ESPECTROSCOPIA VISVEL E ULTRAVIOLETA

Os mtodos espectrofotomtricos so baseados nas medidas da transmitncia ou absorbncia

de uma radiao monocromtica que atravessa uma soluo contendo uma espcie absorvente
e a relao entre estas medidas e a concentrao da espcie absorvente. A relao matemtica
entre a transmitncia ou absorbncia e a concentrao conhecida como Lei de Lambert Beer ou simplesmente Lei de Beer.
A espectroscopia de absoro UV-Vis utiliza radiao eletromagntica cujos
comprimentos () se encontram na faixa de 200 a 780 nm. Quando estimulada com esse tipo
radiao, a molcula do composto pode sofrer transies eletrnicas por ocasio da absoro
de energia quantizada. O registro grfico da resposta do sistema ao estmulo denomina-se
espectro eletrnico de absoro.
O princpio de funcionamento esta baseado em uma clula de faces planas e paralelas,
separadas pela distncia b, contendo soluo de concentrao c de uma espcie absorvente.
Radiao monocromtica de poder radiante P0 incidente numa das faces da clula, apresenta
um valor P apos atravessar o percurso b no interior da soluo. Como ocorreu absoro de
energia radiante, tem-se P<P0. Assim pela lei de Beer determina-se a absorbancia.
Esse mtodo se aplica em compostos orgnicos e inorgnicos basta que:
Nos inorgnicos, o comprimento de onda de absoro das transies d-d depende
do metal envolvido, do nmero de grupos coordenados, da basicidade, dos tomos doadores e
da geometria dos grupos coordenados.
Nos compostos orgnicos, os que possuem dupla ligao absorvem fortemente no
ultravioleta remoto. Os compostos que possuem ligaes simples e duplas alternadamente,
chamadas de ligaes conjugadas, produzem absoro em comprimentos de ondas maiores.
Quanto mais extenso for o sistema conjugado, mais longos sero os comprimentos de onda
absorvidos, podendo chegar regio do visvel.
As vantagens do metodos esto ligados com a facilidade de execuo em comparao
com outros metodos de analise; h uma grande variedade de substancias orgnicas e
inorganicas que absorvem nas zonas do visivel e ultravioleta; e um metodo reprodutivel.
As desvantagens esto associadas com o facto de haver desvios na lei de Beer
nomeadamente: interao dos centros absorventes da molecula entre si ou com outras
especies; variao do indice de refreo com variao da concentrao; alterao da posio
de equilibrio quimico entre especies absorventes por diluio e absoro de radiao
policromatica ou seja radiao com largura efetiva de banda relativamente larga.

Age, bruno samuel |MIA 2016

A intrumentao para esta tecnica so simples e baratos (algumas centenas de

dolares), e por outro lado os computacionais um pouco mais complexos que do informao
mais detalhada podendo custar US$ 30 mil ou mais.
Anlise qualitativa: Realiza-se a comparao de espectros da amostra com os de
vrias substncias (mximos, mnimos e pontos de inflexo); - Grupos funcionais (anel
aromtico, -CO) e banda caracterstica.
Anlise quantitativa: Baseia-se na relao Absorvncia versus Concentrao (Lei de
Lambert e Beer); Processamento dos dados: Mtodo da curva de calibrao, padro interno e
mtodo de adio de padro.
O espectro UV-Vis um espectro de absoro um grfico mostrando como A (ou
) varia com o comprimento de onda. Em que os comprimentos de onda esto no intervalo
de 160 a 780nm.
A determinao simultnea se h uma mistura de substncias e cada uma com seu
espetro, o espetro desta ser a soma dos espectros individuais dos componentes da mistura.
Se isto acontece, as substncias absorventes numa mistura no reagem sendo desejvel que
cada componente obedea a lei de Beer pra cada comprimento de onda.
H um caso muito simples em que cada substncia presente na mistura d uma banda de
absoro, que inteiramente distinta da de qualquer outro componente. Este caso trata-se do
mesmo modo que a anlise de um s componente, repetida tantas vezes quantas as
substncias absorventes que se queriam determinar na amostra.
Se no h interao entre os dois componentes, a absorvancia da mistura a qualquer
comprimento de onda ser simplesmente a soma das absorvancias.
Exemplos: Especies orgnicas- Cafeina, A.A. salcilico;CH3OH; CH3NH2; (CH3)2O; CH3I.
Especies inorgnicas- ies permanganato; nitrato;cromato e iodo molecular.
Lei de Beer
Esta equao d a relao entre a intensidade da luz incidindo na soluo (I0), e a intensidade
da luz saindo da soluo (I).
Log (I0/ I) =A=abc
A= absorbncia; a= absorvidade molecular ou coeficiente de extino; c= concentrao do
material absorvedor; b= espessura da amostra da amostra atravs da qual a luz passa.
A lei de Beer tem algumas limitaes reais, visto que s se aplica em solues muito
diludas, geralmente inferiores a 10-2 ou 10-3M, o que ser devido a dois motivos:

