GUAS DE LABORATORIO:

ANLISIS INSTRUMENTAL
Valoraciones

potenciomtricas

cido-base:

Estandarizacin

de

las

soluciones

aplicaciones...11
Determinacin potenciomtrica de cloruro en orina humana y suero fisiolgico...15
Determinacin espectrofotomtrica de Fe (II) en un producto farmacutico: Curva de
error...22
Demanda Qumica de Oxgeno (DQO) en una muestra de agua. Determinacin
espectrofotomtrica...27
Determinacin de alcohol en una bebida alcohlica por refractometra..31
Determinacin de sacarosa en azcar de mesa por polarimetra.. ...36
Determinacin

de

acetaminofn

en

tabletas

farmacuticas

por

espectrofotometra

ultravioleta....40
Determinacin de cobre y zinc en cabello por espectrofotometra de absorcin atmica....44
Determinacin de simeticona en un medicamento por espectroscopa infrarroja.48
Determinacin de etanol en una bebida alcohlica por cromatografa de gases..52
Determinacin de acetaminofn en tabletas por cromatografa lquida (HPLC).....56
Fluorescencia.....60
Anexos...62

DESARROLLO DEL CURSO

La responsabilidad de las condiciones seguras de trabajo en el laboratorio recae sobre todos los
individuos que conforman el curso; sin embargo, la persona que tiene mayor responsabilidad es
la que est a cargo del curso por poseer mayor experiencia, preparacin y destreza para el
desarrollo de las prcticas. El docente o Asistente de Docencia no es solamente responsable de
la enseanza sino tambin de mantener el sitio de trabajo tan seguro como sea posible. A estas
personas se les debe reportar cualquier anomala. Muchos de los accidentes que ocurren en un
laboratorio de qumica son ocasionados principalmente por dos razones: la falta de
conocimiento, ya sea personal o la de un compaero, acerca de la prctica que se realiza y la
negligencia para seguir las normas mnimas de seguridad. Los accidentes pueden originarse por
las siguientes razones:

Inadecuada manipulacin de productos qumicos corrosivos y venenosos.

Manipulacin de material de vidrio roto.

Manejo de materiales que se encuentran a temperaturas elevadas.

Falta de prevencin o mal uso del fuego proveniente de mecheros u originado por un
circuito elctrico.

Para evitar accidentes durante su trabajo en el laboratorio, debe conocer y seguir las reglas de
seguridad, adems de las recomendaciones hechas por los profesores o Asistentes de docencias
encargados del curso, para el buen funcionamiento de los laboratorios, tanto en su planta fsica
como en el desarrollo de las prcticas que all se realizan. El usuario de un laboratorio debe
adquirir el hbito de pensar en los riesgos involucrados en el desarrollo experimental que planea
realizar.

1. GENERALIDADES

Las prcticas se desarrollan en grupo de dos o tres personas, mximo.

Los estudiantes deben portar su carn que los identifica como miembros de la Universidad
del Valle, y su carn del servicio mdico y/o EPS al cual se encuentre afiliado.

Si algn estudiante padece de alguna enfermedad o condicin que pueda generar

emergencias de atencin mdica (asma, epilepsia, embarazo, entre otras) es importante que
mencione su caso al profesor y la manera cmo se debe afrontar la emergencia si llegase a
suceder durante la prctica de laboratorio.

El estudiante debe tener claro los conceptos bsicos tericos relacionados con el tema de la
prctica de laboratorio.

Debe realizar un diagrama de flujo en su cuaderno antes del inicio de la prctica

correspondiente.

Debe mantener su cuaderno de laboratorio siempre para revisarse en cualquier momento

durante la prctica.
1

El profesor puede plantear cambios o trabajo adicional, los cuales se informaran

la realizacin de la prctica.

La relacin de prcticas, el tipo de informe y la evaluacin, se encuentran en el programa del

curso, el cual es emitido por el Departamento de Qumica y presentado a los estudiantes por
el profesor al inicio del semestre. Los implementos de uso personal deben ser aportados por
cada estudiante en la medida que los requiera.

La asistencia a todas las prcticas del laboratorio es obligatoria; slo es aceptada una excusa
certificada por el servicio mdico de la Universidad, para considerar la repeticin de las
prcticas alternativas de reemplazo.

Se exige puntualidad a todas las prcticas.

El laboratorio de qumica no es realmente un lugar peligroso, se requiere de prudencia

razonable y conocimientos bsicos serios por parte del experimentador para mantener su
seguridad.

Los materiales y equipos sern solicitados por los estudiantes en el respectivo almacn, una
semana antes de realizarse la practica programada.

A cada grupo se le asigna un lugar de trabajo, el cual debe permanecer limpio y ordenado
durante y despus de la prctica. De igual manera deben permanecer las zonas y elementos
de uso comn: Saln de balanzas analticas, cabinas de extraccin de gases, tablero,
reactivos, soluciones y residuos, etc.

Debe tener presente las recomendaciones acerca de los riesgos y toxicidad de los reactivos
que manipula durante la prctica.

previo a

2. SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Mantenga consigo un documento actualizado que lo identifique como estudiante de la

Universidad del Valle, el cual ser requerido en el caso de que sea necesario llevarlo a un
centro de asistencia mdica. Adems de su carn del servicio mdico (EPS) donde se
encuentre afiliado.

En todo momento utilice bata de laboratorio completamente abotonada, no salga del

laboratorio con ella puesta ya que puede contaminar a sus compaeros. Vstase adecuada y
cmodamente el da de la prctica. Use pantaln largo y preferiblemente de algodn. No
lleve puestos anillos, aretes largos, collares y pulseras mientras est trabajando. Pngase
calzado con suela antideslizante, no utilice sandalias. Si su cabello es largo recjalo y
sujtelo de manera que no se suelte con facilidad. Mantenga y lave su bata de laboratorio
aparte de la ropa que usa normalmente.

Es recomendable el uso de guantes cuando se trabaja con reactivos txicos o corrosivos.

Proteja siempre en forma adecuada sus ojos. El riesgo de una lesin grave en los ojos, obliga
a que todos (estudiantes, profesores y visitantes) en el laboratorio lleven siempre una
proteccin adecuada, desde que inicia hasta el final de la prctica. Mantenga puestas las
gafas de seguridad an cuando usted no est realizando algo peligroso, sus vecinos pueden
tener un accidente y afectarlo a usted. En el caso de que lleguen salpicaduras de reactivo a
2

los ojos lave inmediatamente con abundante agua. Si solo un ojo es afectado, proteja el sano
durante el lavado. Abra bien los prpados y mueva el ojo en diferentes sentidos. Avise a su
instructor de inmediato y acuda al mdico lo antes posible. Nunca use lentes de contacto en
el laboratorio, ya que las sustancias qumicas pueden penetrar por capilaridad debajo de ellos
por lo que no ser fcil enjuagarlos.

Al llegar al laboratorio, conozca donde se localiza la fuente de agua, la ducha, los

extinguidores y las salidas de emergencia. Aprenda a usarlos adecuadamente y no dude en
usar estos equipos si es necesario. Es importante retirar los seguros de las puertas que son
acceso a la salida de emergencia, al iniciar la prctica. Utilice la ducha de seguridad si su
ropa se incendia o si sobre ella se derrama gran cantidad de un reactivo peligroso. Qutese de
inmediato la prenda afectada, el pudor no cuenta en ese momento, slo cuenta la rapidez con
la cual usted enfrente el problema.

Asegrese de conocer los procedimientos de primeros auxilios y uso de los medicamentos

en su defecto conocer la persona encargada de esta actividad.

Nunca trabaje slo sin supervisin en el laboratorio. No realice ningn experimento sin
previa autorizacin.

Mantenga su rea de trabajo limpia, seca y ordenada. Siga cuidadosamente las instrucciones
para el ensamblaje de equipo y antes de ponerlo en funcionamiento haga que su instructor lo
revise. Mantenga libros y objetos personales retirados del sitio de trabajo, ellos pueden
interferir con su labor. Si usted salpica o riega un reactivo lmpielo rpidamente. Provase de
un trozo de tela para la limpieza de las reas de trabajo.

Lea los rtulos de los reactivos cuidadosamente. El uso errneo de sustancias qumicas
puede causar serios accidentes. Evite contaminar los reactivos puros. Nunca devuelva el
exceso de reactivo a los frascos, tome slo la cantidad que usted va a necesitar.

No transportar los reactivos de un lado a otro. En caso necesario agarre las botellas por la
base, nunca por la boca. Nunca ingiera los reactivos utilizados en la prctica.

Rotule correctamente los envases de las soluciones preparadas para la prctica y de los
desechos producidos. El rtulo debe contener: Nombre, Frmula, Concentracin, Fecha de
preparacin y Persona responsable. Los desechos se deben tratar en un trabajo coordinado
con su instructor.

