NUTRICIN MICROBIANA

Para obtener energa y elaborar nuevos componentes celulares, los organismos tienen que disponer de materias
primas, o nutrientes. Los nutrientes son sustancias que se emplean en la biosntesis y produccin de energa y,
en consecuencia, son necesarios para el crecimiento microbiano.
5.1 Requerimientos nutritivos esenciales
El anlisis de la composicin de la clula microbiana revela que ms del 95 % del peso seco de la clula est
constituido por unos pocos elementos: carbono, oxgeno, hidrgeno, nitrgeno, azufre, fsforo, potasio, calcio,
magnesio y hierro.
Estos se denominan macroelementos o micronutrientes, porque los microorganismos los captan en
cantidades relativamente grandes.
Los seis primeros (C, O, H, N, S y P) son componentes de los hidratos de carbono, lpidos, protenas y cidos
nuclecos.
Los cuatro macroelementos restantes se encuentran en la clula en forma de cationes y desempean diversos
papeles. Por ejemplo,
el potasio (K+) es necesario para la actividad de varias enzimas, incluyendo algunas que participan en la
sntesis de protenas.
El calcio (Ca2+) contribuye, entre otras funciones, a la termorresistencia de las endosporas.
El magnesio (Mg2+) acta como cofactor de muchas enzimas, forma complejos con el ATP, y estabiliza los
ribosomas y las membranas celulares.
El hierro (Fe2+ y Fe+) forma parte de los citocromos y es cofactor de enzimas y de protenas transportadoras de
electrones.
Todos los organismos, incluidos los microorganismos, requieren diversos micronutrientes o elementos traza:
manganeso, cinc, cobalto, molibdeno, nquel y cobre.
Sin embargo, las clulas precisan de unas cantidades tan pequeas, que contaminantes presentes en el agua,
recipientes y en los componentes habituales del medio son a menudo suficientes para el crecimiento.
Por ello, es muy difcil demostrar la necesidad de un micronutriente. En la naturaleza, los micronutrientes son
alicuotas y probablemente, por lo general, no limiten el crecimiento.
Estos micronutrientes son normalmente parte de enzimas y cofactores, y facilitan la catlisis de reacciones y el
mantenimiento de la estructura de protenas. Por ejemplo,
el cinc (Zn2+) se encuentra en el centro activo de algunas enzimas, pero tambin est involucrado en la
asociacin de las subunidades reguladoras y catalticas de la aspartato carbamoiltransferasa en E. coli.
El manganeso (Mn2+) facilita a muchas enzimas la transferencia cataltica de los grupos fosfato.
El molibdeno (Mo2+) es necesario para fijar nitrgeno; y
El cobalto (Co2+) es un componente de la vitamina Bt2. Enzimas y transportadores de electrones.
Adems de los macroelementos o micronutrientes, los microorganismos pueden tener necesidades
especiales que reflejen la naturaleza especial de su morfologa o de su habitat natural.
Las diatomeas necesitan cido silcico (H4SiO4) para construir sus hermosas paredes celulares de slice [(SiO)].

Bacterias que crecen en lagos salinos y ocanos dependen de la presencia de concentraciones elevadas del ion
sodio (Na+).
Por ltimo, debe recalcarse que los microorganismos requieren una mezcla compensada de nutrientes. Si un
nutriente esencial no se encuentra disponible, el crecimiento microbiano se ver limitado, independientemente de
la concentracin de otros nutrientes.
5.2 Requerimientos de carbono, hidrgeno y oxgeno
Las necesidades de carbono, hidrgeno y oxgeno suelen cubrirse al mismo tiempo.
El carbono es necesario para construir el esqueleto de todas las molculas orgnicas y, adems, las molculas
que sirven como fuente de carbono aportan tambin, normalmente, tomos de oxgeno e hidrgeno.

Es decir, los compuestos de carbono constituyen la fuente de los tres elementos.

Por otra parte, ya que estos compuestos orgnicos se encuentran casi siempre reducidos y pueden donar esos
electrones a otras molculas, pueden servir como fuentes de energa.
As, cuanto ms reducidos estn, mayor contenido energtico tendrn (p. ej., los lpidos tienen un mayor
contenido energtico que los carbohidratos).
Esto es as porque, como veremos ms adelante, la transferencia de electrones libera energa cuando los
electrones se mueven de dadores reducidos (con un potencial de reduccin ms negativo) a aceptores oxidados
(ms electropositivos).
Una fuente de carbono muy importante que no aporta hidrgeno o energa es el dixido de carbono (CO 2). Esto
es as porque el CO 2 est oxidado y carece de hidrgeno. Probablemente, todos los organismos pueden fijar CO 2
esto es, reducirlo y transformarlo en molculas orgnicas. Sin embargo, por definicin, slo los organismos
auttrofos pueden usar CO2 como fuente nica o principal de carbono.
Numerosos microorganismos son autotrofos, y la mayora de stos son fotosintticos, y utilizan la luz como
fuente de energa. Algunos autotrofos oxidan molculas inorgnicas y obtenien energa al ceder esos electrones.
Fijacin fotosinttica del dixido de carbono.
La reduccin del CO2 es un proceso que consume gran cantidad de energa. Por ello, muchos microorganismos
no pueden usar CO2 como nica fuente de carbono, sino que dependen de la presencia de molculas complejas,
ms reducidas, como fuente de carbono.
Los organismos que emplean molculas orgnicas preformadas y reducidas como fuentes de carbono son
heterotrofos (estas molculas preformadas proceden generalmente de otros organismos). Como se indic
anteriormente, la mayora de los heterotrofos usan nutrientes orgnicos como fuente de carbono y de energa.
Por ejemplo, la va glucoltica produce energa en forma de ATP y NADH, y tambin compuestos carbonados
reducidos para utilizarlos en la biosntesis. Va glucoltica.
La caracterstica nutricional ms notable de los microorganismos es su extraordinaria flexibilidad en relacin con
las fuentes de carbono.
Experimentos de laboratorio indican que no existe ninguna molcula orgnica natural que no pueda ser utilizada
por algn microorganismo.
Los actinomicetos pueden degradar alcohol amlico, parafina e incluso caucho. Algunas bacterias pueden
emplear casi cualquier sustancia como fuente de carbono; por ejemplo,
Burkholderia cepacia puede utilizar ms de 100 compuestos diferentes de carbono.
Bacterias omnvoras, otras son extremadamente exigentes y catabolizan pocos compuestos de carbono. As,
las bacterias metilotrofas metabolizan slo metano, metanol, monxido de carbono, cido frmico y similares
molculas de un tomo de carbono.
Leptospira utiliza solamente cidos grasos de cadena larga como fuente principal de carbono y energa.
Parece ser que en los entornos naturales poblaciones muy complejas de microorganismos son capaces incluso
de metabolizar sustancias sintetizadas por el hombre, como por ejemplo los pesticidas.
Molculas en principio indigestibles son oxidadas y degradadas en presencia de un nutriente que favorece el
crecimiento y que es metabolizado al mismo tiempo, proceso denominado cometabolismo. Los productos
resultantes de este proceso pueden ser utilizados como nutrientes por otros microorganismos. Biodegradacin y
microorganismos.
5.3 Tipos nutricionales entre los microorganismos
Adems de los requerimientos de carbono, hidrgeno y oxgeno, todos los organismos necesitan fuentes de
energa y electrones para su crecimiento.
Los microorganismos pueden agruparse en clases nutricionales basadas en cmo satisfacen dichos
requerimientos. (Tabla 5.1).
Tabla 5.1 Fuentes de carbono, energa y electrones
Fuentes de carbono
Autotrofos
CO2 como nica o principal fuente de carbono
Heterotrofos
Molculas orgnicas preformadas reducidas, procedentes de otros
organismos
Fuentes de energa
Fototrofos
Luz
Quimiotrofos
Oxidacin de compuestos orgnicos o inorgnicos
Fuentes de electrones
Litotrofos
Molculas inorgnicas reducidas
Organotrofos
Molculas orgnicas
Ya hemos visto que los microorganismos pueden clasificarse en hetertrofos o autotrofos con respecto a su
fuente preferente de carbono.
Por otra parte, existen nicamente dos fuentes de energa disponibles para los organismos:

1) la energa lumnica para la fotosntesis, y

2) la energa derivada de la oxidacin de molculas orgnicas o inorgnicas.
Los fototrofos emplean luz como fuente de energa;
Los quimiotrofos obtienen la energa a partir de la oxidacin de compuestos qumicos (orgnicos o inorgnicos).
Tambin, los microorganismos tienen solamente dos fuentes de tomos de hidrgeno, o electrones.
Los litotrofos (esto es, que comen piedras) utilizan sustancias inorgnicas reducidas como fuente de
electrones.
Los organotrofos obtienen electrones o hidrgeno de compuestos orgnicos.
Fase lumnica de la fotosntesis; Oxidacin de molculas orgnicas e inorgnicas.
A pesar de la enorme diversidad metablica que presentan los microorganismos, la mayora puede incluirse en
una de los cuatro tipos nutricionales, tomando como base sus fuentes primarias de energa, hidrgeno o
electrones, o ambos, y carbono (Tabla 5.2). La inmensa mayora de los microorganismos estudiados hasta la
fecha son auttrofos fotolitotrficos o heterotrofos quimioorganotrficos.
Los autotrofos fotolitotrficos (denominados a menudo fotoautotrofos o fotolitoautotrofos) utilizan energa
lumnica y CO2 como fuente de carbono.
Las algas y las cianobacterias emplean agua como dador de electrones, liberando el oxgeno.
Las bacterias verdes y prpuras del azufre no pueden oxidar agua, pero captan electrones de dadores
inorgnicos, como hidrgeno, sulfuro de hidrgeno y azufre elemental.
Los
heterotrofos
quimioorganotrficos
(denominados
a
menudo
quimioheterotrofos,
quimioorganoheterotrofos o, incluso, simplemente heterotrofos) emplean compuestos orgnicos como fuentes de
energa, hidrgeno, electrones y carbono para realizar la biosntesis. Con frecuencia, un mismo nutriente
orgnico satisface todas estas necesidades.
Es interesante destacar que prcticamente todos los microorganismos patgenos son quimioheterotrofos.
Las otras dos clases comprenden pocos microorganismos, pero son a menudo muy importantes desde el punto
de vista ecolgico. Algunas bacterias prpuras y verdes son fotosintticas y utilizan materia orgnica como dador
de electrones y fuente de carbono.
Estos organismos hetertrofos fotoorganotrfcos (fotoorganoheterotrofos) habitan comnmente lagos y
arroyos contaminados. Algunas de estas bacterias pueden crecer tambin como fotoautotrofos, teniendo como
dador de electrones al hidrgeno molecular.
Los miembros del cuarto grupo, los autotrofos quimiolitotrficos (quimiolitoautotrofos) oxidan compuestos
inorgnicos reducidos, como molculas de hierro, nitrgeno o azufre para liberar energa y electrones para la
biosntesis. El dixido de carbono es la fuente de carbono. Unos pocos quimiolitotrofos pueden obtener el
carbono de fuentes orgnicas y, por ello, son heterotrofos.
Los quimiolitotrofos contribuyen en gran medida a las transformaciones qumicas de los elementos (p. ej., la
conversin de amonio en nitrato, o de azufre en sulfato) que se producen continuamente en el ecosistema.
Bacterias fotosintticas y quimiolitotrofas .
Aunque una especie particular puede pertenecer solamente a uno de los cuatro tipos nutricionales mencionados,
algunas muestran una gran flexibilidad metablica y modifican sus modelos metablicos para adaptarse a los
cambios ambientales. Por ejemplo, muchas bacterias prpuras no sulfreas se comportan como hetertrofas
fotoorganotrofas en ausencia de oxgeno, pero oxidan molculas orgnicas y funcionan quimiotrficamente en
presencia de niveles atmosfricos de oxgeno. Incluso, cuando hay poco oxgeno, la fotosntesis y el
metabolismo oxidativo pueden funcionar simultneamente.
Otro ejemplo lo proporcionan bacterias como Beggiatoa que pueden obtener energa de fuentes inorgnicas,
utilizando una fuente orgnica de carbono (aunque a veces puede ser el propio CO 2). A estos microorganismos
se les denomina habitualmente mixotrlcos, ya que combinan procesos metablicos quimiolitoautotrficos y
heterotrficos.
Esta clase de flexibilidad parece compleja y confusa, pero aporta al organismo en cuestin una gran ventaja
adaptativa cuando las condiciones ambientales cambian con frecuencia.
Tabla 5.2 Principales tipos nutricionales entre los microorganismos
Principales
tipos Fuentes de energa, hidrgeno
nutricionales''
/electrones \ carbono
Energa lumnica
Fotolitotrofa autotrfica
Dador
inorgnico
de
(fotolitoautotrofa)
hidrgeno/electrones (H/e~)
CO2 como fuente de carbono
Energa lumnica Dador orgnico
Fotoorganotrofa heterotrfica
de H/e~ Fuente
(fotoorganoheterotrofa)
orgnica de carbono (puede
emplearse tambin CO2)
Fuente
de
energa
qumica
Quimiolitotrofa autotrfica
(inorgnica)
(quimiolitoautotrofa)
Dador inorgnico de H/e~ CO2
como fuente de carbono
Quimioorganotrofa heterotrfica
(quimioorganoheterotrofa)

Fuente
de
(orgnica)

energa

qumica

Microorganismos
representativos
Algas
Bacterias prpuras y verdes del
azufre
Cianobacterias
Bacterias prpuras no sulfreas
Bacterias verdes no sulfreas
Bacterias oxidantes del azufre
Bacterias del hidrgeno
Bacterias nitrificantes
Bacterias oxidantes del hierro
Protozoos
Hongos

