INSTITUTO TECNOLGICO DE MRIDA

ITM

DEPTO: INGENIERIA QUMICA

SEMESTRE: 8vo SEMESTRE

MATERIA: ANALISIS INDUSTRIALES
PROFESOR: DRA.LOURDES VARGAS Y VARGAS

UNIDAD 2
REPORTE
PRTICA # 3
DETERMINACION DE DEMANDA DE OXIGENO DISUELTO DBO5

NOMBRE DEL ESTUDIANTE:

JORGE MARIO RODRIGUEZ SANTIAGO

MRIDA, YUCATN, A 21 DE OCTUBRE DE 2015

OBJETIVO
Esta norma mexicana establece el mtodo de anlisis para la determinacin de la
demanda bioqumica de oxgeno (DBO5) en aguas naturales, residuales y
residuales tratadas.
Se determina la cantidad de oxgeno utilizada por una poblacin microbiana
heterognea para transformar la materia orgnica, en un periodo de incubacin de
5 das a 20C.
INTRODUCCIN
Demanda bioqumica de oxgeno (DBO5): Es una estimacin de la cantidad de
oxgeno que requiere una poblacin microbiana heterognea para oxidar la
materia orgnica de una muestra de agua en un periodo de 5 das. El mtodo se
basa en medir el oxgeno consumido por una poblacin microbiana en condiciones
en las que se ha inhibido los procesos fotosintticos de produccin de oxgeno en
condiciones que favorecen el desarrollo de los microorganismos.
PRINCIPIO DEL MTODO
El mtodo se basa en medir la cantidad de oxgeno que requieren los
microorganismos para efectuar la oxidacin de la materia orgnica presente en
aguas naturales y residuales y se determina por la diferencia entre el oxgeno
disuelto inicial y el oxgeno disuelto al cabo de cinco das de incubacin a 20C.
Para la determinacin de oxgeno disuelto (OD) se puede emplear cualquiera de
los dos mtodos establecidos en la norma mexicana NMX-AA-012-SCFI (ver 2
Referencias).
DEFINICIONES
Para los propsitos de esta norma se establecen las siguientes definiciones:
Aguas naturales.El agua cruda, subterrnea y pluvial.

Aguas residuales.Las aguas de composicin variada provenientes de las descargas de usos

municipales,

industriales,

comerciales,

de

servicios,

agrcolas,

pecuarios,

domsticos y en general de cualquier otro uso.

Biota.Es un conjunto de organismos vivos tanto de origen vegetal como animal.
Blanco analtico o de reactivos.Agua reactivo o matriz equivalente que no contiene, por adicin deliberada, la
presencia de ningn analito o sustancia por determinar, pero que contiene los
mismos disolventes, reactivos y se somete al mismo procedimiento analtico que la
muestra problema.
Medio anaerobio.Es aquel en el cual se desarrollan microorganismos en ausencia de oxgeno
molecular.
Medio aerobio.Es aquel en el cual se desarrollan microorganismos en presencia de oxgeno
molecular.
REACTIVOS
Todos los productos qumicos usados en este mtodo deben ser grado reactivo, a
menos que se indique otro grado.
Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas:
a) Resistividad, megohm-cm a 25C: 0,2 min.;
b) Conductividad, S/cm a 25 C: 5,0 mx., y

c) pH: 5,0 a 8,0.

1. Fosfato monobsico de potasio (KH2PO4)
2. Fosfato dibsico de potasio (K2HPO4)
3. Fosfato dibsico de sodio heptahidratado (Na2HPO 47H2O)
4. Cloruro de amonio (NH4Cl)
5. Sulfato de magnesio heptahidratado (MgSO 47H2O)
6. Cloruro de calcio anhidro (CaCl2)
7. Cloruro frrico hexahidratado (FeCl36H2O)
8. cido sulfrico concentrado (H2SO4)
9. Hidrxido de sodio (NaOH)
10. Sulfito de sodio (Na2SO3)
11. 2-cloro-6 (triclorometil) piridina
12. Glucosa grado patrn primario (C6H12O6)
13. cido glutmico grado patrn primario (C5H9NO4)
14. cido clorhdrico (HCl)
15. cido ntrico (HNO3)
PREPARACIN DE REACTIVOS
1. Disolucin amortiguadora de fosfato. Pesar aproximadamente 8,5 g de
fosfato monobsico de potasio (1), 21,75 g de fosfato dibsico de potasio
(2), 33,4 g de fosfato dibsico de sodio heptahidratado (3) y 1,7 g de cloruro
de amonio (4), disolver en 500 mL de agua y aforar a 1 L. El pH de la
disolucin debe ser de 7,2. Desechar el reactivo (o cualquiera de los
siguientes reactivos) si hay algn signo de crecimiento biolgico en el
frasco de almacenamiento.
2. Disolucin de sulfato de magnesio. Pesar aproximadamente 22,5 g de
sulfato de magnesio heptahidratado (5), disolver en agua y diluir a 1 L.
3. Disolucin de cloruro de calcio. Pesar aproximadamente 27,5 g de cloruro
de calcio anhidro (6), disolver en agua y diluir a 1 L.
4. Disolucin de cloruro frrico. Pesar aproximadamente 0,25 g de cloruro
frrico hexahidratado (7), disolver en agua y diluir a 1 L.
5. Disolucin de cido sulfrico (0,1N). Agregar aproximadamente 2,8 mL de
cido sulfrico concentrado (8) a 500 mL de agua, mezclar bien y diluir
hasta 1 L.
6. Disolucin de hidrxido de sodio (0,1N). Pesar aproximadamente 4,0 g de
hidrxido de sodio (9), disolver en agua y diluir a 1 L.

