VALTEK DIAGNOSTICS

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Las Dalias 1900 - uoa
Santiago CHILE

CALCIO
Set de reactivos para la determinacin colorimtrica de Calcio en suero, plasma u orina.
Para uso en el diagnstico in vitro

MUESTRA

SIGNIFICANCIA CLINICA

Utilizar suero o plasma heparinizado.

El uso de otros
anticoagulantes puede interferir con el ensayo. Obtener la
muestra evitando estasis venosa. El uso de torniquetes puede
arrojar resultados ms elevados. De preferencia el paciente
debe encontrarse en ayunas.

El Calcio (Ca2+) posee variadas funciones en el cuerpo, no solo

como factor estructural de huesos y dientes, sino que tambin
en la funcin neuromuscular y los procesos de coagulacin.
Aproximadamente el 45% del Calcio corporal esta unido a
protenas sricas, un 5% se encuentra en forma no ionizada, y el
restante 50% se encuentra ionizado, esta ltima fraccin es la
activa, en trminos de funcin biolgica.
El aumento del calcio srico (hipercalcemia), puede estar
asociado a diversas patologas tales como, hiperparatiroidismo,
hipervitaminosis, mielomas, y algunos cancer seos. As mismo,
su disminucin (hipocalcemia), puede estar asociada a
hipoparatiroidismo, nefrosis, nefritis, esteatorrea y pancreatitis.
Por otra parte, una variacin en el contenido proteico del plasma,
tambien puede derivar en cambios en la concentracin de
Calcio, aumentando en algunos casos de mieloma. Tambin
parece existir una interrelacin recproca entre los niveles de
Calcio y Fsforo.
FUNDAMENTOS DEL METODO
Se han utilizado una variedad de mtodos colorimtricos para la
determinacin de Calcio. El mtodo VALTEK utiliza
cresolftalena complexona segn Moorehead y Briggs. La CFC
reacciona con el Calcio y Magnesio en medio alcalino fuerte,
formndose un complejo coloreado. La interferencia del
Magnesio es eliminada con la adicin de 8-Hidroxiquinolina.
La intensidad del color prpura formado, es directamente
proporcional a la concentracin de Calcio presente en la
muestra, y se mide a 570 nm. (rango 540 a 600 nm.).

En el caso de utilizar orinas, utilizar muestra de 24 horas

colectada en un contenedor acidificado con 15 ml. de cido
clorhdrico concentrado, con el objeto de evitar la precipitacin
de sales de Calcio. Dilur previamente 1:2 con agua desionizada.
EQUIPO REQUERIDO
Espectrofotmetro o fotocolormetro de filtros capaz de leer
absorbancias a 570 nm. (rango 540 a 600 nm.), timer y pipetas.
TECNICA
TECNICA CON BLANCO TUBO
Standard
Muestra
Reactivo de Trabajo (ml)
1.00
1.00
Mezclar y leer para cada tubo las absorbancias A1 contra
blanco de agua.
Standard
(ml)
0.01
--Muestra
(ml)
--0.01
Mezclar e incubar a lo menos 60 segundos y leer para cada
tubo las absorbancias A2 contra blanco de agua.
CALCULOS

REACTIVOS

10
(A2 Standard - A1 Standard)
Calcio (mg/dl)= FACTOR x (A2 Muestra - A1 Muestra)

Conservados a temperatura ambiente y protegidos de la luz,

estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.

TECNICA SIN BLANCO TUBO

-Buffer Alcalino:
2-Amino-2-Metil-1-Propanol
Cianuro de Potasio
Estabilizantes e ingredientes no reactivos

350 mM
2 mM
c.s.

-Reactivo CFC:
o-Cresolftalena complexona
8-Hidroxiquinolina

0.05 mM
5 mM

-Solucin Standard:
Carbonato de Calcio en HCl diludo

10 mg/dl

FACTOR=

Blanco
Standard
Muestra
Standard
(ml)
--0.01
--Muestra
(ml)
----0.01
Reactivo de Trabajo (ml)
1.00
1.00
1.00
Mezclar e incubar a lo menos 60 segundos y leer
las
absorbancias contra blanco de reactivos.
CALCULOS
FACTOR=

Preparacin del Reactivo de Trabajo:

Mezclar 1 ml. de Buffer Alcalino con 1 gota (50 ul) de Reactivo
CFC. Estabilidad del reactivo de trabajo: 7 das a temperatura
ambiente. Para mayores volmenes, preparar manteniendo la
proporcin de los componentes.

10
Absorbancia Standard
Calcio (mg/dl)= FACTOR x Absorbancia Muestra
En el caso de las muestras de orina, multiplicar el resultado por
el factor de dilucin. Si la muestra es de 24 horas multiplicar
adems por el volumen total expresado en litros y luego por 10.

E-mail: valtek@cepri.cl WEB site: http://www.valtekdiagnostics.cl

OBSERVACIONES

RANGOS DE REFERENCIA

El color resultante es estable por a lo menos 1 hora.

La reaccin es lineal hasta 20 mg/dl.
En caso que la concentracin sea superior a los 20 mg/dl,
repetir el ensayo diluyendo la muestra 1:2 con suero fisiolgico
(NaCl 0.9 g/dl). El resultado se multiplica por 2.
En caso de muestras muy lipmicas, efectuar un blanco
muestra con 3 ml. de suero fisiolgico y 0.05 ml. de la muestra.
Leer contra blanco de agua, y restar la absorbancia obtenida
para este blanco a la obtenida en la reaccin. Calcular de
acuerdo a lo indicado.
El material de vidrio utilizado (pipetas-tubos) debe estar LIBRE
de calcio para garantizar un resultado fidedigno. Es
recomendable lavar el material a utilizar en esta tcnica, con la
solucin IONSTOP-C de VALTEK, para eliminar las trazas de
este catin, y posteriormente enjuagar exaustivamente con
agua desionizada libre de calcio.
Este reactivo CONTIENE CIANURO, por lo tanto se
recomienda manipular con precaucin.
NO MEZCLAR CON ACIDOS.
Eliminar junto a grandes volmenes de agua.
Los volmenes indicados pueden ser modificados
proporcionalmente, sin alterar los resultados.
En caso de no poder garantizar el grado de limpieza de su
material de trabajo, le recomendamos el realizar la tcnica
CON BLANCO TUBO, la cual permite descartar la eventual
contaminacin con calcio presente en su material.

Suero o plasma:
Adulto
Nio (*)

:
:

8.8 a 10.7 mg/dl

10.0 a 12.0 mg/dl

(*) El rango de referencia para los nios es levemente ms

elevado que el de los adultos, y decrece lentamente con el
crecimiento.
Orina

50 a 400 mg/24 h.

BIBLIOGRAFIA
1.Connerty H.V.& Briggs A.R., Clin Chem 11(716),1965.
2.Connerty H.V.& Briggs A.R., Am J Clin Path 45(290),1966.
3.Moorehead W.R. & Briggs A.R., Clin Chem 20(1458), 1974.
4.Young D.S. et al., Clin Chem 21(272), 1975.
5.Friedman R.B. et al., Clin Chem 26(61), 1980.