Protozooses Cavitrias

Tricomonase
Giardase
Amebase

Enfoque desta aula:

Agente etiolgico
Epidemiologia
Transmisso
Ciclo de vida
Diferentes formas do parasita
Patogenia
Diagnstico
Tratamento
Controle

Tricomonase

Agente etiolgico
Tricomonase uma doena causada por pelo protozorio
Trichomonas vaginalis.
Taxonomia
Reino : Protista
Sub-reino: Protozoa
Filo: Sarcomastigophora
Sub-filos: Mastigophora
Classe: Trichomonadae (Zoomastigophorea)
Famlia: Trichomonadidae
Gnero: Trichomonas

Epidemiologia
Estimativa de incidncia global de doenas
sexualmente transmissveis em 2005 e 2008
(milhes de casos).

STI estimates, WHO, 2008.

Epidemiologia
uma doena sexualmente transmitida e de distribuio
mundial;
Doena no-viral mais prevalente;
Atinge principalmente mulheres (idades 16-35 anos) e
homens sexualmente ativos;
4,3 milhes de casos por ano no Brasil (SVS, 2006).

Incidncia e Prevalncia (em milhes de casos)

de Tricomonase.
(2008)
Regio
frica
Amricas
Sudeste Asitico
Europa
Mediterrneo Oriental
Pacfico Ocidental

Incidncia
59,7
85,4
42,9
22,6
20,2
45,7

Prevalncia
42,8
57,8
28,7
14,3
13,2
30,1

STI estimates, WHO, 2008.

Epidemiologia
Fatores de risco: status socioeconmico
Sobrevive em gua tratada e em piscinas
Cerca de 25 a 50% das mulheres positivas so
assintomticas
No uma zoonose
Amplificao da transmisso do HIV

Mecanismos de Transmisso
1. Relao sexual (+ frequente)
2. Durante o parto
3. Outras formas de transmisso
roupa ntima ou de cama
instalaes sanitrias

Ciclo de Vida
Trofozotos
Reproduz-se por
Relao
sexual

diviso binria
longitudinal
No forma
cistos

Forma normal-flagelos
externalizados

Pseudocisto:
forma intraflagelar

Trofozotos
Flagelos anteriores
Membrana ondulante
Flagelo posterior
Corpo parabasal e ap.Golgi
costa

ncleo

hidrogenossomos

Filamento parabasal
axstilo

Habita o trato genito-urinrio masculino e feminino;

Seu formato pode variar entre ovides, arredondados ou elipsides;

Possui 4 flagelos anteriores desiguais, uma membrana ondulante e
emitem pseudpodes para captar alimentos;
Medem em mdia 9,7m de comprimento por 7 m de largura;

Morfologia

A: T. vaginalis vista em meio de cultura. O axstilo, a membrana ondulante

e os flagelos so bastante visveis
B: T. vaginalis na superfcie de uma clula epitelial vaginal
C: Morfologia amebide da T. vaginalis aderida a uma clula de cultura.
Clin. Microbiol. Rev. 11:300

anaerbio facultativo utilizando

glicose, maltose e galactose como
fontes de energia;

Precisa que o hospedeiro sintetize

molculas essenciais (nucleotdeos,
cidos graxos, aminocidos);

Cresce bem na ausncia de O2 e em

pH entre 5 e 7,5;

No possui mitocndrias;

Contm hidrogenossomos (envolvidos

no metabolismo de carboidratos).
Hidrogenases transformam piruvato

0.5-2 m de tamanho com

membrana dupla

em acetato e liberam ATP e H2.

no contm material gentico

Metabolismo no Hidrogenossomo
Hidrogenase

Acetato:succinato
CoA

Piruvato
Ferrodoxina
Oxidoredutase

Succinato
tioquinase

Patognese
Mecanismos moleculares:
Infecta o epitlio do trato genital
A capacidade de adeso tem papel muito importante na patognese
Adeso d-se atravs de protenas: adesinas (tratamento com tripsina abole
adeso)
Cisteno-proteases extracelulares que digerem mucinas e imunoglobulinas
locais
A adeso dependente de temperatura, pH e tempo

Apoptose > Necrose secundria

Draft genome sequence of the

sexually transmitted pathogen
Trichomonas vaginalis
Science 2007, 315:207

Organizao estrutural de possveis

molculas de superfcie de T. vaginalis
envolvidas na aderncia e
citotoxicidade s clulas hospedeiras.