Dador orgnico de H/e~ Fuente

orgnica de carbono

La mayora de las bacterias no

fotosintticas
(incluyendo la mayor parte de los
microorganismos patgenos)
a
Se han aislado bacterias que pertenecen a otras categoras nutricionales. Los tipos descritos se basan en
las fuentes de energa, electrones y carbono. Entre parntesis se indica el nombre abreviado.
5.4 Necesidades de nitrgeno, fsforo y azufre
Para crecer, un microorganismo debe ser capaz de incorporar grandes cantidades de nitrgeno, fsforo y
azufre. Aunque estos elementos pueden adquirirse a partir de los mismos nutrientes que aportan carbono, los
microorganismos suelen emplear tambin fuentes inorgnicas. Mecanismos bioqumicos para incorporar
nitrgeno, fsforo y azufre.
El nitrgeno es necesario para sintetizar aminocidos, purinas, pirimidinas, algunos hidratos de carbono y
lpidos, cofactores de enzimas y otras sustancias.
Muchos microorganismos pueden emplear el nitrgeno en aminocidos y, a menudo, incorporar directamente el
amonio por medio de enzimas, como glutamato deshidrogenasa o glutamina sintetasa y glutamato sintetasa.
La mayora de los microorganismos fototrofos y muchos no fotosintticos reducen nitrato a amonio,
incorporndolo mediante la reduccin asimilatoria de nitrato. Numerosas bacterias (p. ej., muchas cianobacterias
y la bacteria simbitica Rhizobium) pueden reducir y asimilar el nitrgeno atmosfrico mediante el sistema de la
nitrogenasa .
El fsforo est presente en los cidos nucleicos, fosfolpidos, nucletidos como ATP, varios cofactores, algunas
protenas y otros componentes celulares.
Casi todos los microorganismos usan fosfato inorgnico como fuente de fsforo y lo incorporan directamente.
Niveles bajos de fosfato limitan el crecimiento microbiano en numerosos entornos acuticos. La captacin de
fsforo por E. coli ha sido muy estudiada. Esta bacteria puede utilizar tanto fsforo orgnico como inorgnico.
El azufre es necesario para la sntesis de sustancias como los aminocidos cistena y metionina, algunos
hidratos de carbono, biotina y tiamina. La mayora de los microorganismos utilizan sulfato como fuente de azufre
y lo reducen mediante la reduccin asimilatoria de sulfato; unos pocos precisan de una forma reducida de azufre,
como cistena.
5.5 Factores de crecimiento
Los microorganismos carecen de una o ms enzimas esenciales. Por ello, no pueden elaborar todos los
constituyentes indispensables, sino que deben obtenerlos, o a sus precursores, del ambiente.
Los compuestos orgnicos que son necesarios porque son componentes celulares esenciales, o sus
precursores, y no pueden sintetizarse por el organismo, se denominan factores de crecimiento. Existen tres
clases principales de factores de crecimiento:
1) Los aminocidos se necesitan para la sntesis de protenas, y
2) Las purinas y pirimidinas, para la sntesis de cidos nucleicos.
3) Las vitaminas son molculas orgnicas pequeas que normalmente forman la totalidad o parte de los
cofactores enzimticos y slo se requieren cantidades pequeas para el crecimiento.
Las funciones de algunas vitaminas seleccionadas y ejemplos de microorganismos que las precisan se exponen
en la Tabla 5.3.
La observacin de que numerosos microorganismos pueden sintetizar grandes cantidades de vitaminas ha
permitido su empleo en la industria. Diversas vitaminas hidroflicas o hidrofbicas se producen parcial o
totalmente en grandes incubadores industriales.
Tabla 5.3 Funciones de algunas vitaminas comunes en los microorganismos
Ejemplos de microorganismos que
Vitamina
Funciones
requieren vitaminas"
Carboxilacin
(fijacin
de
CO2) Leuconostoc mesenteroides (B)
Metabolismo
Biotina
Saccharomyces cerevisiae (H)
de compuestos monocarbonados
Ochmmonas malhamensis (A)
Acanthamoeba castellana (P)
Especies de Lactobacillus (B) Euglena
Reagrupamientos moleculares
gracilis (A)
Metabolismo de compuestos
Diatomeas y otras muchas
Cianocobalamina
monocarbonados:
transporta
grupos algas (A)
metilo
Acanthamoeba castellana (P)
Enterococcus faecalis (B)
(B12)
Metabolismo
de
compuestos Tetrahymena pyriformis (P)
monocarbonados
cido flico

Transferencia de grupos acilo

cido lipoico

Lactobacillus casei (B)

Especies de Tetrahymena (P)

Precursor de la coenzima A: transporta

grupos
acilo (oxidacin del piruvato, metabolismo
de los cidos grasos)

Proteus morganii (B)

Especies de Hanseniaspora (H)
Especies de Paramecium (P)

cido pantotnico

Especies de Lactobacillus (B)

Tetrahymena pyriformis (P)
Brucella abortas,
Niacina
Precursor de NAD y NADP: transporta
Haemophilus influenzae (B)
electrones y tomos de hidrgeno
(cido nicotnico)
Blastocladia pringsheim (H) Crithidia
fasciculata (P)
Caulobacter vibrioides (B)
Riboflavina (B2)
Precursor de FAD y FMN: transporta Especies de Dictyostelium (H)
electrones o tomos de hidrgeno
Tetrahymena pyriformis (P)
Phycomyces
Transferencia
de
grupos
aldehido Bacillus anthracis(H)(B) Ochromonas
Tiamina (B,)
(decarboxilacin del piruvato, oxidacin ot- blakesleeanus
malhamensis (A) Colpidium campylum
ceto acida
(P)
Los microorganismos representativos son miembros de los siguientes grupos: bacterias (B), hongos
(H), algas (A) y protozoos (P).
Piridoxina (Be)

Metabolismo de los aminocidos (p. ej.,

transaminacin)

5.6 Captacin celular de nutrientes

El primer paso en la utilizacin de un nutriente consiste en su captacin por la clula. Los mecanismos de
captacin deben ser especficos esto es, hay que tomar las sustancias necesarias y no otras. No es til para
una clula captar una sustancia que no puede utilizar. Como los microorganismos viven a menudo en habitat
pobres en nutrientes, deben ser capaces de transportarlos en contra de un gradiente de concentracin, desde
soluciones diluidas hasta el interior de la clula. Finalmente, las molculas de nutrientes tienen que atravesar la
membrana plasmtica selectivamente permeable, que no permitir el paso libre a la mayora de las sustancias.
Considerando la gran variedad de nutrientes existentes y la complejidad del proceso de nutricin celular, no
resulta sorprendente que los microorganismos utilicen varios mecanismos de transporte diferentes. Los ms
importantes son la difusin facilitada, el transporte activo y la translocacin de grupo. Se cree que los
microorganismos eucariotas no utilizan la translocacin de grupo, sino que captan los nutrientes por endocitosis
(microorganismos eucariotas).

Difusin facilitada
Algunas sustancias, como el glicerol, pueden atravesar la membrana plasmtica por difusin pasiva.
La difusin pasiva, denominada a menudo simplemente difusin, es el proceso por el cual las molculas se
desplazan desde una regin de concentracin elevada a otra con menor concentracin, debido a una agitacin
trmica aleatoria. El nivel de difusin pasiva depende de la diferencia de gradiente de concentracin entre el
exterior de la clula y su interior (Figura 5.1).
Es necesario un gradiente de concentracin bastante elevado para que se realice una captacin de nutrientes
adecuada por difusin pasiva (esto es, la concentracin externa del nutriente debe ser alta), disminuyendo el
nivel de captacin a medida que se adquiere ms nutriente, salvo que ste se utilice inmediatamente. Molculas
muy pequeas como H2O, O2 y CO2 atraviesan a menudo las membranas por difusin pasiva. Grandes
molculas, iones y sustancia polares no atraviesan las membranas por difusin pasiva.

