DATOS, CLCULOS Y RESULTADOS

Para esta prctica se emplearon dos tipos de

metodos cromatogrficos para la separacin de
mezclas e identificacin de sustancias, los cuales
son respetivamente cromatografa de columna y
cromatografa de capa delgada. Estos mtodos
involucran principalmente la transferencia
reversible de un compuesto que es adsorbido en
una fase estacionaria (adsorbente) a una fase
mvil (disolvente) que fluye a travs de la fase
estacionaria2. ddfjnvd
Cromatografa de columna:
Tabla 1. Soluciones recolectadas en la
cromatografa de columna.
Reactivo
Masa
(g)

Fase estacionaria
Almina
10,22

Reactivo
N. Tubo
de ensayo

Etanol
1

Fase mvil
Entanol
2

Observaci
n

No hay
arrastre
de
compue
stos

Arrastre de
compuesto
de color azul
(azul de
metileno)

Agua
3

Agua
4

Arrastre de
compuesto
de color
amarrillo
(naranja de
metilo)

No hay
arrastre
de
compues
to

(mL)
1
-2
19
3
16
4
17.2
Para llevar a cabo este mtodo, se utiliz dos
placas de cromatografa de capa fina, que poseen
una capa uniforme de adsorbente slido o fase
estacionaria la cual para este caso fue la alumina.
En cada una de ellas, con ayuda de un capilar, se
coloc un punto de la mezcla de tintes y un punto
de la solucin de tinte puro soluble en etanol. Lo
mismo se hizo con los tintes obtenidos (amarillo y
azul). Luego cada una de las placas se
introdujeron en dos beakers diferentes que tenan
una cantidad diferente de la mezcla de disolventes
de elusin (etanol-agua), que se difunda por la
placa para separar los componentes y as poder
calcular el Rf (movilidad relativa) que es
caracterstica para cada compuesto, teniendo en
cuenta el desplazamiento. [7]
A continuacin se muestran los resultados
obtenidos con base en el mtodo de CCD, as
como tambin el respectivo montaje empleado y
las placas reveladas.

A continuacin se muestra un imagen donde se

esquematizan las respectivas fracciones
obtenidas.

Figura 2. Montaje de Cromatografa de capa

delgada.
.
Figura 1. Fracciones obtenidas mediante CC

Tabla 2. Volumen de las fracciones recolectadas

Tubo de ensayo
Volumen

Rf =

distanciarecorrida por el compuesto

distancia recorrida por el disolvente

(Ec. 1)
Los resultados obtenidos con base en la anterior
relacin se encuentran debidamente registrados
en la siguiente table

Figura 3 placa revelada (10 etanol /1 agua).

Tabla 5. Factores de retencin de la mezcla de

tintes y las sustancias obtenidas en al
cromatografa de columna frente a disolventes
compuestos por agua y etanol.
SOLVENTE
SUSTANCIA
Rf
Mezcla de tintes
0.81
10:1
0.92
Azul de metileno
Solucin
1
0.0
EtOH:H2O
Solucin 2
0.96
0.80
Mezcla de tintes

Tabla 3. Distancias recorridas para la Placa 10-1

(etanol-agua).
Distancia
Sustancia
recorrida
(cm)
Disolvente
2.7
(agua- etanol)
Mezcla de tintes
2.2
Azul de metileno
2.5
Solucin 1 (azul de metileno)
0.0
Solucin 2 (naranja de metilo )
2.6

0.96
Azul de metileno
Solucin 1 (azul de
0.0
metileno)
Solucin 2 (naranja 0.42
de metilo )
Referencia de las placas cromatogrficas: Slica
gel 60 F254
Marca: Merck
1:10
EtOH:H2O

Figura 4 placa revelada (1 etanol /10 agua).

