1.

Las bacterias son organismos procariotas, con caractersticas bsicas

correspondientes como la carencia de un ncleo delimitado por una
membrana aunque presentan un nucleoide, una
estructura elemental que contiene una gran
molcula circular de ADN.
En el Nucleoide el ADN Bacteriano se
encuentra compactado, plegado y
combinado
con
los
componentes
citoplasmticos.
De todas las muestras biolgicas que podemos someter a un proceso de
extraccin de ADN, las suspensiones bacterianas, son quizs las que
ofrecen menos problemas por la homogeneidad y riqueza del material. En
particular, las suspensiones densas de bacterias gram - negativas pueden
liberar cantidad suficiente de ADN en condiciones bastante suaves como
pueden ser una simple ebullicin, congelacin o una combinacin de
ambas.
2. La adicin de un detergente es necesaria a menudo para eliminar las
membranas. El detergente disuelve los lpidos (molculas grasas) y las
protenas de la membrana celular, rompiendo las uniones que mantienen la
integridad de la misma. De esta forma se libera el contenido celular. Luego,
el detergente forma complejos con los lpidos y las protenas, permitiendo
que los mismos sean separados del ADN por filtracin. As se libera el ADN.

3. La lisozima es de la clase de enzimas que destruye las paredes celulares

de ciertas bacterias Gram-positivas por ruptura del enlace (1-4) entre el
cido N-acetilmuramico (NAM) y N-acetilglucosamina del peptidoglicano
(NAG) debilitando as la pared celular. Figura 1.

Figura 1. Estructuras repetitivas del peptidoglicano de la pared celular de bacterias. Se

muestra el sitio de corte de la lisozima

El resultado es la penetracin de agua en la clula que se hincha y acaba

por estallar, un fenmeno denominado lisis celular Figura 2., y se utiliza
para extraer el ADN o protenas de las clulas para anlisis, especialmente
en el caso de bacterias.

Figura 2. Formacin de protoplastos: en una solucin diluida, la rotura de la pared libera el

protoplasto que inmediatamente se lisa al ser muy dbil la membrana citoplasmtica

4. El alcohol es necesario para una correcta purificacin. A travs de su

adicin se busca la precipitacin del ADN.

El ADN es insoluble en alcohol, por lo que se puede precipitar etanol fro o

isopropanol y recuperar el ADN permitiendo el paso de las molculas y
sales que acompaan la reaccin de lisis. Finalmente se lava con alcohol y
se eluye el contenido.

Analizar directamente un caldo nutritivo tras un proceso de extraccin

primaria de ADN (lisis celular) suele producir resultados satisfactorios para
la mayora de matrices alimentarias por lo que un paso de purificacin no es
estrictamente necesario.

5. A simple vista no se puede visualizar una molcula de ADN debido a su

tamao microscpico.

6. De la experiencia se obtienen miles o millones de molculas de ADN juntas.

Posiblemente contengan otros contaminantes por el proceso de extraccin
empleado.

BIBLIOGRAFA

http://www.microbialsystems.com/web/docs/Newsletter_Microbial_03.pdf

http://webcache.googleusercontent.com/search?
q=cache:trB5JEA9mCcJ:es.slideshare.net/glexirodriguez/extraccion-deacidos-nucleicos-lab-genetica-unah27425914+&cd=4&hl=es&ct=clnk&gl=co Extraccin de cidos nucleicos
lab. Gentica UNAH

http://www.revistasan.org.ar/pdf_files/trabajos/vol_14/num_4/RSAN_14_
4_314.pdf Lisozima: Actividad antibacteriana y alergenicidad

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purificacin del ADN para el anlisis por PCR.

La extraccin y