SUPUESTO PRCTICO

MARIAN LVAREZ GONZLVEZ

Las marcas ms importantes del mercado en IC son Dionex y

Metrohm. La diferencia entre ambos radica en el tipo de
supresor qumico que utilizan.
Los cationes que se determinan habitualmente con esta
tcnica instrumental son: Mg+2, Ca+2, Fe2+, Fe3+, K+, Na+, y
tambin: Ba2+, Be2+; Cr3+, Cu+, Cu2+, H+, Pb2+ , Pb4+, , Li+, Mn2+
, Hg2+, , Sr2+ , Sn2+ , Sn4+ , Zn2+.
En cuanto a aniones: Cl- ,F-,I-,S2-,N3-, N-3, CO23, ClO3,CrO24,
Cr2O27, H2PO4, HCO3, HSO4, HSO3, OH, ClO, HPO24, NO3, NO2,
ClO4, MnO4, O22, PO34, SO24, SO23, O2, S2O23, SiO4-4, SiO2-3,
AlSiO-4.
Calibracin del cromatgrafo:

En primer lugar, prepararemos las disoluciones que contengan

distintas concentraciones de los analitos deseados. Esto se hace
preparando en primer lugar una disolucin madre con una
concentracin mayor del analito o analitos a partir de la cual se
prepararn el resto de disoluciones por dilucin.
Por ejemplo, para la preparacin disolucin madre ( )103 ppm de
analito/s:
1) Pesar X1000-4g
perfectamente limpio.

de

analito/s

en

un

matraz

de

50mL,

2) Enrasar hasta 50mL con agua ultrapura Tipo 1.

3) Tapar con parafilm y agitar para disolver.

En segundo lugar, se preparar por dilucin las disoluciones que

van a formar nuestra recta de calibrado. Por ejemplo:
Punto de
la recta

Patrn
(ppm)

Volumen a tomar de
la disolucin madre
(mL)

Diluir
hasta
(mL)

250

2,5

100

150

1,5

100

0,50

100

1
3
4
5
6
7

300

200

2,0

100

1,0

50
25

Tabla #1

0,25

100

100

100
100

Volmenes necesarios para preparar la recta de calibrado

Tras la preparacin de los patrones que forman nuestra recta de

calibrado, estos se introducen dentro del cromatgrafo y se
analizan.
A continuacin, se procede al calibrado del equipo, (Metrohm):

1) Una vez finalizado el anlisis de todos los patrones, se ha de

comprobar que todos los picos estn correctamente integrados e
identificados. Se eliminar aquellos picos que hayan sido
detectados y que no pertenezcan a la recta de calibrado
correspondiente.
2) En la pantalla de REPROCESAR, al seleccionar el primero y el
ltimo cromatograma, dentro de una misma recta de calibrado,
se puede comprobar que los tiempos de retencin de los
diferentes analitos se han modificado ligeramente. Es
importante que el tiempo de retencin especfico de cada uno
de los analitos coincida en todos los cromatogramas. Establecer
un tiempo de retencin intermedio para cada analito y pulsar
el botn COMPONENTS, situado en el margen izquierdo y se abrir
una ventana que indique COMPONENT TABLE. En esa ventana,
modificar los tiempos haciendo clic en cada pico y
modificando el valor que aparece en RETENTION TIME. Finalmente,
pulsar OK.
3) Sobre el mismo cromatograma, (el ltimo de todos), donde se han
modificado los tiempos de retencin, se tendrn que modificar
las concentraciones tericas calculadas para cada uno de los
patrones. Para ello, hacer clic en STANDARDS situado en el
margen izquierdo. Hacer doble clic sobre cada uno de los
patrones para poder introducir las nuevas concentraciones
tericas para cada uno de los azcares.
4) Una vez terminado el paso anterior, es necesario reprocesar
todos los cromatogramas con respecto a este ltimo donde se han
modificado los tiempos de retencin y las concentraciones
tericas, con el fin de que todos los cromatogramas tengan los
mismos datos de referencia. De esta forma, pulsar el botn que
indica REPROCESSING y en la ventana que aparece indicar FROM
SELECTED DETERMINATION. Finalmente, pulsar OK.
5) Volver a seleccionar todos los cromatogramas de ambas rectas
de calibrado y reprocesar.
6) Relacionar cada uno de los cromatogramas con cada uno de los
estndares introducidos anteriormente. Para ello, hacer doble
clic sobre el primer cromatograma y en la casilla que indica
SAMPLE TYPE y seleccionar en el desplegable el nmero del
estndar correspondiente, en este caso STANDAR 1. Repetir este
proceso con el resto de cromatogramas.
2

