4/2/14

Antes de Watson y Crick

Replicacin del DNA

Los genes factores hereditarios de acuerdo a

Mendel estn asociados a caractersticas
especficas, pero se desconoca su naturaleza
fsica.
La hiptesis de un gen-una protena postulaba
que los genes controlan la estructura de las
protenas
Los genes se encuentran en los cromosomas
Varios experimentos iniciados en 1920
indicaban que el DNA era el material gentico y
no otro (como carbohidratos, protenas)
Referencia: Captulo 7. DNA: Estructura y replicacin. Gentica. Griffiths et al
9na edicin. 2008 McGraw Hill.

ADN o PROTENAS?

Colonias Rugosas

en busca del material hereditario

Colonias Lisas

Transformacin de
Streptococcus pneumoniae

Que caractersticas debera presentar

el material hereditario?

Clulas L
vivas

v Perpetuarse (replicarse)
v Manifestarse (expresarse)
v Cambiar (mutar)
v Combinarse (recombinarse)
4/2/14

1928 - Frederick
Griffith

1865

bacteria

Clulas R
vivas
cpsula

Clulas L
muertas por
calor

Clulas L muertas por

calor junto a celulas R
vivas

Inyeccin

Resultados
3

Clulas L vivas en
muestras de sangre de los
ratones muertos

4/2/14

Cul de los componentes qumicos es el agente transformador?

4/2/14

1865

1944 - Avery, MacLeod & McCarty

El DNA purificado como un factor de

transformacin
El ADN de las clulas lisas
transformaba a las rugosas

4/2/14

Oswald Avery

Colin MacLeod

Maclyn McCarty

5
Sin embargo los cientficos eran reacios a aceptar el DNA como material gentico

1865

1952 - Hershey &

Chase

1865

El DNA viral (no las protenas)

programa las clulas

1952 - Hershey &

Chase
Protenas
radioactivas
(35S)

Se centrifuga y se mide
la radioactividad en el
pellet y el supernadante

fago T2
Bacteria

La
radioactividad
est en el
supernadante
pero no en el
pellet.

bacteriofagos
4/2/14

Martha Chase & Alfred Hershey

El fago radioactivo
infecta las clulas
bacteriales
4/2/14

Se separan las
cubiertas proteicas
de la superficie
bacterial

4/2/14

1865

1952 - Hershey &

Chase
DNA radioactivo (32P)

LA ESTRUCTURA DEL ADN

Radioactividad
en el pellet, pero
no en el
supernadante

Por lo tanto, es el DNA viral, y no las protenas, lo que

programa a la clula para que haga copias del virus
4/2/14

Dos nucletidos con bases de purina y dos nucleotidos con base de

pirimidina son los bloques fundamentales de construccin del DNA

Estructura de los cuatro nucleotidos del DNA

Qu otra informacin estaba disponible para Watson y Crick?

4/2/14

1865

10

1947 - Erwin Chargaff

Las bases de DNA siguen

ciertas reglas
La composicin es especie
especfica
A = T, C = G en todas las especies

4/2/14

12

4/2/14

1865

1953 - Franklin & Wilkins

1865

Descripcin de la estructura tridimensional

del DNA

La naturaleza helicoidal del DNA

Rosalind Franklin

1953 - Watson & Crick

Film
fotogrfico

Fuente de rayos X
DNA cristalizado

4/2/14

1865

Maurice Wilkins

Francis Crick & James Watson

13

1953 - Watson & Crick

1865

Que dedujeron de:

14

1953 - Watson & Crick

Que dedujeron ellos mismos?

