METHOD #: 352.

1
1971)

Approved for NPDES and SDWA (Issued

TTULO:

Nitrgeno, Nitrato (colorimtrico, Brucina )

ANALITO:

CAS # 7727-37-9 N Nitrgeno

N03 Nitrato

INSTRUMENTACIN:
STORET No.

Espectrofotmetro
Total 00620

1.0 Alcance y aplicacin

1.1 Este mtodo es aplicable al anlisis de aguas potables, de superficie y
salinas, los desechos domsticos e industriales. La modificacin puede
hacerse para eliminar o corregir para la turbidez, color, salinidad, o
compuestos orgnicos disueltos en la muestra.
1.2 El rango de aplicacin de concentraciones es de 0,1 a 2 mg N03-N/liter .
2.0 Resumen del mtodo
2.1 Este mtodo se basa en la reaccin del ion nitrato con sulfato de brucina
en una solucin 13 N H2S04 a una temperatura de 100 C. El color del
complejo resultante se mide a 410 nm . El control de temperatura de la
reaccin de color es extremadamente crtica.
3.0 Tratamiento de muestras y conservacin
3.1 El anlisis debe hacerse tan pronto como sea posible. Si el anlisis se
puede hacer dentro de 24 horas, la muestra debe ser preservada por
refrigeracin a 4 C. Cuando las muestras se deben almacenar ms de 24
horas, debern ser conservados con cido sulfrico ( 2 ml conc . H2S04 por
litro) y la refrigeracin.
4.0 Interferencias
4,1 materia orgnica disuelta producir un color apagado en 13 N H2S04 y
debe ser compensado por adiciones de todos los reactivos excepto el
reactivo de cido sulfanlico - brucina. Esto tambin se aplica al color natural
presente no se debe a compuestos orgnicos disueltos.
4.2 El efecto de la salinidad se elimina por adicin de cloruro de sodio a los
espacios en blanco, los estndares y muestras.
4.3 Todos los agentes oxidantes fuertes o reductores interfieren. La
presencia de agentes oxidantes puede ser determinada con un kit de
prueba de cloro residual total.
4,4 interferencias de cloro residual se eliminan mediante la adicin de
arsenito de sodio.

4,5 ferroso y manganeso de hierro y tetravalentes frricos dan

interferencias ligeramente positiva, pero en concentraciones de menos de 1
mg / L de stos son insignificantes.
4,6 El calentamiento desigual de las muestras y los estndares durante el
tiempo de reaccin resultar en valores errticos. La necesidad de un
control absoluto de la temperatura durante el perodo de desarrollo de color
crtico no es exagerada.
5.0 Aparato
5.1 Espectrofotmetro o fotmetro de filtro adecuado para la medicin de la
absorbancia a 410 nm .
5.2 Nmero suficiente de 40 a 50 ml tubos de muestra de vidrio para los
blancos de reactivo, estndares y muestras.
5.3 neopreno recubierto bastidores de alambre para sujetar los tubos de
muestra.
5.4 Bao de agua adecuado para su uso a 100 C. Este bao debe contener
un mecanismo de agitacin de manera que todos los tubos estn a la misma
temperatura y deben tener la capacidad suficiente para aceptar el nmero
necesario de tubos sin cada significativa en la temperatura cuando se
sumergen los tubos.
5.5 Bao de agua adecuada para el uso a 10-15 C.
6.0 Reactivos
6,1 Agua destilada libre de nitrito y nitrato se va a utilizar en la preparacin
de todos los reactivos y estndares.
6,2 Solucin de cloruro de sodio 6,2 ( 30 % ) : Disolver 300 g de NaCl en
agua destilada y se diluye hasta 1 litro.
6.3 Solucin de cido sulfrico: Aadir con cuidado 500 ml conc . H2S04 a
125 ml de agua destilada. Enfriar y mantener bien cerrado para evitar la
absorcin de humedad atmosfrica.
6.4 reactivo de cido sulfanlico Brucina - : disolver 1 g de sulfato de brucina
[( C23H26N204 ) 2 H2S04 7H20 ] y 0,1 g de cido sulfanlico
( NH2C6H4S03H * H20 ) en 70 ml de agua destilada caliente . Aadir 3 ml
conc. HCl, fresco, mezclar y diluir hasta 100 ml con agua destilada.
Almacenar en una botella oscura a 5 C. Esta solucin es estable durante
varios meses; el color rosa que se desarrolla lentamente no afecta a su
utilidad. Rotular la botella con la advertencia: ADVERTENCIA: Brucina Sulfato
es txico: tener cuidado para evitar la ingestin.
6,5 Solucin de nitrato de potasio 6,5 existencia: 1,0 ml = 0,1 mg N03 -N.
Disolver 0,7218 g de nitrato de potasio anhidro ( KN03 ) en agua destilada y

