SINOPSIS La replicacin del DNA es semiconservadora, lo que signica que durante la divisin

celular cada una de las clulas hijas recibe una mitad del dplex original. Este mecanismo de
replicacin lo sugirieron por vez primera Watson y Crick como parte de su modelo de la
estructura del DNA. Ellos sealaron que la replicacin ocurre por la separacin gradual de las
cadenas debido al rompimiento de los puentes de hidrgeno, de modo que cada cadena puede
servir como plantilla para la formacin de una cadena complementaria. Pronto se conrm este
modelo en las clulas bacterianas y eucariotas al demostrar que las clulas de una generacin
que se transeren a medios marcados con radiactividad producen clulas hijas cuyo DNA posee
una cadena marcada y una cadena no marcada (pg. 534). El mecanismo de replicacin se
entiende mejor en clulas bacterianas. La replicacin se inicia en un solo origen sobre el
cromosoma bacteriano circular y procede hacia afuera en ambas direcciones como un par de
horquillas de replicacin. Las horquillas de replicacin son sitios en los que se desenrolla la doble
hlice y se incorporan nucletidos en ambas cadenas recin sintetizadas (pg. 537). Una familia
de DNA polimerasas cataliza la sntesis del DNA. La primera de estas enzimas que se caracteriz
fue la DNA polimerasa I de E. coli. Para catalizar la reaccin de polimerizacin, la enzima requiere
cuatro trifosfatos de desoxirribonuclesido, un plantilla de la cadena que debe copiar y un
iniciador que contenga un OH 3' libre al cual se puedan aadir nucletidos. El iniciador es
necesario porque la enzima no puede empezar la formacin de una cadena de DNA. Ms bien
slo es capaz de aadir nucletidos en el extremo 3' terminal hidroxilo de una cadena existente.
Otra caracterstica inesperada de la DNA polimerasa I es que slo puede polimerizar una cadena
en direccin 5' 3'. Se presupone que las dos cadenas nuevas se sintetizaran en direcciones
opuestas por polimerasas que se mueven en direcciones opuestas a lo largo de las dos cadenas
progenitoras plantilla. Este proceso se explic al demostrar que las dos cadenas se sintetizan de
manera muy diferente (pg. 538). Una de las cadenas recin sintetizadas (la cadena adelantada)
crece en direccin de la horquilla de replicacin y se sintetiza de manera continua. La otra
cadena recin sintetizada (la cadena retrasada) crece y se aleja de la horquilla y se sintetiza de
manera discontinua. En clulas bacterianas, la cadena retrasada se sintetiza como fragmentos
de unos 1 000 nucletidos de largo, denominados fragmentos de Okazaki, que se unen por
enlaces covalentes entre s mediante una DNA ligasa. En cambio, la cadena adelantada se
sintetiza como cadena simple continua. Ni la cadena continua ni los fragmentos de Okazaki
pueden iniciarse por accin de la DNA polimerasa; en vez de ello, empiezan como un iniciador de
RNA corto sintetizado por un tipo de RNA polimerasa llamado primasa. Despus de ensamblar el
iniciador de RNA, la DNA polimerasa contina la sntesis de la cadena o el fragmento como DNA.
A continuacin el RNA se degrada y el espacio lo ocupa DNA (pg. 540). Los sucesos observados
en la horquilla de replicacin exigen una variedad de diferentes tipos de protenas que tienen
funciones especializadas. Entre tales protenas guran las siguientes: una DNA girasa, que es un
tipo de topoisomerasa II necesaria para liberar la tensin que se genera como resultado del
desenrollamiento del DNA; una DNA helicasa que desenrolla el DNA y separa las cadenas;
protenas que se unen de modo selectivo al DNA monocatenario y evitan que se vuelvan a
reconectar; una primasa, que sintetiza los iniciadores de RNA; y una DNA ligasa que sella los
fragmentos de la cadena retrasada para formar un polinucletido continuo. La DNA polimerasa III
es la enzima que sintetiza el DNA de manera primaria y aade nucletidos a cada iniciador de
RNA, en tanto que la DNA polimerasa I se encarga de eliminar los iniciadores de RNA y
reemplazarlos con DNA. Se cree que dos molculas de DNA polimerasa III se desplazan juntas en
forma de un complejo a lo largo de sus respectivas cadenas plantilla. Esto se efecta conforme la
cadena retrasada se pliega hacia atrs sobre s misma (pg. 541). Las DNA polimerasas poseen
sitios catalticos separados para la polimerizacin y degradacin de las cadenas de cido
nucleico. La mayor parte de las DNA polimerasas tiene actividades de exonucleasa 5' 3' y 3'
5'. La primera acta para degradar los iniciadores de RNA de cada fragmento de Okazaki y la
segunda remueve los nucletidos inapropiados despus de su incorporacin errnea, lo cual
contribuye a la delidad de la replicacin. Se estima que alrededor de uno de cada 109
nucletidos se incorpora de manera incorrecta durante la replicacin en E. coli (pg. 544). La

