Laboratorio Biologia Molecular

Informe de laboratorio Biologa Molecular N1
Recomendaciones e identificacin de equipos del laboratorio de

Biologa Molecular
Integrantes
1. Programa de Ingeniera Biotecnolgica, Biologa Molecular, Universidad Francisco de Paula Santander.
Ccuta, Norte de Santander, Colombia

Fecha
Resumen:
Ahora ms que nunca la biologa molecular nos permite entender como funciona la vida
mediante el desarrollo de nuevas tcnicas moleculares. Esta practica parte de la premisa de
que el estudiante al conocer los equipos y las normas que rigen el laboratorio desarrollar
herramientas que le permitan desenvolverse en un entorno investigativo; desde este punto
vista, se atendi a las recomendaciones para el trabajo eficiente dentro del laboratorio y se
identificaron los equipos disponibles. Entre los equipos que se encontraron estn el
termociclador, cmara de electroforesis, transiluminador, cabina para PCR, etc. Se pudo
concluir que las herramientas con las que cuenta el laboratorio son las indicadas para el
desarrollo de las futuras prcticas, sin embargo queda planteada la necesidad de actualizarlas
en la medida de las posibilidades, puesto que nuevas tcnicas moleculares requieren nuevos
equipos.
Palabras claves: Laboratorio, equipos, recomendaciones, tcnicas moleculares, PCR.
Abstract:
Now more than ever molecular biology allows us to understand how life works through the
development of new molecular techniques. This practice stems from the premise that the
student at getting to know the equipment and rules that manage the laboratory will develop
tools that allows them to unwrap in a research environment; from this point of view, the
recommendations were attended so that the work inside the laboratory stayed efficiently and
the available equipment was identified. Among the equipment that were identified there was a
thermocycler, electrophoresis chamber, transilluminator, PCR cabin, etc. It could be concluded
that the tools the laboratory counts on are the right ones for the development of future
practices, is yet raised the need to update them as the possibilities extents, as a result that
new molecular techniques requires new equipment.
Key words: Laboratory, equipment, recommendations, molecular techniques, PCR.

2
para el buen desempeo en las actividades

INTRODUCCIN
La
biologa
molecular
del laboratorio; entre las mas importantes

se
ocupa
se
encuentran,
la
preparacin
con
principalmente de la comprensin de los
anterioridad de los protocolos, contar con la
mecanismos
la
indumentaria completa, ser precavido con
transmisin y expresin de la informacin
el uso de los equipos, y mantener ordenada
gentica, que en ltimo trmino establecen
y limpia el rea de trabajo para prevenir
la estructura y la funcin celular 1. Para la
accidentes.
responsables
de
comprensin de dichos mecanismos se

utilizan tcnicas moleculares que permiten
Posteriormente
se
analizar los procesos involucrados. Sin
registraron
embargo antes de poder abordar estas
bsicos utilizados para el desarrollo de
tcnicas y las metodologas del laboratorio
tcnicas
de biologa molecular, se deben establecer
funcin y en que procesos se aplican.
en
identificaron
fotografas
moleculares,
los
equipos
mencionando
su
bases fundamentales en el conocimiento,

manejo de los equipos y buenas prcticas
Finalmente se debati que otros equipos
en bsqueda de eficiencia y seguridad .
podran hacer parte del laboratorio y
En consecuencia, el presente laboratorio
actualizarse para la implementacin de
tiene como finalidad identificar la utilidad de
nuevas tcnicas.
cada uno de los equipos pertenecientes al

RESULTADOS Y DISCUSIONES
laboratorio de Biologa Molecular, as como

las normas de bioseguridad que se deben
tener en cuenta durante el desarrollo de las
Equipos
de
prcticas.
molecular:
laboratorio
de
biologa
MATERIALES Y METODOS
La prctica se llev a cabo en el laboratorio
Cmara Electroforesis horizontal:
de Biologa Molecular de la Universidad
La
electroforesis
constituye
parte
Francisco de Paula Santander sede Los
importante del anlisis de los cidos
Patios, se discutieron las recomendaciones
nucleicos y protenas. El principio bsico de

