Fraes de fibra em aveia

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Fraes de fibra em aveia e sua aplicao em programas

de melhoramento
Cludia Fernanda Lemons e Silva(1), Sandra Cristina Kothe Milach(2), Srgio Delmar dos Anjos e Silva(3),
Luis Carlos Federizzi(4), Cndida Raquel Montero(4) e Roberto Serena Fontaneli(5)
(1)Universidade

Federal de Pelotas, Instituto de Fsica e Matemtica, Dep. de Matemtica e Estatstica, Caixa Postal 354, CEP 96010-900
Pelotas, RS. E-mail: lemonsc@terra.com.br (2) Pioneer Sementes, Rua Paissand, n o 582, CEP 99010-080 Passo Fundo, RS.
E-mail: sandra.milach@pioneer.com (3)Embrapa Clima Temperado, Caixa Postal 403, CEP 96001-970 Pelotas, RS. E-mail: sergio@cpact.embrapa.br
(4)Unversidade Federal do Rio Grande do Sul, Fac. de Agronomia, Av. Bento Gonalves, no 7712, Caixa Postal 15100, CEP 91501-970 Porto
Alegre, RS. E-mail: federizi@ufrgs.br, candidaraquel@hotmail.com (5)Universidade de Passo Fundo, Campus I, Caixa Postal 611, CEP 99001-970
Passo Fundo, RS. E-mail: roberto@upf.br

Resumo O objetivo deste trabalho foi determinar fraes de fibra em gentipos de aveia e avaliar o potencial do
NIRS, utilizando gros inteiros e modos. Gros descascados, inteiros e modos, dos gentipos UFRGS 7,
UFRGS 14, UFRGS 17 e de 99 linhagens recombinantes F7, de UFRGS 7 x UFRGS 17, foram analisados quanto aos
teores de fibras total, solvel e insolvel, pelo mtodo enzimtico gravimtrico. Amostras de gros, descascados
inteiros e gros modos, foram tambm analisadas pelo NIRS. Os resultados indicaram que a utilizao do NIRS,
para avaliao do teor de fibras a partir de gros inteiros, eficaz e pode ser empregada na seleo desse carter
em aveia.
Termos para indexao: Avena sativa, NIRS, variabilidade gentica.

Oat fiber fractions and their application in breeding programs

Abstract The objective of this work was to determine fiber fraction in oat genotypes and to evaluate the use of
NIRS with whole and ground groats. Whole oat groats of UFRGS 7, UFRGS 14 and UFRGS 17 and 99 F7
recombinant inbred lines from UFRGS 7 x UFRGS 17, were analyzed for total fiber, soluble fiber and insoluble fiber
contents, by gravimetric-enzymatic method. Samples of whole and ground groats, were also analyzed by NIRS.
The results showed that the NIRS method was efficient to determine fiber content using whole grain, and it is
possible to use it for selection in oat.
Index terms: Avena sativa, NIRS, genetic variability.

Introduo
Estudos relacionados ao consumo de fibras e seus
efeitos metablicos e fisiolgicos sobre o organismo
humano tm sido crescentes nas ltimas dcadas. Definida como a frao da dieta resistente digesto pelas
enzimas do trato gastrintestinal de mamferos, a fibra
alimentar apresenta-se insolvel e solvel em gua
(White, 2000). A fibra insolvel se refere quantidade
de lignina, celulose e algumas hemiceluloses insolveis,
ao passo que a fibra solvel se refere s substncias
pcticas e hemiceluloses solveis, predominantemente
(Lee & Prosky, 1995; White, 2000).
Ingredientes ricos em fibra tm sido pesquisados para
melhorar a qualidade nutricional e funcional das dietas.
Um desses ingredientes a aveia cuja fibra se encontra
principalmente em tecidos externos dos gros, tendo

funo estrutural e de proteo. Esses tecidos contm

mais de 70% do total da fibra alimentar, enquanto o
endosperma apresenta quantidades relativamente
pequenas (Gutkoski & Trombetta, 1998). As beta-glicanas
solveis, por constiturem aproximadamente 85% da
frao solvel da aveia, so intensamente estudadas neste
cereal (White, 2000). O desenvolvimento de gentipos
com maior teor de fibras solveis um alvo importante a
ser alcanado pelos melhoristas, no entanto so
necessrios mtodos de avaliao que possam facilitar a
seleo dessas caractersticas.
De acordo com a Resoluo no 40, de 21 de maro
de 2001, da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
(Brasil, 2001), a informao nutricional de produtos
industrializados como flocos e cereais matinais, entre
outros, obrigatria no rtulo de produtos industrializados
e deve incluir o teor de fibra alimentar presente. Este

