MV. MG. LUISA ECHEVARRA C.

Para tener xito en la IA

Momento apropiado dentro del ciclo estrual de

la perra.

Usar buena calidad de semen.

Usar una buena tcnica de IA

(Linde-Forsberg 2002)

Experiencia en otros pases

El Kennel Club controla el uso de la IA.

Restringe el uso a profesionales autorizados.

Restringe la congelacin y almacenaje del

semen de los reproductores a establecimientos
autorizados.
La principal preocupacin del Kennel Club es el
control de la identidad de las dosis de semen.

Conocimientos bsicos indispensables

Fisiologa espermtica, y patologas reproductivas
del macho.
Ciclo estrual de la perra, y variaciones en la
presentacin del celo.
Interpretacin de determinacin de niveles
hormonales en la especie

Frotices Vaginales Realizacin e intepretacin

Evaluacin de semen Coleccin e interpretacin

de resultados.

EQUIPOS Y MATERIALES

Microscopio
Materiales para coleccin de semen
Hemocitmetro
Centrfuga
Dilutores- Semen diluido, semen congelado
Cooler
Catteres de IA
Nitrgeno lquido
Tanques de nitrgeno lquido

INSEMINACION ARTIFICIAL EN
CANINOS

1 .-

Determinacin de la ovulacin de la perra:

Progesterona,
Frotis vaginal

3.-

Coleccin y procesamiento del semen:

Fresco, refrigerado y congelado

4.-

Inseminacin de la hembra

Determinacin de la ovulacin
de la perra
Se propone :
Determinacin de Progesterona y
Frotis vaginal

NIVELES HORMONALES DE
PROGESTERONA PARA DETERMINAR
MOMENTO DE OVULACIN
PROGEST
Nmol/l

DA DE
OVULACIN

DA DE SERVICIO

3-6

+ 2das

+ 4 das ( 3 6)

7 - 12

.+ 1 da

+3das ( 2 5 )

13 - 32

0 das

+ 2 das ( 1 4 )

> 32*

- 1 a 5 das

0 +1 da

(Johnston, Sh. 2002)

2 5 das post ovulacin ---- 10-25 ng/ml

(Linde-Forsberg et al)

*Siempre que en los frotices vaginales se obtengan Clulas

escamosas y superficiales - ESTRO

FROTICES VAGINALES

OBTENCIN DEL
FROTIS VAGINAL

Cambios en el grosor de la pared vaginal, citologa vaginal, y las

concentraciones plasmticas de estradiol durante el ciclo estrual de la perra

EVALUACIN DE SEMEN

Volumen
Color
Motilidad
Concentracin espermtica
Morfologa Presencia de eritrocitos,
leucocitos otras clulas en el eyaculado.

PRO ESTRO

ESTRO

FRACCIONES DEL EYACULADO

Volumen total

4-15 ml

Fracciones :

1) Pre eyaculado - Procedente de la prstata,

apariencia clara.
2) Fraccin espermtica - Contiene
espermatozoides, color blanquecino, opaco.
3) Fraccin prosttica - Color claro

Coleccin de 1ra y 2da fraccin en tubo

graduado estril. Evaluar motilidad
La segunda fraccin del eyaculado , se
completa en 1 a 2 minutos.
El volumen es de 1 a 3 ml.
La primera y tercera fraccin afectaran
negativamente a los . (England and Allen,1992; Rota et al.
1995)

Coleccin y Procesamiento
del semen
Semen fresco
Semen diluido refrigerado
Semen congelado

Semen fresco
1.-

Evaluacin anticipada del semen

2.-

Coleccin de semen
1ra y 2da fraccin
Evaluar motilidad

Semen fresco
3.-

Inseminacin de la hembra
Materiales

Jeringa de 5 20cc

Tubo conector
Catter
Nmero y frecuencia de IA
Realizar 2 IA, das 2 y 3 1 y 3
considerando el da 0 como el da
de la ovulacin

MATERIAL PARA IA CON SEMEN FRESCO

INSEMINACION
DE LA HEMBRA

Cateter Mavic para IA en caninos MINITUB

RAZAS

ml

Pequeas

12

Medianas

3 -4

Grandes

5-6

COLECCIN DE SEMEN

INSEMINACION
DE LA HEMBRA

VAGINA Y CERVIX EN DIFERENTES

FASES DEL CICLO ESTRUAL

ANESTRO

PROESTRO

INSEMINACION DE LA
HEMBRA

INSEMINACION DE LA
HEMBRA
Despus de la
Inseminacin
Mantener esta
posicin mnimo
10 minutos

Semen diluido refrigerado

Se recomienda la centrifugacin del semen para remover el lquido
prosttico.

