Clasificacin, estructura y replicacin de las bacterias

Las bacterias son las clulas ms pequeas y, aunque sus tamaos varan, suelen
tener aproximadamente 1 m de dimetro.

Diferencias entre las eucariotas y las procariotas

A diferencia de los animales, plantas y hongos, formados por clulas
eucariotas (con ncleo), las bacterias y las algas azul-verdosas son organismos
procariotas que carecen de ncleo y organelos. Adems, el cromosoma de una
bacteria tpica consiste en una nica molcula circular con dos cadenas de ADN, que
contiene alrededor de 5 millones de pares de bases (5,000 pares de kilobases), con
una longitud aproximada de 1.3 mm. Las bacterias emplean un ribosoma ms
pequeo, el ribosoma 70S, y en la mayora de ellas existe una pared celular protectora
formada por peptidoglucanos. Las bacterias pueden sobrevivir, e incluso crecer, en
ambientes hostiles, bajo elevadas presiones y temperaturas extremas, en ambientes
secos y con diversas y escasas fuentes de energa.

Clasificacin bacteriana
Las bacterias pueden clasificarse segn su aspecto macroscpico y
microscpico, por su crecimiento y sus propiedades metablicas caractersticas, por
su antigenicidad y por su genotipo.

Distincin macroscpica y microscpica

Las bacterias crecen en colonias que albergan uno o ms millones de
organismos. Sus caractersticas individuales condicionan los rasgos que definen a la
colonia, como su color, tamao, forma u olor. Su resistencia ante determinados
antibiticos, su capacidad de fermentar azcares especficos, de lisar eritrocitos
(capacidad hemoltica) o de hidrolizar lpidos puede determinarse usando medios de
cultivo adecuados.
El tamao, la forma y la configuracin de los grmenes (cocos, bacilos, curos,
espirales), y su capacidad de captar el colorante de Gram (grampositivos o
gramnegativos) son los rasgos que permiten distinguir las bacterias. Los cocos
muestran formas esfricas, los bacilos poseen forma de bastn, y los espirilos adoptan
formas serpenteantes. Algunas bacterias tienen aspectos filamentosos ramificados.
Otras forman agregados o cmulos.
La tincin de Gram permite distinguir dos clases de bacterias, establecer un
diagnstico inicial e iniciar un tratamiento basndose en las diferencias entre las
bacterias. Estas se fijan con calor, o se dejan secar sobre el porta, y se tien con
violeta cristal, un colorante que se precipita con yodo. El exceso de colorante y el
colorante no ligado se eliminan con un decolorante hecho con acetona y agua. Luego
se aade safranina como medio de contraste para teir las clulas decoloradas.
Las bacterias grampositivas se tien de prpura al quedar atrapado el
colorante en una gruesa capa de peptidoglucano. Las bacterias gramnegativas, por
tener una capa de peptidoglucanos ms delgada, no retienen el violeta cristal y se
tien con la safranina, que les da una coloracin rojiza.

Debido a que los peptidoglucanos desaparecen en bacterias carentes de

nutrientes (en cultivos antiguos o en fase estacionaria) y despus de un tratamiento
antibitico, la tincin de Gram no es del todo fiable. Las bacterias que no pueden
clasificarse con esta tincin incluyen las micobacterias, que poseen una cubierta crea
y se distinguen con la tincin cido-alcohlica, y los micoplasmas, que no tienen
peptidoglucanos.

