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Obtencin de Etanol y Biogs a Partir de Banano de

Rechazo
Biogas and Bioethanol Production from Non-Exportable Low
Quality Banana

Carlos A. Guevara*, Hctor A. Arenas, Alexander Meja y Carlos A. Pelez


Universidad de Antioquia, Grupo Interdisciplinario de Estudios Moleculares (GIEM),
Inst. De Qumica, Calle 67 N0 53-108, Medelln-Colombia. (email:carlosguevara@utp.edu.co )
* Autor a quien debe ser dirigida la correspondencia.

Resumen
Se desarroll un proceso fermentativo mediante hidrlisis endgena inducida para
producir etanol a partir de banano verde no apto para exportacin. El potencial de las
vinazas tambin fue evaluado para obtener biogs. A escala de 1 litro se compar la
hidrlisis endgena inducida con la hidrlisis exgena usando enzimas comerciales, y la
hidrlisis cida tomando como punto de referencia el etanol producido en la
fermentacin. Con la hidrlisis endgena se obtuvo los mayores rendimientos y con
esta metodologa se realizaron fermentaciones a 15 litros Los rendimientos de etanol
en promedio fueron 0.065 litros por kilogramo de banano verde y los del biogs fueron
2.24 litros por litro de vinaza. El proceso propuesto presenta rendimientos comparables
con los de la fermentacin de caa de azcar. Adems presenta ventajas, tales como
su bajo costo, fcil operacin y por ser una alternativa de solucin ambientalmente
compatible en el rea del manejo de residuos de cosecha.
Palabras clave: hidrlisis enzimtica; banano de rechazo, etanol, biogs,
fermentacin

Abstract
In this study was developed a fermentative process to produce ethanol from green
banana non optimal for exportation through one induced endogenous hydrolysis. The
potential of the stillage to produce biogas was also evaluated. It was compared the
induced endogenous hydrolysis, with the exogenous hydrolysis that uses commercial
enzymes and the traditional acid hydrolysis done all of them in a final volume of 1 liter,
the reference point was the ethanol produced in the fermentation process. The
maximum performance was obtained with the endogenous hydrolysis and with these
methodology fermentations at 15 liter as done. The average of ethanol produced was
0.065 liters from one kilogram of green banana and the biogas production was 2.24

liter per liter of stillage. The proposed process shows performance comparable with
that obtained by sugar cane fermentation. Also the methodology demonstrated several
advantages, such as low cost, simple to operate, and because it constitutes a good
alternative, which is environmentally compatible in the area of management of crop
residues.
Keywords: enzymatic hydrolysis, rejected banana, ethanol, biogas, fermentation

INTRODUCCION
La industria bananera de exportacin en Colombia genera una importante cantidad de
biomasa residual denominada banano de rechazo, que tiene tres caractersticas
importantes: 1) no se exporta, 2) est concentrada en las empacadoras de fruta, 3)
representa un volumen importante. Estas condiciones hacen que este sustrato sea
atractivo para emprender un estudio que permita evaluar su uso como materia prima
en la produccin de biocombustibles, teniendo en cuenta que el esfuerzo energtico
por concentrar la fruta se hizo con fines de exportacin, lo que reduce
significativamente su costo energtico como materia prima y con ello tambin se
reduzca ostensiblemente su huella de carbono. El banano para exportacin se cosecha
verde, se transporta hasta las empacadoras donde mediante criterios de tamao y
apariencia se selecciona en dos categoras bsicas: Fruta de exportacin y fruta de
rechazo. Las cifras de banano verde de rechazo, oscilan entre 6.5 y 10.8 t/ao/ha, por
tanto el volumen total en Colombia es de unas 400.000 t/ao (Sierra, 2007). En el
caso especfico de la zona de Urab -noroccidente del pas- al ao se cuenta con unas
250.000 t de banano de rechazo (Augura, 2007).
Actualmente una tercera parte de la fruta que no se exporta se destina al consumo
interno como fruta fresca, otra tercera parte se emplea como sustrato en la produccin
de fertilizantes orgnicos (compost) para el cultivo de la misma fruta y, una tercera
parte contina considerndose como residuo. Son precisamente estas ltimas 2/3
partes del residuo las que potencialmente se pueden usar en la produccin de
biocombustibles.
Durante aos, esta biomasa se constituy en una de las problemticas ambientales
ms importantes de las zonas bananeras y en un intento de solucin, en 1987 el CIID
(Centro Internacional de Investigaciones y el Desarrollo) de Canad don un sistema
de produccin de alcohol con el que se estim la viabilidad del uso de estos residuos
para la obtencin de etanol, por medio de un proceso hidroltico/fermentativo seguido
de una destilacin. El costo de la hidrlisis cida (Canch-Escamilla et al, 2005),
comparado con el valor para la poca de los combustibles fsiles, hicieron que esta
iniciativa fuera considerada como inviable. Sin embargo, una alternativa no estudiada a
fondo en su momento fue la conversin de carbohidratos a travs de una hidrlisis
enzimtica endgena inducida, y ms an si se consideran los costos actuales del
petrleo (Augura y Fbrica de Licores de Antioquia, 1990). En un trabajo realizado en
la Universidad de Texas A&M, se estudiaron el potencial de los bananos de rechazo
para la produccin de etanol en diferentes estados de maduracin, obteniendo para
banano verde 0.090, maduro 0.082, sobre madurado 0.069 L etanol/Kg de toda la
fruta (Hammond et al., 1996)

