FISIOLOGIA VEGETAL

Aula 1 Relaes Hdricas nas Plantas (RH1)

gua nas plantas:

Solvente e meio de reaco;

Regulao Trmica;

Suporte Estrutural (ex. nas plantas herbceas, o suporte conferido pela presso de
gua; a desidratao leva perda de forma por parte da planta);

Reaces Metablicas (no entanto, gua como reagente representa < 1%);

Transporte;

Meio difusor da luz (fotossntese);

A molcula de gua:

gua como solvente e meio de reaco:

Molcula assimtrica;

Polaridade extremamente importante - tomos de hidrognio representam os polos

positivos da molcula, sendo o tomo de oxignio mais electronegativo. Os electres
do H so atrados pelo tomo de oxignio, formando-se um momento dipolar. Assim,
a gua apresenta energia cintica disponvel, no reagindo com molculas apolares;

No estado lquido, apenas 10% das ligaes entre molculas de gua correspondem a
ligaes covalentes;

Estabelecimento foras electrostticas fortes entre os tomos de H e os tomos de O

de uma molcula de gua adjacente - pontes de hidrognio (mais fortes do que as
ligaes de Van der Walls) confere caractersticas especiais gua:

1. Ponto de fuso = O C
2. Ponto de ebulio = 100 C

Quer o ponto de fuso quer o de ebulio so muito mais elevados do que os da maioria
das substncias com molculas do mesmo tamanho;
temperatura ambiente, qual ocorre a maioria das reaces metablicas, a gua
apresenta-se no estado lquido (quando seria de esperar, devido s dimenses da molcula,
que esta estivesse no estado gasoso), constituindo um meio de reaco adequado;
Devido polaridade e sua pequena dimenso, a gua torna-se um solvente muito eficaz,
sobretudo para os compostos polares.
A gua apresenta ainda um papel importante ao formar as chamadas esferas de
hidratao (hydration shells) em torno de macromolculas, designadamente protenas,
evitando a sua precipitao.

Regulao trmica:
A gua possui:
1. Calor especfico elevado (4,2 J G-1 C-1) para elevar 1 C a temperatura da unidade de
volume de gua necessria maior quantidade de energia do que para qualquer outra
substncia; gua absorve bastante energia, provocando um aumento baixo da
temperatura;
Importncia Biolgica: permite gua amortecer as alteraes de temperatura e proteger
os organismos de grandes flutuaes trmicas; este facto facilita a distribuio da energia
trmica no corpo.

2. Condutividade trmica elevada explicada pelo facto de a gua absorver muita

energia sem grandes aumentos de temperatura;

3. Calor latente de vaporizao elevado necessria muita energia calorifica para

provocar a vaporizao de 1 mL de gua (mais do que para qualquer outra

substncia); todas as pontes de hidrognio tm que ser quebradas para que se d a

passagem ao estado gasoso.

Importncia Biolgica: permite a regulao da temperatura atravs da transpirao

(arrefecimento acentuado das folhas atravs da transpirao combate o calor excessivo na
planta).

Suporte Estrutural:

A presso de turgescncia gerada no interior das clulas confere a rigidez necessria

ao suporte estrutural dos tecidos no lenhificados;

Esta presso ainda importante para o crescimento (expanso celular), o qual ocorre
tambm por diviso celular nos meristemas, para a abertura estomtica, e para o
transporte flomico.

Participao em reaces metablicas:

Exemplo mais importante a fotossntese

Transporte:

gua constitui o meio no qual so transportados solutos orgnicos e inorgnicos, na

soluo do solo, no xilema e no floema;

Molculas de gua so pouco compressveis;

Capacidade de transporte resulta das caractersticas de tenso superficial e coeso

das molculas de gua:
Tenso superficial: energia necessria para aumentar a
rea de interface gua-ar;
Coeso: atraco entre as molculas de gua;
Adeso: atraco entre as molculas de gua e a
superfcie de um slido;
Capilaridade: resultante da tenso superficial, coeso e
adeso;

Fora de tenso: fora mxima por

unidade de rea que uma coluna gua
suporta antes de partir (importante na
subida de gua nos vasos, que se
comportam de forma semelhante aos
capilares).

Meio difusor da luz:

As caractersticas pticas da gua, nomeadamente a sua elevada transmitncia na

gama do visvel, so importantes para a produtividade vegetal;

Excesso de luz provoca uma fotoinibio (algumas espcies, para se protegerem deste
excesso, utilizam estratgias como a movimentao intracelular dos cloroplastos).

A gua no Mundo:

gua doce representa apenas 2,5%, dos quais praticamente 70% esto em glaciares e
no permafrost; - a gua como recurso renovvel representa apenas 0,3% da gua
total!

Aula 2 Relaes Hdricas nas Plantas (RH2)

Clula vegetal algumas estruturas particularmente importantes nas questes hdricas:

Parede Celular confere rigidez (ausente nas cls. Animais); d origem ao chamado
potencial de parede;

Vacolos de grandes dimenses ocupam a maior parte da clula; possuem a

capacidade de ganhar/ perder gua.

Deslocao da gua nas plantas 2 formas:

1. Fluxo de massa: molculas de gua deslocam-se mesma velocidade e na mesma
direco; nas plantas, s relevante no transporte a longa distncia;
2. Difuso/ osmose: molculas deslocam-se de forma aleatria; nas plantas,
importante no transporte a curta distncia; a osmose um caso particular que envolve
o transporte transmembranar.

Fluxo de massa

A fora motriz a presso (gua desloca-se das regies onde a presso maior para as
regies onde esta menor);

Fluxo depende ainda da condutividade (ou condutncia) do canal de deslocao da

gua:

Flux = DP * k
Difuso

A difuso o movimento directo de uma substncia da regio com maior concentrao

para a regio com menor concentrao de partculas, devido ao movimento aleatrio
das molculas;

O movimento contnuo at ser atingido um equilbrio entre os diferentes

compartimentos;

No exemplo do osmmetro h movimentao das molculas de gua de fora para

dentro, provocando uma ascenso de uma coluna de gua que cria uma presso
(hidrosttica) que contrabalana a presso feita para que se desse a entrada de gua
(osmtica);

Quando as presses hidrosttica e

osmtica se igualam, o movimento de
gua cessa.

Medindo a presso necessria para

que a gua se mantenha ao nvel do
gobelet dentro do tubo, sabemos a
presso osmtica.

Potencial hdrico Corresponde ao potencial qumico da gua; representa a energia livre

associada s molculas de gua;

Potencial qumico de uma espcie representado por :

= * + RTlna + zZE + VP + mgh

* - potencial de referncia
RTlna potencial osmtico
zZE potencial elctrico
VP potencial de presso
mgh potencial gravtico

O potencial gravtico apenas necessrio em transportes com grandes diferenas de

altura (ex: transporte desde a raiz at s folhas de uma rvore de grande altura);

Potencial hdrico:

= * + RT lnC + VP
wspmg

s potencial osmtico (ou de solutos);

p potencial de presso (= turgescncia);

Mais importantes: sp

m potencial mtrico (capacidade de substncias hidrfilas absorverem a gua);

6

g potencial gravtico (normalmente referenciado como zero).

O potencial da gua pura presso atmosfrica 0; a presena de solutos torna o

potencial hdrico negativo;

ATENO: o potencial hdrico que determina o movimento da gua nas plantas!

(sendo que a gua se desloca da regio com o potencial hdrico mais elevado para a
regio com potencial menos elevado);

Unidades para MPa (Mega Pascal medida de presso)

1 atmosphere = 1.013 bar = 0.1013 MPa = 1.013 x105 Pa

Quanto mais elevada for a presso osmtica, mais negativo ser o potencial hdrico; no
solo, quanto mais negativo for o potencial hdrico, menor a gua disponvel para as
plantas, fazendo com que estas desenvolvam caractersticas especiais (aernquimas,
pneumatforos, etc.)

(A) gua pura;

(B) soluo com 0,1 M sucrose;
(C) clula plasmolisada numa soluo 0,1 M sucrose; como o potencial hdrico inicial da
soluo de sucrose maior (menos negativo) do que o da clula, a gua move-se para
dentro da clula;
- com a entrada de gua, a presso que a parede exerce para que a clula no rebente
comea a aumentar, ou seja, aumenta a presso hidrosttica (+p); consequentemente,
aumenta a presso hdrica dentro da clula, levando a uma diminuio da diferena do
potencial entre o interior e o exterior da clula (-w);

- eventualmente, o potencial de presso aumenta o suficiente para que o potencial hdrico

na clula iguale o potencial hdrico da soluo; neste ponto, atingido o equilbrio (w
= 0 MPa), e o fluxo de rede cessa;
(D) - o aumento de concentrao de sucrose (0,3M) faz baixar o potencial hdrico da soluo
(fica mais negativo do que o da clula), fazendo com que saia gua da clula, reduzindo a
presso de hidrosttica (ou de turgescncia);
- isto ocorre at a clula atingir o estado de plasmlise, uma vez que as molculas de
sucrose conseguem passar atravs de poros relativamente largos da membrana celular;
(E) mantendo a concentrao a 0,1M, mas aumentando desta vez a presso na clula,
aumenta o valor do potencial de presso, levando a uma subida do potencial hdrico da
clula;
- este facto cria uma diferena entre o potencial hdrico da clula e o da soluo que leva
nesta caso a uma sada de gua da clula para o exterior;

IMPORTANTE: todos estes exemplos evidenciam que o fluxo de gua atravs da

membrana um processo de transporte passivo; a gua move-se em resposta a foras fsicas,

deslocando-se para as regies com menor potencial hdrico ou com menos energia disponvel.

Aula 3 Relaes Hdricas nas Plantas (RH3)

Movimentos transmembranares e aquaporinas:

A difuso directa de gua atravs da bicamada lipdica da membrana no suficiente

para explicar algumas taxas de movimento de gua atravs desta;

1991 descoberta das aquaporinas; so protenas membranares integrais que formam

canais selectivos para a passagem de gua ao longo da membrana celular; estas
facilitam o fluxo de gua ao longo das clulas das plantas, uma vez que o movimento
feito de uma forma muito mais rpida do que no caso da difuso;

As

aquaporinas

aumentam

velocidade de deslocao da gua mas

no alteram a direco do transporte
ou a fora motriz do movimento;

Estas

protenas

configuraes

possuem

(open/

closed),

duas
em

resposta a parmetros fisiolgicos (ex.

pH, Ca2+) este facto permite s
plantas regularem a permeabilidade das suas membranas gua.
9

Determinao do Potencial Hdrico:

Mtodo de Chardakov depende de uma mudana da densidade de soluo na qual o

tecido emerso; a soluo ganha ou perde gua de acordo com o potencial hdrico do
tecido (o movimento de solutos entre o tecido e a soluo negligencivel);

Vantagens: No necessita de equipamento especializado;

Desvantagens: Base emprica com um certo grau de subjectividade; pouco preciso.

Psicrometria uso de psicrmetros,

que podem ser de dois tipos; tiram
partido do elevado calor latente de
vaporizao da gua, o qual permite
medir ou a presso do vapor da gua
em equilbrio com a amostra ou a
transferncia do vapor de gua entre a
amostra e uma soluo com um
potencial de solutos conhecido (s);

Cmara de Scholander (ou de presso) mede o potencial hdrico aplicando uma

presso externa de gs s folhas retiradas de uma amostra at que a gua seja forada
a sair das clulas vivas;

10

Aula 4 Relaes Hdricas nas Plantas (RH4)

gua no Solo

A quantidade de gua e
o movimento desta nos
solos depende em larga
escala do tipo de solo e
da sua estrutura;

Granulometria do Solo Num

extremo, a areia (partculas de
0,05 a 2 mm); no outro a argila,
com partculas de dimetro
inferior a 0,002 mm (2 m); o
limo apresenta partculas que vo de 0,002 a 0,05 mm.
11

Solos arenosos: rea de superfcie por grama de solo baixa, existindo grandes
espaos entre as partculas;

Solos argilosos: reas de superfcie elevadas, com muito menos espaos existentes
entre as partculas; as partculas de argila, com a ajuda de substncias orgnicas como
o hmus, podem agregar-se de modo a formarem canais que facilitam a aerao do
solo e a infiltrao da gua;

Dependendo da quantidade de gua disponvel nos solos, esta pode existir como uma
pelcula aderente superfcie do solo, pode preencher os canais mais finos mas no os
mais grossos, ou pode preencher todos os espaos disponveis entre as partculas;

Nos solos arenosos, os espaos entre as partculas so to largos que a gua

permanece apenas superfcie e nos interstcios destas. Retm apenas 15% de volume
de gua quando irrigados;

Em solos argilosos, a gua retida, contrariando a fora gravtica. Um solo argiloso

aps uma chuvada pode reter um volume de gua que vai at aos 40%;

Capacidade de Campo quantidade de gua num solo saturado e cujo excesso de

gua pode ser drenado;

Composio mineral minerais constituintes do solo

tambm so importantes; os minerais mais importantes
so os chamados macronutrientes, por serem minerais
dos quais as plantas necessitam em grande quantidade;
existem tambm os micronutrientes, que embora
presentes em menores quantidades, so muitas vezes
essenciais para a planta;

IMPORTANTE: a presena de um determinado

mineral no solo no significa que este esteja
disponvel para a planta; esta disponibilidade
est relacionada com o pH do solo, variando
acentuadamente.

Absoro de gua pela raiz Estruturas denominadas pelos radiculares (root hairs
projeces das clulas epidrmicas) desempenham um papel fundamental na absoro da
gua do solo pelas razes da planta; tm duas funes:

12

(1) - Aumentam a rea de interface entre a planta e o solo, aumentando a rea de

absoro de gua por parte da planta;
(2) Permitem a explorao de micronichos de
solo, nos quais existe gua disponvel e que
no est acessvel s razes;
O solo uma mistura entre gua, solutos
dissolvidos, e ar; medida que o solo vai secando, a
gua vai sendo adsorvida junto s superfcie das
partculas do solo, e medida que vai ocorrendo a
absoro desta por parte das razes; desta forma, na
interface ar-gua, o solo vai formando concavidades que provocam uma tenso na soluo de
solo (tenso negativa), que aumenta medida que o solo vai secando e, portanto, mais gua
vai sendo absorvida;
Discusso: ser que toda a superfcie da raiz igualmente permevel gua (B), ou
existem regies mais permeveis que outras ao longo das razes (C)? a gua entra mais
rapidamente junto extremidade da raiz; as regies mais maturas da raiz so menos
permeveis gua, por terem desenvolvido uma camada externa de tecido protector
exoderme/ hipoderme com materiais hidrofbicos nas paredes das clulas; este facto
importante para permitir a subida de gua (que contm nutrientes necessrios planta)
devido a tenses do xilema a partir das regies distais do sistema radicular.

13

Hiptese que
explica o grfico

Coifa (root cap) extremidade da raiz permite raiz perfurar o solo medida que esta cresce;
Regio meristemtica regio na qual ocorrem sucessivas divises celulares, permitindo o
crescimento; uma zona com clulas indiferenciadas na qual no existem vasos condutores;
permite o crescimento apical da planta;
Zona de elongao - zona relativamente impermevel que j possui vasos xilmicos; aps
esta, existe uma zona fortemente permevel, onde existem pelos radiculares;

Suberificao - medida que a raiz envelhece, vai havendo uma deposio de suberina
(suberificao), que torna as paredes celulares impermeveis;

Movimento de gua na raiz a gua pode fluir da epiderme para a endoderme da raiz de 3
formas: via do apoplasto (1); via do simplasto (2); via transmembranar (3)
(1) Apoplasto - sistema contnuo de paredes celulares, bolhas de ar intracelulares, e
lmen de clulas mortas fibras e clulas condutoras do xilema; neste, a gua passa
14

atravs do crtex da raiz sem precisar de atravessar qualquer membrana, movendo-se

por entre as paredes das clulas e os espaos extracelulares;
(2) Simplasto Diz respeito rede citoplasmtica das clulas, interconectada pela
existncia de plasmodesmos; nesta via, a gua movimenta-se atravs dos
plasmodesmos;
(3) Via transmembranar/ transcelular gua entra por um lado de uma clula, saindo
pelo lado oposto, e prossegue deste modo ao longo da rede de clulas; neste caso, a
gua atravessa as membranas celulares; gua atravessa o citoplasma, o tonoplasto e
entra no vacolo (implica o transporte ao longo de um maior nmero de membranas
do que no caso do transporte simplstico)

Ao nvel da endoderme, o movimento da gua atravs do apoplasto obstrudo pelas

Bandas de Caspary (Casparian strip) bandas impregnadas com suberina; estas bandas
rompem a continuidade da via do apoplasto, forando a gua e os solutos a passarem pela
membrana plasmtica, de modo a atravessarem a endoderme via simplstica utilizada
obrigatoriamente a este nvel; qual a vantagem do passo simplstico obrigatrio? espcie de
15

filtrao da gua (exemplo: quando existe um excesso de sais, esta via permite uma reteno
destes sais);

Medio da gua no solo:

Mtodo Gravimtrico Recolhe-se uma amostra de solo, pesa-se, leva-se a uma

estufa, e volta a pesar-se (desta vez, o peso seco); a diferena registada no peso antes
e depois de levar a amostra estufa indica-nos a gua que estava no solo e
desapareceu na estufa sabemos o contedo de gua em massa (ex. grama de gua/
grama de solo);
Vantagens: preciso e pode ser efectuado em diversos locais;
Desvantagens: Exige trabalho e existe um intervalo de tempo entre a recolha da
amostragem e a obteno dos resultados; pode gerar erros de localizao.

Observao do solo mtodo mais elementar; recolhem-se amostras de solo e este

analisado directamente pela sua textura; por exemplo, um solo hmido adere aos
dedos, contrariamente a um solo seco;
Vantagens: No implica custos e pode ser efectuado em diversos locais;
Desvantagens: necessrio ter experincia; mtodo pouco preciso.

