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11/08/2015

PROCESOS BIOTECNOLOGICOS II

CURSO 2015
Responsable Prof. Titular G. Pic

AREA PROCESOS BIOTECNOLOGICOS


DEPARTAMENTO DE TECNOLOGA
Responsable del Area Prof. Titular G. Pic
Asignaturas del Area
PROCESOS BIOTECNOLOGICOS I (Prof. Pic)
(4to ao 1er cuatrimestre)
PROCESOS BIOTECNOLOGICOS II (Prof. Pic)
Profs. Adjunto H. Menzella y D. Romanini
(4to ao 2do cuatrimestre)

PROYECTOS BIOTECNOLOGICOS (Prof. D. Romanini)


(5to ao 1er cuatrimestre)
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11/08/2015

ACREDITACION DE LA ASIGNATURA: lograr la condicin de regular


- asistencia obligatoria a las clases tericas,
- asistir y aprobar las tareas de aula y Laboratorios segn reglamento de T.P.
-- aprobar el parcial /o su recuperatorio.

Alumnos que deseen promover totalmente la asignatura:


Rendirn la parte de la Teora, el da que se tome el parcial recuperatorio.
No podrn promover aquellos alumnos que deban recuperar el parcial.

ESTOS ALUMNOS DEBERN REDIR EXAMEN FINAL EN LOS TURNOS


CORRESPONDIENTES
3

MATERIAL PARA ESTA ASIGNATURA


1- Power Point de cada Clase Terica (en web)
2- Gua de estudio y Problemas ( en web)
3- Apunte sobre temas que da cada profesor (consultar a
cada Profe.)

Como hay feriados fijos y espontneos, para las clases


perdidas consultar con el docente a cargo de cada comisin
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11/08/2015

Los Procesos Biotecnolgicos hoy

PROCESOS BIOTECNOLOGICOS

MICROBIOLOGIA
INDUSTRIAL

PROCESOS DE SEPARACION
(downstream processing)

(fermentacin)

Molcula de inters

Objetivos de la Asignatura
- Introducir al alumno en el escalado del las OU de mezclado
- Introducir al alumno en la teora de los reactores.
- Introducir

al alumno en la teora de los bioreactores, sus


ecuaciones, clasificacin. Aprender a manejar un bioreactor de
escala de laboratorio.
- Introducir al alumno en los Procesos Biotecnolgicos que
emplean microorganismos y sus condiciones de manejo y
desarrollo.

- Presentar y discutir el desarrollo de algunos procesos


biotecnolgicos actuales de importancia.
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11/08/2015

PROCESOS BIOTECNOLOGICOS II
Escalado en el Mezclado

V, CA

Reactores Qumicos
Micro organismos
Bioreactores y
Fermentadores

Fermentacin Slida en
estado slido

Procesos Biotecnolgicos de importancia actual

La Operacin Unitaria de Mezclado


Curso 2015
Tericos Profesor G. Pic

11/08/2015

Escalado del Mezclado

Mezclado en el laboratorio

El mezclado
OBJETIVO: obtener una fase homognea (formacin de una
solucin) o lograr la dispersin de una fase en otra.
PARA QUE SE EMPLEA EL MEZCLADO EN LOS BIOPROCESOS?

1- Obtener una solucin de dos compuestos solubles.


2- Dispersar un gas en una fase lquida
3- Mantener partculas en suspensin
4- Dispersar dos fases inmiscibles entre si (para hacer un
reparto)
5- Facilitar la trasmisin de calor entre dos fases separadas
por una pared.
6- Obtencin de una emulsin
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11/08/2015

COMO SE HACE UN MEZCLADO ?


POR AGITACION ENTREGANDO ENERGIA EN FORMA DE TRABAJO
MECANICO
Recordando conceptos de la Fisica de los Fluidos

ENERGA

MOTOR

W : trabajo
Potencia (P)
El trabajo mecnico se emplea
para mover la fase lquida
(agitacin)
11

LA EXPERIENCIA DIARIA NOS MUESTRA.. !!!!!!!!!


