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UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS
ASIGNATURA DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

PRCTICA N 07
RECONOCIMIENTO DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

I. GENERALIDADES
Las enzimas generalmente son sustancias de naturaleza proteica que catalizan reacciones
bioqumicas. En estas reacciones, las enzimas
actan sobre unas molculas denominadas
sustratos, las cuales se convierten en diferentes
molculas, los productos. Casi todos los procesos
metablicos en las clulas necesitan enzimas. A las
reacciones mediadas por enzimas se las denomina
reacciones enzimticas. No todos los catalizadores
bioqumicos son protenas, pues algunas molculas
de ARN son capaces de catalizar reacciones (como
el fragmento 16S de los ribosomas en el que reside
la actividad peptidil transferasa).
Las enzimas funcionan disminuyendo la energa de activacin de una reaccin, de forma que
se acelera sustancialmente la tasa de reaccin. Las enzimas no alteran el balance energtico de las
reacciones en que intervienen, ni modifican, por lo
tanto, el equilibrio de la reaccin, pero consiguen
acelerar el proceso incluso millones de veces. Una
reaccin que se produce bajo el control de una
enzima, o de un catalizador en general, alcanza el
equilibrio mucho ms deprisa que la correspondiente
reaccin no catalizada.
Las enzimas son extremadamente selectivas
con sus sustratos. La especificidad de las enzimas
depende de las caractersticas del sitio o centro
activo; es decir, la regin de la enzima donde esta
se une al substrato antes de que ocurran las
transformaciones del substrato. El conjunto de
enzimas sintetizadas en una clula determina el
metabolismo que ocurre en cada clula. A su vez,
esta sntesis depende de la regulacin de la
expresin gnica.
La actividad de algunas enzimas depende solamente de su estructura como protenas,
mientras que otras necesitan, adems uno o ms componentes no proteicos, llamados cofactores. El
cofactor puede ser un ion metlico (Cu++, Zn++, Co+
+
), o bien una molcula orgnica. Esta puede unirse
qumicamente al enzima, denominndose, en este
caso grupo prosttico, o puede interaccionar
dbilmente durante el proceso de catlisis y se
llamar coenzima (la mayor parte de coenzimas son
vitaminas).
El
complejo
apoenzima-cofactor
catalticamente activo recibe el nombre de
holoenzima. Cuando se separa el cofactor, la
protena restante llamada apoenzima es inactiva
catalticamente. Muchas enzimas se almacenan en la

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clula en estado inactivo (proenzima o zimgeno) debido a que pueden actuar y atacar la sustancia
misma de la clula.
Dentro de las diferentes enzimas que se forman en los seres vivos, encontramos a las enzimas
antioxidantes denominadas catalasas. La participacin de las catalazas en la catlisis son importantes
para la vida, estas ayudan a descomponer el perxido de hidrgeno (un agente oxidante poderoso y
daino) en oxgeno y agua, previniendo la acumulacin de burbujas de dixido de carbono en la
sangre. La catalasa es una enzima muy
potente, una molcula de catalasa
puede
descomponer
millones
de
molculas de perxido de hidrgeno en
oxgeno y agua. El perxido de
hidrgeno es uno de los productos del
metabolismo
celular
en
diversos
organismos, pero dada su potencial
toxicidad, es transformado enseguida
por la enzima catalasa. Adems, la
catalasa cumple una funcin protectora
contra determinados microorganismos
patgenos, sobre todo anaerobios. Las
bacterias anaerobias, mueren al estar
en contacto con oxgeno, es por esta
razn que el oxgeno producido por esta
enzima tiene efecto bactericida sobre
estos microorganismos.

RECONOCIMIENTO DE CATALAZAS EN TEJIDOS ANIMALES Y


VEGETALES Y EL EFECTO DE LA TEMPERATURA, CIDOS Y
ALCALIS SOBRE SU ACTIVIDAD ENZIMTICA
II. COMPETENCIAS
Determina la presencia de catalasas por su accin enzimtica en tejidos animales y vegetales.
Comprueba el efecto de la temperatura sobre la actividad enzimtica en diferentes tejidos biolgicos.
Demuestra cmo influye el cambio de pH (cido y alcalino) en la actividad enzimtica en diferentes
tejidos biolgicos.
Valora la importancia de las enzimas en la realizacin de los procesos biolgicos y la alteracin de su
actividad funcional cuando se exponen a factores fsicos y qumicos.
.

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1. MATERIALES Y EQUIPOS
1.1 MATERIALES Y MUESTRAS
MATERIAL INDIVIDUAL: (Bajo responsabilidad de los estudiantes)

Un marcador de tinta indeleble


Gorro
Mandil
Guantes
Mascarilla
Gotero
Jeringa de 5ml desechable
Una capsula de ENZIMATIC O FRUTENZIMA (capsulas que lo encuentras en cualquier botica)

MATERIAL GRUPAL: (Bajo responsabilidad de los estudiantes)

Paos limpiadores
Bistur u hoja de afeitar
Una caja de Fsforo
50 g de hgado de pollo
1 papa pequea
1 zanahoria pequea
1 manzana pequea
Chancador de ajos, pequeo
Cuchillo pequeo
100 ml de agua oxigenada

MATERIAL QUE ENCONTRARS EN EL LABORATORIO:

Reactivos: Perxido de hidrgeno, agua destilada.