Neutron Scattering mtodo altamente especializado, baseado em sondas de

neutres. A sonda de neutres um aparelho que se insere no solo, e possui uma
substncia radioactiva que emite neutres de alta energia para o solo, os quais
interagem sobretudo com protes. Quando um neutro interage com um proto, gera
um neutro de baixa energia, e esta sonda possui um detector de neutres de baixa
energia. A gua uma substncia rica em protes, pelo que se o solo rico em gua,
os neutres de alta energia rapidamente encontram protes H+, transformando-se
num neutro de baixa energia, que rapidamente detectado pela sonda;
Vantagens: permite a anlise de um volume de solo relativamente grande; diminui os
erros relativos microlocalizao da gua (analisa diferentes profundidades); preciso
e permite a obteno de amostras repetidas em diferentes locais;
Desvantagens: aparelho caro; necessria licena para utilizao de substncias
radioactivas; no pode ser utilizado perto da superfcie do solo, podendo gerar erros
neste caso;

Tensimetros aparelhos relativamente baratos que permitem avaliar o contedo

hdrico do solo. No entanto, no funcionam bem em solos com uma tenso elevada,
16

ou seja, em solos muito secos assim, so operacionais numa gama limitada de

valores de potencial hdrico (0 a 75 bar de tenso). Um tensimetro possui uma ponta
feita em cermica porosa, e um tubo cujo interior est preenchido por um lquido
(mercrio, lcool) que liga a ponta porosa a um leitor de tenso se colocarmos o
tensimetro no solo, gera-se um contnuo entre o solo e o liquido que est no interior
do aparelho (atravs da ponta porosa), e a tenso que existe no solo, ou seja, a
apetncia que o solo possui para captar gua, propaga-se at ao leitor de tenso,
sendo este um mtodo expedito.

Espectros baseados na resistncia elctrica do solo No solo existem sais minerais,

pelo que a soluo do solo condutora de electricidade um solo hmido conduz
electricidade, um solo seco no, havendo uma relao entre a condutividade eltrica
do solo e o seu contedo hdrico; estes blocos de gesso possuem dois elctrodos,
medindo a condutncia (condutividade entre os dois elctrodos) quando esta alta,
significa que existe gua no solo; quando baixa, indica-nos que o solo se encontra
seco. Estes aparelhos tendem a funcionar melhor em solos com maiores tenses, ou
seja, com maior escassez de gua.

Psicrometria de Solos Utilizao de psicrmetros de solo, que possuem sondas que

so introduzidas no solo, contendo uma estrutura porosa que cobre o psicrmetro e
que permite que a atmosfera de solo entre em equilbrio com a atmosfera interior do
aparelho; se medirmos a humidade relativa da atmosfera do solo, sabemos o potencial
hdrico do solo.

NOTA: o problema do controlo da rega torna-se particularmente importante em culturas

particulares, como por exemplo no caso das vinhas; as vinhas necessitam de estar sob stress
hdrico para produzirem bom vinho, mas quando este existe em excesso, diminui a produo
da uva necessrio encontrar um equilbrio entre a quantidade e a qualidade da uva (se
houver muita gua, obtm-se muita uva mas com poucos acares, resultando num vinho de
baixa qualidade, pelo que necessrio sujeitar as culturas numa fase do seu crescimento a um
stress hdrico).

17

Transporte Xilmico ocorre aps a absoro de gua pelas razes; O xilema composto por
dois tipos de clulas:
1. Traquedos so clulas mortas, relativamente longas e
estreitas, e possuem uma parede secundria lenhificada
(confere ridigez); as suas extremidades transversais so
estreitas e esto cobertas por uma fina membrana, enquanto
as paredes laterais so espessas e apresentam numerosos
poros (pits - zonas nas quais no existe parede secundria
lenhificada) que permitem a passagem de substncias; estas
clulas alinham-se topo a topo, de modo a facilitar o
movimento de gua no seu interior; os traquedos so tpicos
das gimnosprmicas, no estando no entanto completamente
ausentes em angiosprmicas;
2. Elementos de vaso (traqueias) so mais frequentes nas
angiosprmicas, existindo no entanto em algumas gimnosprmicas (Gnetales e alguns
fetos); estas clulas so mais curtas e largas que os traquedos, apresentando a mesma
parede secundria lenhificada; nestas clulas, as paredes transversais desaparecem, e
as clulas ficam alinhadas topo a topo, formando um tubo; as paredes laterais
apresentam pontuaes simples ou aureoladas; outra
distino funcional o facto dos elementos de vaso
serem mais eficientes na deslocao da gua (so
mais largas causam menos resistncia passagem
de gua) mas menos eficientes como estrutura de
suporte; h ainda um problema importante associado
s traqueias estas esto muito mais sujeitas
formao de bolhas de ar, devido ao facto de serem
mais largas, as quais podem bloquear a passagem de
gua para as zonas superiores da planta, originando
um

processo

denominado

por

cavitao;

nos

traquedos, o menor dimetro das clulas e o facto de estas possurem membranas

transversais impede a passagem das bolhas de ar.

Controlo da Cavitao nas conferas, existe uma estrutura, o trus (um espessamento),
que est situada na membrana entre dois vasos condutores, e que impede a propagao
18

das bolhas de ar, actuando como uma vlvula capaz de obstruir os poros, evitando assim
que as bolhas de gs sejam propagadas para traquedos vizinhos.

Aula 5 Relaes Hdricas nas Plantas (RH5)

Cavitao Interrupo da coluna de gua que se prolonga desde o solo at s folhas da
planta, impedindo o transporte da gua ao longo do
xilema; nalgumas circunstncias (no ptimas) a
coluna de gua formada pelo feixe de vasos
condutores quebra-se, forma-se uma embolia que
se expande no interior do feixe, e gera-se ar onde
devia haver gua deixa de haver transporte de
gua nesse vaso condutor; se a cavitao ocorrer ao
nvel de inmeros vasos, a planta pode ficar incapaz
de transportar a gua do solo para a sua parte
area (e morre); assim, as plantas desenvolveram
um conjunto de mecanismos que lhes permitem
evitar a formao de bolhas de ar ao nvel dos seus
vasos condutores;

Porque que ocorre a cavitao? No xilema,

existe uma tenso negativa; quanto maior for a
transpirao e menor a quantidade de gua
disponvel no solo, mais aumenta a tenso no
19

interior da planta; quando isto acontece, aumenta a probabilidade de ocorrncia de cavitao;

quando um vaso cavita, este fenmeno muito difcil de se reverter (ser que se reverte?); o
que as plantas tm um conjunto de dispositivos que tentam minorar os efeitos da
cavitao, sendo o trus um deles quando se forma uma embolia, gera-se uma presso nesse
local que empurra o trus contra a pontuao, e este veda a pontuao para que o ar no
passe desse ponto, no se propagando a embolia; outras plantas no possuem trus, estando
as pontuaes dos vasos separados por uma
membrana com pequenos orifcios, que
oferecem resistncia passagem do ar,
impedindo que a embolia se propague a
clulas adjacentes; como os vasos xilmicos
esto interconectados atravs de placas
perfuradas nas suas paredes secundrias, a
gua consegue contornar o vaso bloqueado
pela embolia, movendo-se atravs do vaso
adjacente ao bloqueado. No caso da imagem
da esquerda (embolia em elementos de vaso),
o que se verifica que as placas perfuradas
no foram capazes de conter a embolia, e esta
propagou-se

ao

longo

de

trs

vasos

condutores, obrigando a seiva a ascender

atravs de vasos vizinhos obviamente, a
resistncia

ao

transporte

de

gua

vai

aumentar.

O que acontece quando cortamos uma folha? o rasgo na folha provoca a entrada de ar, e
forma-se uma embolia, sendo a seiva obrigada a contornar esse local, seguindo depois o seu
trajecto normal; a necessidade de deslocao da seiva para os vasos vizinhos atravs dos poros
aumenta a resistncia ao transporte de gua ao longo da planta.

Eliminao das bolhas de gs pelo xilema noite, quando a transpirao mais baixa, o
potencial de presso (p) no xilema aumenta, e o vapor de gua e outros gases podem
simplesmente dissolver-se na soluo xilmica; alm disto, algumas plantas so capazes de

20

criar presses positivas (presses de raiz) no xilema provocam a dissoluo dos gases,
desfazendo as bolhas de gs.

Falhas no Sistema do Trus quando o sistema do trus falha, h propagao da embolia;

(a) a formao da bolha de ar no leva deslocao do trus, e o ar passa atravs da
membrana para a clula do lado; o trus no responde ao aumento de presso, e o ar
acaba por passar pelas perfuraes da membrana;
(b) projeco do trus feita de uma forma desequilibrada, acabando por atravessar a
abertura h passagem de ar pelo espao formado; o trus no consegue bloquear a
abertura;
(c) A projeco do trus no suficiente, ou seja, este no encosta o suficiente
abertura, havendo uma falha na capacidade do trus selar a abertura;
(d) - Ocorrncia de uma ruptura na membrana que sustm o trus, passando o ar pela
zona que sofreu essa mesma ruptura.

21

Eficincia do Sistema de Trus avaliada atravs de equaes, baseadas em trs medidas

anatmicas: Da dimetro da abertura, Dt dimetro do trus e Dm dimetro da
membrana;

ndice de Flexibilidade (F = margo flexibility ndex)

- F varia entre 0 e 1;
- se o Dt for igual ao Dm (se tudo fosse trus), teramos F = 0 (sem flexibilidade do trus);
- medida que aumenta o Dt, a flexibilidade do trus diminui e, portanto, quanto mais
pequeno for o trus relativamente ao dimetro da membrana, maior ser a sua
flexibilidade.

Sobreposio do Trus sobre a Abertura (O = torus overlap against pit)

- tambm varia entre 0 e 1;

- se Da = Dt, a sobreposio ser nula;

Efeito de Vlvula - competncia da vlvula para parar a embolia (Vef = Valve Effect)

22

Teoria da Coeso-Tenso teoria actualmente aceite para explicar a subida da seiva xilmica.
As molculas de gua tm uma elevada coeso entre elas, resultante das pontes de hidrognio
tendo uma elevada coeso, as molculas de gua resistem a tenses elevadas, sendo por isso
mesmo esta teoria designada por teoria da coeso-tenso. Segundo esta, a gua ascende na
planta puxada a partir da atmosfera, sendo a fora gerada nas folhas, provocando uma
tenso no xilema (se as molculas no fossem fortemente coesas, no resistiriam a esta
tenso).

Como se gera a tenso? A tenso gerada nas paredes celulares das folhas. As molculas de
gua que chegam folha atravs dos vasos xilmicos ficam na zona junto s paredes celulares,
e vo evaporando para o ar existente no mesfilo das folhas, passando posteriormente para a
atmosfera atravs dos estomas. medida que as molculas de gua vo passando para a
atmosfera, via estomas, outras molculas que esto nos espaos de ar juntos s paredes
celulares vo evaporando, e medida que estas evaporam, vo-se restringindo cada vez mais
23

aos ngulos entre as clulas, havendo acumulao de gua nestes ngulos. Quanto menos
gua estiver disponvel (quanto mais pequeno o ngulo), mais adsorvida a gua pelas
paredes celulares (altamente hidrfilas), gerando uma tenso de adsoro sobre a gua, sendo
esta propagada ao longo de toda a coluna de gua, e responsvel pela subida da gua at s
folhas. Esta tenso mantida porque a gua est constantemente a ser evaporada das
paredes celulares para os espaos intracelulares.

Gutao Nalgumas circunstncias, sobretudo no final da noite (algumas plantas), surgem

gotculas de gua na extremidade do caule ou folhas, e resulta da formao de uma presso
radicular (presso no xilema das razes) que se propaga at ao local onde ocorre a gutao.
Neste caso, o xilema encontra-se sob presso, ao invs de se encontrar sob tenso.
Quando que ocorre a gutao? Quando a transpirao nula ou reduzida, fechando os
estomas ( noite). A fora de tenso do xilema dissipa-se, uma que os espaos intracelulares
ficam saturados em gua, no havendo evaporao. Alm disto, tem que existir presso
positiva gerada pela acumulao activa de ies no xilema das razes. Durante a noite, se os
estomas estiverem fechados, a tenso gerada for baixa e se houver transporte activo de ies
ao nvel da raiz do solo para o interior dos vasos xilmicos, h um abaixamento do potencial
osmtico dos vasos xilmicos, h afluxo de gua devido diminuio do potencial osmtico
(com consequente diminuio do potencial hdrico), e este afluxo gera uma presso
hidrosttica no interior das razes, que se propaga e leva sada de gotculas de gua nalguns
rgos da planta. Portanto, a gutao explicada pela ocorrncia de uma presso radicular
positiva.
No entanto, as presses positivas mais elevadas medidas at agora ao nvel do xilema
no explicam subidas de gua acima dos 7 metros de altura. Assim sendo, esta teoria no
explica o transporte de gua na maioria das rvores. Uma forma de medir a presso radicular
faz-se colocando as razes num contentor com gua, cortam-se as razes, ligamos a superfcie
de corte a um sistema com mercrio, e observa-se a subida de mercrio gerada pela ligao s
razes.

Transpirao Fenmeno que garante a gerao de tenso no interior do xilema; A gua

chega s folhas pelos vasos xilmicos, saindo depois destes, ficando adsorvida s paredes das
clulas do mesfilo, e vai evaporando para os espaos intercelulares, em particular para
espaos maiores designados por cavidades subestomticas. A partir daqui, a gua pode
finalmente difundir-se para a atmosfera (transpirao).
24

A concentrao de vapor de gua no interior da folha muito elevada, sendo superior

registada na atmosfera, e este facto permite a sua difuso para o exterior atravs dos
estomas (uma vez que a epiderme possui uma cutcula largamente impermevel). Por outro
lado, como o mesfilo das folhas altamente fotossinttico, existe um elevado consumo de
CO2, de modo que a concentrao deste gs no interior das folhas tem que ser inferior ao
existente na atmosfera. Assim, existe ao nvel dos estomas um gradiente de vapor de gua
contrrio ao gradiente de CO2 medida que sai vapor de gua, entra dixido de carbono. A
abertura dos estomas est essencialmente ligada entrada de CO2, pelo que a muitas vezes as
plantas perdem gua pelos estomas porque necessitam da entrada de CO2 para efectuarem a
fotossntese.

A regulao estomtica essencial para a planta, pois os estomas tm que estar com o
grau de abertura ideal para optimizar a fotossntese mas no comprometer o estado hdrico da
planta. A abertura estomtica uma abertura pequena, oferecendo resistncia passagem de
vapor de gua esta resistncia pode variar, consoante os estomas estejam mais ou menos
abertos (resistncia estomtica).
Outra resistncia a resistncia da boundary layer - camada de ar estacionrio que se
gera volta da folha, e que est saturada em vapor de gua. Se no houver turbulncia,
medida que o vapor de gua atravessa os estomas, acumula-se na proximidade da folha, e o ar
em volta da folha fica saturada em vapor de gua, e o gradiente de vapor de gua entre o
exterior e o interior diminui, fazendo baixar a transpirao (aumenta a resistncia passagem
25

de gua). Se houver vento, o ar mantm-se seco junto aos estomas e a transpirao continua a
processar-se.

Existe uma relao entre a

quantidade de vapor de gua que a
atmosfera

pode

conter (quando

saturada a quantidade mxima) e a

temperatura. Por exemplo, a 10 C, a
atmosfera fica saturada com vapor de
gua a 0,522 mol m-3, ou seja, no
possvel colocar mais moles em cada
metro cbico de ar a 10 C (ficamos
com

atmosfera

saturada

humidade relativa a 100%). No

entanto, aumentando a temperatura
at 40 C, a atmosfera fica saturada
com cerca de 3 moles m-3 (cerca de 3 vezes mais), da termos a sensao que o ar fica
particularmente hmido quando est muito calor, uma vez que a atmosfera saturada a esta
temperatura contm muito mais vapor de gua do que a atmosfera a 10 C. Assim sendo,
podemos dizer que a humidade absoluta aumenta com a temperatura. Ateno que no
podemos dizer o mesmo em relao humidade relativa (100% 100%, quer seja a 10 ou a
40C).

Por

outro

lado,

tambm podemos estabelecer

uma relao entre a humidade
relativa e o potencial hdrico.
Uma

atmosfera

saturada

(humidade relativa a 100%)

no consegue receber mais
gua, pelo que o potencial hdrico neste caso igual a 0. medida que decresce a humidade
relativa da atmosfera, h uma diminuio bastante acentuada do potencial hdrico. Da que se
colocarmos espcies incapazes de controlar o teor de gua do seu corpo (poiquilohdricas),
como no caso dos musgos, numa atmosfera seca, eles rapidamente perdem toda a sua gua,
26

ficando com potenciais hdricos bastante baixos. O que os distingue de outras plantas o facto
de, ao serem reidratados, serem capazes de elevar novamente o seu potencial hdrico,
retomando a sua actividade fisiolgica normal. Nas plantas superiores, existem poucas
espcies poiquilohdricas, sendo estas denominadas por plantas de ressurreio (parecem
capazes de ressuscitar).

27

28

Por

outro

lado,

tambm podemos estabelecer

uma relao entre a humidade
relativa e o potencial hdrico.
Uma

atmosfera

saturada

(humidade relativa a 100%)

no consegue receber mais
gua, pelo que o potencial hdrico neste caso igual a 0. medida que decresce a humidade
relativa da atmosfera, h uma diminuio bastante acentuada do potencial hdrico. Da que se
colocarmos espcies incapazes de controlar o teor de gua do seu corpo (poiquilohdricas),
como no caso dos musgos, numa atmosfera seca, eles rapidamente perdem toda a sua gua,
ficando com potenciais hdricos bastante baixos. O que os distingue de outras plantas o facto
de, ao serem reidratados, serem capazes de elevar novamente o seu potencial hdrico,
retomando a sua actividade fisiolgica normal. Nas plantas superiores, existem poucas
espcies poiquilohdricas, sendo estas denominadas por plantas de ressurreio (parecem
capazes de ressuscitar).