Tabla 4. Distancias recorridas para la Placa 1-10
(etanol-agua).
Sustancia
Distancia
recorrida
(cm)
Disolvente
2.6
(agua- etanol)
Mezcla de tintes
2.1
Azul de metileno
2.5
Solucin 1 (azul de metileno)
1.1
Solucin 2 (naranja de metilo )
0.0

Para calcular la movilidad relativa se utiliz

siguiente ecuacin:

Anlisis de resultados
En todas las separaciones cromatogrficas la
muestra se disuelve en una fase mvil, que puede
ser un gas un lquido o un fluido supercrtico. Esta
fase mvil se hace pasar a travs de una fase
estacionaria inmiscible, la cual se mantienen fija
en una columna o sobre una superficie slida. Las
fases se eligen de tal forma que los componentes
de la muestra se distribuyen de modo distinto
entre la fase mvil y la fase estacionaria. Aquellos
componentes que son retenidos con ms fuerza
por la fase estacionaria se mueven lentamente
con el flujo; por el contrario los componentes que
unen dbilmente a la fase estacionaria, se
mueven con rapidez. Como consecuencia de la
distinta movilidad, los componentes de la muestra

se separan en bandas discriminadas que pueden

analizarse cualitativa y/o cuantitativamente.
La separacin surge de las interacciones mutuas
de componentes de una muestra, disolvente y
adsorbente. El adsorbente est presente en un
gran exceso, con una gran superficie y con sitios
polares capaces de unir reversiblemente
pequeas concentraciones de sustancias por un
proceso esencialmente electrosttico. El
disolvente compite con los componentes de la
muestra por los sitios de unin. Estos
componentes son desplazados reversible y
continuamente en la direccin del flujo del
disolvente. El proceso descrito puede resumirse
como un equilibrio competitivo en donde hay una
particin de los componentes entre la fase
estacionaria y la fase mvil.
De domo que entre ms polar sea un compuesto,
ms fuertemente se adsorbe en la fase
estacionaria, por lo que su migracin a lo largo de
ella es menor, siendo eludo (arrastrado) ms
lentamente por la fase mvil, que los compuestos
menos polares. De este modo, la separacin
selectiva de los componentes de una muestra, por
cromatografa, se debe a las diferencias en la
migracin de los componentes individuales a lo
largo de la fase estacionaria. [3]

La cromatografa de columna es una tcnica que

consiste en adicionar la mezcla a separar sobre el
borde de la fase estacionaria que en ste caso fue
almina bsica, la cual fue empacada
uniformemente dentro de la columna. donde la
distribucin de los componentes entre la fase
slida y lquida est determinada, por la polaridad
propia de cada compuesto y por el grado de
actividad del adsorbente (el cual depende
principalmente del grado de hidratacin y de la
polaridad del disolvente).
El principal factor para controlar el movimiento de
los diferentes compuestos en un cromatograma es
la polaridad del disolvente. Una lista de los
disolventes ms usados en los diferentes tipos de
cromatografa, en orden de polaridad creciente, se
indica en la Tabla 6. Entre ms polar sea un
disolvente, ms rpido es el movimiento de los
compuestos y menos efectiva la separacin. [7]

Tabla 6. Disolventes comunes para cromatografa

de lquidos.

Fuente:http://www.bib.uia.mx/gsdl/docdig/didactic/I
ngCienciasQuimicas/lqoa001.pdf
La cromatografa de columna se emple para
separar los componentes de una mezcla de tintes
de color verde aguamarina, la cual contena azul
de metileno (cloruro de metilionina) un compuesto
heterocclico (figura. 5) y naranja de metilo
(colorante azoderivado) (figura. 6). Estos tintes
son polares, aunque el naranja de metilo es ms
polar que el azul de metileno, esto debido a que el
primero respecto al segundo tiene menos
estructuras apolares, tal como se evidencia en la
presencia de una menor contenido de tomos de
carbono en su estructura, adems de que este
posee grupos sustituyentes polares tales como el
SO3Na y las aminas a diferencia del azul de
metileno que tiene un grupo S y tres N. Para
separar esta mezcla, los solventes o fases mviles
empleados, fueron agua y etanol ya que estos
poseen propiedades que son a fin con las
sustancias a separar (lo semejante disuelve lo
semejante), tales como su polaridad siendo el
agua en este caso el compuesto de mayor
polaridad, tal como lo indica su constante
dielctrica. [3]

Figura. 5: Estructura del azul de metileno.

Figura. 7. Sistema cristalino hexagonal del Al2O3

.
Figura. 6: Estructura del naranja de metilo.

