9.

Explicar las variables que influyen en el flujo electroosmtico o las que

regulan la dispersin de los analitos.

Variables que afectan al EOF

Variable
pH de la
regulador
a
Fuerza de
la
regulador
a

Efecto en EOF
EOF aumenta
con el pH

Comentario
Mtodo adecuado para controlar EOF pero afecta a
la carga de los analitos

EOF disminuye
con el aumento
de la fuerza de
la reguladora

Campo
elctrico

El aumento del
campo
elctrico
incrementa
EOF
Aumentar la
temperatura
disminuye la
viscosidad e
incrementa
EOF
Cambia el
potencial en las
paredes del
capilar, la
constante
dielctrica de
la reguladora y
la viscosidad.
Normalmente
reduce el EOF.
Se adsorben
sobre las
paredes de la
superficie del
capilar.

Temperatu
ra

Modificad
or
orgnico

Tensioacti
vos

El aumento de la fuerza inica aumenta la

corriente elctrica a travs del capilar
produciendo calor.
A fuerza inica baja se produce un aumento de
la adsorcin de la muestra en las paredes del
capilar.
Concentraciones de reguladora baja reducen el
stacking de la muestra tras la inyeccin.
Bajar el campo elctrico puede reducir la eficiencia
de la separacin y aumentar la fuerza del campo
puede causar calentamiento.

Fcil de controlar

Efectos complejos, puede usarse pero debe

evaluarse su efecto experimentalmente.

Recubrimi
ento
covalente

Pueden
aumentar o
disminuir EOF

Los catinicos tienen mucha afinidad por los

grupos silanol y bloquean el acceso a los
cationes pequeos en disolucin reduciendo el
EOF. A concentraciones elevadas forman una
doble capa, dando a la pared del capilar una
carga positiva y produciendo un EOF inverso
hacia el nodo.
Los aninicos reducen el acceso de los iones
pequeos al potencial positivo en las paredes
incrementando EOF.
Los neutros reducen la carga negativa de la
pared reduciendo EOF.
Los inicos tienen un marcado efecto en EOF.

de la
pared

dependiendo
del
recubrimiento

Variables que regulan la dispersin de analitos

Difusin longitudinal
o Principal causa del aumento de la anchura de pico pero menor
que en GC.
o Depende de la longitud del capilar y del coeficiente de difusin
del analito en la reguladora.
o Los pptidos y las molculas grandes tienen coeficientes de
difusin pequeos (picos estrechos).
Longitud del volumen inyectado
o Pequeos volmenes ocupan mucha longitud de capilar (0,02
L = 1 cm) y se suelen introducir volmenes relativamente
elevados para compensar los altos LD.
o El stacking se corrige disolviendo la muestra en agua o una
reguladora de baja conductividad: al aplicar el campo elctrico
los iones migran rpidamente a la frontera con la reguladora.
Calentamiento Joule
o La fuerza del campo elctrico est limitada por la conversin
de energa elctrica en calor.
o El aumento de la temperatura local produce cambios locales de
viscosidad.
o La generacin de calor puede minimizarse usando capilares
estrechos y/o manteniendo termostatizado el capilar.
Interacciones del analito y la pared
o El analito puede interaccionar con la pared a travs de los
grupos silanol negativos o por interacciones hidrofbicas.
o Fuerzas inicas fuertes bloquean las cargas negativas y
reducen el EOF pero producen un aumento del calor.
o Si slo se requiere el anlisis de cationes se puede bajar el pH
reduciendo la carga
o negativa de los grupos silanol, reduciendo EOF con lo que los
cationes se movern hacia el ctodo sin la ayuda del EOF.
Electrodispersin
o La movilidad de los iones de la reguladora tiene que ser similar
a los del analito.
o Si es menor, se obtienen picos con frente debido a que las
molculas de analito del frente entran en la zona de la
reguladora donde experimentan un campo elctrico mayor
(hay una resistencia mayor en esta zona que en la del analito)
y se separan de la zona de la muestra. Este efecto es menor si
se aumenta la concentracin de la reguladora.
o Si es mayor, se obtienen picos con cola debido a que las
molculas de analito de la parte posterior se retrasan y entran
en la zona de la reguladora donde eperiementan un campo
elctrico menor (hay una resistencia menor en esta zona que

en la del analito) y se separan de la zona de la muestra. Este

efecto es menor si se disminuye la concentracin de la
reguladora.