Figura 5.1 Difusin pasiva y facilitada. El nivel de difusin depende de la diferencia de gradiente de
concentracin del soluto.
Obsrvese que cuando est funcionando un transportador de difusin facilitada, se produce un efecto de
saturacin o meseta por encima de un valor especfico de gradiente. Dicho efecto de saturacin se observa
siempre que una protena transportadora medie en el proceso.

Figura 5.2 Modelo de difusin facilitada. El transportador de membrana puede cambiar su conformacin
despus de unirse a un soluto, liberndolo posteriormente al interior de la clula. Luego, recupera su
conformacin original, orientado hacia el exterior, quedando listo para captar otra molcula de soluto. Como no
hay aporte de energa, las molculas continuarn entrando en la clula mientras que su concentracin sea
superior a la del exterior.
El nivel de difusin a travs de las membranas selectivamente permeables aumenta considerablemente cuando
intervienen protenas transportadoras, denominadas permeasas, que estn inmersas en la membrana
plasmtica.
Como el transportador facilita el proceso de difusin, ste se denomina difusin facilitada. La velocidad o tasa
efectora en la difusin facilitada tambin aumenta con el gradiente, pero lo hace mucho ms rpidamente que en
la difusin pasiva, y a concentraciones inferiores de la molcula que difunde (Figura 5.1).
Obsrvese que el nivel de difusin alcanza una meseta por encima de un valor de gradiente especfico, debido a
la saturacin del transportador esto es, la protena transportadora se une y traslada tantas molculas de soluto
como sea posible. La curva resultante es similar a una curva enzima-sustrato y diferente de la respuesta lineal
observada en la difusin pasiva.
Las protenas transportadoras permeasas se parecen tambin a las enzimas en su especificidad por la
sustancia que transportan; cada una es selectiva de una sustancia y slo transportar solutos muy similares.
Aunque en este proceso participa una protena transportadora, se trata de una autntica difusin. El movimiento
de las molculas no necesita un aporte adicional de energa, est dirigido por un gradiente de concentracin en
toda la membrana. Si desaparece el gradiente de concentracin, el movimiento neto hacia el interior se detiene.
El gradiente puede ser mantenido mediante la transformacin del nutriente transportado en otro compuesto, o
bien, en el caso de eucariotas, transportndolo a otro compartimiento intracelular.
Parece que el complejo de protena transportadora cruza toda la membrana (Figura 5.2).
Una vez que la molcula de soluto se une por el exterior, el complejo transportador puede cambiar su
conformacin y liberar la molcula en el interior de la clula. A continuacin, volver a adquirir su forma original,
quedando listo para captar otra molcula. El efecto neto es que una molcula no liposoluble puede penetrar en la
clula debido a su gradiente de concentracin. Recurdese que este mecanismo es dependiente de gradientes
de concentracin y, por tanto, reversible. Si la concentracin del soluto es superior dentro de la clula, se
desplazar hacia el exterior. Como la clula metaboliza los nutrientes entrantes, est favorecida la entrada a la
clula.
La difusin facilitada no parece que sea importante en los procariotas, ya que la concentracin de nutrientes
normalmente es ms baja fuera de la clula. El glicerol se transporta por difusin facilitada en E. coli, Salmonella
typhimurium,
Pseudomonas, Bacillus y otras bacterias. Este proceso es mucho ms destacado en las clulas eucariotas, que
lo utilizan para transportar diversos azcares y aminocidos.
Transporte activo
Los mecanismos de difusin facilitada no son siempre adecuados y la clula debe utilizar otros mtodos. Los dos
procesos de transporte ms importantes para estas situaciones son el transporte activo y la translocacin de
grupo.
El transporte activo permite el transporte de molculas de soluto hacia concentraciones ms elevadas, o en
contra de un gradiente de concentracin, utilizando un aporte de energa metablica. Como el transporte activo
comprende la actividad de un transportador proteico, se parece en algunos aspectos a la difusin facilitada. Las
protenas transportadoras o permeasas se unen a determinados solutos con una gran especificidad por las
molculas que transportan. En ambos sistemas, difusin facilitada y transporte activo, molculas de soluto
similares pueden competir por la misma protena transportadora.
El transporte activo se caracteriza tambin por el efecto de saturacin del transportador en concentraciones de
soluto elevadas (Figura 5.1). Sin embargo, el transporte activo se diferencia de la difusin facilitada por el uso de
energa metablica y su capacidad de concentrar sustancias. Los inhibidores metablicos que bloquean la
produccin de energa inhibirn el transporte activo, pero no afectarn a la difusin facilitada (al menos, por un
perodo corto de tiempo).

En bacterias Gram negativas, los solutos deben atravesar antes la membrana externa, requirindose otros
sistemas de transporte activo.
Translocacin de grupo
En el transporte activo, las molculas de soluto se desplazan a travs de una membrana sin modificarse. Muchos
procariotas captan tambin molculas mediante translocacin de grupo, proceso por el cual una molcula es
transportada al interior celular despus de alterarse qumicamente. El sistema de translocacin de grupo que
mejor se conoce es el dependiente de fosfoenolpiruvato: sistema fosfotransferasa de azcares (PTS, sugar
phosphotransferase system). Transporta diversos azcares al interior de las clulas procariotas, fosforilndolos
mediante fosfoenolpiruvato (PEP) como dador de fosfato.
PEP + azcar (exterior) > piruvato + azcar-P (interior) El PTS es bastante complejo.
Captacin de hierro
Casi todos los microorganismos necesitan hierro para vivir; est presente en citocromos y muchas enzimas. La
captacin de hierro es difcil debido a la extrema insolubilidad del ion frrico (Fe3+) y de sus derivados,
quedando poco hierro libre disponible para su transporte. Muchas bacterias y hongos han superado esta
dificultad gracias a la secrecin de siderforos [Griego, transportadores de hierro]. Los siderforos son
molculas de bajo peso molecular capaces de acomplejar hierro frrico y aportarlo a la clula. Estas molculas
transportadoras de hierro son normalmente hidroxamatos o fenolatos-catecolatos.
Despus de que el hierro ha entrado en la clula, se reduce a la forma ferrosa (Fe +). El hierro es tan
fundamental para los microorganismos que stos pueden utilizar ms de una va de captacin de hierro para
asegurar un aporte adecuado.
CRECIMIENTO MICROBIANO
Conceptos
1. El crecimiento de un microorganismo se define como el aumento de sus componentes celulares, que puede
tener como resultado un incremento de su tamao o del nmero de su poblacin, o de ambos.
2. Cuando los microorganismos crecen en un sistema cerrado, el crecimiento de la poblacin permanece en
fase exponencial durante tan slo unas pocas generaciones, pasando a una fase estacionaria debido a
factores como la limitacin de nutrientes y la acumulacin de residuos. En un sistema abierto, donde se
renuevan continuamente los nutrientes y se eliminan los residuos, la fase exponencial puede mantenerse
durante perodos largos.
3. Se pueden emplear diversas tcnicas para estudiar el crecimiento microbiano, midiendo los cambios
observados en el nmero total de clulas, la poblacin de microorganismos viables o la masa celular.
4. La disponibilidad de agua, el pH, la temperatura, la concentracin de oxgeno, la presin atmosfrica, la
radiacin y muchos otros factores ambientales influyen sobre el crecimiento microbiano. Sin embargo,
muchos microorganismos y, en particular, las bacterias, han conseguido adaptarse y desarrollarse en
condiciones ambientales extremas que destruiran a la mayora de los organismos superiores.
5. En el entorno natural, a menudo el crecimiento se ve severamente limitado por los nutrientes disponibles y
otros muchos factores ambientales.
6. Las bacterias se pueden comunicar entre s y conducirse de una forma cooperativa mediado por seales
dependientes de la densidad de poblacin.
El crecimiento puede definirse como un incremento en los constituyentes celulares; este crecimiento ocasiona
un aumento del nmero de clulas en el caso de los microorganismos que se multiplican por procesos como
gemacin y fisin binaria.
Las bacterias se reproducen por fisin binaria, esto quiere decir que las clulas van aumentando en longitud,
hasta dos veces la inicial y, al final, se dividen en dos. Se duplica el material gentico, se inicia la citocinesis
(divisin del citoplasma) y la escisin de la membrana y la pared celular, stas crecen hacia el interior y acaban
dividiendo a la clula en dos. Cuando la nueva pared celular no se divide, o cuando lo hace incompletamente, se
forman cadenas de bacterias. Algunas especies de bacterias se reproducen con rapidez y la replicacin en
condiciones ptimas se lleva a cabo tan solo en unos 15 minutos mientras que en otras podra tardar hasta 18
horas. Si el suministro de nutrientes fuese ilimitado, creceran indefinidamente a velocidad constante, pero
afortunadamente su crecimiento se encuentra restringido por la escasez de nutrientes y otros factores del medio
ya sea natural o artificial.
En el ltimo caso, clulas individuales se agrandan y dividen para originar dos clulas hijas de un tamao
aproximadamente igual.
Si el microorganismo es cenoctico esto es, multinucleado, en el que las divisiones nucleares no se
acompaan de divisiones celulares el crecimiento produce un incremento de tamao, pero no del nmero de
clulas.