Al finalizar la recoleccin la solucin de color azul,

se observ que nuevamente la solucin que
descenda por la columna era incolora por lo cual
se cambi el eluyente por agua, el cual al poseer
un momento dipolar ms grande que el EtOH, fue
capaz de sustituir al naranja de metilo al
adsorberse en los centros polares de la fase
estacionaria, generando el desplazamiento del
tinte a lo largo de la columna. Visto de otra
manera el naranja de metilo en su estructura
posee tres tomos de oxgeno, los cuales le
permiten formar enlaces tipo puente hidrgeno
con el agua, siendo esto posible gracias a que
cuando se adicion EtOH en la primera etapa, el
naranja de metilo no eluy debido a que la fuerza
entre naranja de metilo-almina fue ms fuerte
que la interaccin naranja de metilo - EtOH. [2]

Por otro lado se emple como fase estacionaria

un empaquetamiento de almina bsica Al2O3
(pH= 10), este xido de aluminio tiene un
empaquetamiento caracterstico (figura. 7) y un
tamao muy fino que permite que el equilibrio
adsorcin-desorcin se establezca de manera
rpida y se produzca una mejor resolucin en la
cromatografa. Adems este compuesto permiti
que los componentes de la mezcla que puedan
formar enlaces de hidrogeno tengan una mayor
atraccin y puedan ser retenidos para la
correspondiente separacin de estos, de tal
manera que cuando es aadida la mezcla de
tintes seguida por la adicin del EtOH como la
primera fase mvil, fue posible observar que el
compuesto que descenda por la columna en este
caso era el azul de metileno y esto se debi a que
las interacciones entre el resto de los
componentes del tinte y el etanol son ms dbiles
que las interacciones entre el etanol y azul de
metileno, puesto que el etanol posee un mayor
nmero de tomos de hidrgenos disponibles para
llevar a cabo el enlace tipo puente, adems la
interaccin entre el naranja de metilo y la fase
estacionaria (almina) se hizo ms fuerte debido a
la alta polaridad marcada sobre el grupo SO 3-,
generando que la fase estacionaria retuviera el
compuesto con mayor polaridad y el menos polar
fuese removido por el eluyente. [5]

Por otro lado, la cromatografa de capa delgada se

emple para identificar las sustancias separadas
de la mezcla. sta es una de las tcnicas ms
comunes utilizadas en qumica orgnica, puesto
que permite determinar el grado de pureza de un
compuesto, por comparacin de muestras con un
con un compuesto puto de referencia, asi como
tambin realizar el respectivo seguimiento de una
reaccin y controlar el contenido de las fracciones
obtenidas en cromatografa de columna [8].
Por otra lado se realiz el respectivo anlisis de
pureza empleando como mecanismo el mtodo de
cromatografa de capa delgada, donde se observ
que el compuesto que ascendi a lo largo de la
placa fue para la mezcla de tintes fue el naranja
de metilo y en menor proporcin el azul de
metileno, esto se debi a que por la composicin
de la slica gel (figura 8) fue posible formar
enlaces ms fuertes con el naranja de metilo.

Fuente: www.aldbot.com/HPLC-Analysis.htm.
Figura 8 v. Organizacin molecular de la slica
Gel.

Es decir, un compuesto que tenga muchos

tomos de hidrgenos disponibles para formar
puentes de hidrogeno y elementos tales como O F
N, tendr una interaccin fuerte con la fase fija, en
este caso el azul de metileno tiene mayor
posibilidad de formar puentes de hidrogeno con la
slica, adems a diferencia de la almina, la slica
tiene ms oxgenos en su estructura por lo cual
ser ms fcil formar puestes de hidrogeno, las
propiedades absorbentes de la gel de slice se
deben a los grupos hidroxilo unidos a los tomos
de silicio, los cuales actan como dadores de
hidrogeno formando los correspondientes enlaces
puente de hidrogeno, en este caso no se necesita
que la molcula sea muy polar, por el contrario se
necesita que pueda formar los enlaces para
mantenerse fija a pesar de que el naranja de
metilo tiene la polaridad marcada sobre el grupo
SO3-.; La mezcla que se utiliz para este caso fue
de etanol-agua en las proporciones mostradas en
la tabla 5, los dos solventes tienen polaridad
marcada y gran capacidad de formar puentes de
hidrogeno los cuales se forman con el naranja de
metilo debido a la presencia de 3 oxgenos con
pares de electrones libres. [4]
Como la marca del patrn de uno de los
componentes de la mezcle de tinte recorri
aproximadamente la misma distancia que el
patrn de azul de metileno puro, se comprob que
el compuesto azul de metileno efectivamente se
encontraba presente en la mezcla.
Por otro lado para la segunda placa se observ
que solo corri el naranja de metilo tal como lo
describen los valores de Rf, registrados en la tabla
5.5 todo lo anterior debido a la gran polaridad que
tiene el componente en mayor proporcin del
eluyente, con el cual interaccionan solo los grupos
funcionales de molculas con alta polaridad.

