Seminario:

1. Comente porque ocurre o no la hemlisis en cada uno de los tubos

estudiado?
Tubo

Solucin

Detergente triton x

Hemolisis
Si/No/NoP/
C
Si

Agua destilada

Si

Glucosa 0,05M

Si

Glucosa 0,15M

No C

Glucosa 0,30M

No C

NaCl 0,05M

Si

NaCl 0,15M

NoP

NaCl 0,30M

NoP

Motivo de hemolisis/crenacin

El detergente al tratarse de un compuesto apolar

tiene la capacidad de romper la bicapa lipdica al
separar las protenas de los fosfolipidos de los
eritrocitos, causando una rpida hemolisis.
El aadir agua destilada provoca que la
concentracin de iones sea mayor al interior de las
clulas, provocando el movimiento de agua hacia
dentro de ellas para equilibrar las concentraciones
hasta el punto de romper la membrana por un
exceso de volumen.
La concentracin de la glucosa en el interior de los
glbulos rojos contenidos en esta muestra de
sangre debi ser mayor, pues de esta forma el
agua se movi (no la glucosa pues esta no puede
atravesar la membrana sin la ayuda de un
transportador) hacia el interior de los eritrocitos
para equilibrar las concentraciones y provoc el
aumento del volumen de la clula hasta la ruptura
de la membrana
La concentracin de la glucosa al exterior de los
eritrocitos fue mayor, por lo que el agua contenida
en ellos tendi a salir para disminuir la
concentracin exterior causando la crenacin de
las clulas, las cuales con el tiempo decantaron
dentro del tubo
Al igual que el caso anterior ocurri la crenacin de
las clulas, aunque hubo una diferencia apreciable
en el resultado final en cuanto a la turbiedad de la
preparacin y la cantidad de clulas que
decantaron luego de pasados 15 minutos
La concentracin de iones sodio y cloro al interior
de los eritrocitos debi ser mayor para que al entrar
en contacto la sangre con esta disolucin, por
diferencias de concentracin el agua entrara a la
clula para equilibrar las concentraciones
provocando la ruptura de la membrana.
En esta preparacin no qued del todo claro que
fue lo que ocurri, se consideraron dos opciones:
una posible hemlisis parcial o bien que el soluto
aadido fuera de carcter isotnico con respecto a
las concentraciones de estos iones en la sangre.
Mismo resultado que el anterior: una hemlisis

Urea 0,05M

Si

10
11
12

Urea 0,15M
Urea 0,30M
Etanol 0,30M

Si
Si
Si

13

Glicerol 0,30M

NoP iso

14

Manitol 0,30M

No C hiper

15

NaCl 0,15M + Urea

0,15M

NoP iso

parcial o bien la generacin de un medio isotnico.

La urea es un compuesto capaz de transitar casi
libremente a travs de la membrana, a diferencia
de los otros antes utilizados, por lo que aparte del
movimiento de agua, tambin ocurre un movimiento
de soluto en estos casos experimentados. En los 3
casos se obtuvo resultados similares (con
diferencias de tiempo que tom en completar la
hemlisis), una preparacin en la cual se poda ver
claramente a travs de ella despus de un periodo
corto de tiempo, por lo que se asume una lisis
celular. Esta debi generarse luego de que, una
vez equilibradas las concentraciones de urea a
nivel intracelular y extracelular, el agua ingresara a
la clula por una concentracin final mayor en este
lado, provocando la lisis del eritrocito.
Para la preparacin con etanol se observa una
preparacin opaca en la que vagamente se ve a
travs de ella, por lo que se tratara de una
hemlisis parcial o bien que resultara ser una
solucin isotnica, no produciendo la hemlisis.
El glicerol al tratarse de una molcula polar no es
capaz de atravesar la membrana sin la ayuda de
una protena transportadora, por ende el agua se
mover por osmosis con el fin de equilibrar las
concentraciones, pero en este caso la preparacin
resultante parece tratarse de una solucin
isotnica, por lo que la concentracin de glicerol al
interior de las clulas debi ser similar a la
generada en el medio extracelular.
El manitol tambin es una molcula polar que no
atraviesa la membrana sin la ayuda de una
protena transportadora. En la preparacin se
observ que los eritrocitos sufrieron de crenacin,
por lo que se deduce que la concentracin de
manitol en el medio intracelular es menor al de la
solucin empleada o bien nulo.
En esta preparacin se observa que no hay una
hemlisis total, por ende podra tratarse de una
solucin isotnica. A diferencia del cloruro de sodio,
la urea puede atravesar ms fcilmente la
membrana celular, por lo que para lograr un
equilibrio esta podra entrar a la clula y el cloruro
de sodio mantenerse fuera. As la variacin del
volumen de agua no sera tan amplia evitando una
hemlisis o crenacin.
En esta preparacin era ms esperada una