Cualquier experimento en el cual se puedan producir humos txicos o irritantes, deber

realizarse dentro de una cabina extractora (revisar que su funcionamiento sea ptimo antes
de iniciar el procedimiento). Para probar el olor de una sustancia, coloque la boca del
recipiente alejada de su nariz y con su mano ventile un poco los vapores hacia su nariz. No
inhale profundamente, olfatee suavemente.

La mayora de los productos qumicos son txicos. Evite el contacto con la piel, ojos y
mucosas. Si ocurre salpicaduras en la piel elimnelas con un trozo de tela limpio y seco y
luego lave el rea con abundante agua fra; en el caso de soluciones corrosivas la rapidez con
que usted acte es factor importante para evitar dao en la piel. Debido al peligro de
absorcin nunca use solventes orgnicos para retirar un reactivo qumico que se derrame en
el cuerpo.

Evite las chanzas, juegos, manifestaciones de cario y visitas de sus amigos hasta que
termine la prctica de laboratorio. No permita bajo ningn motivo la presencia de nios en el
laboratorio.

Nunca ingiera comidas o bebidas, ni fume en el laboratorio. Lave sus manos antes y despus
de la prctica. No almacene alimentos en los refrigeradores donde se guardan productos
qumicos.

Las lesiones ms frecuentes en un laboratorio son las cortaduras y quemaduras. Descarte el

material de vidrio que se ha resentido o quebrado y depostelo en el lugar indicado para tal
propsito. Pula con fuego las puntas cortantes de tubos y varillas de vidrio. Nunca intente
forzar la entrada de un tubo de vidrio o un termmetro por un agujero. Asegrese de lubricar
con glicerina o agua jabonosa. Proteja sus manos con una toalla o unos guantes mientras
inserta material de vidrio en un tapn. Nunca toque directamente las mallas de
calentamiento, material de vidrio, aros y materiales de laboratorio que previamente hayan
sido sometidos a calentamiento. Dejar el material caliente en un lugar apartado hasta que se
enfre.

En caso de fuego sobre la ropa evite correr, trate de rodar por el piso. Si hay una ducha de
seguridad cerca, mantenga la persona bajo esta hasta que las llamas se extingan y los
posibles reactivos qumicos se laven. No usar una manta ya que sta no enfra y los focos de
llamas latentes pueden continuar.

Apagar todos los mecheros alrededor, retirar todos los reactivos y disolventes combustibles
cuando se presenten reactivos ardiendo. Si el fuego se presenta en un matraz o vaso de
precipitados se puede apagar cubrindolo con vaso grande, o un vidrio reloj. Si es necesario,
utilizar un extintor seco apuntando directamente a la base de las llamas. Nunca utilizar agua.
En caso de incendio mayor dar la alarma y abandonar el recinto con calma.

En caso de quemaduras trmicas o qumicas, enjuagar la zona quemada con agua fra
durante 15 minutos como mnimo. Retirar los reactivos con jabn suave y agua. No es
aconsejable el uso de reactivos neutralizantes, ungentos, cremas o lociones, no obstante, en
caso de quemaduras trmicas menores puede aplicar una crema calmante.

Siempre utilice una pera de caucho, un macropipeteador o una jeringa para succionar o
extraer lquidos con una pipeta. Nunca utilice la boca, ni pruebe el reactivo.

Nunca agregue agua a un cido concentrado. Diluya el cido lentamente adicionndolo al

agua con agitacin constante. Las bases debern ser diluidas en forma anloga. Nunca
mezcle cidos concentrados con bases concentradas sin tomar las precauciones del caso.
Recuerde que se produce una reaccin fuertemente exotrmica.

Encienda los mecheros solo cuando va a utilizarlos. Previamente perctese que no se

encuentren lquidos inflamables cerca (Ejemplo: alcohol, acetona, ter de petrleo,
benceno), estos debern encontrarse a una distancia prudencial. Nunca use mechero para
calentar este tipo de sustancias, utilice una manta de calentamiento elctrica, una plancha o
bao de mara.

Cuando caliente un lquido en un tubo de ensayo, coloque la boca del tubo retirada y en
posicin opuesta de usted y de sus vecinos, caliente en forma suave. Nunca caliente un
lquido en un recipiente completamente cerrado.

No agregue residuos qumicos a las canecas destinadas para residuos slidos ordinarios. No
emplee los vertederos para eliminar desechos slidos, como papel, pedazos de vidrio,
algodn, etc. Nunca arroje a los vertederos lquidos inflamables o voltiles, sustancias
corrosivas o compuestos que puedan producir vapores txicos ni precipitados.

Al finalizar la prctica de laboratorio, devuelva todo el equipo desarmado, limpio y seco. Revise
que las instalaciones hidrulicas y de gas estn cerradas. Equipos, cabinas de extraccin y
extractores deben quedar apagados. El lugar de trabajo y las zonas comunes deben quedar
limpios y ordenados.
En la pgina del Departamento de Qumica http://quimica.univalle.edu.co encontrar el
manual de seguridad de los laboratorios donde se manejan sustancias qumicas y las hojas de
seguridad de algunos reactivos. Adicionalmente, en los almacenes ubicados en los pisos 1, 2 y 3
del Departamento de Qumica se encuentran copias fsicas de las fichas de seguridad de los
reactivos que se manejan en cada uno de ellos.

3. MANEJO DE MATERIALES
3.1 PESADAS
Al realizar una pesada recuerde:

No pesar nunca directamente sobre el platillo, sino sobre un vidrio reloj o recipiente de
vidrio limpio y seco.
Comprobar el cero en la balanza.
Despus de la pesada dejar la balanza completamente limpia.
No dejar reactivos en la mesa de las balanzas.

3.2 FILTRACIN
Para filtrar a gravedad se opera tal como se muestra en la Figura 1, una vez colocado el papel en
el embudo debe humedecerse con el lquido de lavado, con el fin que la superficie externa del
papel se adhiera perfectamente a la pared interna del embudo.

Figura 1. Filtracin a gravedad.

5

Para filtrar al vaco con embudo Buchner (Figura 2) se tomar un crculo de papel filtro de igual
dimetro que el Buchner y se situara en el interior de este, el embudo se adhiere a un kitasato y
se conecta el tubo lateral del erlenmeyer al aparato productor de vaco, generalmente una trampa
de agua, al final de la filtracin procure quitar el kitasato del erlenmeyer antes de cerrar el
sistema de vaco, sobre todo cuando se trata de una trampa de agua ya que la diferencia de
presiones har que el agua pase impurificando la muestra o en el mejor de los casos diluyndola.

Figura 2. Filtracin al vaco

Generalmente la primera forma de filtrar, al ser ms lenta, genera mayor dificulta al paso de
pequeas partculas de slido a travs del filtro, por ello suele usarse en aquellos casos en donde
el precipitado es casi coloidal. La segunda forma es mucho ms rpida y se utiliza generalmente
para separar los productos finales de las disoluciones que los contienen dejndolos un rato al
vaco para que se sequen.
3.3 MEDICIN Y TRASVASE DE LQUIDOS
3.3.1 Bureta: Se emplea para medir volmenes con exactitud en titulaciones, por lo que es
necesario tomar algunas precauciones.

Nunca adicione lquidos calientes.

La zona que hay entre la llave y la boca de salida debe quedar completamente llena de
lquido. Asegrese de que no haya burbujas de aire.
El enrase se hace tomando como indicador la parte baja del menisco.
Siempre se empieza a titular con la bureta llena.
El lquido debe caer lentamente para evitar que no quede parte pegado a las paredes.

3.3.2 Matraz: Solo mide el volumen dado por el aforo, debe tenerse en cuenta:

No se puede calentar ni adicionar lquidos calientes.

El enrase debe hacerse con sumo cuidado, procurando que la parte baja del menisco quede
en la seal que indica el matraz (aforo).
Prepare las disoluciones en un vaso de precipitados en menor cantidad que el volumen del
matraz, transfiera la solucin al matraz lavando muy bien el vaso.
6

Figura 3. Forma correcta de observar el aforo.

3.3.3 Pipetas: Son de dos clases, graduadas y volumtricas, ambas provistas de una jeringa o
embolo con la que se succiona el lquido, estas deben sostenerse de manera vertical al
sumergirse en el lquido. Sea cuidadoso en el manejo de stas evitando transportarlas de un lado
a otro con lquido, nunca introduzca la misma pipeta en otro recipiente sin ser lavada,
contaminar de esta forma los reactivos. Puede transvasar a un vaso la cantidad que necesita y
llevarla a su lugar de trabajo, excepto en sustancias como cidos y bases concentrados que
deben manejarse todo el tiempo en cabina de extraccin.
3.3.4 Probeta: su uso es solo para medir volmenes nunca prepare soluciones en ella.