Posteriores esfuerzos se han realizado en todos los frentes de investigacin y muchas


de estas experiencias se encuentran debidamente documentadas en la revisin
bibliogrfica: "El banano verde de Rechazo en la Produccin de Alcohol Carburante"
(Afanador, 2005), en donde se abordan aspectos tales como, la disponibilidad del
material, tipos de hidrlisis, fermentaciones con diferentes tipos de microorganismos,
separacin y deshidratacin del etanol (Beckley et al, 2005). Tambin se efectu un
anlisis energtico y exergtico para evaluar el proceso de obtencin de etanol a partir
de banano; analizando el cultivo y transporte del material, hidrlisis del banano,
fermentacin de los azcares, destilacin del etanol y planta de utilidades. Finalmente
se demostr que el balance energtico es positivo pero debe mejorarse (Velsquez et
al., 2009).
A veinte aos de la primera experiencia, es posible pensar en obtener etanol a partir
de este tipo de residuos agroindustriales, con dos aspectos claros para considerar: 1)
Mejorar el rendimiento, bajar el costo de la hidrlisis y desarrollar una metodologa
adecuada de extraccin de los azcares fermentables. 2) Disminuir el costo energtico
de la produccin de etanol mediante la obtencin simultanea otros biocombustibles y
coproductos a partir de los residuos hasta llegar a implementar el concepto de
biorrefineria (Rabelo et al., 2011).
En ste estudio se pretendi abordar la problemtica desde una visin holstica.
Considerando todas las etapas del proceso a dos escalas diferentes. Fueron realizadas
5 etapas: hidrlisis, extraccin y neutralizacin de jugos (Lee et al., 2006;
Kyamuhangire et al., 2002; Kyamuhangire Et al., 1999), la evaluacin fisicoqumica del
jugo, fermentacin etanlica, destilacin y finalmente produccin de biogs a partir de
las vinazas, con el fin de obtener biocombustibles a partir de banano de rechazo.