La velocdad de disolucin del azucar depender:
De la velocidad con que se agite (cantidad de trabajo mecnico entregado)
De la viscosidad y densidad de la fase liquida
Del volumen total del sistema

Agregando miel al te

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11/08/2015

Movimiento de fluidos

Dinmica de los fluidos

Hay cambios bruscos en la velocidad de las


molculas

Todas la molculas se mueven con igual


velocidad

Nmeros adimencionales (definidos por la Fsica de los fluidos)


Nmero de Reynolds (Re) relaciona las propiedades fsicas de un fluido
D dimetro del conducto [L]

Re

Dv

V velocidad promedio del liquido [L/ t]


Densidad del liquido [kg/ L
Viscosidad del liquido [m/ L t ]

Re < 2000 flujo laminar Re > 4000 flujos turbulentos

Re >>2 10 6

13

Agitacin de un liquido en un tanque


En la agitacin existen tres tipos de flujos: radial, axial y tangencial.

radial

axial

tangencial

El flujo radial y el flujo axial producen mezclado; mientras que el flujo tangencial
no, todo el conjunto gira sin mezclarse produciendo un efecto de vrtice, es un flujo
no deseable que se trata de evitar.

11/08/2015

No se logra agitacin cuando:


EL MOVIMIENTO ES LAMINAR !!!!!

Flujo circular

Mezclado por
corriente de
circulacin.
Tiempo de
mezclado largo

Mezclado por corriente de


circulacin
Proceso lento
MACROMEZCLADO

Flujo Laminar
Produce vrtice

Flujo Turbulento
REMOLINOS DE
TAMAO
MINIMO.
Remolinos de
Kolmogorov

Ruptura de remolinos

15

MICRO MEZCLADO

1/ 4

Poca agitacin

u3

remolino grande

Escala de mezcla o escala de Kolmogonov o


escala de turbulencia
tamao de los remolinos mas pequeos
Con agitacin
Hay difusin
Remolino chico

= / Viscosidad cinemtica del medio


Velocidad local de disipacin de energa
turbulenta/unidad de volumen

Cmo se favorece un mezclado turbulento ?


Empleando rodetes !!!!!!!

16

11/08/2015

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LOS RODETES

Rodete Rushton

Su dimetro debe ser

1/3 del dimetro del tanque

Turbina Rushton
medidas usuales

W
W

W
L
0,2
0,25
DR
DR

DR

DR

DR

DT

18

11/08/2015

La turbina o rodete Rushton es el modelo mas difundido, genera un flujo radial

DR

19

Deflectores
Tanque agitado con rodete,se
forma un regimen no turbulento: no
hay mezcla

Tanque agitado con rodete y con deflectores

20

10

11/08/2015

AGITACION DE UN FLUIDO CON Y SIN DEFLETORES

21

Cmo se caracteriza un rodete ?


Con los nmeros adimencionales: para flujos turbulentos

P Np Na3 DR

Nmero de Potencia = esfuerzo de frotamiento / esfuerzo de inercia


Numero de Potencia (Np): relaciona la potencia aplicada (P) a un rotor con variables fsicas
del fluido.
Np numero de potencia, es una constante para cada rodete
P potencia aplicada al rotor (trabajo por unidad de tiempo)

Densidad del liquido, Na velocidad de rotacin del rotor, D dimetro del rotor

Nmero de Reynolds para el rodete Rushton

Re(r )

Na DR2

Nmero de Reynolds = esfuerzo de inercia / esfuerzo cortante

Na velocidad del rodete, vueltas /unidad de tiempo


DR dimetro del rodete, y viscosidad y densidad de la solucin

22

11

11/08/2015

Qu dimensin debe tener el rodete ?????