Datos de R. Franklin
hlice doble
ancho uniforme de 2 nm
bases separadas por 0.34 nm
Chargaff
la adenina se aparea con la
timina
la citocina se aparea con la
guanina
4/2/14

4/2/14

Las bases estn hacia adentro,

y los fosfatos y las azucares
hacia afuera
Enlaces de hidrogeno
Hebras antiparalelas
Sugirieron un modo semiconservativo de replicacin
15

4/2/14

16

4/2/14

Deducciones del trabajo de

Watson y Crick

La replicacin del DNA es semiconservativa

La estructura de doble helice sugiri cmo

el material gentico puede determinar la
estructura de las protenas
La secuencia de bases del DNA
posiblemente especificaba la secuencia
de aminoacidos (un cdigo gentico)
El apareamiento especfico de bases
sugiere un posible mecanismo de copia
(replicacin semiconservativa)
4/2/14

Tres modelos alternativos para la

replicacin del DNA postulados antes del
trabajo de Meselson-Stahl

18

Experimento MeselsonStahl, 1958. Mostr que

la replicacin del DNA
es semiconservativa

De estos tres modelos, el modelo de WatsonCrick para la estructura del DNA produce el
primer modelo de replicacin: semiconservativo.
Las hebras en dorado son las nuevas hebras
sintetizadas

4/2/14

Estructura del ADN

Las cadenas corren en
sentido opuesto, los
extremos 5 y 3 se deben
a la orientacin de los
atomos de carbono en los
anillos de azcar. Cada
pareja de base tiene una
pirimidina (timina o
citosina) y una (purina
adenina o guanina).

El ADN es una doble helice

compuesta de dos cadenas de
nucletidos mantenidas juntas por
compementariedad de bases: A
con T y G con C
El modelo semiconservativo de
replicacin del DNA propuesto por
Watson y Crick est basado en la
especificidad de los enlaces de
hidrgenos de los pares de bases.
Las nuevas cadenas polimerisadas,
en color dorado, tienen secuencias
de bases que son complementarias
con sus cadenas molde

Horquilla de Replicacin
(Otra prediccin del modelo de Watson y Crick)

Punto de crecimiento en cual esta ocurriendo la

replicacin

John Cairns, 1963. Al microscopio electrnico,

la horquilla de replicacin es vista como un ojo
(Estructura )
Replicn: Unidad de DNA donde un acto
individual de replicacin ocurre. Donde la hlice
se desdobla para producir dos cadenas sencillas
que sirven de molde
Definido por elementos de control: Origen y
Termino

Figure 8-17. Left: Autoradiograph of a bacterial chromosome after one replication in

tritiated thymidine. According to the semiconservative model of replication, one of the two
strands should be radioactive. Right: Interpretation of the autoradiograph. The light blue
line represents the tritiated strand

En 1963 John Cairns permiti la replicacin de DNA en clulas de

bacteria con la incorporacin de timidina, el nucleotido de timina
marcado con istopo radioactivo de hidrgeno llamado tritio. En teora
cada molcula hija deba tener una hebra caliente (radioactiva) y una fra
no radioactiva. Despus lisaba las bacterias y haca microscopa
electrnica (autoradigrafa). Despus de un ciclo de replicacin observ
un anillo lo que sugiri que el cromosoma bacteriano era circular.

4/2/14

Replicones bacteriales:
Unicos, se replican una vez/divisin celular
Informacin gentica adicional: Plsmidos, DNA circular
autnomo que constituye un replicn

Puede replicarse junto con el cromosoma bacteriano

(Control de copia simple)

O se replica bajo otro mecanismo de control

Control multicopia: en nmero mayor que el
cromosoma
En el genoma eucaritico hay un gran nmero de replicones
Cairns tambin observ que en el segundo ciclo de replicacin, la horquilla de
replicacin poda contar con ms granos (en el caso de que la hebra parental
fuera la tritiada) sugiriendo sntesis de dos hebras radioactivas y
ms apoyo para el modelo semiconservativo.