crenacin, ya que el NaCl por su disociacin aporta

el doble equivalentes que la urea, generando una
concentracin de iones mayor en el medio
extracelular que la de soluto en el intracelular.

2.- Qu puede deducir de los resultados obtenidos respecto de la permeabilidad

de la membrana celular para cada uno de los compuestos usados?
Detergente Triton x: El detergente es capaz de degradar destruir la unin entre las
protenas y los fosfolpidos de la membrana celular, lo que causar una rpida lisis
del eritrocito por lo que no necesita ser permeable para la membrana.
Agua destilada: La membrana celular es muy permeable al agua gracias a la
presencia de las aquaporinas, por lo que al agregar agua pura esta tender a
ingresar a la clula por osmosis donde encontrara una mayor concentracin de
iones.
Glucosa: Esta molcula es de gran tamao y de carcter polar, por lo que su nica
va de ingreso a la clula ser a travs de protenas transportadoras las cuales no
permitirn el paso de esta, causando entonces que sea el agua la que se mueva
fuera o dentro de la clula segn corresponda a las diferentes concentraciones.
NaCl: Este compuesto inico en disolucin acuosa forma iones Na + y Cl- los cuales
debido a que se trata de molculas con carga, solo pueden atravesar la membrana
a travs de diferentes protenas transportadoras. La clula para mantener su buen
funcionamiento, al igual como con la glucosa, no permitir su entrada por lo que el
agua ser la que deba moverse para mantener las concentraciones de solutos
equilibradas.
Urea: Esta molcula tiene acceso a la clula por difusin simple por lo que tender
a ingresar con el fin de equilibrar las concentraciones y con ella tambin el agua
por osmosis.
Etanol y manitol: estas molculas, al ser polares, no pueden moverse libremente a
travs de la membrana (deben utilizar protenas transportadoras), causando que
sea el agua el que se mueva para equilibrar las concentraciones. En el caso del
etanol este result, segn lo que se observa en la preparacin, generar una
solucin isotnica, mientras que con el manitol fue observada la crenacin de los
eritrocitos.

NaCl + urea: los iones de sodio y cloro solo pueden ingresar a la clula por medio
de protenas transportadoras, mientras que la urea puede atravesar la membrana
libremente. Por esto podra formarse una especie de contrapeso o neutralizacin
de los cambios de concentracin al aumentar la de los iones en el medio
extracelular y la de la urea en el intracelular
3.- Qu conclusiones puede obtener respecto de los resultados dentro de cada
serie?
Serie A: en esta serie la nica solucin realizada fue la que contena el detergente
Triton x, este fue el compuesto hemoltico de ms rpida accin. Al no tener
conocimiento sobre la concentracin de este no se pueden hacer observaciones
respecto a ello. Sea cual sea su concentracin, el efecto que tuvo sobre los
eritrocitos en la muestra fue nocivo al destruir las uniones entre protenas y
fosfolpidos de la membrana plasmtica, provocando una lisis prcticamente
automtica.
Serie B: nuevamente se trata de solo una solucin dentro de esta serie: el agua
destilada. Esta al tratarse de agua pura sin iones, y puesto que el movimiento del
agua es relativamente rpido a travs de las aquaporinas en comparacin a las
otras sustancias que deben moverse a travs de protenas transportadoras,
provoc una rpida lisis de los eritrocitos al ingresar el agua