7. Disolucin de sulfito de sodio. Pesar aproximadamente 1,575 g de sulfito de

sodio (10), disolver en agua y diluir a 1 L. Esta disolucin no es estable; por
lo que debe prepararse diariamente.
8. Disolucin patrn de glucosa-cido glutmico. Secar glucosa y cido
glutmico a 103C durante una hora. Pesar aproximadamente y con
precisin 150,0 mg de glucosa (12) y 150,0 mg de cido glutmico (13),
diluir en agua y aforar a 1 L. Preparar inmediatamente antes de usarla. Esta
disolucin tiene una DBO5 de 198 mg/L.
9. Disolucin de cloruro de amonio. Pesar aproximadamente 1,15 g de cloruro
de amonio (4) y disolver en 500 mL de agua, ajustar el pH a 7,2 con
disolucin de hidrxido de sodio (6) y aforar a 1 L. La disolucin contiene
0,3 mg N/mL.
EQUIPO
Equipo de aireacin con difusor

Incubadora: Controlado por termostato a 20C 1C. Eliminar toda la luz

para evitar la posibilidad de produccin fotosinttica de oxgeno disuelto.

Balanza analtica con precisin de 0,1 mg
Medidor de oxgeno disuelto
MATERIAL

Botellas Winkler de vidrio para incubacin con capacidad de 300 mL de

aforo total y con boca estrecha, reborde y tapn de vidrio esmerilado, de

forma cnica.
Contratapa de politetrafloroetileno u otro material

Winkler
Bureta

plstico para botella

Limpieza del material.

Todo el material usado en la determinacin debe ser exclusivo para este

procedimiento. Para el lavado del material remojar durante 1 h en una
disolucin de cido sulfrico al 10 % y enjuagar con agua. Los detergentes
con base de amoniaco no deben usarse para la limpieza del material.

Los contenedores de las muestras deben lavarse con disolucin de

detergente no inico, libre de metales, enjuagarse con agua, remojarse

en cido toda la noche y volver a enjuagarse con agua libre de metales.

Para el material de cuarzo, politetrafloroetileno o material de vidrio debe
dejarse remojando de 12 h a 24 h con HNO 3 (1:1), HCl (1:1) o con agua
regia (3 partes de HCl concentrado + 1 parte de HNO 3 concentrado) a 70
C solo en los casos que presente material adherido, despus debe ser

enjuagado con agua libre de metales.

En los casos de que el material presente grasas, enjuagar con acetona y/o
hexano.
RECOLECCIN,

PRESERVACIN

ALMACENAMIENTO

DE

MUESTRAS
.-En el caso de aguas naturales debe tomarse un mnimo de 1 L de muestra en un
envase de polietileno o vidrio. En el caso de aguas residuales (DBO5 mayores a
50 mg/L) deben tomarse mnimo 100 mL. Pueden utilizarse muestras simples o
compuestas.
.-No se debe agregar ningn preservador a las muestras. Solo deben conservarse
a 4C hasta su anlisis.
.-El tiempo mximo de almacenamiento previo al anlisis es de 24 h.
CONTROL DE CALIDAD
Cada laboratorio que utilice este mtodo debe operar un programa de control de
calidad (CC) formal.
El laboratorio debe mantener los siguientes registros:
- Los nombres y ttulos de los analistas que ejecutaron los anlisis y el encargado
de control de calidad que verifica los anlisis,
- Las bitcoras manuscritas del analista y del equipo en los que se contengan los
siguientes datos:
a) Identificacin de la muestra.

b) Fecha del anlisis.

c) Procedimiento cronolgico utilizado.
d) Cantidad de muestra utilizada.
e) Nmero de muestras de control de calidad analizadas.
f) Trazabilidad de las calibraciones de los instrumentos de medicin.
g) Evidencia de la aceptacin o rechazo de los resultados.
h) Adems el laboratorio debe mantener la informacin original reportada por los
equipos en disquetes o en otros respaldos de informacin.
De tal forma que permita a un evaluador externo reconstruir cada determinacin
mediante el seguimiento de la informacin desde la recepcin de la muestra hasta
el resultado final.
CALIBRACIN
Se debe contar con la calibracin de los equipos y materiales siguientes:

Material volumtrico
Balanza analtica
Medidor de oxgeno disuelto

METODOLOGA

Determinaci

Despus de 5 das de incubacin determinar el OD en las diluciones n del OD fnal

de la muestra, en los controles y en los blancos. La medicin del OD
debe ser realizada inmediatamente despus de destapar la botella
de Winkler, para evitar la absorcin de oxgeno del aire por la
muestra.