involucradas1. En una cromatografa de columna,

los tintes se separan debido a la adsorcin en la
superficie del slido con afinidades diferentes
(fuerza de unin). La fase mvil arrastra y
disuelve estos componentes de acuerdo con su
afinidad por la superficie slida y la solubilidad de
la sustancia en la misma. El factor relevante es el
establecimiento del equilibrio.
La almina ayuda a la separacin de los tintes,
debido a que retiene los componentes del mismo
sobre la superficie mediante una combinacin de
fuerzas de cido de Lewis y base de Lewis,
actuando con diferente intensidad sobre la
muestra. Cuanto mayor sea la relacin de
adsorbente con respecto al peso total de la
mezcla problema, y mayor sea la longitud de la
columna o de la placa, mejor ser la separacin.
Esto se debe a que las fuerzas que efectan la
separacin tendrn ms oportunidad de actuar
sobre cada componente. No obstante, el aumento
de la cantidad de adsorbente, significa un tiempo
adicional en la separacin.
Las fases mviles utilizadas fueron etanol y agua
los cuales arrastraron los tintes que podan
disolver, (mayor afinidad) con cada uno en contra
posicin a la fase estacionaria. El etanol separ el
azul de metileno mientras el agua separ el otro
tinte de color amarillo. El agua, desempea un
papel importante en la separacin de la mezcla
debido a que arrastra los componentes que no
son separados por el etanol, adems de que
agiliza la separacin gracias al cambio de
solvente.
2. Qu es la cromatografa de columna
seca? Y cmo se desarrolla?

Preguntas
1. Explique por qu y cmo se separan
los compuestos de la mezcla de
tintes?

La separacin de dos o ms componentes se

logra en ltimo trmino por un equilibrio
relativamente sutil de todas las fuerzas

La cromatografa en columna seca, se desarrolla a

partir del empacado de la columna cromatogrfica
con material de relleno seco2. La muestra se
aade como una disolucin concentrada o seca
sobre una pequea cantidad de adsorbente antes
de la introduccin. Se deja que el disolvente
descienda a lo largo de la columna por capilaridad

hasta que el frente casi alcance la parte inferior. El

flujo de disolvente se para y se sacan las bandas
de la columna, por corte. Luego se extraen con un
disolvente adecuado.
No hay flujo de lquido a travs de la columna y no
se forman canales; la zona de separacin est
definida. La cromatografa en columna seca
realiza la separacin de manera rpida, y requiere
poco disolvente. Cuando se usa almina o gel de
slice, las separaciones se pueden extrapolar
directamente de las placas de TLC analticas
eligiendo el mismo adsorbente en la columna, por
lo tanto, el mtodo es una variante de TLC
analtico con la misma resolucin.

cromatograma est completo y el papel se sec,

la hoja se rota 90 y se realiza una cromatografa
paralela al segundo borde utilizando otro sistema
de solventes. Dado que cada compuesto migra a
una velocidad caracterstica en un sistema de
solventes determinado, la segunda cromatografa
debera incrementar en grado sustancial la
separacin de la mezcla en sus componentes.

La cromatografa en columna seca ha demostrado

ser eficaz para un fraccionamiento inicial rpido de
extractos de plantas.
3. Cul es el desarrollo mltiple y el
desarrollo bidimensional de la CCD?

