Tincin de May-Grnwald Giemsa

La tincin de May Grnwald-Giemsa (MGG) es una

tcnica de tincin derivada del mtodo de Romanowsky
que se utiliza principalmente para el coloreo de muestras
de frotis sanguneos o extendidos de mdula sea. Como
el resto de las coloraciones basadas en la tcnica de Romanowsky, la tcnica MGG permite diferenciar cualitativa y cuantitativamente los principales elementos formes
de la sangre.

Los componentes celulares que tienen anidad por ambos

tipos de colorantes se denominan neutrlos y se tien en
variados tonos de violeta.

En los laboratorios clnicos de hematologa resulta especialmente til para la demostracin de alteraciones en el
nmero, proporcin y morfologa de las clulas sanguneas. Tambin puede ser adaptada para su utilizacin como una tcnica de tincin clsica para cortes histolgicos.

Los citoplasmas de las clulas maduras aparecen de

un color violeta muy plido o marrn muy plido.

Resultado:
Los ncleos aparecen en colores que van del color
azul al prpura-negro.

Los glbulos rojos, ricos en hemoglobina aparecen

de colores entre rosados y beige.
Los grnulos de los neutrlos aparecen de colores
entre violeta y marrn.

Principio de la coloracin

Los grnulos de los eosinlos aparecen de color naranja.

Como su nombre lo indica, la tcnica combina las tcnicas de coloracin desarrolladas por May-Grnwald y
Giemsa. Estas tcnicas a su vez se basan en el empleo de
dos soluciones colorantes:

Los grnulos de los baslos de color entre azul y

negro.
Los grnulos de los linfocitos grandes aparecen de
color prpura.

La solucin de May-Grnwald, que contiene el colorante ninico eosina y el colorante catinico azul
de metileno ambos disueltos en metanol

Las clulas con gran produccin de ARN (como linfocitos productores de inmunoglobulinas y clulas
inmaduras) presentan un citoplasma de color azul
intenso.

La solucin de Giemsa, que contiene eosina, azul de

metileno y una serie de productos de la oxidacin de
este ltimo tales como el azur A, el azur B, el violeta
Cabe destacar que las coloraciones nales obtenidas son
de metilo y el azul de metilo.
muy dependientes del pH de las soluciones de tincin y
de las soluciones de lavado, por lo que los tonos pueden
Todos estos colorantes se encuentran en estado no ioniza- variar bastante, teniendo un aspecto mas verdoso cuando
do mientras se mantienen en solucin de alcohol metlico, el pH nal obtenido es cercano a 5 y un tono rojizo cuando
pero al aadir agua se ionizan y se unen selectivamente el pH nal es cercano a 9. Para evitar estos efectos se
a los constituyentes celulares precipitando como sales in- suelen utilizar soluciones amortiguadoras de pH neutro
solubles.
para preparar las soluciones de tincin y las soluciones de
Los componentes celulares de naturaleza aninica (cida) lavado.
se unen selectivamente a los tintes catinicos tindose en
variados tonos de azul. Estos componentes son llamados
baslos: (ADN, mitocondrias, ribosomas y citoplasma
de clulas ricas en ARN).

2 Particularidades

Los componentes celulares de naturaleza catinica (bsicos) se unen selectivamente al tinte cido eosina, tindose en variados tonos de naranja y rojo. A estos elementos
se los denomina acidlos o eosinlos. Este es el caso
de la hemoglobina, y de las protenas contenidas en las
granulaciones de los granulocitos eosinlos.

Dos tipos de comportamiento tintorial coexisten en esta

coloracin: Por un lado est el comportamiento ortocromtico, en este caso el tinte conserva el color cuando se
ja al componente celular. Este es el caso del eosinato de
metileno, aqu el color naranja de la eosina se conserva y
el color del azul de metileno se conserva.
1

Por otro lado est el comportamiento metacromtico, en

este caso el tinte cambia de color una vez unido al componente celular. Es lo que ocurre con los derivados del azul
de metileno. Los azure A y B originalmente de intenso
color azul se convierten en prpuras cuando se unen a los
componentes celulares azurlos.

