Vous êtes sur la page 1sur 18

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE

Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

SESION 01: LOS AMINOCIDOS; SILLARES DE LAS PROTENAS.


Los veinte aminocidos hallados
corrientemente como productos de la
hidrlisis de las protenas se parecen
todos en que contienen un grupo carboxilo y un grupo - amino, pero
difieren entre s en la naturaleza
qumica de los grupos R sustituidos
en el tomo de carbono . Se
clasifican basndose en la polaridad
de sus grupos R. La clase no polar
(hidrfoba) comprende la alanina, la
leucina, la isoleucina, la valina, la
prolina, la fenilalanina, el triptfano y
la metionina. La clase neutra polar
incluye la glicocola, la serina, la
treonina, la cistena, la tirosina, la
asparagina y la glutamina. En la clase con carga negativa (cida) se hallan comprendidos los
cidos asprtico y glutmico. Finalmente, en la clase bsica cargada positivamente se hallan
la arginina, la lisina y la histidina. En unas pocas protenas especializadas pueden existir otros
aminocidos, tales como la hidroxiprolina, la hidroxilisina y la desmosina.
Los aminocidos monoaminos- mono carboxlicos se comportan como cidos dibsicos
(+NH3CHRCOOH) a valores bajos de pH. A medida que se aumenta el pH a las proximidades
de 6, se pierde el protn del grupo carboxilo para constituir la especie dipolar o in hbrido
+NH3CHRCOO- que es elctricamente neutra. Un aumento ulterior del pH origina la prdida
de un segundo protn y se produce la especie inica NH2CHRCOO- . El pK de la primera
ionizacin, es decir, del grupo - carboxilo, se halla entre 2,0 y 2,5; el pK de la segunda etapa
se halla entre 9 y 10. Los aminocidos que poseen grupos R ionizables pueden existir en
especies inicas adicionales, que dependen de los valores de pK de sus grupos R. El tomo
de carbono- de los aminocidos es asimtrico, excepto en la glicocola, y puede existir por

tanto en dos formas esteroismeras por lo menos; en las protenas solamente se encuentran
los esteroismeros L, que se hallan relacionados con el L- gliceraldehdo.

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

El grupo - amino se acila tambin con facilidad. El bencilclorocarbonato rinde derivados


benciloxicarbonlicos a partir de los aminocidos. Los grupos carboxilo y R de los aminocidos
muestran tambin reacciones caractersticas. El grupo tiol de la cistena se oxida con facilidad
para dar cistina que, a su vez puede reducirse a cistena. Tales reacciones son
extremadamente tiles para la identificacin y el anlisis de aminocidos.
Las mezclas complejas de aminocidos pueden separarse, identificarse y determinarse
mediante cromatografa sobre papel o de columnas de intercambio inico o por electroforesis
sobre papel. Estos mtodos utilizan las diferencias de comportamiento cido- bsico y/o la
solubilidad de los diferentes aminocidos.

1)

La

siguiente corresponde a la curva de titulacin del aminocido

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

Histidina:
a) Dibuja las estructuras del aminocido en cada punto de ionizacin.

b) Identifica los puntos en esta curva de titulacin correspondientes a las cuatro especies
inicas.
c) Identifica los puntos donde la carga neta es +2, +0,5, 0 y -1.
d) Identifica el punto en el que el pH es igual al pKa del grupo R. e) En cual o cuales pHs la
Histidina se comportara como buen amortiguador.
2) Por qu con solo 20 aminocidos (aa) pueden sintetizarse miles de protenas
diferentes?