Aula 6 Relaes Hdricas nas Plantas (RH6)

Gradiente de Presso de Vapor (ou Dfice de Presso de Vapor) No caso referimo-nos ao
vapor de gua e o gradiente em causa o gradiente de presso parcial de vapor de gua entre
o interior e o exterior da folha; quando falamos no dfice, falamos da diferena entre a
presso de vapor de gua na atmosfera (mais baixa) e o interior da folha.
No grfico, temos primeiro uma situao (A), por exemplo pela manh, na qual a folha
regista 10 C, e a humidade relativa no interior da folha de 100% (partimos do principio que
a humidade relativa dos espaos areos da folha sempre 100%, pois estes esto em contacto
com os vasos condutores, paredes celulares, entre outros, estando sempre saturados de gua).
A esta temperatura e humidade relativa corresponde uma determinada humidade absoluta
(grfico da ltima aula), e a esta corresponde uma determinada presso parcial de vapor de
gua = 1,23 KPa. Passando agora para o caso da atmosfera na qual se encontra esta folha,
tambm ela regista uma temperatura de 10 C, mas a humidade relativa de 50%, qual
corresponde uma presso de vapor de 0,61 KPa. Portanto, a presso de vapor de gua na folha
maior do que a da atmosfera, registando uma diferena de 0,61 KPa assim, o vapor de gua

vai-se deslocar da regio com maior presso para a de menor presso, ou seja, do interior da
folha para a atmosfera.
Se considerarmos a mesma folha umas horas mais tarde, situao (B), nesta temos
uma subida da temperatura da folha de 10 para 20C, continuando a humidade relativa nos
100%. Para este caso, no entanto, a presso de vapor aumentou para 2,34 KPa. Na atmosfera,
tambm esta passou para os 20 C, e tornou-se menos hmida (humidade relativa na ordem
dos 26%). O resultado deste facto o aparecimento de uma presso parcial de vapor de gua
igual a 0,61 KPa na atmosfera dfice de presso entre a folha e a atmosfera aumentou para
1,73 KPa, ou seja, a transpirao na planta aumenta (h maior passagem de gua para a
atmosfera, considerando a mesma abertura estomtica nestas condies a planta poder
eventualmente regular a abertura estomtica para controlar a taxa de transpirao).
No caso (C), temos uma
outra folha, estando esta mais
exposta ao Sol (da a sua
temperatura ser 30C), mas
que se encontra igualmente
numa atmosfera de 20 C.
Neste caso, a sua humidade
relativa continua a ser de 100%,
mas a presso de vapor de gua

igual

4,24

KPa.

Na

atmosfera, os dados mantmse, mas o gradiente de presso

vai ser muito maior do que no
caso anterior, devido ao aumento da presso de vapor de gua na folha (derivada do aumento
de temperatura na folha) h um aumento capacidade potencial de transpirao.
A relao humidade relativa/ temperatura essencial na definio da presso de
vapor; o dfice de presso de vapor entre o interior da folha e a atmosfera a fora que
garante a transpirao.

Condutncia Estomtica - Para o mesmo potencial transpiratrio, a transpirao efectiva pode

ser diferente consoante a regulao da abertura estomtica. Importante tambm no fluxo de
transpirao a existncia da boundary layer camada de ar estacionrio que se forma em
torno das folhas quando no existe circulao do ar.
No grfico Quando h vento (moving
air), existe uma relao quase linear entre o fluxo
transpiratrio e a abertura estomtica; quando
no h circulao de ar (still air), o que se verifica
o aparecimento rpido de uma linha de
saturao,

abertura

dos

estomas

praticamente no conduz a uma maior taxa de

transpirao h formao da boundary layer
(altamente saturada em vapor de gua, oriundo
da folha), o que leva a que deixemos de ter um
gradiente do vapor de gua entre o interior da
folha e o exterior (que fica coberto por uma
camada extremamente hmida, reduzindo ou
anulando ou dfice de presso), diminuindo assim a transpirao.

Estoma O estoma propriamente dito corresponde a uma abertura, o ostolo. Esta abertura
est rodeada por duas clulas altamente especializadas, as clulas guarda, e geralmente
existem ainda outras duas clulas a flanquear as clulas guarda, as clulas companheiras ou
subsidirias. As paredes celulares das clulas guarda so muito desiguais, isto , existem zonas
muito menos espessas e outras muito mais espessas facto importante na regulao da
abertura estomtica.
Na figura (A), temos o estoma
aberto, porque as clulas guarda tm as suas
paredes afastadas uma da outra. Quando
estas se aproximam, o estoma fecha.

Porque que as paredes se movem

afastando-se/

aproximando-se

uma

da

outra? Este movimento d-se devido

entrada de gua no interior das clulas de
guarda. Quando estas esto plasmolisadas (com pouca gua), as paredes interiores ficam

encostadas uma outra. Se, por outro lado, estas se encontram trgidas, aumentam de
volume e adquirem uma curvatura que provoca o afastamento das suas paredes. Assim, o
estoma abre quando as clulas guarda esto trgidas, e fecha quando estas esto
plasmolisadas.

Porque que a entrada de gua provoca a abertura do estoma? Aparentemente, se h um

aumento de volume das clulas aquando da entrada de gua, poderamos pensar que este
aumento levaria a que as clulas se encostavam uma outra, e no que se afastavam. No
entanto, devido irregularidade existente na parede celular destas clulas que ocorre a
abertura estomtica. A parede interior de ambas as clulas de guarda bastante mais
espessa que a parede exterior; alm disto, existe uma estrutura de microfibrilhas de celulose
dispostas radialmente ao longo do eixo da clula que formam uma espcie de anis
semirrgidos ao longo desta. Como resultado destes dois fenmenos, quando as clulas
ganham volume, a parede exterior (menos espessa) alonga-se mais do que a interior, fazendo
com que a clula sofra a curvatura caracterstica ao sofrerem esta curvatura, as paredes
interiores afastam-se, e o estoma abre. Por outro lado, as estruturas anelares impedem que a
clula alargue e, portanto, as clulas alongam-se mas no alargam ao aumentar de volume.

Estomas das Gramneas Possuem um sistema

diferente, com as clulas em forma de halteres. Estas
so mais espessas nas extremidades e menos espessas
no meio. Quando ganham volume, as paredes interiores
afastam-se, e quando plasmolisadas, aproximam-se.

A luz A luz importante em diversos processos nas plantas, sendo o mais evidente a
fotossntese (produo de energia para a planta). O excesso de luz pode provocar fotoinibio,
e esta tem ainda um papel vital enquanto sinal ambiental; A fotomorfognese o fenmeno
pelo qual as plantas adquirem uma dada forma devido ao efeito da luz; O fototropismo diz
respeito ao controlo da direco de crescimento das plantas pela luz.
Nem todos os comprimentos de onda da luz so igualmente importantes enquanto
sinal ambiental. Existem dois tipos principais de respostas da planta a sinais provenientes da
luz: respostas do fitocromo, e respostas luz azul.
Os comprimentos de onda respeitantes transio luz vermelha/ infravermelho so
particularmente importantes como sinais. Foi encontrado um receptor especfico de luz

vermelha, o fitocromo, que controla o desenvolvimento vegetativo e reprodutivo - a luz azul

tem um papel complementar neste processo.
Existem vrios receptores conhecidos para a luz azul, pelo que esta produz variadas
respostas: fototropismo, inibio do alongamento do hipoctilo, regulao da abertura
estomtica, estimulao da sntese de clorofilas e carotenides, activao da expresso
gentica, fototaxia, etc.

Regulao Estomtica pela Luz Azul A resposta desencadeada ao nvel das clulas de
guarda, as quais so activadas pela luz fundamentalmente de duas formas: para realizarem
fotossntese, ou para responderem luz azul; Os estomas abrem quando as clulas guarda
ficam trgidas, e esta turgescncia deve-se entrada de gua nestas clulas. Mas o que que
tem que variar para que se d a entrada de gua? O potencial hdrico tem que ser mais baixo
na clula guarda do que no meio, para que a gua se desloque para o interior das mesmas.
Surgiram duas teorias para explicar a diminuio do potencial hdrico nas clulas guarda:
1. Acumulao de sacarose faria baixar o potencial osmtico, e consequentemente o
potencial hdrico;
2. Acumulao do io potssio e dos seus
contra-ies (cloreto e malato).
No grfico ao lado (em cima) variao
da radiao fotossinteticamente activa (PAR),
essencialmente entre os 400 e os 700 nm, ao
longo

de

um

dia;

(em

baixo)

abertura

estomtica de uma planta neste mesmo dia

estomas nunca esto completamente fechados,
nem mesmo durante a noite. Analisando os
grficos, existe uma relao muito prxima
entre a abertura estomtica e a disponibilidade
de luz aponta para a teoria da sacarose (+ luz =
+ disponibilidade fotossinttica = + produo de
sacarose = abertura estomtica).

Na experincia que se segue, mediu-se a

abertura estomtica ao longo de vrias horas durante
as primeiras 2 horas a luz foi iluminada por luz
vermelha (tendo a abertura estomtica passado de
cerca de 2 m para 7 m). Aps as 2 horas, a luz
vermelha deixa de causar um aumento significativo na
abertura do estoma, havendo uma estabilizao por
esta altura. No entanto, se ao fim das 2 horas
sobrepusermos luz azul luz vermelha, verifica-se um aumento muito significativo da abertura
estomtica. Assim, conclui-se que at certo ponto a luz vermelha capaz de induzir abertura
estomtica, mas a luz azul apresenta um papel especfico neste processo.
NOTA: o efeito da luz azul implica pelo menos pr-activao pela luz vermelha, isto porque
uma vez que a luz azul desencadeia tanto a fotossntese como a abertura estomtica,
necessria a luz vermelha para saturar a resposta fotossinttica deste modo, fica claro que a
abertura dos estomas pela luz azul no est relacionada com uma estimulao da fotossntese
ao nvel das clulas de guarda.

Porque que houve uma abertura estomtica aquando da iluminao pela luz azul? Porque
houve um aumento de volume das clulas de guarda (NOTA: nesta experincia as paredes
celulares das clulas foram digeridas, e portanto foram iluminados apenas os protoplastos); Os
protoplastos, ao serem iluminados, aumentaram de
volume e, portanto, a luz azul provoca abertura
estomtica por provocar um aumento de volume dos
protoplastos das clulas de guarda.
Ao analisarmos o volume do protoplasto das
clulas guarda (controlo) com radiao vermelha e
posteriormente com luz azul, verifica-se uma estabilizao
deste entre os 15 e os 30 minutos (red light on). A partir
dos 30 minutos, havendo adio da luz azul, h um aumento considervel do volume dos
protoplastos (blue light on). Por outro lado, adicionando ao meio vanadato, mesmo sob o
efeito da luz azul, o aumento de volume dos protoplastos inibido - O vanadato um inibidor
das ATPases membranares, inibindo o transporte de protes atravs da membrana. Este facto
sugere que o aumento de volume dos protoplastos est associado actividade de uma bomba
protnica atravs da membrana.

Suspendendo-se protoplastos de clulas guarda no meio, e monitorizando o pH do

meio no qual esses protoplastos foram inseridos,
observou-se que aquando da iluminao pela luz
vermelha, o pH mantm-se estvel numa regio
mais alcalina; no entanto, ao fazer incidir pulsos
de

luz azul com

diferentes

intensidades,

verificou-se uma diminuio do pH do meio no

qual estavam suspensos os protoplastos (sendo
essa diminuio tanto maior quanto maior a
intensidade do feixe de luz). Isto mostra que a luz
azul faz com que os protoplastos iniciem um transporte de protes ao longo da membrana, do
interior para o exterior da clula.

Teoria da Acumulao de Potssio (A) A acumulao de potssio dentro das clulas no

processo de abertura estomtica (e diminuio do potencial hdrico) uma consequncia da
extruso de protes, isto porque a componente elctrica do gradiente protnico possibilita o
transporte passivo de ies potssio para dentro da clula, via canais regulados por voltagem; A
sada de protes compensada pela entrada de potssio, que por sua vez acompanhada
pela intruso de ies cloreto e malato este processo faz baixar o potencial osmtico (fica
mais negativo devido a uma maior concentrao de solutos), diminuindo o potencial hdrico, e
permitindo que entre gua e as clulas ganhem volume, provocando a abertura estomtica.

Teoria da Acumulao de Sacarose Sacarose proveniente da hidrlise do amido (comea

por originar maltose, seguindo depois uma via de reaces enzimticas at ser produzida
glucose-1-fosfato, que por sua vez convertida a sacarose) figura (B); ou sacarose
proveniente no da hidrlise do amido, mas do ciclo de Calvin figura (C).

Mas afinal qual das teorias est correcta? Aparentemente, parecem estar ambas. Num estudo
no qual se acompanhou a abertura estomtica ao longo do dia, verificou-se que a abertura
inicial corresponde a um aumento muito significativo de potssio nas clulas de guarda
abertura dos estomas ao incio do dia
parece ser da responsabilidade da
acumulao de potssio; mas, a partir
de uma dada altura do dia (cerca das
13h),

comea

diminuir

concentrao de ies de potssio nas

clulas, e os estomas continuam
abertos

um

aumento

da

concentrao de sacarose nas clulas medida que a planta faz a sua fotossntese, que
mantm a abertura estomtica. Assim, existem como que duas fases osmorregulatrias, uma
primeira dominada pela acumulao de potssio, e uma segunda pela de sacarose.

De onde provm os solutos osmoticamente activos? Podem ser quatro, as vias que fornecem
os solutos necessrios para as clulas guarda:
1. A entrada de ies potssio e cloreto, acoplada biossntese de malato;
2. Produo de sacarose pela hidrlise do amido;
3. Produo de sacarose a partir do ciclo de Calvin (fixao de carbono no cloroplasto
da clula de guarda);
4. Ganho de sacarose apoplstica, gerada pelo mesfilo fotossinttico.
NOTA: Na abertura estomtica regulada pela luz vermelha, esta encontra-se totalmente
dependente da sacarose gerada pela fotossntese ocorrida ao nvel das clulas guarda.

Aula 7 Relaes Hdricas nas Plantas (RH7)

ABA (cido abscsico) Hormona vegetal responsvel pelo encerramento estomtico; Existem
vrias formas de cido abscsico nas plantas formas isomricas (mesma composio qumica,
estruturas distintas), e enantiomricas (caso particular de isomeria, na qual as molculas so a
imagem uma da outra no espelho). No entanto, a forma activa, e que ocorre naturalmente, a
forma (S)-cis-ABA; A forma (R)-cis-ABA uma forma inactiva e, portanto, no provoca o
encerramento estomtico; H tambm o (S)-2-trans-ABA, outra forma inactiva desta hormona,
mas que pode ser convertida para a forma cis, tornando-se assim activa.

A via biossinttica do ABA - inicia-se com o isopentenil difosfato (IPP), que por sua vez
tambm um precursor de outras hormonas importantes, as citoquininas (de facto, este
composto inicia uma via sinttica que origina quase todas as fitohormonas conhecidas); depois
ocorrem uma srie de passos na via de sntese at produo de ABA, mas o importante
salientar a ligao entre o ABA e outros compostos do metabolismo das plantas; o passo
seguinte na via produz farnesil difosfato (C15), o qual d origem a um outro grupo de
fitohormonas, os brassinoesterides; e, de seguida, o composto geranilgeranil difosfato (C20)
surge como o precursor das giberelinas; seguidamente, h tambm o aparecimento de um
caroteno, o fitoeno (pai de todos os carotenos); do fitoeno passamos para a zeaxantina (uma

xantofila), e desta para a violaxantina; aps esta, surge outra xantofila, a neoxantina, e por
fim o ABA-aldedo.
No esquema temos tambm a representao, colateralmente via metablica,
mutantes (milho e Arabidopsis) para as enzimas de converso, o que altera a sua via de sntese
do ABA. Aps o ABA-aldedo, h ainda uma outra categoria de mutantes, por exemplo os
mutantes flacca (significa fraco), que so assim chamados porque no conseguem sintetizar o
cido abscisico e, portanto, no conseguem controlar os estomas, estando estes
permanentemente abertos (o que aumenta a sua taxa de transpirao e provoca a perda de
turgescncia sofrem emurchecimento).

A maioria dos passos da via biossinttica do cido abssico do-se ao nvel do

cloroplasto, mas a sntese propriamente dita d-se no citoplasma (ltimos dois passos a
xantoxina, produzida a partir da neoxantina, origina ABA j no citoplasma).

Como se d a inactivao do
ABA? Esta pode ser feita de
duas maneiras: por conjugao
com monossacridos, ou por
oxidao (primeiro a cido
dihidrofaseico, e depois a cido
faseico). Isto uma forma de
regular a actividade biolgica
do cido abscisico sem ser
necessrio reprimir a sua sntese. Se a planta a dada altura entende que preciso restringir o

encerramento dos estomas, uma forma rpida de fazer esta regulao inactivar o ABA por
um destes dois processos.

