QUE ES UN EXAMEN DE ADN

El examen gentico permite el diagnstico de la vulnerabilidad hacia

determinadas enfermedades hereditarias basndose en la gentica, y puede ser tambin
utilizado para determinar la ascendencia de una persona. Normalmente, cada ser humano
posee dos copias de cada gen, una heredada de su madre y otra de su padre. Se cree que
elgenoma humano contiene alrededor de 20.000 o 25.000 genes. Adems de estudiar a
los cromosomas al nivel de genes individuales, el examen gentico, en un sentido ms amplio,
incluye pruebas bioqumicas para demostrar la posible presencia de enfermedades genticas,
o formas mutantes de genes asociados con el crecimiento del peligro de desarrollar
desrdenes genticos. El examen gentico identifica cambios en cromosomas, genes o
protenas. La mayor parte de las veces, el examen se utiliza para hallar cambios que estn
asociados con enfermedades hereditarias. Sus resultados pueden confirmar o descartar una
condicin gentica que antes fuese probable o ayudar a determinar las oportunidades de un
ser humano de desarrollar o evitar una enfermedad gentica. Actualmente estn en vigencia
cientos de tests genticos, y estn siendo desarrollados nuevos.
Ya que los exmenes genticos pueden causar problemas ticos o psicolgicos, son
usualmente acompaados por el consejo gentico.

COMO REALIZAR UN EXAMEN GENETICO

Lo primero que se tiene que hacer es extraer el ADN, ya sea de sangre, folculos capilares, etc.
Generalmente se extrae sangre y se utiliza un mtodo muy sencillo y econmico como es el
mtodo del perclorato. Primero se extraen 5 ml de sangre perifrica en tubos con E.D.T.A. y se
colocan 3ml de sangre en tubos de centrfuga de polipropileno estriles, con capacidad de 15 ml y
fondo cnico, y se le adicionan 11 ml de la solucin amortiguadora de lisis I a 4 C (sacarosa 0.3 M,
Tris-HCl. 0.010 M, MgCl2 0.005 M 6H2O, tritn X-100 pH 7.5). Se mezcla por inversin
cuidadosamente y se procede a centrifugar a 4,500 rpm a 4 C durante 10 minutos. Posteriormente
se decanta cuidadosa y rpidamente el sobrenadante a otro tubo, sin levantar el botn formado que
es el necesario para la extraccin del ADN. Despus se resuspende el botn obtenido con 2.25 ml
de solucin amortiguadora de lisis II (NaCl 0.075 M, EDTA 0.024 M), 62.5ul de SDS al 10 % y 550ul
de perclorato de sodio 5M. Se agita durante 10 minutos a temperatura ambiente con agitacin
mecnica. Despus se le adiciona a cada tubo 1 ml de NaCl 6 M y se agita muy fuerte con la mano
durante 15 segundos y se centrifuga a 3,500 rpm por 30 minutos a 4 C. Despus se Recupera el
sobrenadante en otro tubo de centrfuga de 15 ml estril, y se adiciona 3.5 ml de isopropanol
absoluto a 4C, se tapa los tubos y se mezcla suavemente en posicin horizontal hasta la
formacin de las hebras de ADN. Se fija el ADN obtenido en la pared del tubo con la ayuda de una
pipeta Pasteur y se desecha el lquido. Posteriormente se pasa el ADN obtenido a un tubo
Eppendoff de 1.5 ml y se lava 2 veces con etanol al 70 %, teniendo precaucin en el lavado.
Finalmente se resuspende el ADN con 150ul de solucin amortiguadora TE, incubndolo a 37 C
por una hora. La solucin de ADN obtenida se conserva a 4C.
Ya que se extrajo el ADN se procede a identificar lo que se desea, por ejemplo en el caso de una
prueba de paternidad ya que se tiene el ADN del hijo y del padre, se marca el ADN con 15
marcadores genticos altamente polimrficos, ubicados en 13 distintos cromosomas, para
identificar que alelo porta cada individuo, posteriormente se comparan los genotipos del hijo y del
supuesto padre. Para que un individuo pueda ser considerado genticamente relacionado con otro,
deben compartir un alelo de cada uno de los 15 marcadores.
El marcaje se realiza mezclando los marcadores con la hebra de ADN en suspensin y se
comparan mediante la realizacin de una electroforesis en la cual se puede observar mediante una
imagen obtenida a travs de un transiluminador.

UNIVE
RSIDA
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PRIVA
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GENETICA
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ESTUDIANTE: MARIBEL ESCORBAR VILLCA

TEMA: COMO REALIZAR UN EXAMEN DE ADN

FECHA: 28 / 03 / 2016
CARRERA: MEDICINA