Age, bruno samuel |MIA 2016

a) A distncia media entre as especiais responsveis pela absoro diminui como

aumento da concentrao.
b) Para concentraes bastante elevadas h uma variao do ndice de refrao da
soluo.

vlida para radiao monocromtica;

varia com o ndice de refraco.

Curva de calibrao
A concentrao determinada por interpolao. Depois de localizar o comprimento de onda
apropriado para a medio da absorvncia da substancia que se pretende determinar, vamos
ver se o sistema segue a lei de Beer, o que se consegue a partir da representao grfica de
valores de absorvncia para um dado numero de solues-padro, em funo da sua
concentrao. Seguidamente traa-se a melhor reta que passa pelos pontos experimentais
atravs do tratamento dos mnimos quadrados.
As vantagens esto ligadas com que o mtodo rpido; apenas uma curva de
calibrao para varias amostras; custos de operao reduzidos.
As desvantagens do mtodo de calibrao no caso de no haver linearidade entre os
pontos a lei de Beer sempre deve estar comprida.
Adio de padro
Aqui a concentrao determinada por extrapolao. Usamos o mtodo das adies de
padro quando for difcil ou impossvel fazer uma cpia da matriz da amostra. Em geral, a
amostra contaminada com uma quantidade ou quantidades conhecidas de uma soluo
padro contendo o anolito. No mtodo das adies de padro de um nico ponto, duas
pores da amostra so tomadas. Uma poro medida como de costume, mas uma
quantidade conhecida da soluo padro adicionada segunda poro. As respostas para as
duas pores so ento empregadas para calcular a concentrao desconhecida, assumindo-se
uma relao linear entre a resposta e a concentrao do anolito.
No mtodo das adies mltiplas so feitas as adies de quantidades conhecidas da
soluo padro do anolito a vrias pores da amostra e uma curva de calibrao com as
mltiplas adies obtida. O mtodo das adies mltiplas permite verificar se existe uma
relao linear entre a resposta e a concentrao do anolito.
A concentrao do anolito desta forma determinado por extrapolao em mtodo
grfico ou seja lugar na reta onde o valor de y zero no metodo estatistico. As vantagens
deste metodo estao ligados com a correcao dos erros que possam estar associados a
Age, bruno samuel |MIA 2016