3) Qu es un aminocido? Cul es su estructura? A qu se llama aminocidos


esenciales?
1. En base a la curva de titulacin de la glicina mostrada en el grfico, responda lo
siguiente:
a) En qu punto la glicina estar principalmente en forma de +H3N-CH2-COOH? ____
b) En qu punto el pH ser igual al pKa del grupo carboxilo? ____
c) En qu punto la carga neta promedio ser +1/2? ____
d) En qu punto el grupo amino de la mitad de los Aas estar ionizado? ___
e) En qu punto el pH ser igual al pKa del grupo amino protonado? ____
f) A qu pHs tendr la glicina su mxima capacidad buffer? ________
g) En qu punto la carga neta promedio ser cero? ____
h) Cules son los puntos lmites del buffer hacia el cido?_________
i) En qu punto el grupo carboxilo estar titulado completamente (primer punto de
equivalencia)? ____
j) En qu punto la mitad de los grupos carboxilo estarn ionizados? ____
k) En qu punto la glicina estar completamente titulada (segundo punto de
equivalencia)? ____
l) En qu punto la estructura de la especie predominante ser +H3N-CH2-COO? ____
m) Cules son los puntos lmites del buffer hacia la base?_________
n) En qu punto la carga neta promedio ser 1?____
o) En qu punto la carga neta promedio ser -1/2?____
p) En qu punto la estructura de las especies predominantes corresponden a una
mezcla 50:50 de +H3N-CH2-COO y H2N-CH2-COO? ____
q) En qu punto las estructuras de las especies predominantes consisten en una mezcla
50:50 de +H3N-CH2-COOH y +H3N-CH2-COO? ____
r) Se desea utilizar la glicina como buffer, qu puntos representan la peor regin de pH
para la capacidad buffer? ______________
s) En qu punto de la titulacin la especie predominante es H 2N-CH2-COO?

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

t) Qu indica el punto isoelctrico? ________________________________


u) Qu indica el final de la titulacin?_______________________________

SESION 02: PROTENAS: CONFORMACIN TRIDIMENSIONAL.


Cada protena posee al menos una conformacin tridimensional en la que es estable y activa
en condiciones biolgica de temperatura y de pH: es la conformacin nativa. El anlisis por
rayos X de las - queratinas, protenas fibrosas del pelo y de la lana, muestra que sus
cadenas polipeptdicas son arrollamientos - helicoidales dextro, que poseen 3,6 restos
aminocidos por vuelta y que se mantienen unidos por formacin del mximo nmero posible
de enlaces de hidrgeno intracatenarios. Cada tomo de oxgeno del carbono peptdico en la
hlice se halla unido mediante enlace de hidrgeno al NH- del enlace peptdico situado tres
restos mas all. En las - queratinas, los enlaces disulfuro transversales de la cistina
mantienen unidos los arrollamientos - helicoidales paralelos. La fibrona de la seda que es
una - queratina posee una estructura de lmina plegada en la que los esqueletos
polipeptdicos se hallan en conformacin extendida de la cadena polipeptidica y se hallan
unidos transversalmente mediante enlaces de hidrgeno intercatenarios. Las tres cadenas del
colgeno, que es una protena fibrosa, estn constituidas por tres hlices en sentido levo, las
cuales se entrelazan para formar la unidad repetida bsica de tropocolgeno de una fibrilla de
colgeno. El colgeno es rico en glicocola, prolina e hidroxiprolina.

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

El

anlisis por rayos X de protenas globulares tales como la mioglobina muestra que sus
cadenas se hallan plegadas muy compactamente, dejando poco espacio en el interior para
molculas de agua. Todos o casi todos los grupos R polares de las protenas globulares se
hallan sobre la superficie y estn hidratados; los residuos hidrofbicos permanecen ocultos en
el interior. En funcin de su secuencia aminoacdica, las protenas globulares contienen
cantidades muy variables de hlice o de conformacin . Los restos de prolina dan lugar a
curvaturas en los arrollamientos - heliciodales.
la estructura cuaternaria de protenas oligomricas tales como la hemoglobina, viene tambin
determinada por la secuencia aminoacdica primaria de los componentes de las cadenas
polipeptdicas. La hemoglobina puede unir cuatro molculas de oxgeno en una reaccin que
indica que las subunidades interaccionan de modo cooperativo. La unin del oxgeno va
acompaada por cambios de conformacin de las subunidades. Los cambios de estado
conformacional por la unin de ligandos se producen en muchas protenas oligomricas.
Puede explicarse bien por transiciones secuenciales de sucesivas subunidades o por
transiciones simtricas todo o nada de la molcula oligomrica completa.