Diferencia metablica, antignica y gentica

El siguiente nivel de la clasificacin bacteriana depende de diversas
caractersticas metablicas, incluidas la necesidad de un entorno aerobio o anaerobio
y de nutrientes especficos, y la produccin de metabolitos caractersticos y enzimas
especficas.
Una cepa concreta puede distinguirse usando anticuerpos contra antgenos
caractersticos (serotipado). Estas pruebas serolgicas permiten identificar
organismos difciles, demasiado peligrosos o que deben identificarse con rapidez.
La clasificacin bacteriolgica ms exacta parte del anlisis del material
gentico bacteriano, el cual permite detectar secuencias de ADN especficas
caractersticas. La hibridacin del ADN y la amplificacin mediante reaccin en
cadena de la polimerasa (PCR), entre otras, son tcnicas empleadas para tal fin.
Estas tcnicas no precisan grmenes vivos y pueden emplearse para detectar e
identificar grmenes de crecimiento lento, o para analizar muestras patolgicas, e
incluso muy virulentas. Al analizar secuencias de ADN ribosmico, las secuencias muy
conservadas distinguen a una familia o gnero, y las secuencias altamente variables
caracterizan a una especie o subespecie. El anlisis de plsmidos, el ribotipado y
el anlisis de fragmentos de ADN cromosmico permiten clasificar subespecies
dentro de la investigacin epidemiolgica.

Estructura bacteriana
Estructuras citoplsmicas
El citoplasma bacteriano contiene ADN cromosmico, ARNm, ribosomas,
protenas y metabolitos. El cromosoma bacteriano est compuesto por una sola
molcula circular de doble cadena localizada en el nucleoide. Este cromosoma carece
de histonas que mantengan la conformacin del ADN y este no forma nucleosomas. La
clula puede poseer plsmidos, molculas circulares de ADN extracromosmico que
suelen encontrarse en bacterias gramnegativas y que, si bien no son esenciales para
la supervivencia celular, a menudo proporcionan ventajas selectivas, como la
resistencia frente a uno o ms antibiticos.
La ausencia de membrana nuclear acopla los procesos de transcripcin y de
traduccin; los ribosomas pueden sintetizar protenas fijados al ARNm que an se
sintetiza y permanece unido al ADN.
El ribosoma bacteriano consta de dos subunidades de 30S y 50S que forman
un ribosoma 70S (distinto al ribosoma 80S formado por las subunidades 40S y 60S).
Las protenas y el ARN ribosmicos constituyen un blanco para los antibiticos.

La membrana citoplsmica es una bicapa lipdica que, a diferencia de las

membranas de los eucariotas, no contiene esteroides (los micoplasmas son los nicos
con esteroides membranales). La membrana bacteriana transporta y produce energa,
capta metabolitos y liberar otras sustancias. Adems, contiene bombas de iones (para
mantener un potencial de membrana) y enzimas. La cara interna de la membrana est
tapizada de filamentos proteicos tipo actina que influyen en la forma de la bacteria y
el lugar de formacin del tabique en la divisin celular.

Pared celular
Las bacterias grampositivas difieren de las gramnegativas en la estructura,
funciones y componentes de sus paredes celulares. Los componentes de la pared
celular bacteriana son exclusivos de estas clulas, y su estructura desencadena
respuestas inmunitarias innatas en el hombre.
Las membranas citoplsmicas de la mayora de los procariotas estn rodeadas
de capas rgidas de peptidoglucano (murena), salvo en las arqueobacterias (que
contienen seudoglucanos o seudomurenas) y los micoplasmas (que carecen de pared
celular). El peptidoglucano proporciona rigidez y, por tanto, determina la forma de
cada bacteria. Las bacterias gramnegativas estn cubiertas tambin por membranas
externas.

Bacterias grampositivas
Una bacteria grampositiva posee una pared celular gruesa de varias capas,
formada principalmente por peptidoglucano, un exoesqueleto lo suficientemente
poroso como para permitir la difusin de metabolitos a la membrana plasmtica. El
peptidoglucano es un componente clave para le estructura, la replicacin y la
supervivencia de las bacterias en las condiciones normalmente hostiles en las que
proliferan.
El peptidoglucano puede ser degradado por la lisozima, una enzima presente
en mucosas y lgrimas humanas, producido tambin por bacterias y otros
microrganismos. Sin el peptidoglucano, la bacteria se lisa debido a las grandes
diferencias de presin osmtica a uno y otro lado de la membrana. La eliminacin de
la pared celular produce un protoblasto que, a menos que se estabilice
osmticamente, sufre lisis celular.
La clula grampositiva puede poseer otros componentes. Los cidos teicoicos
son polmeros hidrosolubles unidos al peptidoglucano mediante enlaces covalentes.
Los cidos lipoteicoicos poseen un cido graso y estn unidos a la membrana
citoplsmica. Estas molculas son antgenos de superficie que diferencian los
serotipos bacterianos y favorecen la fijacin a otras bacterias y a receptores
especficos en la superficie de otras clulas. Los cidos teicoicos constituyen factores
de virulencia. Los cidos lipoteicoicos pueden ser expulsados al medio intercelular del
organismo anfitrin y desencadenar respuestas inmunitarias semejantes a las de las
endotoxinas.