La horquilla de replicacin se
mueve secuencialmente en el
DNA a partir del origen, la
replicacin puede ser
unidireccional o bidireccional

Todos son activados una sola vez durante el ciclo celular

Replicones mitocondriales y del cloroplasto son regulados
como los plsmidos que existen en copias mltiples

DNA polimerasas catalizan la reaccin de elongacin de

las cadenasde DNA
En 1959 Arthur Kornberg purific la
DNA polimerasa I

Microscopia electrnica ayuda

a determinar si hay una o dos
horquillas de replicacin:
U nidireccional solo un
termino se mueve, el otro
representa el origen
B idireccional, ambos
terminos se mueven

La energa para la reaccin de

polimerizacin proviene de la
ruptura de enlaces de fosfato de
alta energa de los nucleotidos
trifosfato

4/2/14

Se han reportado 5 DNA polimerasas en la

bacteria Escherichia coli
Caractersticas comunes de
todas las DNA polimerasas
es que ellas no pueden
iniciar la sntesis de una
cadena de DNA a partir de
nucletidos libres. Necesita
una hebra molde de DNA
que en la clula esta
disponible despus de que
la doble hlice de DNA ha
sido abierta y cada una de
las cadenas se encuentra
expuesta.

Caracters9cas principales de las ADN polimerasas de

E. coli

ADN Pol I ADN Pol II

ADN Pol III

Masa molecular (dalton)

109000

Estructura

Cons6tucin

Monmero Monmero

900000
Dmero
asimtrico

Ac6vidad /
Funcin

Nmero de polimerasas / clula

400

Polimerasa 5' 3' / Elongacin

SI
Exonucleasa 3' 5' / Correccin
(remueve bases incorrectas)
SI
Exonucleasa 5' 3' / Reparacin
(degrada molculas hebras de DNA o
RNA que no se encuentran apareadas) SI

90000

Desconocido 10 a 20
SI

SI

SI

SI

NO

NO

Pol I:

DNA polimerasa I
Tres tipos de actividad
1. Polimerasa: cataliza el crecimiento de la
cadena en sentido 5 a 3
2. Una actividad exonucleasa, que remueve
bases malincorporadas
3. Una actividad exonucleasa 5 a 3 que
degrada moleculas de una cadena (DNA y
RNA)

codificada por polA.

103 kD
Reparacin de DNA
Rol subsidiario en la replicacin semiconservativa
Dos subunidades:
Fragmento Klenow de 68kD
Usada in vitro
2/3 en C-termino contiene la polimerasa
N- termino 3-5 exonucleasa (Proofreading)
Fragmento de 35 kD
5-3 exonucleasa
Nick translation: degrada cadenas dobles de DNA
La replicacin del DNA es altamente exacta: Fidelidad de la replicacin. 1/1010
error es insertado. Pol I y Pol III
DNA polimerasa I es lenta y se disocia despus de haber incorporado 20 -50
nucleotidos
La DNA polimerasa III cataliza la sntesis de DNA en la horquilla de replicacin

4/2/14

Replicacin del DNA en la

horquilla de replicacin

Cadena
retrasada:
sntesis ocurre
en direccin
opuesta a
cadena lder.

Replicacin del DNA

Debido a que las DNA polimerasas siempre agregan
nucleotidos en el extremo 3, solo una de las dos hebras
antiparalelas puede servir como molde para replicacin
en el sentido de la horquilla de replicacin
La sntesis que se mueve hacia afuera de la horquilla de
replicacin no puede seguir por largo tiempo. Debe
hacerse en fragmentos pequeos y moverse
nuevamente al extremo 5 donde la horquilla ha
expuesto nueva cadena molde

Cadena lder: sintesis en direccin de la horquilla de replicacin

procede sin interrupcin.

Replicacin del DNA

Las DNA polimerasas pueden extender,
pero no pueden iniciar una cadena
La sntesis de la cadena lder y la cadena
retrazada o fragmentos de Okazaki debe
ser iniciada por un cebador (cadena corta
de nucleotidos)
Estos cebadores son sintetizados por un
juego de protenas llamadas primosoma
cuyo componente central es la enzima
llamada primasa, un tipo de RNA
polimerasa.