la electroforesis consiste en la migracin de

3
las molculas a travs de un gel u otro tipo
permitiendo
realizar
de matriz de naturaleza porosa, en el cual,
replicacin del ADN.
el
proceso
de
por accin de un campo elctrico, se

separan de acuerdo a su tamao o peso
molecular. En la electroforesis de tipo
horizontal (Fig. 1), se analizan tanto
molculas de ADN como de ARN.
Fig. 2 Termociclador
Microcentrifugadora:
Es una mquina que pone en rotacin una

muestra para separar por fuerza centrfuga
sus componentes o fases (generalmente
Fig. 1Cmara de electroforesis horizontal
una slida y una lquida), en funcin de su
Termociclador:
densidad, la encontrada en el laboratorio
La reaccin en cadena de la polimerasa
(Fig. 2)emplea volmenes pequeos (1,5-
PCR es una reaccin de sntesis de ADN
2mL) y realiza mezclas entre 0-12000rpm.
in Vitro que permite la obtencin de un gran

nmero de copias de una secuencia
especfica de bases a partir de una
molcula
de
ADN
que
acta
como
sustrato.2
Para llevar a cabo esta sntesis de ADN in
Vitro se utiliza un dispositivo electrnico
llamado termociclador (Fig. 3), que tiene
como
funcin
generar
variaciones
de
temperaturas controladas sobre la muestra,

para
lograr
la
reaccin
mencionada,
Fig. 2 Microcentrifugadora
Equipo
Plancha de Calentamiento:
diseado
para
suplir
las
necesidades de calentamiento y agitacin

4
de modo magntico, su funcionamiento se

basa en un sistema elctrico, controlado
por un termostato de alta sensibilidad
capaz
de
mantener
la
temperatura
constante y homognea a travs de la

superficie de calefaccin (Fig. 4).3
Fig. 5 Autoclave
Transiluminador UV
Equipo que permite la visualizacin y

localizacin de bandas de DNA deseadas
en geles de agarosa teidos con bromuro
de
etidio,
por
medio
de
diferentes
longitudes de onda UV (Fig. 6).4
Fig. 4 Plancha de Calentamiento
Autoclave
La esterilizacin es el proceso mediante el

cual se alcanza la destruccin o eliminacin
de todas las formas de vida microbianas
Fig. 6 Transiluminador UV
incluyendo las bacterias y sus estructuras.

La autoclave de laboratorio (Fig. 5) est
formada por un recipiente en el que el
Es un equipo que permite una rpida
vapor circula a alta presin y que tiene
mezcla y agitacin en el fondo de la
como objetivo la esterilizacin. El vapor
muestra, mediante un movimiento vibratorio
saturado se condensar inmediatamente
orbital.
liberando su alto calor de evaporizacin
(celulares o no) en un liquido (Fig. 7).5
que es el agente destructivo.
Vortex
Para
suspender
partculas

5
controlado (espacio refrigerado) diversos

fluidos y sustancias, para que se conserven
en buenas condiciones, mientras ms baja
sea la temperatura habr menor actividad
qumica y biolgica (Fig. 9)7
Fig. 7 Vortex
Centrifugadora
La centrifugadora es un equipo que separa

un slido en suspensin con un lquido; el
fundamento es aplicar una cierta velocidad
angular que hace que la suspensin gire,
de forma que las partculas mas pesadas
se depositen en el fondo del recipiente
Fig. 9 Refrigerador
(precipitado), mientras que las sustancias

ms
ligeras
quedan
por
encima
(sobrenadante)(Fig. 8).
Cabina de flujo laminar
Su principal funcin es la de mantener un

rea
de
trabajo
contaminantes,
libre
de
partculas
mediante el flujo de aire
en forma laminar y sin turbulencias para

poder retener las partculas contaminantes
y asegurar que sta zona sea estril. Este
proceso se logra gracias a que las cabinas
de flujo laminar vienen provistas de una
Fig.
8 Centrifugadora
Refrigerador
turbina que fuerza el paso del aire a travs
El refrigerador en los laboratorios es uno de
de
un
medio
filtrante
especial
los equipos ms importantes. Su funcin
denominado filtro HEPA, puede ir ubicado
consiste en mantener en un ambiente
en la pared frontal produciendo un flujo