Relao parasita-hospedeiro
Resposta imune protetora- IgA secretora
Reinfeces - ausncia de imunidade adquirida
- grande variabilidade de isolados

Manifestaes Clnicas
Na mulher
Assintomtica: 25 a 50% dos casos
Vaginite aguda:
Corrimento vaginal fluido, bolhoso e abundante
de cor amarelo-esverdeada e de odor ftido
Prurido ou irritao vulvovaginal
Dor durante as relaes sexuais
Dor ao urinar (disria)
Dor plvica
Vaginite crnica: sintomas leves
Aumenta a transmisso do HIV

Manifestaes Clnicas
No homem:
Assintomtica (a maioria)
Uretrite aguda: corrimento abundante
Sintomatologia leve: escasso corrimento, disria, prurido
Complicaes (raras): epididimite, infertilidade e
prostatite
Aumenta a transmisso do HIV

Aumento da transmisso do HIV associado

tricomonase pode ser o resultado de:
1. Inflamao local produzida
pela doena
2. Rompimento dos tecidos
produzido pela doena
3. Alta prevalncia desta
doena em indivduos
infectados pelo HIV
4. Susceptibilidade doena
pode ser resultado da
imunossupresso associada
ao HIV

Homens seropositivos para HIV

com uretrite sintomtica e
Trichomonas tiveram 6X mais RNA
viral no smen do que homens HIV
positivos no infectados com
Trichomonas.

Diagnstico
Coleta da amostra
Homem
Materiais: secreo uretral, urina primeiro jato, esperma,
secreo prosttica e material sub-prepucial
Mulher
Material: secreo vaginal
Exame
Exame microscpico de preparaes a fresco ou coradas
Imunofluorescncia direta (sensvel + cara)
Cultura do parasito (resultados em 3 a 7 dias)

Tratamento
Institudo sob superviso mdica e deve incluir todos os
parceiros sexuais
Derivados nitroimidazlicos:
Metronidazol
contra-indicado para grvidas (1 trimestre)
linhagens de parasitas resistentes na Europa
Tinidazol
Ornidazol
Nimorazol

Tratamento

Mecanismo de Ao do Metronidazol

Inibe a sntese
de DNA

Int. J. Parasitol. 1999, 29: 199

Na presena do metronidazol, eltrons gerados pela PFO (piruvato

ferrodoxina oxidoredutase) so transportados pela ferrodoxina [2Fe2S]
para a droga e no para o seu aceptor natural que a hidrogenase (HY).
Metronidazol reduzido e ocorre a formao de um nitro nion que um
radical livre. O radicais livres citotxicos (RNO2-) so formados como
produtos intermedirios da reduo da droga.

Giardase

Agente etiolgico
Giardase uma doena causada por pelo protozorio
Giardia lamblia ou G. duodenalis ou G. intestinalis.
Taxonomia
Reino : Protista
Sub-reino: Protozoa
Filo: Sarcomastigophora
Sub-filos: Mastigophora
Classe: Zoomastigophorea
Famlia: Hexamitidae
Gnero: Giardia

Diferentes espcies de Giardia

Espcie

Hospedeiro

Caractersticas

Comprimento
(uM)

Largura
(uM)

G. lamblia

Vrios
mamferosHomem

Trofozotos em forma de
pra

12-15

6-8

G. muris

Roedores

Trofozotos arredondados

3-12

5-7

G. microti

Ratos
Silvestres

Cistos contm 2
trofozotos diferenciados

G. psittaci

Aves

Trofozotos em forma de
pra

~14

~6

G. ardeae

Aves

Trofozotos arredondados

~10

~6,5

G. agilis

Anfbios

Trofozotos longos e
estreitos

20-29

4-5

Epidemiologia
Distribuio mundial (cosmopolita)
OMS: 500 mil novos casos/ano
Atinge principalmente crianas de 8 meses 10-12 anos
(creches)
Surtos epidmicos veiculados por gua
Prevalncia
5 a 43% em pases em desenvolvimento
3 a 7% em pases desenvolvidos