Estos fragmentos cortos de 1000 a 2000 nucleotidos

nuevos sintetizados se llaman fragmentos de Okazaki

Replicacin del DNA

La primasa sintetiza un fragmento corto
de~ 8-12 nucleotidos de RNA
complemementario a una regin
especfica del cromosoma
En la cadena lider solo un cebador es
necesario, en la cadena retrazada, cada
cada fragmento de Okazaki necesita su
propio cebador
La cadena de RNA que compone el
cebador es extendidad como cadena de
DNA por la DNA polimerasa III

4/2/14

Sntesis de la cadena
retrazada

La sntesis de DNA es semidiscontinua y primada por RNA

(cebador de RNA)
Estructura antiparalela,
Movimiento de la horquilla de replicacin
5-3 y 3-5
DNA polimerasa solo sintetizan 5-3
Solucin, para el problema de la polaridad en la cadena 3-5
Sntesis de fragmentos pequeos en la direccin
contraria al movimiento de la horquilla de replicacin
en la direccin usual 5-3
Cadena lider 5-3: sntesis continua
Cadena retardada 3-5: sntesis discontinua
DNA polimerasas no pueden iniciar la sntesis de novo
Requiere de primers o cebadores que proveen el trmino
3OH
Cadena lider un slo evento
Cadena retardada: Eventos multiples
Primasa codificada por el locus dnaG

DNA ligasa conecta fragmentos adyacentes

despus de que la DNA polimerasa I remueve RNA
y rellena con DNA en el extremo 5 de fragmentos
adyacentes

La precisin o fidelidad de la
replicacin del DNA es muy alta
Menos de un error por cada 1010
nucleotidos incorporados
Esto se debe en parte a que tanto la DNA
pol I y DNA pol II poseen actividad 3-5
exonucleasa que funciona como prueba
de lectura removiendo bases que no
hacen apareamiento correcto que han
sido insertadas

60 kD
RNA pol que sintetiza fragmentos cortos de
RNA para utilizarlos como primers: 8-12 bp
Forma parte del Primosoma

Figure 8-27. Initiation of DNA synthesis by an RNA primer.

La adicin de bases incorrectas se

debe al proceso de tautomerizacin
Cada una de las bases en el DNA puede aparearse de
varias formas llamadas tautmeros, los cuales son
ismeros que varian en la posicin y enlaces de sus
tomos.
Las formas keto estn normalmente presentes en el
DNA pero en raras circunstancias pueden cambiar a
formas imino o enol.
Las formas imino o keto pueden aparearse formando
una pareja no correcta
Por ejemplo cuando una C cambia a su forma imino, la
polimerasa agrega una A en vez de una G. Esto es
usualmente detectado y corregido por pol I y II

10

4/2/14

La adicin de bases incorrectas se

debe al proceso de tautomerizacin
Esta adicin de
bases incorrectas
es corregida
mediante Prueba
de lectura por DNA
pol I y II las cuales
remueven bases
mal apareadas
usando su
actividad
exonucleasa 3 a 5

La replicacin de DNA es precisa y

rpida
Cmo se puede mantener velocidad y
exactitud durante la replicacin?
Mediante coordinacin de la replicacin por el
replisoma.
El replisoma es el complejo de nucleoprotenas
del que la DNA polimerasa forma parte y que
coordina las actividades de replicacin en la
horquilla de replicacin
El tiempo necesitado por E. coli para replicar su
cromosoma puede ser tan corto como 40 minutos
Por consiguiente su genoma de aproximadamente 5
millones de pares de bases debe ser copiado a una
velocidad de 1000 nucleotidos por segundo

Puntos importantes en la
replicacin
La replicacin ocurre en la horquilla de
replicacin donde la dobe helice se desdobla
La replicacin ocurre de manera continua en la
direccin en que se abre la horquilla de
replicacin en la cadena lder
El DNA es sintetizado en fragmentos cortos en
direccin hacia afuera de la horquilla de
replicacin, en la cadena retrazada
La DNA polimerasa requiere un cebador o
cadena corta de nucleotidos pegados a la
cadena molde, para comenzar sntesis

El replisoma garantiza velocidad y

exactitud durante la replicacin
La mayora de las funciones
mayores (replicacin,
transcripcin y traduccin) de
las clulas son llevadas a cabo
por grandes complejos de
mltiples subunidades
El ncleo cataltico de la DNA
pol III es parte de un complejo
mucho ms grande llamado
holoenzima poll III que
consiste de dos ncleos
catalticos y muchas protenas
accesorias

11

4/2/14

Replisoma

Uno de los ncleos

catalticos maneja la
sntesis de la cadena lder y
otro la cadena retrazada.