4. CUADERNO DE LABORATORIO
Es esencial en cualquier trabajo experimental la elaboracin de un cuaderno de laboratorio en el
que se vayan anotando las experiencias realizadas. Debe constituir un registro completo de todo
el trabajo prctico realizado, contener toda la informacin necesaria para que cualquier otra
persona sea capaz de reproducir el experimento exactamente de la misma forma en que lo ha
realizado el autor del cuaderno, incluyendo las operaciones llevadas a cabo, los hechos
observados y las conclusiones que se derivan de todo ello.
Las notas deben tomarse inmediatamente para no dejar nada a la memoria (que puede fallar). No
es recomendable tomar notas sueltas sobre los experimentos y escribir los detalles
posteriormente en el cuaderno.
Por tanto, el cuaderno de laboratorio es el diario de trabajo donde se describen las acciones
cotidianas de la experimentacin, es totalmente personal, pero, a la vez, debe estar totalmente al
alcance de los compaeros de trabajo para su lectura y consulta. Adems, ya sea cuando se est
trabajando en el laboratorio, en el campo o en la biblioteca, siempre se debe tener a la mano el
cuaderno de laboratorio personal. En el caso de realizar algn experimento en pareja, los datos
son comunes, pero no la redaccin de los mismos.
Un cuaderno de laboratorio debe de tener una serie de detalles y componentes imprescindibles:

Fecha en la que se lleva a cabo el experimento.

Nombre de la persona que realiza el experimento.
Ttulo del experimento.
Objetivo del experimento o reaccin.
Esquema del montaje del aparato(s) a utilizar.
7

Procedimiento experimental detallado.

Datos analticos requeridos y obtenidos.
Observaciones generales del comportamiento qumico y fsico del proceso.
Encuadernacin permanente (tapa dura no absorbente y hojas cosidas) con las hojas
numeradas, papel resistente al rasgado, sin color (blanco) ya sea rayado, cuadriculado o liso.
Debe utilizarse bolgrafo negro de tinta indeleble, nunca lpiz.
Nunca debe borrarse la informacin consignada. Si se cometen errores, deben tacharse
nicamente con una lnea por encima, de forma que an puedan leerse, y nunca debe
arrancarse una pgina.
Slo se grapar hojas al cuaderno de laboratorio, cuando se trate de los datos y/o grficas
suministrados por los equipos de laboratorio, por ejemplo un espectrofotmetro.
Debe escribirse lo que realmente se ha hecho en el experimento. No se trata de escribir lo
que dice la gua de la prctica que se debe hacer (para ello es suficiente con hacer referencia
a la pgina de la gua).
Al desarrollar los procedimientos, se debe escribir de forma concisa, clara, impersonal, y de
gramtica correcta.

NORMA:
NORMA:
LQA-002
-1
LAI

UNIVERSIDAD
UNIVERSIDAD DEL
DEL VALLE
VALLE
DEPARTAMENTO
DEPARTAMENTO DE
DE QUMICA
QUMICA
LABORATORIO DE ANLISIS
LABORATORIO DE QUMICA ANALTICA
INSTRUMENTAL

VERSIN:
VERSIN:
02
02

FECHA
FECHA DE
DE REVISIN:
REVISIN:
2013
2013

MANEJO DE LA BALANZA ANALTICA

VALORACIONES POTENCIOMTRICAS CIDO-BASE:
Y ANLISIS ESTADSTICO
DE DATOS
ESTANDARIZACIN
Y APLICACIONES
ELABORADO POR:
ELABORADO POR:
Norberto Bentez, Ferney Gonzlez y
Fernando Barona

REVISADO POR:
REVISADO POR:

Norberto Bentez
Norberto Bentez y Humberto Espinal

APROBADO POR:
APROBADO POR:

Departamento de Qumica
Departamento de Qumica

1. OBJETIVOS

Obtener informacin sobre la composicin de una solucin mediante la medicin del

potencial electroqumico reversible entre dos electrodos.

Aplicar los conceptos bsicos de potenciometra en la determinacin de puntos finales en

valoraciones cido-base mediante el uso de un potencimetro.

Adquirir destreza en el manejo del potencimetro, as como en la identificacin y uso del

electrodo de vidrio como un electrodo de membrana.

2. INTRODUCCIN
La concentracin de iones hidrgeno (actividad en trminos reales) de una solucin acuosa
puede determinarse midiendo la diferencia del potencial electroqumico entre un electrodo
indicador de vidrio y uno de referencia. El electrodo de vidrio es altamente selectivo a los iones
H+ y su respuesta est determinada por el intercambio catinico en la superficie de la membrana,
como se muestra en el siguiente equilibrio:

Una valoracin potenciomtrica consiste en la medicin del potencial de una celda

electroqumica en funcin del volumen de titulante adicionado. La celda electroqumica
galvnica para la determinacin de pH bsicamente consiste en un par de electrodos (electrodo
de trabajo o vidrio y electrodo de referencia) sumergidos en la solucin a la cual se le quiere
medir el pH. En los instrumentos actuales ambos electrodos estn acoplados en un solo
dispositivo denominado electrodo mixto. La representacin grfica de la variacin del pH
respecto al volumen de la solucin patrn (titulante) origina una curva sigmoidea a partir de la
cual es posible obtener el punto final de la titulacin, necesario para la cuantificacin del
analito. En el caso especfico de las valoraciones cido-base, la apariencia de la curva y
especialmente el potencial en el punto final depende de la fortaleza de disociacin (Ka Kb) de
la especie conjugada que se haya generado y de su actividad (concentracin aparente).
9

3. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Material
Potencimetro y soluciones amortiguadoras estndares
Electrodo mixto (1)
Agitador magntico (1)
Barra magntica cilndrica y pequea (1)
Matraz volumtrico de 100.00 mL (3), 50.00 mL (1)
Pipeta volumtrica de 5.00 mL (2)
Vaso de 100 mL (4)
Bureta de 25.00 mL (1)
Pinza para bureta (1)

Soporte universal (1)

Esptula pequea (1)
Frasco lavador (1)
Goteros (2)
Vidrio reloj o Pesasales (1)
Reactivos
cido fosfrico
cido clorhdrico
Hidrxido de sodio
Ftalato cido de potasio

4. PROCEDIMIENTO
a) Partiendo de soluciones concentradas prepare 50 mL de HCl 10 mM y 50 mL de H3PO4 10
mM, y con el reactivo slido prepare 500 mL de NaOH 10 mM.
b) Calibre el potencimetro (pH-metro), segn instrucciones del equipo y del profesor, lavando
al final el electrodo mixto con suficiente agua destilada.
c) Estandarice la solucin de NaOH con ftalato cido de potasio previamente secado (1 hora,
105 C). Pese exactamente el patrn primario (cantidad suficiente para gastar cerca de 5 mL
del secundario) en un vaso de 100 mL, agregue cuidadosamente agua destilada (15 - 20 mL)
y un magneto e introduzca el electrodo de tal manera que el bulbo quede inmerso y que el
magneto no lo golpee.
d) Agite magnticamente y registre el pH inicial.
e) Mantenga agitacin suave y deje caer desde la bureta 0.4 mL de titulante, registre el pH.
Repita este procedimiento hasta antes del punto final.
f) Al aproximarse al punto final se observa un cambio brusco en el pH (recuerde que se busca
una curva sigmoidea), en esta regin adicione cantidades menores de titulante (0.2 mL)
hasta que el pH no sufra cambios grandes y en este punto adicione alcuotas de 0.4 mL (unos
3 mL) registrando cada vez el pH.
g) Finalizada la valoracin lave suficientemente el electrodo y sumrjalo en un vaso con agua
destilada hasta la siguiente titulacin.
h) Valore 5.0 mL de la solucin problema de HCl siguiendo las pautas de los tems c) f).
i) Valore 5.0 mL de la solucin problema de H3PO4 siguiendo las pautas de los tems c) f).
Recuerde que no se observa slo un punto final.
j) Aplique el procedimiento anterior a una muestra comercial de vinagre. Teniendo en cuenta
que la etiqueta reporta cerca de 4 % en CH3COOH, tome la alcuota necesaria para gastar
aproximadamente 5.00 mL del titulante.

10

5. TRATAMIENTO DE DESECHOS
El tratamiento de los desechos de la prctica se realizar con la orientacin del profesor de
laboratorio.
6. CLCULOS Y RESULTADOS
a) Para cada valoracin haga un grfico de pH vs. volumen de base aadido y a partir de estas
grficas determine el punto final. En los casos en que este punto no sea evidente realice una
grfica de la aproximacin a la primera derivada. Emplee la aproximacin a la segunda
derivada si sigue siendo difcil determinar dicho punto.
b) Determine la concentracin de los analitos en las muestras.
c) De la manera ms simple, a partir de las curvas de titulacin obtenga los valores de pKa que
haya lugar y comprelos con los reportados en la literatura.

