORIA DE LA ABSORCION MOLECULAR
Todos los tomos o molculas poseen un nmero discreto de niveles de energa. A
temperatura ambiente la mayora de las especies se encuentran en su nivel energtico ms
bajo denominado estado fundamental. Cuando una onda electromagntica interacciona con
un tomo o molcula, la energa de dicha onda puede resultar absorbida si coincide

exactamente con la energa necesaria para llevar a la especie qumica en cuestin desde el
estado fundamental hasta alguno de los niveles energticos superiores. En este caso la energa
de la onda se transfiere a la molcula promovindola a un estado de energa ms elevado o
estado excitado.
Despus de un periodo de tiempo muy breve (unos pocos nanosegundos) la especie excitada
se relaja a su estado original devolviendo energa al medio que le rodea.
INTRUMENTOS PTICOS EN MEDIDAS DE ABSORBANCIA
La Figura muestra los componentes bsicos de un espectrofotmetro de absorcin. Es decir,
de un instrumento diseado para cuantificar la absorcin de radiacin ultravioleta o visible
por sustancias qumicas. Dichos componentes bsicos son:
La fuente de luz que emite la radiacin que posteriormente interacta con la muestra.
Un sistema monocromador que permita separar bandas de luz estrechas, ya sea antes o
despus de la interaccin de la luz con la muestra. El monocromador est constituido por
lentes, espejos, redes de difraccin, prismas de refraccin, rendijas etc.
Un compartimento para colocar la muestra en celdas o cubetas adecuadas, dependiendo de
la regin del espectro utilizada. El compartimento estar colocado de manera que el haz de luz
de la fuente atraviese la muestra perpendicularmente.
Un sistema para la deteccin de la radiacin que ha atravesado la muestra o sistema
detector.
Sistemas electrnicos de amplificacin, transformacin y comparacin de seal.
Sistemas de registro de seal o almacenamiento de datos

Todos estos componentes se pueden ensamblar de diversas maneras dependiendo de varios

factores. No obstante, las dos configuraciones ms empleadas son las de espectrofotmetros
de haz sencillo o espectrofotmetros de doble haz.
Transmitancia:
La transmitancia ptica se refiere a la cantidad de luz que atraviesa un cuerpo, en una
determinada longitud de onda. Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslcido, una
parte de esa luz es absorbida por el mismo, y otra fraccin de ese haz de luz atraversar el
cuerpo, segn su transmitancia. El valor de la transmitancia ptica de un objeto se puede
determinar segn la siguiente expresin:

La figura muestra un haz de radiacin paralela antes y despus de que ha pasado a travs de
una capa de solucin que tiene un espesor de b cm y una concentracin c de una especie
absorbente.
La transmitancia T de la solucin es entonces la fraccin de la radiacin incidente transmitida
por la solucin:
I
T = --I0
I es la cantidad de luz transmitida por la muestra e I0 es la cantidad total de luz incidente.
Muchas veces encontraremos la transmitancia expresada en porcentaje, segn la frmula:
I
%T = --- x 100
I0
Absorbancia
Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslcido, una parte de esta luz es absorbida por
el cuerpo, y el haz de luz restante atraviesa dicho cuerpo. A mayor cantidad de luz absorbida,
mayor ser la absorbancia del cuerpo, y menor cantidad de luz ser transmitida por dicho
cuerpo. Como se ve, la absorbancia y la transmitancia son dos aspectos del mismo fenmeno.
La absorbancia A de una solucin se define mediante la ecuacin:
I0
A= -LogT = Log --I
Donde I es la intensidad de la luz que pasa por la muestra (luz transmitida) y I0 es la
intensidad de la luz incidente.
La medida de la absorbancia de una solucin es usada con mucha frecuencia en laboratorio
clnico, para determinar la concentracin de analitos tales como colesterol, glucosa, creatinina
y triglicridos en sangre. Cada uno de estos analitos se hace reaccionar qumicamente con
determinados compuestos, a fin de obtener una solucin coloreada. A mayor intensidad de
color, mayor ser la absorbancia de la solucin en una determinada longitud de onda. La
absorbancia es entonces directamente proporcional a la concentracin del analito en sangre.
De acuerdo a la ley de Beer, la absorbancia es directamente proporcional a la longitud del
camino b a travs de la solucin y la concentracin c de la especie absorbente. Estas
relaciones se dan como:
A = abc
Siendo a una constante de proporcionalidad llamada absortividad. La magnitud de a
depender de las unidades empleadas para b y c. A menudo b es dada en trminos de cm y c
en gramos por litro, entonces la absortividad tiene unidades de lg1cm1.
Cuando la concentracin se expresa en moles por litro y la longitud de la celda en
centmetros, la absortividad se llama absortividad molar, se designa como y tiene unidades
de lmol1cm1, entonces la absorbancia es:

A = bc
Si es vlida la ley de Beer, para esa sustancia a esas concentraciones, la relacin debe ser una
recta, que pase por el origen de los ejes cartesianos; a menudo se observan desviaciones
debidas a diversos factores.
Podemos conocer la absortividad de determinada solucin, si sabemos su concentracin, la
colocamos en una cubeta transparente de cierta medida conocida y medimos su absorbancia a
determinada longitud de onda, mediante un espectrofotmetro.
EJERCICIOS RESUELTOS
1) Una disolucin 100 M de un determinado cromforo tuvo una transmitancia a 525 nm de
0.5 cuando se midi en una celda 1.5 cm de longitud. Calcular: a) la absorbancia de la
disolucin; b) la absorptividad molar del cromforo
a) A = -log T = - log 0.5 = 0.301
b) A = C . . L Reordenando la ecuacin obtendremos:
= A/(C x L) = 0.301 /(10-4 M x 1.5 cm) = 2 x 103 M-1 cm-1
2) Una disolucin patrn de nquel 5.00 x 10-5 M se coloca en una cubeta de longitud de paso
1 cm. La absorbancia a 592 nm es 0.446. a) Cunto vale a 592 nm?. b) Si una disolucin
problema de nquel tiene una absorbancia de 0.125 a la misma cul es la concentracin de
nquel en la muestra?.
a) Dado que A = C . . L. Entonces 0.446 = 5 x 10 -5 M x 1 cm x y deducimos = 8920 M-1
cm-1
b) Aplicando que A = C . . L. 0.125 = 8920 M-1 cm-1 x 1 cm x C; y por lo tanto C= 14 M
EJERCICIO: Hallar absorbancia y transmitancia de una disolucin 0,00240 M de una
sustancia que tiene una absortividad molar de 313 M -1 cm-1, en una celda de 2,00 cm de paso
ptico.
Rpta: A = 1.5 T= 3.16%