TRIGLICRIDOS

Enzimtico AA
MTODO ENZIMTICO COLORIMTRICO PARA LA DETERMINACIN DE TRIGLICRIDOS
SRICOS EMPLEANDO TCNICA MANUAL O AUTOMATIZADA

SIGNIFICACIN CLNICA:

PREPARACIN DE LA SOLUCIN DE TRABAJO:

La determinacin de triglicridos permite, junto a

otras como la de colesterol, HDL-colesterol,
apolipoproteinas y el lipidograma electrofortico,
una exacta clasificacin de las dislipidemias, hecho
esencial para poder administrar el tratamiento ms
coveniente.

Disolver el contenido de un envase conteniendo el

Reactivo Enzimas en un envase conteniendo el
Reactivo Buffer. El reactivo de trabajo as preparado
es estable durante 4 semanas en heladera
(2-10 C).
MUESTRA:

FUNDAMENTOS DEL MTODO:

Los triglicridos se hidrolizan enzimticamente en

glicerol y acidos grasos libres, por medio de una
combinacin especial de lipasas. El indicador es
una quinoneimina formada a partir de perxido de
hidrgeno, 4-aminoantipirina y 4-clorofenol , con la
accin cataltica de una peroxidasa.
LPL

trigliceridos

glicerol + ac.grasos
GK

glicerol +ATP

glicerol 3-P + ADP

GPO

glicerol 3-P + O2

dihidroxiacetona-fosfato + H2O2
POD

H2O2 + 4 AA+ 4-CF

quinoneimina + HCL + 4 H2O2

Suero o plasma heparinizado o plasma EDTA. La

estabilidad de los trigliceridos en la muestra es de
3 das a 2-8 C.
TCNICA OPERATORIA MANUAL:
Pipetear en tubos de ensayo:
Blanco
Standard
Muestra
Muestra
----10 l
Standard
--10 l
--Rvo. trabajo
1 ml
1 ml
1 ml
Mezclar e incubar a 37 C durante 5 minutos o 10 minutos
a 25 C.
Leer a 520 nm (500-530) en espectrofotmetro llevando
a cero con agua destilada.

*La estabilidad del color es de 30 minutos.

REACTIVOS PROVISTOS:

Estos reactivos son para USO IN VITRO:

Reactivo Buffer :Solucin buffer de pipes pH=7.5,
para una concentracin final de 50 mmol/l y 4 -clorofenol 5 mmol/l.
Reactivo Enzimas: Polvo conteniendo enzimas,
4-AA y ATP, para las siguientes concentraciones fina
les: Lipoproteinlipasa (15000 U/l), Glicerolquinasa
(1000 U/l), Glicerol 3-P oxidasa (2500 u/l), Peroxidasa (440 U/l), 4-AA 0.7 mmol/l, ATP 0.18 mmol/l.
Standard : Solucin patrn equivalente a 2.00 g/l o
2.26 mmol/l de triolena.

CLCULO DE RESULTADOS :

Trigliceridos (g/l) = 2.00

A Muestra
A Standard

Trigliceridos(mmol/l)= 2.26

A Muestra
A Standard

VALORES DE REFERENCIA :

Hombres
Mujeres

: 0,60 a 1.65 g/l

: 0,40 a 1.40 g/l

ESTABILIDAD:
Estos reactivos son estables hasta la fecha de
vencimiento indicada en la caja, cuando se
conserva en heladera (2-10 C).
No someter a temperaturas elevadas durante
tiempos prolongados.
PRESENTACION:

Este equipo permite realizar 100 DET.con la tcnica

manual. Se presenta conteniendo:
# Reactivo Buffer: 2 x 50 ml
# Reactivo Enzimas: 2 unidades
# 5 ml de standard.
SOCIEDAD DE BIOQUIMICOS DE SANTA FE -AVENIDA URQUIZA 2657 -3000 SANTA FE.TE/FAX (0342) 455 2708
e-mail: sbstafe@ceride.gov.ar

ESPECIFICACIONES
PARA AA:

ANALITICAS

DE

APLICACION

PRINCIPIO DE LA REACCIN:
Trinder
TIPO DE REACCIN:
Punto final nico
DIRECCIN DE LA REACCIN:
Positiva
LONGITUD DE ONDA PRIMARIA :
505-520
LONGITUD DE ONDA SECUNDARIA :
600-700
UNIDADES:
g/l
TIEMPO DE INCUBACION REACTIVOS (seg):
300
TIEMPO DE LECTURA (seg):
5-20
LINEALIDAD (conc):
10
ABSORBANCIA LMITE DEL BLANCO (Abs):
0.300
LMITE DE ABSORBANCIA (Abs):
2.000
RELACIN MUESTRA /REACTIVO:
1:100
CALIBRACIN: emplear calibradores nivel I y II
CONTROL DE CALIDAD: emplear sueros control nivel I

y II.

OBSERVACIONES :

* Se debe tener cuidado con la contaminacin del

reactivo de trabajo, ya que los oxidantes colorean el
mismo aumentando los blancos, los reductores
disminuyen la respuesta de color y los detergentes,
metales pesados y cianuros son inhibidores
enzimticos.
* Valores de bilirrubina inferiores a 20 mg/dl y de
hemoglobina de hasta 150 mg/dl.
RENDIMIENTO ANALTICO PARA LA TECNICA
MANUAL:

* Linealidad : La reaccin de color sigue la ley de

Beer al menos hasta 10 g/l.
Para valores
superiores diluir la muestra al medio con solucin
salina , repetir la determinacin y multiplicar el
resultado por 2.
BIBLIOGRAFA :

Trinder, P. Ann.Clin.Biochem. - 6 (1969) 24.

Fossati, P .Clin. Chem. -28 (1982) 2077.