6.1 Curva de crecimiento

Cuando los microorganismos se cultivan en un medio lquido, normalmente se trata de un cultivo discontinuo o
en sistema cerrado esto es, se incuban en un tubo de ensayo cerrado al que no se aade ms cantidad de
medio que la inicial; en consecuencia, las concentraciones de nutrientes disminuyen y las de residuos
aumentan.

Figura 6.1 Curva de crecimiento microbiano en un sistema cerrado.

I. Fase de latencia (lag) (tramo entre A y B )
Cuando se introducen microorganismos en un medio de cultivo fresco, normalmente no se produce un aumento
inmediato del nmero de clulas o de masa y, por ello, este perodo se denomina fase de latencia (lag). Aunque
la divisin celular no se produce inmediatamente y no hay un incremento neto de masa, es un proceso activo, la
clula est sintetizando nuevos componentes. Una fase de latencia previa al comienzo de la divisin celular
puede ser necesaria por diversas razones. Las clulas pueden ser viejas y poseer cantidades reducidas de ATP,
cofactores esenciales o de ribosomas; estas sustancias deben sintetizarse antes de que se inicie el crecimiento.
El medio puede ser diferente al anterior donde crecan los microorganismos; en este caso, necesitar nuevas
enzimas para usar esos otros nuevos nutrientes.
Por ltimo, tambin es posible que los microorganismos se hayan alterado y necesiten un tiempo de
recuperacin.
Cualquiera que sea el motivo, durante la fase de latencia las clulas se equipan de nuevo, replican su DNA,
comienzan a incrementar su masa y por ltimo, se dividen.
La duracin de la fase de latencia vara considerablemente segn el estado de los microorganismos y la
naturaleza del medio.
Las Celula Vegetativa microbiana al final de esta fase lag de crecimiento son ms resistentes a Tratamientos
letales.
II. Fase de aceleracin positiva; (tramo entre B y C), donde la velocidad de la multiplicacin de las clulas
microbianas va aumentando continuamente.
III. Fase exponencial o logartmica (log) (tramo entre C y D),
Durante esta fase, los microorganismos crecen y se dividen hasta el nivel mximo posible, en funcin de su
potencial gentico, el tipo de medio y las condiciones en que crecen.
La velocidad de crecimiento es constante durante la fase exponencial; los microorganismos se duplican en
nmero a intervalos regulares.
No existe sincronizacin, cada clula se divide en un momento ligeramente diferente del resto, por ello, la curva
de crecimiento aumenta suavemente, en lugar de realizar saltos discretos (Figura 6.1).
Durante esta fase, la poblacin es ms uniforme, qumica y fisiolgicamente; por ello, los cultivos en fase
exponencial se utilizan normalmente en estudios bioqumicos y fisiolgicos.

El crecimiento exponencial es un crecimiento equilibrado. Es decir, todos los constituyentes celulares se

producen a una velocidad constante, unos respecto de otros. Si se modifican las concentraciones de nutrientes o
las condiciones ambientales, se origina un crecimiento desequilibrado.
Se denomina as porque las velocidades de sntesis de los componentes celulares varan entre s, hasta que se
alcanza un nuevo estado de equilibrio.
Las Clula Vegetativa microbiana en fase de crecimiento logartmico son menos resistentes a Tratamientos
letales; y ms resistente si estn al final de la fase lag o en fase estacionaria mxima de crecimiento.
IV. Fase de aceleracin negativa: (tramo entre D y E),
En esta fase inicia un decremento de la velocidad de replicacin o crecimiento de las bacterias, es decir, deja de
ser mxima o exponencial. El nmero de bacterias que se dividen disminuye.
V: Fase estacionaria (tramo entre E y F),
Finalmente, el crecimiento de la poblacin cesa y la curva de crecimiento se hace horizontal (Figura 6.1). Las
bacterias llegan normalmente a la fase estacionaria cuando la concentracin es de, aproximadamente, 10 9
clulas por mL.
El tamao final de la poblacin depende, por supuesto, de la disponibilidad de nutrientes y otros factores, as
como del tipo de microorganismo que se cultive.
En la fase estacionaria, el nmero total de microorganismos viables permanece constante. Este hecho puede ser
el resultado del equilibrio entre la divisin y la muerte de las clulas o, simplemente, que la poblacin deje de
dividirse, aunque siga metablicamente activa.
Las poblaciones microbianas entran en fase estacionaria por varias razones. Un factor obvio es la limitacin de
nutrientes; si se reduce drsticamente la concentracin de un nutriente esencial, la poblacin crecer muy
lentamente.
Los organismos aerobios estn limitados a menudo por la disponibilidad de O 2. El oxgeno no es muy soluble y
puede reducirse tan rpidamente que slo la superficie del cultivo tenga una concentracin de O 2 adecuada para
el crecimiento.
El crecimiento de una poblacin puede tambin cesar debido a la acumulacin de productos residuales txicos.
Parece que este factor limita el crecimiento de muchos cultivos anaerobios (cultivos que crecen en ausencia de
O2). Por ejemplo, los estreptococos pueden producir a partir de la fermentacin de azcares altas
concentraciones de cido lctico y otros cidos orgnicos, que acidificarn su medio, inhibiendo el crecimiento.
Es en esta fase cuando el viraje del indicador de pH presente en el medio de cultivo cambia de color.
Finalmente, hay evidencias que indican que el crecimiento puede cesar cuando se alcanza un cierto nivel crtico
poblacional. En definitiva, un cultivo est en fase estacionaria como consecuencia de varios factores que actan
conjuntamente.
Como acabamos de ver, las bacterias en un cultivo discontinuo pueden entrar en fase estacionaria en respuesta
al estrs nutricional, hambre.
Probablemente, esto ocurre en la naturaleza ya que numerosos ambientes tienen muy bajos niveles de
nutrientes.
Sin embargo, el hambre puede ser una experiencia positiva para la bacteria. Algunas responden con cambios
morfolgicos muy significativos, como la formacin de endosporas.
La mayora, simplemente disminuyen su tamao, normalmente acompaado de una reduccin del protoplasto y
condensacin del nucleoide, y se producen cambios significativos a nivel de la expresin gnica y fisiolgicos.
Las bacterias en condiciones de estrs nutricional producen frecuentemente una serie de protenas del hambre,
que las hacen mucho ms resistentes al dao por diferentes mecanismos.
Incrementan los puentes cruzados del peptidoglicano y, por consiguiente, la fuerza intrnseca de la pared celular.
Se producen protenas que se unen y protegen al DNA (Dps, DNA-binding proteins from tarved cells).
Chaperonas protegen a las protenas de su desnaturalizacin, adems de recuperar el estado nativo de
protenas daadas.
Como consecuencia de estos y muchos otros mecanismos, las clulas en condiciones de hambre se vuelven
ms resistentes a la destruccin por el hambre en s mismo y a otros factores, como compuestos qumicos
txicos, como el cloro.