La cromatografa de capa fina o delgada, se

puede obtener por desplazamiento del disolvente
en direcciones ascendentes, descendentes,
horizontales o radiales. La modalidad ascendente
tiende a minimizar el problema que plantea el flujo
preferencial del disolvente por canales. El
desarrollo continuo implica la eliminacin del
disolvente a medida que alcanza el extremo del
papel o de la capa fina. El desarrollo mltiple,
implica la vaporizacin del disolvente despus de
que el frente de disolvente ha alcanzado el
extremo de la hoja, seguida de la repeticin del
desarrollo en la misma direccin3. El desarrollo
escalona, consiste en el desarrollo de una placa
con un disolvente apolar seguido de su
evaporacin luego de un segundo desarrollo con
un disolvente ms polar. Por ltimo, el desarrollo
bidimensional, es utilizado en mezclas complejas
que no se separan por completo en un solo
cromatograma en pape; en esta, la muestra se
aplica en una esquina de una hoja de papel filtro y
el cromatograma se corre en forma paralela a uno
de los bordes del papel. Luego de que el

4. En qu consiste la cromatografa de
CCD preparativa?
Para asilar una sustancia a partir de una mezcla
compleja se pueden desarrollar separaciones en
escala analtica y separaciones en escala
preparativa. Las primeras son importantes para el
anlisis cualitativo y cuantitativo de los productos
naturales, mientras que las separaciones en
escala preparativa son primordiales para descubrir
nuevas sustancias biolgicamente activas o an
para disponer de sustancias de referencia4.
El valor del Rf es variable respecto a factores
como la temperatura del medio ambiente, el grado
de pureza de los solventes utilizados y las
variaciones de homogeneidad de las diferentes
placas de capa delgada. Debido a estos factores,
el uso de una substancia de referencia para
garantizar la identificacin, es importante,
principalmente cuando se trata de extractos de
plantas. Falta agregar ms
5. Qu es una resina de intercambio
aninico? Y una resina catinica?

Las resinas de intercambio inico son aquellas en

las que el sitio de intercambio se halla limitados a
una delgada capa superficial. En forma de perlas
de pequeo dimetro son tiles para las
separaciones de muestras pequeas a alta
presin y elevada velocidad. Los contraiones del
intercambiador son sustituidos por iones del
mismo signo presentes en la mezcla que ha de
separarse. La distinta afinidad de estos iones por
la fase estacionaria hace que queden retenidos de
forma desigual. Estos iones, posteriormente son
desplazados por iones de la fase mvil que va
siendo progresivamente agregada a la resina5.
Una cromatografa de intercambio inico se utiliza
cuando se requiere separar una mezcla de cuyos
componentes qumicos que en disolucin, y a un
pH adecuado, se disocian en iones. El origen de
este tipo de separacin se efectu con el uso de
arcillas y zeolitas, intercambiadoras de iones de
origen
inorgnico,
pero
estas
fueron
reemplazadas por las resinas de origen orgnico.
stas, son polmeros de gran masa molar y
muchos grupos ionognicos por molcula. En
condiciones adecuadas estos grupos funcionales
se disocian generando iones fijos unidos a la
matriz molecular e iones mviles o
intercambiables, de carga opuesta denominados
contraiones. En funcin de si la carga del
contrain es positiva o negativa, se distingue entre
intercambiadores de cationes o de aniones
respectivamente. Los intercambiadores de iones
constituyen la fase estacionaria en este tipo de
cromatografa, de forma que cuando entran en
contacto con la fase mvil se establecen
equilibrios de intercambio inico.
Un ejemplo de un equilibrio en un intercambiador
de cationes es el siguiente:

Donde xRSO3-H+ es una resina en su forma cida

y Mx+ es cualquier catin de la disolucin.

En el caso de un intercambiador de aniones, el

proceso anlogo queda ilustrado a continuacin:

Donde xRN(CH3)3+OH- es un ejemplo de resina en

su forma bsica y Ax- es cualquier anin de la
disolucin.
Del tratamiento del equilibrio se deduce que si uno
de los contraiones est en exceso, tanto en la fase
mvil como en la resina, el cociente entre la
concentracin del otro contrain en la resina y su
concentracin en la fase mvil ser constante, y
su valor indica la afinidad de una resina
determinada por ese contrain. El valor de esta
constante de distribucin est relacionado con la
carga y el tamao del in hidratado. Cuanto mayor
es la carga del in, con ms fuerza se une ste a
la resina; dentro de un grupo de iones con la
misma carga, la distinta habilidad para penetrar en
la resina da lugar a constantes distintas.

6. Indique algunas de las aplicaciones de

la cromatografa de adsorcin en
columna.
falta
Conclusiones:

La cromatografa de capa delgada, se

basa en su rapidez, versatilidad y
reproducibilidad en el anlisis a realizar
mediante la utilizacin de una pequea
cantidad de solvente y de muestra para
su desarrollo.
Da la posibilidad de analizar varias
muestras
en
una
sola
placa
cromatogrfica; revelando en stas
reactivos cromognicos, lo cual hace
posible detectar sustancias que no
absorben en la regin UV(VIS)

posibilita el desarrollo de separaciones a

escala semi-preparativa

Referencias:

PREGUNTAS

[1] Durst, H. D., & Gokel, G. W.

