Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
INTRODUCCIN
MicroARNs (miRNAs) son endgenos ARNs cortos no codificantes que regulan
negativamente la expresin de genes diana mediante la unin a su 3'-UTR [ 1 ]. MiRNAs
funcionan como reguladores en un proceso biolgico amplio. La desregulacin de miRNAs
ejerce una fuerte influencia en la progresin de la enfermedad, cambiando la expresin de
genes diana en diversos tumores [ 2 , 3 ]. Cada vez son ms los datos han sugerido que los
miRNAs podran ser potenciales biomarcadores de cncer colorrectal en estadio temprano
(CRC) ya que no pueden ser degradados con facilidad y sus niveles de expresin de los
plipos colorrectales, sangre y heces pueden dar un indicio de la aparicin de la
enfermedad . CRC representa el 10% de los nuevos casos de cncer y es una de las
principales causas de muerte en todo el mundo (ms de 1,23 millones de muertes por ao)
[ 4 ]. Hasta la fecha, los mtodos comunes para el diagnstico precoz de CRC son la
tomografa computarizada (TC), prueba de sangre oculta en heces y la colonoscopia (SOH)
[ 5 ]. Sin embargo, la TC tiene una baja sensibilidad para el diagnstico de CCR precoz y
podra resultar en una gran exposicin a la radiacin [ 6 ]. La colonoscopia tambin es caro
y aumenta el riesgo de morbilidad o mortalidad debido a la perforacin del intestino [ 7 ],
aunque se puede detectar de manera efectiva ocurrencia neoplsica y permitir la extirpacin
de los plipos cuando se encuentran. FOBT se usa comnmente, pero otras enfermedades
del aparato digestivo como la colitis ulcerosa y las hemorroides tambin pueden causar
sangre en las heces [ 8 ] por lo que la deteccin de sangre oculta en heces no es una prueba
sensible para un diagnstico precoz. En conjunto, las metodologas actuales para la
deteccin temprana son ni sensibles ni especficos. La expresin diferencial de los genes
miARN en individuos CRC vs individuos normales es un evento comn y puede ser
fundamental para la aparicin y progresin tumoral. Lo que es ms, algunos miRNAs
desregulados estn asociados con la progresin y el grado de malignidad de CCR. Mltiples
estudios han identificado los valores de miRNAs en el diagnstico del CCR. Algunos
informes indican que el cambio de los niveles de expresin de miRNAs se correlacionan
estrechamente con la progresin del cncer y el pronstico [ 9 - 11 ]. A continuacin, se
revisa la literatura para resumir la asociacin de algunos miRNAs importantes con el
diagnstico en etapa temprana, el pronstico y la recurrencia de la CRC y discutir algunos
miRNAs que podran dar una pista para guiar las decisiones de tratamiento (tabla (Tabla
11 ).
Resumen de las funciones de los microRNAs en el cncer colorrectal
MIRNA
progresin de la enfermedad
biomarcador
Tratamiento
MiR-21
El aumento de miR-21 se
Disminucin de miR-
21 sensibiliza a las
tratamiento [21 ]
metstasis linfticos en
[ 30 ] miR-21 en el suero [ 33 ]
MIRNA
progresin de la enfermedad
biomarcador
de CRC
Tratamiento
MiR-29
MiR-29a como un
[ 38 , 39 , 42 ] Regulacin al alza de
prediccin de la supervivencia
[ 48 ]
DFS y OS [ 48 ]
MiR-
MiR-34a como un
El aumento de miR-
34a
[ 57 ] miR-34a predicados
tratamiento [ 58]
[ 59 ] El aumento de miR-34b / c
[59 ]
MIRNA
progresin de la enfermedad
biomarcador
MiR-
124a
y el CRC [ 65 , 66 ] La metilacin de
evaluar el riesgo de
carcinognesis en pacientes
con CU [71 ]
MiR-
El aumento de miR-130b en
130b
MIR-
139-3p
pobres [ 82 ] miR-139-3p en el
disminuyen la supervivencia,
la ocurrencia de CRC [ 84 ]
estadios TNM I y II [ 82 ]
MiR-
155
de pronstico para la SG y
[ 85 ] El aumento de expresin de
miR-155 postoperatoria
Tratamiento
MIRNA
progresin de la enfermedad
biomarcador
[ 11 , 86 ]
Tratamiento
MiR-
Supresin de miR-224
224
CRC sensibiliza a la
ms corta y la supervivencia
quimiorradioterapia
libre de metstasis [ el
[ 94 ]
de clulas CRC [ 95 ]
90 - 93 ]
MiR-
MiR-378 en el plasma
378
muestras de CRC [ 96 , 97 ] y
aparicin de CCR
invasin y la angiognesis [ 98 , 99 ]
La expresin de miR-378 se
UC: La colitis ulcerosa; CRC: El cncer colorrectal; OS: La supervivencia global; DFS: la
supervivencia libre de enfermedad.