Una protena accesoria

llamada abrazadera rodea
al DNA como un donut y
mantiene la poll III pegada a
la molcula de DNA. Esto
ayuda a que la pol III se
mantenga en la horquilla en
movimiento, a que no se
desprenda y a que agregue
decenas o miles de
nucletidos

Protenas que tienen que ver con la

replicacin pero no forman parte del
replisoma
Protenas iniciadoras: se unen a los orgenes de
replicacin para causar una desnaturalizacin parcial. En
procariotas se llaman DnaA y HU.
Topoisomerasas: deshacen los superenrrollamientos
para facilitar la entrada a la maquinaria replicativa.
ADN.Pol-I: aunque tiene capacidad para sintetizar el
ADN, esta funcin la realiza preferentemente la ADN.PolIII, quedando restringida la funcin de la ADN.Pol-I a
eliminar y rellenar el espacio de los primers de ARN y
reparar errores.
ADN Ligasa: une los fragmentos en la cadena retrazada.

Protenas que forman parte del replisoma

Helicasas: avanzan por cada horquilla de
replicacin (hay dos por cada burbuja de
replicacin, formada a partir de cada origen de
replicacin, y avanzan en sentidos opuestos)
desnaturalizando el AND mediante ruptura de
puentes de hidrgeno.
Primosoma (conjunto de Primasa, que es una
ARN Polimerasa, y otras protenas accesorias):
sintetiza el ARN iniciador, cebador o primer.
ADN.Pol-III: sintetiza el ADN con su funcin
polimerasa 5'3'.

El replisoma y protenas
accesorias llevan a cabo
los diferentes pasos de la
replicacin en la horquilla
de replicacin.
Topisomerasa previene
sobre- enrollamiento de la
doble helice y helicasa abre
la doble helice de DNA
Protenas de unin a
cadenas simples de DNA
se unen a las cadenas
abiertas y previenen que se
apareen.

12

4/2/14

Mecanismo de la Replicacin del DNA

DNA polimerasa III acta en la horquilla de replicacin

DNA girasa, una topoisomerasa, elimina las torsiones extra durante la

replicacin. A) Extra enrollados o superenrollados se acumulan adelante
de la horquilla de replicacin a medida que las hebras de DNA se separan
para la replicacin. B) Una topoisomerasa como la DNA girasa remueve
esas regiones cortando hebras de DNA y permitiendo que rote y desdoble
o desenrolle la doble hlice.

El ensamblaje del replisoma es un

proceso ordenado que comienza en sitios
especficos del cromosoma llamados
sitios de origen y ocurre en ciertos
tiempos de la vida de la clula
En E. coli comienza en un sitio llamado
OriC y continua en ambas direcciones
hasta un punto donde se encuentran
ambas horquillas de replicacin

Figure 8-20. DNA replication fork.

Compleja
E. coli: Mecanismo mejor estudiado

Iniciacin de la replicacin en
procariotas
El primer paso es la unin de una protena
llamada DnaA a una secuancia especfica de 13
pares de bases llalada caja DnaA la cual se
repite cinco veces en OriC
En respuesta a la unin de DnaA, el origen se
desdobla en un cluster de nucletidos de A y T.
Con DnaA alrededor del origen, dos helicasas
(las protenas DnaB) ahora se unen y se deslizan
en una direccin 5 a 3 para comenzar a abrir la
doble hlice (como abriendo una cremallera) en
en la horquilla de replicacin.
Cuando se abre entonces llegan los
componentes del replisoma Primasa y
holoenzima DNA pol III a la horquilla de
replicacin mediante interacciones protenaprotena y la sntesis de DNA comienza.