1. Explique por qu y cmo se separan

los compuestos de la mezcla de tintes?

(1985). Qumica orgnica experimental.

Revert.

La especie que migra de ltima, lo hace

porque es ms fuertemente retenida que la
otra y por tanto se retrasa durante el proceso
de migracin.

[3] Laitinen, H. A., & Harris, W. E.

(1982). Anlisis qumico. Revert.

[2] Cruz, N. S. ., & Serrano, A. J. B.

Los compuestos de la mezcla de tintes se

separan, porque tiene diferentes velocidades
de migracin y se van aislando cada vez
ms, hasta completar la separacin a medida
que se les pase cantidades suficientes de
fase mvil a travs de la columna, hasta
lograr que cada uno de los componentes
individuales llegue al final para recogerlos por
separado. [3]

(2012). Tecnologa farmacutica. Editorial

Club Universitario.
[4]Nicolai, S. (2002). Fundamentos de
tecnologa de productos
fitoteraputicos.Colombia: Ed. Universidad
del Tolima, 56.
[5] de Marcano, D., & Hasegawa, M.
(1991). Fitoqumica orgnica. Universidad
Central de Venezuela, Consejo de Desarrollo
Cientfico y Humanstico.

2. Qu es la cromatografa de columna
seca? Y cmo se desarrolla?
Fue una tcnica descrita por Loev y
Goodman, la cual consiste en rellanar una
columna clsica de cromatografa con
adsorbente, sin ayuda de ningn solvente,
sea que en vez de usar varios volmenes
de disolvente la cromatografa de columna
seca finaliza cuando el solvente alcanza el
fondo de la columna al usar un solo volumen
de disolvente. Este mtodo ofrece algunas
ventajas como el grado y la velocidad de
separacin. [1]

Para el montaje de la cromatografa de

columna seca se inicia rellenando un
columna de vidrio o preferiblemente un tubo
de nylon con almina seca o slice gel seca,
la adicin de este se hace sin la presencia de
ningn disolvente y tratando de disminuir al
mximo los espacios que puedan quedar al
adicionarse el adsorbente. El tamao de la
columna se escoge dependiendo de la
dificultad para separar la muestra, entre ms
difcil ms grande ha de ser la columna.
Posteriormente se adiciona la muestra en el
tope del absorbente, se adiciona el solvente

eluyente hasta que este alcance el fondo de

la columna resultando un cromatograma que
es revelado con una lmpara de UV
observando
zonas
del
absorbente
correspondiente
a
los
compuestos
separados. La columna de nylon se marca
con una pluma y se corta con un cuchillo
cada zona, luego se pueden extraer los
compuestos contenidos en el absorbente con
metanol, ter o el solvente adecuado. [1]
Fuente: www.aldbot.com/HPLC-Analysis.htm.
Figura 14. Cromatograma bidimensional con
diferentes sistemas de solventes.

3. Cul es el desarrollo mltiple y el

desarrollo bidimensional de la CCD?
La cromatografa de capa delgada posee un
poder mximo de resolucin en una regin
especfica. En separaciones difciles la
resolucin
puede
incrementarse
por
desarrollo mltiple. En esta tcnica despus
del primer desarrollo la placa se remueve de
la cmara, se deja secar y se desarrolla otra
vez en el mismo solvente. Estas
separaciones son ideales para compuestos
con Rf menores de 0,5. [1]

Fuente: www.aldbot.com/HPLC-Analysis.htm.
Figura 13. Cromatograma de desarrollo mltiple.