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

Responda las siguientes preguntas.


1.

Define enlace peptdico. Cmo se produce? Forma un dipptido partiendo de la frmula


general de los aminocidos. Qu caractersticas tiene dicho enlace?

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________
2. Explica brevemente los tipos caractersticos de la estructura terciaria de las protenas.

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
_____________________
3. Qu es un aminocido? Cul es su estructura? A qu se llama aminocidos esenciales?

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
_____________________
4. En qu consiste la desnaturalizacin de una protena? Se puede producir su
renaturalizacin?

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
_____________________
5. Explica cmo desempean las protenas la funcin del transporte.

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
______________
6. Realiza una clasificacin de los aminocidos proteicos. Escribe algn ejemplo de cada uno de
ellos.

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

___________________________________________________________________________
___________________________________
7. Sabras explicar de qu manera se consiguen la formacin y la estabilidad de protenas
fibrosas como el colgeno?

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
______________
8. Explica de qu depende la gran variedad en el tipo de funciones que desempean las
protenas.

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
______________
9. Poseen todos los aminocidos un carbono asimtrico? Qu implica el hecho de que posean
dicho carbono?

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
______________
10. Qu diferencias hay entre la -hlice y la lmina plegada de la estructura secundaria de las
protenas?

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
_____________________
11. Qu es un grupo prosttico? Enumera los grupos de protenas que contengan un grupo
prosttico, indicando de qu sustancia se trata.

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
_____________________
12. Explica el carcter anftero de los aminocidos.

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
______________
13. De qu dependen las estructuras primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria de las
protenas?

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
______________
14. Realiza una clasificacin de las protenas simples atendiendo a su funcin.

___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

SESION 03: LAS PROTENAS Y SUS FUNCIONES.


La funcin primordial de la protena es producir tejido corporal y sintetizar enzimas, algunas
hormonas como la insulina, que regulan la comunicacin entre rganos y clulas, y otras
sustancias complejas, que rigen los procesos corporales. Las protenas animales y vegetales
no se utilizan en la misma forma en que son ingeridas, sino que las enzimas digestivas
(proteasas) deben descomponerlas en aminocidos que contienen nitrgeno. Las proteasas
rompen los enlaces de pptidos que ligan los aminocidos ingeridos para que stos puedan
ser absorbidos por el intestino hasta la sangre y reconvertidos en el tejido concreto que se
necesita.
Es fcil disponer de protenas de origen animal o vegetal. De los 20 aminocidos que
componen las protenas, ocho se consideran esenciales es decir: como el cuerpo no puede
sintetizarlos, deben ser tomados ya listos a travs de los alimentos. Si estos aminocidos
esenciales no estn presentes al mismo tiempo y en proporciones especficas, los otros
aminocidos, todos o en parte, no pueden utilizarse para construir las protenas humanas. Por
tanto, para mantener la salud y el crecimiento es muy importante una dieta que contenga
estos aminocidos esenciales. Cuando hay una carencia de alguno de ellos, los dems
aminocidos se convierten en compuestos productores de energa, y se excreta su nitrgeno.
Cuando se ingieren protenas en exceso , lo cual es frecuente en pases con dietas ricas en
carne, la protena extra se descompone en compuestos productores de energa. Dado que las
protenas escasean bastante ms que los hidratos de carbono aunque producen tambin 4
caloras por gramo, la ingestin de carne en exceso, cuando no hay demanda de
reconstruccin de tejidos en el cuerpo, resulta una forma ineficaz de procurar energa. Los
alimentos de origen animal contienen protenas completas porque incluyen todos los
aminocidos esenciales. En la mayora de las dietas se recomienda combinar protenas de
origen animal con protenas vegetales. Se estima que 0,8 gramos por kilo de peso es la dosis
diaria saludable para adultos normales.