Pesq. agropec. bras., Braslia, v.41, n.6, p.975-980, jun. 2006

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C.F.L. e Silva et al.

outro motivo que justifica o desenvolvimento de

metodologias que facilitem a anlise desse componente
de qualidade.
No Brasil, um dos mtodos utilizados na determinao
da fibra alimentar o enzimtico-gravimtrico,
reconhecido pela AOAC (Association of Official
Analytical Chemists, 1995). Contudo, a implementao
desta anlise complexa, uma vez que sua aplicao
consome muito tempo, de custo elevado, devido
utilizao de enzimas, alm de exigir mo-de-obra.
A tcnica de espectroscopia de reflectncia no
infravermelho prximo (NIRS, Near-Infrared
Reflectance Spectroscopy) vem sendo utilizada para
medir constituintes de diferentes vegetais de forma
rpida e precisa. No passado, o NIRS foi usado com
sucesso na determinao de protena, gordura e fibra
de vrios produtos e espcies vegetais (Kays et al.,
1996). Embora o NIRS tenha amplitude para detectar
espcies e constituintes qumicos, pouco tem sido
estudado quanto utilizao dessa tcnica para
determinao de fibra alimentar, pela dificuldade na
obteno de dados fsico-qumicos, fundamentais para
o desenvolvimento de curvas de predio. Esta
dificuldade tem sido descrita tambm por outros autores
(Hicks et al., 2002).
O objetivo deste trabalho foi determinar as fraes
de fibras em linhas recombinantes de uma populao de
aveia, e avaliar o potencial do NIRS para determinao
de fibras, utilizando gros inteiros e modos.

Material e Mtodos
Amostras de gros de 99 linhagens F7, oriundas do
cruzamento de UFRGS 7 e UFRGS 17, bem como de
repeties dos genitores, cultivadas no inverno de 2001,
na Estao Experimental, da Universidade Federal do
Rio Grande do Sul (UFRGS), em Eldorado do Sul, foram
descascadas e escolhidas manualmente, eliminando-se
os gros quebrados e parcialmente descascados. Essas
amostras foram divididas em duas partes, sendo uma
delas moda a granulometria de 0,350,5 mm, em moinho
Tecator, modelo Knifetec 1095, por 50 segundos. Da
frao moda, uma poro foi usada para a anlise do
teor de fibra alimentar pelo mtodo enzimticogravimtrico e serviu como referncia para calibrao.
Outra poro moda foi usada para anlise de fibra
alimentar pelo NIRS. Parte da amostra de gros
descascados e no modos (inteiros) tambm foi utilizada
para anlise no NIRS. Assim, duas curvas de calibrao

Pesq. agropec. bras., Braslia, v.41, n.6, p.975-980, jun. 2006

foram obtidas nesse equipamento, uma com dados de

gros inteiros e outra de gros modos. Para a equao
de calibrao, foi utilizada a anlise dos componentes
principais (PLS), e os outliers foram descartados.
Na determinao de fibra total, solvel e insolvel,
foi utilizado o mtodo enzimtico-gravimtrico descrito
por Prosky et al. (1992). A base de determinao
dessas fraes consiste em submeter a amostra moda
(0,50,35 mm) digesto enzimtica com amilase,
protease e amiloglicosidase. As enzimas utilizadas foram
cedidas pela Novozymes do Brasil Ltda. Depois do
tratamento enzimtico, o resduo resultante foi filtrado
imediatamente, para obteno de fibra insolvel, ou
sofreu precipitao etanlica, para determinao de fibra
total. A fibra solvel obtida pela diferena das duas
fraes. Em cada resduo, foram realizadas
determinaes de protena e cinzas, para a obteno
dos valores corrigidos de cada frao de fibra avaliada.
As amostras foram analisadas em duplicata e, alm disso,
tambm foram conduzidas provas em branco.
Em bquer de 400 mL, 1 g da amostra moda foi pesado
e anotada a pesagem, em quatro repeties. Em cada
bquer, foram adicionados 50 mL de tampo fosfato pH 6,0
e 100 L de alfa-amilase termoestvel (Termamyl 120-L).
Os recipientes foram tampados com papel-alumnio e
levados a banho-maria a 100C com agitao, por meia
hora. Aps resfriamento e correo do pH para 7,5, as
amostras foram incubadas a 60C, com protease (alcalase),
por 30 minutos, sob agitao. Por ltimo, o pH das amostras
foi corrigido para 4,5, adicionado 300 L da enzima
amiloglicosidase (AMG 200L) e levadas a banho-maria,
sob agitao, por 30 minutos. Depois desse perodo, duas
das amostras foram usadas para fibra total (FT) e duas
para fibra insolvel (FI).
As duas amostras para determinao de fibra total
foram tratadas com 280 mL de etanol 95%, previamente
aquecido a 60C, por uma hora, para precipitar a fibra
solvel. Decorrido o tempo, o material foi filtrado em
cadinho contendo 1 g de l de vidro, pesado
anteriormente. O resduo presente no cadinho filtrante
foi lavado com etanol a 78% (trs vezes), etanol a 95%
(duas vezes) e acetona (duas vezes).
Na determinao da fibra insolvel, depois da
incubao com a ltima enzima (AMG), as amostras
foram imediatamente filtradas e lavadas com 60 mL de
gua destilada, etanol a 95% e por ltimo com acetona.
Depois da lavagem, todas as repeties foram deixadas
por uma noite na estufa a 105C, e pesadas no dia
seguinte.