Bacterias gramnegativas
Las paredes celulares gramnegativas poseen dos capas: una delgada capa de
peptidoglucano, que representa del 5% al 10% del peso de la pared celular, y una
membrana externa, exclusiva de las bacterias gramnegativas. Estas paredes,
adems, carecen de cidos teicoicos y lipoteicoicos. El espacio periplsmico,
comprendido entre la membrana citoplsmica y la membrana externa, contiene

diversas enzimas hidrolticas (proteasas, fosfatasas, lipasas, nucleasas y enzimas

metabolizadoras de carbohidratos) que degradan y metabolizan macromolculas. Las
bacterias gramnegativas patgenas poseen factores de virulencia lticos (colagenasas,
hialuronidasas, proteasas, etc.) en el espacio periplsmico. Las paredes
gramnegativas cuentan con distintos sistemas de transporte, como los dispositivos de
secrecin de tipos I, II, III, IV y V, que captan y liberan diversos metabolitos y
compuestos. El dispositivo de secrecin III es un factor virulento que cruza las
membranas interna y externa y puede inyectar protenas dentro de otras clulas.
La membrana externa, una bicapa lipdica, mantiene la estructura bacteriana y
constituye una barrera impermeable a molculas grandes, como la lisozima, y
molculas hidrfobas, como algunos antimicrobianos, adems de proteger a la clula
en ambientes hostiles. Su zona interna contiene los fosfolpidos regulares de las
membranas bacterianas, y su zona externa est formada principalmente por
lipopolisacrido (LPS).
Los LPS, conocidos tambin como endotoxinas, se desprenden de la bacteria
hacia el medio y el anfitrin, y son potentes inductores de las respuestas inmunitarias.
Los LPS activan los linfocitos B e inducen la liberacin de IL-1, IL-6, TNF y otros
factores liberados por macrfagos y clulas dendrticas, entre otras. Los LPS
producen fiebre y pueden provocar shock. La liberacin de grandes cantidades de
endotoxinas induce la reaccin de Schwartzman (coagulacin intravascular
diseminada). Las bacterias de tipo Neisseria liberan lipooligosacridos (LOS), que
producen fiebre y sntomas graves.
Las membranas externas contienen solo una limitada gama de protenas,
aunque estas pueden encontrarse en concentraciones elevadas. Muchas de estas son
protenas transmembranales, como las porinas. Los canales de la porina permite la
difusin transmembranal de metabolitos y antibiticos hidrfilos pequeos. La
membrana externa tambin contiene protenas estructurales y receptores para los
bacterifagos, entre otros componentes.
La membrana externa se une a la membrana citoplsmica mediante zonas de
adhesin, y al peptidoglucano por medio de una lipoprotena. Las zonas de adhesin
proporcionan una va para el paso hacia la membrana externa de sus componentes
recin sintetizados.
La membrana externa debe su fuerza y rigidez a los enlaces catinicos
divalentes (Mg2+ y Ca2+) formados entre los LPS y a las interacciones hidrofbicas
entre los LPS y las protenas existentes. No obstante, la resistencia de la membrana
puede ser afectada por antibiticos o por la eliminacin de iones de calcio y magnesio
(quelacin con EDTA o tetraciclina). La alteracin de la membrana externa debilita a
la bacteria y favorece el paso de molculas hidrfobas de gran tamao. La adicin de
lisozima a clulas con membranas externas alteradas produce esferoblastos
sensibles a los cambios osmticos.