13

4/2/14

Resumen de replisoma
El replisoma es ana mquina molecular
que lleva a cabo la sntesis del DNA.
El replisoma incluye dos unidades de DNA
polimerasa que llevan a cabo la sntesis
de cada nueva hebra y coordina la
actividad de protenas accesorias
requeridas para primar, desenrollar y
estabilizar las hebras de DNA

Replicacin en organismos eucariotas

La replicacin del DNA en ambos, procariotas y
eucariotas usa un mecanismo semiconservativo
y emplea sntesis de cadena adelantada y
retrazada.
Por esta razn los componentes del replisoma
de eucariotas y procariotas son similares, pero a
medida que los organismos crecen en
complejidad, tambien crece el nmero de
componentes del replisoma

El replisoma eucariota
La replicacin es mucho ms compleja en eucariotas los
cuales tienen genomas ms complejos con histonas
Hasta ahora se conocen 13 componentes del replisoma
de E. coli y por lo menos 27 en los replisomas de
levaduras y mamferos
Los cromosomas eucariotas existen en el ncleo como
cromatina. La unidad bsica de cromatina es el
nucleosoma que est compuesto de DNA envuelto en
protenas llamadas histonas
El replisoma eucariota lleva a cabo todas las funciones
del replisoma procariota y adicionalmente debe desensamblar y re-ensamblar los complejos de DNA
protenas llamados nucleosomas

En eucariotas, la protena CAF-1 (chromatin assembly

factor 1) lleva histonas a la horquilla de replicacin
donde son ensambladas en nucleosomas. CAF1 y las
histonas que lleva se unen a PCNA (proliferating cell
nuclear antigen), una versin eucariota de la protena
procariota abrazadera ( clamp)

14

4/2/14

Orgenes de replicacin en
eucariotas
E. coli completa su replicacin en 20 40 minutos.
En eucariotas, el tiempo de replicacin vara de 1.4
horas (levaduras) a 24 horas en clulas cultivadas de
animales. Pero puede llegar a 100-200 horas en algunas
clulas eucariotas
Los orgenes de replicacin en levaduras son muy
parecidos a los de E. coli. Estos sitios son de 100-200
bp y tienen secuencias conservadas que incluyen
regiones ricas en AT
Hay muchos orgenes de replicacin en los cromosomas
eucariticos, aprox. 400 dispersos en los 16
cromosomas de la levadura y miles en los 23
cromosomas de humanos

En levaduras el ensamblaje del replisoma est

ligado al ciclo celular.
La sntesis de DNA se lleva a cabo durante la
fase S (de Sntesis) del ciclo celular eucaritico.
En levaduras, tres protenas son requeridas para
iniciar el ensamblaje del replisoma: ORC (origin
recognition complex) primero se une a
secuencias de origen tal como lo hace DnaA (en
E. coli). Esto hace que Cdc6 y Cdt1 se acerquen
al sitio de origen y atraigan a la helicasa llamada
complejo MCM y otros componentes del
replisoma.
En levaduras, Cdc6 y Cdt1 se sintetizan tarde en
la mitosis y fase Gap1 y son destriuidas por
protelisis despues que la fase S se inicia.
De esta manera el replisoma de levadura solo
puede ser ensamblado antes de la fase S.
Cuando la replicacin comienza, nuevos
replisomas no se pueden ensamblar porque
Cdc6 y Cdt1 han sido degradadas

La replicacin procede en ambas direcciones desde un

nico sitio de origen en el cromosoma circular procariota
mientras que la replicacin procede en ambas direcciones
desde cientos a miles de origenes de replicacin en cada
uno de los cromosomas lineares eucariticos

Este ejemplo de levadura

muestra la iniciacin de la
sntesis de DNA en un
origen de replicacin en
eucariota. Como la
iniciacin procariotas
protenas del ORC se
unen al sitio de origen,
separan las dos hebras y
atraen componentes del
replisoma a la horquilla de
replicacin. La replicacin
en este caso est ligada al
ciclo celular mediante
disponibilidad de las
protenas Cdc6 y Cdt1