Fraes de fibra em aveia

Imediatamente depois do tratamento enzimtico, o

resduo resultante foi filtrado, para obteno de fibra
insolvel, ou sofreu precipitao etanlica, para
determinao de fibra total. Em seguida as amostras
foram filtradas e lavadas com lcool e acetona. Depois
da lavagem todas as repeties foram deixadas por uma
noite na estufa a 105C, e pesadas no dia seguinte.
Das duplicatas, uma foi utilizada para determinao
do teor de protena pelo mtodo micro Kjeldahl (Tedesco
et al., 1985) e a outra para determinao do teor de cinzas
(mufla a 525C por cinco horas). Essas determinaes
foram utilizadas para corrigir os valores de cada frao
de fibra avaliada. A fibra solvel foi obtida pela diferena
das duas fraes. O peso seco foi calculado pela
diferena da amostra mida e amostra seca a 105C
por 24 horas. A porcentagem de fibra total (FT)
presente na amostra (expressa em porcentagem do
peso seco) foi obtida por meio da frmula:
FT = (resduo de digesto - cinzas - protena - branco)/
peso seco da amostra, em que: resduo de digesto o
peso mdio das duplicatas, e o branco a FT
determinada na amostra em branco.
Para determinao das fraes de fibra alimentar por
meio do NIRS, foram utilizados aproximadamente 5 g
de gros inteiros descascados e de gros modos das
mesmas constituies genticas. As leituras dos
espectros das amostras foram obtidas em aparelho da
NIRSystems, modelo 5000, digitalizadas, gravadas na
forma de log (1/R) e processadas pelo programa New
Infrasoft International software. Na calibrao dos
dados, foi utilizada uma seleo de amostras obtidas por
meio do algoritmo select sample. A estatstica de
calibrao incluiu erro-padro de calibrao (EPC) e
coeficiente de determinao (R2). Para validao, foi
utilizado o erro-padro de validao cruzada (EPVC) e
o coeficiente de determinao (R2).

977

Resultados e Discusso
Os valores de mdia, desvio-padro, mximos e
mnimos, obtidos na comparao dos mtodos de anlise
pelo mtodo enzimtico-gravimtrico e os preditos pelo
NIRS para fibra total, insolvel e solvel esto descritos
na Tabela 1. As correlaes entre os mtodos de
avaliao indicam que os resultados obtidos por meio do
NIRS podem ser utilizados com boa preciso.
A variabilidade no teor de fibra solvel foi maior do
que em outras fraes. Essa variabilidade pode ser
explorada na seleo, porm, quanto fibra solvel, os
resultados da calibrao foram inferiores aos obtidos na
fibra total e insolvel. Tal fato pode ser devido forma
indireta para determinao da fibra solvel, obtida pela
diferena entre as fraes total e insolvel calculados
pelo mtodo convencional.
O contedo de fibra insolvel e solvel e suas
composies em gentipos de aveia apresentam
variabilidade que pode ser explorada no desenvolvimento
de gentipos com teor e composio de fibra desejada,
de acordo com sua finalidade (Manthey et al., 1999).
Teores de 9,28 a 13,86%, para fibra total, 4,87 a 10,07%,
para fibra insolvel e 2,26 a 7,25%, para fibra solvel,
foram encontrados em gentipos brasileiros de aveia
(Gutkoski & Trombetta, 1998). Dessa forma, a faixa
de variao dos valores para essas caractersticas,
neste trabalho, est de acordo com a observada em
gentipos de aveia cultivados em ambientes do Sul
do Brasil, indicando a possibilidade de seleo para
obteno de gentipos superiores quanto aos teores
de fibras.
O erro-padro de validao cruzada alcanado quanto
fibra total foi 0,27%, nos gros modos, e 0,15% nos
gros inteiros. Quanto fibra insolvel, o erro-padro
de validao cruzada obtido foi de 0,33% para gros

