9.

MEMBRANAS BIOLGICAS
INTRODUCCIN
Hay diferentes manera de transportar las molculas a travs de la membrana:
1. Se puede atravesar la bicapa lipdica por difusin simple (con una cintica lineal).
2. O bien por difusin facilitada y transporte activo (en este caso con una cintica
saturable).
3. En otros casos las molculas que se transportan se pueden modificar o no a la vez que
se transportan a travs de la membrana (por ejemplo fosforilar la glucosa).
4. Y tambin tenemos transportes discontinuos, donde se permite el paso de compuestos
encapsulados o no.
Diferencias entre los transportes de 1 y 2:

Difusin simple (transporte pasivo sin protena) Cintica lineal

Difusin facilitada (transporte pasivo con protena) Cintica saturante
Transporte activo Cintica saturante

TRANSPORTE

ACTIVO Y PASIVO

Decimos que es un transporte pasivo porque el transporte se da en la direccin

termodinmica (a favor del gradiente) y por tanto no se va a necesitar el uso de energa para
mover las molculas, de ah el nombre de difusin.
En cuanto al transporte activo tenemos dos tipos, que depende de donde consigan la energa
para llevar a cabo el transporte:

Primario: donde la energa la suministra el propio transportador por hidrlisis de

nucletidos (90% ATP).
o Dentro de las ATPasas cada una funcionar de diferentes maneras.
Secundario: emplea como energa un gradiente de iones previamente creado por
alguno de los transportes primarios.

Los transportadores
irreversibilidad.

tendrn

diferentes

afinidades

otorgarn

direccionalidad

Tipos de transporte
Desde el punto de vista de cuantas cosas transportemos tenemos:

Uniporte: una sola molcula en un sentido.

Simporte: Se transportan varias molculas en la misma direccin.
Antiporter: Transportamos simultneamente varias cosas en direcciones opuestas.

MEMBRANAS BIOLGICAS

Los componentes de las membranas son:

Lpidos
Protenas
Glico-conjugados (glicolpidos y glicoprotenas)
1

Esto genera un mosaico fluido, lo que indica que en una matriz lipdica las partes polares
estn en contacto con componentes acuosos. Tanto los lpidos como las protenas de la parte
extracelular pueden estar glicosilados, lo que permitir la interaccin con otras protenas. Las
protenas pueden ser integrales (intrsecas) o perifricas (extrnsecas). Las intrnsecas no
tienen por qu atravesar toda la membrana,

PARADIGMA

DE LA ESTRUCTURA DE LAS MEMBRANAS

Las molculas anfiflicas se ensamblan espontneamente en las membranas a causa

del efecto hidrofbico, que impide que las zonas hidrfobas estn en contacto con la
membrana.
El modelo de mosaico fluido describe la estructura de la membrana.
Las membranas biolgicas tienen dominios laterales que forman rafts balsas lipdicas.
o En los rafts la movilidad se ve reducida y las protenas que estn dentro estn
modificadas.
Los complejos proteicos dinmicos se aglutinan en el interior de la membrana y se
extienden a sus bordes.

DIFERENTES

MEMBRANAS

El hecho de generar una bicapa o

una estructura cerrada depender
de la interaccin con el agua.
Adems, en estructuras con dos
bicapas
(Gramo
mitocondrias/cloroplastos)
observaremos que cada una de las
membranas ser de diferente
composicin, y afectar de manera
diferente en la permeabilidad.

POLIMORFISMOS EN LAS FASES LIPDICAS

Como vemos en la imagen tenemos diferentes disposiciones:

Hexagonal con la zona apolar hacia dentro. (H I)

Hexagonal con la zona apolar hacia fuera (como formando tubos por los que dentro
circula el agua u otro lquido). (HII)
Una estructura lamelar. (Bicapas) (LM)
Cbicas, tambin una normal y otra invertida.

Lo preferido y ms generalizado para la bicapa lipdica es la estructura lamelar. Las otras dos
tambin se darn de manera transitoria en puntos especficos de la membrana y de manera
regulada. Es decir, pese a que no sean las estructuras ms notables, es importante
estudiarlas.
2

Amarillo = apolar // Azul = polar

H1= normal, las colas hidrocarbonadas hacia el interior como una tubera micelar, el agua va
por fuera.
H2 = invertida, en este caso el agua va por dentro del tubo, mientras que las colas
hidrocarbonadas se encuentran hacia fuera.

