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2do.GRUPO
V CICLO
INTEGRANTES:
PRCTICA N 3:
LA ACCIN DE LAS ENZIMAS EN DETERGENTES PARA LAVAR ROPA
I. GENERALIDADES
Las enzimas son molculas de naturaleza proteica y estructural que
catalizan reacciones qumicas, siempre que sean termodinmicamente
posibles: una enzima hace que una reaccin qumica que es
energticamente posible , pero que transcurre a una velocidad muy baja,
sea cinticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin
la presencia de la enzima. En estas reacciones, las enzimas actan sobre
unas molculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en
molculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las
clulas necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las
reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimticas.
Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos
y su velocidad crece solo con algunas reacciones, el conjunto (set) de
enzimas sintetizadas en una clula determina el tipo de metabolismo que
tendr cada clula. A su vez, esta sntesis depende de la regulacin de la
expresin gnica.
Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la
energa de activacin (G) de una reaccin, de forma que se acelera
sustancialmente la tasa de reaccin. Las enzimas no alteran el balance
energtico de las reacciones en que intervienen, ni modifican, por lo tanto,
el equilibrio de la reaccin, pero consiguen acelerar el proceso incluso
millones de veces. Una reaccin que se produce bajo el control de una
enzima, o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho ms
deprisa que la correspondiente reaccin no catalizada.
Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son consumidas
por las reacciones que catalizan, ni alteran su equilibrio qumico. Sin
embargo, las enzimas difieren de otros catalizadores por ser ms
especficas. Las enzimas catalizan alrededor de 4 000 reacciones
bioqumicas distintas. No todos los catalizadores bioqumicos son protenas,
pues algunas molculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como
la subunidad 16S de los ribosomas en la que reside la actividad peptidil
transferasa). Tambin cabe nombrar unas molculas sintticas denominadas
enzimas artificiales capaces de catalizar reacciones qumicas como las
enzimas clsicas.
La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras molculas. Los
inhibidores enzimticos son molculas que disminuyen o impiden la
actividad de las enzimas, mientras que los activadores son molculas que
incrementan dicha actividad. Asimismo, gran cantidad de enzimas requieren
de cofactores para su actividad. Muchas drogas o frmacos son molculas
inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por la temperatura, el pH,
la concentracin de la propia enzima y del sustrato, y otros factores fsicoqumicos.
Algunas enzimas son usadas comercialmente, por ejemplo, en la sntesis de
antibiticos y productos domsticos de limpieza. Adems, son ampliamente
Estructuras y mecanismos:
Las enzimas son generalmente protenas globulares que pueden presentar
tamaos muy variables, desde 62 aminocidos como en el caso del
monmero de la 4-oxalocrotonato tautomerasa, 16 hasta los 2 500
presentes en la sintasa de cidos grasos.
Las actividades de las enzimas vienen determinadas por su estructura
tridimensional, la cual viene a su vez determinada por la secuencia de
aminocidos.18 Sin embargo, aunque la estructura determina la funcin,
predecir una nueva actividad enzimtica basndose nicamente en la
estructura de una protena es muy difcil, y un problema an no resuelto.
Casi todas las enzimas son mucho ms grandes que los sustratos sobre los
que actan, y solo una pequea parte de la enzima (alrededor de 3 a 4
aminocidos) est directamente involucrada en la catlisis.20 La regin que
contiene estos residuos encargados de catalizar la reaccin es denominada
centro activo. Las enzimas tambin pueden contener sitios con la capacidad
de unir cofactores, necesarios a veces en el proceso de catlisis, o de unir
pequeas molculas, como los sustratos o productos (directos o indirectos)
de la reaccin catalizada. Estas uniones de la enzima con sus propios
sustratos o productos pueden incrementar o disminuir la actividad
enzimtica, dando lugar as a una regulacin por retroalimentacin positiva
o negativa, segn el caso.
Al igual que las dems protenas, las enzimas se componen de una cadena
lineal de aminocidos que se pliegan durante el proceso de traduccin para
dar lugar a una estructura terciaria tridimensional de la enzima, susceptible
de presentar actividad. Cada secuencia de aminocidos es nica y por tanto
da lugar a una estructura nica, con propiedades nicas. En ocasiones,
protenas individuales pueden unirse a otras protenas para formar
complejos, en lo que se denomina estructura cuaternaria de las protenas.
