revisin

intranucleares bacterias: en el interior del

centro de control celular de los eucariotas
Frederik Schulz y Matthias Cuerno
Departamento de Microbiologa y Ciencia de Ecosistemas, Universidad de Viena, Althanstrae 14, 1090 Viena, Austria

Las bacterias intracelulares incluyendo los principales

agentes patgenos viven en el citoplasma o en las
vacuolas citoplsmaticas dentro de su clula husped. Sin
embargo, algunos pueden invadir los ms inusuales nichos
intracelulares
tales
como
el
ncleo
eucariota.
Filogenticamente diversas bacterias intranucleares se han
descubierto en varios protistas, artrpodos, marina
invertebrada, y anfitriones mamferos. Aunque tienen
orientacin del mismo compartimento celular, tienen
fundamentalmente, diferentes estrategias de infeccin
aparentemente desarrollados. El ncleo proporciona una
rica gama de nutrientes y proteccin frente a los
mecanismos de defensa del citoplasma anfitrion; las
bacterias intranucleares pueden manipular directamente al
anfitrion cuando interfiere con sus procesos nucleares. El
impacto en sus clulas anfitrionas se extiende de
asociaciones estables con un efecto neutral o beneficioso
sobre la rpida lisis de la clula. El anlisis de la forma de
vida intranuclear se extender a nuestro marco actual para
la comprensin de las interacciones anfitrion-patgeno.
Las bacterias en las clulas eucariotas
Las bacterias que viven dentro de las clulas eucariotas son
omnipresentes. Como simbiontes benficos o principales agentes
patgenos que son parte integral de la biologa, la ecologa y la
evolucin de sus hospederos humanos y animales. Las bacterias
intracelulares generalmente residen directamente en el citoplasma
anfitrion o en las vacuolas derivadas de la clula [1]. Para
prosperar con xito en los compartimentos vacuolar, las bacterias
frecuentemente secuestran las vas endocticas y secretoras del
anfitrion, reclutan las protenas y los ribosomas del anfitrion
hacia la membrana vacuolar, y en ltima instancia estructuran un
orgnulo especializado para su replicacin [2]. Slo en raras
ocasiones se han observado bacterias directamente dentro de
otros compartimentos intracelulares tales como el retculo
endoplsmico, las vesculas relacionados al Golgi, plstidos,
mitocondrias, o el ncleo [3-8]. Las bacterias en el ltimo
compartimento se denominan como bacterias intranucleares (o
endonucleares) y en la actualidad representan el mayor grupo de
microbios dirigidas a nichos subcelulares inusuales. La primera
evidencia de bacterias intranucleares se remonta al siglo 19,
cuando partculas extraas son observadas en el ncleo de
paramecios (Recuadro 1). Hoy en da, se sabe que las bacterias
intranucleares que se producen en diversos protistas, insectos,
invertebrados marinos, y mamferos. Mientras que la mayora
siguen siendo difcil de alcanzar, algunos han sido descritos con
ms detalle mediante microscopa ptica y electrnica.
Informacin sobre su filogenia y distribucin, el proceso de
infeccin, y su impacto en las clulas husped est disponible

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Para muy pocas bacterias intranucleares. El advenimiento de los

