Chimie : 2nde

Activit.4 : Chromatographie sur couche mince de lhuile essentielle de lavande

Objectifs :
Comprendre le principe de la chromatographie sur couche mince (CCM) et la raliser.
Sparer par CCM les constituants de l'huile essentielle de lavande (extraite au TP prcdent) et les identifier.

I. Principe de la chromatographie sur couche mince :

La CCM est une mthode permettant de sparer les constituants dun mlange et ventuellement de les identifier.
Le mlange sparer est dabord dpos sur une ligne horizontale, appele ligne de dpt, sur une plaque (gel de silice en
couche mince sur une plaque daluminium). Puis, il est entran par un solvant appropri qui migre par capillarit sur la plaque.
Les constituants du mlange se sparent par migration diffrentielle : cette opration sexplique par un double phnomne :
Les constituants du mlange ont des solubilits diffrentes dans lluant : chacun dentre eux est dautant plus
entran par lluant quil est soluble.
Les constituants du mlange sont absorbs diffremment sur gel de silice : ils ne sont pas retenus de la mme
manire par ce dernier.
Aprs migration, les tches doivent tre rvles.

II. Mode opratoire : voir fiche mthode en pages 2 et 3.

1. Matriel utilis :
Cuve lution avec couvercle.
Eluant utilis : 20% dactate dthyle mlang 80%de cyclohexane).
Dpts : nots X (pour lessence de lavande extraite par hydrodistillation lors du prcdent TP), A (pour le linalol),
et B (pour lactate de linalyle commercial).
Trois micropipettes (ou 3 piques apritif).
Un sche-cheveux.
Une solution de permanganate de potassium 0,02 mol.L-1 pour la rvlation.
2. Protocole exprimental :
Effectuer les diffrentes tapes dcrites dans la fiche mthode en pages 2 et 3.
Pour la rvlation de ltape 4, plonger le chromatogramme dans la solution de permanganate de potassium, le sortir
et le rincer leau distille. Le scher et entourer les diffrentes tches.

III. Analyse du chromatogramme :

1. Quobservez-vous lors de llution ?
2. On dit que la plaque et lluant sont 2 phases distinctes.
Quelle est la phase liquide ? Quelle est la phase solide ? Quelle est la phase mobile ? Quelle est la phase fixe ?
3. Que se passe-t-il pendant llution, lorsque lluant entre en contact avec les dpts sur la plaque ?
4. Quobserve-t-on pour le dpt X ? En combien de tches sest-il dissoci ? Que peut-on dire de la solution X ?
5. Mmes questions pour les dpts B et C.
6. Mesurer et noter la hauteur H parcourue par le solvant et la hauteur h atteint par chaque tche.
h
7. Lespce prsente dans une tche est caractrise par son rapport frontal Rf, dfini par Rf = .
H
Calculer le rapport frontal de chaque tche.
8. Sachant que deux corps prsentant le mme rapport frontal R f sur la mme plaque sont identiques, indiquer quels
sont les constituants de lextrait de lavande que vous pouvez identifier.

Chimie : 2nde

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Fiche mthode : Ralisation dune chromatographie sur couche mince (CCM)
I. Premire tape : Prparation de la cuve lution
Voir schma ci-dessous
1 Ouvrir le flacon contenant lluant.
2 Verser une hauteur denviron 5 mm dluant dans la cuve lution.
3 Refermer le flacon.
4 Recouvrir la cuve laide du couvercle et attendre environ dix minutes. Pendant ce temps passer ltape 2.
Bouchon

Couvercle
2
4

Eluant

5 mm
Cuve lution

II. Deuxime tape : Prparation de la plaque chromatographie

1 Tracer la rgle et au crayon papier, et sans appuyer, une ligne fine environ 1 cm du bord infrieure de la plaque.
2 A laide de traits fins, reprer les positions des dpts effectuer.
3 A laide dune micropipette dposer une goutte du mlange X analyser. En changeant chaque fois de micropipette
faire les deux dpts despces chimiques de rfrence A et B. Le dpt doit seffectuer par petites touches
brves, de faon obtenir une tche de diamtre gal environ 2 mm.
4 A laide dun sche-cheveux, scher la plaque.

1 cm

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III. Troisime tape : llution

1 Oter le couvercle de la cuve lution.
2 Introduire la plaque dans la cuve lution, sans toucher les bords.
3 Recouvrir la cuve avec le couvercle, et laisser llution seffectuer jusqu ce que le front du solvant se situe environ
1 cm du sommet de la plaque.

1
X

IV. Quatrime tape : Rvlation et exploitation du chromatogramme

1 Sortir le chromatogramme de la cuve et reprer le front du solvant laide dun trait horizontal
2 Scher la plaque.
Si les tches du chromatogramme restent invisibles, utiliser un moyen de rvlation adapte :
- Immersion dans une solution de permanganate de potassium
- Exposition aux vapeurs de diiode
- Exposition aux rayons ultraviolets (UV)
3 Reprer les tches situes la mme distance de la ligne de dpt, et identifier les espces chimiques contenues
dans le mlange X. Calculer les rapports frontaux Rf pour chaque espce chimique : voir schma ci-dessous pour
lexemple du rapport frontal RfB de lespce chimique B.

H
X

B
X

1
X
2

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hB

3
RfB =

hB
H

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