DR dimetro del rodete

DT dimetro del tanque

1
DR DT
3

23

ESCALADO DE LA AGITACION
Como se relaciona el tamao del rodete con el volumen (V) que se quiere agitar ?

Turbina Rushton
1
DR DT
3

V RT2 H T
2

3D
V R .H T
2
H T H L 3DR
V 3DR .3DR
2

27
DR 3
4
3
V DR

Relacin entre el volumen del liquido a agitar y el


dimetro del rodete

24

12

11/08/2015

La ecuacin

V DR

Indica que el volumen a agitar debe ser proporcional a Dr 3.


Y condiciona el dimetro del tanque. Aparece la primera relacin de escalado
en el mezclado

V igual es los dos recipientes

cual seleccionamos ?

25

Fundamento terico del escalado


El principio de similaridad
hace referencia a la relacin que existe entre el tamao de los
sistemas fsicos, siendo un principio bsico en el escalamiento
de los procesos qumicos.
Qu similaridades hay?
Geomtrica
Cintica

Dinmica
Trmica
Qumica

26

13

11/08/2015

Criterio de escalado
SIMILITUD GEOMETRICA vs PRACTICIDAD

NO VIABLE

Dx

1L
1000 L

D x 1000
Dx

NO VIABLE

No se mantiene la
similitud, Sistema Viable

VIABLE
D x 10

27

Como se define el volumen de un tanque agitado?:

DB

DB dimetro deflector
HT altura tanque
HL altura liquido
DR dimetro rodete
DT dimetro tanque

Valores usualmente empleados

HL
0,7 0,8
HT

DB
HT
0,08 0,1
1 282
DT
DL

14

11/08/2015

Como se define el volumen de un mezclador

?:

Ejemplo: un mezclador o fermentador de 2000 L

V 2000 L
DB
0,1
DT

Valores recomendados de las


variables geomtricas

DR
HT
0,33
2
DT
DT
2

D
Vtotal T .H T
2
se sup one H T 2 DT
2

D
Vtotal 2000 L 2m 3 T 2.DT
2
DT 3

2.Vtotal

2. 2m 3

4m 3

3 1,3m 3

DT 1,1 m

29

DT 1,1 m H T 2. (1,1m) 2,2 m


DR 0,33DT 0,33. 1,1 m 0,36 m
DB 0,1

30

15

11/08/2015

Ya seleccione el rodete y

cuanto tiempo debo esperar para que


se complete el mezclado??????
Detector

1 minuto ???
1 hora ??
1 semana ???
W

1000 aos ????

DR

Como se calcula??????
31

El tiempo de mezcla ( Tm ): tiempo necesario para lograr que una


variable fsica del sistema sea homognea en toda su masa

De qu depende ???:

Cmo se determina ?

volumen del sistema,


viscosidad y densidad de la solucin,
tamao del rodete de agitacin
la velocidad de agitacin

Detector

Trazador:
cido o base, colorante, otro soluto,
calor, etc
Variable a medir:
temperatura, conductancia inica, pH,
etc.

DR

32

16

11/08/2015

El tiempo de mezcla ( Tm ) : tiempo necesario para lograr


que una variable fsica del sistema sea homogenea en toda su masa

depende de:

Cmo se determina ?

volumen del sistema,


viscosidad y densidad de la solucin,
tamao del rodete de agitacin
la velocidad de agitacin

Detector

Trazador:
cido o base, colorante, otro soluto,
calor, etc
Variable a medir:
temperatura, conductancia inica, pH,
etc.