Estos cambios son tan efectivos que algunas bacterias pueden sobrevivir en estas condiciones de estrs
nutricional durante aos.
Comprensiblemente, estas consideraciones tienen una enorme implicacin prctica en medicina y en la industria.
Las Celula Vegetativa microbiana al final de esta fase de crecimiento son ms resistentes a Tratamientos letales.
Hay evidencias de que Salmonella typhimurium y algunos otros patgenos se vuelven ms virulentos cuando
pasan hambre.
VI.- Fase de muerte acelerada: (tramo entre F y G),
En esta fase se produce un desequilibrio y la tasa de muerte de las bacterias es mucho mayor a la de las
bacterias viables.
VII. Fase de muerte o muerte logartmica: (tramo entre G y H),
Esta fase inicia en cuanto la velocidad de muerte

de

las

bacterias

es

constante.

Cambios ambientales perjudiciales, como privacin de nutrientes y acumulacin de residuos txicos, originan la
disminucin del nmero de clulas viables, hecho que caracteriza la fase de muerte.
La muerte de una poblacin microbiana, al igual que su crecimiento durante la fase exponencial, es normalmente
logartmica (esto es, una cantidad constante de clulas muere cada hora).
A menudo, la nica forma de decidir si una bacteria es viable consiste en incubarla en un medio fresco; si no
crece ni se multiplica, se considera que est muerta.
Es decir, la muerte microbiana se define como la prdida irreversible de la capacidad de multiplicarse.
Aunque la mayor parte de una poblacin microbiana normalmente muere de forma logartmica, la velocidad de
mortalidad puede disminuir despus de reducirse drsticamente la poblacin. Esto se debe a la supervivencia
prolongada de clulas particularmente resistentes. Por stas y otras razones, la curva de la fase de muerte
puede ser compleja.
VIII.- Fase de Reduccin de la Velocidad de Muerte (tramo entre H y I),
En esta fase, las bacterias que han sobrevivido pasan a un estado de reposo; no existe divisin celular, si bien
las clulas que quedan sobreviven a base de nutrientes endgenos.

Control de microorganismos por agentes fsicos y qumicos

7.1 Definicin de los trminos ms frecuentes
Esterilizacin: Proceso que destruye toda forma de vida microbiana incluidos virus y esporas.
Un objeto estril (en sentido microbiolgico) est libre de microorganismos vivos.
Esterilizante: Aparato, solucin, producto, mtodo, tcnica, que esteriliza instrumentales,
equipos, materiales, objetos, ambientes etc., que erradicando microorganismos y grmenes
patgenos, va su destruccin o eliminacin.
Desinfeccin: Proceso fsico o qumico que mata o inactiva agentes patgenos tales
como bacterias, virus y protozoos impidiendo el crecimiento de microorganismos patgenos
en fase vegetativa que se encuentren en objetos inertes .; la desinfeccin no implica
necesariamente esterilizacin.
Desinfectante: Agente usualmente qumico, que mata las formas en crecimiento de los
microorganismos, pero no necesariamente las esporas. El trmino se refiere a sustancias
utilizadas sobre objetos inanimados.
Antisepsia: Es el empleo de medicamentos o de sustancias qumicas (antispticos) para
inhibir el crecimiento, destruir, o disminuir el nmero de microorganismos de la piel, mucosas
y todos los tejidos vivos.
Antisptico: Sustancia que impide el crecimiento o la accin de los microorganismos, ya sea
destruyndolos o inhibiendo su crecimiento y actividad. Se aplica sobre superficies corporales
para reducir la posibilidad de infeccin, sepsis o putrefaccin.
Sanitizante: Agente que reduce la poblacin microbiana a niveles seguros, segn los
requerimientos de salud pblica. Se aplica en objetos inanimados de uso diario, por ejemplo
utensilios y equipos para manipular alimentos, vasos, platos y otros objetos de uso similar.
Germicida: Es un agente que puede destruir microorganismos patgenos y muchos no
patgenos pero no necesariamente esporas. (Bactericida, fungicida, viricida).
Bactericida: Sustancia que causa la muerte a las bacterias. Los antibiticos son sustancias
bactericidas.
Bacteriosttico: agente con capacidad de inhibir el crecimiento microbiano, pero sin
matarlos, pero dificulta su reproduccin. La cepa bacteriana envejece y desaparece.