Tabela 1. Nmero de amostras (N), mdia das amostras, desvio-padro (DP), mnimo e mximo, e correlao (r) entre os valores
determinados pelo mtodo enzimtico-gravimtrico e os preditos pelo NIRS usando gros inteiros, para fibras total, insolvel
e solvel da populao UFRGS 7 x UFRGS 17 e seus progenitores.
Mtodo

Mdia

DP

Mnimo

Mximo

r (%)

7,45
7,83

10,25
10,33

98,75

5,21
5,28

7,20
7,03

95,09

1,60
1,44

4,76
4,42

69,94

Fibra total
Enzimtico -gravimtrico
NIRS

72
72

Enzimtico -gravimtrico
NIRS

69
69

Enzimtico -gravimtrico
NIRS

68
68

8,74
8,74

1,5582
1,5566
Fibra insolvel
6,15
1,1627
6,18
1,1243
Fibra solvel
2,58
0,6667
2,55
0,6079

Pesq. agropec. bras., Braslia, v.41, n.6, p.975-980, jun. 2006

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C.F.L. e Silva et al.

modos e de 0,25% para gros inteiros (Tabela 2). Tanto

em fibra total quanto em fibra insolvel, o erro-padro
de validao cruzada (EPVC) foi menor quando
utilizados gros inteiros, o que indica que a calibrao
de fibras, com essa forma fsica de amostra, pode ser
realizada satisfatoriamente. Wu & Shi (2004) tambm
alcanaram boas predies quanto ao teor de amilose,
usando gros inteiros de arroz, o que indica que o NIRS
pode ser usado na determinao de caractersticas de
qualidade qumica, como teores de fibras, sem
necessidade de moagem das amostras.
Poucos estudos tm sido realizados a fim de determinar
equaes de calibrao de fibras de alimentos usando
NIRS. Segundo Borges et al. (2001), as equaes de
calibraes para fibras normalmente no so to boas
quanto as obtidas em outros constituintes, como, por
exemplo, protena bruta. Este fato pode ser devido s
imprecises dos mtodos de anlises de fibras, e segundo
Cervantes-Martinez et al. (2002), boas curvas de
calibrao para fibras requerem maior nmero de
amostras em relao ao necessrio para protena e leo.
As fraes de fibras nos gros so muito pequenas, o
que contribui para que erros maiores sejam verificados
nas determinaes laboratoriais. Alm disso, a frao
solvel da fibra sofre influncias ambientais, logo o
conhecimento dessa interao pode ser fundamental ao
permitir que se minimize essas interaes em campo e,
assim, melhorar a calibrao para fibra solvel.
Resultados de baixas predies para fraes de
gorduras, usando linhagens e hbridos de sorgo, foram
encontrados por Hicks et al. (2002), e atribudos
complexidade das caractersticas estudadas e baixa
variabilidade encontrada quanto a essas caractersticas.
Estes fatores devem ser considerados em relao a fibras
e suas fraes e podem ser vlidos tambm para os
resultados deste trabalho.

Tabela 2. Nmero de amostras (N), mdia das amostras, erropadro de calibrao (EPC), coeficiente de determinao (R),
erro-padro de validao cruzada (EPVC) e coeficiente de determinao de validao (RV) para fibra alimentar em gros
de aveia modos e inteiros.
Gros
Variveis
Modos
Fibra total
Fibra insolvel
Inteiros
Fibra total
Fibra insolvel