diferenas entre os padres e a soluo problema; corrige alguma variao de alguma

propriedade que afecte o resultado mas que no seja detectavel. As desvantagens esto
ligadas com o facto de que os custos so elevados; fazer uma curva de calibrao por
amostra; muito tempo despendido.
Metodos estatisticos em analise quimica
A reta de regressao a reta construida no grafico, ou seja a melhor reta que pode ser tracada
graficamente, e rgresso ou correlao usa-se para estimar como melhor esto de forma linear
os pontos na reta.
O desvio padro nos indica qual o desvio que existe num determinado connjuto de
dados realizados.
O interlavo de confianca um interlavo numerico em que esta patente num certo
intervalo de numeros cujo o metodo pode ser aceite. E fora desse intervalo numerico ovalor
no aceite.
Metodo de Fluorescencia Molecular
Mtodo onde molculas so excitadas produzindo um espectro de emisso com informao
que permite a sua utilizao na anlise qualitativa e quantitativa.
A principal condio para que se produza a fluorescncia a existncia de uma
estrutura molecular absorvente quanto maior a absorvancia de uma molcula mais intensa
ser a sua fluorescncia.
A fluorescncia total de uma soluo depende do numero de molculas das substancia
fluorescente, o que constitu o fundamento dos mtodos quantitativos de analise por
fluorescncia. A lei de Beer estabelece que, dada a soluo de uma substancia absorvente, a
absorvancia diretamente proporcional a concentrao.
F= K. C
Onde: F- Emisso de fluorescncia; C-concentrao; K-constante instrumental.
A fluorescncia mais intensa e mais til encontrada em compostos contendo grupos
funcionais aromticos com nveis de transio

* de baixa energia. Compostos

contendo estruturas alifticas, aliciclicas carbonilicas ou estruturas de ligaes duplas

altamente conjugadas tambm podem apresentar fluorescncia.
Um dos aspectos mais atraentes dos mtodos de luminescncia a sua sensibilidade
intrnseca, com limites de deteo de uma a trs ordens de grandeza menores que os
encontrados em espetroscopia de absoro. Os limites de deteo tpicos esto na faixa de
partes por bilho.

Age, bruno samuel |MIA 2016

Outra vantagem dos mtodos fotoluminescentes a sua extensa faixa de concentrao

linear que com frequncia significativamente maior que as encontradas em mtodos de
absoro. Devido a sua alta sensibilidade os mtodos de luminescncia quantitativos esto
sujeitos a efeitos de interferncia srios das matrizes das amostras. Quanto a instrumentao
na absoro a leitura feita num angulo de 180, na fluorescncia 90.
Rendimento quntico
O rendimento quntico, ou eficincia quntica, para fluorescncia ou fosforescncia
simplesmente a razo do nmero de molculas que luminescem pelo numero de molculas
excitadas. Para uma molcula altamente fluorescente, como fluorescena a eficincia quntica
em algumas condies se aproxima da unidade. Espcies qumicas que no fluorescem
apreciavelmente rem eficincias qunticas que se aproximam de zero.
Limite de deteno
a quantidade mnima da concentrao do anolito que um mtodo pode conseguir detectar.
Os limites de deteo do mtodo de fluorescncia moleculares frequentemente de uma
a trs ordens de grandeza menores que os encontrados em espetroscopia de absoro. Os
limites de deteo tpicos esto na faixa de partes por bilho.
Construo de grficos de anlise Qumica
Curva de calibrao

Age, bruno samuel |MIA 2016

C(mol/l
)
0.00
0.25
0.51
0.75
1.00

A
0.000
0.093
0.127
0.230
0.320

Curva de calibrao
0.350
0.300
0.250

f(x) = 0.31x - 0
R = 0.98

0.200
0.150
0.100
0.050
0.000
0.00

0.20

Problema

C(mol/l)
Ca
0.00
K
0.25
Na
0.51
0.75
Mn

A
0.083
0.130
0.240
0.410

0.40

0.60

Matriz
Urina
Sangue

0.80

1.00

1.20

Tcnica

Emisso atmica: curva de calibrao

Fotometria de chama: emisso atmica

Sangue

Fotometria de chama: emisso atmica

Ao

Espetroscopia de Absoro atmica

Ni/Co

Minrio

Absoro molecular no UV-Vis

Quinina

Refrigerante

A.A. Saliclico

Comprimido

Pb

Agua

Fluorescncia molecular
Espetroscopia de Absoro molecular UVVis.
Espetroscopia de Absoro atmica:
chama.