Regulao Estomtica pelo ABA No grfico, temos na parte de cima o potencial hdrico das
folhas, e submeteu-se a planta a uma situao de seca. Assim, ao longo dos dias, o potencial
hdrico foi ficando cada vez mais negativo, devido maior presso osmtica (solutos mais
concentrados). Ao quinto dia, a planta
voltou a ser regada, e o potencial hdrico
regressou aos nveis iniciais.
Em baixo, temos por um lado
representada a resistncia estomtica
(resistncia que o estoma oferece sada
do

vapor

de

gua

da

cavidade

subestomtica, ou seja, transpirao)

que aumenta de forma considervel
quando o potencial hdrico da planta
comea a baixar (planta fechou os
estomas). Neste caso, o que se estudou
foi a resposta da planta aps ter sofrido
desidratao. Portanto, a planta responde perda de gua da folha fechando os estomas.
Assim sendo, quando as folhas perdem gua, h um aumento da resistncia estomtica, e em
paralelo existe um aumento do contedo em cido abscsico. Ao serem regadas, as plantas
aumentam o seu potencial hdrico, abrem os estomas, e o contedo em ABA diminui.
Outros estudos mostram que existe um encerramento estomtico mesmo antes de
haver a perda de gua do solo, ou seja, as plantas possuem sinais provenientes da raiz para a
parte area da folha que levam ao encerramento dos estomas de modo a evitar a perda de
gua ao nvel das folhas um desses sinais exactamente o cido abscsico. Este produzido
em enormes quantidades ao nvel das razes, e estas ao sentirem o solo secar (os processos
pelos quais a planta sente a seca so denominados por sensi) transmitem-no pelo xilema e
deste para as folhas, provocando o fecho dos estomas (processos de signaling). Existe,
portanto, uma relao estreita entre a diminuio do contedo de cido abscsico e a
reabertura dos estomas.
O pH foliar parece ter um papel importante na regulao do papel do ABA sobre os
estomas. Em circunstncias de ausncia de stress hdrico, o pH do apoplasto da folha
ligeiramente cido (6.3). Neste caso, existem protes disponveis no meio, e o cido abscsico

presente no apoplasto (fora das clulas) encontra-se na forma protonada ABAH. O ABA nesta
forma atravessa facilmente as membranas celulares, entrando no mesfilo das clulas, e no
interior destas desprotonado, pelo que j no atravessa facilmente as membranas, ficando
retido no interior das clulas. Portanto, quando o pH no apoplasto cido, d-se a protonao
do cido abscsico, e este fica retido nas clulas, no provocando o encerramento estomtico,
que s ocorre quando este atinge as clulas de guarda. No entanto, em condies de stress
hdrico, o pH do apoplasto sobe; o cido abscsico toma a sua forma desprotonada, no entra
nas clulas do mesfilo e capaz de ascender at s clulas guarda, onde capaz de provocar
o encerramento estomtico.

Como que a chegada do ABA s clulas guarda induz o encerramento dos estomas?
Anteriormente vimos que ao iluminarmos os protoplastos com luz azul, esta provocava um
decrscimo do pH do meio onde estes estavam suspensos, uma vez que esta activava uma
ATPase que bombeava protes para o exterior das clulas de guarda, acidificando o meio
exterior; ao adicionar ABA a este meio, o que acontece que o decrscimo de pH muito mais
ligeiro, pelo que este contraria a acidificao do meio que provocada pela luz azul o ABA
anula o efeito da luz azul, inibindo o transporte de protes para o exterior.
O encerramento estomtico provocado pelo ABA resulta do efluxo de ies K+ e outros
ies, e consequentemente da diminuio de presso osmtica e da perda de turgidez das
clulas guarda (processo inverso ao verificado no caso da luz azul), uma vez que as clulas
perdem gua.
No se sabe exactamente qual o mecanismo que leva sada dos ies K+ e outros ies. A
sada continuada de potssio parece implicar a abertura de canais de sada especficos, o que
requer uma despolarizao continuada da membrana. Esta despolarizao da membrana
depende de dois factores:

1. De uma despolarizao temporria directamente provocada pelo ABA;

2. Do aumento do clcio no citosol (parece clara a existncia de um papel importante do
clcio no encerramento estomtico provocado pelo ABA).
O clcio importado do exterior da clula, e tambm passa do vacolo para o
citoplasma no entanto, no se sabe exactamente qual o papel do clcio, sabendo-se apenas
experimentalmente que ao encerramento estomtico pelo ABA est sempre associado um
aumento do contedo citoplasmtico deste io.
O ABA activa canais de efluxo aninico de dois tipos, o tipo-R (rpidos) e o tipo-S
(lentos), os quais garantem a continuidade do processo de sada. A activao dos canais
rpidos essencialmente resultante da aco directa do ABA (no se sabe exactamente com
que mecanimo); no caso dos lentos, necessria uma aco conjunta entre o ABA e o clcio. A
abertura prolongada destes canais permite a sada de uma grande quantidade de cloreto e
malato no sentido do seu gradiente electroqumico. Esta sada massiva de anies despolariza
ainda mais a membrana, e provoca a abertura de canais de sada do K+ dependentes da
voltagem transmembranar.
NOTA: Estes canais de efluxo so protenas transmembranares, que na sua maioria fazem
transporte passivo no entanto, estas protenas so regulveis (canais podem fechar e abrir,
como acontecia no caso das aquaporinas, por fosforilao ou metilao). Muitos canais so
regulados pela voltagem transmembranar, sendo sensveis a diferenas de potencial elctrico
entre os dois lados da membrana. A despolarizao da membrana elimina a diferena de
potencial elctrico ao longo da membrana, e permite o encerramento de determinados canais.
A j referida inibio da ATPase membranar do plasmalema tambm contribui para a
despolarizao da membrana. O ABA contribui para a inibio desta bomba protnica, mas
no inibe directamente a enzima (o mecanismo da inibio desconhecido). Esta inibio pelo
ABA mediada por um forte aumento do clcio citoslico (potente inibidor da enzima,
inibindo-a directamente) e pela alcalinizao deste.
O cido abscsico, alm de provocar o fecho dos estomas, pode inibir a abertura destes
provocada pela luz azul, inibindo a bomba protnia e induzindo o aumento de clcio no
citoplasma e, desta forma, impedindo a abertura de canais de influxo de K+.

Onde se localizam os receptores do ABA? No se sabe ao certo se os receptores de ABA so

extracelulares, intracelulares, ou ambos; as experincias efectuadas neste sentido tm
demonstrado resultados algo contraditrios.
Algumas evidncias experimentais parecem ser favorveis existncia de receptores
extracelulares:

1. Microinjeco de ABA directamente no interior dos protoplastos estas microinjeces no

alteraram a abertura estomtica, pelo que os receptores no estaro localizados
intracelularmente;
2. Conjugado ABA-protena efectuou-se uma ligao qumica do ABA a determinadas
protenas, o que resulta numa molcula de grandes dimenses, incapaz de atravessar a
membrana (incapaz de penetrar na clula). Quando se aplicou este conjugado s protenas
das clulas, conseguiu-se provocar a abertura dos canais inicos (necessrio para o
processo de encerramento estomtico), e foram expressos genes relacionados com o fecho
dos estomas o que corrobora a teoria dos receptores se encontrarem na superfcie
exterior das clulas;
3. Marcao de protoplastos com ABA-biotinalado este pode posteriormente ligar-se ao
fluorescente avidina, e verificou-se uma fluorescncia em mltiplos locais exteriores,
sugerindo a existncia de muitos receptores de ABA no espao extracelular.

No entanto, existem igualmente evidncias experimentais para a existncia de receptores

de ABA intracelulares:
1. Aplicao do ABA directamente com uma pipeta tipo patch inibiu os canais de influxo de
potssio e os canais lentos de influxo de anies, necessrios para a abertura estomtica, ou
seja, a microinjeco de ABA no interior das clulas provocou efeito na abertura dos
estomas;
2. Quando aplicado extracelularmente, o ABA duplamente eficaz na inibio da abertura
estomtica quando fornecido a pH 6.5, isto , totalmente protonado. O ABA protonado
penetra nas clulas; se temos uma resposta melhor quando fornecemos ABA capaz de
entrar nas clulas, isto indica-nos que os seus receptores estaro localizados
intracelularmente. Por outro lado, quando fornecido a pH 8 e, portanto, largamente
dissociado na forma aninica de difcil penetrao, este tem uma aco oposta.
3. Microinjeco de ABA enjaulado nas clulas guarda ABA enjaulado microinjectado
numa forma inactiva (ligado a outra substncia); depois, necessrio um procedimento
que liberte o ABA da substncia a que este se encontra ligado, para o desenjaular no
interior da clula (ex. tratamento com radiao UV num dado comprimento de onda que
quebra a ligao) verificou-se um encerramento dos estomas neste caso. Pelo contrrio,
utilizando uma jaula no fotolizvel, no se obteve resposta estomtica. Assim, quando
h ABA livre na clula h resposta fisiolgica, o que no acontece quando este se encontra
preso, evidenciando mais uma vez a existncia de receptores no interior da membrana.

Aula 8 Fotossntese
Breve Introduo A luz apresenta caractersticas de partcula e onda, e a sua velocidade
dada por C = ( comprimento de onda; frequncia), sendo o resultado igual a 3 x 108
ms-1; por outro lado, a energia associada a cada foto igual a E = h (sendo h a constante de
Planck, 6.626 x 10-34 J s-1). O comprimento de onda e a frequncia esto inversamente
relacionados, e uma onda ser tanto mais rpida na sua propagao quanto maior for a sua
frequncia e menor o seu comprimento de onda.
Uma pequena parte do espectro electromagntico corresponde luz visvel, e esta
que efectivamente absorvida pelas plantas, correspondendo radiao com comprimentos
de onda entre os 400 e os 700 nm. Relativamente luz solar, que atinge a Terra, a zona de
maior energia deste espectro igualmente a regio da luz visvel, e a absoro de radiao
pela clorofila A (pigmento principal) d-se nesta regio.
Se considerarmos a luz azul, para a qual as plantas absorvem melhor a radiao,
acontece que esta no vai ser a radiao mais eficiente para a fotossntese. O que acontece
que esta luz tem uma energia superior quela que pode ser utilizada pelos centros de reaco
nas reaces fotoqumicas da fotossntese. Assim sendo, quando esta radiao absorvida
pelas plantas, parte da energia transportada nos fotes prontamente dissipada sob a forma
de calor. Ao haver perda de energia pelo calor, os fotes passam a um estado menos
energtico e os pigmentos que absorvem para estes comprimentos de onda vo agora emitir
fotes de luz menos energticos do que aqueles que tinham incidido na planta inicialmente.
Os comprimentos de onda referentes a estes fotes menos energticos correspondem regio
da luz vermelha, e portanto, na prtica a luz que chega aos centros de reaco a luz vermelha
(comprimentos de onda entre os 600 e os 700 nm). Estes centros de reaco fazem parte dos
fotossistemas I e II, sendo tambm denominados por P700 e P680, o que reflecte os
comprimentos de onda para os quais os centros de reaco absorvem mais energia.
Comparando os espectros de absoro da clorofila a para a luz azul e a vermelha, o
que se verifica que os comprimentos de onda relativos luz azul acabam por ser
transformados em luz vermelha. Sendo estes comprimentos de onda os que correspondem
aos picos mximos de absoro por parte dos centros de reaco, poderamos pensar que
estes so directamente usados nas reaces fotoqumicas no entanto, h uma parte pequena
que utilizada noutra forma, sendo emitidos fotes de luz capazes de causar fluorescncia.
Esta fluorescncia no detectvel pelo nosso olho, mas ao colocar uma placa de
cromatografia sob luz ultravioleta, visvel uma emisso constante de fluorescncia na regio

do vermelho. Muitas vezes esta pequena emisso de fluorescncia til no estudo da

fotossntese.
Ao haver esta emisso de
energia

sob

forma

de

fluorescncia, isto leva a uma

nova perda de energia e a um
novo aumento do comprimento
de onda, e ocorre o chamado
efeito de Strokes quando
incidimos

luz

de

663

nm

(vermelha), caso haja clorofila a

em

soluo,

esta

vai

emitir

fluorescncia num comprimento de onda superior e desfasado. Detectando esta fluorescncia

in vivo, e jogando com esta diferena nos comprimentos de onda, possvel estudar a
fotossntese. Este desfasamento no comprimento de onda geralmente de 5 nm (passa a
emitir para cerca de 668 nm), e denomina-se por deslocao (ou efeito) de Strokes. Quando se
analisa in vitro, com a luz ultravioleta, o desfasamento muito maior, devido enorme
energia desta luz.
A energia sob forma de luz absorvida pelos pigmentos, e em particular pela clorofila a,
portanto utilizada de outras formas, no sendo usada integralmente no processo de
fotossntese. Resumindo, existem vrias vias de utilizao da energia pela clorofila:
1. Sob a forma de calor a mais rpida, tendo um tempo de semi-vida mais curto (o
tempo de semi-vida do calor diz respeito ao tempo mdio que decorre entre a
absoro e emisso de radiao por uma molcula, sendo da ordem dos 10-13s); por
isto que quando as folhas efectuam a fotossntese tendem a aumentar a sua
temperatura, o que pode ser contrariado por uma srie de outros efeitos, uma vez que
as plantas foram evoluindo de modo a dissipar esse calor (ex. abertura dos estomas
para transpirao, produo de ceras que reflectem a luz);
2. Fluorescncia tempo de vida muito curto, sendo, no entanto, superior ao do calor;
3. Transferncia de energia para os centros de reaco, que leva s reaces
fotoqumicas da fotossntese; esta transferncia de energia pode ocorrer ao nvel dos
pigmentos de antena, em que os vrios pigmentos que absorvem a energia da luz
conseguem transferi-la de uns para os outros , e esta transferncia de energia entre os
diversos pigmentos at chegada aos centros de reaco, origina sempre uma perda
energtica, por calor ou por fluorescncia.

Portanto, a quantidade de energia que chega aos centros de reaco e de facto

utilizada nas reaces fotoqumicas j no a inicialmente absorvida pela planta, mas sim a
que resultou da perda de energia sob as formas j mencionadas. Alm das 3 vias principais
referidas, h ainda uma parte da energia utilizada na fosforescncia, a qual apresenta um
tempo de semi-vida na ordem dos milissegundos, e quando ocorre possvel a sua
visualizao; na termoluminescncia; e outras emisses desfasadas de luz, sendo estas
situaes que ocorrem em muito menor quantidade.

Compreenso da fotossntese Inicialmente, descobriu-se a libertao de oxignio por parte

das plantas (1771, Joseph Priestley); ainda no sculo XVIII, descobriu-se o papel essencial da
luz neste processo (1779); pela mesma altura, chegou-se concluso que eram tambm
necessrios ao processo de fotossntese o CO2 e a gua. Deste modo, quando se chegou ao fim
do sculo XIX, j a fotossntese era definida do seguinte modo:

Portanto, a partir de CO2 eH20, era possvel a sntese de uma hexose e libertao de
oxignio. Para a ocorrncia desta reaco, era necessria a incidncia de luz. Actualmente,
sabe-se que o processo no se d exactamente assim, uma vez que no se forma uma hexose
mas sim trioses de fosfato ou outros acares. Assim sendo, esta reaco foi evoluindo at aos
dias de hoje.
No sculo XX, van Niel mostrou em bactrias no fotossintticas que a fotossntese
envolvia uma reaco de oxidao-reduo, o que foi importante porque at a no se sabia de
que modo a energia da luz era usada pela planta - a luz composta por fotes, e para haver
reaces redox, necessria a existncia de electres que saiam das suas orbitais, sendo
perdidos pelos compostos, e que sejam capazes de reduzir outro composto (o que perde o
electro fica assim oxidado). Mas como que isto acontecia por aco da luz? Como que esta
levava perda de electres, e como que a partir de matria inorgnica se formavam
compostos orgnicos? No se sabia de todo
Nos anos 30, Robert Hill demonstrou que em cloroplastos de plantas superiores
existiam de facto reaces de oxidao-reduo, e que estas eram essenciais para que
houvesse libertao de O2 no fim da fotossntese. Isto levantou uma questo: de onde vem o
oxignio que libertado? Na altura, a resposta mais bvia era que este provinha do CO 2 (era
mais fcil um gs libertar outro gs, e no era possvel libertar oxignio a partir da gua, a

menos que houvesse uma corrente elctrica demasiado forte, o que no fazia sentido no caso
das plantas).
Actualmente, conhecem-se mais de 50 reaces intermedirias no processo de
fotossntese at libertao de oxignio.

Pigmentos Fotossintticos Todos presentes nos cloroplastos. As clorofilas e as

bacterioclorofilas so os pigmentos caractersticos dos seres fotossintticos, existindo no
entanto pigmentos acessrios.
As clorofilas a e b encontram-se ao nvel das plantas verdes, e as c e d encontram-se
em alguns protistas e cianobactrias. Todas as clorofilas apresentam uma estrutura complexa
em anel, e quase sempre existe uma longa cauda hidrocarbonada agarrada a este mesmo
anel, responsvel por ancorar a parte hidrofbica da clorofila ao seu ambiente.
Os diferentes carotenoides encontrados ao nvel dos organismos fotossintticos so
molculas lineares com mltiplas ligaes duplas. O facto de absorverem para comprimentos
de onda entre os 400 e 500 nm confere-lhes o seu tom alaranjado. Estes pigmentos localizamse ao nvel da membrana tilacoidal e esto geralmente associados com protenas dos centros
de reaco e de antena. Como a luz absorvida pelos carotenoides transferida posteriormente
para a clorofila para a ocorrncia de fotossntese, estes pigmentos so ditos acessrios.

Experincias importantes No grfico representado abaixo, temos representado o espectro

de absoro e, sobreposto a este, o espectro de aco para a fotossntese (a cada
comprimento de onda, analisa-se em que medida que estes so mais ou menos eficientes na
fotossntese, sendo esta eficincia medida em termos do oxignio que vai sendo libertado). O
que se verifica que na zona de luz vermelha, h uma quase coincidncia em termos de

espectro de absoro e aco, e a regio com maior discrepncia entre estes dois espectros
corresponde regio da luz azul.
Sabe-se agora que o espectro de aco reflecte bastante a eficincia da clorofila a para
a fixao de luz, sendo esta muito maior do que no caso da clorofila b ou dos carotenoides.
por isto que nas zonas em que a absoro essencialmente feita pelos pigmentos acessrios,
existe uma maior discrepncia entre os dois espectros (so menos eficientes).