El dilutor ayuda a proteger la membrana espermtica de los daos

causados por el cambio de temperatura y el transporte, brindando
sustrato energtico, esatbilizacin de pH y presin osmtica.
Los espermatozoides disminuyen su tasa metablica por lo que
aumenta su viabilidad.
Se agregan antibiticos: 1 mg de dihydrostreptomycina a 1000 IU
of benzyl penicillin, a la solucin final.
El semen diluido debe ser viable en promedio hasta una semana
despus de coleccin y preparacin.

Semen diluido refrigerado

Centrifugar el semen
Al mezclar el semen con el dilutor, asegurarse que
ambos viales estn en igual temperatura (shock trmico).

Volumen diluido final

No mayor de 1-3 ml in IA intrauterina
3-5 ml in en IA vaginal, aunque depende del
tamao de la perra.
Colocar el semen ya diluido en el refrigerador o cooler
por 30 a 60 min, dependiendo del volumen y tasa de
refrigeracin hasta que la temperatura de la muestra llegue
a+4C.

Semen diluido refrigerado

DILUTOR BUFFER TRIS CITRATO
Chilled semen extender:
Tris
cido Citric (mono hydrate)
Fructosa
Streptomicina
Aqua dest. to
Bensyl penicillinA

3.025 g
1.7 g
1.25 g
0.1 g
100 ml
0.06 g (in 0.3 ml dest H20)

Yema de huevo 20 % (v/v) , se agrega antes de usar

pH = 6.76
Osmolarity = 324 mOsm
La solucin sin yema de huevo se puede almacenar en aliquotas de 2 8 ml in el congelador
La dilucin a 20% (v/v) de yema d ehuevo (ejm. 0.5 ml a 2 ml Tris, o
2 ml to 8 ml Tris) se hace inmediatamnete antes de diluir el semen.

Semen diluido refrigerado

Minitube
CaniPRO

Semen congelado
El semen debe mezclarse con dilutores que protejan del shock
trmico, durante la congelacin y descongelacin, tenga la
misma osmolaridad y mantenga el pH, del plasma seminal, as
como proveer sustrato energtico para el espermatozoide.
Buffers TRIS
Crioprotectores DMSO, glicerol
Yema de huevo
Azcares
Detergentes SDS (Sodium dodecyl sulphate), Equex
Antibiticos
Comerciales : CLONE, MINITUB Cani PRO, Mtodo Upssala,
Mtodo Ghent

Semen
Semen
congelado
congelado

Las dosis de semen congelado en canino

estn en pajillas de 0.5 o 0.25 ml, o en
pellets.
Concentracin aproximada de 50 100
millones por pajilla de 0.5 ml, se usan 2 a
4 pajilla por IA.
Almacenamiento en tanques de nitrgeno
lquido.
Descongelamiento: 70 C x 8 seg
37C x 30 60 seg

Semen
Semen
congelado
congelado
The Uppsala Equex 2 Extender and Freezing Procedure:
(Pea and Linde-Forsberg 2000).
Uppsala Equex 2:
Extender 1
Extender 2
Descongelamiento
medium
Tris
3.025 g
idem
idem
Citric acid (monohydrate) 1.7 g
idem
idem
Fructose 1.25 g ditto ditto
Streptomycin
0.1 g
idem
idem
Aqua dest.
a 77 ml
a 72 ml
a 100 ml
Bensyl penicillin
0.06 g (en 0.3 ml dest H20) idem
idem
Glycerol
3 ml
7 ml
no
Equex *
none
1 ml
no
Egg yolk
20 ml
idem
no
pH = 6.72 6.74 6.76
Osmolaridad mOsm
865
1495
324