Mecanismos de Transmisso
Cistos so responsveis pela transmisso
(sobrevivem na gua)
gua e alimentos contaminados
Transmisso direta pelas mos (fecal-oral)
Perodo de incubao
1-4 semanas com mdia de 7-10 dias

Ciclo de Vida

Ciclo de Vida

Caractersticas Especiais
Eucarioto dos mais primitivos (Fssil vivo)
Caractersticas de:
Eucarioto membrana nuclear, citoesqueleto
Procarioto - ausncia de nuclolo e de mitocndria. Possui
uma organela parecida com uma mitocndria chamada
mitossoma.
Metabolismo anaerbio
Utiliza glicose e armazena glicognio

Formas de vida - Trofozoto

Piriforme (12-15 m de
comprimento)
simetria bilateral
achatamento dorsoventral
superfcie ventral - disco
adesivo
2 ncleos
= quantidade de DNA
ambos ativos
transcripcionalmente
ambos dividem ao mesmo
tempo
4 pares de flagelos
Reproduz-se por fisso
binria

Corpos basais

Ncleo

Crista
Latera
l

Disco
ventral
Corpos
medianos

Flagelo
anterolatera
l

Flagelo
posterolateral

Flagel
o
ventra
l
Flagelo
caudal

Formas de vida - Trofozoto

habitat: duodeno e parte do

jejuno
mergulhados nas criptas
aderidos mucosa - disco suctorial
metabolismo: anaerbio (no tem
mitocndria)
aerotolerante
nutrio: membrana e pinocitose
Deslocamento rpido por
batimento dos flagelos
Reproduo: diviso binria
longitudinal
cultivvel

Formas de vida - Cisto

CISTO
ncleo

ovides com parede cstica (quitina)

4 ncleos (duplas estruturas
internas)
eliminados com as fezes formadas

axonema

formas de resistncia
gua: 2 meses

Sintomatologia
Varivel
Assintomtica
Sintomtica (agudo-crnico)
Aguda, intermitente e autolimitante
Dores abdominais (clicas)
Diarria (lquida) - muco + gordura - ausncia de
hemceas
M absoro intestinal
Incubao: 12-20 dias

Mecanismo de patogenicidade
processo principalmente
mecnico
parasitas em grande
quantidade aderem e
recobrem a parede do duodeno
- tapete
impression prints - marcas
deixadas quando o parasita
descola, arrancando as
microvilosidades

Adeso dos trofozotos s clulas epiteliais do

intestino delgado

Mecanismos de Adeso Via

Disco Ventral
Ao hidrodinmica: propulso dos flagelos e a
fora de suco do disco ventral - processo fsico
de adeso;
Receptores: lectinas ligantes de manose
(superfcie do parasito);
Contrao das protenas do disco ventral.

Mecanismos de patogenicidade
Evidncias da presena de uma toxina (CRP136)
No ocorre invaso da mucosa
O revestimento da parede do duodeno dificulta
a absoro intestinal (?) - diarria
Grande nmero de trofozotas eliminado.

Relao Parasita-Hospedeiro
Resposta do hospedeiro

Aguda neutrfilos e eosinfilos

Crnica: inflamao atrofia das microvilosidades
Participao de IgM, IgA e IgG especficos
HIV: no induz aumento ou gravidade de casos

Mecanismos de Escape
Variao antignica
VSPs - antgenos de superfcie
Evaso do sistema imune
Sobrevivncia em diferentes
condies intestinais

Diagnstico
Parasitolgico
Nas fezes formadas pesquisa de cistos com salina ou
lugol pelo mtodo de Faust;
Nas fezes diarricas pesquisa de trofozotos ou
cistos (imediatamente aps a coleta ou colocar em solues
conservantes pois os trofozotos tm viabilidade curta);
No fluido duodenal pesquisa de trofozotos em
bipsia jejunal ou Entero-test (para casos de diarria
crnica).

Diagnstico
Imunolgico
No soro pesquisa de anticorpos por ELISA ou IFI
pouco sensvel e especfico;
Nas fezes pesquisa de antgenos por ELISA
sensibilidade em torno de 85% a 95% e especificidade
de 90 a 100%.