mtodos de cultivo independiente para la identificacin y anlisis
funcional de los microbios en conjuncin con las tecnologas
actuales "micas" ofrece un nuevo impulso, facilitando la
caracterizacin de las bacterias intranucleares.
En este artculo, por primera vez, se resumen los principales
hallazgos sobre las bacterias intranucleares obtenidos durante los
ltimos 150 aos. En primer lugar, recordaremos los
conocimientos actuales sobre la diversidad de bacterias
intranucleares y sus respectivos hospederos. A continuacin se
proporciona un resumen de la evidencia y las hiptesis en
relacin con el proceso de infeccin e invasin del
compartimento nuclear. A continuacin se discute las posibles
ventajas de explotar este nicho intracelular en particular, y
terminamos con breves consideraciones evolutivas.
Bacterias intranucleares en protozoos
La mayora de las bacterias intranucleares conocidas son
asociadas con los protistas (Figura 1). Uno de los ms
minuciosamente estudiado y mejor entendida intranucleares
bacterias son Holospora spp., Que infectan a los paramecios y
estn afiliados a rickettsias (Alphaproteobacteria). A finales del
siglo 19, tres Holospora spp. Se describieron y distinguieron en
funcin de su morfologa caracterstica y su localizacin
intracelular, ya sea en el micro o el macro ncleo [9]. El proceso
de infeccin de Holospora se ha estudiado ampliamente y
revisado recientemente [10]. Holospora spp. Muestran dos etapas
de desarrollo distintas: una forma infecciosa de hasta 20 um de
largo y un corto morfotipo reproductor que se forma en el ncleo.
La mayora Holospora spp. Prosperan dentro del macro ncleo de
paramecios, donde hasta el 100% de una poblacin de acogida
pueden ser infectados, a pesar del efecto negativo sobre la tasa de
crecimiento del husped (revisado en [11]). En la Holospora.spp
la explotacin del micro ncleos son menos frecuentes
(aproximadamente el 10% de la poblacin de acogida), ya que
perjudican ciliado la reproduccin sexual. La asociacin de
Holospora con paramecios puede ser estable durante largos
perodos de tiempo, pero el hambre puede desencadenar la
diferenciacin de nuevo en la forma infecciosa, que luego se
escapa del compartimiento nuclear y finalmente provoca la lisis
de la clula husped (revisado en [11]). Curiosamente, la
infeccin con una Holospora sp. no necesariamente representa
una carga para el anfitrin Paramecium pero puede imponer una
ventaja selectiva. La presencia del simbionte aumenta la
expresin de las protenas de choque trmico de acogida, lo que
resulta en un aumento de las tasas de supervivencia de acogida en
la cara de las condiciones ambientales adversas, como la
salinidad alterado o cambios de temperatura [12-14].

Cuadro 1. El descubrimiento de las bacterias intranucleares

En el medio del siglo 19, se observaron partculas en forma de varilla,

por primera vez en los ncleos de ciliados [79]. En ese momento se
crea que el ncleo juega un papel importante en "la formacin del
embrin ', y se propusieron las estructuras intranucleares para
representar los espermatozoides producidos en este compartimiento
[79-81]. En los aos siguientes, los resultados similares fueron
reportados en varias ocasiones; se observ que las partculas estaban
inmviles, y la hiptesis de que surgieron estas barras intranucleares
estn en parsitos bacterianos hecho [82-84]. En el siglo 20, parsitos
intranucleares en cocoides la Euglena flagelado [31] se inform que
caus la hipertrofia del ncleo, cambio de color de plastidios, y la
inhibicin de la divisin de la clula husped. bacterias
morfolgicamente similares fueron encontrados posteriormente en
flagelados Trichonympha aisladas de las termitas y se describieron
como Caryococcus spp. [32]. Las bacterias en los ncleos de los
eucariotas multicelulares se observaron por primera vez durante el
anlisis de las rickettsias como el agente causante de la fiebre
maculosa de las Montaas Rocosas. Adems de las bacterias en forma
de bastoncillos que se encuentran en el citoplasma de las clulas de
garrapatas y de conejillo de indias, estas bacterias tambin se
encuentran ocasionalmente en el interior del compartimento nuclear
[85,86].

Trends in Cell Biology Junio de 2015, vol. 25,

No. 6

Un segundo linaje de Alphaproteobacteria, representada por

Caedibacter caryophilus y macronucleorum Caedibacter, es capaz
de prosperar en los ncleos de los paramecios [15-17]. No se
observaron estas bacterias por primera vez en el siglo 20. Se
transmiten principalmente verticalmente sobre la divisin celular
del husped Paramecium y fueron originalmente descritos basado
en una caracterstica sobresaliente, la presencia de estructuras de
fagocitosis (?) caractersticos, los llamados cuerpos reticulados
(cuerpos-R; revisado en [18]). Estos cuerpos-R median el "rasgo
killer 'de los anfitriones Paramecium, que sirve como un
mecanismo de defensa para competencia externa con paramecios
sin simbionte relacionado ([19], Revisado en [18]). Dos fenotipos
de Caedibacter diferentes se pueden distinguir por la forma
infecciosa que expresa R-bodys y la forma reproductiva que
carece de R-bodys. formas infectivas son liberados de los
ejrcitos Symbi-ONT portadoras y pueden ser absorbidos por los
paramecios sin simbionte travs de la fagocitosis. Tras la
acidificacin del fagosoma, el R-cuerpo desenrolla, se alarga,
penetra