Estructuras externas
Algunas bacterias (grampositivas o gramnegativas) estn rodeadas por
cpsulas laxas de protenas o polisacridos, o por capas de limo muy dbilmente
adheridas y con grosores y densidades irregulares. Las cpsulas y las capas de limo
tambin son llamadas glucoclix.
Las cpsulas y las capas de limo no son indispensables para el crecimiento
bacteriano, pero son importantes para su supervivencia en el organismo anfitrin. La

cpsula es poco antgena y antifagoctica, y es un factor de virulencia significativo.

Adems, la cpsula puede actuar como barrera ante molculas hidrfobas txicas
(como detergentes), y facilitar la adherencia a otras bacterias o a los tejidos del
anfitrin. En cultivos in vitro, al faltar la presin del organismo anfitrin, pueden
aparecer cepas carentes de cpsula que son, por tanto, menos virulentas. Algunas
bacterias producen una biopelcula polisacrida que favorece la formacin de la
colonia y la protege de los antibiticos y las defensas del anfitrin.
Los flagelos, formados por subunidades de flagelina enrolladas
helicoidalmente, se unen a las membranas bacterianas mediante un gancho y un
cuerpo basal, y son impulsados por el potencial de membrana. Las bacterias pueden
tener uno o varios flagelos anclados en diferentes regiones. Los flagelos permiten que
las bacterias se muevan para alcanzar nutrientes y evitar sustancias txicas
(quimiotaxis), y adems poseen factores antignicos y determinantes de la cepa
bacteriana.
Las fimbrias (pili) son estructuras piliformes localizadas en el exterior de las
bacterias, formadas por subunidades de pilina. En toda la superficie bacteriana
existen cientos de fimbrias dispuestas uniformemente. Estas carecen de estructuras
helicoidales, poseen dimetros menores que los flagelos y varan en tamao.
Las fimbrias favorecen la adhesin a otras bacterias o al organismo anfitrin
(tambin son llamadas adhesinas, lectinas, evasinas y agresinas). Los extremos de las
fimbrias pueden contener lectinas que se fijan a azcares especficos. Los pili F (pili
sexuales), codificados por un plsmido (F), se unen a otras bacterias y permiten la
transferencia horizontal de segmentos cromosmicos.

Excepciones bacterianas
Las micobacterias, bacterias acidorresistentes, poseen una capa de
peptidoglucano entrelazado y unido covalentemente a un polmero de
arabinogalactano, y rodeado de una capa lipdica ceriforme de cido miclico, factor
de agregacin de micobacterias (cord), waxD y sulfolpidos. Dicha capa lipdica es
antifagoctica y responsable de la virulencia de las micobacterias. Los micoplasmas
carecen de pared celular de peptidoglucano e incorporan en sus membranas
esteroides procedentes del organismo anfitrin.

Estructura y biosntesis de los principales componentes de

la pared celular bacteriana
Las paredes celulares estn compuestas por grandes estructuras formadas por
numerosos polmeros. La sntesis de peptidoglucano, LPS, cidos teicoicos y cpsulas
ocurre fuera de la clula, lejos de la maquinara de sntesis y las fuentes de energa
del citoplasma, en un ambiente inhspito. Las subunidades y los precursores de la
pared celular se ensamblan en el interior de la clula y se unen a una estructura
transportadora que los lleva a la superficie para ser conectados a la estructura
preexistente. El transportador molecular es el bactoprenol (llamado tambin
undecaprenol fosfato, un poliisoprenoide de 55 carbonos). Los precursores de la
pared celular, para poder ensamblarse, deben estar activados por enlaces de alta
energa (como los fosfatos) u otros medios. En las bacterias gramnegativas, las zonas
de adhesin permiten el transporte de los componentes de la membrana externa.