Molecular
Amostras de gua pesquisa de DNA parasitrio
por PCR.

Diagnstico

Cisto corado com lugol

Cisto fresco

Trofozotos corados
com Giemsa

Profilaxia
Saneamento bsico (gua)
Higiene - creches, asilos
Cuidados com alimentos
Tratamento dos doentes
Tratamento dos portadores assintomticos - muito
importante
Animais domsticos (ces e gatos) so reservatrios

Tratamento
5-Nitroimidazis
Meia vida
~17-29 hs
~12-13 hs
~ 7 hs
Fonte: SVS, 2006

Resistncia
Vacina para giardase canina

Amebase

Agente etiolgico
Amebase uma doena causada pelo protozorio
Entamoeba histolytica
Taxonomia
Reino : Protista
Sub-reino: Protozoa
Filo: Sarcomastigophora
Sub-filos: Mastigophora
Classe: Lobosea
Famlia: Endamoebidae
Gnero: Entamoeba

Amebas
Protozorios com inmeros habitats:
Vida livre
Parasitas
Comensais
Vida livre,
eventualmente
parasitas

Vrios gneros e espcies

Entamoeba histolytica
Entamoeba coli, E. dispar,
E. hartmanni, E. gengivalis,
Endolimax nana,
Iodamoeba btschlii
Acanthamoeba, Naegleria

Complexo: E. histolytica /E. dispar

Aproximadamente durante um sculo E. histolytica foi
considerada como nica espcie. Descobriu-se no entanto
outra espcie (E. dispar) que morfologicamente idntica
porm no patognica.
Diferenas entre E. histolytica e E. dispar:
Evidncias bioqumicas: diferenas no perfil isoenzimtico
(zimodemas);
Padro de crescimento em culturas axnicas (E. histolytica
cresce melhor);
Capacidade de adeso a clulas alvo (mediada por lectinas): h
diferenas antignicas (detectadas por anticorpos
monoclonais) e funcionais entre as lectinas de adeso;
Diferenas na composio de glicoconjugados de membrana:
lipofososglicano (LPG) abundante em E. histolytica;
Diferenas genticas demonstrveis por mtodos moleculares;
Diferenas nas formas clnicas da doena.

Diferenas nas formas clnicas da doena.

Entamoeba histolytica (Schaudinn, 1903)
Apresenta diversos graus de virulncia, invasiva (podem
estar relacionados com diferentes cepas);
Apresenta diversas formas clnicas;
1 caso de doena/4 casos assintomticos
Entamoeba dispar (Brumpt, 1925)
Pode causar eroses na mucosa intestinal;
Maior parte dos casos assintomticos e colite no
disentrica.

Epidemiologia
Cosmopolita- varia de acordo com a regio de 5 a 50%
pessoas infectadas
Regio

Infeco

Doena

Mortes

frica

85 milhes

10 milhes

10-30 mil

sia

300
milhes

20-30
milhes

25-50 mil

Europa

20 milhes

100 mil

Mnima

Amricas

95 milhes

10 milhes

10-30 mil

Totais

650
milhes

40-50
milhes

40-110 mil

Mecanismos de transmisso
Ingesto de cistos
Direta: fecal-oral
Indireta: gua ou alimentos contaminados
Cistos so viveis por at ~ 30 dias no meio externo
passam pelo estmago (quitina)
resistem ao pH cido
enzimas digestivas, pH alcalino
desencistamento intestino delgado
ciclo: luz intestino grosso
Trofozotas - destrudos no estmago

Ciclo de vida
Formas do Parasita
Cisto
Metacisto
Trofozoto
Pr-cisto

Eucariotos primitivos, no tem:

Mitocndria, REG ou Aparelho de Golgi
Possuem uma organela chamada mitossoma ou
cripton (exerce funo de mitocndria)

Formas de Vida
Trofozoto

Cisto
1-4 ncleos
esfricos/ovais
forma de resistncia
eliminado nas fezes

1 ncleo
citoplasma: ecto e endoplasma
ingesto pinocitose/fagocitose:
bactrias/hemceas (forma invasiva)
multiplicao: diviso binria simples