Material de metal: Gradilla para tubos de ensayo, cuchillo pequeo.
Material de vidrio: Tubos de ensayo, mortero.
Goteros
Agua destilada
Mechero de alcohol
Escobilla lava tubos
Detergente
Frasco lavador
Alcohol
Lanceta estril
Materiales de diseccin: tijera, pinza, estilete.
Solucin salina fisiolgica esteril.
cido clorhdrico al 10 %
Hidrxido de sodio al 10%

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EXPERIMENTO 01
RECONOCIMIENTO DE ENZIMAS DIGESTIVAS COMERCIALES EN TEJIDOS
VEGETALES Y ANIMALES

II. PROCEDIMIENTO

N de
Tubo

1. Coger 04 tubos de ensayo limpios y enumrelos del 1 al 4.

1.

2.

Proceder segn la tabla adjunta:

3.

Agregar 3 cc. Disueltas de enzimas comerciales


(enzimatic o frutenzima) a cada uno de los tubos y
dejar actuar por espacio de 15 minutos.

4.

Agregar 3 cc. de perxido de hidrgeno en cada uno


de los tubos y agitar.

5.

Observe en cada uno de los tubos si hay actividad enzimtica.

6.

Esquematice, analice y explique la experiencia.

2.
3.
4.

Muestra

cantidad

Hgado
triturado
Papa triturada

2g

Zanahoria
triturada
Manzana
triturada

2g

2g

2g

EXPERIMENTO 02
RECONOCIMIENTO DE CATALAZAS EN TEJIDOS VEGETALES Y ANIMALES

I. PROCEDIMIENTO
N
de
Tubo

1.

Coger 04 tubos de ensayo limpios y enumrelos del 1 al


4

2.

.Proceder segn la tabla adjunta:

3.

Agregar 3 cc de perxido de hidrogeno a cada uno de


los tubos.

2.

4.

Agite cada uno de los tubos y observe el desprendimiento


de burbujas de oxgeno en ellos

3.

5.

Compare y ordene los tubos en forma decreciente, segn


la actividad de burbujeo.

4.

6.

Esquematice, compare los resultados de los cuatro tubos, analice y explique la experiencia.

1.

Muestra

cantidad

Hgado
triturado
Papa
triturada
Zanahoria
triturada
Manzana
triturada

2g
2g
2g
2g

EXPERIMENTO 03
EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LAS
CATALAZAS

II. PROCEDIMIENTO
1.

Coger 04 tubos de ensayo limpios y enumrelos del 1 al 4.

2.

Proceder segn la tabla adjunta:

3.

Agregar 3 cc de agua destilada a cada uno de los tubos.

4.

Hervir el contenido de cada uno de los tubos durante 5 minutos y deje enfriar.

5.

Retire el agua de cada una de las muestras

6.

Agregue 3 cc. de perxido en cada uno de los tubos

7.

Agite cada uno de los tubos y observe si hay actividad enzimtica en las muestras analizadas.

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8.

Esquematice, analice y explique la experiencia.

EXPERIMENTO 04
EFECTO DEL PH CIDO SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LAS CATALAZAS

II. PROCEDIMIENTO
1. Coger 04 tubos de ensayo limpios y enumrelos del 1 al
4.
2.

Proceder segn la tabla adjunta:

3.

Agregar 3 cc. de cido clorhdrico al 10 % a cada uno


de los tubos y dejar actuar por espacio de 5 minutos.

4.

Retirar el cido clorhdrico de cada uno de los tubos.

5.

Agregar 3 cc. de perxido de hidrgeno en cada uno


de los tubos y agitar.

6.

Observe en cada uno de los tubos si hay actividad


enzimtica.

7.

Esquematice, analice y explique la experiencia.

N
de
Tubo
1.

2.
3.
4.

Muestra

cantidad

Hgado
triturado
Papa
triturada
Zanahoria
triturada
Manzana
triturada

2g
2g
2g
2g

EXPERIMENTO 05
EFECTO DEL PH ALCALINO SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LAS CATALAZAS

II. PROCEDIMIENTO
8. Coger 04 tubos de ensayo limpios y enumrelos del 1 al
4.
9.

N
de
Tubo

Proceder segn la tabla adjunta:

10. Agregar 3 cc. utilizando hidrxido de sodio al 10% a


cada uno de los tubos y dejar actuar por espacio de 5
minutos.
11. Retirar el
tubos.

1.

2.
3.

hidrxido de sodio de cada uno de los


4.

12. Agregar 3 cc. de perxido de hidrgeno en cada uno


de los tubos y agitar.

Muestra

cantidad

Hgado
triturado
Papa
triturada
Zanahoria
triturada
Manzana
triturada

2g
2g
2g
2g

13. Observe en cada uno de los tubos si hay actividad enzimtica.


14. Esquematice, analice y explique la experiencia.

CUESTIONARIO
1. Qu diferencia hay entre una coenzima y un grupo prosttico?
2. Qu son los peroxisomas y cul es su funcin en las clulas?
3. Explique que es la acatalasia o enfermedad de Takahara
4. Cul es el principio activo de la frutenzima y del enzimatic (contenido,
descripcin , indicaciones teraputicas, contraindicaciones, etc?

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