MiR-21
y la metstasis en este estudio, con elevada miR-29a que indica metstasis y peor
supervivencia de pacientes con CRC. Wang et al [ 42 ] reclut a un total de 114
participantes, incluyendo 58 pacientes con metstasis hepticas y 56 pacientes con CCR no
metastsico, en su estudio, ya que la metstasis heptica colorrectal es ms
comn. Descubrieron que la expresin de miR-29a en el suero es significativamente
elevada en pacientes con metstasis hepticas de cncer colorrectal. Adems, la expresin
significativamente elevado de miR-29a se encontr en pacientes con CCR avanzado estadio
tumoral T, mientras que el miR-29a muestra un alzado no significativa en los pacientes con
estadio tumoral avanzado N. En consecuencia, descubrieron que miR-29a puede servir
como una herramienta de cribado no invasivo prometedor econmica para la deteccin
temprana de metstasis hepticas colorrectal [ 42 ]. En conclusin, la alta expresin de
miR-29a se asocia con un mal pronstico y la metstasis.
En cuanto a la prediccin de la recurrencia temprana de CRC, Kuo et al [ 43 ] encontr que
tanto el miR-29a y miR-29c muestran disminucin de los niveles de expresin de manera
significativa en 43 pacientes con recurrencia temprana en comparacin con 35 pacientes de
recurrencia no temprano. El aumento de miR-29a o el aumento de miR-29c sugiere un
mejor resultado a los 12 meses. Sin embargo, slo miR-29a se puede utilizar como un
factor de prediccin de la recurrencia temprana. Que el miR-29c no pueda predecir la
recurrencia temprana puede ser debido a un seguimiento corto o un pequeo tamao de la
muestra [ 43 ]. Por otra parte, tambin se encontr el valor pronstico de miR-29a en la
etapa II CRC. Weissmann-Brenner et al [ 44 ] examinaron el perfil de expresin de
microARN matriz en 51 etapas I y II etapa de 59 muestras de CRC y luego 903 expresiones
miARN se verificaron mediante qRT-PCR. Los autores definieron mal pronstico como
recurrencia dentro de los 3 aos de la ciruga. Sus datos revelaron que en la etapa II, el
miR-29a muestra nicamente una diferencia obvia entre los pacientes con buen pronstico
y los que tienen mal pronstico. Sin embargo, en la etapa I, no hay miRNA con diferentes
expresiones entre los dos grupos. El resultado mostr el valor pronstico de miR-29a en la
recurrencia en pacientes con estadio II. Tambin concluyeron que el aumento de la
expresin de miR-29a se asocia con un DFS ya [ 44 ].
MiR-29b: Como miembro de la familia de miR-29, miR-29b es el ms altamente
expresado en la familia miR-29 y se encuentra en dos loci genmico [ 45 ]. MiR-29b puede
inhibir la proliferacin e inducir la apoptosis en clulas de CRC y mediar en la inhibicin
de la transicin epitelio-mesenquimal (EMT), que est estrechamente relacionado con el
pronstico de la CRC. Por otra parte, Yuan et al [ 46] realiz QRT-PCR para probar el miR29b en 41 muestras de CRC emparejado emparejados-e inform que el miR-29b se reduce
significativamente en el CCR, lo que sugiere que el miR-29b est asociada con el tamao
del tumor, estadio clnico avanzado y los ganglios linfticos metstasis de CCR
34a sensibiliza las clulas de manera significativa al tratamiento con 5-FU y inhibe el
crecimiento celular [ 58 ]. Adems, miR-34a como un biomarcador recurrencia se ha
investigado. En dos cohortes independientes de 268 pacientes con CRC, la expresin de
miR-34a se asocia positivamente con la supervivencia de DFS y puede servir como un
factor pronstico de recidiva del CCR. Adems, en comparacin con los pacientes con
expresin de p53-negativos, miR-34a es mucho mayor en aquellos con la expresin de p53positivo.Los autores concluyeron que miR-34a inhibe el crecimiento celular y la invasin
de CRC de una manera dependiente de p53 y predice recurrencia en la etapa II y III
pacientes con CRC [ 59 ].