 Trofozoto: forma ativa, que se alimenta (via pinocitose,

fagocitose) e se reproduz rapidamente
Metabolismo
principalmente anaerbico
aerbico facultativo - microaerfila
principal fonte energtica glicose (estoque
vacolos de glicognio), metabolizada principalmente
em etanol, acetato e CO2

Trofozoto
pleomrfico, com grande variabilidade tamanho
motilidade pseudpodes

 Cisto: forma de resistncia eliminada com as fezes

Membrana plasmtica + parede cstica (quitina)
1-4 ncleos (N) (diviso endomitose)
Vacolos de glicognio (V)
Corpos cromatides (CC) agregados de ribossomos

V
N
CC
N
Cisto jovem

Cisto maduro

 Desencistamento
intestino delgado - ecloso
37 C ambiente anaerbio
1 Cisto 4 ncleos- divises sucessivas
8 amebas pequenas (fase metacstica)
Se alimentam e crescem (fase

estmago

trofozotica)

Habitat trofozoto
- luz intestino grosso

Encistamento
Luz intestino grosso

Formas clnicas e Sintomatologia

Forma

assintomtica

Forma intestinal (no invasiva)

dores abdominais (clicas)

diarrias - ~6 episdios/dia (pode ficar crnica)

Forma intestinal invasiva

colite amebiana aguda, disenteria grave (fezes lquidas)

lceras intestinais, abscessos

Forma extra-intestinal

fgado (+ comum): dor, febre, hepatomegalia mais comum

em homens
pulmo (+ raro)
crebro (+ raro)
pele (regio perianal e rgos genitais)

Patogenicidade
Amebase
Mecanismos
de invaso
A. Adeso
B. Destruio tecidual
C. Disperso amebide

extra-intestinal

Mecanismo de invaso
1. Adeso - via lectina ligadora de Gal/GalNAc s clulas do
epitlio intestinal
2. Processo de destruio tecidual (origem do nome histolytica) - ao de enzimas (hialuronidase/proteases/
mucopolissacaridases) - formao de lcera tpica
3. Disperso o trofozota cai na circulao e atinge o fgado
via sistema porta
4. Formao de abscessos, necrose e at obstruo do
sistema porta - pode levar o paciente a bito.

Fatores lticos
1. mecanismos dependentes de
contato
liberao de um protena
formadora de poros- amebapore
- atividade citoltica
2. mecanismos independentes de
contato
liberao de colagenase e
cisteno-proteases - degradao
matriz extra-celular

Amebase intestinal
diarrias
colites
lceras
perfuraes
Forma intestinal
peritonite
apendicite
amebomas
Forma aguda fulminante

Forma intestinal invasiva

Patologia
Ulcerao
perfurao
Abscesso
fgado

Adeso

Relao Parasita-Hospedeiro
Amebase

Mecanismos de defesa do hospedeiro

1. Camada Mucosa - mucinas: gel aderente, previne
adeso s clulas epiteliais e facilita a eliminao
do parasita
2. Glicosidases produzidas pelas bactrias da flora
intestinal e proteases do lmen degradam a
lectina da E. hystolyica
3. Resposta Imune

Trends in Parasitology 2007, 23 (3)

Diagnstico
Clnico diarria/sndrome do clon irritvel
Parasitolgico de fezes
Pesquisa de cistos em fezes slidas (diferenciar
amebas no patognicas)
Trofozotas em fezes lquidas
Cultura de fezes
Diagnstico imunolgico
ELISA para deteco de antgeno nas fezes
ELISA para deteco Acs IgG soro - amebase invasiva
Diagnstico Molecular
PCR (distingue espcies)

Diagnstico
Problemas
Diagnstico diferencial amebas no patognicas
E. histolytica x E. coli
E. histolytica x E. dispar

E. histolytica X E. coli
Diagnstico diferencial
Morfologia - trofozotas
Entamoeba histolytica

Entamoeba coli

E. histolytica X E. coli
Diagnstico diferencial
Morfologia (cistos)
Entamoeba histolytica

Entamoeba coli

E. histolytica X E. dispar
E. histolytica: espcie patognica com potencial
invasivo
virulncia dependente
- cepa
- resposta do hospedeiro
E. dispar: espcie no patognica que raramente
causa eroso de mucosa
10X mais frequente
portadores assintomticos

