INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

German Gaspar Jennifer L., Pascualli Lpez Miguel ngel
3FV1
Seccin: 2

CINTICA ENZIMTICA I
CURVA TIPO DE AZCARES REDUCTORES
INTRODUCCIN
Las enzimas son protenas que catalizan
reacciones biolgicas, aumentan la velocidad a la
que se alcanza el equilibrio sin afectar el
equilibrio final de la reaccin. Son altamente
especficas y su actividad puede modificarse por
factores tales como la temperatura, pH,
concentracin de enzima, concentracin de
sustrato, inhibidores, etc.
El termino cintica enzimtica implica el estudio
de la velocidad de una reaccin catalizada por
una enzima y las condiciones que las modifican.
OBJETIVOS
Analizar algunos factores que modifican la
velocidad de la reaccin catalizada por la
invertasa y caracterizar de esta manera a dicha
enzima.

RESULTADOS
TABLA NO 1
Curva tipo azucares reductores

Azcar reductor
(moles)/2.0mL

Problemas

0.1

0.2

0.4

0.5

1.2

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

Regulador de acetatos
0.05M, pH 4.7 (mL)

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

Agua (mL)

1.9

1.8

1.6

1.2

0.8

3,5 DNS (mL)

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

Desarrollo de color

5 minutos a 92C 8en bao mara)

Dilucin

Colocar en bao con hielo y diluir con 4mL de

agua destilada

Sacarosa
(mL)

0.35M

Leer en espectrofotmetro a 540 nm.

Absorbencia

.110

.
138

10

CLCULOS

Glucosa 0.005 M + Fructosa 0.005 M =0.01 M [ Az . Reducto

0.01 M Az . Reductor 1000 mL
[ X ] 0.1 mL Tubo 1
moles de Az .
mol de Az .
6
X =1 x 10 . 1 .
2.0 mL
2.0 mL
Nota: El valor de X cambiara dependiendo de los mL.
de Azcar Reductor que se aadieron a los tubos, todos
los valores se encuentran registrados en la tabla de
resultados.

Con la (Tabla No.1) se obtiene la (Grfica No.

1) que es la curva de calibracin obtenida de
acuerdo con los datos tomados durante la
prctica.

Tubo No.

Fructosa 0.005M (mL)

Curva de azucares reductores Absorbancia vs [A.R]

Blanco

Glucosa 0.0005 M

.
416

.
808

.887

1
0.8 f(x) = 0.09x + 0
R = 0.99
0.6
Absorbancia
Valores Y540nm 0.4Linear (Valores Y)
0.2
0
0 2 4 6 8 10 12
[A.RM]

Y
=
R = 0.985

0.093x
Y = bx + a

Y = [A.R]
X = Absorbancia

0.003

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German Gaspar Jennifer L., Pascualli Lpez Miguel ngel
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Seccin: 2

REACCIN QUMICA

C6H12O6

(D-glucosa)

92.8 C /5 min

nitro,5-amino
salicilato

3,5-DNS

C6H11O7 (D-gluconato) + 3salicilato

3-amino,5-nitro

92.8 C /5 min

pueden reaccionar como reductores con otras

molculas); tambin sirve para
medir las
velocidades de la enzima a tratar y observar la
aparicin de azucares reductores en funcin del
tiempo (5 min.), los productos formados se
identifican con la ayuda del 3,5DNS, el cual nos
sirve para cuantificar azcares reductores, este
genera una coloracin amarilla, la cual es ms
intensa dependiendo de la concentracin de
azcar reductor, esto se pudo ver en nuestros
resultados al calcular las concentraciones de
azcar reductor, ya que
fue directamente
proporcional a la absorbencia obtenida.
La grafica resultante nos guiara para poder
hacer las comparaciones correspondientes en
cada experimento donde haya efectos que
modifiquen la velocidad de reaccin, por medio
de la lectura de absorcin de estos experimentos,
as podremos compararla con la absorcin de
nuestras curva tipo y sabremos la concentracin
de azcar reductor que se tiene.

CONCLUSION

DISCUSIN
La sacarosa es un azcar no reductor, disacrido;
y puede dar lugar a dos azcares reductores,
como lo son la Glucosa y la Fructosa, mediante la
intervencin de la enzima Sacarasa (fructofuranosidasa o invertasa).
La curva tipo nos sirve para conocer la actividad
enzimtica en este caso de la invertasa,
mediante la toma de lecturas de absorbencias en
el espectrofotmetro (calibrado con el tubo
testigo), transformndolas en M de azcar
reductor (Los azcares reductores son aquellos
azcares que poseen su grupo carbonilo/ grupo
funcional, intacto, y que a travs del mismo

Las
curva
tipo
son
curvas
con
concentraciones
conocidas
para
determinar el valor de absorbancia
Un azcar reductor contiene un grupo
carbonilo libre y el cual reduce a otro
compuesto
La fructosa en medio alcalino se convierte
en glucosa por equilibrio cetoenolico
El 3,5-DNS sirve para reducir compuestos

BIBLIOGRAFA

Lidia Cardella Rosales. (2007). Bioqumica

Humana. La Habana: Ciencias Mdicas. Pp.
40
http://recursostic.educacion.es/ciencias/bi
osfera/web/profesor/practicas/Actividad_en
zimatica.pdf