en grandes

cantidades a ellos con el fin de disminuir la concentracin de solutos en el medio

intracelular y llegar al equilibrio, causando un aumento de volumen celular que no
fue soportado por la membrana.
Serie C: en esta serie se encuentra a la glucosa en 3 concentraciones diferentes,
por lo que los resultados dependern de si estas son mayores iguales o menores
a las concentraciones de glucosa en el medio intracelular. As como ocurrir con
las dems series (series D y E con cloruro de sodio y urea respectivamente) en
que se aplica la misma solucin a diferentes concentraciones se tendr que: si la
concentracin del soluto en la solucin es menor al intracelular, provocara que se
produzca el movimiento de agua hacia el interior de la clula causando finalmente

una hemlisis por exceso de volumen de agua a nivel intracelular; si la

concentracin de soluto en la solucin es igual al intracelular, se creara una
solucin isotnica en la que no debiera observarse caractersticas de hemlisis ni
crenacin; o bien si la concentracin de soluto es mayor que la intracelular, el
agua por osmosis tender a salir de la clula para equilibrar las concentracin de
solutos causando la deshidratacin de la clula.
En las series D y E ocurren mecanismos similares, difiriendo en cuanto a las
concentraciones iniciales de los diferentes solutos a nivel intracelular y en los
tiempos utilizados en llegar un punto final de la reaccin, ya que en el caso de la
urea esto fue mucho ms rpido probablemente por su facilidad al momento de
atravesar la membrana en comparacin a las otras dos que deben utilizar
protenas transportadoras.
Serie F: en esta se tienen diferentes tipos de alcoholes a la misma concentracin
en la solucin, pero que a nivel intracelular no se tenan en iguales
concentraciones entre ellos, por lo que fue posible observar 2 casos: medio
isotnico en las preparaciones con etanol y glicerol, y medio hipertnico en la
preparacin con manitol. Al tratarse todos de molculas polares, solo poda haber
en gran medida movimiento de agua por osmosis.
Serie G: esta serie solo se trata de una preparacin pero que contiene dos solutos
diferentes: cloruro de sodio, el cual se disocia en iones los cuales para su ingreso
a la clula necesitan la ayuda de protenas transportadoras, y de urea la cual
puede atravesar sin mayor complejidad la membrana. Esta diferencia en su
transporte genera un equilibrio de concentraciones entre abundancia de iones en
el medio extracelular y de soluto (urea) en el intracelular, por lo que el movimiento
de agua por osmosis no fue tan considerable como para provocar algn dao a
nivel celular. En esta preparacin era ms esperada una crenacin, ya que el
NaCl por su disociacin aporta el doble equivalentes que la urea, generando una
concentracin de iones mayor en el medio extracelular que la de soluto en el
intracelular.
4.- Clasifique las soluciones de acuerdo a su osmolaridad y tonicidad.

Solucin
Detergente triton x

Osmolaridad

Tonicidad
Hipotnica

Hipo-osmtica
Agua destilada

Hipotnica
Hipo-osmtica

Glucosa 0,05M

Hipotnica
Hipo-osmtica

Glucosa 0,15M

Hipertnica
Hper-osmtica

Glucosa 0,30M

Hipertnica
Hper-osmtica

NaCl 0,05M

Hipotnica
Hipo-osmtica

NaCl 0,15M

Isotnica
Hper-osmtica

NaCl 0,30M

Isotnica
Hper-osmtica

Urea 0,05M

Hipotnica
Hipo-osmtica

Urea 0,15M

Hipotnica
Hipo-osmtica

Urea 0,30M

Hipotnica
Hipo-osmtica

Etanol 0,30M

Isotnica
Hipo-osmtica

Glicerol 0,30

Isotnica
Hper-osmtica

Manitol 0,30

Hipertnica
Hipo-osmtica

NaCl 0,15M + Urea 0,15M

Isotnica
Hper-osmtica

5.- Explique cual es la diferencia entre una solucin isotnica e iso-osmtica?