ENLACES EXTERNOS

3.4 Tincin con Giemsa

La solucin de Giemsa es inestable una vez diluida en

agua, por lo que conviene prepararla inmediatamente antes de su uso, usualmente se prepara haciendo una dilucin 1:10 de la solucin comercial en agua destilada tamponada con fosfatos a pH 7,2. Se cubren los portaobjetos
Las diluciones de las soluciones de tincin y los lavados
con la solucin de Giemsa recin preparada y se dejan
deberan hacerse con una solucin tamponada a pH 7,2teir por espacio de 15 a 20 minutos, transcurridos los
7,3 (pH prximo al siolgico) para no perturbar las acuales se retira el colorante se lavan los portaobjetos con
nidades de tincin de los constituyentes celulares.
la solucin tamponada y se dejan escurrir en posicin vertical hasta que estn completamente secos.

Tcnica

3.5 Observacin

EL procedimiento descrito a continuacin es simplemenSe hace en microscopio ptico de gran aumento con obte a ttulo informativo. Debe ser adaptado de acuerdo a
jetivo de inmersin en aceite, esto permite ver detalles de
las especicaciones del fabricante de los colorantes y a
la cromatina de los ncleos y dilucidar correctamente las
los resultados obtenidos.
estructuras observadas.

3.1

Fijacin

El primer paso es jar las clulas sanguneas presentes en

el frotis. La jacin es un proceso sicoqumico que altera las propiedades qumicas de las protenas que forman
las clulas, para que luego resistan el proceso de teido
preservando la estructura que tenan cuando estaban vivas. En la tcnica de May-Grnwald/Giemsa la jacin
la hace el metanol de la solucin de May-Grnwald. Para
jar se colocan los vidrios con los frotis horizontalmente
en una parrilla o en una caja de coloracin y se vierten
unas 20 gotas de solucin sobre cada uno hasta que los
frotis queden completamente cubiertos. Se mantienen as
durante 2 o 3 minutos para que el metanol je las clulas.

3.2

Tincin con May-Grnwald

Simultneamente al proceso de jacin, tanto el azul de

metileno como la eosina habrn permeado todos los compartimientos celulares, pero los colorantes no se podrn
unir a sus respectivas estructuras anes hasta que la solucin se convierta en polar, esto se consigue agregando
lentamente agua, permitiendo as que los colorantes precipiten selectivamente.

3.3

Lavado y rehidratacin

La solucin de Giemsa es mucho ms polar que la solucin de May-Grnwald, y para permitir que acte correctamente es conveniente que el preparado se encuentre
convenientemente rehidratado, luego de haber aadido el
agua a la primera solucin se lavan los vidrios con un chorro de agua tamponada y luego se cubren con la misma
solucin de lavado durante un minuto, para permitir una
correcta rehidratacin.

4 Bibliografa
ARP, ed. (1992). Mtodos Histotecnolgicos. Instituto de patologa de las Fuerzas Armadas de los
EEUU (AFIP).

5 Enlaces externos
Mtodo de May Grnwald Giemsa
Tincin de las extensiones de sangre perifrica
Imagen de una tincin de May Grnwald-Giemsa de
neutrlos
Imagen de una tincin de May Grnwald-Giemsa de
sangre perifrica

Origen del texto y las imgenes, colaboradores y licencias

6.1

Texto

Tincin de May-Grnwald Giemsa Fuente: https://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_May-Gr%C3%BCnwald_Giemsa?oldid=

86738069 Colaboradores: CEM-bot, Rosarinagazo, Gonn, Pedro Felipe, J3D3, Poco a poco, Ppefelipe.prox08, Xqbot, EmausBot, KLBot2
y Annimos: 2

6.2

Imgenes

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Archivo:Eosinophil_and_polymorphonuclear_neutrophil.jpg
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Eosinophil_and_polymorphonuclear_neutrophil.jpg Licencia: Public domain Colaboradores: I made this picture. Artista original:
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BY-SA 3.0 Colaboradores: Trabajo propio Artista original: Lacrp

6.3

Licencia del contenido

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