DR

33

El resultado obtenido de la experiencia ser


220

concentracin de marcador

200
180
160
140
120
100
80
60
40
0

tiempo

Tiempo de mezcla: tiempo


necesario para que se adquiera
la homogeneidad de las
variables fsicas

10

12

14

16

Tm

34

17

11/08/2015

El numero de vueltas que el rodete debe dar para alcanzar el Tm ser:

Na. Tm
Na: nmero de vueltas /minuto
Se demuestra que en un tanque agitado, con deflectores, por una turbina
Rusthon ser:

Na .Tm
Si DR aumenta

1,5 V
DR3

El numero de vueltas disminuye,


Si V (volumen) aumenta el nmero de vueltas
aumenta
Para un rodete cualquiera, su Potencia (P)
P = f (Na, D, geometra del rodete, densidad y viscosidad del fluido, etc.)

P Np Na3 DR

Np = f (Re) se demuestra experimentalmente


35

(depende del rodete y el tanque de agitacin)

Conclusin
El trabajo mecanico (W) para hacer girar un rodete depende de :
(Na, tipo y geometra del rodete, densidad y viscosidad del fluido, placas
deflectoras, etc.)

Fuerza mecnica >>> Fuerza viscosa

P Np Na3 DR
Re(r )

Na DR2

F uerza mec nic a


F uerza del fluido (vis c os idad)
opues ta a la fuerza mec nic a

Todas estas variables fsicas son


medibles, bajo las condiciones de
trabajo del sistema
36

18

11/08/2015

Relacin entre los numeros de potencia y Reynolds, tanque agitado con defletores

Re(r )

Na DR2

Na .Tm

Zona de mezclado

Si aumenta Na => aumenta P (aumenta el costo)

1,5 V
cte
DR3

P Np Na3 DR

37
5

Frmulas de clculo para tener en cuenta


Permite calcular el tiempo de mezclado y/o el numero
de vueltas por minuto del rotor, para un flujo turbulento

Na .Tm
Re(r )

1,5 V
cte
DR3
Na DR2

Permite calcular el numero de vueltas por minuto del


rotor, para un flujo turbulento conociendo la viscosidad y
densidad del liquido.
38

19

11/08/2015

Cmo esta formado un tanque agitado ?

Vidrio Pyrex o Acero


inoxidable

1-

Sistema de agitacin

2-

Sistema de suministro de oxigeno (#)

3-

Sistema de control de espuma

4-

Sistema de control de temperatura y pH

5-

Puertos de entrada y salida de muestra

6-

Sistema de esterilizacin (#)

39

1. Sistema de control de pH

Bombas
Acido

Base
Electrodo

40

20

11/08/2015

2. Sistema de control de temperatura

Circulacin de agua
proveniente de un
termostato

En fermentadores de volmenes menores 1 a 5 L el calentamiento es


elctrico, controlado por PC

41

3. Sistema de control de espuma:

Porqu se forma espuma?:


Empleo de detergentes en el buffer
Adicin de otras sustancias tensoactivas: protenas, sustancia antipticas
Qu CONSECUENCIAS PRODUCE ?
Disminucin del volumen del lquido en el interior
del biorreactor si la espuma sale por la salida
del gas agotado.
Contaminacin microbiolgica del bioproceso si la
espuma alcanza a salir.
Disminucin de la actividad biolgica del bioproducto
si posee propiedades tensoactivas
42

21

11/08/2015

Las protenas se disponen en la interfase aire-liq.


Deshidratacin

Desnaturalizacin

Burbuja

SOLUCION

aire

Como se disminuye la formacin de espuma ?


1. Control de la velocidad del rodete
2. Control en la Velocidad de burbujeo de oxigeno u otro gas
3. Empleo de anti espumantes
43

Escala HLB
Polidimetilsiloxano

antiespumantes
Dimetilpolixiloxano
10 mg/kg
Dixido de silicio amorfo
10 mg/kg

44

22

11/08/2015

Un antiespumante ideal debe tener las siguientes propiedades:

Debe dispersarse y tener una accin rpida sobre la espuma.

Debe ser activo a bajas concentraciones

No debe ser metabolizado por el microorganismo.

No debe ser txico para el microorganismo, humanos ni otros


animales.