7) Concluido el punto anterior, hacer clic en el ltimo

cromatograma y pulsar REPROCESSING y en la ventana que aparezca
indicar FROM STANDARDS OF REPROCESSING TABLE. Finalmente,
pulsar OK. De esta forma, se han unificado todos los
cromatogramas y se ha creado la recta de calibrado para cada
uno de ellos.
8) Sin salir de la pantalla de REPROCESAR, seleccionar el ltimo
cromatograma y seleccionar CALIBRATION CURVE. En esta ventana,
se podr ver la recta de calibrado para cada analito y ser
necesario verificar la linealidad (coeficiente de correlacin
prximo a la unidad). Si observamos que el coeficiente presenta
mucha variacin, se puede eliminar aquellos puntos que permitan
mejorar la linealidad, siempre y cuando la recta de calibrado
no deje de ser representativa del intervalo de concentraciones
que interesa. Para eliminar algn punto de la recta, hacer
clic sobre l en la tabla y con el botn derecho del ratn
pulsar ON/OF segn interese.
9) Cuando se hayan realizado las modificaciones oportunas de cada
una de las rectas, es necesario reprocesar todos los
cromatogramas con respecto al modificado (el ltimo). Para
ello, pulsar REPROCESSING y en la ventana que aparece
seleccionar FROM SELECTED DETERMINATION. Finalmente, pulsar OK.
10) Sin salir de la pantalla de REPROCESAR, pulsar donde indica
METHOD y guardar el mtodo sobrescribiendo el actual.
Finalmente, pulsar OK en la ventana de REPROCESAR.
11) Para que las modificaciones realizadas en el mtodo se
apliquen, es necesario hacer clic sobre STOP HARDWARE y
posteriormente START HARDWARE. A partir de ese momento las
siguientes muestras se analizarn con la nueva calibracin.

El agua a utilizar para la preparacin de la recta de

calibrado ha de ser de Tipo 1, como ya se ha indicado.
El Real Decreto 140/2003 tiene como objetivo establecer
los criterios sanitarios que deben cumplir las aguas de
consumo humano y las instalaciones que permiten su
suministro desde su captacin hasta el grifo del
consumidor, adems del control de stas, garantizando su
salubridad, calidad y limpieza, con el fin de proteger la
salud de las personas de los efectos adversos provocados
por una contaminacin de las aguas.
3

A efectos de esta disposicin se entender por agua de

consumo humano:

Todas aquellas aguas, ya sea en su estado original, ya sea

despus del tratamiento, utilizadas para beber, cocinar,
preparar alimentos, higiene personal y para otros usos
domsticos, sea cual sea su origen e independientemente de
que se suministren al consumidor, a travs de redes de
distribucin pblicas o privadas, de cisternas, de depsitos
pblicos o privados.
Anlisis de control de potabilidad de grifo consumidor (Segn
Real Decreto 140/2003).

Anlisis de control de potabilidad de la salida ETAP, del

depsito y de la red de distribucin (Segn Real Decreto
140/2003).
Anlisis de control de potabilidad en Industria Alimentaria
(Segn Real Decreto 140/2003).

Anlisis de control de potabilidad completa (Segn Real

Decreto 140/2003).
Otra Normativa:

O.
Reglamentacin
embotelladores de
11/6/1949).

del
aguas

trabajo
en
establecimientos
minerales naturales. (B.O.E.

