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CTIC
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10:
INCL
USI

INTRO
DUCCI
ON:

Las clulas animales como las clulas vegetales incluyendo las

clulas procariotas cumplen con diversas funciones vitales como:
crecimiento, movimiento mantenimiento reproduccin, etc. Para
ello necesitan grandes cantidades de energa que lo
proporcionan sistemas complejos y eficientes como son las
mitocondrias y cloroplastos, encontrndose en mayor proporcin
en lugares donde existe una mayor actividad. Un ejemplo de ello
es la clula heptica que por su funcin metablica altamente
activa llega a tener hasta 1600 mitocondrias por clula
Toda clula est equipada para cumplir sus funciones vitales
como un ser vivo pluricelular. En este ltimo las clulas han
adquirido complejidad de estructura y de funciones. tal es el caso
de las clulas intestinales que contienen micro vellosidades y
dentro de ellas estructuras que aumentan an ms
considerablemente la absorcin de sustancias
La mayora de organelos citoplasmticos como mitocondrias,
cloroplastos, complejo de Golgi, lisosomas e inclusiones
citoplasmticas, pueden observarse en el microscopio ptico con
relativa dificultad dependiendo del tamao y localizacin interna
de la clula. Esta experiencia prctica te permitir conocer los
organelos ms importantes en lminas precisamente preparadas
e inclusiones citoplasmticas en clulas vegetales( grnulos de
almidn) y en clulas animales(glucgeno)

MATE
RIALE
S:
MATERIALES,
EQUIPOS Y REACTIVOS :
1. Laminas preparadas de cortes histolgicos
conteniendo
2. Mitocondrias, vellosidades intestinales, medula
espinal, glucgeno
3. Laminas portaobjeto y cubreobjetos
4. Pipetas Pasteur
5. Microscopio compuesto
6. Azul de metileno
7. Lugol
8. Agua destilada
9. Geranio
10. Hoja de geranio
11. Papa, camote, agua, trigo y maz
12. Navaja nueva
13. Palitos de fsforos

PROC
EDIMI
ENTO:

1. OBSERVACION DE INCLUSIONES CITOPLASMATICAS:

a) FUNDAMENTO: la mayora de veces, las clulas incluyendo las
clulas procariotas como las bacterias incorporan dentro de su
citoplasma, sustancias de reserva de naturaleza diversa.
Qumicamente pueden ser protenas, glcidos, lpidos y sustancias
minerales, las cuales son formadas cuando existen sustancias
nutritivas en exceso y que muchas veces son usadas cuando se
agota un elemento nutritivo. Las inclusiones citoplasmticas se
presentan en las clulas adultas dependiendo del estado fisiolgico,
especializacin y edad de las clulas. Como ejemplo tenemos:
inulina,glocogeno,aleurona,drusas,rafidios y almidn
b) TECNICA:
OBSERVACION DE ALMIDON

Cortar una papa o camote en dos mitades, luego rayarlo con una navaja
Realiza un preparado en fresco, colocando una gota de la muestra
anterior(aydate con una pipeta Pasteur) en una lmina portaobjeto luego
adiciona una gota de agua destilada encima de la gota anterior
Coloca una laminilla encima de la gota de la lmina anterior y observa a menor
y mayor aumento (objetivo de 10x y 40x) los grnulos de almidn
Enfoca un granulo de almidn y determina su forma ovoide y el hilio que se
encuentra como un punto excntrico
Realiza la misma experiencia con maz molido , trigo, arroz y yuca
Coloca una gota de lugol al borde de laminilla y observa la coloracin de los
grnulos de almidn

OBSERVACION DE GLUCOGENO:

Observa en una lmina preparada de un corte histolgico de hgado, las clulas

hepticas. usa el objetivo de 40 x
Cambia de aumento , al objetivo de 10X e identifica el citoplasma, y dentro de
ella unas granulaciones generalmente de color rosado
2. RECONOCIEMIENTO DE CITOPLASMA Y NUCLEO DE CELULAS DE
MUCOSA LABIAL:
a) FUNDAMENTO: todas las clulas poseen citoplasma y membrana
citoplasmtica, en las clulas eucarioticas como de la mucosa labial
se encuentran en un medio acuoso formando dispersiones coloidales
de protenas, lpidos glcidos etc. En un constante cambio, pasando
del estado gel a sol y viceversa. Normalmente la membrana
citoplasmtica es de 6-10 nanmetros lo que imposibilita observarlo al
microscopio ptico cuya resolucin es de 0.25 micromtricos. Muchas
membranas citoplasmticas se encuentran adosadas de una
expresin celular denominada glucocalix, que permite un mayor
grosor de la membrana, permitiendo la observacin en el microscopio
ptico.

b) TECNICA:
Raspa suavemente la cara interna de la mejilla con un palito
de fosforo limpio y deposita el contenido en el centro de una
lmina portaobjeto
Coloca una gota de agua encima del contenido anterior y
homogenzalo completamente. Luego con la ayuda de otra
lamina realiza extendido similar a un frotis de sangre. Ver el
esquema presentado por su profesor
Seca la lmina a temperatura ambiente y agrega sobre la
preparacin hecha en lamina 4-5 gotas de azul de metileno,
dejando actuar durante 3 minutos
Lavar ligeramente la lmina con agua de cao, hasta que no
salga ms colorante del lavado
Seca la lmina frente a un mechero
Coloca la lmina coloreada con el microscopio y con el objeto
de 10x busca un campo microscopio donde las clulas sean
bien teidas y ntidas
Una vez seleccionado el campo microscpico, cambia al
objetivo de 40 x y ubica la membrana citoplasmtica y su
ncleo
OBSERVACIONES DE ORGANELOS CITOPLASMATICOS:
A. FUNDAMENTO: dentro del citoplasma celular se encuentran
una serie de elementos que cumplen una funcin
determinada en la clula semejante a un rgano en los
animales superiores .los ms importantes organelos
citoplasmticos son: mitocondrias, complejo de Golgi,
liposomas, cloroplastos, etc.
B. TECNICA :
OBSERVACION DE CLOROPLASTOS:
Coloca una gota de agua en el centro de una lmina
portaobjeto limpia
Deposita sobre la gota, una hoja de Elodea( o
epidermis de geranio) y esparcirla completamente
Cubrir con una laminilla y ubicar zonas claras con el
objetivo de 10X
Identificar los cloroplastos, que se presentan como
corpsculos de color verde en el citoplasma de la
clula

OBSERVACION DE MITOCONDRIAS EN CELULAS RENALES:

Coloca la lmina preparada conteniendo el corte histolgico de

clulas renales, e identifica una clula renal con el objetivo de 10X
Cambia al objetivo de mayor aumento (40 X) y ubica en el citoplasma
unas formas granulares de color rosado o azul violeta pertenecientes
a las mitocondrias

OBSERVACION DEL COMPLEJO DE GOLGI:

Coloca la lmina conteniendo un preparado histolgico de
epiddimo de rata e identifica con el objetivo de 10X las clulas
del tejido
Cambia el objetivo a mayor aumento y determina en el
citoplasma una forma reticular( vacuolas ) de color pardo
oscuro que se encuentran en la parte distal de las clulas hacia
luz del tubo correspondiente al complejo de Golgi
OBSERVACION DE CHAPA ESTRIADA:

Coloca la lmina preparada de un corte histolgico de intestino

delgado( yeyuno) y con el objetivo de 10X identifica las
vellosidades intestinales
Cambia al objetivo de mayor aumento y determina en el
neoplasma unos filamentos que se entrecruzan denominados
neurofibrillas