Inseminacin con Semen congelado

CATTER NORUEGO
Catter Noruego
Endoscopio fibro-ptico vaginal
rgido

Laparoscopa

Laparotoma

Inseminacin con Semen congelado

CATTER NORUEGO

Inseminacin con Semen congelado

CATTER NORUEGO

Inseminacin con Semen congelado

CATTER NORUEGO
El catter escandinavo consiste en un catter de acero
de 1 - 2 mm de grosor con una punta de 0.75 mm a 1
mm de dimetro, con 3 diferentes longitudes: 20, 30 o
40 cm.
El catter de tamao mediano es adecuado para la
mayora de las perras de pequeo y mediano tamao.
El equipo se puede obtener de Nowegian Fur Criadors
Associacin, P.O. Box 136, kern, N-0509 Oslo 5,
Noruega.

Inseminacin con Semen congelado

CATTER NORUEGO

Si el catter se introduce a ciegas con fuerza, podran ocurrir

perforaciones.
La IA intra-uterina con el catter escandinavo se realiza con la
perra parada sobre el piso sobre una mesa.

Inseminacin con Semen congelado

Semen congelado
endoscopio fibro-ptico rgido
Equipo y materiales
Endoscopio fibro-ptico rgido
Catter urinario de 6 - 8 Fr de dimetro

Indicaciones
inseminacin trans cervical intra-uterina
Sin sedacin

Inseminacin con Semen congelado

Semen congelado
endoscopio fibro-ptico rgido

Usando IA endoscpica con semen congeladodescongelado, tasas de paricin de 25% (3 de 12

perras) y 80% (32 de 40 perras). Una ventaja
significativa de esta tcnica es que permite la
visualizacin directa de la apertura cervical

Inseminacin con Semen congelado

endoscopio fibro-ptico rgido

Inseminacin con Semen congelado

endoscopio fibro-ptico rgido

TASA DE PREEZ EN RELACIN A TIPO DE SEMEN

Y VIA DE IA

TASA DE PREEZ %
Va de IA
Tipo de Semen
SEMEN FRESCO
SEMEN
REFRIGERADO
SEMEN CONGELADO

VAGINAL

INTRAUTERINA

47.7 (2012)

62(121)

45.4 ( 348)

65 (40)

36.7 (30)

55.5 (240)

Linde Forsberg, 2003

Inseminacin con Semen congelado

Nmero de repeticiones de IA

Semen congelado intrauterino , si se repite

aumenta tamao de camada

Con una sola inseminacin se debe inseminar

entre 2 a 5 das post ovulacin.

INSEMINACIN ARTIFICIAL
EN GATOS

COLECCIN DE SEMEN
Vagina Artificial

Axner, E. Y Linde Forsberg,

(2003) IVIS

Electroeyaculacin Bajo sedacin:

Medetomidina 80mg/Kg SC
Ketamina 5 mg/kg IM

EVALUACIN DE SEMEN
Parmetros Seminales del gato
Volumen
Concentracin
Motilidad
pH

0.034 0.04 ml ( rango: 0.01 0.12) ( Vag. Artif)

1730 millones/ ml
( Vag Artif.)
57 61 millones/eyaculado
56 84%
6.6 8.8

PROCESAMIENTO DEL SEMEN

Diluyente de lactosa yema de huevo para la
Criopreservacin de espermatozoides de gato. [8]
Lactosa

11 g

Glicerol

4 ml

Sulfato de estreptomicina

1000 mg/ml

Penicilina G

1000 IU/ml

Yema de huevo

20 ml

Agua destilada

para 100 ml
Platz, et al (1978)

INSEMINACIN ARTIFICIAL

Cateter de IA en gatas
Zambelli D, 2002

INSEMINACIN ARTIFICIAL
Determinacin de momento de estro de la gata
Frotices Vaginales Clulas escamosas

Nmero de espermatozoides por IA 5 50 millones

2 IA ( 5 mill. esperm)
1Ia (80 mill esperm)

2 das seguidos

75% concepcin VAGINAL

(Sojka, 1970)

77.8% concepcin VAGINAL

(Tsusui, et al2000)

MUCHAS GRACIAS POR

SU ATENCIN