7. PREGUNTAS
a) El profesor de laboratorio asignar 2 o 3 preguntas relacionadas con la prctica.
b) Qu ocurre en las valoraciones ordinarias cuando la concentracin de los reaccionantes es
muy pequea? Ser correcto en estos casos utilizar un indicador?
c) Cul es el indicador qumico apropiado para una valoracin de un cido dbil con una base
dbil?
d) La valoracin de cidos muy dbiles es difcil de realizar con el mtodo aqu descrito. Sin
embargo, el uso de reactivos auxiliares puede aumentar en gran medida la exactitud del
anlisis. El cido borico (pK = 9.2) se puede titular con una base fuerte en presencia de un
reactivo auxiliar orgnico que posea al menos dos grupos hidroxilos, describa brevemente el
mecanismo de accin de un reactivo auxiliar en la titulacin del cido brico.
8. BIBLIOGRAFA
RUBINSON, K. y RUBINSON, J. Anlisis Instrumental. Madrid: Pearson Educacin S.A,
2001.
SKOOG, D.A.; HOLLER, F.J. y CROUCH, S.R. Principios de Anlisis Instrumental.
6ed.Mexico: McGraw-Hill, 2008.
WILLARD, H.; MERRIT, L.; DEAN, J. y SETLE, F. Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Mxico: Grupo Editorial Iberoamrica S.A., 1998.
HARRIS, D.C. Anlisis qumico cuantitativo. 6ed. Barcelona: Reverte SA, 2007.
CELESTE, M.; AZEVEDO, C. y CAVALEIRO, ANA M. V. Journal of Chemical Education
Fecha
de
publicacin
(Web): Marzo
28,
2012 (Laboratory
Experiment)
DOI: 10.1021/ed200180j
11

UNIVERSIDAD DEL VALLE

DEPARTAMENTO DE QUMICA
LABORATORIO DE ANLISIS
INSTRUMENTAL

NORMA:
LAI -002

VERSIN:
02

FECHA DE REVISIN:
2013

DETERMINACIN POTENCIOMTRICA DE CLORURO

EN ORINA HUMANA Y SUERO FISIOLGICO
ELABORADO POR:

REVISADO POR:

APROBADO POR:

Norberto Bentez, Ferney Gonzlez y

Fernando Barona

Norberto Bentez y Humberto Espinal

Departamento de Qumica

1. OBJETIVOS

Fortalecer los conceptos adquiridos sobre mediciones potenciomtricas aplicadas a las

valoraciones por precipitacin.
Cuantificar cloruro en muestras reales (orina humana y suero fisiolgico) mediante
titulaciones argentomtricas y el uso de un electrodo in selectivo.
Determinar experimentalmente el valor de la constante del producto de solubilidad (Kps) del
AgCl
Adquirir destreza en el manejo y cuidado del electrodo de ion selectivo de estado slido.

2. INTRODUCCIN
Los mtodos potenciomtricos estn basados en la medida de la diferencia de potencial de una
celda electroqumica constituida por dos electrodos sumergidos en una disolucin y un
potencimetro (un voltmetro en el presente experimento) como dispositivo de medida. El
electrodo que responde de forma directa o indirecta a la actividad del analito se denomina
indicador y el otro, cuyo potencial permanece prcticamente constante, se denomina de
referencia. Una correcta determinacin del potencial electroqumico se debe realizar a una
corriente cero o extremadamente baja, por lo cual el potencimetro debe poseer una resistencia
interna muy grande respecto a la resistencia de los otros componentes de la celda.
En un electrodo indicador de primera especie, un metal sumergido en una solucin que contiene
sus iones, genera una diferencia de potencial elctrico (E) en la interfase. La relacin de este
potencial con la actividad de la especie (a Mn+) se rige por la ecuacin de Nernst,
para:
Un electrodo metlico (de segunda especie) puede dar respuesta a la actividad de un anin, si
este ltimo forma un precipitado o un complejo estable con la especie oxidada del electrodo. Por
ejemplo, la plata puede servir como un electrodo de segunda especie para haluro y
pseudohaluro.
12

El potencial de celda medido es la diferencia entre el potencial del electrodo indicador y el

electrodo de referencia de potencial conocido y constante. Es importante recordar que estos
potenciales son potenciales de electrodos (escritos como reduccin).

Ecelda = Eind - Eref

Los mtodos potenciomtricos tambin se pueden aplicar de forma directa para la determinacin
de un ion o de una molcula, comparando el potencial del electrodo indicador (electrodo
selectivo) en la disolucin problema frente al obtenido cuando se sumerge en una o ms
disoluciones estndar del analito. La buena selectividad del electrodo usado en la presente
prctica hace que no se requieran etapas previas de separacin.
3. MATERIALES Y REACTIVOS
Material
Potencimetro (1)
Electrodo indicador de Ag (1)
Electrodo de referencia, Ag/AgCl (1)
Electrodo selectivo para iones Cl- (1)
Agitador magntico (1)
Barra magntica cilndrica y pequea (1)
Pipeta volumtrica de 0.5 mL (1), 1.00 mL (3), 10.00 mL (1), 20.00 mL (1), 25.00 mL (1)

Pipeta graduada de 10.0 mL (1)

Vaso de 100 mL (4), 50 mL (4)
Matraz volumtrico de 25.00 mL(1), 50.00 mL (1), 100.00 mL (2)
Bureta de 25.00 mL (1)
Pinza para bureta (1)
Soporte universal (1)

Cables caimn banana (1)

Lija No 150 (1)
Esptula (1)
Pesasales (1)
Frasco lavador (1)
Gotero (1)
Escobilln (1)
Auxiliar de pipeteador (1)
Reactivos
Nitrato de sodio 5 M
cido ntrico
Cloruro de sodio
Carbonato de sodio
Cloruro de potasio

4. PROCEDIMIENTO
4.1 MTODO ARGENTOMTRICO
4.1.1 Estandarizacin de la solucin de AgNO3
a) Prepare, sin tanta exactitud, 50 mL de solucin de AgNO3 0.1 M y con ella llene la bureta.
Al finalizar la prctica guarde la solucin sobrante en un frasco mbar proporcionado por el
instructor.
b) En un vaso de 100 mL pese exactamente NaCl analtico (previamente secado por una hora a
110 C) suficiente para gastar cerca de 5 mL del patrn secundario. Agregue exactamente
20.00 mL de agua desionizada.
c) Agregue una gota de HNO3 concentrado y 0.5 mL de NaNO3 5 M.
d) Si el electrodo de plata presenta xido, plalo con carbonato de calcio o con una lija No 150
y lvelo con agua destilada.

13

e) Arme las partes del sistema de titulacin segn la Figura 1. Introduzca los electrodos a la
solucin (el bulbo debe estar sumergido) y djelos all hasta el final de la titulacin.

Bureta

Electrodo de
referencia
(E.R.)

Electrodo
de plata
(E.Ag.)

Voltmetro
Magneto
Cable E.Ag. en
voltaje

Cable E.R. en com

Placa agitador

Figura 1. Sistema de titulacin. Bureta torcida!!!!

f) Agite magnticamente la solucin evitando que la barra golpee el electrodo y registre el
potencial inicial.
g) Mantenga la agitacin y dispense 0.40 mL de titulante, registre el potencial. Contine la
valoracin hasta antes del punto final adicionando el mismo volumen. Despus de cada
adicin de AgNO3 espere a que el potencial se estabilice y registre su valor.
h) Al aproximarse al punto final se observa un cambio brusco en el potencial (recuerde que se
obtiene una curva sigmoidea), en esta regin debe adicionar cantidades menores de titulante
(0.20 mL). Despus del punto final el potencial es casi constante, en esta zona adicione
cantidades de 0.40 mL de AgNO3 (unos 3 mL) registrando cada vez el potencial.
i) Finalizada la valoracin lave el electrodo con abundante agua destilada y sumrjalo en un
vaso con agua destilada hasta la siguiente titulacin.
4.1.2 Determinacin de cloruros en las muestras de orina humana y suero fisiolgico
a) Tome 1.00 mL de la muestra de orina y adicinelos en un vaso de 50 mL, agregue
exactamente 20.00 mL de agua desionizada y realice el procedimiento descrito en los tems
c) i) de la seccin anterior.
b) Tome 2.00 mL de la muestra de suero fisiolgico y adicinelos en un vaso de 50 mL,
agregue exactamente 20.00 mL de agua desionizada y realice el procedimiento descrito en
los tems c) - i) de la seccin anterior.