ESTRUCTURA

Componentes (pueden o no
estar glicosilados, si lo estn
ser hacia la cara externa).
o Lpidos
(fosfatidilinositoles, son
los
lpidos
menos
importantes)
o Protenas
Distribucin asimtrica de los
lpidos
Variedad en la interaccin con
protenas

La distribucin depender de la
membrana que estemos estudiando.
Como vemos en la anterior imagen la distribucin depende entre diferentes especies, pero
dentro de un organismo tambin variar la composicin segn las necesidades y funciones de
la clula. Los lpidos ms comunes son la fosfatidilcolina (PC) y la fosfatidiletanolamina (PE).

MODELO DE MOSAICO
FLUIDO
Han
diversos

existido
modelos

de

distribucin
de
membranas. En todos ellos tenemos una
exactamente como

interaccin protena-lpido, aunque no se sabe

eran. No fue hasta cuando mediante anlisis
por criofractura, Singer y Nicolson observaron
que las protenas (algunas) estaban embebidas
entre la bicapa lipdica. De este modo los
lpidos y protenas podran moverse libremente
por la bicapa. Sin embargo, observamos que
todas las membranas no son completamente fluidas, sino que hay elementos ms o menos
estticos como balsas o complejos proteicos que no son completamente fluidos.

DISTRIBUCIN

ASIMTRICA DE LPIDOS EN LA
DE ERITROCITOS RBC

MP

Hay una distribucin asimtrica de lpidos en todas las

clulas. La distribucin de la izquierda corresponde
exclusivamente a la de los eritrocitos.
Como vemos en la membrana interna tenemos una mayor
cantidad de lpidos cargados que facilitan la interaccin de
protenas citoplasmticas para favorecer su funcin, como
la de las kinasas que
aunque son citoplasmticas
necesitan asociarse a la
membrana para activarse.
En las membranas externas
tendremos,
por
tanto,
lpidos sin carga, que
resultarn ms neutros a la
hora de interaccionar con
protenas.
Todas
las
membranas
estarn en un equilibrio
ente el estado gel y el
estado fluido. Tambin depender de la composicin de la
membrana, de la funcin, las necesidades
Lo que ms influir para estar en un estado u otro sern los cidos grasos, mientras que las
cabezas polares afectarn poco al estado. Los cidos grasos con dobles enlaces favorecern
el estado gel (favorecen la permeabilidad), debido a que la distancia entre las cabezas es
mayor y la longitud de las cadenas alifticas disminuye.
La membrana no busca estar muy fluida, sino estar en un estado intermedio para poder
reaccionar en un sentido u en otro. Es por eso que la clula regula la composicin de la
membrana para mantenerse en ese equilibrio entre gel y fluido. //En E. coli se observa que
cuanto ms aumentamos la temperatura de crecimiento, mayor es la cantidad de cidos
grasos saturados. Esto se observa a la hora de hacer DSC y analizar como varan los estados
4

de transicin de los lpidos. Conforme mayor es la cadena aliftica, mayor es la temperatura

de transicin de fase.

MOVIMIENTOS
En la imagen podemos ver como
se dan movimientos de lpidos
desde la capa interna, lugar en el
que se forman, hacia la capa
externa. Este movimiento est
dado por flipasas ya que si no
podran tardar horas.
Hemos dicho que el movimiento
que provoca que los cidos grasos
de la capa interna pasen a la
externa es generado por las
flipasas.
Mientras
que
los
movimientos contrarios, los que
intercambio FA de la capa externa
a la interna es realizado por las
flopasas. Dentro de la bicapa
tambin hay otros movimientos
como los de rotacin. Estos
movimientos son catalizados de
manera especfica y con gasto
energtico
por
ser
contra
gradiente.
Luego tenemos otras enzimas, las
scramblasas, que lo hacen de
manera inespecfica (mueven lpidos en cualquiera de las dos direcciones para mantener el
equilibrio). Si una membrana solo tuviera scramblasas,
tericamente la membrana tendra la misma
composicin interna y externa.