6
laminar horizontal o ubicado en el techo y

producir un flujo laminar vertical, este filtro
HEPA tiene una eficiencia del 99,999% y
retiene partculas de un tamao superior a
0,3 m
Fig. 11 Incubadora
Micropipeta
Es un instrumento de laboratorio empleado

para
absorber
transferir
pequeos
volmenes de lquidos y permitir su manejo

Fig. 10 Cabina de flujo laminar
en las distintas tcnicas cientficas. Los

volmenes
Incubadora
su diseo,
segn
temperatura y humedad para
crear un ambiente adecuado apto para la

reproduccin y desarrollo de organismos
vivos.
por
estos
instrumentos varan segn el modelo: los
La Incubadora es un equipo con funciones

especficas que permite controlar,
captables
Algunas de las aplicaciones mas
comunes son los cultivos microbiolgicos,
ms habituales, denominados p20, p200 y

p1000, admiten un mximo de 20, 200 y
1000 l, respectivamente. Es de destacar
que el uso de micro pipetas permite
emplear distintos lquidos sin tener que
lavar el aparato: para ello, se emplean
puntas desechables.
micolgicos y virales, entre otros.
Fig. 12 Micropipetas

7
Equipo de PCR a Tiempo Real:
En la actualidad la ciencia avanza a pasos
La tecnologa de PCR en tiempo real utiliza
agigantados.
las
termocicladores que detectan fluorescencia
especialidades que ms lo ha hecho es la
para amplificar secuencias de nucletidos
biologa
especficas
quiz
molecular.
Los
una
de
protocolos
se
al
tiempo
que
miden
su
actualizan a diario y aparecen equipos con
concentracin.
nuevas tecnologas; atendiendo a este
especificidad y rapidez se convierte en el
hecho
instrumento ideal para la identificacin
algunos
continuacin
equipos
se
mencionan
novedosos
sus
aplicaciones:
El
rpida
de
Por
patgenos,
su
al
sensibilidad,
alcance
de
pequeos presupuestos de investigacin. 9
Lector de ELISA
analizador
de
ELISA
es
un
espectrofotmetro especializado, diseado

para efectuar la lectura de los resultados de
una tcnica que se utiliza para determinar
la presencia de anticuerpos o antgenos
especficos presentes en una muestra.
Tiene aplicacin directa en inmunologa y
en
serologa;
permite
confirmar
la
presencia en el organismo de anticuerpos o

antgenos de un agente infeccioso.8
Fig. 12 Termociclador a tiempo real
Fraccionador OFFGEL
El fraccionamiento previo de protenas y

pptidos antes del anlisis LC/MS, puede
aumentar drsticamente el nmero de
Fig. 13 Lector de ELISA

8
protenas identificadas en ltima instancia.
Se puede analizar: Cariotipo, diagnostico
Este equipo resuelve protenas de pptidos
prenatal, diagnostico bacteriano y vrico,
segn su punto isoelctrico (pI) logrando
subpoblaciones de linfocitos, tipaje tisular y
una fraccin de alta resolucin. Quiere
tipificacin y conteo de clulas, etc.11
decir que utiliza una nueva tcnica de

isoelectroenfoque para lograr obtener un
punto isoelctrico excelente, base para el
fraccionamiento. Las fracciones resultantes
estn
en
solucin,
haciendo
la
Fig. 14 Citmetro de flujo
recuperacin para el anlisis LC/MS mucho

ms fcil que con los geles anticuados.10
Fotodocumentador de alta resolucin:
Permite
la
lectura
imgenes
de
geles
deteccin
automtica
adquisicin
de
de
de
electroforesis,
bandas,
su
cuantificacin y lectura, calculo de los

pesos moleculares o puntos isoelctricos,
concentraciones
densidades
pticas,
adems los datos se pueden representar

mediante rectas logartmicas mediante un
Fig. 13 Fraccionador OFFGEL
software integrado.
Citmetro de flujo
La citometra de flujo (CMF) es una tcnica

de anlisis celular multiparametrico
cuyo
fundamento se basa en hacer pasar una

suspensin
de
partculas
alineadas
(generalmente clulas) de una en una por

delante de un haz de lser focalizado. La
citometra de flujo es una tecnologa que
Fig. 15 Fotodocumentador de alta resolucin
permite la medida simultnea de mltiples
caractersticas fsicas de una sola clula.
El congelador es un equipo de suma
Equipo de congelacin a -800C:
importancia para preservar el material