Peptidoglucano (mucopptido, murena)

El peptidoglucano es una malla rgida formada por cadenas de polisacridos,

unidas por pptidos.
Los polisacridos estn compuestos de disacridos
repetidos e N-acetilglucosamina (GlcNAc, NAG, G) y cido N-acetilmurmico
(MurNac, NAM, M).
El MurNac est unido a un tetrapptido compuesto de D-aminocidos y Laminocidos, y es producido por enzimas y no por ribosomas. Los dos primeros
aminocidos del tetrapptido varan entre microrganismos.
Los diaminocidos en la tercera posicin, como la lisina y los cidos
diaminopimlico y diaminobutrico, son esenciales para el entrecruzamiento de las
cadenas de peptidoglucano. El entrecruzamiento se forma entre el amino libre del
diaminocido y la D-alanina situada en la cuarta posicin de otro tetrapptido. S.
aureus y otras bacterias grampositivas introducen un puente entre estos aminocidos
para aumentar la longitud del entrecruzamiento.
El peptidoglucano de las bacterias grampositivas forma mltiples capas y suele
mostrar una conformacin tridimensional que aumenta la fuerza y rigidez de la pared
celular. Las paredes celulares gramnegativas solo tienen una capa de peptidoglucano.
La rigidez de la malla de peptidoglucano depende del nmero y longitud de los
entrecruzamientos.

Sntesis del peptidoglucano

La sntesis del peptidoglucano consta de cuatro pasos.
1.

2.

3.

4.

Dentro de la clula, la glucosamina es convertida en MurNAc, y este es

activado energticamente al reaccionar con trifosfato de uridina (UTP),
formando difosfato de uridina-acido N-acetilmurmico (UDP-MurNAc). El
precursor UDP-MurNAc es ensamblado enzimticamente.
El pentapptido UDP-MurNAc forma un enlace pirofosfato con el bactoprenol
en la membrana citoplsmica y se libera monofosfato de uridina (UMP). Se
aade GlcNAc para formar el disacrido que constituye el peptidoglucano.
El bactoprenol transporta hacia el exterior al precursor del pentapptido
disacrido. El disacrido GlcNAc-MurNAc se une a la cadena polipeptdica
mediante la accin de las transglucosilasas, que emplean la energa del
enlace pirofosfato formado entre el disacrido y el bactoprenol. El pirofosfato
de bactoprenol es reciclado como fosfato de bactoprenol. La bacitracina
inhibe este reciclaje.
Fuera de la clula, las cadenas peptdicas de cadenas adyacentes de glucanos
se entrecruzan mediante el intercambio de un puente peptdico
(transpeptidacin) entre el amino libre del diaminocido en la tercera
posicin del pentapptido y la D-alanina situada en la cuarta posicin de la otra
cadena peptdica. Este proceso no requiere energa.

El entrecruzamiento es catalizado por transpeptidasas ligadas a la

membrana. Las DD-carboxipeptidasas eliminan las D-alaninas terminales extra para
limitar el entrecruzamiento. Las transpeptidasas y las carboxipeptidasas son
protenas de unin a la penicilina (PBP) que constituyen blancos para la
penicilina y otros antibiticos -lactmicos. La extensin y entrecruzamiento de los
peptidoglucanos es necesaria para el crecimiento y la divisin celular.
El peptidoglucano se sintetiza y degrada constantemente. La inhibicin de la
sntesis o el entrecruzamiento del peptidoglucano debilitan la malla y la estructura
bacteriana hasta ocasionar la lisis y la muerte celular. En ausencia de nutrientes no

hay sntesis de peptidoglucano y la pared celular se debilita, lo que disminuye la

fiabilidad de la tincin de Gram.
Diversos antibiticos actan sobre uno o ms pasos de la sntesis del
peptidoglucano, con nulos o escasos efectos adversos para las clulas del organismo
anfitrin.

cidos teicoicos
Los cidos teicoicos y lipoteicoicos son polmeros de ribosa o glicerol
modificados qumicamente y unidos por grupos fosfato. A los grupos hidroxilo del
glicerol o de la ribosa pueden unirse azcares, colina o D-alanina, que actan como
determinantes antignicos. Estas molculas se diferencian mediante el empleo de
anticuerpos y pueden determinar el serotipo bacteriano. El cido lipoteicoico posee un
cido graso unido a la membrana. La sntesis del cido teicoico es similar a la del
peptidoglucano. El cido teicoico y algunas protenas de superficie son secretados
para unirse al peptidoglucano.