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

Muchas enfermedades e
infecciones producen una
prdida
continuada
de
nitrgeno en el cuerpo.
Este problema debe ser
compensado con un mayor
consumo
de
protena
diettica. Asimismo, los
nios tambin precisan ms
protena por kilogramo de
peso
corporal.
Una
deficiencia de protenas
acompaada de falta de
energa da origen a una
forma
de
malnutricin
proteico-energtica
conocida con el nombre de
marasmo,
que
se
caracteriza por prdida de
grasa corporal y desgaste de msculos.
En relacin a todo lo que usted a aprendido en clases, mas las lecturas
complementarias responda las siguientes preguntas de alternativas.
1. Cul es la definicin de protena?
a) Son polmeros constituidos por la unin mediante enlaces qumicos de unidades menores
denominadas nucletidos.
b) Son biomolculas orgnicas formadas bsicamente por carbono e hidrgeno y generalmente
tambin oxgeno; pero en porcentajes ms bajos.
c) Son polmeros formados por la unin, mediante enlaces peptdicos, de unidades de menor masa
molecular denominadas aminocidos.
d) Ninguna de las citadas anteriormente.
2. Qu tipo de funcin realiza el colgeno y en que consiste?
a) Defensiva; es un anticoagulante de la sangre.
b) Reserva; utilizado como nutriente durante el desarrollo embrionario.
c) Movimiento; utilizado durante la contraccin muscular
d) Estructural; mantiene unidos tejidos animales y forma tendones y matriz de huesos y cartlagos.
3. Cul de las siguientes protenas realiza una funcin de tipo hormonal que consiste en
disminuir el nivel de glucosa en la sangre?
a) Insulina
b) Queratina.
c) Dineina.
d) Ovoalbmina.
4. La estructura de un aminocido esta formada por:
a) Un carbono unido a un hidrgeno, un grupo cetona y un grupo amino.
b) Un carbono unido a un hidrgeno, un radical, un grupo amino y otro grupo carboxilo.
c) Un carbono unido a un radical y un grupo carboxilo.
d) Un nico hidrgeno unido a un grupo aldehido.

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

5. Los aminocidos que poseen ms de un grupo amino en su estructura como la histidina, la


arginina o la lisina pertenecen al grupo de:
a) Aminocidos polares cidos.
b) Aminocidos apolares o hidrfobos.
c) Aminocidos polares no ionizables o hidroflicos.
d) Aminocidos polares bsicos.
6. Indica cuantos aminocidos esenciales poseen los adultos y responde adems a la siguiente
cuestin, los aminocidos esenciales son aquellos que:
a) El cuerpo humano puede fabricar con mucha mayor facilidad que los dems, en adultos son 12.
b) El cuerpo humano no puede fabricar ni sintetizar y debe obtener a travs de la ingestin de ciertos
alimentos. En adultos son 8.
c) Poseen una estructura totalmente diferente a los dems aminocidos, con diferentes grupos y
enlaces, de ah el nombre de aminocidos esenciales. En adultos son 15.
d) Todas las afirmaciones anteriores son falsas. Ningn aminocido es esencial para el ser humano.
7. Qu quiere decir que los aminocidos poseen un carcter anftero?
a) Que son compuestos slidos y cristalinos.
b) Que presentan un elevado punto de fusin.
c) Son solubles en agua.
d) Pueden comportarse como base o como cido dependiendo de su in dipolar zwitterion.
8. En la siguiente imagen el aminocido estara comportndose como:

a) Base (por eso es el grupo amino el nico que finalmente queda ionizado.
b) cido (por eso es el grupo carboxilo el nico que finalmente queda ionizado.
c) Ambos, tanto cido como base.
d) Ninguno de ellos, ya que el aminocido mostrado no est ionizado.
9. El enlace peptdico es una reaccin de condensacin en la que se produce una amida y una
molcula de agua. Dicho enlace se forma cuando reaccionan:
a) El radical de un aminocido con el grupo amino de otro.
b) El grupo cido de un aminocido con el grupo amino de otro.
c) El radical de un aminocido con el grupo cido de otro.
d) El grupo amino de un aminocido con el grupo tambin amino de otro.
10. Expresa cuales son los enlaces que pueden girar en la siguiente fotografa:

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

a) Todos ellos.
b) Ninguno de ellos.
c) Los nicos enlaces que pueden girar son C-C y C-N ya que no estn dentro del
enlace
peptdico (este posee un carcter de doble enlace, supone una estructura
fija que no permite el
movimiento de los tomos que lo forman).
d) Unicamente los que se encuentran dentro del enlace peptdico, ya que este posee carcter
de un enlace simple.
11. A qu estructura pertenece la siguiente imagen?
a) Estructura secundaria.
b) Estructura terciaria.
c) Estructura primaria.
d) Estructura cuaternaria

12. La estrucutra secundaria de una proteina es:


a) La representacin tridimensional o disposicin de la estructura primaria en el espacio.
b) La secuencia de aminocidos que componen la cadena polipeptdica y el orden en que dichos
aminocidos se encuentran.
c) La disposicin espacial de un polipptido al plegarse sobre s misma adoptando una forma espacial
y caractersticas determinadas.
d) Unin mediante enlaces dbiles (no covalentes) de varias cadenas polipeptdicas con estructura
terciaria, idnticas o no, para formar un complejo protico.
13. Existe una forma en la estructura terciaria que poseen las protenas que realizan funcin
estructural, de proteccin o ambas, son insolubles en agua y disoluciones salinas (betaqueratina, colgeno...), dicha forma es:
a) Fibrosa o filamentosa.
b) Globular.
c) Rectilnea.
d) Ninguna de ellas.
14. La cromatina, ribosomas, histonas y protaminas de eucariotas son ejemplos de protenas
pertenecientes a un grupo denominado:
a) Fosfoprotenas.
b) Glucoprotenas.
c) Lipoprotenas.
d) Nucleoprotenas.
15. El concepto de desnaturalizacin de una protena quiere decir que:

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

a) Las diferencias existentes entre protenas con la misma funcin son muchas en especies alejadas
evolutivamente.
b) Se produce la prdida de todas las estructuras de orden superior (secundaria, terciaria y
cuaternaria) quedando la protena reducida a un polmero con estructura primaria.
c) Las protenas debido a su gran tamao, forma disoluciones coloidales al disolverse.
d) Al ionizarse los radicales R se establecen puentes de hidrgeno con molculas de agua. La protena
que recubierta por molculas de agua que impide la unin de otras protenas, que provocaran su
precipitacin.

SESION 04: ENZIMAS: MECANISMO, ESTRUCTURA Y REGULACIN.


La topografa del centro activo de las enzimas puede ser estudiada mediante la
determinacin de la especificidad de sustrato, utilizando reactivos qumicos especficos
capaces de modificar covalentemente los grupos funcionales esenciales para la catlisis, por
marcaje de afinidad y mediante anlisis por rayos X de los complejos cristalizados enzimasustrato o enzima- inhibidor. Los grupos R de la serina, la histidina, la lisina y la cistena,
presente en las protenas enzimticas, intervienen frecuentemente en la catlisis en el centro
activo.