7.2 Condiciones que influyen sobre la eficacia de la actividad de un agente

antimicrobiano
La destruccin de los microorganismos y la inhibicin de su crecimiento no son asuntos
sencillos porque la eficacia de un agente antimicrobiano (agente que destruye
microorganismos o inhibe su crecimiento) depende de al menos seis factores.
a) Tamao de la poblacin. En cada intervalo de tiempo se destruye una fraccin igual de
poblacin microbiana, por tanto, una poblacin mayor necesitar ms tiempo para morir
que una ms pequea.
El mismo principio se aplica a los agentes qumicos antimicrobianos.
b) Composicin de la poblacin. La eficacia de un agente vara considerablemente con la
naturaleza de los organismos que se van a tratar porque stos difieren sustancialmente
en cuanto a susceptibilidad. Las endosporas bacterianas son mucho ms resistentes a la
mayora de los agentes antimicrobianos que las formas vegetativas, y las clulas ms
jvenes se destruyen normalmente con ms facilidad que los organismos maduros. Por
otra parte, algunas especies son capaces de soportar mejor que otras condiciones
adversas.
Mycobacterium tuberculosis, causante de la tuberculosis, es mucho ms resistente a los
agentes antimicrobianos que la mayora de las bacterias.
c) Concentracin o intensidad de un agente antimicrobiano.
A menudo, pero no siempre, cuanto ms concentrado est un agente qumico o ms
intenso sea uno fsico, ms rpidamente se destruyen los microorganismos. Sin embargo,
la eficacia de un agente no est normalmente relacionada directamente con la
concentracin o intensidad.
A veces, un agente es ms eficaz en concentraciones ms bajas. Por ejemplo, el etanol al
70 % es ms eficaz que el de 95 %, ya que su actividad aumenta en presencia de agua.
d) Duracin de la exposicin. Cuanto ms tiempo se exponga una poblacin a un agente
microbicida, ms organismos se destruirn (Figura 7.1). Para conseguir una esterilizacin,
hay que realizar una exposicin suficiente para reducir la probabilidad de supervivencia a
10"6 o menos.
e) Temperatura. La actividad de los agentes qumicos aumenta con la temperatura. Con
frecuencia, concentraciones bajas de un desinfectante pueden ser eficaces a
temperaturas ms altas.
f) Ambiente local. La poblacin microbiana que debe ser controlada no est aislada, sino
en el contexto de una serie de factores ambientales que pueden ofrecerle proteccin o
facilitar su destruccin. Por ejemplo, como el calor es ms eficaz en medios con pH cido,
los alimentos y las bebidas acidas, como frutas y tomates, se pasteurizan con ms
facilidad que los alimentos con valores de pH ms altos, como la leche. Otro factor
ambiental importante es la materia orgnica que puede proteger a los microorganismos
frente al calor y a los desinfectantes qumicos.
El mismo cuidado hay que tener cuando se destruyen los agentes patgenos durante el
tratamiento del agua para su potabilizacin. Cuando el suministro de agua de una ciudad tiene
un contenido elevado de materia orgnica, hay que aadir ms cloro para desinfectarlo. Los
biofilms son tambin buenos ejemplos de condicionamientos en el control microbiano. La
matriz orgnica que rodea el biofilm proteger a los microorganismos, por ello, el biofilm y su
microbiota son a menudo difciles de eliminar.
Los microorganismos ofrecen diversos beneficios a la sociedad en diferentes formas. En otro
aspecto son tambin los microorganismos un vehculo para la produccin de enfermedades,
por la produccin de toxinas propiamente dichas o metabolitos txicos. Adems de daos en

cultivos, descomposicin de alimentos y enfermedades en animales. Es por esto que el ser

humano ha buscado los procedimientos necesarios para destruir o controlar el crecimiento de
los microorganismos perjudiciales.
Modo de accin de los antimicrobianos:
a) Alteracin de la permeabilidad de la membrana citoplasmtica.
b) Dao a la pared celular o inhibicin de la sntesis de sus componentes.
c) Alteracin del estado fsico qumico de las protenas y cidos nuclecos, o inhiben su
sntesis.
d) Inhibicin enzimtica

Procedimientos para el control microbiano:

I.
MTODOS FSICOS: Los mtodos fsicos se utilizan a menudo para lograr la
descontaminacin, la desinfeccin y la esterilizacin microbiana.
1. CALOR:
El calor hmedo destruye rpidamente los virus, las bacterias y los hongos (Tabla 7.2). Una
exposicin a agua en ebullicin durante 10 minutos es suficiente para destruir clulas
vegetativas y esporas de eucariotas.
Lamentablemente, la temperatura de ebullicin (100C) no es suficiente para destruir
endosporas bacterianas que pueden sobrevivir durante horas en ebullicin. En consecuencia,
este mtodo se puede usar para desinfectar agua potable y objetos que no se daen por el
agua, pero no esteriliza.
La eficacia del calor como agente antimicrobiano, se puede expresar como el
Tiempo de muerte trmica (TDT) es el tiempo til para destruir, a una determinada
temperatura, un determinado N de microorganismos (o esporas) bajo condiciones
especficas.
Punto de muerte trmica es la T necesaria para matar la totalidad de los
microorganismos en un tiempo de 10 minutos.
Valor D es el tiempo de reduccin decimal, o el tiempo necesario para destruir el 90% de
los microorganismos
Valor Z hace referencia a los F necesarios para que la grafica de muerte trmica
atraviese un ciclo logartmico.
Valor F es el tiempo equivalente, en minutos, a 250F, de todo el calor considerado con
respecto a su capacidad para destruir las esporas o las clulas vegetativas de un
microorganismo
12-D es la duracin de la letalidad del tratamiento que es necesario efectuar en
enlatados = tratamiento trmico mnimo que debe reducir a 10 12 la probabilidad de
supervivencia de las esporas ms resistentes de Clostridium botulinum.
Penetracin del calor
1. Calentamiento por Conduccin el calor se trasmite de molcula a molcula. Es lenta
en Alimentos.
2. Calentamiento por Conveccin el calor se transmite por el desplazamiento de lquidos
o gases.
La industria alimentaria utiliza frecuentemente los valores D y Z. Por ejemplo, despus de
enlatar un alimento, hay que calentarlo para eliminar el riesgo de germinacin de esporas de
Clostridium botulinum.

Tabla 7.2 Condiciones aproximadas para destruir microorganismos con calor hmedo
Organismo

Clulas vegetativas

Esporas

Levaduras
Mohos
Bacteriasa

5 minutos a 50-60C
30 minutos a 62C
10 minutos a 60-70C

5 minutos a 70-80C
30 minutos a 80C
De 2 a ms de 800
minutos a 100C
0.5-12 minutos a 121C

Virus
30 minutos a 60C
a
Condiciones para bacterias mesfilas.

La exposicin al agua en ebullicin durante 10 minutos es suficiente para destruir clulas

vegetativas, pero no es suficiente para destruir endosporas. No esteriliza.
La eficacia del calor como agente antimicrobiano, se puede expresar como:
Tiempo de Muerte Trmico (TMT), que se define como el tiempo ms corto necesario
para destruir los microorganismos en una suspensin, a una temperatura especfica y en
condiciones definidas. Sin embargo como la destruccin es logartmica no es posible
eliminar completamente los microorganismos de una muestra.
Existen diversos mtodos de control de microorganismos por medio del calor:
a) Esterilizacin por vapor (calor hmedo o autoclave): El agua es llevada a punto de
ebullicin de manera que el vapor llena la cmara, desplazando el aire fro. Cuando
todo el aire es expulsado, se cierran las vlvulas de seguridad y el vapor satura toda la
cmara, por lo que incrementa la presin, hasta que se alcanzan los valores deseados
(121C y 15 lb presin).
En estas condiciones se destruyen todas las clulas vegetativas y endosporas en un
tiempo que por lo general es de 15 minutos. Se piensa que el calor hmedo degrada
los cidos nuclecos, desnaturaliza protenas y adems alterar las membranas
celulares.
Si no se cumplen las condiciones adecuadas, no hay esterilizacin. Para controlar el
buen funcionamiento del equipo, se pueden incluir con la esterilizacin un control
biolgico o un indicador qumico.
El indicador biolgico consiste en una ampolla estril con un medio y un papel cubierto
con esporas de Bacillus stearothermophilus o Clostridium. Luego de la esterilizacin se
rompe la ampolla y se incuba por unos das. El indicador qumico consiste en una cinta
especial con letras o lneas que cambian de color despus del tratamiento suficiente
con calor.
b) Pasteurizacin: Se utiliza para sustancias o medios que no pueden ser calentadas a
ms de su temperatura de ebullicin.
Un calentamiento breve a 55 o 60C destruir los microorganismos patgenos y
disminuye los causantes de la descomposicin de la sustancia. NO esteriliza.
Existen variaciones que son utilizadas en la industria de la leche: la pasteurizacin
rpida (HTST high temperature short-term) que consiste en calentar a 72C por 15
segundos. Y la pasteurizacin a temperatura ultra elevada (UTH ultrahigh temperature)
que calienta a 140-150C por 1 a 3 segundos.
c) Tindalizacin o esterilizacin fraccionada al vapor: se utiliza para qumicos o
material biolgico que no puede llevarse a ms de 100C. Se calienta a una
temperatura de 90C a 100C durante 30 minutos por tres das consecutivos y se
incuba
a
37C
entra
cada
calentamiento.
El primer calentamiento destruye clulas vegetativas pero no esporas, por lo que
germinan a 37C y luego son eliminadas con el siguiente calentamiento.