GRAMOunme
troM a p r o
t

mio

segundoa c t

eria
La membrana vacuolar, y potencialmente proporciona una toxina,
que an no identificada en el citoplasma del anfitrin, lo que
resulta en la muerte de la clula husped Paramecium (la
competencia) [20].
Los dinoflagelados tambin pueden servir como anfitriones para
las bacterias intranucleares [21,22]. Hasta la fecha slo el
betaproteobacterial simbiontes de Gyrodinium instriatum se han
estudiado hasta cierto punto [22]. El anlisis ultraestructural
revel que los simbiontes se distribuyen por todo el
nucleoplasma, pero se concentran principalmente en racimos
densos adyacentes a la envoltura nuclear, mientras que las
bacterias son raramente observadas en contacto directo con los
cromosomas. No se observ ningn efecto negativo en el
anfitrin dinoflagelado. bacterias individuales se liberan del
compartimento nuclear en el cito-plasma, y podran servir como
una fuente de alimento para los hambrientos clulas husped
[21,22].
Las bacterias en el interior del ncleo tambin se han encontrado
en euglenoids [23-25]. Un anlisis ms detallado est disponible
para las bacterias intranucleares an no clasificados en Euglena
hemichromata [26]. Las bacterias se dispersan en todo el
nucleoplasma pero preferentemente se localizan en las
proximidades de la nucleolo. En etapas posteriores de la
infeccin, la cromatina de acogida se reduce, y en ltima
instancia, las clulas husped se lisan. Aunque slo un bajo
porcentaje de la poblacin de Euglena se ve infectada
generalmente, estos parsitos intranucleares podran tener un
fuerte impacto en la dinmica de la poblacin y la proliferacin
de algas [26].
Las bacterias que colonizan el ncleo se han observado varias
veces en flagelados aislados del vientre de las termitas [27,28].
Un estudio reciente describi el comportamiento parasitario que
an no tiene las bacterias intracelulares no identificadas en
Staurojoenina assimilis [29]. Los simbiontes se observaron en
contacto directo con la cromatina husped, y se observ un
cambio estructural pronunciado de la envoltura nuclear del
anfitrin. La infeccin llev a un sobre-crecimiento del ncleo

(hipertrofia nuclear), lo que resulta eventualmente en su

destruccin y la liberacin bacteriana. Las bacterias
intranucleares del intestino de las termitas Trichonympha agilis
han sido recientemente identificados como Verrucomicrobia, un
grupo predominantemente de bacterias de vida libre que se
encuentra en ambientes de agua dulce y de suelo. 'Candidatus
Nucleococcus trichonymphae' y 'Candidatus Nucleococcus
kirbyi' (Figura 1) No caus hipertrofia o ruptura nuclear del
ncleo del anfitrin [30]. Ellos probablemente representan el
gnero Caryococcus que haba sido descrita hace ms de un siglo
(Recuadro 1)[31,32]. Simbiontes Verrucomicrobial en el ncleo
parecen ser ms generalizada entre flagelados termitas asociado
como se indica por la deteccin de bacterias intranucleares en
diferentes anfitriones con una fluorescencia Verrucomicrobia
especfica en el ensayo de hibridacin in situ [30]. Es de destacar
que la coinfeccin del ncleo de flagelados con un Verrucomicrobial y otro simbionte bacteriano ha sido observado
[30,33]. Bacterias intranucleares tambin se han encontrado en
las amebas de vida libre, por primera vez en Naegleria clarki
[34,35]. Las bacterias tienen una morfologa cocoides y
principalmente rodea el nuclolo (Figura 2). Estas bacterias,
tentativamente re-preferidas como cepa 'Pn', son miembros de las
clamidias, un grupo de bacterias intracelulares obligados que
comprenden agentes patgenos conocidos, as como simbiontes
ubicuos [36]. Otro estudio inform sobre la identificacin de dos
bacterias, las cepas HT99 y CC99, que puede infectar y prosperar
en Acanthamoeba Polyphaga [37]. Estas bacterias son
gammaproteobacteria,
los
cuales
estn
relacionados
moderadamente con