se diluye hasta 1 litro en un matraz aforado . Preservar con 2 ml de

cloroformo por litro. Esta solucin es estable durante al menos 6 meses.
6,6 Potasio nitrato solucin estndar: 1,0 ml = 0,001 mg N03 -N. Diluir 10,0
ml de la solucin madre ( 6.5 ) a 1 litro en un matraz aforado. Esta solucin
patrn deber prepararse semanalmente fresco.
6,7 cido actico ( 1 + 3 ) : Diluir 1 volumen de cido actico glacial
( CH3COOH ) con 3 volmenes de agua destilada .
6,8 Hidrxido de sodio (1N) : Disolver 40 g de NaOH en agua destilada.
Enfriar y diluir hasta 1 litro.
7.0 Procedimiento
7.1 ajustar el pH de las muestras a aproximadamente a 7 con cido actico
(6.7) o hidrxido de sodio (6.8). Si es necesario, se filtra para eliminar la
turbidez.
7.2 Establecer el nmero requerido de tubos de muestra en el rack para
manejar los reactivos, el blanco, los estndares y las muestras. Los
Espacios entre los tubos debe ser uniforme a lo largo del bastidor para
permitir el flujo de agua de bao entre los tubos. Esto debera ayudar a
lograr un calentamiento uniforme de todos los tubos.
7.3 Si es necesario corregir el color o la materia orgnica disuelta que har
que el color de la calefaccin, se debe ejecutar un conjunto de duplicados
de las muestras a las que se han aadido todos los reactivos, excepto el
cido sulfanlico brucina.
7.4 Pipetear 10,0 ml de estndares y muestras o una parte alcuota de las
muestras diluidas a 10,0 mL - en los tubos de muestra.
7.5 Si las muestras son salinos, aadir 2 ml de la solucin de cloruro de
sodio al 30 % (6,2) al blanco, estndares y muestras. Para las muestras de
agua dulce, la solucin de cloruro de sodio se puede suprimir. Mezcle los
contenidos de los tubos por turbulencia y colocan el estante en el bao de
agua fra (0 - 10 C).
7.6 pipetear 10,0 ml de solucin de cido sulfrico (6.3) en cada tubo y
mezclar por agitacin. Permitir que los tubos lleguen al equilibrio trmico en
el bao fro. Asegrese de que las temperaturas estn equilibrada en todos
los tubos antes de continuar.
7.7 Aadir 0,5 ml de reactivo de cido sulfanlico brucina (6,4) a cada tubo
(excepto los tubos de control de interferencia , 7.3) y mezclar
cuidadosamente por turbulencia, a continuacin, coloque el bastidor de
tubos en el bao de agua a 100 C durante exactamente 25 minutos.
PRECAUCIN : Inmersin de la gradilla de tubos en el bao no debe
disminuir la temperatura del bao de ms de 1 a 2 C. Con el fin de

mantener esta disminucin de la temperatura a un mnimo absoluto , el flujo

de agua del bao entre los tubos no debe ser restringido por el
hacinamiento demasiados tubos en el rack. Si el desarrollo del color en las
normas revela discrepancias en el procedimiento , el operador debe repetir
el procedimiento despus de revisar los pasos de control de temperatura .
7.8 Eliminar bastidor de tubos del bao de agua caliente y sumergirse en el
bao de agua fra y permita que alcance el equilibrio trmico ( 20-25 C).
7.9 Leer la absorbancia frente al blanco de reactivo a 410 nm usando un 1
cm o clula ya .
8.0 Clculo
8.1 obtener una curva de calibracin graficando la absorbancia de los
estndares de gestin mediante el procedimiento anterior contra mg N03 -N
/ L. ( La reaccin de color no siempre sigue la ley de Beer ' ) .
8.2 Restar la absorbancia de la muestra sin el reactivo-brucina sulfanlico
partir de la absorbancia de la muestra que contiene cido sulfanlico brucina
y determinar mg N03-N / L. Multiplicar por un factor de dilucin apropiado si
se toma menos de 10 ml de muestra.
9.0 Precisin y exactitud
9.1 Veintisiete analistas en quince laboratorios analizaron muestras de agua
naturales que contiene incrementos exactos de nitrato inorgnico , con los
siguientes resultados :
Incremento de precisin como lo Precisin como
El nitrgeno, nitrato Desviacin Estndar Bias, Bias,
mg N / litro mg N / litro % mg N / litro
OD 02 TOT0 . 19 0,083 8,30 0,02
1,8 0,245 4,12 0,04
1,24 0,214 2,82 0,04
( FWPCA Estudio Mtodo 2 , Anlisis de Nutrientes ) .
bibliografa
1 . Mtodos estndar para el Anlisis de Aguas y Aguas Residuales , 14
Edicin , pgina 427 , Mtodo 419D ( 1975 ) .
2 . Annual Book of ASTM Standards , Parte 31 , "Agua" , la Norma D 992-71 ,
p 363 ( 1976 ) .

3 . Jenkins , D., y Medsken , L., " Un Mtodo Brucina para la Determinacin

de nitrato en el ocano , de estuario , y las Aguas Dulces " , Anal Chem . , 36
, p 610, (1964).