DE LA DIGESTIN DE LAS GRASAS in vitro.

ACCIN EMULSIFICANTE DE
LAS SALES BILIARES SOBRE LAS GRASAS. ACCIN DE LA LIPASA
PANCRETICA SOBRE LOS TRIGLICRIDOS Y EFECTO DE LAS SALES
BILIARES.
1.

Componentes

Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

Aceite de Olivo (gotas)

Agua destilada (ml)

Cloroformo (ml)

Sales biliares (ml)

Primer Sistema: Accin emulsificante de las Sales Biliares sobre las

grasas
a. Procedimiento
Se arma el siguiente sistema:

Como se observa en la tabla anterior, la accin emulsificante de las sales biliares se

ejerce sobre el aceite de olivo. Por otro lado, el cloroformo (Tubo 3) no ejercer
ningn efecto emulsificador sobre el aceite de olivo.
b. Resultados
Como se puede observar en la imagen siguiente (ver fig. 1), se
forman diferentes estados de disolucin y emulsificacin.
Claramente se deduce que luego de mezclar el agua destilada y el

Fig 01: Tubos deTubo

ensayo
correspondientes
1 Tubo
2
Tubo 3 a solucin heterognea (Tubo 1), emulsificacin (Tubo 2) y soluc

aceite de olivo en el Tubo 1, se forma una solucin heterognea

bifsica debido a que no son miscibles. Mientras que en el Tubo 3 se

forma una solucin homognea debido a que el cloroformo es un

solvente apolar miscible con el aceite de olivo; sin embargo, no hay
evidencia de emulsificacin. Por otro lado, en el Tubo 2 se aprecia la
presencia de miscelas suspendidas en la mezcla, con lo que se
demuestra la accin emulsificante de las sales biliares.
2. Segundo Sistema: Accin de la Lipasa Pancretica sobre los
triglicridos y efecto de las sales biliares sobre la reaccin enzimtica.
a. Procedimiento
Se arma el siguiente sistema:
Componente (ml)
Emulsificacin de aceite
vegetal
Buffer fosfato 0.1M pH 8.0
Solucin de sales biliares
1%
Solucin de extracto
pancretico
Agua destilada

Tubo I

Tubo II

Tubo III

Tubo IV

Como se aprecia en la tabla anterior, el Tubo ideal corresponde al

Tubo IV debido a que tiene todas las condiciones necesarias para
llevarse a cabo una correcta digestin (por la Lipasa Pancretica del
extracto pancretico) y emulsificacin (por la solucin de sales biliares)
de los triglicridos.
A cada uno de los tubos se aade fenolftalena (3 gotas) y NaOH 0.1N
(gotas) para la titulacin.
b. Discusin y Resultados
Como se puede observar en la imagen siguiente (ver fig. 2), luego de
la mezcla y titulacin de las soluciones, se observa la aparicin del
color rosa tenue despus de utilizar un cierto nmero de gotas de
NaOH 0.1N en cada tubo de ensayo.
Tubo I

Tubo II Tubo III

Tubo IV

Fig 02: Tubos de ensayo correspondientes a ausencia del sustrato (Tubo I), emulsificacin y no digestin (T

Tubo de

Caractersticas

Titulacin

ensayo

(gotas de NaOH

Tubo I

0.1N)
2

No hay digestin, tampoco emulsificacin por la

ausencia del sustrato (emulsificado de aceite

vegetal).
Escasa presencia de AGL, por lo tanto, se
necesita un menor nmero de gotas de NaOH

Tubo II

0.1N.
S hay emulsificacin, pero no digestin por la

ausencia del extracto pancretico.

Baja concentracin de AGL, pero mayor que la

12

concentracin del Tubo II; por ello, se emplea un

Tubo III

nmero de 12 gotas de NaOH 0.1N.

No hay emulsificacin, pero s digestin.
Por ello la concentracin de AGL es mayor a

47

comparacin del Tubo II. Esto justifica la utilizacin

Tubo IV

de un mayor nmero de gotas de NaOH 0.1N.