amoebiphila Nucleicultrix

Nuevo Mjico

notario pblico

simbionte clamidias pn
Nuevo Mjico

notario
pblico
Carolina del Norte

Trends in Cell Biology

Figura 2. bacterias intranucleares en amebas. Fluorescencia de imgenes de

hibridacin in situ (izquierda) y microscopa electrnica de transmisin (TEM, derecha)
de Nucleicultrix amoebiphila y el simbionte clamidias Pn (puntas de flecha) revelan
diferentes lugares dentro de los ncleos de las amebas de vida libre (bacterias en
rosa, nucleoplasma en azul, el citoplasma ameba en color gris o verde). Mientras que
Nucleicultrix amoebiphila ocupa una gran parte del nucleoplasma y est
estrechamente asociada con la heterocromatina husped (material oscuro, granular),
Pn est dispuesto alrededor del nuclolo. La imagen TEM de Pn se modific a partir
[44]. Las barras de escala indican 1 metrometro. Abreviaturas: NC, nuclolo; nm, la
membrana nuclear; np, nucleoplasma.

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Hay dos informes adicionales sobre las bacterias
intranucleares en los artrpodos; sin embargo, la identidad de los
simbiontes sigue siendo difcil de alcanzar. Un estudio describi
bacterias en las clulas de los ovarios de dos spp termitas. [46]. A
diferencia de la mayora de las bacterias intranucleares, fueron
rodeados por una membrana vacuolar. A pesar de que su
presencia caus una reduccin en la densidad de la cromatina, y
condujo a la formacin de material granular en el ncleo, no se
observ impacto negativo en los procesos meiticos o la
integridad de la clula husped [46]. Bacterias intranucleares
encerradas en las vacuolas en el interior del ncleo de acogida
tambin se encontraron en la chicharrita Pentastiridius leporinus
[47].
Bacterias intranucleares en los invertebrados marinos
Simbiontes intranucleares se han encontrado en varias almejas y
mejillones bathymodiolin [48-51]. Descrito originalmente como
rickettsia como "inclusin nuclear X ', las bacterias intranucleares
que se encuentran en la navaja del Pacifico Patula siliqua, fueron
identificados como Gammaproteobacteria ms de cerca posible
relacionadas a Pseudomonas spp. [48,52,53]. La infeccin con
estas bacterias provoca hipertrofia nuclear; que se consideran
patgenos graves y se han asociado con la amplia disminucin de
la poblacin del anfitrin [48]. 'Nuclear inclusin X' pertenece a
un clado de simbiontes de invertebrados marinos, que tambin
incluye 'Candidatus Endonucleobacter bathymodioli' descrito
recientemente como un parasito intranuclear de mejillones
bathymodiolin [51]. Estas bacterias muestran un ciclo de
desarrollo distinta con una etapa corta en forma de varilla que
infectan el compartimento nuclear que crece hasta formar largos
filamentos, y dividindose por fisin binaria transversal (figura
3). La infeccin se acompaa de una reduccin de la cromatina y
el agrandamiento de los ncleos, y, finalmente, conduce a la sede
de la lisis celular [51]. Curiosamente, las clulas del tejido
branquial que albergan bacterias intranucleares estn libres de los

Legionella y Coxiella spp. Recientemente, un simbionte en el

ncleo de otra cepa de ameba, Hartmannella sp., Se descubri
[38]. La bacteria en forma de bastn, llamada 'Candidatus
Nucleicultrix amoebiphila', est relacionado con Holos-Pora y
Caedibacter, y un miembro de un clado de protistas simbiontes en
el Alphaproteobacteria (Las figuras 1 y 2). La infeccin con este
simbionte no parece influir negativamente en su Hartmannella sp
nativo. acoger, mientras que se observa la lisis de la clula
husped a la infeccin de Acanthamoeba spp. [38].
Bacterias intranucleares en artrpodos
Varios miembros de la Rickettsiaceae son capaces de entrar en el
ncleo de sus clulas husped de artrpodos, a saber, los
patgenos bacterianos asociados son Rickettsia rickettsii,
Monacensis Rickettsia, Rickettsia honei, y Rickettsia Canad
[39-42]. Sin embargo, la invasin del ncleo parece ser un evento
raro debido a que estas bacterias generalmente se localizan en el
citoplasma de acogida. Rickettsias tambin se han encontrado en
los ncleos de los tbulos de Malpighi o clulas epiteliales del
intestino del booklouse Liposcelis bostrychophila, el insecto
musgo Xeno-phyes cascus, y los Nephotettix cincticeps
saltahojas
[43-45]. Sorprendentemente, las bacterias intranucleares de N.
cincticeps se transmiten por va paterna (es decir, de una
generacin a la siguiente) a travs de los ncleos de las clulas de
esperma [45]. Estos simbiontes tambin son capaces de infectar
el compartimento nuclear de un mosquito y una lnea celular de
gusanos de seda, lo que indica su potencial para explotar varios
otros insectos hospedadores [45].
simbiontes citoplasmticos thiotrofico y metanotrofico que estn
tpicamente presentes en estos tejidos. Bacterias intracelulares
tambin han sido observadas en las esponjas pero que an no
han sido ms investigas. [54].