Primeiros espectros de aco No fim do sculo XX, Engelmann efectuou uma experincia na
qual utilizou uma espirogira (cloroplastos enormes), e fez incidir sobre esta uma luz, fazendo-a
passar num prisma que a decomps nas
diferentes cores. Portanto, a alga tinha regies
do seu cloroplasto iluminadas com luz violeta,
outras com luz vermelha, outras azul, e por a
em diante. Engelmann observou que, ao serem
colocadas em meio aqutico, as bactrias
presentes na espirogira, que necessitavam de
oxignio, no se espalhavam uniformemente
pela gua, dirigindo-se a determinadas zonas
correspondentes s zonas onde havia libertao
de oxignio (regies da luz azul e da luz
vermelha). Portanto, esta experincia veio
dizer-nos que os diferentes componentes da luz

branca so diferentemente eficientes na libertao de oxignio, da que as bactrias no se

tenham distribudo uniformemente.

Experincia de R. Emerson e W. Arnold (1932) - Tambm sabemos que a fotossntese ocorre

em sistemas complexos, que possuem complexos de antena, com muitos pigmentos a
absorverem a energia da luz (no s a clorofila a que capaz de absorver a luz), e esta
energia transferida para os centros de reaco e nestes centros que se d a separao de
cargas, havendo a perda do electro que inicia as reaces redox necessrias realizao da
fotossntese. No entanto, no se sabia como que este processo ocorria. Por cada molcula de
clorofila, que energia seria absorvida? Seria a suficiente para a perda imediata do electro?
Quantos pigmentos estariam envolvidos?
Assim, nos anos 30, e utilizando uma alga verde (Chlorella pyrenoidoisa), estes
investigadores fizeram incidir flashes de luz branca com uma durao bastante curta (na
ordem de microssegundos), separados entre si por um perodo mais alargado de escurido,
para que essa luz pudesse ser utilizada e depois voltasse ao estado basal, parando os
processos que estavam a ocorrer. Entretanto, variaram a energia que estava associada a cada
flash de luz (mantendo o tempo de incidncia destes), e foram medindo a quantidade de
oxignio produzido, verificando que medida que a intensidade dos flashes de luz ia sendo
maior, maior era a quantidade de oxignio que ia sendo libertado.
Assim, construram um grfico no qual demonstraram que a quantidade de oxignio
libertado dependia da energia associada aos flashes de luz. No entanto, a partir de certa
altura,

com

aumento

da

intensidade da luz, a quantidade de

oxignio libertado passou a aumentar
de forma no linear, at que para
flashes bastante energticos, atingiuse um patamar (um mximo). Ao ser
atingido

este

patamar,

torna-se

possvel calcular quantas molculas

de

clorofila

que

tnhamos

presentes, e que correspondiam a

cada molcula de oxignio libertado. Pegou-se na Chlorella, extraram-se os pigmentos,
quantificou-se a clorofila, e relacionou-se a quantidade de clorofila presente com a quantidade
de oxignio produzido (que pode ser seguida com um elctrodo de oxignio de fase liquida). E

concluiu-se que este rendimento mximo implicava que por cada molcula de O2 produzido
existissem cerca de 2500 molculas de clorofila!
Por outro lado, o declive da recta relaciona o oxignio libertado em funo da energia
da luz incidente d-nos o rendimento quntico da fotossntese. Neste caso, temos o
rendimento quntico das reaces fotoqumicas da fotossntese (estamos a medir a
quantidade de oxignio libertado em funo da luz incidente), uma vez que no estamos a
considerar as reaces qumicas da fotossntese (fixao de carbono); e este rendimento
fotoqumico vai-nos dar nmero de produtos fotoqumicos (oxignio) pelo total de quanta
absorvidos. Sabendo o valor para a Chlorella, comeou a ter-se uma noo do que seria o
rendimento quntico da fotossntese, e do nmero de pigmentos necessrios para a libertao
de oxignio.
Mais tarde, determinou-se ainda que cada centro de reaco tinha vrias centenas de
pgimentos, e que cada um deles precisava de funcionar 4 vezes para libertar uma molcula de
oxignio o que demonstra a complexidade deste processo (que inclui inmeros passos
intermdios ainda no inteiramente compreendidos). Sabe-se tambm que o rendimento
fotoqumico da fotossntese da ordem dos 95% para os cloroplastos, e de cerca de 5% para a
fluorescncia.
Assim, por esta altura a equao anteriormente descrita tinha j sofrido alteraes:

Sabamos que por cada molcula de CO2 e gua tnhamos a formao de um acar e a
libertao de uma molcula de O2; era necessria luz; eram necessrios cerca de 9/10 fotes
por cada molcula de O2 libertada (uma vez que os centros de reaco precisam de funcionar 4
vezes para a formao de uma molcula); o rendimento quntico era bastante elevado (na
ordem dos 95%); e a eficincia da converso de luz (quantidade de luz dos fotes que foi
efectivamente transformada em energia qumica) era bastante menor que o rendimento
quntico, uma vez que parte da energia dissipada pelos processos j mencionados, sendo da
ordem dos 27% para 680 nm, o comprimento de onda mais eficiente (obviamente esta
eficincia est dependente do comprimento de onda, uma vez que diferentes comprimentos
de onda correspondem a nveis energticos distintos).

Portanto, e para no confundirmos os dois termos (rendimento quntico e eficincia

da converso de luz), no rendimento quntico (ou eficincia quntica - ) falamos em quanta,
ou seja, medimos a quantidade de fotes absorvidos que foi utilizada nas reaces
fotoqumicas, pelo que este elevadssimo; pelo contrrio, quando falamos na eficincia da
converso de luz (ou eficincia energtica), referimo-nos energia associada a estes fotes
que armazenada sob a forma de produtos qumicos, pelo que esta bastante mais baixa s
cerca de da energia dos fotes armazenada sob a forma de energia qumica (a restante
convertida na sua maioria em calor), apesar da maioria destes ser utilizado na fotossntese.
Ento, temos que a fotossntese uma sequncia de reaces redox que levam
libertao de oxignio, e tambm sabemos que neste processo a fixao de CO2 vai estar
relacionada com o armazenamento da energia produzida durante as reaces fotoqumicas da
fotossntese de uma forma estvel.
Entretanto, pensava-se que cada pigmento absorvia os seus fotes de luz, e quando
tivesse recebido a energia necessria, libertaria um oxignio mas como?

Experincia de Emerson (anos 50) Conhecendo o conceito de rendimento quntico, Emerson

foi ver para os diferentes comprimentos de onda qual era o rendimento quntico
correspondente, e comparou os dados com o espectro de absoro (de uma alga verde
unicelular) o que se verificou foi que o rendimento quntico variava com o comprimento de
onda, e que este rendimento na zona do azul violeta era constante, na zona do verde diminua,
depois voltava a aumentar (por absoro das clorofilas), mas acima dos 680 nm havia uma
queda enorme deste rendimento e, portanto, qualquer luz com comprimento de onda acima
deste valor (regio do vermelho) era muito menos eficiente.
Entretanto, o mesmo grupo de investigadores fez incidir luz nos infravermelhos, e
verificaram qual a fotossntese relativa que tinham; depois, desligavam esta luz e sujeitavam as
mesmas algas aco da luz vermelha, e a fotossntese relativa era a mesma - ento, se
juntssemos os dois comprimentos de onda, ser que a fotossntese relativa passava para o
dobro? E o que se verificou foi um efeito sinergstico, e a fotossntese aumentou para mais do
dobro este aumento explicado pelo funcionamento em srie dos fotossistemas, ou seja,
existem duas zonas de absoro de luz correspondentes aos dois fotossistemas, mas estes no
so independentes; organizando os dois fotossistemas em funo do seu potencial de
oxidao-reduo, o que se verifica que o fotossistema II (P680) tem um potencial menor
(mais oxidante), e portanto quando incidem fotes de luz sobre este fotossistema, h uma
perda de electres das clorofilas existentes no centro de reaco, e estes vo passar para outra
clorofila (que fica num estado mais excitado), e portanto h reaces redox. medida que

ocorrem as sucessivas reaces de oxidao-reduo, vai havendo uma diminuio da energia

e do potencial redox, at que estes electres reduzam o fotossistema I. Como este
fotossistema tambm capaz de absorver luz, com a energia proveniente desta mais os
electres que recebe vindos do fotossistema II, este tem uma capacidade redutora bastante
maior que o fotossistema II, acabando por reduzir o NADP a NADPH, formando potencial
redutor da clula.
Obviamente que se a clorofila do fotossistema II perdesse um electro e este no fosse
reposto, a molcula era completamente degradada, e deixava de funcionar o centro de
reaco. Deste modo, necessria uma reposio rpida dos electres, que possvel devido
presena de gua.

Aula 9 Fotossntese
Aparelho Fotossinttico Fotossntese ocorre no cloroplasto; este organelo tem uma dupla
membrana que sofre vrias invaginaes e forma os tilacoides (sistemas de membrana
internas do cloroplasto), e estes por sua vez encontram-se num arranjo empilhado, formando
um granum (plural grana). Existe tambm uma regio designada por estroma do cloroplasto, e
h ainda o interior do tilacoide, designado por lumen do tilacoide.

Devido existncia de dupla membrana, obviamente necessria a existncia de

inmeros transportadores especficos de metabolitos; os cloroplastos possuem DNA
cloroplastidial, mas muitos dos compostos utilizados por estes no so sintetizados pelo
cloroplasto (ex. subunidade grande da rubisco sintetizada pelo DNA cloroplastidial, mas as
pequenas so codificadas pelo DNA nuclear, havendo transporte posterior das protenas
formadas no citolplasma para dentro do organelo).

O transporte ao longo das duas membranas do cloroplasto extremamente selectivo,

havendo muitos transportadores envolvidos um papel importante destes transportadores
permitir a deslocao dos produtos obtidos na fotossntese (acares) para o citoplasma da
clula.
Em termos da organizao dos tilacoides, temos alguns componentes principais da
cadeia transportadora de electres na fotossntese:
Fotossistema II (PSII),
Fotossistema I (PSI),
Dmero LHCI (protena envolvida na captao de luz, pertencente ao fotossistema I light
harvesting complex I),
Trmero LHCII (protena anloga interior, mas pertencente ao fotossistema II),
Dmero citocromo b6f (liga ambos os fotossistemas, existindo tanto ao nvel dos grana
como ao nvel do estroma),
ATP sintetase.
Antigamente, julgava-se que havia uma proporo semelhante de fotossistemas I e II,
bem como dos sistemas de captao de luz a estes associados. H menos de 10 anos para c,
verificou-se que no assim na regio de empilhamento dos tilacoides, que constitui o
grana, existe essencialmente fotossistema II; na regio onde predominam as membranas e h
formao de invaginaes, predomina o fotossistema I; por outro lado, h uma desproporo
muito grande entre estes dois fotossistemas. Como estes no esto adjacentes um ao outro,
os restantes componentes so importantssimos porque tm que possuir alguma mobilidade
ao longo da membrana, para assegurar o transporte dos electres ao longo da cadeira.

Numa representao mais realista, temos o fotossistema II associado de alguma forma

gua, a partir da qual capta electres; o fotossistema I apresenta uma estrutura bastante
diferente do fotossistema II; o citocromo b6f muito importante no transporte de protes ao
longo da membrana; a separao dos fotossistemas implica a existncia de um ou mais
transportadores de electres que funcionem entre estes dois sistemas - temos a plastocianina
(PC), uma protena de pequenas dimenses que contm cobre, e ao contrrio do b6f que
atravessa a membrana de um lado para o outro, esta pode estar na membrana, e a
plastohidroquinona (PQH2) ambas as protenas conseguem difundir-se das zonas do grana
para as zonas do estroma do cloroplasto, assim como os protes produzidos na oxidao da
gua; a ferredoxina NADP-redutase vai receber os electres no fim da cadeia, e vai reduzir o
NADP a NADPH, estando no estroma do cloroplasto (apresenta uma mobilidade muito grande).
medida que vo ocorrendo as reaces de oxidao-reduo, que culminam com a reduo
do NADP (aceitador final) a NADPH, vai havendo em simultneo um transporte de protes H+
que leva a que entre o estroma do cloroplasto e o lumen do tilacoide se forme um gradiente,
que ao ser dissipado pela ATPase permite a formao de ATP.

Nos ltimos anos, a grande dvida tentar perceber porque que em termos
evolutivos existe uma separao espacial entre os dois fotossistemas. Allen e Forsberg, em
2001, concluram que aparentemente existe uma maior eficincia na distribuio de energia
entre os dois fotossistemas se estes estiverem separados pode estar relacionado com uma
questo de competio; se estes estiverem muito juntos na membrana, como a luz branca
possui um contnuo de comprimentos de onda, acontece que o fotossistema II tem um pico de

absoro mximo a 680 nm, mas tambm absorve a 700 nm; por outro lado, o fotossistema I
tem um pico de absoro para os 700 nm mas tambm capaz de absorver a 680 nm, e isto
levaria a uma diminuio de eficincia por parte de um dos fotossistemas.
A partir daqui, comeou a verificar-se que no necessria uma proporo
semelhante de PSI e PSII para que haja uma alta eficincia na fotossntese os organismos
eucariotas fotossintticos possuem mais fotossistema II (relacionado com o processo de
empilhamento dos tilacoides), as cianobactrias possuem mais fotossistema I, e existem
organismos com outras variantes.

Sistemas de Antena Como captada a energia da luz at chegar aos centros de reaco?
Frequentemente,

representa-se

que

os

primeiros

pigmentos a absorverem a luz so os carotenoides,

seguidos da clorofila b, e depois a a - o nico pigmento
que consegue utilizar directamente a energia da luz a
clorofila a. Cerca de 95 a 99% dos fotes que so
captados por estes pigmentos, os chamados pigmentos
constituintes do sistema de antena, chegam aos centros
de reaco. Estes pigmentos variam de organismo
fotossinttico para organismo fotossinttico, e podem
diferir no prprio individuo consoante as condies de
crescimento. Todas as diferenas observveis ao nvel da
captao de luz no se encontram nos centros de reaco estes so bastante semelhantes
entre todos os organismos fotossintticos.
Relativamente estrutura dos complexos de antena, estes envolvem inmeros
pigmentos, mas tambm protenas (LHCII e LHCI light harvesting complex). No esquema
abaixo, temos representada a LHCII, com 3 regies helicoidais que atravessam a membrana tilacoidal, e o anel
tetrapirrlico das clorofilas. Os carotenoides esto
representados pelas linhas vermelhas. Portanto, os
complexos de captao de luz so compostos por
pigmentos e protenas (que ajudam a estabilizar a prpria
organizao dos pigmentos da membrana)!
A energia da luz, ao chegar aos centros de reaco,
leva partio de cargas, e s aqui h perda de um
electro, e aqui que se iniciam as reaces fotoqumicas da fotossntese (redox); o electro

perdido, no caso das clorofilas que fazem parte do PSII (P680), e que ficam num estado
excitado ao receber a energia da luz, pensa-se que vai reduzir uma outra clorofila presente
anteriormente feofitina (outro tipo de clorofila, sem a estrutura de anel pirrlico); desta, h
passagem do electro pelas quinonas, seguindo-se depois o complexo b6f (neste existem uma
srie de reaces de oxidao-reduo); aps este complexo, passa-se para a plastocianina, e a
partir desta o electro vai reduzir o fotossistema I e, como este tambm consegue captar
energia a partir da luz, consegue atingir um potencial redutor muito maior (energia
proveniente da luz + electro excitado), reduzindo uma srie de componentes, at chegar
ferredoxina redutase, que no fim reduz o NADP. Portanto, os electres recebidos pelos centros
de reaco vo permitir a formao de potencial redutor, necessrio para a passagem do
NADP (aceitador final de electres) a NADPH. Simultaneamente, como h transporte de
protes ao longo da membrana, estes vo permitir a formao de ATP. No entanto, no existe
uma estequiometria na reaco em que por cada mol de NADP reduzido h uma mol de ATP
formada isto leva a que existam alturas em que os eletres que chegam ferredoxina (que
naturalmente iriam reduzir a ferredoxina redutase para formar NADPH), esta no se encontra
no estado de oxidao-reduo adequado recepo desses electres, e estes acabam por
voltar para o complexo b6f, com um potencial redox semelhante ao da ferredoxina e que tem
uma mobilidade enorme ao longo da membrana fotofosforilao cclica (electres andam
em ciclo entre componentes com potenciais de reduo semelhantes, no havendo formao
de NAPDH, mas este transporte leva formao de um gradiente protnico ao longo da
membrana tilacoidal, permitindo formao de ATP estes ajustes so importantes para as
plantas conseguirem responder disponibilidade de ATP e NADP, e s necessidades
energticas da clula). Esta fotofosforilao cclica envolve assim o fotossistema I (P700).

Vimos anteriormente que o PSII, ao receber a energia da luz, perdia um electro. No

entanto, necessrio que este seja reposto, caso contrrio ocorre a desagregao do centro
de reaco. Este electro proveniente da gua (no se sabe exactamente por que
mecanismo) uma teoria que surgiu nos anos 80, sem qualquer base experimental, diz-nos
que seria necessrio um componente prximo de gua que teria que funcionar 4 vezes para
que houvesse a libertao de uma molcula de oxignio.