La mayora de las enzimas, al igual que el resto de las protenas, pueden ser
desnaturalizadas si se ven sometidas a agentes desnaturalizantes como el
calor, los pHs extremos o ciertos compuestos como el SDS. Estos agentes
destruyen la estructura terciaria de las protenas de forma reversible o
irreversible, dependiendo de la enzima y de la condicin. Una consecuencia
de la desnaturalizacin es la prdida o merma de la funcin, de la capacidad
enzimtica
Cofactores:
Algunas enzimas no precisan ningn componente adicional para mostrar
una total actividad. Sin embargo, otras enzimas requieren la unin de
molculas no proteicas denominadas cofactores para poder ejercer su
actividad.46 Los cofactores pueden ser compuestos inorgnicos, como los
iones metlicos y los complejos ferrosulfurosos, o compuestos orgnicos,
como la flavina o el grupo hemo. Los cofactores orgnicos pueden ser a su
vez grupos prostticos, que se unen fuertemente a la enzima, o coenzimas,
que son liberados del sitio activo de la enzima durante la reaccin. Las
coenzimas incluyen compuestos como el NADH, el NADPH y el adenosn
trifosfato. Estas molculas transfieren grupos funcionales entre enzimas.
Un ejemplo de una enzima que contiene un cofactor es la anhidrasa
carbnica, en la cual el zinc (cofactor) se mantiene unido al sitio activo, tal y
como se muestra en la figura anterior (situada al inicio de la seccin
"Estructuras y mecanismos").48 Estas molculas suelen encontrarse unidas
al sitio activo y estn implicadas en la catlisis. Por ejemplo, la flavina y el
grupo hemo suelen estar implicados en reacciones redox.
Las enzimas que requieren un cofactor pero no lo tienen unido son
denominadas apoenzima o apoprotenas. Una apoenzima junto con
cofactor(es) es denominada holoenzima (que es la forma activa). La mayora
de los cofactores no se unen covalentemente a sus enzimas, pero s lo
hacen fuertemente. Sin embargo, los grupos prostticos pueden estar
covalentemente unidos, como en el caso de la tiamina pirofosfato en la
enzima piruvato deshidrogenasa. El trmino "holoenzima" tambin puede
ser aplicado a aquellas enzimas que contienen mltiples subunidades, como
en el caso de la ADN polimerasa, donde la holoenzima es el complejo con
todas las subunidades necesarias para llevar a cabo la actividad enzimtica.
Coenzimas
Las coenzimas son pequeas molculas orgnicas que transportan grupos
qumicos de una enzima a otra.49 Algunos de estos compuestos, como la
riboflavina, la tiamina y el cido flico son vitaminas (las cuales no pueden
ser sintetizados en cantidad suficiente por el cuerpo humano y deben ser
incorporados en la dieta). Los grupos qumicos intercambiados incluyen el
ion hidruro (H-) transportado por NAD o NADP+, el grupo fosfato
transportado por el ATP, el grupo acetilo transportado por la coenzima A, los
III. PROCEDIMIENTO
1) Preparar la gelatina: por cada 50 ml de agua, usar 18 g de gelatina.
2) Llenar 8 tubos o vasos de precipitado graduado con 10 ml de la solucin
de gelatina cada uno (tubo 1, tubo 2, t 3, y t 4 y 1 A, 2 A, 3 A, y 4A) y
colocarlos en heladera hasta que solidifique.
3) Sacar los tubos de la heladera. La gelatina debe estar slida.
4) Marcar sobre el vidrio de cada tubo con el marcador la altura de la
gelatina slida.
5) Preparar una jarra con la solucin de detergente (10ml de detergente en
90ml agua = 10%). (Con y sin enzima)
6) En el tubo 1 agregar 30 gotas de la solucin enzimtica sobre la gelatina
slida.
7) En el tubo 2 agregar 60 gotas de agua sobre la gelatina slida.
- Procedimiento
Tubo1: agregamos 30
solucin enzimtica
Tubo2: agregamos 60
Tubo3: agregamos 30
de detergente
Tubo4: agregamos 60
de detergente.
gotas de la
gotas de agua
gotas de solucin
gotas de solucin