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Potencial para infectar clulas de los mamferos

Varias lneas de evidencia sugieren que algunas bacterias
intranucleares tambin pueden infectar las clulas de mamferos.
Rickettsia belli, Rickettsia conorii, y Rickettsia rickettsia se han
encontrado que en ocasiones invaden el ncleo in vitro en
experimentos de cultivo celular [39,55]. Se detect el rganoismo Orientia tsutsugamushi relacionado con rickettsia dentro de
los ncleos de las clulas de hgado humano y se observ in vitro
en lneas celulares correspondientes [56,57]. Sin embargo, una
locacin intracelular slo se ha observado en una fraccin de las
clulas husped. As, se ha sugerido que rickettsias se pueden
introducir accidentalmente el ncleo. Estas bacterias inducen la
polimerizacin y la nucleacin de la actina del anfitrion y
propulsan la fuerza generada en este proceso a travs del
citoplasma del anfitrion [58]. Cuando accidentalmente penetran
la envoltura nuclear, la naturaleza diferente de la actina en este
compartimiento puede conducir a la prdida de la motilidad
bacteriana y restringir su salida [59]. Las bacterias comienzan a
replicarse a continuacin, lo que conduce finalmente a la
alargamiento y explosin del ncleo [60]. La evidencia adicional

para la capacidad de las bacterias intranucleares para infectar

clulas de mamfero est disponible para el C99 ameba
simbionte, que es capaz de invadir ncleos de macrfagos
humanos y clulas HeLa, lo que resulta en la lisis de la clula
husped [37].
Proceso de infeccin y el ciclo de vida de las bacterias
intranucleares
Antes de que el ncleo pueda ser explotado para la replicacin,
las bacterias deben entrar en la clula husped, soportar los
mecanismos de defensa frente al citoplasma, migrar al
compartimiento nuclear y cruzar la envoltura nuclear, que es
fundamentalmente diferente de la membrana citoplasmtica y
representa un lmite importante. Se compone de una doble
membrana: la membrana nuclear externa, que es continua con el
retculo endoplsmico, y la membrana nuclear interna, que
desempea un papel importante en el mantenimiento de la
integridad estructural del nucleoplasma. Ambas membranas se
fusionan en los sitios de insercin de los complejos del poro
nuclear; estos grandes canales de protenas estructuran la
envoltura nuclear como una barrera de difusin y
(SEGUND
O)

(UN)

Controlan el intercambio bidireccional de sustratos entre el

ncleo y el citoplasma [61,62]. Para superar esta barrera, las
bacterias intranucleares aplican varias estrategias sofisticadas.

Ncleo
Citoplasma

Hasta la fecha, los procesos de infeccin y ciclos de vida de las

bacterias intranucleares se han descrito con cierto detalle para la
E. bathimodioli, N. amoebiphila, Holospora spp., Y para las
bacterias que ocupan el ncleo de Euglena (figura 3)[10, 26,
38,51]. E. bathimodioli muestra un ciclo de desarrollo
pronunciada que involucra etapas morfolgicamente muy
distintas (figura 3), Pero la informacin sobre su absorcin en la
clula husped y la invasin del ncleo se carece [51]. N.
amoebiphila parece salir del fagolisosmica y presumiblemente
invade el compartimento nuclear en el desglose de la envoltura
nuclear durante la mitosis abierta de su husped ameba (Las
figuras 3 y 4)[38]. Holospora spp. Escapa del fagosoma
acidificado y utiliza su llamada "punta invasin' para infectar
(figura 3)[63,64]. Esta estructura macromolecular tiene una
longitud de aproximadamente 1 um y se recubre con una protena
de 89 kDa que contiene dos motivos de unin a actina, una
espiral de la bobina y un dominio de cadherina [10]. Se plante la
hiptesis de que esta protena induce la polimerizacin de la
actina husped, permitiendo a la Holospora moverse a travs del
citoplasma del anfitrion [64]. Adems, la protena de 89 kDa
facilita la unin a la membrana nuclear y la entrada de la bacteria,
pero se queda atrs en el curso de este proceso (Figura 4)[10].
Una estrategia alternativa para invadir el ncleo se ha descrito
para las bacterias intranucleares en Euglena. El simbionte es
absorbido por fagocitosis y sobrevive