Hiptese de Kok (anos 70) O fotossistema II

ir a certa altura buscar energia, e algum
componente ir ficar num estado mais
reduzido

(mais

energtico),

no

tendo,

contudo, perdido ainda qualquer electro;

depois, necessria a chegada de mais um
electro para que este componente fique num
patamar energtico seguinte at chegar a um
quarto estado energtico.
Entretanto,

com

os

raios-X

ressonncias magnticas, chegou alguma informao acerca disto. Actualmente, sabe-se que o
PSII perde o electro, volta deste existe uma protena D1 (muito semelhante a D2), com
resduos de aminocidos em locais diversos da membrana, e h uma zona na qual resduos
aminoacdicos de protenas distintas se aproximam, e neste local cria-se uma estrutura que
permite que se d a hiptese de Kok,
ou seja, que haja um aumento
sucessivo de absoro de energia da
luz, um aumento sucessivo de
estados energticos, at se obter a
energia

necessria

para

retirar

electres gua e, a partir daqui,

libertar oxignio. Existem vrios
componentes associados a esta
estrutura que j foram identificados,
entre os quais tomos de clcio e
mangans a grande dificuldade que tem que se trabalhar com pequenos resduos de
diferentes protenas, que se agregam num micro ambiente dentro da membrana com
condies termodinmicas muito desfavorveis.

Relativamente s reaces fotoqumicas da fotossntese, em termos evolutivos h uma

optimizao para que os organismos fotossintticos consigam absorver o mximo de luz de
uma forma eficiente. A verdade que as plantas superiores, por no possurem locomoo,
precisam de se alterar rapidamente e de forma complexa em resposta a mudanas no
ambiente muitas das descobertas relacionadas com sade comeam exactamente pelo
estudo das plantas, porque as respostas fisiolgicas destas so bastante complexas.

O que acontece quando a planta recebe mais luz do que a que utiliza? O excesso de luz pode
levar a danos desginados por fotoinibio, ou seja, a prpria luz inibe o processo de
fotossntese. De uma forma esquemtica, se tivermos fotes com uma dada intensidade, por
exemplo luz azul, parte da energia logo perdida sob a forma de calor. Portanto, a primeira
forma de dissipar alguma da energia em excesso sob a forma de calor. Se continuar a chegar
luz que a planta no consegue processar, a planta volta a emitir calor e recorre a uma
alterao dos pigmentos por exemplo, muitos carotenoides so utilizados nos protectores
solares, porque estes tm uma facilidade muito grande em converterem-se uns nos outros,
sendo capazes de dissipar energia sob a forma de calor e, portanto, em condies de
fotoinibio, a proporo de carotenoides relativamente de clorofilas aumenta bastante,
pelo que a razo carotenoides/ clorofilas um dado importante para averiguar se as plantas se
encontram em condies de excesso de luz.
Por outro lado, as clorofilas no so igualmente eficientes na absoro de energia (a
mais eficiente a a), pelo que a planta pode tambm recorrer a uma alterao nas clorofilas.
Assim, muitas vezes a razo clorofila a/ clorofila b pode alterar-se em resposta a alteraes no
ambiente.
Se continuar a haver um excesso de fotes a chegar planta, comeam uma srie de
rpidas reaces fotoqumicas da fotossntese, havendo mais fotofosforilao (no h NADP
suficiente para ser reduzido); h formao de ATP mas, a certa altura deixa de haver ADP
suficiente para ser fosforilado, e inicia-se um ciclo ftil, que serve apenas para dissipar energia;
e comea a haver necessidade de ir buscar electres gua se no possvel ir buscar estes
electres mesma rapidez a que estes so usados, acontece que se formam radicais
altamente energticos e txicos (superxidos), que levam a reaces que no deveriam
ocorrer, causando danos a nvel celular. Muitos destes radicais funcionam como sinalizadores,
que podem levar a uma srie de processos de defesa, mas quando em excesso, podem levar
activao de processos errados, levando toxificao das clulas. Se esta segunda linha de
defesa (neutralizao destes radicais envolve muitos enzimas como a superxido dismutase)
no funcionar, comea a haver danos ao nvel dos prprios fotossistemas.

Curiosamente, um dano que ocorre sempre que se verificam as reaces fotoqumicas

da fotossntese est associado a problemas na protena D1 (que faz parte do sistema
enzimtico oxidante da gua). Quando se descobriu isto, achava-se que era um erro
proveniente das tcnicas utilizadas, mas mais tarde percebeu-se que existem mecanismos de
reparao muito rpidos desta protena, o que permite que se mantenha uma quantidade de
D1 funcional constante, garantindo a continuidade das reaces fotossintticas. Quando h
excesso de luz e todos os mecanismos de defesa falham, acontece que a reparao da D1 no
efectuada velocidade que seria necessria, o que culmina numa situao em que
aumentando a luz, comea a diminuir a taxa de fotossntese fotoinibio.

Aula 10 Fotossntese
Porque que a fotossntese no acaba na formao de ATP e NAPDH? A fotossntese envolve a
utilizao do ATP e NADPH formados a partir da energia da luz para a fixao do CO 2, e para a
obteno de acares. O que acontece que o ATP e o NAPDH so formas altamente
energticas mas muito instveis, pelo que no constituem formas estveis de armazenamento
da energia. Assim, a energia tem que ser armazenada sob a forma de acares para isto,
necessrio um processo de fixao de carbono, pois este que conduz formao destes
compostos. Esta fixao ocorre pelo chamado Ciclo de Calvin, e possvel proceder a uma
cromatografia para verificar quais os produtos formados pelos cloroplastos em presena de luz
para isto, necessrio dar CO2 radioactivo marcado ao organismo em estudo (algas) e,
portanto, todos os produtos da fixao de carbono surgem radioactivos; depois, aplicando
uma pelcula fotogrfica ao cromatograma e deixando ambos em contacto durante algum
tempo, pode revelar-se a imagem, e nesta surgem zonas escuras que indicam a presena de
CO2 radioactivo.
Nas imagens ao lado, a primeira representa os
compostos formados aps 5 segundos (muito poucos
compostos marcados, sendo essencialmente cidos
fosfoglicridos e alguns acares de fosfato
bifosfatos e trioses); a segunda indica os compostos
formados aps 30 segundos, e a confuso j muito
maior - continua a haver bastante PGA (cidos
fosfoglicridos), vrios cidos, uma grande quantidade
de

acares

fosfatos

difosfato

uridina

difosfoglucose. Portanto, primeiro surgem vrios

acares fosfatados e depois vrios cidos e
aminocidos. Na altura (1961), no era fcil explicar o ocorrido nestas vias metablicas, uma
vez que estas eram analisadas como vias que ocorrem em sequncia, e no como vias que
envolviam um ciclo.

Ciclo de Calvin Frequentemente referido como um ciclo dividido em 3 fases: fase de

carboxilao, fase de reduo e fase de regenerao; neste, ocorre a fixao do CO2, com
recurso ao ATP e NADPH formados aquando das reaces fotoqumicas da fotossntese.
A fase de carboxilao a fase na qual ocorre a fixao propriamente dita. Nesta, o
CO2 vai ser fixado a partir da ribulose-1,5-bifosfato, um acar com 5 carbonos originando
no um composto com 6 carbonos, mas duas molculas de 3-fosfoglicerato (cada uma com 3

carbonos); na fase seguinte, a fase de reduo, onde utilizada a maioria do ATP e NADPH
previamente formados esta corresponde apenas a duas reaces; a fase de regenerao
envolve inmeras reaces, mas apenas uma delas gasta ATP esta fase permite voltar a
formar o substrato no qual vai ser
fixado o CO2 (ribulose-1,5-bifosfato),
da que ocorra uma via metablica
cclica.
Entretanto,

na

fase

de

reduo onde se forma a maioria

dos acares que vo ser usados
como fonte de energia para toda a
planta e restantes organismos (seres
fotossintticos na base da cadeia
alimentar).

A questo que se ps na altura foi como que compostos estveis com 3 carbonos so
capazes de voltar a formar molculas com 5 ou outro nmero de carbonos? A formao destes
compostos essencial para fechar o ciclo, regenerando a ribulose-1,5-bifosfato. Se tivermos
3 ribuloses-1,5-bifosfato inicialmente (na fase de carboxilao), teremos 6 molculas de 3fosfoglicerato formadas (2 por cada ribulose); na fase seguinte, por cada 6 molculas de cido
fosfoglicrido temos 6 de ATP gastas, passando este a 1,3-bifosfoglicerato, e posteriormente a
gliceraldedo-3-fosfato (fosfatos provenientes do ATP); na reaco de formao do
gliceraldedo-3-fosfato, h libertao de um fosfato, pelo que temos todo o poder redutor do
NADPH utilizado na reduo deste composto; tendo 6 molculas de gliceraldedo, formam-se 5
acares com 3 carbonos cada, e um acar com 3 carbonos para formar a triose de fosfato,
que abandona o ciclo de Calvin. Os outros 5 que permanecem no ciclo, vo ser utilizados para
a fase de regenerao; nesta fase existe um enorme nmero de reaces ocorrentes entre os
diversos acares, com mltiplas combinaes de molculas com diferentes nmeros de
tomos de carbono (acares tm no mnimo 3 carbonos). A fase de regenerao a maior
fase do ciclo de Calvin, apesar de esta ser a que regista um menor nmero de molculas de
ATP gastas e de no haver gasto de poder redutor, e nesta que ocorre a formao dos
acares que sero utilizados pela planta. O gasto de ATP feito apenas na fase final da
regenerao, pois necessria a fosforilao da ribulose-5-fosfato a ribulose-1,5-bifosfato, o
qual funcionar como substrato para a fixao de novas molculas de CO2.

Carboxilao Importante saber a reaco; consiste na reaco entre o CO2 e a ribulose-1,5bifosfato, originando 2 molculas de 3-fosfoglicerato, e catalisada pela enzima ribulose-1,5bifosfato carboxilase oxigenase (Rubisco);

Rubisco Possui 16 monmeros (8 subunidades grandes e 8 pequenas); a protena mais

abundante na Terra, e corresponde a 50% das protenas existentes ao nvel das folhas de
plantas superiores; nas plantas C3 (primeiro composto formado possui 3 carbonos), existe 6
vezes mais rubisco do que clorofila;
Este exagero na quantidade da enzima resulta do facto de esta ser imprescindvel, mas
tambm devido sua baixa eficincia nas actuais condies atmosfricas. Aparentemente, a
reaco catalisada pela rubisco no gasta ATP e, portanto, no deveria estar dependente da
luz nem das reaces fotoqumicas. No entanto, esta reaco no ocorre na ausncia de luz,
uma vez que a rubisco uma enzima enorme pouco eficiente, tendo algumas limitaes.
A rubisco inclui uma regio denominada por loop 6, bastante flexvel, e o que acontece
que a enzima devia ligar-se ribulose-1,5-bifosfato e ao CO2 originando gliceraldedo-3fosfato e ficar por aqui. O problema que a ribulose-1,5-bifosfato consegue ligar-se ao centro
activo da rubisco sem esta estar activada, no havendo formao de produto, e neste caso o
substrato funciona como um inibidor como que a enzima activada? Para isto,
necessrio que a rubisco seja previamente carbamilada (ligada a um CO2 que altera a sua
estrutura e posteriormente a um magnsio que tambm altera a sua estrutura, de tal forma

que quando esta se liga ribulose-1,5-bifosfato, o loop 6 fecha e o CO2 proveniente da

atmosfera pode ligar-se e formar as 2 molculas de PGA).
Outro problema na regulao desta enzima que mesmo aps a carbamilao,
existem inibidores existentes no meio, e um deles forma-se em escurido, que se se ligarem
enzima no permitem a formao de produto. O inibidor que surge em escurido liga-se
rubisco em condies em que diminui a quantidade de luz disponvel, no permitindo a
continuidade do ciclo de Calvin.
Aps ocorrer a carbamilao, e antes de se ligar ao CO2, tambm pode acontecer que
em vez de se originar um produto certo (com 6 tomos de carbono mas muito instvel,
formando-se rapidamente 2 molculas de PGA), h formao de produtos errados (ex. 3fosfoarabinitol bifosfato). Como resolvido o problema? Descobriu-se, nos finais dos anos
90, que a rubisco s funciona bem porque tem a ajuda de uma outra enzima que a activa
(rubisco activase), funcionando como uma chaperona reguladora da actividade da rubisco. O
que esta faz in vivo, ultrapassar os erros feitos naturalmente pela rubisco.

No entanto, mesmo aps a descoberta da rubisco activase, nada justificava o porqu

desta reaco ter que se passar na presena de luz. Mas a verdade que se veio a descobrir
que a rubisco activase tinha que ser activada por ATP, e tambm que algumas subunidades da
rubisco activase eram activadas pela ferredoxina reduzida - na ausncia de luz, esta enzima
deixa de funcionar; o facto de existir luz tambm importante na medida em que em presena
desta, o pH o ideal para que ocorram as reaces (s escuras, no ocorre a acidificao do

meio, o que leva a uma inactivao da enzima). A primeira reaco do ciclo de Calvin no
ocorre, portanto, na ausncia de luz.

Sistema Ferredoxina/Tiorredoxina A ferredoxina um composto que, ao receber electres,

fica facilmente reduzida, e tem uma mobilidade muito grande ao ficar reduzida, por aco
dos fotossistemas, esta vai reduzir a ferredoxina-tiorredoxina redutase, e esta ao reduzir-se
provoca uma reduo das pontes bissulfito existentes ao nvel desta enzima, havendo
posteriormente uma reduo ao nvel da tiorredoxina, e esta vai reduzir algumas enzimas que
se encontram inactivados sem pontes bissulfito, activando-as. O importante que existem 5
enzimas participantes no ciclo de Calvin (na imagem) que so todas elas reguladas pela luz
ou pelo sistema ferredoxina/ tiorredoxina, ou porque utilizam directamente NADPH, ou
porque utilizam directamente o ATP, ou porque precisam da alterao do pH que ocorre ao
nvel do estroma do cloroplasto, ou ainda porque necessitam do magnsio (cofactor de muitas
enzimas), cuja disponibilidade se altera consoante o pH. Assim, todos estes processos regulam
o ciclo de Calvin, e especialmente as 5 enzimas presentes na imagem. Mal deixa de haver luz, o
ciclo interrompido (da que no nos possamos referir a este como ciclo de reaces s
escuras).

RESUMO: Sintetizando, no ciclo de Calvin tem-se que para cada 3 molculas de CO2 fixado, h
gasto de 5 molculas de H20, 6 de NADPH, 9 de ATP, forma-se gliceraldedo-3-fosfato (d
triose de fosfato, que abandona o ciclo e pode ser usado noutros processos, e os restantes
produtos vo ser necessrios regenerao do ciclo), 6 NADP (vai regressar s reaces
fotoqumicas para voltar a ser reduzido), 3 protes (o ciclo de Calvin ocorre no estroma do
cloroplasto, e estes protes permanecem neste local, baixando o pH, o que promove uma
maior diferena de pH entre o estroma e os tilacoides importante para regulao de enzimas

e formao de ATP), 9 ADP e 8 fosfatos inorgnicos. O ciclo de Calvin no pode ocorrer

desligado das reaces fotoqumicas da fotossntese e vice-versa.

Aula 11 Fotossntese
Fotorrespirao Na aula anterior, vimos somente os processos de regulao da rubisco
relativamente ps-transcrio, pelo que no nos referimos regulao da quantidade de
enzima, quer da subunidade maior (sintetizada ao nvel nuclear), quer da subunidade menor
(codificada pelo DNA cloroplastidial); portanto, o que vimos foi para uma dada quantidade de
enzima disponvel, como que regulada a sua actividade pela luz (ainda que indirectamente)
embora seja importante reter que a quantidade da enzima tambm pode ser ajustada por
outros factores do ambiente.
Anteriormente, referimos que a rubisco catalisa uma reaco de carboxilao; no
entanto, esta tambm responsvel por catalisar a oxigenao da ribulose-1,5-bifosfato.
Utilizando uma molcula de gua, a reaco desta com o substrato da rubisco vai formar um
intermedirio

enediol, que no caso da

carboxilao se ligava
ao CO2, dando inicio ao
ciclo

de

entanto,

Calvin;
esta

no

forma

activa da ribulose-1,5bifosfato

pode

igualmente ligar-se ao
O2,

originando

um

composto intermedirio
instvel com apenas 5
carbonos. Este, ao dissociar-se, vai formar uma molcula de 3-fosfoglicerato (tal como se
passada aquando da carboxilao) e um outro elemento de 2 carbonos, o 2-fosfoglicolato. O
problema que o 2-fosfoglicolato vai rapidamente originar glicolato, extremamente txico
para os cloroplastos e para as clulas. Deste modo, necessrio que este glicolato seja
metabolizado, e numa primeira fase este transportado para fora dos cloroplastos, por
transportadores especficos, at ao peroxissoma.

No peroxissoma, o glicolato vai passar a glicerato, com consumo de uma molcula de

oxignio necessria para converter o glicolato a glioxilato (primeiro passo no peroxissoma);
esta converso implica a formao de perxido de hidrognio (H2O2), tambm altamente
txico, por ter capacidade para formar radicais superxido. O glioxilato passa depois a glicina
(que contm 2 carbonos), e esta vai-se deslocar para a mitocndria, onde ocorre o seguinte
quando temos 2 molculas de glicina total de 4 carbonos), estas vo ser descarboxiladas e
originar uma serina (3 carbonos), pelo que se perde um CO2. Nesta reaco que ocorre na
mitocndria, catalisada pelo complexo piruvato descarboxilase, h formao de NADH a partir
do NAD (forma-se potencial redutor). Este NADH, usado na mitocndria como substrato do
processo de respirao, pelo que este fenmeno permite a formao de ATP ao nvel das
mitocndrias. Quer isto dizer que o metabolismo do glioxilato, por promover uma maior
quantidade de substrato respiratrio, vai alterar o balano energtico da clula.