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

Las reacciones catalizadas por las enzimas son de 108 a 1020 veces ms rpidas que las
correspondientes reacciones no catalizadas. Una parte principal del incremento de velocidad
donde

probablemente de la colocacin exacta del sustrato en la proximidad y orientacin apropiadas


respecto al grupo cataltico, de modo que se alcance con facilidad el estado de transicin. En
algunas enzimas se produce un incremento de velocidad menor debido al funcionalismo de la
catlisis covalente, en la cual un compuesto covalente enzima- sustrato se forma y se
destruye rpidamente el incremento de velocidad se hace tambin posible mediante la
catlisis cido- base de carcter general promovida por los grupos dadores o aceptadores de
protones situados en el centro activo. La velocidad experimenta un incremento a una medida
que por el momento no puede evaluarse debido a los cambios de conformacin que se
producen cuando se combinan la enzima y el sustrato. Por otra parte, se est comenzando a
comprender el mecanismo de accin de algunas enzimas como la quimotripsina y la lisozima.

Algunas enzimas estn biolgicamente adaptadas para desempear una funcin cataltica
adems de una reguladora. Las enzimas alostricas resultan moduladas por enlace no
covalente con algn metabolito especfico. Por regla general, catalizan la primera reaccin de
una secuencia multienzimtica y con frecuencia son inhibidos por el producto final de la
secuencia que se une a un centro regulador especfico, o alostrico de la molcula
enzimtica. Algunas enzimas alostricas son estimuladas por su modulador, que puede ser el
mismo sustrato. Las enzimas alostricas muestran una cintica atpica que no parece seguir
la ecuacin de velocidad clsica de Michaelis- Menten. Algunas enzimas alostricas muestran
curvas sigmoidales en la representacin de la velocidad inicial frente a la concentracin del
sustrato, mientras que otros muestran curvas hiperblicas no rectangulares. Cuando la
molcula del modulador se halla unida a su centro especfico, cambia el valor de la KM

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

aparente o de Vmax de la enzima. Casi todas las enzimas alostricas conocidas poseen
mltiples subunidades, que en algunos casos son de dos tipos; catalticas y reguladoras. Se
han propuesto varios para explicar el mecanismo de regulacin alostrico. El modelo de
simetra propone que la molcula de la enzima alostrica existe solamente en una de las dos
conformaciones posibles, activa o inactiva, mientras que el modelo secuencial postula que las
subunidades cambian de conformacin en una secuencia determinada; es decir, que no lo
hacen simultneamente, de modo que pueden existir estados intermedios con diferente
actividad cataltica. Otra clase de enzimas reguladoras experimentan su interconversin entre
las formas activas e inactivas por modificacin covalente de algn grupo especfico de la
molcula de la enzima debido a la accin de otras enzimas. Constituye un ejemplo la
glucgeno- fosforilasa, que se convierte en su forma b, inactiva, por hidrlisis enzimtica de
sus restos de serina fosforilados y por disociacin de su estructura tetramrica en una forma
dmera; esta ultima puede convertirse de nuevo en fosforilasa a, activa, mediante fosforilacin
enzimtica.
Algunas enzimas aparecen en formas mltiples, llamadas isozimas, dentro de una especie
determinada o tipo de clula. Contienen diferentes proporciones de dos o ms tipos de
cadenas polipeptdicas lo que determina que las formas isozmicas difieren en KM y Vmax.
Responda las siguientes preguntas.
1. Explica cules son los principales factores que afectan a la actividad enzimtica.

______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
_________________
2. Qu es un inhibidor y de cuntos tipos puede ser la accin que realizan?
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
________
3. Diferencia entre cofactor y coenzima.
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
________
4. Cmo se define la velocidad de un proceso enzimtico? Qu efecto tiene sobre ella la
cantidad de sustrato presente en el medio de reaccin?

______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
_________________
5. Dnde actan los enzimas alostricos?
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
________
6. Define centro activo y complejo enzima-sustrato.

______________________________________________________________________
______________________________________________________________________

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

______________________________________________________________________
_________________
7. En los enzimas alostricos, es lo mismo el centro activo que el centro alostrico?
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
________
8. Cita tres propiedades por las que podamos considerar a los enzimas como catalizadores.
Qu es el centro activo?
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
________
9. Diferencias entre inhibicin competitiva y no competitiva.
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
________
10. Principales tipos de coenzimas.
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________
11. Qu caractersticas poseen los enzimas alostricos?