Lipopolisacrido
El lipopolisacrido (LPS, endotoxina) est formado por tres regiones: lpido
A, regin central del polisacrido (regin central rugosa) y antgeno O. El lpido A es
esencial para la viabilidad bacteriana y es el responsable de la toxicidad del LPS. La
regin central (core) es un lipopolisacrido ramificado formado por entre 9 y 2
azcares. El antgeno O est unido a la regin central y se proyecta hacia el exterior
de la bacteria. El lipoligosacrido (LOS) de Neisseria carece de la porcin del
antgeno O y se desprende fcilmente de la clula.
La estructura del LPS se emplea en la clasificacin bacteriana. La estructura
del lpido A es idntica en bacterias afines. La regin central es idntica en cada
especie bacteriana. El antgeno O diferencia los serotipos (cepas) de una especie
determinada.
El lpido A y la regin central son sintetizados en la superficie interna de la
membrana citoplsmica. Las unidades repetidas de antgeno O se unen a una
molcula de bactoprenol y se transfieren a una cadena de antgeno O en formacin.
Una vez formada la cadena de antgeno O, se transfiere a la regin central del lpido
A. Las molculas de LPS se desplazan hacia el exterior de la clula a travs de las
zonas de adhesin.

Divisin celular
La replicacin del cromosoma bacteriano desencadena la divisin celular. La
clula debe crecer y ampliar los componentes de su pared celular, y formar un tabique
de divisin compuesto por dos membranas separadas por dos capas de
peptidoglucano. El tabique se forma en la zona media de la clula, y crece hacia el
centro de la misma, provocando la separacin de las clulas hijas. Este proceso
requiere transpeptidasas especiales (PBP) y otras enzimas. Una separacin
incompleta del tabique puede mantener unidas a las bacterias, formando cadenas
(como los estreptococos) o cmulos (como los estafilococos).

Esporas

Algunas bacterias grampositivas (Bacillus y Clostridium, entre otras), pueden

formar esporas. En condiciones adversas, estas bacterias pueden pasar de un estado
vegetativo a un estado de latencia o de espora.
La espora, una estructura deshidratada con mltiples capas que protege a la
clula) contiene una copia completa del cromosoma bacteriano, las concentraciones
mnimas de sus ribosomas y protenas esenciales, y una elevada concentracin de
calcio unido a cido dipicolnico. La espora posee una membrana interna, dos
capas de peptidoglucano y una capa proteica externa similar a la queratina. Bajo el
microscopio ptico, la espora es una estructura refringente (brillante). La estructura
de la espora protege el ADN bacteriano del calor, la irradiacin y la actividad de
muchas enzimas y sustancias qumicas. Las esporas pueden mantenerse viables
durante siglos y precisan desinfectantes especiales para descontaminarse.
El agotamiento de nutrientes especficos induce la produccin de una espora.
Comienzan a transcribirse los ARNm de la espora, se produce cido dipicolnico y
suelen eliminarse antibiticos y toxinas. Tras la duplicacin cromosmica, una copia
de ADN y los contenidos citoplsmicos son rodeados por la membrana bacteriana, el
peptidoglucano y la membrana del tabique. As, el ADN queda recubierto por dos
capas de membrana y el peptidoglucano. Estas dos capas estn rodeadas por la
corteza, recubierta a su vez por una dura capa proteica semejante a la queratina.
El proceso de esporognesis dura entre seis y ocho horas.
La germinacin de las esporas es estimulada por la alteracin de la capa
externa, debida a factores mecnicos, el pH y el calor, entre otros factores. El proceso,
que dura unos noventa minutos, requiere agua y un nutriente desencadenante.
Primero la espora absorbe agua, se hincha, pierde sus capas y, finalmente, produce
una nueva clula idntica a la clula original. El proceso de germinacin debilita a la
espora, hacindola vulnerable como cualquier otra bacteria.

3,400

6,100