METODOLOGA
Mtodos analticos
Bajo la Norma Tcnica Colombiana (NTC) fueron cuantificados Nitrgeno (NTC 370),
Fosforo (NTC 234). La capacidad de retencin de agua (CRA), humedad, pH, carbono
orgnico, cenizas y densidad se determinaron segn la norma (NTC 5167). Los
azcares reductores fueron cuantificados por un mtodo espectrofotomtrico,
utilizando DNS (cido 3,5-dinitrosaliclico) y adicionalmente los azucares solubles por
refractometra, tcnica usalmente denominada Grados Brix (Bx). Potasio, Sodio,
Calcio, Magnesio, Zinc, Aluminio se cuantificaron por Electroforesis capilar. Azufre por
gravimetra bajo la norma AVAC 98002 (Association of Vficial Analytical Chemists),
Conductividad y pH bajo norma SSLMM-42-2-92: Soil Survey Laboratory Methods
Manual Reporte N42, Versin 2.0, 1992. Slidos totales por gravimetra bajo norma
APHA (American Public Health Association), AWWA (American Water Works
Association) y WPCF (Water Pollution Control Federation). La caracterizacin
enzimtica, tanto cintica como de punto final, fue estimada por determinacin de las
velocidades iniciales segn los protocolos definidos para valoraciones en heterofase
(Pelez et al., 2004). La concentracin alcohlica fue estimada por cromatografa de
gases, usando un equipo Marca Agilent 6890 con detector FID, dotado de una columna
Carbowax 20 M de 50 m de longitud y 1 de dimetro interno; el volumen de
inyeccin fue de 1 L y una divisin de 1:50. La Temperatura del inyector fue de 200
C y el flujo de gas portador de 20 mL/min de H2(V'Neal, et al 1996). El contenido de
biogs fue establecido por volumetra y prueba de llama.

Hidrlisis y extraccin
Los bananos verdes fueron adquiridos en la central de alimentos minorista de Medelln
y transportados inmediatamente al laboratorio. Tres procedimientos fueron empleados
en la hidrlisis y extraccin de los jugos: En la hidrlisis endgena, una cmara de
maduracin equipada con sistema de humidificacin, calentamiento y medidores de
temperatura y humedad, fue usada para la hidrlisis por induccin de enzimas
endgenos. Para la induccin, la concentracin de etileno en la cmara fue de 50 ppm,
la temperatura de 25C y la humedad relativa de 85% todo esto se mantuvo por 96
horas, segn una estandarizacin cintica realizada previamente (Paull, 2000;
Margossian et al 1988). La extraccin de los jugos se realiz en una etapa por adicin
de 300 mL de solucin acuosa de Ca(VH)2 al 10% por cada Kg de banano, mezclado y
dejado en reposo por 15 minutos y luego centrifugacin. Posteriormente el jugo fue
neutralizado con H2SV4 comercial, pasteurizado y nuevamente filtrado hasta obtener
el jugo clarificado. En la hidrlisis por enzimas exgenas se tomaron 80 g de banano
verde que se maceraron con 250mL de buffer acetato 0.05M y pH 5.0. El material
resultante se someti a 2 atm y 121C por 1 hora en autoclave (All American model N
25). El jugo pre tratado se llev a 55C en bao mara, se someti a agitacin
mecnica, y se le agregaron 0.250 mL de cada uno de los enzimas amilolticos
(Termamyl 120L y Amylase AG 300L), se dej transcurrir la hidrlisis por espacio de 3
horas y finalmente se filtr. Este jugo clarificado fue utilizado para la fermentacin. En
la hidrlisis qumica se emple el mismo equipo empleado en el pre tratamiento
anterior a las mismas condiciones de volumen, presin y temperatura con cido
sulfrico al 0.5% y durante 30 minutos (Baret, 2003). El jugo fue entonces
neutralizado a pH 5.5, filtrado y utilizado para la fermentacin. Todos los ensayos
fueron realizados por triplicado. El ensayo con mejores contenidos de alcohol fue
repetido a una escala superior en un reactor con capacidad nominal de 20L hasta
completar un total de 15 repeticiones.
Fermentaciones
Las fermentaciones se llevaron a cabo en dos niveles dependiendo del tamao del
fermentador. En el primer nivel se utiliz un fermentador de 1 L equipado con sistema
de agitacin mecnico y fue til para comparar las metodologas de hidrlisis y
extraccin de jugos. Los ensayos fueron realizados por triplicado.
En el nivel II se utiliz un fermentador de capacidad 20 L equipado con sistema de
agitacin hidrulica.
El microorganismo empleado para la fermentacin fue la levadura Saccharomyces
cerevisiae (Mauripan ), activada en agua a 37C durante 30 minutos. Las
fermentaciones se realizaron a temperatura ambiente (25C) y por un periodo de 48
horas. El etanol presente en el fermento fue cuantificado por cromatografa de gases.
Los fermentos fueron destilados a presin atmosfrica. Las condiciones a las que
fueron realizadas las fermentaciones en los niveles I y II son presentadas en la tabla 1.
Tabla 1. Parmetros fisicoqumicos y microbiolgicos para fermentaciones en nivel I y
II

