El descubrimiento de la auxina estimul a muchos investigadores a
buscar otros tipos de compuestos qumicos que regulasen el crecimiento debido a que, al igual que ocurre en los animales, pareca improbable que el crecimiento y desarrollo de las plantas estuviese regulado slo por una hormona. La bsqueda se concentr, especialmente, en hormonas que regulasen la divisin celular. Estos compuestos se han encontrado en todas las plantas, particularmente en los tejidos que se dividen de forma activa como meristemas, semillas en germinacin, frutos en maduracin y races en desarrollo. Estas hormonas se llamaron citocininas (de citocinesis) o citoquininas. Los estudios sobre la accin de las citocininas en la divisin celular han demostrado que son necesarias en algunos procesos posteriores a la replicacin del ADN pero anteriores a la mitosis. o
En 1892, Wiesner propuso la existencia de factores
estimulantes de la divisin celular.
En 1913, Gottlieb Haberlandt descubri que un compuesto
encontrado en el floema tena la capacidad de estimular la divisin celular en clulas de parnquima.
En 1941, Johannes van Overbeek y ms tarde F.C. Steward
y sus colaboradores, descubrieron que el endosperma lquido del coco tambin tena esta capacidad.
En 1954, Jablonski and Skoog ampliaron el trabajo de
Haberlandt mostrando que los tejidos vasculares contienen sustancias que estimulan la divisin celular.
Miller y Skoog descubrieron la kinetina, una citocinina artificial
o
En 1955, tras experiencias previas realizadas con ADN de
esperma de arenque, Folke Skoog y Carlos Miller consiguieron preparar por tratamiento trmico de ADN un compuesto, el 6-furfurilamino purina, que promova la divisin celular. Denominaron a esta sustancia kinetina y llamaron a los reguladores que se incluan dentro de este grupo citocininas, debido, como dijimos anteriormente, a su aparente implicacin en los procesos de citocinesis, o divisin celular.
Como se observa en la Figura 14.17, la kinetina se
parece a la base prica adenina, que fue la clave que condujo a su descubrimiento.
Figura 14.17 Notar las similitudes entre la
purina adenina y estas cuatro citocininas. La kinetina y la 6-benzilamino-purina (BAP) son citocininas sintticas comnmente usadas. La Zeatina y la i6Ade se han aislado de plantas. [Figura modificada de Raven, P.H. & Eichhorn, S.E. (1999). Biology of Plants. 6th ed., W.H. Freeman and Company. Worth Pub.].
La kinetina, que probablemente no existe en las plantas
de modo natural, tiene una estructura relativamente simple, y los bioqumicos han sido capaces de sintetizar una gran variedad de otros compuestos relacionados que se comportan como citocininas.
En 1964, Letham y sus colaboradores aislaron una citocinina
natural a partir de semillas de maz (Zea mays), a la que denominaron zeatina, la cual es la citocinina natural ms activa que se conoce.
Actualmente se han aislado citocininas de muchas especies
diferentes de plantas, donde se encuentran, fundamentalmente, en rganos cuyos tejidos se estn dividiendo de forma activa, es decir, en semillas, frutos, y races. Recientemente, las citocininas se han identificado en dos plantas vasculares sin semilla, un equiseto (Equisetum arvense) y el helecho Dryopteris crassirhizoma.
Efectos fisiolgicos producidos por las citocininas
o
La respuesta puede variar dependiendo del tipo de citocinina y
de la especie vegetal.
Estimulan la divisin celular.
Estimulan la morfognesis (iniciacin de tallos/formacin
de yemas) en cultivo de tejidos.
Estimulan el desarrollo de las
Contrarresta la dominancia apical.
yemas
laterales.
Estimulan la expansin foliar debido al alargamiento
celular.
Pueden incrementar la apertura estomtica en algunas
especies.
Retrasan la senescencia foliar al estimular la movilizacin
de nutrientes y la sntesis de clorofila.
Promueven la conversin de etioplastos en cloroplastos
via estimulacin de la sntesis de clorofila.
Estimulacin de la prdida de agua por transpiracin.
Eliminacin de la dormicin que presentan las yemas y
semillas de algunas especies.
Estimulan la formacin de tubrculos en patatas.
Las citocininas regulan el ciclo celular
o
Los estudios de las interacciones que envuelven a la auxina y a
las citocininas estn ayudando a los fisilogos a entender cmo las hormonas de las plantas (fitohormonas) trabajan para producir el patrn de crecimiento global de cada planta. Es obvio que una clula vegetal indiferenciada tiene dos opciones: bien puede alargarse, dividirse, alargarse, y volverse a dividir de nuevo, o bien puede alargarse sin sufrir posteriores divisiones. Las clulas que se dividen repetidamente permanecen esencialmente indiferenciadas, o meristemticas, mientras que las clulas que se alargan tienden a diferenciarse, o especializarse.
En estudios realizados con tallos de tabaco, la adicin de
AIA a los cultivos de tejidos produjo una rpida expansin celular, por lo que se formaron clulas gigantes.
La adicin de kinetina sola tuvo poco o ningn efecto.
El AIA ms la kinetina produjo una rpida divisin celular,
por lo que se produjo un gran nmero de clulas relativamente pequeas e indiferenciadas.
En otras palabras, la adicin de kinetina, junto con el AIA
(aunque no con kinetina slo) condujo a las clulas a un estado meristemtico.
La relacin auxina/citocinina cultivos de tejidos o
regula
la
morfognesis
en
Alterando ligeramente las concentraciones relativas de auxina y
citocinina, los investigadores han podido modificar el desarrollo de las clulas indiferenciadas de los cultivos de tejidos.