O. Ordenanza de Trabajo para las industrias de captacin,

elevacin, conduccin, tratamiento y distribucin de aguas.
(B.O.E. 23/2/1972).
D. Garanta sanitaria de las aguas destinadas a consumo
humano. (B.O.E. 1/6/1981).
D. Reglamentacin tcnico-sanitaria
(B.O.E. 24/6/1981).

de

aguas

envasadas.

R.D. Reglamentacin tcnico-sanitaria para la elaboracin,

circulacin y comercio de aguas de bebida envasadas. (B.O.E.
21/9/1981).
O. de 27 -7-83 Por la que se aprueban los mtodos oficiales
de anlisis microbiolgicos de aguas potables de consumo
pblico. (B.O.E. 13/8/1983).

R. Aditivos y coadyuvantes tecnolgicos autorizados para

tratamiento de las aguas potables de consumo pblico. (B.O.E.
9/5/1984).
Ley 29/1985 de 2 de agosto de Aguas. (B.O.E. 8/8/1985).

Real Decreto 849/1986 de 11 de abril, por el que se aprueba

el reglamento del Dominio Pblico Hidrulico, que desarrolla
los ttulos I,IV,VI, y VII de la Ley 29/1985 de Aguas. O. De
1-7-87 por la que se aprueban los mtodos oficiales de
anlisis fsico-qumicos para aguas potables de consumo
pblico. (B.O.E. 9/7/1987, 17/9/1987).

O. Regula las empresas colaboradoras en materia de control

de vertidos de aguas residuales. (B.O.E. 4/8/1987).
O. De 8-2-88 relativa a los mtodos de medicin y frecuencia
de muestreos y anlisis de aguas superficiales que se
destinen a la produccin de agua potable. (B.O.E. 2/3/1988).
O. 11-5-88 , sobre caractersticas bsicas de calidad que
deben se mantenidas en las corrientes de aguas superficiales
cuando sean destinadas a la produccin de agua potable.
(B.O.E. 20/5/1988, 23/10/1990).
Real Decreto 927/1988 de 29 de julio, por el que se aprueba
el Reglamento de la Administracin Pblica del Agua y de la
Planificacin Hidrolgica, en desarrollo de los Ttulos II
y III de la Ley 29/1985 de aguas.

R.D. 1138/1990 de 14 de septiembre, por la que se aprueba la

Reglamentacin Tcnico-Sanitaria para el abastecimiento y
control de calidad de las aguas potables de consumo pblico.
(B.O.E. 20/9/1990, 24/11/1990).

A continuacin se muestran varias Metrohm application

notes:

Imagen #1
Buscador de aplicaciones

Imagen #2

Aplicaciones encontradas

Determinacin con Supresin qumica Vs Determinacin

Sin supresin qumica:

CROMATOGRAFIA IONICA SIN SUPRESION

Caracteristicas:

Medida de la diferercia entre la conductividad del ion de

la muestra y el ion del eluyente
Conductividad de fondo alta

Amplia gama de eluyentes a elegir

Utilizado para cationes, acidos organicos, hidratos de

carbono y aplicaciones especiales de aniones:
-Analisis sencillos de aniones

-Analisis de aniones en matrices muy dificiles

-Analisis de
silicatos,

aniones

de

acidos

debiles

(cianuros,

boratos, sulfuros, arsenito,...)

-Se trabaja con sistemas MONO-COLUMNA

-Se usan INTERCAMBIADORES IONICOS de BAJA CAPACIDAD.

CROMATOGRAFIA IONICA CON SUPRESION
Caracteristicas

La supresion qumica reduce la conductividad de fondo

Supresion: intercambio los contraiones de la muestra y el
eluyente
Eluyentes que proporcionan H2O 6 una especie no disociada
al reaccionar en el supresor

La conductividad de fondo despues de la supresion es

proxima a 0
Medida de la suma de la conductividad del ion de la muestra
y el contraion
Mejora los Ifmites de deteccion para la mayoria de
especies anionicas Utilizada para aniones organicos e
inorganicos

-Se reduce la conductividad del ELUYENTE en una reaccion

POST-COLUMNA
-Se sustituyen los CONTRAIONES del eluyente dando H2O u
otra especie poco disociada, por lo que se reduce la
conductividad de fondo.