___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
_________

TALLER 05: ENZIMAS: CINTICA E INHIBICIN.


Las enzimas se clasifican basndose en la reaccin que catalizan. Algunas enzimas son protenas
simples; otras son protenas conjugadas y contienen grupos prostticos constituidos por iones metlicos,
por coenzimas, o por ambos. Las coenzimas y los grupos prostticos actan como transportadores
intermediarios de grupos funcionales especficos, de tomos o de electrones. Muchos coenzimas
contienen una molcula de una vitamina determinada, nutriente orgnico del que solo se precisan
vestigios para la funcin celular normal.

En las reacciones catalizadas por enzimas, un incremento de la concentracin del sustrato aumenta la
velocidad de la reaccin hasta que se alcanza un punto en que dicha velocidad se hace independiente de
la concentracin del sustrato. En este punto la enzima se haya saturada y la reacciones de orden cero con

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

respecto al sustrato. Para cada enzima hay una concentracin de sustrato caracterstica (KM, la constante
de Michaelis- Menten) a la que la velocidad de la reaccin es la mitad de la reaccin mxima. La
reaccin cuantitativa entre la velocidad inicial de la reaccin, la concentracin del sustrato KM y la
velocidad mxima de una enzima viene dadas por la ecuacin de Michaelis- Menten. Su deduccin se
basa en la suposicin de que se forma un complejo enzima- sustrato que es reversible, como etapa
esencial de la catlisis. Las enzimas exhiben tambin un pH ptimo y un intervalo de temperatura en el
que son estables y activos.

Los inhibidores competitivos de las enzimas son aquellos que reaccionan reversiblemente con la enzima
libre en competencia con el sustrato para formar un complejo enzima-inhibidor; su accin puede
invertirse por incremento de la concentracin del sustrato. Los inhibidores competitivos no reaccionan
con la enzima libre, pero se combinan reversiblemente con el complejo enzima- sustrato, impidiendo la
formacin de los productos. Los inhibidores no competitivos reaccionan reversiblemente tanto con la
enzima libre como con el complejo enzima- sustrato. Los inhibidores irreversibles, producen una
modificacin qumica permanente de algn grupo funcional esencial en la molcula de la enzima. Las
experiencias cinticas se utilizan para distinguir entre los diversos tipos de inhibicin reversible de las
enzimas; las representaciones dobles recprocas son especialmente tiles para el anlisis de estos datos
cinticos.
En las reacciones bisustrato de desplazamiento simple al azar, la enzima forma un complejo ternario con
ambos sustratos, los cuales pueden adicionarse en cualquier orden. En las reacciones de desplazamiento
simple ordenadas, existe una secuencia obligatoria en la adicin de los sustratos para formar el complejo
ternario. En las reacciones de doble desplazamiento, o ping- pong, un sustrato reacciona con la enzima y
su correspondiente producto se libera antes de que se combine con el otro sustrato.

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

Actividad
En base a los contenidos tratados en clases y a la lectura post sesin, responda las siguientes preguntas.
1. Defina:
a) Efector negativo
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
______________
b) Sitio regulador
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
______________
c) Cooperatividad
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
______________
d) Isoenzima
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
______________
2.Describa las diferencias que existen entre los sitios catalticos y sitios reguladoras de una enzima
alostrica.
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHILE


Talleres de Bioqumica

DIRECCIN DE CIENCIAS BIOMDICAS


Facultad de Ciencias de la Salud

____________________________________________________________________________________
____________________________
3. Dibuje un grfico para cada situacin cintica
a) Velocidad inicial versus concentracin de enzima

b) Velocidad inicial versus concentracin de sustrato para una enzima que obedece la ecuacin de
Michaelis-Menten

c) Velocidad inicial versus concentracin de sustrato para una enzima alostrica

Vous aimerez peut-être aussi