Tratamento

Formas intestinais
Medicamento

Adulto

Criana

SECNIDAZOL

2g, VO, dose

nica

30mg/kg/dia,
VO

METRONIDAZOL

500mg, VO, 3x/

dia, 5 dias

35mg/kg/dia,
VO, 5 dias

TINIDAZOL

2g, VO
2 dias

TECLOZAM
(somente formas leves
ou assintomticas)

1,5g, VO, dose

nica

15mg/kg/dia,
VO, 5 dias

Tratamento
Formas graves
Medicamento

Adulto

Criana

METRONIDAZOL

750mg, VO, 3x/

dia, 10 dias

50mg/kg/dia,
VO, 10 dias

TINIDAZOL

50mg/kg/dia,
VO, 2-3 dias

50mg/kg/dia,

Histria natural da amebase

Profilaxia e Controle
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Saneamento bsico
Educao sanitria
Tratamento de gua
Controle de alimentos (lavar frutas e verduras)
Tratamento das fontes de infeco
Cuidados com higiene pessoal (lavar as mos)
Portadores assintomticos!

Vacinas (experimentais)
Alvos
trofozotas (via oral)
cistos (impedir encistamento bloqueio transmisso)

The genome of the protist parasite

Entamoeba histolytica.
Nature 2005, 433:865
Predicted metabolism of E. histolytica based on analysis of
the genome sequence data.

Amebase como doena oportunista

Amebas encontradas no solo e na gua, bacterifagas.
Parasitas facultativos em vertebrados.
Famlia Vahlkamphidae
Gnero Naegleria

Meningoencefalite
amebiana primria

Famlia Hartmannellidae
Gnero Acanthamoeba

lcera de
crnea
Ceratite

Famlia Leptomyxiidae
Gnero Balamuthia

Encefalite amebiana
granulomatosa

Infeco cutnea crnica

imunodeprimidos

Amebas de vida livre

Trofozotos fagocitam e digerem microorganismos

Mecanismos de transmisso
Naegleria fowleri

Acanthamoeba

Encontradas em todo o mundo no solo, gua (rios, lagos,

piscinas, gua encanada).
Cistos estveis por 8 meses a temperatura ambiente.

Naegleria fowleri contato com gua, contaminao via

epitlio neurolfatrio - indivduos sadios
Acanthamoeba contato com gua, uso de lentes de contato.
Contaminao local, via epitlio olfatrio, via hematognica.

Fatores determinantes para infeco:

Temperatura, dose infectante, capacidade de persistir nas mucosas,
imunidade de mucosa, imunodeficincia

Acanthamoeba
A. culbertsoni
A. polyphaga
A. hatchetti
A. castellanii

Acanthamoeba spp.
Ameba de vida livre potencialmente patognica

cistos

trofozotos

Acanthamoeba spp
Infeco ocular
(ceratites)

Acanthamoeba - Patogenia
Infeco ocular
Micro-leso ou trauma pr-existente
(lentes de contato, por exemplo)
Contato
Serino e cisteno-proteases
Fagocitose/ apoptose
Persistncia de cistos

adeso

efeito citoptico
leso/morte celular

AMEBAS DE VIDA LIVRE

Acanthamoeba spp.

Encefalite amebiana granulomatosa

Acanthamoeba
Pacientes com imunodepresso

Infeco cutnea crnica

Encefalite amebiana
granulomatosa

Endossimbiontes Legionella e outras bactrias

Amebase como doena oportunista

Famlia Vahlkamphidae
Gnero Naegleria

Naegleria fowleri

Termoflica

Naegleria fowleri
Famlia Vahlkamphidae
Gnero Naegleria

N.gruberi
N. lovaniensis
N. australiensis

Meningoencefalite
amebiana primria

Patogenia
Naegleria
Meningoencefalite amebiana primria, ocorre
principalmente em indivduos jovens.
Doena rara, mas fulminante.
Meningoencefalite necrotizante hemorrgica.
Mecanismos de invaso: adeso, protena formadora
de poros, fosfolipase, outras proteases.

Diagnstico
Exame do LCR: hemorrgico, neutrfilos, glicose
normal ou baixa, protena elevada
Pesquisa de trofozotos
Ceratite raspado de crnea e cultura
Exame direto
Cultura