penetra invasin p
membrana nuclear

Fusin de vacuola
con
membrana
nuclear

(C)

Desintegra el
de envoltura
nuclear
durante la mitosis

Figura 4. La invasin del ncleo. Se han propuesto diferentes estrategias de cmo las
bacterias intranucleares entrar en el ncleo. (A) Holospora spp. emplear una
estructura macromolecular especializada conocida como la punta invasin. Esta
estructura incluye una protena de 89 kDa con actividad de unin a actina, que es
secretada al entrar en contacto con la membrana vacuolar y facilita escapar en el
citoplasma y la penetracin de la envoltura nuclear. (B) simbiontes intranucleares de
Euglena spp. posiblemente entrar en el ncleo por la fusin de las bacterias que
contienen vacuolas derivadas del husped con la membrana nuclear externa seguido
por invaginacin de la membrana nuclear interna y liberacin en el nucleoplasma. (C)
Nucleicultrix amoebiphila puede utilizar la desintegracin de la envoltura nuclear que
tiene lugar durante la mitosis abierta para permitir la invasin del ncleo.

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A la fusin fagosoma-lisosoma. La vacuola es entonces

translocada al ncleo, donde su membrana se fusiona con la
membrana nuclear externa. La bacteria se libera en el espacio
perinuclear y, presumiblemente, entra en el nucleoplasma por
invaginacin de la membrana nuclear interna (Figura 4)[26]. Una
vez dentro del ncleo, los cuatro simbiontes inician la
replicacin, lo que puede en ltima instancia conducir a la
hipertrofia nuclear y, finalmente, la lisis del anfitrion.
El ncleo como un nicho
La vida en el interior del ncleo tiene muchas ventajas
potenciales. Su invasin podra representar una estrategia para
escapar de los mecanismos de defensa celulares del husped,
proporcionando una larga duracin y el nicho seguro donde las
bacterias estn protegidas de procesos citoplasmticos tales como
la autofagia [65].
Parece plausible que la proximidad para recibir cromosomas
facilita la entrega de molculas efectoras bacterianas que pueden
manipular la clula anfitrin a favor de la replicacin bacteriana
atacando directamente a procesos nucleares. Tales efectores,
tambin llamados nucleomodulins, cada vez son ms reconocidos
en los patgenos bacterianos intracelulares tales como Listeria,
Mycobacterium, Shigella y Helicobacter [8]. Estas bacterias
manipulan la cromatina y los mecanismos epigeneticos de sus
clulas anfitrionas [66] ya sea indirectamente a travs de
cascadas de sealizacin citoplasmticas [67,68] o directamente
en el ncleo por nucleomodulins que median las modificaciones
de las histonas [69,70]. Las bacterias intranucleares son
propensos a utilizar la estrategia de "directo". Al igual que en
nucleomodulins conocidos, sus efectores pueden actuar como
reguladores de la cromatina husped o factores de transcripcin