Las vinazas resultantes de la destilacin del alcohol fueron analizadas y sometidas a


digestin anaerobia en un reactor discontinuo con capacidad de 5.0 L. La produccin
de biogs fue realizada con y sin inoculo. Cuando se utiliz inoculo, se empleo a una
concentracin del 10% en peso de porquinaza (excretas de cerdo) o rumen, con
respecto a los slidos totales en la vinaza. El proceso se realiz con y sin control de pH.
Los ensayos fueron realizados por triplicado. El biogas producido se hizo pasar por dos
trampas (para cido sulfhdrico y CV2 y posteriormente se le realiz prueba de
ignicin.

RESULTADOS Y DISCUSION
Las caractersticas fisicoqumicas ms importantes de la materia prima (fruta verde),
se aprecian en la tabla 2 .
Del anlisis de la tabla 2 se deduce que la fruta de banano se caracteriza por poseer
alta humedad y un significativo contenido de materia orgnica representado por una
importante cantidad de almidn (Aurorea, 2009; Prabha and Bhagyalakshmi, 1998).
Hay poca presencia de azcares fermentables tal y como lo demuestran los anlisis de
Bx y los azcares reductores. Adicionalmente el bajo contenido de nitrgeno indica
una baja presencia de protena.
Tabla 2. Propiedades fisicoqumicas del banano verde.
* Capacidad de Retencin de Agua. ** miliMolar.

La hidrlisis del almidn presente en el banano debe ser considerado como el paso
clave para la produccin de etanol. En ste paso ocurre la conversin de amilosa y
amilopectina a azcares fermentables que posteriormente pueden ser convertidos a
etanol por levaduras y bacterias (Mojovic et al, 2006)
La figura 1 muestra los resultados que se obtienen al evaluar los diferentes procesos
de hidrlisis con respecto a los slidos solubles (Bx) y el etanol producido. Si se
considera una concentracin de carbohidratos en el banano completo, cercana al 29%
(Aurorea, 2009). En trminos de los Bx la hidrlisis cida ofrece aproximadamente un
95% de conversin de los carbohidratos, mientras que la hidrlisis endogena alcanza
un 60% y la exogena un 45%. En principio y a partir del referente de la refractometra,
dos de los procesos pueden ser tenidos en cuenta para un segundo nivel de anlisis: La
hidrlisis cida y la hidrlisis enzimtica endgena.
Dado que no adecuado tener como nico criterio de decisin el poder hidroltico, esto
se complement con la capacidad de convertir el producto hidrolizado en alcohol,
evalundose mediante cromatografa de gases, para as definir el protocolo ms
adecuado. En este sentido, los rendimientos de la hidrlisis cida son bajos, dado que
no superan el 4% de alcohol, hecho que no se compadece con lo esperado segn los
Bx alcanzados en la hidrlisis. Esto se atribuye a la degradacin de los azcares
fermentables hasta llegar a furfural durante la hidrlisis (Davis. L., et al 2005; Nigam J.
N., 2001). Esto contrasta significativamente con lo que se presenta en el caso de la
hidrlisis endgena donde se obtienen valores de alcohol que en promedio se acercan
al 7.0% (V/V).
En sta primera etapa cabe anotar que si todos los carbohidratos presentes en el
banano fueran convertidos a azcares fermentables y estos posteriormente a etanol

con la mayor eficiencia, se deberan obtener aproximadamente 0.170 L de etanol por


cada kg de banano. Esto sin tener en cuenta que parte de la celulosa (hemicelulosa)
est conformada por varios tipos de pentosas que no son susceptibles de degradar por
la levadura Saccharomyces cerevisiae que fue utilizada para ste estudio.