Ms recientemente, los efectos de la familia miR-34 en el pronstico tambin se estudiaron
de manera sistemtica en el CCR y un aumento de miR-34b / c predominantemente
expresados en tejidos estromales se revel que se asocia con un mal pronstico en el CCR
[ 60 ]. La relacin entre miR-34b / c y el desarrollo de la enfermedad se investig en
muestras de CRC de 159 americano y 113 chino de QRT-PCR. Encontraron que el miR-34b
/ c se acumula en tumores avanzados y asociada con un mal mortalidad especfica por
cncer en dos cohortes independientes. TP53 regula la expresin de miR-34b / c en el nivel
transcripcional. Por otra parte, en comparacin con el tejido epitelial, miR-34b / c es mucho
mayor en el estroma del cncer. En conjunto, el miR-34 b / c puede contribuir a la
interaccin con el cncer estromal asociado con la progresin del CCR. Todos los datos
presentados anteriormente revelaron que la familia miR-34 podra ser una herramienta ideal
para predecir el pronstico y la recurrencia en el CCR.
MiR-124a
MiR-124a es conocido como un gen supresor de tumor, que se ha demostrado que regular a
la baja oncognico quinasa dependiente de ciclina 6 (CDK6) que participan en la
carcinognesis, lo que resulta en la detencin del ciclo celular en la transicin G1-S puesto
de control [ 61 , 62 ]. Se inform de miR-124a que se expresa en niveles bajos en CRC
debido a la metilacin [ 63 ]. Por un lado, el miR-124a es el ms frecuentemente metilado
en el CCR en comparacin con otros tipos de tumores, lo que indica el estado de metilacin
de miR-124a puede ser un marcador especfico de la CRC. Como se ha mencionado por
Deng et al [ 64 ], la menor expresin de miR-124a est asociado con la metilacin de la
misma y el tratamiento con 5-aza-2 'desoxicitidina puede inducir la expresin de miR124a. Entre CRC, cncer del pncreas, estmago, hgado, pulmn, mama, rin y prstata y
melanoma, encontraron que CRC muestra la ms alta frecuencia de metilacin de miR124a y una alta frecuencia de metilacin de miR-124a tambin se observ en plipos
[ 65 , 66 ]. Juntos, la metilacin de miR-124a puede ser un evento temprano en todas las
vas de la carcinognesis colorrectal. Por otro lado, la transcripcin de miR-124a es
controlado por la metilacin del ADN de las regiones promotoras de tres isoformas miR124a (miR-124a-1, 2 y 3) en el CCR [ 61 , 62 , 67 , 68 ]. Se saba que la metilacin
aberrante de miR-124a se induce en la inflamacin crnica [ 69 ]. En la mucosa colorrectal
de pacientes peditricos con colitis ulcerosa (UC), se inform de miR-124a para regular
positivamente la expresin de transductor de seal y activador de la transcripcin 3
(STAT3), que es un factor importante en la respuesta inflamatoria [ 70 ], lo que indica que
silenciamiento de miR-124a est relacionada con la promocin de la inflamacin en la
mucosa colorrectal a travs de la va de sealizacin STAT3. Ueda et al [ 71 ] a prueba el
nivel de miR-124a en 40 pacientes con CU sin CRC, 4 pacientes con CCR o displasia, 8
pacientes con CCR espordicos y 12 controles normales. Encontraron que el miR-124a-1, 2
y 3 genes son todos CDK6 metilado y dependiente de ciclina, como el objetivo de miR124a, se eleva en muestras neoplsicas. El nivel de metilacin de miR-124a-3 es
significativamente mayor en la pancolitis que en AT y los niveles de metilacin en CU de
larga son ms altos que en el corto plazo la UC. Adems, en contraste con los pacientes sin
larga data UC y pancolitis, el nivel de metilacin de los pacientes con estos factores de
riesgo muestra un aumento 7,4 veces. En conjunto, la metilacin de miR-124a-3 est
emergiendo durante la oncognesis en pacientes con CU y podra ser utilizado para estimar
el riesgo individual de cncer.