Alm disto, neste processo h tambm libertao de amnia (NH4+), que vai ser fixada
e originar glutamato no chamado ciclo fotorrespiratrio do azoto. Sem este azoto, era
impossvel a sobrevivncia das plantas. Nesta fixao do azoto, h gasto de potencial redutor,
e a ferredoxina vai ser importante na regulao do potencial redutor, permitindo que o azoto
seja fixado. No entanto, o CO2 libertado na mitocndria vai ser perdido (a menos que seja
novamente fixado pela rubisco, se esta estiver a funcionar como carboxilase); portanto,
quando a rubisco funciona como oxigenase, incorporando uma molcula de oxigniona
ribulose-1,5-bifosfato, isto leva perda de CO2 (que j estava armazenado na ribulose-1,5bifosfato). por isto que por vezes o oxignio referido como um inibidor da fotossntese
contudo, um inibidor uma substncia que se liga ao centro activo da enzima, inactivando-a e
no levando formao de produto; e no caso do oxignio, este leva produo de glioxilato e
glicolato, havendo depois uma srie de outras reaces. Como a rubisco apresenta ento dois
substratos, em termos da fixao de carbono uma desvantagem para a planta o facto de esta
funcionar como oxigenase.

Quando temos 2 molculas ribulose-1,5-bifosfato, que se ligam a 2 molculas de

oxignio, mais um oxignio que vai ser necessrio na converso do glicolato em glioxilato no
peroxissoma, e com a gua e o glutamato, h uma srie de reaces envolvendo utilizao do
potencial redutor proveniente das reaces fotoqumicas da fotossntese, h formao de 3fosfoglicerato, que sabemos que faz parte do ciclo de Calvin, e h sempre a perda de 1
carbono; o poder redutor gasto pela ferredoxina reduzida, pois os electres que a reduzem
no so passados por esta para o NADP, pelo que este no se reduz a NADPH, e assim nas

reaces fotoqumicas da fotossntese no vai haver formao de NADPH (uma vez que parte
dos eletres so utilizados no ciclo fotorrespiratrio). Este ciclo denominado por
fotorrespiratrio pois durante este h um consumo de O2, libertao de CO2, e s se d na
presena de luz.
Se considerarmos o ciclo redutivo das pentoses de fosfato (ciclo de Calvin) e o
oxidativo (fotorrespiratrio), a mesma enzima a catalisar ambos os processos a rubisco
pois esta possui 8 centros activos, funcionando como carboxilase e oxigenase. Se esta
funcionar como carboxilase, h incorporao do CO2, com formao de duas molculas de PGA
(2,3-fosfoglicerato), e vai ocorrer o ciclo de Calvin normal, obtendo-se acares de reserva
(sacarose e amido); se a enzima funcionar como oxigenase, em termos de regulao ocorrem
os mesmos processos,
e

oxigenao

da

ribulose-1,5-bifosfato
vai dar origem a uma
molcula de PGA e
uma

de

seguindo

glicolato,
o

ciclo

fotorrespiratrio

no

peroxissoma

na

mitocndria, na qual se
d a libertao do CO2,
sendo depois possvel
recuperar

parte

do

carbono perdido com gasto de ATP. Portanto, a recuperao deste carbono implica gasto de
energia e, por outro lado, o facto de ser recuperada amnia implica o uso de poder redutor
quando h fotorrespirao, a eficincia da fotossntese diminui, pois o ATP e NADPH no vo
ser integralmente armazenados sob a forma de acares.

Energtica da Fotorrespirao O que acontece naturalmente nas clulas que, se

considerarmos uma atmosfera com 340 ppm de CO2 (dados de 1986 actualmente estamos
nos 390 ppm), 21% de O2, e a uma temperatura de 25 C, por cada 5 carboxilaes, ocorrem 2
oxigenaes o custo de cada carbono acumulado corresponde a 4.75 ATP e 3.5 NADPH
(neste NADPH esto includas as ferredoxinas reduzidas); se, por outro lado, tivermos uma
atmosfera com baixo teor de oxignio (2%), como a enzima tem muito maior afinidade para o
CO2, nestas condies praticamente no se verifica fotorrespirao, pelo que a rubisco vai

funcionar exclusivamente como carboxilase. Neste caso, o custo de cada carbono acumulado
ser de 3 ATP e 2 NADPH a eficincia da fotossntese ser muito maior nestas condies, pois
necessria muito menos energia para fixar o carbono. O que vai condicionar a
fotorrespirao o balano entre o dixido de carbono e o oxignio existentes, pois apear do
primeiro existir sempre em menores quantidades, a enzima tem muito maior afinidade para
este, pelo que muito mais fcil promover reaces de carboxilao do que de oxigenao.

Quando se descobriu
a fotorrespirao, foi possvel
compreender porque que
muitas

das

taxas

fotossintticas medidas eram

inferiores
superiores,

(a

prof.
mas

disse
tenho

dvidas) actividade que se

media da rubisco, devido
sua dupla aco; portanto, o
que se pensou foi que se no ocorresse fotorrespirao, a produo aumentaria bastante (nos
anos 70 estvamos na tentativa de entrar na 3 revoluo agrcola; na 2 revoluo tinha
comeado a utilizao de adubos com nitratos para facilitar a fixao de azoto, fsforo para
as reaces fotoqumicas da fotossntese, e potssio para o balano das clulas) a utilizao
de adubos por esta altura j tinha atingido o limite, e portanto comeou a pensar-se que uma
boa soluo para aumentar a eficincia da produo agrcola seria fazer com que a rubisco
catalisasse apenas reaces de carboxilao; de facto, na altura em que surgiu a enzima (3.5
milhes de anos, em cianobactrias) a atmosfera no tinha oxignio e, por isso, a rubisco
funcionava apenas como carboxilase foram as prprias reaces promovidas pela rubisco
que levaram produo de oxignio, o que fez com que a mesma enzima que levou
produo de oxignio, afectada por este (o O2 um substrato), pelo que o seu prprio
produto diminui a sua capacidade.
Assim, comearam as primeiras tentativas para alterar a estrutura da enzima de modo
a que esta funcionasse exclusivamente como carboxilase as primeiras plantas transgnicas
(em Arabidopsis) foram exactamente para alterar a rubisco; o que acontecia que realmente
conseguia-se que esta funcionasse apenas como carboxilase, mas a velocidade com que a
reaco decorria era muito menor; actualmente, os projectos feitos neste sentido investigam
organismos fotossintticos que possuam uma rubisco com maior especificidade para o CO2 do

que para o oxignio, e a ideia introduzi-la nas principais plantas utilizadas na alimentao,
no sendo necessrio transformar a estrutura da enzima.

Mecanismos de Concentrao de CO2 (1)- Nas plantas, ao longo da evoluo, medida que foi
aumentando o teor de oxignio na atmosfera, estas podem ter alterado a sua rubisco para
uma forma igualmente eficiente (no deu origem a grandes evolues) ou surgiram sistemas
que permitiam que ao nvel da rubisco houvesse mais CO2 para que houvesse menos
fotorrespirao foi assim que surgiram mecanismos de concentrao de CO2 ao nvel da
rubisco presente no estroma dos cloroplastos.
Nas algas e no fitoplncton, estes mecanismos so particularmente importantes,
porque o CO2 dissolvido na gua menor ainda do que aquele que se encontra dissolvido no
ar. Tanto a quantidade de CO2 como a de O2 dissolvidos na gua menor do que a existente no
ar; um dos grandes problemas das alteraes climticas que medida que aumenta a
temperatura, os gases dissolvidos nos lquidos libertam-se (a solubilidade dos gases nos
lquidos diminui com o aumento de temperatura), o que diminui a produtividade do
fitoplncton; acrescido a este facto, a solubilidade do CO2 diminui ainda mais do que a do O2
com o aumento de temperatura pelo que tender a haver mais fotorrespirao e menor
eficincia fotossinttica.
Nas plantas superiores, estas foram evoluindo no sentido de concentrar o CO2 ao nvel
da rubisco; estes mecanismos encontram-se ao nvel das plantas C4, e levam a que estas sejam
as mais produtivas (milho, cana-de-acar, sorgo) qual o mecanismo? o chamado
metabolismo fotossinttico em C4; Estas plantas abrem os estomas para fixar o dixido de
carbono atmosfrico, e este ao entrar nos estomas vai ser fixado no citoplasma das clulas do
mesfilo por uma outra enzima, a fosfoenolpiruvato carboxilase, capaz apenas de carboxilar o
fosfoenolpiruvato (composto com 3 carbonos), ligando-o ao CO2, o que originar um produto
estvel com 4 carbonos (plantas C4; fotossntese em C4), que no um acar mas sim um
cido. Existem vrios sub-tipos de plantas C4, e um dos possveis compostos formados o
malato, o qual sendo um cido vai alterar o pH do meio; este passa posteriormente das clulas
do mesfilo para as clulas que se encontram volta da bainha dos feixes (clulas da bainha
perivascular), que possuem rubisco nos seus cloroplastos; os cloroplastos das clulas do
mesfilo so muito pouco funcionais, e possuem muito pouca rubisco. Mas as clulas da
bainha perivascular possuem quantidades considerveis desta enzima, embora estas clulas
existam em pouco nmero (para muitas clulas do mesfilo, existem poucas da bainha
perivascular) nestas, o malato vai ser descarboxilado, originando um composto de 3
carbonos, e liberta CO2 numa regio onde est presente a rubisco, aumentando a

concentrao de dixido de carbono; isto faz com que a rubisco funcione essencialmente
como carboxilase, e a taxa fotorrespiratria muito baixa.

O facto de existirem muitas clulas do mesfilo relativamente s da bainha, faz com

que haja muito carbono a ser fixado pela PEP-C (espalhada pelo citoplasma, o que permite
uma fixao mais eficiente), e muito malato a ser transportado para as clulas da bainha
perivascular e nestes cloroplastos ocorre a tal descarboxilao do dixido de carbono; o
problema que se a rubisco funcionar a uma baixa velocidade, vai-se acumular um excesso de
CO2 nesse local que poderia difundir-se facilmente para outras clulas no entanto, as plantas
C4 possuem uma parede celular espessa que impede o transporte facilitado deste gs para as
clulas vizinhas. Assim, o aumento da concentrao de CO2 nos cloroplastos destas clulas
ocorre devido ao facto da taxa a que este descarboxilado ser superior taxa a que a rubisco
o fixa. A rubisco presente nos cloroplastos das clulas da bainha pode ento fixar o CO2 de
modo a ocorrer o ciclo de Calvin, e h formao de acares - como esta tem maior afinidade
para o dixido de carbono, e este muito concentrado volta da enzima, ela vai funcionar
praticamente apenas como carboxilase, o que explica a grande produtividade destas plantas.

Porque que as plantas no evoluram todas para C4? que este mecanismo de fixar o CO2
pela PEP carboxilase, que utiliza o fosfoenolpiruvato, implica que este seja reciclado h gasto
de energia; portanto, para ocorrer o processo de concentrao do CO2 nas clulas da bainha,
para cada CO2 fixado, h um custo de duas molculas de ATP. S quando compensa para a
planta um maior gasto para permitir um melhor funcionamento da rubisco como carboxilase
que surgem estas plantas.

Aula 12 Fotossntese
Anatomia das C3 e C4 No caso das C3, as clulas da bainha perivascular so bastante mais
pequenas, no tm um aumento significativo de cloroplastos, e h muitos mais cloroplastos
nas clulas do mesfilo (pelo que nestas plantas ao nvel destas clulas que existe maior
quantidade de rubisco, que funciona como carboxilase e como oxigenase); as C4 possuem um
feixe central muito mais dilatado, e as clulas da bainha possuem uma parede celular mais
espessa, e as clulas do mesfilo tm muito menos cloroplastos. Assim, a anatomia das folhas
diferente nos dois grupos de plantas.

Gnero Flavenia (exemplo) - Plantas do gnero Flavenia possuem trs tipos de espcies: C3, C4
e espcies intermdias entre os dois tipos referidos (continuam a evoluir para C4); vista, as
plantas so muito semelhantes,
e se analisarmos o teor de
trioses de fosfato acumuladas
por rea de folha, existe uma
relao

entre

este

velocidade a que o CO2 fixado

(e, consequentemente, entre
este e a taxa de fotossntese)
o que se verifica que numa
planta C3, o teor de trioses
muito mais baixo, e aumenta
muito pouco com o aumento

da taxa fotossinttica (uma vez que aumenta tambm a fotorrespirao); numa C4, medida
que aumenta o CO2 fixado, aumenta imenso a quantidade de trioses formadas, porque estas
plantas praticamente no fazem fotorrespirao, graas ao mecanismo de concentrao do
CO2; tal como esperado, no caso de uma espcie intermdia, o nmero de trioses tambm
intermdia entre os dois exemplos anteriormente descritos.

Mecanismos de Concentrao de CO2 (2) Outro mecanismo distinto do abordado na aula

anterior o chamado metabolismo cido das crassulceas (plantas CAM). Este foi descoberto
pela mesma altura do metabolismo C4, nas plantas crassulceas. Este metabolismo cido,
pois tal como nas C4, elas fixam o CO2 nas clulas do mesfilo atravs da fosfoenolpiruvato
carboxilase, originando-se um composto com 4 carbonos este composto um cido
orgnico, e no caso das plantas C4, este cido era transportado para as clulas da bainha
perivascular, onde se dava a descarboxilao ao nvel dos cloroplastos, onde estava a rubisco
capaz de fixar o CO2; nas plantas com metabolismo cido das crassulceas, passa-se a mesma
coisa, mas estas separam a fixao primria de CO2 pela PEP-carboxilase. da fixao secundria
de CO2 pela rubisco ao longo do tempo enquanto nas C4, a fixao primria e a secundria
ocorriam em simultneo sob a presena de luz, nas plantas CAM uma parte funciona de noite
e outra de dia. Esta PEP-C das CAM uma isoenzima da PEP-C das C4, pelo que catalisa a
mesma reaco, usa o mesmo substrato, d o mesmo produto, tem uma estrutura bastante
semelhante, mas com uma velocidade distinta, um pH e temperatura ptimos diferentes, e
com uma regulao tambm divergente, pelo que esta isoforma CAM funciona plenamente
em escurido, formando os cidos durante a noite.

Durante a noite, as plantas abrem os estomas para fixarem o dixido de carbono

atmosfrico no citoplasma das clulas do mesfilo, formando cidos em C4; mas como estes
cidos no podem ser utilizados no ciclo de Calvin, pois este s funciona com luz, estas plantas
vo acumular os cidos medida que fixam o CO2 no vacolo pelo que durante a noite, estas
plantas CAM ficam com um pH bastante cido; esta acumulao de cidos no vai levar
sntese de acares, nem ao armazenamento de energia para a planta o que vai acontecer
que durante o dia, estes cidos vo do vacolo para os cloroplastos das clulas do mesfilo
(no h troca de clulas, ao contrrio do que acontecia nas C4), e como h luz, todas as
reaces fotoqumicas da fotossntese esto a ocorrer, h activao de todas as enzimas que
participam no ciclo de Calvin, e portanto possvel descarboxilar os cidos em C4, libertar o
CO2 e permitir a sua converso para acares.
As plantas CAM so frequentemente encontradas no deserto (suculentas) e, portanto,
o facto de abrirem os estomas noite e fech-los durante o dia confere-lhes uma vantagem na
medida em que permite prevenir a perda de gua por evapotranspirao. Este facto no lhes
permite um grande crescimento, mas permite que estas acumulem gua e sobrevivam durante
muito tempo. No entanto, tambm existem plantas aquticas CAM (ex. famlia dos Isoetes,
vivem dentro de gua doce; macrfitos aquticos). Durante o dia, nas zonas de gua doce
costuma haver uma grande abundncia de algas, e a fixao do CO2 por estas ao nvel da gua
to grande que baixa consideravelmente o teor de CO2 disponvel para as plantas; assim,
durante a noite, enquanto as algas no esto a fazer a fotossntese, as plantas CAM abrem os
estomas de modo a poderem fixar o dixido de carbono, e durante o dia transformam-no em
acares, atravs do ciclo de Calvin. A mesma coisa se passa em muitas plantas CAM que so
epfitos das florestas tropicais (ex. orqudeas, embora nem todas sejam CAM), nas quais existe
muita humidade, pelo que a seca no o problema que se coloca no caso destas plantas.
Daqui conclumos que mais do que uma competio pela gua, o metabolismo CAM uma
competio pelo carbono nesta competio pelo carbono o balano hdrico pode ser
importante (caso do deserto), mas esta pode ser simplesmente devida competio entre as
diferentes plantas.
Fazendo um breve resumo, durante a noite h abertura dos estomas, o CO2 fixado
pela fosfoenolpiruvato carboxilase, que na realidade fixa no o CO2 atmosfrico mas sim o io
bicarbonato, h formao de um cido C4 oxalacetato, o qual vai originar malato, que vai
ficar acumulado no vacolo. Os acares que so armazenados durante o dia, essencialmente
sob a forma de amido (no caso dos cloroplastos), vo ser utilizados para dar o
fosfoenolpiruvato, o qual vai ser essencial na formao do cido C4. O ciclo correspondente ao
metabolismo das plantas CAM s se fecha quando juntamos os acontecimentos do dia e da

noite, uma vez que h uma separao temporal entre a fixao primria do CO2 (noite) e a
fixao secundria (dia). S durante o dia que os cidos abandonam o vacolo, so
descarboxilados no cloroplasto, aumentam a concentrao do CO2 ao nvel da rubisco e
permitem a fixao secundria do CO2. Frequentemente nas plantas CAM, a concentrao de
CO2 no cloroplasto pode atingir os 2000 ppm (na atmosfera tem uma representao actual de
390 ppm), e nestas condies a rubisco funciona essencialmente como carboxilase.

Trocas gasosas nas plantas CA - Obviamente, o metabolismo CAM bastante mais complexo
do que aquilo que acabmos de descrever. Relativamente s trocas gasosas, o que acontece
que no perodo nocturno h abertura dos estomas, e antes do incio do dia, com o aumento da
temperatura estes comeam a fechar, voltando a abrir novamente durante a noite (o que
corresponde praticamente altura em que se d a assimilao do CO2 durante a noite). A meio
da noite, esta assimilao atinge o mximo, comeando depois a descer por j no ser possvel
acumular mais cidos. No vapor de gua a situao semelhante, mas aqui mesmo durante o
dia pode haver alguma perda de gua por evaporao.