Fig 1: Efecto del tipo de hidrlisis sobre los Brix y la concentracin final de etanol
Tomando como base estos resultados en la figura 1 , se opt por continuar los
experimentos con un jugo formulado a partir de hidrlisis con enzimas endgenos y
posterior extraccin con lechada de cal (Ca(VH)2). No solo por el contenido de alcohol
en el fermento, sino por viabilidad tcnica y econmica ya que no es necesario comprar
enzimas o equipos que trabajen a altas temperaturas. Para realizar el escalado a
volmenes de 20 L, se realiz la hidrlisis por induccin con enzimas endgenas en
una cmara de maduracin. El jugo fue obtenido siguiendo el protocolo previamente al
nivel de 1L y guardando las proporciones. Las propiedades fisicoqumicas del jugo
producido a partir del banano hidrolizado por los enzimas endgenos y extrado con
lechada de cal, se presentan en la tabla 3 . Cabe destacar la baja concentracin de
Nitrgeno y Fosforo y la alta concentracin de Azufre y Calcio en el jugo, debida
principalmente a la adicin de Ca(VH)2 en el proceso de extraccin y posterior
neutralizacin con H2SV4. La cantidad de slidos solubles (15.5 Bx) en el jugo, fue
considerada adecuada porque una fermentacin ptima producira concentraciones de
alcohol cercanas al 9.0% (V/V) en el fermento e impidiendo la inhibicin por sustrato.
Para las 15 fermentaciones ms representativas a volmenes de 15 L, se obtuvieron
los resultados que se presentan en la tabla 4 .
Al correlacionar las diferentes variables estudiadas, se obtienen los valores que se
presentan en la matriz de correlacin que corresponde a la figura 2 . De aqu se
desprende dos hechos a destacar: 1) En la correlacin de las variables Bx y %Alcohol,

para valores altos en Bx se pierde la linealidad. Esto implica que la produccin de


alcohol no es de dependencia nica del nivel de azcares presentes en el jugo y que
existen otras variables como por ejemplo vitalidad celular, que juegan un papel
determinante en la optimizacin de los procesos de fermentacin (Rodrguez-Porrata et
al., 2008). 2) El comportamiento asinttico en la produccin del jugo a partir de la
fruta disponible, se interpreta como una tendencia a la saturacin en la capacidad
extractante del solvente, lo que tiene trascendencia en la estimacin del rendimiento
mximo. Una forma ms expedita de visualizar estos hechos se da mediante la
formulacin de las variables derivadas, tal y como se indica en latabla 5 .
Tabla 3: Propiedades fisicoqumicas del jugo de banano.
* Electroforesis capilar ** Mtodo desarrollado por el GIEM.

Tabla 4: Parmetros estadsticos de las fermentaciones

Fig. 2: Correlaciones entre variables bsicas en fermentaciones de jugos


Tabla 5. Rendimientos y parmetros estadsticos de la produccin de alcohol a partir
de banano de rechazo.

De la tabla 5 se tiene que por cada kilogramo de fruta se formula en promedio 0.96
litros de jugo y que por cada litro de jugo se obtienen en promedio 53.3 g de alcohol;
lo que en principio se puede considerar un rendimiento significativo. Sin embargo,
debe tenerse en cuenta que la produccin de etanol es funcin de la presencia de
azcares fermentables y que estos a su vez se relacionan con los Bx.
El valor mximo de alcohol obtenido en la fermentacin fue de 0.12 L de alcohol/ Kg de
banano lo que no est lejano del 0.17 propuesto como mximo terico dado que
representa el 70%. Si bien es difcil pensar en superar este mximo experimental
obtenido, si se tiene en cuenta que la hidrlisis endgena afecta principalmente al
material amilceo y no al celulsico presente en la cscara, se requiere trabajar en
mejorar el valor promedio (0.065 L de etanol / Kg de fruta) dado que este valor solo
representa el 40% del valor estequiomtrico. Adems debe tenerse en cuenta que la
extraccin de los azcares fermentables es susceptible de mejorar.
En la figura 3 se evidencia que dadas las condiciones de la fruta se pueden obtener
jugos de muy diferente concentracin de azcares, lo que se traduce en sistemas de
alta, media y baja productividad de alcohol. La alta productividad est representada
por fermentaciones que en promedio obtienen 0.11 (L) de alcohol por cada kilogramo
de fruta, siempre y cuando el jugo en promedio posea 15.5 Bx. Un hecho significativo
que tambin est relacionado con la figura 3 es que el alto contenido de azcares
fermentables no es garanta de una buena fermentacin. Este hecho es actualmente
objeto de estudio para tratar de establecer las razones por las cuales a pesar de poseer
un adecuado nivel de azcares fermentables y condiciones ptimas de fermentacin
tales como agitacin, pH, temperatura, poblacin de levaduras y viabilidad, en algunos
casos se obtienen rendimientos significativamente menores de alcohol.
Cabe recordar que la cantidad de etanol obtenido a partir de caa de azcar es de
0.086 L de etanol por Kg de caa de azcar (BNDES y CGEE, 2008), por lo tanto los
rendimientos obtenidos en el caso del banano son muy promisorios.