replicacin en clulas eucariotas sigue un mecanismo similar y emplea protenas semejantes a

las utilizadas por los procariotas. Todas las DNA polimerasas que participan en la replicacin
alargan las cadenas de DNA en direccin 5' 3'. Ninguna de stas inicia la sntesis de cadenas
sin un iniciador. La mayor parte posee una actividad de exonucleasa 3' 5', lo que garantiza que
la replicacin ocurra con gran delidad. A diferencia de los procariotas, la replicacin en los
eucariotas se inicia de manera simultnea en muchos sitios a lo largo del cromosoma, con las
horquillas de replicacin hacia adelante en ambas direcciones de cada sitio de inicio. Estudios de
levaduras indican que los orgenes de replicacin contienen sitios de unin especca para un
complejo multiprotenico esencial llamado ORC. Los sucesos en el origen aseguran que la
replicacin de cada segmento de DNA ocurra una vez y slo una vez por cada ciclo celular (pg.
546). La replicacin en clulas eucariotas se relaciona de forma estrecha con estructuras
nucleares. Hay evidencia que indica que buena parte de la maquinaria requerida para la
replicacin se vincula con la matriz nuclear. Adems, las horquillas de replicacin que son activas
en cualquier momento se hallan dentro de unos 50 a 250 sitios conocidos como lugares de
replicacin. El DNA recin sintetizado se relaciona en poco tiempo con nucleosomas. Tetrmeros
(H3H4)2 presentes antes de la replicacin permanecen intactos y pasan a las estructuras dplex
hijas, mientras que los dmeros H2A/H2B estn separados el uno del otro y se unen de modo
aleatorio a los tetrmeros (H3H4)2 nuevos y viejos en las dplex hijas (pg. 550). El DNA est
expuesto a muchas inuencias ambientales nocivas, entre ellas radiacin ionizante, sustancias
qumicas comunes y radiacin ultravioleta. Las clulas poseen diferentes sistemas para
reconocer y reparar los daos resultantes. Se estima que menos de una base se modica en mil
salvamentos estructurados por los sistemas de reparacin de la clula. Se conocen cuatro tipos
principales de sistemas para la reparacin del DNA. Los sistemas de reparacin de la escisin de
nucletido (NER) funcionan al remover una pequea seccin de la cadena de DNA que contiene
la lesin, como un dmero de pirimidina. Durante la NER, las cadenas de DNA que alojan la lesin
se separan por accin de una helicasa; una endonucleasa efecta un par de incisiones, la
abertura se llena mediante la accin de una DNA polimerasa y una DNA ligasa sella la cadena. La
NER repara de forma preferencial las cadenas plantilla de genes que estn bajo transcripcin
activa. La reparacin de la escisin de bases elimina diferentes nucletidos alterados que
producen distorsiones menores en la hlice del DNA. Las clulas poseen una variedad de
glucosilasas que reconocen y remueven diferentes tipos de bases alteradas. Una vez que las
bases se remueven la porcin restante del nucletido se desplaza por medio de una
endonucleasa, el espacio se elimina por medio de la accin de una fosfodiesterasa y se llena y
sella mediante una polimerasa y una ligasa. La replicacin de los pares de bases de
apareamiento incorrecto es un mecanismo que se encarga de eliminar los nucletidos
incorrectos incorporados durante la replicacin que escapan a la correccin de pruebas
efectuadas por la actividad de la polimerasa. En bacterias, la cadena sintetizada de nueva
cuenta se selecciona para la reparacin en virtud de la falta de grupos metilo si se compara con
la cadena parental. La rotura de doble cadena se repara en la forma de protenas que se unen a
ambos extremos rotos y se conectan otra vez en sus extremos (pg. 552). Adems de las DNA
polimerasas comunes que intervienen en la replicacin del DNA y la reparacin, las clulas
tambin poseen un ordenamiento de DNA polimerasas que facilita la replicacin en sitios de
lesiones del DNA o alineamientos defectuosos. Estas polimerasas, que actan en la sntesis
translesin, no tienen la procesividad y la capacidad de lectura y correccin y muestran ms
tendencia al error que las polimerasas tpicas (pg. 557).