Na imagem abaixo, temos um estudo efectuado em plantas de estufa (anans jovens),

no qual se mediu de 15 em 15 minutos a assimilao de CO2. No incio da noite, este est a ser

assimilado, no incio da luz h um pico muito grande de assimilao, durante o dia

praticamente zero, e no fim do dia h outro pico de assimilao. Nas plantas CAM, costumam
ser referidas 4 fases, relacionadas com a assimilao do CO2:
Fase 1 Assimilao mxima, ocorre durante a noite;
Fase 2 - Fim da noite (pode ter uma fase maior ou menor, depende muito das condies
crescimento, e h um decrscimo da fixao de CO2);
Fase 3 Durante o dia (no h fixao de CO2, havendo alguma libertao deste devido
grande descarboxilao dos cidos);
Fase 4 - Fim do dia (no ocorre sempre, existindo apenas quando as plantas esto bem
irrigadas, podendo abrir os estomas e sendo capazes de fazer fixao de CO2).

Quais so as condies favorveis aos mecanismos de concentrao de CO2? Nas plantas que
apresentam mecanismos de concentrao de CO2, ao contrrio do que ocorre com as C3,
possvel que no ocorra praticamente fotorrespirao. No entanto, existe a desvantagem
destes mecanismos gastarem ATP. Sejam quais forem as condies favorveis s plantas C3 ou
C4, h a reter que sempre durante o dia que ocorre o ciclo de Calvin, pelo que as reaces
que ocorrem neste no podem ser denominadas de reaces escuras caso contrrio, as
plantas CAM conseguiriam fazer tudo durante a noite. Como vimos, durante a noite h
produo de trioses de fosfato, havendo depois formao de acares de reserv. Geralmente
a sacarose que transportada para os tecidos no fotossintticos; outra forma de acumular a
energia proveniente da luz sob a forma de amido, que insolvel e permanece no interior do
cloroplasto, e durante a noite este amido (polmero de glucose) pode ser despolimerizado e
hidrolisado nas diferentes glucoses, fornecendo a energia necessria para que ocorram os
processos metablicos da planta durante a noite.

Se pensarmos nas plantas C4, temos por exemplo o milho (oriundo da Amrica
Central), cultivado em Portugal essencialmente durante a Primavera e o Vero; e a cana-deacar abunda no Brasil (zonas tropicais). Portanto, estas plantas tm origem tropical ou
subtropical, nos quais a temperatura elevada ora, a solubilidade dos gases diminui com o
aumento da temperatura, e o problema que a solubilidade do CO2 diminui mais rapidamente
que a do O2. Assim, um aumento de temperatura ao nvel da planta leva a uma menor
proporo de CO2 dissolvido no citoplasma, e isto conduz a um aumento da fotorrespirao
(diminuindo a taxa fotossinttica). A partir dos 25 C, h um aumento da fotorrespirao e
uma diminuio da fotossntese evolutivamente, comea a compensar para as plantas
desenvolver mecanismos de concentrao de CO2, porque os 2 ATPs gastos neste processo
compensam. Em relao s CAM, estas possuem uma diversidade enorme de espcies
podem habitar no deserto, mas tambm podem ser plantas aquticas, estando bastante
dependentes dos ciclos de luz e escurido. A distribuio das plantas est deste modo
fortemente relacionada com o seu balano energtico.

Aula 13 Fotossntese
Fases do Metabolismo CAM (continuao) Na imagem abaixo, podemos analisar o
metabolismo das plantas CAM em termos do dixido de carbono que fixado e do oxignio
que

libertado

fotossntese.

Durante

na
a

noite, temos uma fixao do

CO2, mas no h qualquer
libertao de O2 (porque no
esto a ocorrer as reaces
fotoqumicas

da

fotossntese); por outro lado,

a fixao do CO2 nesta fase
d-se

devido

fosfoenolpiruvato
carboxilase. Na fase II, a fixao CO2 decresce rapidamente e comea a haver libertao de O2,
uma vez que comeam as reaces fotoqumicas da fotossntese; na fase III, esta libertao de
O2 continua a aumentar; e na fase IV, h um decrscimo rpido da libertao de O2, e portanto
existe um balano entre o oxignio e o dixido de carbono distinto daquele que ocorre quer
nas plantas C3, quer nas C4.

Uma caracterstica interessante das plantas com metabolismo CAM, que estas no
tm que ser plantas CAM durante toda a sua vida, ou seja, quando temos uma planta C3, esta
permanece C3 ao longo da vida, e o mesmo acontece em relao s C4. Contudo, algumas
plantas C3 tm a capacidade de passar a plantas CAM, e isto induzido de diferentes maneiras
por exemplo, Mesembryanthemum crystallinum germinam e crescem em C3, mas passam a
CAM com a idade; no anans ocorre a mesma coisa ao fim de algum tempo, a planta
percebe quais so as condies do meio ambiente, e passa a CAM; a questo que por
vezes, algumas condies podem fazer com que uma dada planta passe mais rapidamente a
CAM, ou que passe a CAM com uma amplitude maior (esta amplitude medida pela variao
entre o CO2 mximo que a planta consegue fixar durante a noite e o mnimo que fixa durante o
dia; ou pelo mximo de cidos formados durante a noite e o mnimo durante o dia ou seja,
pela variao circadiana que caracteriza o seu metabolismo). Assim, pegando no exemplo da
Mesembryanthemum crystallinum, quando estas so jovens so plantas C3, mas sob stress
hdrico e/ou salino, estas passam mais rapidamente ao CAM. Se passaram ao CAM sem estar
sob stress, ento a amplitude CAM vai ser menor. Em kalanchoe blossfeldiana, estas germinam
e crescem como C3, passam CAM com a idade, mas esta passagem tambm pode ser induzida
devido durao dos dias (quando se passa de dia longo a dia curto); estas plantas tm a sua
origem em ambientes tropicais e sub-tropicais, e nestes climas o dia curto corresponde
poca das secas, e o dia longo poca das chuvas quando o dia longo, no h problema
com a abertura dos estomas nem a perda de gua; quando os dias comeam a encurtar, estas
comeam a passar ao metabolismo CAM, medida que se apercebem da necessidade de
reter gua. No caso da famlia dos Isoetes (macrfitas aquticos) e outras macrfitas
submersas em gua doce, as folhas que se encontram imersas, acima da gua, so sempre C3,
mas as folhas submersas so sempre CAM (porque h tantas algas a este nvel que durante o
dia a fixao de CO2 por parte destas limita o carbono disponvel para as plantas).
Portanto, h uma grande plasticidade das plantas quanto adaptao ao mecanismo
CAM. No entanto, nem todas as plantas so capazes de passar a este tipo de metabolismo
por exemplo, seria vantajoso numa cultura de trigo estas plantas serem capazes de passar a
CAM em condies de seca, mas tal no acontece; tambm o milho, uma planta C4 que
necessita de bastante gua, em condies de seca no consegue passar a CAM assim, em
termos evolutivos h limitaes quanto a esta converso do metabolismo.
NOTA: Tanto quanto se sabe, as plantas C4 no passam a CAM, mas apenas as C3; a grande
diferena entre as plantas C4 e as CAM que no primeiro caso, h uma compartimentao
espacial do metabolismo (clulas do mesfilo, onde h fixao de carbono pela
fosfoenolpiruvato carboxilase clulas da bainha perivascular, onde se d a fixao pela

rusbico), enquanto nas segundas a compartimentao temporal. Portanto, as plantas C4

implicam uma diferenciao celular que no existe ao nvel das plantas CAM.
Fixao de CO2 nos trs tipos de plantas - Comparando a quantidade de CO2 fixado por rea
de folha e por unidade de tempo (mol/ m2/ s), em mdia, nas plantas C3, C4 e CAM, verificase que este varia entre os 12,5 e os 25% nas plantas C3; nas C4 os valores so muito maiores,
podendo chegar aos 50%; e nas plantas CAM vai depender do que ocorre durante a noite
(onde h maior fixao), mas tambm h fixao durante o dia (existem taxas elevadas
correspondentes fase IV, quando as plantas esto bem irrigadas e conseguem fazer a fixao
de CO2 simultaneamente pela PEP-C e pela rubisco).
Se analisarmos a fixao de CO2 em termos da quantidade de gua perdida pela folha
(por transpirao), conclui-se que as plantas que mais perdem gua so as plantas C3 (mximo
volta de 0.8 mol); nas plantas C4 a perda de gua por transpirao menor; nas plantas
CAM, se o perodo for de escurido h uma variao maior (embora a perda seja sempre mais
pequena do que no caso das plantas anteriores), e durante o dia h ainda menos gua a ser
perdida por transpirao.
Para termos uma ideia da importncia ecolgica que tem o facto de terem surgido
estes trs tipos de plantas, podemos olhar para a razo entre a massa de gua perdida pela
planta e a massa de carbono fixado. Nas plantas C3 por cada massa de CO2 fixado, perdem-se
450 a 600 vezes mais de gua; nas plantas C4 este valor menor; e nas plantas CAM, durante a
noite a fixao de CO2 ocorre com um gasto muito menor de gua da que estas acabem por
surgir em regies desrticas.

Ecofisiologia das C3 e C4 - Comparando agora alguns parmetros ecofisiolgicos das plantas

C3 e C4, estas ao realizarem fotossntese dependem logicamente da luz. Mas ser que
dependem da luz da mesma forma? Quando temos uma curva de luz, esta mede qual a taxa de
fotossntese em funo das diversas irradincias. Se repararmos, necessria alguma luz para

que passe a haver um balano lquido de CO2 fixado. O chamado ponto de compensao para
a luz indica-nos a que luz que atingimos o balano 0 de fotossntese.

Porque que a curva no se inicia nas coordenadas (0,0)? Existem vrios processos na planta
que contribuem para variaes na fixao de CO2, sendo a respirao um processo que liberta
dixido de carbono, e que tambm
ocorre na presena de luz! Portanto,
quando

luz

tambm

respirao; quando no h luz

termina a fotossntese, pelo que
temos uma taxa de fixao de CO2
negativa, o que significa que este ao
invs de estar a ser fixado, est a ser
libertado este o valor da taxa
respiratria (muitas vezes chamado
de taxa de respirao s escuras
para no ser confundido com a
fotorrespirao, embora ocorra com e sem luz); ento no ponto de compensao para a luz,
temos a luz necessria para que a fotossntese que est a ser feita (e o CO2 que est a ser
fixado) compense aquele que est a ser libertado pela respirao e pela fotorrespirao, ou
seja, quando a troca lquida zero (quantidade de CO2 fixado = quantidade de CO2 libertado).

Declive - Por outro lado, o declive da recta vai-nos dar a variao da assimilao de CO2 (taxa
fotossinttica aparente) em funo da luz utilizada pela planta isto , o rendimento quntico
da fotossntese (de toda a fotossntese, e no s das reaces fotoqumicas). Obviamente, no
incio do grfico temos que medida que a luz aumenta, aumentamos tambm a fotossntese
aparente, pelo que o factor limitante apenas a luz; no entanto, chegamos depois a uma
altura em que aumentando a luz, a fixao de CO2 j cresce muito pouco, pelo que o factor
limitante comea a ser o CO2 disponvel na atmosfera. Portanto, o grfico tende para o valor
da taxa mxima de fotossntese que possvel obter quando a luz saturante.

Assimilao de CO2 e fotossntese nas C3 e C4 - Se a fotossntese depende da luz, tambm

verdade que esta depende da disponibilidade atmosfrica de CO2 nem todas as plantas so
igualmente eficientes na fixao de CO2, dependendo do facto destas possurem ou no
mecanismos de concentrao do dixido de carbono disponvel. Comparando agora a

assimilao de CO2 pelas plantas em funo da concentrao intracelular deste nos

cloroplastos, o ponto de compensao para o CO2 vai-nos mostrar qual a concentrao de
CO2 necessria para que o CO2 fixado pela fotossntese compense o que libertado pela
respirao e pela fotorrespirao. No caso de uma planta C3, necessria cerca de 10 a 12
pascal de CO2 para que o balano lquido de CO2 seja zero. J numa planta C4, praticamente
0 a concentrao de CO2 necessria para que este seja inteiramente assimilado a acumulao
de CO2 ao nvel da rubisco faz
com que esta funcione apenas
como carboxilase. A planta C4,
aumentando por pouco que seja
a concentrao de CO2 aumenta
imenso a taxa fotossinttica; por
outro

lado,

baixas

concentraes de CO2 interno

satura

fotossntese

taxa

mxima
pelo

que

de
a

limitao destas plantas j no a falta de disponibilidade do gs, mas sim o facto de no

possurem mais rubisco disponvel ao nvel das clulas da bainha para o fixarem. No caso das
plantas C3, medida que aumenta a concentrao interna de CO2 aumenta tambm a
fotossntese (sempre a taxas mais baixas do que ocorria no caso das C4), mas estas no
saturam to facilmente, porque aumentando a concentrao deste a fotossntese vai ser maior
e a fotorrespirao vai diminuir proporcionalmente. E, portanto, por muito elevada que seja a
concentrao de CO2 atmosfrico, por no existirem os mecanismos de concentrao deste
presentes nas C4, muito dificilmente se atinge nas C3 uma concentrao interna deste gs 10,
20 ou 50 vezes superior que existe na atmosfera, tal como ocorre ao nvel das C4 e nas CAM.
E temos assim as curvas tpicas de resposta ao CO2 de cada uma das plantas. Porque
que isto importante? Para conseguirmos prever a resposta de determinadas espcies (para
reposio ecolgica ou importantes para a agricultura) s alteraes do ambiente.

Fotossntese e Temperatura Outro factor que altera bastante a fotossntese a temperatura;

esta afecta a fotossntese a diferentes nveis existem muitos processos enzimticos
envolvidos, e a actividade enzimtica depende da temperatura; faz alterar a razo da
solubilidade entre o dixido de carbono e o oxignio quando a temperatura aumenta, a
solubilidade dos gases nos lquidos decresce, e o CO2 diminui mais rapidamente que a do O2,

pelo que proporcionalmente teremos menos dixido de carbono, o que implica uma maior
afinidade da rubisco para o oxignio, o que vai favorecer a fotorrespirao.
Portanto, e para o caso da planta C3, medida que aumentamos a temperatura a taxa
lquida de fotossntese vai subindo at que se atinge uma regio a partir da qual h um declnio
na assimilao do CO2, uma vez que h desnaturao enzimtica, etc. Numa planta C4, a
temperaturas mais baixas a taxa de fixao de CO2 tambm mais baixa medida que esta
vai crescendo, a taxa de assimilao do CO2 vai aumentar de uma maneira muito mais
significativa do que ocorria nas C3. Este aumento to grande mesmo em condies nas quais a
solubilidade do dixido de carbono diminui relaciona-se com os mecanismos de concentrao
de CO2 existentes nestas plantas, e que implicam o facto da fixao primria de CO2 ser feita
pela fosfoenolpiruvato carboxilase, a qual no possui actividade de oxigenase. Obviamente
que a partir de certa altura, vai tambm haver nestas plantas desnaturao enzimtica.

Se observarmos a figura (B), verificamos que plantas C3 e C4 em ambientes com

elevadas concentraes de CO2 tm taxas de assimilao de CO2 praticamente iguais; isto
porque nestes casos a planta C3, como a rubisco tem uma afinidade elevada para o CO 2,
praticamente no vai haver fotorrespirao, pelo que a resposta muito idntica das plantas
C4.

Rendimentos Qunticos nas C3 e C4 - Relativamente aos rendimentos qunticos, numa planta

C3 este maior a uma baixa temperatura, e medida que esta vai subindo, o rendimento
quntico vai diminuindo a solubilidade do dixido de carbono est a decrescer a uma escala
maior do que a do oxignio, favorecendo a fotorrespirao; ora, esta fotorrespirao
apresenta gastos energticos, e a quantidade de CO2 que fixado pela quantidade de luz vai
diminuindo medida que sobe a temperatura; numa planta C4, o rendimento quntico ser
constante porque no ocorre fotorrespirao. No entanto, a temperaturas inferiores a 25 C,

o rendimento quntico no caso das C4 vai ser mais baixo no que nas C3, porque o mecanismo
de concentrao de CO2 presente nas primeiras gasta energia; da que tenhamos
anteriormente visto que para temperaturas abaixo dos 25 C no faria sentido evolutivamente
surgirem as C4, da estas serem muitas vezes tpicas de regies tropicais e sub-tropicais.

Se virmos uma pradaria da Amrica do Norte, que corre uma srie de latitudes, surgem
gramneas de C3 e C4 muito idnticas; o ganho relativo de carbono nas gramneas C3 a uma
latitude de 25, por exemplo, baixo e vai melhorando medida que a latitude vai
aumentando; enquanto as plantas C4, a latitudes baixas (com maiores temperaturas e mais
perto do Equador) tm j um ganho relativo muito elevado, que aumenta qualquer coisa
medida que a temperatura sobe, mas a partir de
latitudes que representam zonas mais frias este
ganho vai decrescendo nas C3, nas zonas mais
frias ocorre menos fotorrespirao, e aumenta
o ganho relativo de carbono. Em termos gerais,
at latitudes por volta dos 42/ 43 norte, as
plantas C4 tm um ganho relativo de carbono
superior; a partir daqui passam a ser as plantas
C3 a terem um ganho superior de carbono.
A latitude de Portugal est entre os 37 e os 42 norte, estando o nosso pas numa zona
de transio; a centro e sul do pas so favorecidas as plantas C4, e na zona norte teremos
vantagem para as plantas C3. Obviamente que existem outros factores que influenciam a
distribuio das plantas em territrio nacional, como o relevo, disponibilidades de gua em
diversos locais, etc. Em termos de produo agrcola e mesmo na ecologia, estas
caractersticas tornam Portugal um local interessantssimo ao nvel de estudos nestas reas.