14

4.2 CUANTIFICACIN MEDIANTE ELECTRODO SELECTIVO DE IN (ESI)

4.2.1 Preparacin de la curva de calibracin
a) Prepare 100.00 mL de una solucin 1000 ppm en Cl. Con sta prepare, en matraces de
25.00 mL, cinco soluciones en un rango entre 80 y 800 ppm.
b) Transfiera cada solucin estndar a vasos de 50 mL y adicione 0.5 mL de NaNO3 5 M. Haga
lo mismo para 25.00 mL de la solucin de 1000 ppm.
c) Sumerja el electrodo de referencia y el ESI en cada solucin y mida los potenciales (conecte
las terminales al voltmetro segn le indique el profesor) siguiendo un orden creciente en
concentracin y esperando que la seal se estabilice. Lave los electrodos con agua
desionizada cada vez que cambie de solucin.
4.2.2 Determinacin de cloruros en las muestras de orina humana y suero fisiolgico
a) Tome 1.00 mL de la muestra de orina, transfirala a un matraz volumtrico de 25.00 mL y
enrase con agua desionizada. Tranvase a un vaso de 50.00 mL con 0.5 mL de NaNO3 5 M.
Proceda con la medicin de acuerdo al tem c) de la seccin 4.3.1.
b) Tome 2.00 mL del suero fisiolgico, transfieralo a un matraz volumtrico de 25.00 mL y
enrase con agua desionizada. Tranvase a un vaso de 50.00 mL con 0.5 mL de NaNO3 5 M.
Proceda con la medicin de acuerdo al tem c) de la seccin 4.3.1.
5. TRATAMIENTO DE DESECHOS
El tratamiento de los desechos de la prctica se realizar con la orientacin del profesor de
laboratorio.
6. CLCULOS Y RESULTADOS
a) A partir de la curva de titulacin de la estandarizacin determine la molaridad del AgNO 3.
Mediante la linealizacin de la ecuacin de Nernst y con los datos de la estandarizacin que
resulten adecuados obtenga el valor de la pKps del AgCl.
b) Para cada valoracin argentomtrica haga un grfico de potencial (E) vs. volumen aadido de
AgNO3. De estos grficos determine el punto final y calcule la concentracin del analito en
cada muestra. En los casos en que el punto final no sea evidente hacer una grfica de
aproximacin a la primera derivada vs. el volumen medio del titulante. Emplee la
aproximacin a la segunda derivada si sigue siendo difcil determinar el punto final.
c) Para la determinacin del contenido de Cl mediante el uso de un electrodo selectivo de iones
realice la curva regular de calibracin (potencial vs. pCl) y calcule la concentracin de Cl
en las muestras.

15

7. PREGUNTAS
a) El profesor de laboratorio asignar 2 o 3 preguntas relacionadas con la prctica.
b) Cul es el propsito del NaNO3?
c) Qu habra ocurrido en la determinacin de cloruros, si la muestra de orina contuviera
bromuro en una cantidad superior a la normal? (relacin Br/Cl en orina de una persona
adulta normal 1/2150).
d) Suponiendo que el resultado obtenido en la determinacin de cloruro en orina es el valor
promedio de una muestra de 24 horas, estime cuntos miligramos de in cloruro se excretan
por da, si el volumen medio de orina diario es de 1500 mL. Comparar este valor con el
consumo de cloruro de sodio recomendado en las dietas.
e) Qu interferencias se podran presentar en las determinaciones mediante el uso del
electrodo de ion selectivo de cloruros?
f) Lea cuidadosamente el artculo referenciado al final de la bibliografa (incluyendo la
informacin de soporte). Por qu los potenciales de celda iniciales en las titulaciones
(Figuras 1A y 1B) son diferentes? Explique por qu en esos experimentos no se utiliza un
electrodo de referencia convencional.

8. BIBLIOGRAFA
RUBINSON, K. y RUBINSON, J. Anlisis Instrumental. Madrid: Pearson Educacin S.A,
2001.
SKOOG, D.A.; HOLLER, F.J. y CROUCH, S.R. Principios de Anlisis Instrumental.
6ed.Mexico: McGraw-Hill, 2008.
STROBELl, H. y HEINEMAN, W. Chemical Instrumentation: A Systematic Approach. 3 ed.
New York: John Wiley & Sons, 1989.
WILLARD, H.; MERRIT, L.; DEAN, J. y SETLE, F. Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Mxico: Grupo Editorial Iberoamrica S.A., 1991.
HARRIS, D.C. Anlisis qumico cuantitativo. 6ed. Barcelona: Reverte SA, 2007.
MILLER, J Y MILLER, J. Estadstica y quimiometra para qumica analtica. 4ed. Madrid:
Pearson educacin, SA, 2002.
BERGER, M. Journal of Chemical Education, Fecha de Publicacin (Web): Abril 20, 2012
(Communication) DOI: 10.1021/ed2005449
Poner la referencia actualizada.

16

UNIVERSIDAD DEL VALLE

DEPARTAMENTO DE QUMICA
LABORATORIO DE ANLISIS
INSTRUMENTAL

NORMA:
LAI -004

VERSIN:
02

FECHA DE REVISIN:
2013

DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA DE Fe (II)

EN UN PRODUCTO FARMACUTICO. CURVA DE ERROR
ELABORADO POR:

REVISADO POR:

APROBADO POR:

Norberto Bentez, Ferney Gonzlez y

Fernando Barona

Norberto Bentez y Humberto Espinal

Departamento de Qumica

1. OBJETIVOS

Adquirir destreza en el manejo de un espectrofotmetro (rango visible) de haz simple y

obtener en forma manual el espectro de absorcin del complejo Fe-(fenantrolina)3.

Determinar el rango de concentraciones del complejo Fe-(fenantrolina)3 en el cual el error es

mnimo, realizando una curva de error.

Cuantificar hierro en una muestra por espectrofotometra utilizando 1-10 fenantrolina como
agente complejante.

2. INTRODUCCIN
Cuando la radiacin electromagntica atraviesa una solucin que contiene una sustancia capaz
de absorberla, la potencia (P) de dicha radiacin disminuye, este comportamiento se rige por la
ecuacin.
Esta expresin se conoce como la Ley de Lambert-Beer, donde P0 corresponde a la potencia
incidente, es una constante caracterstica de la especie absorbente (la cual depende de la
longitud de onda y de la naturaleza del medio), C es la concentracin de dicha especie y b es la
distancia que recorre la radiacin a travs de la solucin.
La transmitancia (T) se define como la razn P/P 0 y la absorbancia (A) est relacionada
logartmicamente con ella, por lo tanto:

Manteniendo constante b en un intervalo estrecho de longitudes de onda (con radiacin

monocromtica), esta relacin lineal permite inferir sobre la concentracin y el nivel de
absorcin () de la sustancia en una solucin problema a travs de la medida de su absorbancia.
La precisin en las medidas espectrofotomtricas depende de la concentracin del absorbente y
por lo tanto no es recomendable la utilizacin de soluciones muy concentradas o muy diluidas,
17

ya que se presentan desviaciones de la linealidad. La incertidumbre de la concentracin puede

obtenerse expresndola en trminos de la transmitancia y derivando parcialmente (C/T); de
esta manera es posible determinar el rango de transmitancias asociado a las mnimas
incertidumbres relativas de la concentracin (C/C).
Los mtodos espectrofotomtricos se pueden aplicar con exactitud solo en concentraciones
limitadas, es necesario, por lo tanto, hacer especificaciones de los lmites de aplicacin para
cada determinacin. Para los sistemas que cumplen la ley de Beer, el error relativo en la
concentracin (C/C) se puede obtener de la ecuacin:

En donde C es el cambio en la concentracin C del reactivo absorbente. T es el error

fotomtrico o error en las medidas por las limitaciones del instrumento y T es la transmitancia
de la sustancia absorbente. La grfica del porcentaje de error vs. Transmitancia es lo que se
denomina curva de error o curva de Crawford, la cual es til para establecer el intervalo de
absorbancias en el cual el error cometido en la determinacin experimental es mnimo.

3. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales
Espectrofotmetro de haz simple (rango visible) (1)
Estufa (1)
Matraz volumtrico de 200.00 mL (2), 100.00 mL (2), 50.00 mL
(2), 25.00 mL (15)
Pipeta volumtrica de 0.50 mL (1) , 1.00 mL (1), 2.00 mL (1),
3.00 mL (1), 4.00 mL (1), 5.00 mL (1)
Probeta de 25 mL (1)
Bureta de 25.00 mL (1), 50.00 mL (2)
Vidrio reloj (2)
Vaso de precipitados de 100 mL (2),

Embudo con caa (1)

Esptula de acero inoxidable (2)
Reactivos
Solucin estndar de Fe 50 ppm
Cloruro de hidroxilamina
Acetato de sodio
1-10 fenantrolina monohidrato
Etanol
HCl

4. PROCEDIMIENTO
4.1 PREPARACIN DE SOLUCIONES
a) Prepare 50.00 mL de una solucin de 2.0 ppm de Fe a partir de una solucin a 50 ppm.
b) Prepare 25.00 mL de una solucin de cloruro de hidroxilamina 10% p/v.
c) Obtenga 200.00 mL de una solucin 10% p/v de acetato de sodio.
d) Pese 50 mg de monohidrato de 1-10 fenantrolina, adicione 1 mL de etanol, diluya en 10 mL
de agua tibia, deje enfriar y enrase a 50.00 mL con agua destilada.
e) Prepare 200 mL de HCl al 1% v/v.
18

Nota: No desechar las cantidades sobrantes de soluciones de reactivos, stas se envasan en

frascos previamente rotulados y se guardan para la prxima semana.
4.2 LONGITUD DE ONDA DE MXIMA ABSORCIN Y CURVA DE ERROR
a) A partir de las soluciones de 50 y 2.0 ppm de Fe, adicione los volmenes necesarios en
matraces aforados de 25.00 mL para preparar soluciones con concentraciones de 0.04, 0.08,
0.16, 0.24, 0.40, 1.0, 2.0, 4.0, 8.0, 10.0 y 16.0 ppm. A cada matraz adicione 1.0 mL de
solucin de cloruro de hidroxilamina, 2.5 mL de solucin de 1-10 fenantrolina y 8.0 mL de
la solucin de acetato de sodio. Enrase con agua destilada, agite y espere 15 minutos hasta
obtener la coloracin rojiza. Prepare un blanco.
b) Con la solucin de 2.0 ppm de Fe2+ preparada en el tem inmediatamente anterior, realice un
barrido espectral entre 400 y 600 nm registrando la medida de absorbancia cada 20 nm
(tome lecturas cada 2 nm en el intervalo de 500 a 520 nm). Recuerde establecer el 0.00 de
absorbancia con el blanco antes de tomar la lectura a cada longitud de onda.
c) Ajuste el espectrofotmetro en la longitud de onda donde se obtuvo mxima absorbancia y
mida la absorbancia o el porcentaje de transmitancia para cada una de las soluciones
estndar, establecindose previamente el 100% de transmitancia ( 0% de absorbancia) con
el blanco.
4.3 PREPARACIN DE LA MUESTRA
a) Suponiendo que utiliza una muestra de jarabe que contiene 200 mg de sulfato ferroso
heptahidratado por cada 4 mL, realice la dilucin (o diluciones) necesaria para obtener 25.00
mL a una concentracin cercana a 2 ppm en Fe. Tenga en cuenta que esta solucin debe
contener 1.0 mL de solucin de cloruro de hidroxilamina, 2.5 mL de solucin de 1-10
fenantrolina y 8.0 mL de la solucin de acetato de sodio. Siguiendo el orden estricto y las
consideraciones citadas en el tem a) de la seccin anterior.
NOTA IMPORTANTE: Obviamente si su jarabe presenta otra concentracin debe modificar
su clculo.
b) Mida la absorbancia de la solucin problema preparada a la longitud de onda establecida
antes y ajustando el 0.00 de absorbancia con el blanco.

5. TRATAMIENTO DE DESECHOS
El tratamiento de los desechos de la prctica se realizar con la orientacin del profesor de
laboratorio.
6. CLCULOS Y RESULTADOS
a) Grafique el espectro de absorcin del complejo Fe-(Fenantrolina)3 y determine la de
mxima absorcin.

19

b) Suponiendo un error fotomtrico constante de T = 0.05%, correspondiente al tipo

espectrofotmetro utilizado, construya la curva de error (C/C vs. %T).
c) Teniendo en cuenta el rango de concentraciones donde el error en las mediciones es mnimo,
obtenido en el paso anterior, grafique la curva de calibracin. Aplique mnimos cuadrados y
exprese la ecuacin de la recta de manera correcta.
d) Determine la concentracin de Fe en la muestra de jarabe, expresada en mg de sulfato
ferroso por mL.
e) Con la pendiente de la curva de calibracin y sabiendo que el camino ptico fue de 1 cm,
calcule la absortividad molar del complejo Fe-1,10 fenantrolina.
7. PREGUNTAS
Suponiendo un error fotomtrico del 1%, demuestre matemticamente que el error en la
medicin de la transmitancia es mnimo cuando el valor es alrededor del 37%.
8. BIBLIOGRAFA
RUBINSON, K. y RUBINSON, J. Anlisis Instrumental. Madrid: Pearson Educacin S.A,
2001.
SKOOG, D.A.; HOLLER, F.J. y CROUCH, S.R. Principios de Anlisis Instrumental.
6ed.Mexico: McGraw-Hill, 2008.
STROBELl, H. y HEINEMAN, W. Chemical Instrumentation : A Systematic Approach. 3 ed.
New York :John Wiley & Sons ,1989.
WILLARD, H.; MERRIT, L.; DEAN, J. y SETLE, F. Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Mxico : Grupo Editorial Iberoamrica S.A., 1991.
HARRIS, D.C. Anlisis qumico cuantitativo. 6ed. Barcelona: Reverte SA, 2007.
MILLER, J Y MILLER, J. Estadstica y quimiometra para qumica analtica. 4ed. Madrid:
Pearson educacin, SA, 2002.
MILLER, J Y MILLER, J. Estadstica y quimiometra para qumica analtica. 4ed. Madrid:
Pearson educacin, SA, 2002.
Normas de seguridad tomadas de "International Chemical Safety Cards" (ICSC) o Fichas
Internacionales
de
Seguridad
Qumica
(FISQ).
http://www.mtas.es/insht/ipcsnspn/Introducci.htm

20

NORMA:
LAI -001

UNIVERSIDAD DEL VALLE

DEPARTAMENTO DE QUMICA
LABORATORIO DE ANLISIS
INSTRUMENTAL

VERSIN:
02

FECHA DE REVISIN:
2013

DEMANDA QUMICA DE OXGENO (DQO) EN UNA MUESTRA DE AGUA.

DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA
ELABORADO POR:

REVISADO POR:

APROBADO POR:

Norberto Bentez, Ferney Gonzlez y

Fernando Barona

Norberto Bentez y Humberto Espinal

Departamento de Qumica

1. OBJETIVOS

Determinar la DQO en una muestra de agua residual.

Afianzar los conceptos adquiridos sobre espectrofotometra.

Adquirir destreza en la utilizacin del espectrofotmetro en el rango visible.

2. INTRODUCCIN
La demanda qumica de oxgeno (DQO) es una estimacin de la materia oxidable presente en el
agua, se define como la equivalencia en oxgeno del contenido de materia en una muestra que es
susceptible a ser oxidada mediante un oxidante qumico potente. Se expresa como mg O2/L, que
corresponde a la masa de oxgeno consumida por cada litro de la muestra.
La DQO puede determinarse mediante el calentamiento de la muestra en presencia de un
oxidante fuerte como el Cr2O72- o MnO4- en medio cido. Mediante este tratamiento se lleva a
cabo la oxidacin de la materia tanto orgnica como inorgnica, sin embargo, en la mayora de
los casos los componentes orgnicos predominan y son los de mayor inters.
La determinacin de DQO con Cr2O72- se lleva a cabo calentando a reflujo la muestra con un
exceso conocido de K2Cr2O7 y H2SO4 durante dos horas. La materia reductora en la muestra se
oxida ocasionando la formacin de Cr3+, como se muestra en la siguiente ecuacin:

En ocasiones suelen emplearse algunos compuestos aparte de los ya mencionados, para mejorar
la eficiencia del mtodo, este es el caso de Ag2SO4 que acta como catalizador para la oxidacin
de cidos y alcoholes de cadena recta y HgSO4, que acta eliminando los iones Cl-, que son
fcilmente oxidados por el dicromato como se muestra en la siguiente ecuacin:

21

Una vez concluida la digestin se puede determinar el contenido de Cr3+ por valoracin o a
travs de mediciones colorimtricas, para el ltimo mtodo, se construye una curva de
calibracin de soluciones patrn de una sustancia reductora con DQO conocido, como ftalato
cido de potasio.

3. MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales
Placa digestora mltiple de DQO
Espectrofotmetro en rango visible
Matraz volumtrico de 25.00 mL (3), 50.00 mL (1)
Pipeta volumtrica de 5.00 mL (2), 3.00 mL (2)
Vaso de precipitados de 100 mL (4)
Bureta de 10 mL (1)
Bureta de 25 mL (1)

Frasco lavador (1)

Goteros (2)
Vidrio reloj o pesasales (1)
Esptula pequea (1)
Reactivos
Ftalato cido de potasio
cido sulfrico
Dicromato de potasio

4. PROCEDIMIENTO
4.1 PREPARACIN DE SOLUCIONES
4.1.1 Solucin catalizadora
En un vaso de precipitados de 100 mL prepare 40 mL de Ag2SO4 32 mM en cido sulfrico y
transvase a bureta.
4.1.2 Solucin digestora
Prepare 30 mL de una solucin que contenga K2Cr2O7 3.5 mM y HgSO4 0.11 M, para ello pese
las cantidades necesarias de K2Cr2O7 y HgSO4 en un vaso de 100 mL, adicione cuidadosamente
25 mL de agua destilada y 5 mL de H2SO4 concentrado, homogenice con una varilla de
agitacin, deje enfriar y transvase a bureta.
4.1.3 Solucin estndar de ftalato cido de potasio (KC 8H5O4)
Prepare 100.00 mL de una solucin acuosa de KC8 H5O4 4.2 mM. Recuerde que el ftalato cido
de potasio debe ser previamente secado (1 hora, 105 C).
4.1.4 Curva de calibracin
Partiendo de la solucin anterior y agua destilada prepare, en matraces de 25.00 mL, una curva
de calibracin con mnimo 6 puntos entre 80 y 800 mgO2/L teniendo en cuenta la siguiente
relacin:
6
22

4.2 DIGESTIN DE ESTNDARES Y MUESTRA

a) NOTA IMPORTANTE: Evite colocar cintas en los tubos digestores de vidrio (16 x 1 cm),
procure etiquetarlos con marcador y/o en las tapas y cercirese que estas ltimas posean el
respectivo empaque que permita un sellado hermtico. En dichos tubos adicione 1.5 mL de la
solucin digestora (bureta), 3,5 mL de la solucin catalizadora (bureta) y 3.00 mL del estndar
la muestra el blanco (agua destilada).
b) Tape los tubos y agtelos cuidadosamente.
c) Introduzca los tubos en la placa digestora caliente (150 2 oC) y digiera durante 2 horas.
d) Retire los tubos de la placa digestora y deje enfriar durante unos 10 min.
e) Agite manualmente las soluciones para homogenizar con el agua condensada en las paredes
del tubo.
f) Deje en reposo durante 30 min para continuar con el enfriamiento y permitir la sedimentacin
de los slidos suspendidos.
4.3 MEDICIN ESPECTROFOTOMTRICA
a) Si no ha usado un espectrofotmetro, solicitar asesora al instructor
b) Mida la seal a 600 nm de cada una de las soluciones obtenidas despus de la digestin,
ajustando el 0.00 de absorbancia con agua destilada. Realice las mediciones iniciando con el
blanco hasta el estndar de mayor DQO, realice un lavado de la celda con agua destilada entre
cada punto.
c) Para la medicin de las muestras digeridas, lave con agua destilada la celda y realice la
medicin de la absorbancia de manera similar que hizo para los estndares.

6. CLCULOS Y RESULTADOS
a) Haga un grfico de Absorbancia vs. DQO en mg O2/L.
b) Determine la DQO en las muestras.

7. PREGUNTAS
El profesor de laboratorio asignar 2 o 3 preguntas relacionadas con la prctica.

8. BIBLIOGRAFA
23

A.S.T.M. Standard Test Methods for Chemical Oxygen Demand (Dichromate Oxygen Demand)
of Water Standards. 2006. D1252 06.
MILLER, J Y MILLER, J. Estadstica y quimiometra para qumica analtica. 4ed. Madrid:
Pearson educacin, SA, 2002.
file:///F:/Para%20las%20introducciones/DQO.htm
http://books.google.com.co/books?id=30etGjzPXywC&pg=PA32&dq=DQO+%2B+tratamiento
+de+aguas+residualaes&hl=es&sa=X&ei=9tZwT53hE8Pq2QXwwMXxAQ&ved=0CC8Q6AE
wAA#v=onepage&q=DQO%20%2B%20tratamiento%20de%20aguas%20residualaes&f=false

24

UNIVERSIDAD DEL VALLE

DEPARTAMENTO DE QUMICA
LABORATORIO DE ANLISIS
INSTRUMENTAL

NORMA:
LAI -006

VERSIN:
02

FECHA DE REVISIN:
2013

DETERMINACIN DE ETANOL EN UNA BEBIDA

ALCOHLICA POR REFRACTOMETRA
ELABORADO POR:

REVISADO POR:

APROBADO POR:

Norberto Bentez, Ferney Gonzlez y

Fernando Barona

Norberto Bentez y Humberto Espinal

Departamento de Qumica

1. OBJETIVOS

Fortalecer los conceptos y bases tericas del fenmeno de refraccin.

Establecer la utilidad de la medicin del ndice de refraccin de una sustancia como

instrumento de anlisis cualitativo y cuantitativo de la misma.

Determinar el nivel de alcohol etlico en una bebida alcohlica por refractometra, mediante
una curva regular de calibracin y una curva de adicin de estndar.

Establecer la presencia o ausencia de efectos de matriz en la determinacin con la curva

regular de calibracin.

2. INTRODUCCIN
La refraccin es el cambio en la direccin de propagacin de la luz cuando sta pasa de un
medio a otro, como se muestra en la Figura 1:

Figura1. Refraccin de la radiacin.

El ngulo de incidencia (1) est relacionado con el ngulo de refraccin ( 2) a travs de la Ley
de Snell:
sen1 2 1

sen 2 1 2

25

Donde 1 y 2 corresponden a la velocidad de la luz en el medio 1 y el medio 2,

respectivamente, y 1 y 2 los ndices de refraccin en ambos medios.
El ndice de refraccin de un medio determinado es la relacin entre la velocidad de la luz en el
vaco (c) y la velocidad de la luz en el medio ():

Al realizar la medida de los ngulos en el vaco y considerando que el ndice de refraccin del
vaco es 1, se tiene:
sen1 vac
2 vac
sen 2
Donde (2)vac corresponde al ndice de refraccin del medio 2 respecto al vaco, en trminos
prcticos el ndice de refraccin se mide respecto al aire.
Al establecer un ngulo de incidencia de 90 (del haz de luz) se puede hacer en forma directa la
medicin del ndice de refraccin del medio 2 (sen 1 = 1) simplemente midiendo el ngulo del
rayo refractado.
es funcin de la temperatura del material y de la longitud de onda de la luz, generalmente se
mide a 20C y con = 589.3 nm (lnea D de sodio).
El ndice de refraccin de una solucin acuosa de etanol es directamente proporcional a la
concentracin de ste. Dicha proporcionalidad es analticamente til para determinar la cantidad
de etanol presente en una muestra acuosa.

3. MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales
Refractmetro (1)
Matraz volumtrico de 25.00 mL (13)
Pipeta volumtricas de 0.50 mL (1), 1.00 mL (1), 2.00 mL (1), 3.00
mL (1), 4.00 mL (1), 5.00 mL (1), 10.00 mL (1) y 15.00 mL (1)

Picnmetro (1)
Gotero (1)
Reactivos
Alcohol etlico estndar

4. PROCEDIMIENTO
4.1 CURVA DE CALIBRACIN POR PATRN EXTERNO
a) Registre la pureza del alcohol etlico estndar y mida su densidad.
b) En 6 matraces de 25.00 mL prepare soluciones de etanol estndar entre 1.0 y 15.0 % (p/v)
enrasando con agua destilada. Considere para estos clculos un 96% de pureza y una
densidad de 0.8 g/mL. NOTA IMPORTANTE: Para el informe esta pureza y densidad
deben afinarse, tem a).

26

4.2 PREPARACIN DE LA MUESTRA

a) Si hay alto contenido de gas en la muestra desgasifique una porcin suficiente mediante
agitacin (con ultrasonido o agitador magntico) para el desarrollo de toda la prctica.
b) Segn el contenido de etanol que reporta la muestra problema, tome la alcuota pertinente
para preparar 25.00 mL de una solucin cuya concentracin est cercana al centroide de la
curva de calibracin.
4.3 CURVA DE ADICIN ESTNDAR
Segn la etiqueta de la muestra problema, adicione la alcuota que corresponda (ver tabla) en
cada uno de los 6 matraces de 25.00 mL. Posteriormente, agregue 0.00, 0.50, 1.00, 2.00, 3.00 y
4.00 mL de etanol estndar a cada matraz y enrase con agua destilada.
% etanol (etiqueta)
Cantidad (mL)

~ 40
2

~ 30
3

~ 10
10

~5
15

4.4. MEDICIN DEL NDICE DE REFRACCIN

Por triplicado y alternndose la lectura con los miembros de su grupo, mida el ndice de
refraccin de cada una de las soluciones preparadas y del agua destilada. La medicin no se
debe limitar a la simple observacin de la escala, cada estudiante tiene que ubicar la imagen y
registrar su lectura.