d) Calor seco: Se utilizan hornos o estufas a una temperatura de 160-170C por 2 o 3

horas. Es menos efectivo que el calor hmedo, pero no corroe utensilios metlicos. Es
lenta y no se puede utilizar para material termo sensible.
e) Incineracin: Destruye por completo los microorganismos. (calentar las asas en los
mecheros).
2. TEMPERATURAS BAJAS
Refrigeracin y congelacin, son nicamente bacteriostticos. En general, el metabolismo
de las bacterias est inhibido a temperaturas por debajo de 0 C. Sin embargo estas
temperaturas no matan a los microorganismos sino que pueden conservarlos durante largos
perodos de tiempo.
Esta circunstancia es aprovechada tambin por los microbilogos para conservar los
microorganismos indefinidamente. Los cultivos de microorganismos se conservan congelados
a -70 C o incluso mejor en tanques de nitrgeno lquido a -196 C.
Desecacin: Es de efecto bacteriosttico y las esporas permanecen viables.
3. FILTRACIN
Es utilizada para materiales termosensibles.
a) Filtros de profundidad: Se utilizan materiales fibrosos o granulados que forman una
capa gruesa con canales de dimetro muy pequeo. La solucin es aspirada al vaco y los
microorganismos quedan retenidos o son adsorbidos por el material. Se utilizan
diatomeas, porcelana no vidriada, asbestos.
b) Filtros de membrana: Son circulares con un grosor de 0.1 mm y con poros muy
pequeos, de unos 2 m por lo que los microorganismos no pueden atravesarlo. Se
fabrican de acetato de celulosa, policarbonato, fluoruro de polivinilo u otros materiales
sintticos.
4. RADIACIN
a) Ultravioleta: Es letal para todas las clases de microorganismos por su longitud de
onda corta y su alta energa. Es letal a 260 nm ya que es la longitud de onda que es
ms efectivamente absorbida por el ADN.
El mecanismo primario del dao al ADN es la formacin de dmeros de timina lo que
inhibe su funcin y replicacin. Son escasamente penetrantes y se utilizan para
superficies.
b) Ionizante: Niveles bajos pueden producir mutaciones e indirectamente resultar en la
muerte, niveles altos son letales. Especficamente causan una serie de cambios en las
clulas: ruptura de puentes de hidrgeno, oxidacin de dobles enlaces, destruccin de
anillos, polimerizacin de algunas molculas, generacin de radicales libres.
La mayor causa de muerte es la destruccin del ADN. Es excelente esterilizante y con
penetracin profunda en distintos materiales, por lo que se utilizan para esterilizar
materiales termolbiles (termosensibles) como jeringas desechables, sondas, etc.
No se utilizan para medios de cultivo o soluciones proteicas porque producen
alteraciones de los componentes.
II. MTODOS QUMICOS:
Condiciones ideales para un agente antimicrobiano qumico:
a) No txico para el ser humano, animales ni medio ambiente.
b) Actividad antimicrobiana.
c) No debe de reaccionar con la materia orgnica o corroer.
d) Estable y homogneo
Modo de accin:

Bacteriostticos: Inhibidores de sntesis proteica por unin al ribosoma, que es

reversible, pues se disocia de este cuando disminuye en concentracin.

Bactericidas: Causa la muerte celular pero no la lisis. No se eliminan por dilucin.

Bacteriolticos: Inducen la lisis celular al inhibir la sntesis de la pared celular o daan

la membrana citoplasmtica.

Agentes antimicrobianos qumicos:

a) Fenoles: El primer desinfectante y antisptico utilizado, en 1867 Joseph Lister los
emple para reducir el riesgo de infeccin en las cirugas. Hasta ahora los fenoles y
sus derivados (cresol, xilenol) son utilizados como desinfectantes en laboratorios y
hospitales. Elimina micobacterias, eficaz an en presencia de materia orgnica y
permanece activo en la superficie despus de mucho tiempo de su aplicacin.
Desnaturaliza protenas y altera la membrana. Tiene olor desagradable y puede
producir irritaciones cutneas.
b) Alcoholes: No elimina esporas pero son bactericidas y fungicidas y algunas veces
viricida (virus que contienen lpidos), son comnmente utilizados principalmente el
etanol y el isopropanol en concentraciones de 70-80%. Tienen el mismo modo de
accin de los fenoles
c) Metales pesados: mercurio, arsnico, plata, zinc y cobre. Son bacteriostticos ya que
el metal se combina con los grupos sulfihidrilos de las protenas inactivndolas o
precipitndolas. Son txicos. Ejemplos: sulfato de cobre (alguicida) y nitrato de plata
(gonorrea oftlmica en nios)
d) Halgenos:
Yodo: antisptico cutneo. Oxida componentes celulares y forma complejos con
las protenas. En altas concentraciones puede destruir algunas esporas. Puede
lesionar la piel, dejar manchas y desarrollar alergias.
Cloro: oxida componentes celulares, requiere un tiempo de exposicin de unos 30
minutos. El producto clorado ms utilizado en desinfeccin es el hipoclorito de
sodio, que es activo sobre todas las bacterias, incluyendo esporas, y adems es
efectivo en un amplio rango de temperaturas. La actividad bactericida del
hipoclorito de sodio se debe al cido hipocloroso (HClO) y al Cl 2 que se forman
cuando el hipoclorito es diluido en agua. La actividad germicida del in hipocloroso
es muy reducida debido a que por su carga no puede penetrar fcilmente en la
clula a travs de la membrana citoplasmtica. En cambio, el cido hipocloroso es
neutro y penetra fcilmente en la clula, mientras que el Cl 2 ingresa como gas.
Su actividad est influida por la presencia de materia orgnica, pues puede haber
en el medio sustancias capaces de reaccionar con los compuestos clorados que
disminuyan la concentracin efectiva de stos.
e) Compuestos cuaternarios de amonio (detergentes): Molculas orgnicas
emulsificantes porque contienen extremos polares y no polares, solubilizan residuos
insolubles
y
son
agentes
limpiadores
eficaces.
Solo los catinicos son desinfectantes, alteran membrana y pueden desnaturalizar
protenas. No destruyen micobacterias ni esporas. Se inactivan con el agua dura y el
jabn.
f) Aldehdos: Formaldehdo y glutaraldehdo, se combinan con las protenas y las
inactivan. Eliminan esporas (tras 12 horas de exposicin) y pueden usarse como
agentes esterilizantes.
g) Gases esterilizantes: Esterilizacin de objetos termosensibles.

 Oxido de etileno: microbicida y esporicida, se combina con las protenas celulares.

Alto poder penetrante. En concentraciones de 10-20% mezclado con CO 2 o
diclorodifluorometano. Se debe de airear ampliamente los materiales esterilizados
para eliminar el gas residual porque es muy txico.