Age, bruno samuel |MIA 2016

Adio de padro
0.450
0.400
0.350
0.300

f(x) = 0.43x + 0.05

R = 0.94

0.250
0.200
0.150
0.100
0.050
0.000
0.00 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70 0.80

Mtodos clssicos vs mtodos instrumentais

Mtodos clssicos: Baseiam-se na separao dos anolitos por: precipitao, extrao ou
destilao. Em anlise qualitativa figuram reaes especficas gerando produtos
caracterizados por cor, ponto de fuso ou ebulio, solubilidade. Em anlise qualitativa
figuram medidas volumtricas ou gravimtricas.
Mtodos instrumentais: baseiam-se em medidas fsicas dos anolitos: condutividade,
potencial de eltrodo, emisso ou absoro de luz. Tcnicas eficientes de cromatografia e
eletroforese substituram de precipitao, extrao e destilao.
Classificao dos mtodos opticos
Mtodos de Absoro ptica: so aqueles que se baseiam na medio da quantidade de
energia radiante de um certo comprimento de onda que absorvido pela amostra.
Na anlise quantitativa, o nmero de fotes absorvidos funo da concentrao ou
nmero de tomos, ies ou molculas das espcies absorventes. Na anlise qualitativa, os
comprimentos de onda absorvidos so caractersticas dos tomos, ies ou molculas que os
absorvem. As tcnicas usuais deste mtodo so: Espectrofotometria no visvel (calorimetria);

Age, bruno samuel |MIA 2016

Espectrofotometria no UV; Espectrofotometria no IR; Espectroscopia de absoro atmica:

envolve atomizao da amostra (pulverizao de uma soluo da amostra numa chama)
seguida da determinao da quantidade de luz absorvida; Turbidimetria: determina a
quantidade de luz absorvida por uma suspenso.
Mtodos de Emisso ptica so aqueles que se baseiam na emisso da energia radiante e da
medio da quantidade emitida com um certo comprimento de onda. Envolvem o tratamento
da amostra pelo calor ou pela electricidade, de modo que os tomos so promovidos a estados
excitados que proporcionam a emisso da energia; mede-se a intensidade dessa energia
emitida. As tcnicas usuais da excitao so: Espectroscopia de emisso, na qual a amostra
sujeita a um arco elctrico ou a uma centelha e examina-se a luz emitida; Fotometria de
chama, na qual uma soluo da amostra injetada uma chama; Fluorimetria, em que uma
substancia conveniente em soluo (comumente um complexo de reagente fluorescente com
um metal) excitado pela irradiao com luz visvel ou ultravioleta.
Espectrofotmetro (componentes bsicos)
Fontes de radiao

Monocromador

Compartimento
Amostra/padro

Dispositivo de processamentos de dados

Sistema detector

Fontes de radiao: intensidade de potncia radiante suficiente para permitir a sua

deteco pelo sistema detector da mquina.
Monocromador: seleo do comprimento de onda e que se tem interesse para a
anlise. constitudo de uma fenda de entrada de um elemento de disperso de radiao e de
uma fenda de sada.
Recipientes: So usados como recipientes cubas ou cubetas retangulares de vidro ou
quartzo.

Roteiro de uma analise quimica completa

1) Amostragem (homognea ou heterognea): Depende do tamanho e da atureza fisica da
amostra.
2) Escolha do mtodo analtico (instrumental ou clssico):
Age, bruno samuel |MIA 2016

3) Preparao da amostra (triturao, dissoluo, etc);

4) Medida da propriedade do analito (ptica, eltrica, massa, etc);
5) Tratamento de dados (calibrao por curva analtica, clculos, estatstico, etc);
6) Resultados (interpretao e apresentao)

Age, bruno samuel |MIA 2016