5. TRATAMIENTO DE DESECHOS
El tratamiento de los desechos de la prctica se realizar con la orientacin del profesor de
laboratorio.
6. CLCULOS Y RESULTADOS
a) Segn la dilucin realizada, la densidad experimental y la pureza del etanol estndar, calcule
la concentracin de etanol (% p/v o g/mL) de cada solucin patrn y elabore en la misma
grfica las curvas de calibracin (ndice de refraccin promedio vs. concentracin), tanto la
de patrn externo como la de adicin de estndar, mostrando para cada punto las barras de
error.
Nota: Incluya el punto obtenido para el agua destilada en la curva regular de calibracin y
ubique el eje de la abscisa en este valor.
b) Exprese de manera correcta las ecuaciones que definen cada recta mediante el mtodo de
mnimos cuadrados.
c) Determine la concentracin de etanol en la muestra problema (% p/v) a travs de cada
mtodo de calibracin. Tenga en cuenta que al intercepto de la curva de adicin de estndar
debe restarle el ndice de refraccin del agua antes de hacer la extrapolacin.
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d) Determine estadsticamente si existe evidencia de efectos de matriz.

e) Calcule el LDC (lmite de cuantificacin) del mtodo.

7. PREGUNTAS

8. BIBLIOGRAFA
RUBINSON, K. y RUBINSON, J. Anlisis Instrumental. Madrid: Pearson Educacin S.A,
2001.
SKOOG, D.A.; HOLLER, F.J. y CROUCH, S.R. Principios de Anlisis Instrumental.
6ed.Mexico: McGraw-Hill, 2008.
STROBELl, H. y HEINEMAN, W. Chemical Instrumentation : A Systematic Approach. 3 ed.
New York :John Wiley & Sons ,1989.
WILLARD, H.; MERRIT, L.; DEAN, J. y SETLE, F. Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Mxico : Grupo Editorial Iberoamrica S.A., 1991.
HARRIS, D.C. Anlisis qumico cuantitativo. 6ed. Barcelona: Reverte SA, 2007.
MILLER, J Y MILLER, J. Estadstica y quimiometra para qumica analtica. 4ed. Madrid:
Pearson educacin, SA, 2002.
SERWAY, A; JEWETT, J. Fsica; 6 ed. Mxico: Thomson Learning; 1995; V1.
GREEN, M.; NETTEY, H. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 43 (2007)
105110.

28

UNIVERSIDAD DEL VALLE

DEPARTAMENTO DE QUMICA
LABORATORIO DE ANLISIS
INSTRUMENTAL

NORMA:
LAI -007

VERSIN:
02

FECHA DE REVISIN:
2013

DETERMINACIN DE SACAROSA EN AZCAR DE MESA POR POLARIMETRA

ELABORADO POR:

REVISADO POR:

APROBADO POR:

Norberto Bentez, Ferney Gonzlez y

Fernando Barona

Norberto Bentez y Humberto Espinal

Departamento de Qumica

1. OBJETIVOS

Afianzar los conocimientos sobre las propiedades de la luz polarizada y su interaccin sobre
algunas sustancias.

Determinar la rotacin especfica de la sacarosa mediante una curva estndar.

Medir el porcentaje de sacarosa en una muestra de azcar impuro.

2. INTRODUCCIN
Las ondas electromagnticas estn compuestas por campos elctricos y magnticos que oscilan
perpendicularmente entre s, en un nmero infinito de planos en la direccin de propagacin. Sin
embargo, cuando la radiacin atraviesa ciertos materiales, sus ciclos de oscilacin quedan
restringidos a un solo plano; las substancias pticamente activas poseen la capacidad de rotar el
plano de la luz polarizada gracias a que son disimtricas. La sacarosa, especficamente el
enantimero (+), desempea funciones vitales en los sistemas biolgicos, y la rotacin del plano
de la luz polarizada () es directamente proporcional a la concentracin en solucin (C) y al
camino ptico (b):
A determinada temperatura (t) y longitud de onda () se tiene la constante de proporcionalidad
denominada rotacin especfica, la cual es una caracterstica nica de la sustancia:
El polarmetro es ampliamente empleado como un sacarmetro en el anlisis del azcar. La
mayora de las muestras de azcar sin refinar contienen otras sustancias pticamente activas
aparte de la sacarosa, cuando se calienta la sacarosa con cido o con una enzima invertasa, es
invertida para formar una molcula de glucosa y otra de fructuosa. La rotacin especfica de la
sacarosa medida a 20 C y a 589.3 nm (lnea D del sodio) es de -66.5, al hidrolizarse en medio
cido, por ejemplo, produce cantidades equivalentes de glucosa y fructuosa con una inversin
del ngulo de rotacin. Como la fructuosa posee una rotacin especfica de -93.0 y la glucosa
de +52.5, la rotacin especfica de la sacarosa hidrolizada vara de 66.5 a (-93.0 +52.5) / 2 = 20.2oC en la inversin.

29

3. MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales
Polarmetro (1)
Vaso de precipitados de 50 mL (7)
Matraz volumtrico de 25.00 mL (7)
Varilla de agitacin (1)

Esptula (1)
Frasco lavador (1)
Reactivos
Sacarosa estndar

4. PROCEDIMIENTO
4.1 CURVA DE CALIBRACIN POR PATRON EXTERNO
En matraces de 25.00 mL prepare 6 soluciones de sacarosa estndar en agua destilada, entre 4.0
y 20.0% (p/v). Cada masa tomada del estndar djela en los vasos de precipitados y disuelva
justo antes de realizar cada lectura (enrase con agua de lavado del vaso) con el fin de evitar
que el analito se hidrolice.
4.2 PREPARACIN DE LA MUESTRA
Segn el contenido de sacarosa que reporta la muestra de azcar blanca, tome la alcuota
pertinente para preparar 25.00 mL de una solucin cuya concentracin est cercana al centroide
de la curva de calibracin.
4.3 MEDICIN DEL NGULO DE ROTACIN
a) Antes de usar el equipo calbrelo llenando el tubo de 200 mm con agua destilada y cercirese
que la lectura sea cero.
b) Por triplicado y alternndose la lectura con los miembros de su grupo, mida los grados de
rotacin de cada una de las soluciones preparadas y del agua destilada. Para tal efecto, purgue
la celda polarimtrica con la solucin que va a contener, descarte esta solucin de purga y
llene la celda.
La medicin no se debe limitar a la simple observacin de la escala, cada estudiante tiene que
ubicar la imagen y registrar su lectura.

5. TRATAMIENTO DE DESECHOS
El tratamiento de los desechos de la prctica se realizar con la orientacin del profesor de
laboratorio.

6. CLCULOS Y RESULTADOS
a) Segn la masa y la pureza de la sacarosa estndar, calcule la concentracin de sacarosa (%
p/v) de cada solucin patrn y elabore la curva de calibracin (rotacin observada promedio

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vs. concentracin), mostrando para cada punto las barras de error. Exprese de manera
correcta la ecuacin que define la recta.
b) Determine el porcentaje de sacarosa en la muestra.
c) Utilice la ecuacin de la recta para obtener la rotacin especfica de la sacarosa ([]) y
comprela con el valor reportado en la literatura.
d) Calcule el lmite de cuantificacin (LDC) del mtodo.

7. PREGUNTAS
a) En el artculo referenciado al final de la bibliografa se hace un estudio de los perfiles de
estabilidad y actividad luego de la hidrlisis de la sacarosa mediante dos mtodos: un ensayo
enzimtico y un procedimiento directo polarimtrico. Describa cmo se utiliza la
polarimetra para hacer el seguimiento de la actividad de la sacarasa (invertasa) sobre la
sacarosa. Cul cree usted es la importancia que puede tener este mtodo en el control del
trastorno denominado Malabsorcin Congnita de Sacarosa?

8. BIBLIOGRAFA
RUBINSON, K. y RUBINSON, J. Anlisis Instrumental. Madrid: Pearson Educacin S.A,
2001.
SKOOG, D.A.; HOLLER, F.J. y CROUCH, S.R. Principios de Anlisis Instrumental.
6ed.Mexico: McGraw-Hill, 2008.
STROBELl, H. y HEINEMAN, W. Chemical Instrumentation: A Systematic Approach. 3 ed.
New York :John Wiley & Sons ,1989.
WILLARD, H.; MERRIT, L.; DEAN, J. y SETLE, F. Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Mxico : Grupo Editorial Iberoamrica S.A., 1991.
HARRIS, D.C. Anlisis qumico cuantitativo . 6ed. Barcelona: Reverte SA, 2007.
MILLER, J Y MILLER, J. Estadstica y quimiometra para qumica analtica. 4ed. Madrid:
Pearson educacin, SA, 2002.

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