Incubar a 20C 1C las botellas de DBO5 que contengan las

muestras con las diluciones deseadas, los controles de siembra, los
blancos de agua de dilucin y el control de glucosa-cido glutmico.
En caso de no contar con contratapas, diariamente se debe verifcar
que el sello hidrulico est intacto en cada botella incubada,
agregar agua si es necesario.

La determinacin del OD inicial se realiza por medio del mtodo

yodomtrico de azida modifcado, de acuerdo a lo establecido en la
norma mexicana NMX-AA-012-SCFI (ver 2 Referencias).

Si la muestra presenta alto contenido de biocidas como cloro o se

sabe de su bajo contenido de materia orgnica, es necesario
inocular la muestra.
Si se requiere, sembrar el agua de dilucin.

Incubacin

Determinaci
n del OD
inicial

Preparacin de
agua para
dilucin

Preparacin de
Analizar y almacenar el agua de dilucin como se describe en los
agua para
incisos siguientes, de tal forma que siempre tenga a mano agua de
dilucin
calidad garantizada. Antes de usar el agua de dilucin debe ponerse
a una temperatura aproximada de 20C. Saturar con oxgeno
aireando con aire fltrado, libre de materia orgnica durante 1 h por
lo menos.

Colocar el volumen requerido de agua en un frasco y aadir por

cada litro de agua 1 mL de cada una de las siguientes disoluciones:
disolucin de sulfato de magnesio, disolucin de cloruro de calcio,
disolucin de cloruro frrico y disolucin amortiguadora de fosfatos.
Preparar el agua de dilucin diariamente.

Preparacin de
agua para
dilucin

SECCIN DE CLCULOS
Calcular la DBO5.
Cuando no se utilice inculo ni diluciones:
DBO5 (mg/L) = ODi mg/L - OD5 mg/L
Donde:
ODi mg/L: es el oxgeno disuelto inicial.
ml de Tiosulfato = 3.8 ml
OD5 mg/L: es el oxgeno disuelto al quinto da.
ml de Tiosulfato = 3.3 ml
OXGENO DISUELTO
OD mg/L = ( 0.025 * 3.8 * 8 * 1000 ) / (98.7) = 7.70 mg/L
OD5

mg
L

= (0.025 * 3.3 * 8 * 1000 / 98.7) = 6.6869

mg
L

DBO5 (mg/L) = ODi mg/L - OD5 mg/L

DBO5 (mg/L) = ODi mg/L - OD5 mg/l = 7.70 6.6869
DBO5 (mg/L) = = 1.0131 mg/L
Cuando se emplea una dilucin:

%dilucin =

2
=6.6663
300

DBO5 (mg/L)=

7.706.6869
=151.98 mg/l
6.6663

INTERPRETACIN DE RESULTADOS

INTERPRETACIN DE RESULTADOS.
Segn la norma NMX-AA-012 SCFI-2001 existen rangos para determinar si el
agua tiene un buen nivel para ser consumida o saber si est muy contaminada.
Por la demanda de oxgeno disuelto como resultado 1.0131 podemos decir que
segn las tablas el agua es hasta cierto punto es muy buena. Que no contiene
muchos desechos orgnicos presentes en la muestra.
Se encuentra del rango de agua potable, si hubiramos utilizado una dilucin nos
dice que obtuvimos un resultado de 151.98 mg/l lo que nos dice que es un agua
residual urbana que viene de los desechos que nosotros mismos hacemos y se
almacenan.

CONCLUSIONES

El clculo de la demanda de oxgeno disuelto nos ayuda a conocer cmo cambia

el oxgeno que est en una muestra al incubarla durante 5 das, como pudimos
observar el oxgeno disuelto desciende, no considerablemente pero si en una
cantidad pequea.
El clculo anterior de oxgeno disuelto nos ayud mucho para poder hacer esta
prctica ya que necesitbamos el oxgeno disuelto inicial para poder as continuar
con los estudios.
Nuestros resultados de DBO fueron muy buenos a pesar de que el agua se
contaminada, esta prctica nos ense como poder calcular la cantidad de
contaminacin que puede tener el agua de un pozo u otro tipo de agua, esto
tambin nos indica que nuestros resultados fueron los correctos ya que en las
practicas anteriores nuestra muestra haba salido que era contaminada.

Bibliografa
http://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_D
BO5.htm . (s.f.).
Las diluciones que dan lugar a un OD residual mayor de 1 mg/L y una captacin
de OD de al menos 2 mg/L despus de 5 das de incubacin, producen los
resultados ms confiables. Hacer varias diluciones (al menos 3) por
duplicado de la muestra preparada para. (s.f.).
www.drcalderonlabs.com.
(s.f.).
Obtenido
de
http://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion
_de_DBO5.htm