9
biolgico y reactivos
periodos
durante largos
manejar en las diferentes practicas de
de tiempo, se fundamenta en la
laboratorio, para nuestra formacin como
circulacin forzada de aire enfriado por un
ingenieros
biotecnolgicos;
compresor a bajas temperaturas, cuenta
recalco en qu reas de la biologa
con un sistema de aislamiento trmico para
molecular se aplican y como pueden estas
evitar perdidas.
herramientas
ayudar
investigaciones
sean
adems
que
se
nuestras
mas
certeras,
eficaces y exactas.
Acatar las recomendaciones les permite a
los estudiantes prevenir posibles riesgos, a
la vez que facilita el desarrollo de las
actividades dentro del laboratorio. Debe
enfatizarse que el aspecto ms importante
para
garantizar
la
seguridad
en
el
laboratorio es la compresin de las normas
Fig. 16 Congelador a -80C
de bioseguridad.
El laboratorio de biologa molecular cuenta
con las siguientes reas:
A pesar de que los

encuentran
observaron
y se
la
actualidad
en
el
laboratorio no son suficientes para llevar a
rea de Lavado
rea de Siembra
rea Central
rea pre-PCR
rea de post-PCR
Cuarto oscuro
cabo
todas
molecular,
las
estos
tcnicas
permiten
de
biologa
desarrollar
protocolos bsicos y con un buen nivel de

confiabilidad.
CONCLUSIONES
Se
en
equipos que se
describieron
las
funciones de los equipos que se van a

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para el buen desempeo en las actividades

del laboratorio; entre las mas importantes

principalmente de la comprensin de los

anterioridad de los protocolos, contar con la

indumentaria completa, ser precavido con

transmisin y expresin de la informacin

el uso de los equipos, y mantener ordenada

gentica, que en ltimo trmino establecen

y limpia el rea de trabajo para prevenir

la estructura y la funcin celular 1. Para la

comprensin de dichos mecanismos se

analizar los procesos involucrados. Sin

embargo antes de poder abordar estas

bsicos utilizados para el desarrollo de

tcnicas y las metodologas del laboratorio

de biologa molecular, se deben establecer

funcin y en que procesos se aplican.

bases fundamentales en el conocimiento,

Finalmente se debati que otros equipos

en bsqueda de eficiencia y seguridad .

podran hacer parte del laboratorio y

En consecuencia, el presente laboratorio

actualizarse para la implementacin de

tiene como finalidad identificar la utilidad de

cada uno de los equipos pertenecientes al

laboratorio de Biologa Molecular, as como

Cmara Electroforesis horizontal:

de Biologa Molecular de la Universidad

Francisco de Paula Santander sede Los

importante del anlisis de los cidos

Patios, se discutieron las recomendaciones

nucleicos y protenas. El principio bsico de

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las molculas a travs de un gel u otro tipo

de matriz de naturaleza porosa, en el cual,

replicacin del ADN.

por accin de un campo elctrico, se

Es una mquina que pone en rotacin una

una slida y una lquida), en funcin de su

densidad, la encontrada en el laboratorio

La reaccin en cadena de la polimerasa

(Fig. 2)emplea volmenes pequeos (1,5-

PCR es una reaccin de sntesis de ADN

2mL) y realiza mezclas entre 0-12000rpm.

in Vitro que permite la obtencin de un gran

temperaturas controladas sobre la muestra,

necesidades de calentamiento y agitacin

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de modo magntico, su funcionamiento se

constante y homognea a travs de la

Equipo que permite la visualizacin y

longitudes de onda UV (Fig. 6).4

Fig. 4 Plancha de Calentamiento

La esterilizacin es el proceso mediante el

incluyendo las bacterias y sus estructuras.

formada por un recipiente en el que el

Es un equipo que permite una rpida

vapor circula a alta presin y que tiene

mezcla y agitacin en el fondo de la