15

4/2/14

Solucin a la replicacin en el extremo

de cromosomas lineales

La molcula de DNA en eucariotas se encuentra

en forma lineal y no circular como en procariotas
En eucariotas, la replicacin procede en ambas
direcciones lo que cual replica la mayora del DNA. Sin
embargo qu pasa en los extremos de molculas
lineares de DNA? En los telmeros?
La sntesis continua de DNA en la hebra lder puede
proceder hasta el final de la molecula que se est
replicando. Sin embargo la cadena retrazada requiere
cebadores adelante del proceso. Cuando el ltimo
cebador se remueve van a haber secuencias por delante
que no se pueden replicar.
Como consecuencia una hebra simple (no duplex) se
mantiene en el extremo de la molculas hija de DNA y
en cada ciclo de replicacin habra menos DNA de esa
regin

La replicacin de los
fragmentos de Okazaki en la
hebra retrazada comienza
con la insercin de un
cebador.
Destino de la cadena de
abajo en la burbuija de
replicacin: Cuando el
cebador para el ltimo
fragmento de Okazaki se
remueve no hay forma de
llenar el hueco dejado, por
replicacin convencional. Un
cromosoma ms corto es el
resultado de esto

Adicin de mltiples copias de una

secuencia simple no codificante a los
extremos de los cromosomas
Entonces cada vez que los cromosomas
se duplican, son acortados y solo esas
regiones cortas no codificantes se
pierden. Las regiones que se pierden son
agregadas nuevamente a los extremos de
los cromosomas.

La telomerasa lleva una molcula corta de RNA (letras rojas) que actan como
molde para la adicin de una secuencia de DNA complementaria la cual es
agregada al extremo extendido 3 (letras azules). Para agregar otra repeticin, la
telomerasa se trasloca al final de la repeticin y agrega la nueva. El extremo 3
extendido entonces puede servir como molde para replicacin convencional de
DNA.

16

4/2/14

El descubrimiento de que los extremos de los

cromosomas son hechos de secuencias repetidas en
grupo fue hecho en 1978 por Elizabeth Blackburn y Joe
Gall, quienes estaban estudiando el DNA del
macroncleo inusual del ciliado unicelular ciliate
Tetrahymena.
Ahora sabemos que virtualmente todos los eucariotas
tienen repeticiones en tandem en los extremos de los
cromosomas sin embarhgo las secuencias no son
exactamente las mismas. Los cromosomas de humanos
tienen 10 a 15 kb de repeticiones en tandem
deTTAGGG.

Sorprendentemente y aunque muchas clulas geminales tienen

bastante telomerasa, las clulas somticas producen poco o no
telomerasa. Por esta razn los cromosomas de clulas somticas
en proliferacin se hacen progresivamente cortos con cada ciclo de
divisin celular hasta cuando la cllula para de dividirse y entra en
una fase de senescencia.
Esta observacin llev a muchos cientficos a sospechar que haba
una conexin entre acortamiento de telmeros y edad. Genetistas
estudiando enfermedades humanas que llevan a un fenotipo
prematuro de viejoha sido recientemente descubierto que apoya
esa evidencia.
Gente con el sndrome de Werner experimenta un temprano
desarrollo de caracteres de envejecimiento como arrugamiento de
la piel, cataratas, osteoporosis, presencia de canas y enfermedades
cardiovasculares.
Estudios genticos y bioqumicos han encontrado que personas con
sndrome de Werner tienen telomeros ms cortos que las personas
normales debido a una mutacin en el gen WRN, que codifica para
una helicasa que es parte de la estructura de capa de los telmeros

Los telomeros son estructuras especializadas al

final de los cromosomas que contienen
repeticiones en tandem de secuencias cortas de
DNA que se agregan al extremo 3 por la enzima
telomerasa.
Los telomeros estabilizan los cromosomas y
previenen la perdida de informacin genetica
despus de cada ronda de replicacin y por
asociarse con protenas que forman una capa
que esconde los extremos de los cromosomas
de la maquinaria reparadora del DNA.

Una mujer consndrome de Werner a los 15 y 48 aos

17