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Otros cidos nucleicos, tales como ARNm o ARN intrnico
despus de empalme, pero esto tendra importantes
consecuencias sobre la expresin y regulacin gnica del
anfitrion.
Una explicacin alternativa para la reduccin observada de la
heterocromatina en el ncleo podra ser su transicin a la
eucromatina
electrn-translucido
porque
las
bacteria
intranucleares afecta potencialmente a la estructura de la
cromatina anfitrion mediante la interferencia de la metilacin del
ADN o mediante la alteracin de las marcas de la cromatina.
Varias modificaciones de las histonas, tales como acetilacin,
metilacin y fosforilacin, resulta en un cambio en la
compactacin de fibras de cromatina [66]; Sin embargo, la
manipulacin de estos procesos podra afectar gravemente a la
expresin de genes del anfitrion y la estabilidad del genoma.
La localizacin de las bacterias en el compartimento nuclear
tiene un gran potencial para la transferencia horizontal de genes y
recombinacin entre ambos socios. De hecho, los genomas de las
amebas, como Acanthamoeba castellanii, han sido moldeadas en
gran medida por la adquisicin de genes bacterianos [77]Y un
papel para las bacterias intranucleares en este proceso es
concebible. Aunque los anlisis sistemticos estn actualmente
desaparecidos, tal escenario se apoya en la deteccin de
fragmentos del gen 16S ARNr de simbiontes 'Candidatus
Nucleococcus' en el genoma de su anfitrion flagelado [30].
Origen evolutivo independiente de un estilo de vida
intranuclear
Las bacterias intranucleares son mltiples y diversas. (i) Se
infectan a una amplia gama de anfitriones eucariotas. (ii) e

eucariotas [8], Controlando de este modo la expresin de los

genes del anfitrion, la replicacin y reparacin del ADN, la
regulacin del ciclo celular y cambio de sustratos con el
citoplasma. Sin embargo, hasta ahora slo la manipulacin de la
transcripcin de la clula husped se ha descrito para las
bacterias intranucleares. La presencia de Holospora obtusa en el
ncleo altera la expresin de los genes del anfitrion implicados
en la resistencia al estrs, la sealizacin intracelular, la
transcripcin, y el metabolismo aerbico [12,71].
La replicacin en el ncleo tambin puede proporcionar una
ventaja nutricional. Una rica gama de protenas (hasta 90%),
pequeas ribonucleoprotenas, los cidos nucleicos (hasta 30%),
y trifosfatos de los nucleosidos estn fcilmente disponibles para
ser utilizados por el simbionte bacteriano. Para facilitar la
incorporacin de nucletidos, Rickettsias intranucleares, C.
caryophilus, y Holospora spp. codifican uno o ms
transportadores de nucletidos, que son bien conocidos de otras
bacterias intracelulares prspera como parsitos de energa en
vacuolas o el citoplasma [72,73].
Una reduccin de la heterocromatina del anfitrin se ha
observado para varias bacterias intranucleares, que podra endicar que los cromosomas del anfitrion pueden servir como
sustrato [74]. Tal escenario se basara en la secrecin de exoenenzimas capaces de digerir el ADN de alto peso molecular y la
presencia de sistemas de transporte especficos codificados por
los genes de la competencia que facilitan la importacin de
fragmentos de ADN anfitrion en la clula bacteriana [75,76]. Se
podra suponer que la degradacin del material gentico del
anfitrion sera gravemente perjudicial para la clula, pero las
observaciones de varias bacterias intranucleares sugieren que no
confieren una disminucin aparente de la aptitud en sus
anfitriones [22, 38,46]. Una estrategia para evitar daos en los
cromosomas del hospedador podra ser la captacin de
utilizan diferentes estrategias para la infeccin y la invasin de
loa ncleos (Figura 4). (iii) Se muestran diferentes ciclos de vida
que a veces implican inusuales etapas de desarrollo (figura 3).
(iv) Los efectos en sus clulas anfitrionas son diferentes, que van
desde el parasitismo al mutualismo, y (v) estn afiliados con
cinco diferentes clados taxonmicos bacterianos (Figura 1). Cada
uno de estos grupos filogenticos comprende otros simbiontes de
protistas o eucariotas superiores. Sin embargo, la mayora de esas
bacterias se encuentran en su citoplasma de la clula anfitriona, y
un estilo de vida intranuclear parece ser un fenmeno raro
comparable. En conjunto, estos hallazgos son fuertemente
indicativos de una evolucin independiente, convergente de la
capacidad de utilizar el compartimiento nuclear como un nicho.
Es de destacar que la mayora de las bacterias intranucleares
identificadas hasta ahora forman ramas profundas en los rboles
filogenticos, lo que sugiere que la adaptacin a un estilo de vida
intranuclear ocurri hace mucho tiempo. Parece ms
parsimoniosa que la capacidad de invadir el ncleo es una
adaptacin secundaria de bacterias que ya se haba desarrollado
un estilo de vida intracelular. Esta percepcin es compatible
actualmente con la filogenia de clamidias y simbiontes
alphaproteobacteriales (Figura 1).
Observaciones finales
A pesar de los avances recientes, muchas bacterias intranucleares
an no han sido claramente identificadas y an no han sido objeto
de esfuerzos de investigacin especficos. Todava estamos lejos
de comprender la base de este notable estilo de vida (Recuadro
2). Por ejemplo, no podemos explicar cmo las bacterias
intranucleares crecen dentro del ncleo manteniendo la funcin
nuclear y la integridad celular. Tambin sigue siendo difcil de
alcanzar cmo las bacterias intranucleares adquieren nutrientes;
un etiquetado especfico de compuestos nucleares de anfitriones
(por ejemplo, usando istopos estables) podra