Fig 3: Anlisis de clster para las relaciones entre Brix y % etanol en las
fermentaciones
Las vinazas producidas durante la destilacin del fermento estuvieron en una
proporcin de 12 a 14 L de vinaza por Litro de alcohol producido. Este volumen de
vinaza es muy parecido al obtenido cuando se emplea jugo de caa para la formulacin
del mosto (BNDES y CGEE, 2008).
Para la produccin de biogs, se procedi a determinar la composicin de la vinaza de
banano y adems compararla con la de caa de azcar cuando se emplea miel en la
formulacin del jugo. En la tabla 6 se muestran parmetros fisicoqumicos de ambas
vinazas.
Tabla 6. Anlisis fisicoqumico de vinazas de caa y banano. ST: slidos totales; CO:
carbono orgnico

De acuerdo a la tabla 6 , la concentracin de carbono orgnico es cuatro veces ms


alta en la vinaza de caa, obtenida de jugos formulados con miel que la
correspondiente al banano, por lo tanto se esperar menor produccin de biogs en
sta ltima. Adems el % de Nitrgeno tambin es mucho mayor en la vinaza de caa.
La produccin de biogs a partir de vinaza de banano es presentada en la tabla 7 .
Donde se pueden observar los rendimientos dependiendo de la naturaleza del inoculo y
adems los comportamientos cinticos. Los porcentajes corresponden al aumento de la

eficiencia respecto al ensayo sin inoculo. Cuando el reactor fue inoculado con
porquinaza y rumen, los rendimientos aumentaron en 115% y 125% respectivamente.
Igualmente la velocidad aumento en un 15 y 20%. Debe reconocerse la importancia
del inoculo en ste proceso, que permiti aumentar la velocidad y los rendimientos.
Cabe anotar que el control de pH no tuvo mayor efecto sobre los resultados finales.
Tabla 7. Efecto del inoculo sobre la produccin de biogs a partir de vinazas de
banano

Los rendimientos de biogs (2.24 L) por cada litro de vinaza de banano son
proporcionales al biogs obtenido de vinaza de caa en donde para slidos de 16.8%
se obtienen como mximo 9 L de biogs (BNDES y CGEE, 2008).

CONCLUSIONES
La hidrlisis endgena y la extraccin con cal, presenta grandes ventajas con respecto
a las otras hidrlisis y extracciones evaluadas, porque este tipo de proceso puede ser
utilizado a mayor escala por su bajo costo y viabilidad. La concentracin promedio de
alcohol alcanzada en los ensayos, permite concluir que los rendimientos son levemente
ms bajos que los obtenidos con caa de azcar. El volumen de biogs obtenido a
partir de las vinazas de banano es comparable e incluso proporcionalmente superior al
obtenido a partir de las vinazas de caa de azcar.

AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen a Colciencias, al Ministerio de Agricultura de Colombia y a la
Universidad de Antioquia la financiacin del presente trabajo.

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Recibido Ago. 25, 2011; Aceptado Oct. 12, 2011; Versin Final recibida Nov. 03, 2011