S hay emulsificacin y digestin (Tubo ideal).
Aqu, la concentracin de AGL es an mayor que
cualquiera de los tubos anteriores. Por lo tanto, se
requiere un mayor nmero de gotas de NaOH
0.1N para neutralizar las cargas negativas los
grupos
-COOH de los AGL.

DETERMINACIN DE TRIGLICRIDOS PRE Y

POSTPRANDIAL EN SUERO HUMANO.
a. Discusin y Resultados

70

Se puede observar una variacin en la intensidad del color presente en

los tubos de ensayo, esto fue medido por el fotocolormetro y los
resultados se resumen en la tabla siguiente.

Blanco
0.3
Blanco Pre-prandial Post-prandial
mg/dl
0

Pre-prandial
0.4
80.5mg/dl

Post-prandial
0.62
257.6mg/dl

Fig 01: Tubos de ensayo correspondientes a blanco, pre-prandial y post-prandial en la prueba para cuantifi

Claramente se puede observar el incremento de casi el triple en los

triglicridos post-prandial en relacin con el pre-prandial. El valor
preprandial est dentro del rango normal (menor a 150 mg/dl).
Los alimentos ingeridos por el individuo en estudio fueron aceitunas,
huevo, leche, los cuales contienen gran porcentaje en lpidos. Por cada
cien gramos de huevo (2 huevos aproximadamente) estn presentes
14.84 g de lpidos, adems la yema un solo huevo contiene ya la
cantidad de colesterol que debera tomarse como mximo al da (250 a
300 mg).
Nutriente
cidos grasos saturados
cidos grasos monoinsaturados
cidos grasos poliinsaturados

Por cada 100g

4.323g
6.182g
3.251g

Las aceitunas contienen en promedio un 22 % de lpidos en su

composicin.
La

Hechos Nutricionales
Grasa
Grasa Saturada
Grasa Poliinsaturada
Grasa Monoinsaturada
Colesterol

por 1 porcin de 10 medianas

3,82 g
0,505 g
0,326 g
2,817 g
0 mg

leche presenta tambin un alto porcentaje de lpidos en su composicin, en la leche

entera que fue consumida aproximadamente 300 ml se puede encontrar 8.4 gramos
de grasa.
LECHE entera

30 a 35 g. de grasa por litro.

LECHE parcialmente descremada

28 a 29 g. de grasa por litro.

LECHE semidescremada

16 a 18 g. de grasa por litro.

LECHE descremada

de 16 g. de grasa por litro.

Los lipidos de estos alimentos ingresan en forma de trigliceridos, colesterol y

fosfolipidos al organismo. Las grasas de la dieta no son hidrosolubles y
forman agregados lipidicos de forma espontanea. La digestion de los lipidos
se inicia por la lipasa lingual la que hidroliza el acido graso de la tercera
posicion de TAG; posteriormente la mayor parte de la hidrolisis es mediada
por la lipasa pancreatica junto a la colipasa en la que se produce la hidrolisis
intraluminal a acidos grasos y B- monoglicerido, los cuales son solubilizados
en micelas de acidos biliares, en el ribete en cepillo del enterocito. Los acidos
grasos y los B-monogliceridos se liberan de la micela y difundem de forma
pasiva a travez de la capa de agua y de la bicapa lipidica. Una vez dentro del
enterocito, son transportados al reticulo endoplasmatico en las que son
reesterificados por medio de las aciltransferasas.
Los trigliceridos reesterificados se incorporan al quilomicron, varias
apoproteinas (A1,A4, B) se incorporan. Los quilomicrones son capatados por
los linfaticos transportados por el conducto toraxico a la vena cava superior.
Luego los son hidrolizados por la liproteina lipasa para liberar acidos grasos y
monogliceridos que son captados por las clulas. Los restos del quilomicron
son captados por el higado por endocitocis mediada por receptores.
El mtodo para la determinacin de triglicridos (GPO), esta basado en la
determinacin enzimtica del glicerol utilizando la enzima oxidasa glicerol
fosfato despues de la hidrlisis por la lipoprotena lipasa. La intensidad del
color formado es proporcional a la concentracin de triglicridos presentes en
la muestra ensayada.

Fig 02: Reacciones del

mtodo enzimtico para la
determinacin de trigliceridos
Obtenido
de
Scientific, INC

Pointe