La cromatografa de capa delgada en dos

dimensiones
puede
usarse
para
la
separacin de mezclas que contienen
muchos componentes con propiedades
diferentes. Esta tcnica permite trabajar con
un amplio rango de condiciones ya que se
efectan dos desarrollos con el mismo
sistema de solventes o con dos sistemas
diferentes y una gran rea disponible. Este
mtodo es muy til para la separacin de
aminocidos. [1]

dos

4. En qu consiste la CCD preparativa?

Este mtodo cromatogrfico es ideal para la
separacin de pequeas muestras de
compuestos
ligeramente
no
voltiles.
Adems es de gran utilidad para separar
mezclas de reaccin con el objeto de obtener
muestras para estudio preliminar. Tambin
para la preparacin de muestras analticas
puras de productos naturales donde las
cantidades aisladas son muy pequeas y de
mezclas complejas. [4]
La muestra a separarse se deposita en una
lnea delgada sobre un lado de una placa
grande y se desarrolla en una direccin
perpendicular a esta lnea de manera que la
mezcla se resuelva en bandas o zonas que
se visualizan en forma no destructiva si los
compuestos
no
son
coloreados.
El
absorbente que contiene las franjas se
remueve del plato y luego se extrae con un
solvente polar para recuperar el compuesto
orgnico.
El absorbente ms utilizado en la CCD
preparativa es la slica gel, tambin se
pueden usar los dems adsorbentes
comerciales de la CCD, igualmente se usan
los mismos solventes. [1]
5. Qu es una resina de intercambio
aninica? Y una resina catinica?
Las resinas de intercambio inico son
materiales de estructura porosa e insoluble
que contienen grupos reactivos que estn
asociados a iones lbiles capaces de
intercambiarse con los del medio que los
rodea. [2]

Las resinas de intercambio inico se

clasificaron en dos grandes grupos, resinas

catinicas y resinas aninicas, estas pueden

ser resinas catinicas fuertemente o
dbilmente cidas y resinas aninicas
fuertemente o dbilmente bsicas.
Las resinas catinicas poseen cargas
negativas e interaccionan con cargas
positivas, estas generalmente son utilizadas
en dos formas, en forma libre del cido o
forma de hidrgeno y de forma salina, la
forma de hidrgeno fijara aniones y liberar
una cantidad equimolecular de iones
hidrogeno a la solucin, mientras que la
forma sdica se absorbern los aniones y se
liberar
iones
sodio,
entre
los
intercambiadores catinicos se encuentran
SO3H y -CH2SO3H.
Las resinas aninicas poseen cargas
positivas e interaccionan con cargas
negativas, adems tienen propiedades que
dependen de la fuerza bsica de la
naturaleza del grupo activo y tambin de su
posicin, entre las resinas aninicos se
encuentran los grupos amino, -NH2 y amino
sustituidos. [3]
6. Indique algunas de las aplicaciones de
la cromatografa de adsorcin en
columna.
La cromatografa de absorcin en la que la
fase mvil es un lquido que fluye a travs de
un slido por efecto de la gravedad se utiliza
para concentracin de trazas, separacin de
iones interferentes en anlisis clsico,
separaciones de iones de caractersticas
similares, separacin de componentes de
una sntesis orgnica, separacin de
colorantes, separacin e identificacin de
hioscina y de morfina, desmineralizacin del
agua, preparacin de disoluciones patrn y
disolucin de sustancia insolubles. [6]
CONCLUSIONES

La cromatografa de capa delgada es

necesaria para conocer el tipo de
componentes de la mezcla, sin embargo
no
proporciona
una
separacin
cuantitativa; para esta es necesaria utilizar
un procedimiento complementario como
es la cromatografa de columna.
Por medio de los valores calculados de Rf
para las dos placas analizadas, se puede
identificar los componentes de una

mezcla, ya que estos se comparan con los

valores arrojados de las posibles
sustancias que se creen que estn dentro
de esta.

La separacin de un tinte depende de la

fuerza con la que interacta cada
componente de la mezcla a separar con la
fase
estacionaria. En ese caso las
interacciones naranja de metilo - almina
son las mayores debido a la alta polaridad
que las interacciones azul de metilenoalmina, por lo cual el azul de metileno se
separa con mayor velocidad, quedando el
naranja de metilo retenido.

Las interacciones que ocasionaron la

adsorcin fueron las fuerzas de atraccin
entre las molculas de fase estacionaria y
de la fase mvil (EtOH) como dipolodipolo, puentes de hidrgeno y de Van der
Waals.

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klqx2DJWOXwharJ1nknvlirnnE&hl=es&ei
=Fqu3TJ3WKcG78gbmybSTCg&sa=X&oi
=book_result&ct=result&resnum=6&ved=0
CDYQ6AEwBQ#v=onepage&q=por
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