Una concentracin ms o menos igual de las dos
hormona, hace que las clulas sigan indiferenciadas, formando masas de tejido llamadas callos.
Cuando la concentracin de auxina es superior, el tejido
indiferenciado organiza races.
Con una concentracin superior de citocinina, se forman
yemas. Con un cuidadoso equilibrio de las dos hormonas se puede producir races y yemas, y por lo tanto, una plantita incipiente. (Figura 14.18). Figura 14.18 Esquema del control de la diferenciacin ejercido por la interaccin de la auxina con las citocininas. Las piezas de los tejidos de la mdula del tabaco se cultivaron aspticamente en un medio nutritivo (cultivo de tejidos) completando varias con varias concentraciones de dos hormonas. Segn las proporciones relativas de auxina y citocinina, el callo de varias especies de plantas continuar creciendo como tejido sin diferenciar, y podr formar races o formar yemas y tallos. [Figura modificada de Rost, T. et al. (1998). Plant Biology. Wadsworth Publishing Company].
En otros estudios realizados en cultivo de tejidos, usando tejido
de tubrculo de la aguaturna (Helianthus tuberosus), se descubri que un tercer componente, el in calcio, puede modificar la accin de la combinacin auxina-citocinina.
En estos estudios, el AIA ms bajas concentraciones de
kinetina conducan a un alargamiento celular, pero cuando se aada Ca2+ al cultivo se inhiba el alargamiento para favorecerse el proceso de divisin celular.
Altas concentraciones de calcio prevenan la expansin de
la pared celular, por lo que las clulas no crecan y cambiaban su ciclo al de divisin celular.
Es por ello, que no slo las hormonas modifican los
efectos de otras hormonas, sino que estos efectos combinados son a su vez modificados por factores no hormonales, tales como el calcio.
Las citocininas retrasan la senescencia (envejecimiento)
o
Otra funcin, al parecer independiente, de las citocininas es la
de prevenir la senescencia o envejecimiento de las hojas. En la mayora de las especies de plantas, las hojas comienzan a volverse amarillas tan pronto como se extraen de la planta. Este amarilleamiento, el cual se debe a la prdida de clorofila, puede prevenirse usando citocininas (Figura 14.19). Figura 14.19 Efecto de las citoquininas sobre la senescencia en hojas. La aplicacin de citoquininas a la hoja de la derecha, procedente de una plntula de juda (Phaseolus vulgaris), inhibe su senescencia normal. Comparar con el aspecto de la hoja de la izquierda, que no fue tratada con la hormona. [Figura tomada de Rost, T. et al. (1998). Plant Biology. Wadsworth Publishing Company].
Las hojas de cadillo (Xanthium strumarium), por ejemplo,
cuando son arrancadas y dejadas en agua del grifo, se vuelven amarillentas en el trmino de unos 10 das. Si se aade una pequea cantidad de kinetina (10 mg por litro) al agua, se conserva gran parte de la clorofila y, en consecuencia, la apariencia fresca de la hoja. Si las hojas arrancadas son rociadas con soluciones de kinetina, las zonas mojadas permanecen verdes, mientras que el resto de la hoja se amarillea. No obstante, si la hoja rociada con citocininas contiene aminocidos radiactivos marcados con 14C, se puede ver que los aminocidos emigran hacia las zonas que han sido tratadas con citocininas.
Tales estudios, que han sido llevados a cabo sobre
rbanos y otras plantas, propician la hiptesis de que el envejecimiento en las hojas, y probablemente en otras partes de la planta, resulta del progresivo "despido" de fragmentos de ADN, y
de la consiguiente mengua en la produccin de
ARNm y en la sntesis de protenas.
Estas investigaciones sugieren la hiptesis de que
las citocininas previenen la prdida de fragmentos de ADN, permitiendo as que contine la sntesis de enzimas y la produccin de otros compuestos tales como la clorofila.
Una interpretacin de la prevencin por las citocininas de la
senescencia en hojas arrancadas es la de que las hojas normalmente no sintetizan suficiente citocininas como para satisfacer sus propios requerimientos. Por esto, una cuestin importante y todava sin resolver implica al lugar o lugares de produccin de las citocininas dentro de las plantas. Basndose en algunas lneas de evidencia, una posible localizacin es la raz. Un segundo lugar podra ser la zona de elongacin situada debajo del pice caulinar.
Cul es el modo de accin de las citocininas?
o
Desde el primer aislamiento de citocininas a partir de muestras
de cidos nucleicos, los fisilogos vegetales han sospechado siempre que estas hormonas han de estar de algn modo relacionadas con los cidos nucleicos. Cuando Holley y sus colaboradores desvelaron por primera vez la estructura de una molcula de ARNt, se encontraron con que la molcula contena un cierto nmero de bases atpicas. Ms tarde se descubri que en algunos tipos de ARNt la citocinina natural i6Ade (6Nisopenteniladenina), que es a su vez una base atpica, est incorporada en la molcula. La i6Ade se encuentra, por ejemplo, en las molculas de ARNt para la serina y para la tirosina, en las cuales est ubicada inmediatamente junto al anticodn. Sin embargo, todava no se sabe si su presencia o su ubicacin en molculas de ARNt est relacionada con su actividad promotora de la divisin celular. Se conoce que el ltimo efecto de las citocininas implica cambios en la expresin gnica, probablemente a nivel transcripcional.
Modos de accin:
Regulan la sntesis proteica.
Afectan las etapas post-transcripcionales en algunas
especies.
Su presencia en los ARNt pueden regular la sntesis