No debe alterar la extraccin y purificacin del producto.

Costo.

No debe tener efecto en la transferencia de oxgeno.

Debe ser estable ante procesos como la esterilizacin.


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AGITACION DE UN LIQUIDO CON CELULAS EN SUSPENSIN


DAO POR BURBUJAS

Bioreactores agitados: ruptura por burbujas, formacin de espumas


Aumento velocidad de agitacin. Burbujas grandes mayor dao

aire

burbuja

liquido

Estallido de la burbuja

clula

Ruptura celular

burbuja
clula

46

23

11/08/2015

METODOLOGIA PARA DISMINUIR EL DAO POR BURBUJA


AUMENTAR LA VISCOSIDAD DEL MEDIO.
- Albmina
- Pluronic P 68: Polioxido de etileno y propileno

Como funcionan ?
CLULA

+ Pluronic 68
CLULA

Estallido de la burbuja

Ruptura celular
Las Clulas tienden a escapar

47

Tericos 2015 PB II Prof. Pic


LOS CAMINOS PARA ESCALADO
Ya resolvimos:

1- Tamao del rodete


220

2- Tiempo de mezclado

concentracin de marcador

200
180
160
140
120
100
80
60
40
0

10

tiempo

12

14

16

Tm

Qu falta ??
3- Camino de cmo hacer el escalado
48

24

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CAMINOS PARA ESCALAR LA OPERACIN UNITARIA


DE MEZCLADO
El tiempo de mezcla ( Tm ) : depende
de:
volumen del sistema,
viscosidad y densidad de la solucin,
tamao del rodete de agitacin
la velocidad de agitacin
Muchas variables:
Se juntan todas en los nmeros adimencionales :
Np y Re

P Np Na DR
3

Re(r )

Na DR2

49

Pasos para el escalamiento de tanques agitados


Variables geomtricas utilizadas para el escalamiento
Dimetro del tanque, altura til del tanque, dimetro
del rodete

Criterio de escalado
SIMILITUD GEOMETRICA vs PRACTICIDAD

NO VIABLE

Dx

1L
1000 L

D x 1000
Dx

NO VIABLE

No se mantiene la similitud,
Sistema Viable

VIABLE
D x 10

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11/08/2015

Criterios utilizados para determinar las variables


operacionales en el escalamiento
Tanque agitado

Tiempo de mezclado, relacin de potencia


(P/V),
Nmero de vueltas del rodete.
Nmero de Reynols .
Bio fermentador

Caudal de aireacin, etc.

51

COMO HACER EL ESCALADO ?


A relacin de potencia (P/V) constante: no se puede emplear
para lquidos altamente viscosos. 30% de los procesos
emplean este camino
Mantener constante el coeficiente de transferencia de masa
KL: esto se emplea en un fermentador cuando hay que
mantener constante la transferencia de oxigeno
Mantener constante el numero de vueltas del agitador (Na
cte) emplea un 20% de los procesos
Mantener constante el numero de Reynolds
Mantener constante el tiempo de Mezclado ( Tm) (un 20 %
de los procesos)
52

26

11/08/2015

1) Escalado a relacin de potencia constante (P/V) = cte


Criterio muy usado en sistemas de baja viscosidad
La relacin de potencia debe ser la misma para 1L y
1000L
Se supone que se aumenta 1000 veces el volumen 3
5
P1L P1000
L
P1 Np Na1 DR1L

V1L V1000L
reemplazando

P1000 Np Na1000 DR1000L


3

V1000L 1000 .V1L


3

N a 1L DR5 1000L 1

N
D5

R 1L 1000
a 1000L

10 DR 1L DR 1000L

Se aumenta 10 veces el
dimetro del rotor en el
escalado

N a 1L 10 DR 1L 1

N
D
1000
a
1000
L
R
1
L

N a 1L N a 1000L .4,6
o N a 1000L

N a 1L
3,8

El numero de vueltas del rotor para el sistema 1000 L debe


disminuir en 3,8 veces respecto del tanque de 1 L , para que
P/V se mantenga constante