mecanismos moleculares que permiten la invasin del

compartimento nuclear y facilitar la manipulacin de los
procesos nucleares del anfitrion directamente en el centro de
control celular. Esto ser difcil debido todas las bacterias
intracelulares conocidas son patgenos intracelulares obligados y
- en contraste con los organismos modelo ms patgenos - no se
puede mantener en un medio libre del anfitrion. Adems, no hay
herramientas genticas disponibles para estos organismos. Sin
embargo, un importante primer paso hacia el desciframiento de
las bases moleculares de las formas de vida intranucleares fue la
reciente secuenciacin de los genomas de tres Holospora spp.
[78]. La disponibilidad de secuencias del genoma de bacterias
intranucleares de diferentes linajes evolutivos y sus anfitriones,
combinado con estudios funcionales que implican enfoques de la
transcriptmica,
protemica,
metabolmica
contribuirn
significativamente a nuestra comprensin de este estilo de vida
nico.

Recuadro 2. Las cuestiones pendientes

invasin exitosa del ncleo requiere un proceso complejo de la
infeccin; En particular, la envoltura nuclear representa una barrera
importante. Cules son los mecanismos moleculares que subyacen
al trfico de bacterias intranucleares a travs del citoplasma del
anfitrion, y el reconocimiento y la invasin del compartimento
nuclear?
Cules son las protenas efectoras clave utilizados por las bacterias
intranucleares para manipular los procesos nucleares de acogida?
Son similares a nucleomodulins conocidos que se encuentran en
los principales patgenos intracelulares?
Se han observado diferentes patrones de colonizacin del ncleo.
Adems, las bacterias se distribuyen por todo el nucleoplasma o en
asociacin, ya sea con la envoltura nuclear o el nuclolo. Por lo
tanto, cules son las implicaciones de estos hallazgos para el
husped y simbionte?
Aunque algunas bacterias intranucleares promueven la lisis de la
clula anfitriona, otros pueden prosperar de forma estable en el
ncleo de acogida para los perodos de tiempo prolongados. Cmo
hacer esto ltimo las bacterias intranucleares establecer su nicho sin
daar la integridad de la clula anfitriona o que afectan fuertemente
la fisiologa de la clula husped? Cmo hacer frente la clula
anfitriona con una infeccin intranuclear?
El ncleo puede ser considerado una despensa, rica en protenas,
pequeas ribo nucleoprotenas, cidos nucleicos, y trifosfatos de
nuclesidos; Por lo tanto, qu molculas son utilizados por las
bacterias intranucleares?
La evolucin del estilo de vida intranucleares se ha producido varias
veces de forma independiente. Existen distintos mecanismos y
patrones genticos que son compartidos entre todas las bacterias
intranucleares?

Expresiones de gratitud
F.S. es un receptor de la beca DOC de la Academia de Ciencias de Austria en la
Divisin de Ecologa Microbiana de la Universidad de Viena, Austria. M. H.
reconoce el apoyo del proyecto EUGENPATH InfectERA financiado por el Fondo
Cientfico de Austria (FMF; I1628-B22) y el Consejo Europeo de Investigacin
(CEI subvenciones de inicio EVOCHLAMY, # 281633). Agradecemos a Rolf
Michel para el debate y para proporcionar imgenes de microscopa electrnica de
transmisin.

Referencias
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Ayudar a dilucidar que los sustratos son utilizados por las

bacterias intranucleares. Uno de los puntos ms importantes para
la investigacin futura ser la de revelar los factores y

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