Todas las soluciones isotnicas son iso-osmticas?
Una solucin isotnica es aquella en la cual la concentracin del soluto en
cuestin es igual dentro y fuera de la clula o en dos compartimientos separados
por una membrana semipermeable; en cambio dos soluciones son iso-osmoticas
cuando tienen el mismo valor de osmolaridad pero no necesariamente ambas
sern isotnicas, pueden tener, por ejemplo, un valor x de osmolaridad y que a tal
valor una sea hipotnica mientras que la otra isotnica o hipertnica. Puesto que

la osmolaridad est dada por la concentracin de cierto soluto en el medio, no

necesariamente una solucin isotnica ser iso-osmtica con otra, pues las
concentraciones de solutos presentes en los diferentes lquidos del cuerpo
humano varan en sus concentraciones segn sean necesarios.
6.- Busque en al menos 3 textos diferentes la osmolaridad sangunea humana y
comprela con sus resultados. Si tiene la posibilidad o encuentra la osmolaridad
plasmtica de alguna otra especie, comprela con la humana.

Temas clave fisiologa (Costanzo) 4ta edicin: 303,7mOsm/L H 2O

Tratado de fisiologa mdica (Guyton y Hall) 12va edicin: 282mOsm/L H 2O
Fisiologa (Costanzo) 5ta edicin: 290-300mOsm/L H 2O
Osmolaridad en el laboratorio: 300mOsm/L H2O

7.- Qu conclusiones puede observar al comparar los resultados obtenidos en la

serie G respecto a las soluciones individuales?
Al comparar las soluciones que contenan NaCl 0,15M, urea 0,15M y NaCl 0,15M
+ urea 0,15M se tienen, en el mismo orden, soluciones isotnica, hipotnica e
isotnica nuevamente. Esto probablemente fue debido a que, a pesar de que la
urea puede moverse libremente a travs de la membrana y tender a entrar hasta
que se llegue a un equilibrio de su concentracin entre los medios intracelular y
extracelular, los iones provenientes de la ionizacin del cloruro de sodio harn el
contrapeso de concentracin de soluto por el lado extracelular, provocando que el
movimiento neto de agua por osmosis sea muy bajo y se mantenga el volumen
celular constante o al menos no haya un aumento tan alto como para romper la
membrana.
9.- Qu diferencia existe entre el paso de sustancias a travs de la membrana
plasmtica y a travs de un epitelio?, Explique cul es la diferencia entre el
transporte trans-epitelial y para-epitelial?
La diferencia est dada por los dos tipos de transporte:
Transporte trans-epitelial: transporte de sustancias a travs de la membrana
plasmtica, donde solutos y agua se transportan cruzando la membrana apical y
basolateral.

Transporte para-epitelial: transporte que solo se da en los epitelios debido a la

gran cercana intercelular, donde los solutos pasan entre las clulas y no a travs
de ellas.
10.- Cuales son los factores que determinan la permeabilidad de un soluto?
Que una molcula atraviese o no la membrana depender de tres factores: el
tamao, solubilidad y su carga.
Las molculas complejas y de gran tamao requieren de ayuda para atravesar la
membrana (protenas transportadoras), como es el caso de la glucosa. En caso
contrario, molculas pequeas como ciertos gases, pasan con mayor facilidad.
Para el movimiento de agua se tienen las acuaporinas (protenas transmembrana),
por donde pasa para mantener el equilibrio osmtico. Las molculas liposolubles
(hidrofbicas) podrn atravesar la membrana fcilmente. Finalmente, aquellas
molculas no neutras necesitarn de algn transporte especial para atravesar la
membrana, por ejemplo la bomba Na+/K+.