27

11/08/2015

2. Mantener constante el numero de vueltas del agitador


(Na cte) se emplea un 20% de los procesos
Se mantiene constante el numero de vueltas del rodete para 1 L y para
1000 L
Entonces de se deber modificar el DIAMETRO DEL ROTOR

P1L P1000L

V1L V1000L

P Np Na3 DR

REEMPLAZANDO

DR1l
V1l

DR1000L

DR1000l 4,0 D1L

1000 V1l

El dimetro del rotor para el tanque de 1000L debe ser 4


veces mayor que el de 1 L para mantener el numero de
vueltas constantes

3- Mantener constante el numero de Reynolds


Re(r )

Na DR2

Se supone que la viscosidad es cte


Se supone que el dimetro del rotor se escala 10
veces

N a1000L N a1L

1
100 1L

El numero de vueltas del rotor debe


disminuir

28

11/08/2015

4- Mantener constante el tiempo de Mezclado (


Tm) (un 20 % de los procesos)

1000 L

1L

Escalado a Tm constante: al aumentar el volumen del sistema, el recorrido que


realiza el fluido es mayor y por lo tanto la velocidad del liquido deber ser mayor
para mantener el mismo Tm.
57

La velocidad de rotacin (v) de un rodete es:

v r siendo r el radio del ro det e


RPM 2
) ( s 1 )
60
Na : numero de vueltas por unidad de tiempo del ro det e

frecuencia angular (
Na
DT 3DR

2
2
v Na DR
(20)
r

P Na3 DR

P ( NaDR ) 2 NaDR

recordando que :
V DR

(19)

58

29

11/08/2015

La ecuacin para la potencia se puede re escribir como:

P Np Na DR
3

P Na3 DR5

P v 2 Na V
P 2
v (21)
V
Escalamiento
1L

1000 L

Mezclador que usa un rodete Rushton


Quiero mantener el Tm igual a 1 L y a 1000 L
en cuanto deber aumentar Na ?

V1000L 1000 .V1L


59

Si el dimetro aumenta 10 veces, el recorrido debe aumentar lo mismo


Tiempo de recorrida constante,
Velocidad B >> Velocidad A
A

El dimetro debe ser 10 veces mayor !!!


El recorrido deber aumentar 10 veces, para mantener el mismo valor
de tiempo de mezclado

ALGO IMPOSIBLE

v1000L 10 .v 1L
La velocidad del rodete debe aumentar 10 veces !!!!!!!!

60

30

11/08/2015

qu ocurre con la relacin de potencia (P/V) ?


P1L
v 21L (21)
V1L
P 1000L
V1000L

10 . v1L 2
Aplicando la relacin de potencia / volumen
a cada sistema (P/V)

P1L
V1L
v1L

P1000L 100 . v12L


V1000L

V1000L 1000 .V1L

P1L .100 .000 P1000L

Imposible de lograr por problemas


tcnicos !!!!!!!!!!!!!!!!!!!

La conclusin final es que es muy difcil mantener el tiempo de mezclado


constante durante el escalado. Mantener el Tm constante en el escalado es un
criterio muy poco usado
61

Requerimientos de potencia de agitacin

Nivel de agitacin
Bajo
Moderado
Alto
Muy alto

P/V en kW/1000L
0,2-0,6
0,6-1
1-4
>4

31

11/08/2015

Un tanque agitado de laboratorio conteniendo 1 L y un rotor Rushtom de 3 cm es


escalado a planta piloto. Suponiendo que las variables dinmicas valen la unidad
bajo esa condicin, calcule que valores adquirirn a escala piloto de 20 L y 500 L.

VARIABLE

LAB

20 L

500 L

1L
DR

3 cm

P/V

Na

Re

Tm

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