LIPID DROPLET
Sopn
agregados
de liquidos
apolares
como TAG,
esteroles o
AG, que
estn
rodeados
por una
monocapa
de
fosfolpidos.
Los lpidos
apolares
tienen poca
afinidad por
el agua, y
esa es la
razn por la
que se tienen que rodear de una monocapa, para
poder atravesar el citosol de la clula.
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FRAP
Ver como se desplazan los lpidos a travs de la membrana se puede ver mediante la tcnica
FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching)
Lo que se hace es marcar el lpido con una fluorescencia, para despus quemar esa
fluorescencia mediante un rayo de luz muy potente (se eliminan los dobles enlaces que
generan la fluorescencia con un lser de alta intensidad), o esa luz a poca intensidad durante
mucho tiempo. Si los lpidos no se movieran de su sitio el agujero sin fluorescencia provocado
debera mantenerse, pero lo que observamos es que van apareciendo puntos de fluorescencia
a lo largo del tiempo, lo que explica que los lpidos mediante movimientos de rotacin y otros
movimientos se desplazan por la membrana, no son inmviles. A partir de estas tcnicas
podemos obtener la tasa de recuperacin con la que se reestablece la fluorescencia; y t(1/2),
que es el tiempo necesario para reestablecer el 50% de la fluorescencia final. El t de
protenas suele ser mayor wue la de lpidos ya que estas primeras suelen estar ancladas a
protenas del citoesqueleto, por lo que es difcil que haya movilidad. Con esta medida
asignaremos a las molculas
coeficientes de difusin.
Con otras tcnicas (la imagen de
derecha) se puede visualizar la
trayectoria de los lpidos, adems
difusin.
Se
marca
una
nanopartcula de oro con una
fluorescente y se observa el
movimeinto de la partcula. Con el
se observa que el movimeinto de
partcula puede ser al azar, o
quedarse estacionaria en un
indicando que esta molcula se ha
anclada o interaccionando con
componente de la membrana.

la
de

su

molcula

T1/2

tiempo,
la
puede
punto,
quedao
algn

Es el componente lipdico el que otorga la regeneracin de la membrana. En un medio

hipotnico entra agua y la clula se hincha, mientras que en un hipertnico se escapa el agua
y la membrana se deforma, estas deformaciones se denominan espculos.

Los eritrocitos pueden adaptarse para pasar por tubos estrechos. En ese caso vemos
que pierden el contacto en el extremo. No hay contacto con el citoesqueleto.

Luego hay protenas de membrana que tienen una movilidad reducida debido a que tienen
una interaccin especfica con el citoesqueleto.
En vez de ver como se mueve un lpido, podemos mediante el empleo de una pinzas pticas o
magnticas (radiacin con luz lser), medir cuanto
nos cuesta mover la molcula (el lpido), observando
su movilidad.

Para medir con las pinzas pticas tenemos que

aadirle al lpido una molcula que interacte
con la luz.
Mientras que si empleamos unas magnticas,
tiene que ser una molcula que interacte con
el campo magntico. Como consecuencia,
pueden darse movimientos al azar (D), puede
moverse interaccionando con componentes de
membrana (C), puede moverse segn t le
indiques (B) o puede quedarse contenida en el citoesqueleto (A).

Como ya hemos comentado, podemos ver las trayectorias de algunos lpidos en la membrana,
para eso tenemos que hacer un marcaje por molcula nica, fijndonos as de manera
individual. Un problema que podemos observar con esta tcnica es que si el fluorforo es muy
grande puede afectar al movimiento del lpido.

UNIONES PROTENA-MEMBRANA
Las uniones de protenas con la
membrana pueden ser con fuerzas
electrostticas en este caso, si subimos
la fuerza inica del medio donde se
encuentran se van a separar. En otro
caso, si por ejemplo se dan enlaces
ms fuertes como con el Ca++,
necesitamos generar otra fuerza. En
otros casos necesitamos enzimas que
rompan el enlace. O bien podemos
emplear
detergentes
si
son
de
membrana.
Podemos ver diferentes protenas de
membrana en la imagen de la derecha.
Las
hay
de
una
sola
cadena
polipeptdica como los tipos I, II (hlices
TM que tienen el amino del carboxilo a un lado u otro de la membrana), III, V y VI, aunque lo
que pasa en el tipo III es que la misma cadena polipeptdica atraviesa varias veces la
7

membrana. En el tipo IV tenemos una protena formada por varias cadenas polipeptdicas que
se unen dentro de la membrana, Y en el tipo V, en lugar de estar anclada dentro de la
membrana se encuentra sujeta por los lpidos (los ms tpicos el cido palmtico y el
mirstico).
Estas protena que vemos es una protena intrnseca de membrana.
La zona que est dentro de la membrana se encuentra formando una
-hlice.
Las -hlices son mucho ms frecuentes que los barriles , estos se
encuentran ms asociados a las protenas bacterianas.
Los puntos que se ven fuera de fosforlizacin o glucosilacin se
emplean para la comunicacin.

GPI
Son glucofosfatidilinositoles, que
presentan uniones a lpidos de
membrana.
Con los miristoiles se produce un
enlace amida, con los palmitoilos
un enlace tioester y con el
farnesilo un enlace tioeter.