Mdia EPC R

EPVC RV

85
82

9,11
6,29

0,26 0,61 0,27

0,32 0,42 0,33

0,66
0,54

85
82

8,98
6,33

0,14 0,82 0,15

0,25 0,57 0,25

0,92
0,71

Pesq. agropec. bras., Braslia, v.41, n.6, p.975-980, jun. 2006

As correlaes entre os resultados dos teores de

fibra total e de fibra insolvel, determinados por ambos
os mtodos, para gros modos e inteiros, esto
representadas na Figura 1. Os coeficientes de
correlao alcanados demonstram a eficincia do
NIRS para predio das fraes de fibra alimentar
(Tabela 1). Alm disso, na Figura 1 verifica-se
ausncia de restries quanto forma fsica da
amostra utilizada (gros modos x gros inteiros), ou
seja, a moagem dos gros pode ser dispensada, o que
aumenta a rapidez de estimativa dos valores de fibra
alimentar em gros de aveia pelo NIRS.
A utilizao de gros inteiros, ao invs de modos,
poderia ser discutida, pois a reflectncia da luz sobre a
superfcie da amostra poderia no refletir a composio
do interior dos gros. Alm disso, o tamanho e a forma
dos gros podem influenciar a predio dos resultados.
Considerando-se tais fatores, recomenda-se a moagem
fina das amostras para a anlise no NIRS que utiliza o
sensor de reflectncia (Borges et al., 2001).
Os resultados, entretanto, contrariam essas afirmativas,
pois a calibrao com gros inteiros apresentou maiores
correlaes do que as com gros modos (Tabela 2;
Figura 1). Uma explicao pode ser a de que a utilizao
de aparelhos de varredura, com sistema de retculas
hologrficas, como o aparelho NIRS, no tem as mesmas
limitaes dos aparelhos de NIRS que usam, como
detectores, o sulfito de chumbo, e no consegue medir a
luz que incide sobre gros mais espessos.
A utilizao de gros intactos mais eficaz para o
melhoramento gentico, pois torna mais gil a seleo,
permitindo que seja realizada mesmo quando no se
dispe de grande quantidade de gros, principalmente
quando se deseja selecionar em geraes mais precoces.
Wu & Shi (2004) utilizaram gros individuais de linhas
F2 e variedades do grupo indica e japonica, sugerindo
que a seleo precoce, quando se dispe de amostras
menores, pode ser feita com o NIRS.
Gentipos com elevados teores de fibra solvel
podem ser utilizados para controle de colesterol,
enquanto gentipos com maiores teores de fibra
insolvel poderiam ser destinados reduo de
energia em dietas e para a preveno de
constipao. Quando o objetivo do melhoramento
a alimentao animal, deve-se considerar que as
fraes de fibra podem alterar o ganho de peso e a
converso alimentar de aves (Silva, 2002) e, nesse
caso, as propores das fraes solvel e insolvel

Fraes de fibra em aveia

da fibra presente na dieta que afetaro o

desempenho animal. Portanto, a partir do
conhecimento das fraes da fibra nos diferentes
gentipos, estes podem ser usados de forma
direcionada para finalidades especficas, tanto na
alimentao humana quanto animal. Sendo assim, o
desenvolvimento de gentipos, com teores
diferenciados de fibras, pode se constituir um novo
desafio para o melhoramento gentico de aveia e um
avano no melhoramento da qualidade deste cereal.

Porcentagem de fibra total

Enzimtico-gravimtrico

10

Gros modos
y = 0,1563 + 0,9847x
2
R = 0,61

979

Mtodos mais rpidos e eficientes para viabilizar a

implementao da seleo dessa caracterstica so
fundamentais para o melhoramento de fibras se tornar
uma realidade. A utilizao de gros inteiros, sem
necessidade de moagem prvia, uma importante
contribuio deste trabalho, que possibilita implementar
esta tcnica com mais rapidez e menor custo.
Os resultados obtidos neste trabalho mostram a grande
aplicao do NIRS na determinao de fibras em
gentipos brasileiros de aveia.
Gros inteiros
y = 0,9568 + 0,8913x
2
R = 0,82

10

9
9
8

8
10
9
Porcentagem de fibra _ NIRS

Porcentagem de fibra insolvel

Enzimtico-gravimtrico

Gros modos
y = -1,741 + 1,294x
2
R = 0,42
7

9
8
10
Porcentagem de fibra _ NIRS

Gros inteiros
7

y = 0,8249 + 0,8716x
2
R = 0,57

6,2
6,6
5,8
6,4
6,0
Porcentagem de fibra insolvel _ NIRS

7
6
Porcentagem de fibra insolvel _ NIRS

Figura 1. Porcentagem de fibras total e insolvel (%), determinadas pelo mtodo enzimtico-gravimtrico e predita
pelo NIRS, utilizando amostras de dados de gros modos e de gros inteiros.

Pesq. agropec. bras., Braslia, v.41, n.6, p.975-980, jun. 2006

980

C.F.L. e Silva et al.

Concluses
1. Existe variabilidade quanto ao carter fibra
alimentar, que pode ser explorada em programas de
melhoramento gentico, entre cultivares brasileiras de
aveia e suas prognies F7.
2. A utilizao do NIRS para predio do teor de fibras
em aveia a partir de gros inteiros eficaz, podendo ser
empregada com xito na seleo do carter.

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Recebido em 20 de junho de 2005 e aprovado em 18 de janeiro de 2006

Pesq. agropec. bras., Braslia, v.41, n.6, p.975-980, jun. 2006