MiR-130b
orientacin SMAD4 y miR-224, solo o combinado con SMAD4, puede ser un marcador
pronstico independiente para la supervivencia de los pacientes con CCR. Los resultados
clnicos correlacionados con el estado de miR-224 se analizaron en 6 conjuntos de 449
casos de CCR con el fin de evaluar la diferencia en la supervivencia entre los pacientes con
niveles bajos o altos de expresin de miR-224. Sus datos indicaron que la expresin de
miR-224 aumenta consistentemente con la carga tumoral y el estado de microsatlites
estabilidad y mejora la CRC metstasis a travs de la orientacin SMAD4. Los pacientes
con altos niveles de miR-224 muestran OS ms cortos en mltiples cohortes CRC y ms
corto de supervivencia libre de metstasis [ 90 , 91 ]. En consonancia con los datos de
laboratorio de Nicoloso, Zhang et al [ 92 ] tambin seal que SMAD4 est regulada por el
miR-224, lo que sugiere el miR-224 como un nuevo biomarcador para la recurrencia de la
CRC. Se recogieron un total de 108 en estadio I-II pacientes con cncer colorrectal que
recibieron reseccin radical y evaluar la informacin clnico-patolgico de 40 pacientes con
recidiva tumoral y 68 sin recada dentro de los 3 aos despus de la ciruga. Sus datos
sugirieron que el miR-224 se increment notablemente en los tejidos de CRC y de esta
regulacin al alza est asociada con la recurrencia y la mala DFS. Mediante el anlisis de
los plipos precancerosos, una conclusin similar se consigue mediante Adamopoulos et al
[ 93 ]. Adems, el miR-224 tambin tiene algunos vnculos con el tratamiento de la
CRC. Quimiorradioterapia preoperatoria (CRT) es el tratamiento estndar para el cncer de
recto localmente avanzado y miR-224 fue encontrado para dar lugar a un aumento de la
resistencia a la TRC en lneas celulares de CRC [ 94 ]. En otro estudio, cuando la expresin
de miR-224 se investig en 79 muestras de pacientes con CRC y 18 controles sanos, miR224 en los tejidos de CRC se downregulated en gran medida. Por otra parte, el miR-224
suprime la capacidad migratoria de la lnea celular CRC travs de la orientacin Cdc42. En
una palabra, esta investigacin indica la funcin vital de miR-224 en la supresin de la
migracin de clulas de CCR. Concluyeron que miR-224 se podra usar como un
biomarcador prometedor para predecir el desarrollo de CRC. La alta expresin de miR-224
predice la recada de corta duracin y la supervivencia libre de metstasis ms corto y,
adems, el miR-224 puede aumentar la resistencia a la TRC [ 95 ]. Colectivamente, miR224 puede ser un biomarcador pronstico para predecir el pronstico de supervivencia de
los pacientes.
MiR-378
expresin de miR-378 entre los individuos con cncer e individuos sanos de sangre y en los
tejidos tumorales. Por ejemplo, Hauser et al [ 100 ] inform de que miR-378 en suero es
significativamente mayor en 25 pacientes ccRCC en comparacin con 25 individuos
sanos. Liu et al [ 101 ] mostr que el suero miR-378 podra servir como un nuevo
biomarcador no invasivo en la deteccin de cncer gstrico. Todo lo anterior sugiere que
miR-378 podra ser un posible biomarcador tumoral. Por otra parte, el miR-378 en el
plasma puede tener la capacidad de prediccin ms alta en el CCR [ 102 ]. Los autores
investigaron adicionalmente la expresin de los genes miARN en el plasma de 65 pacientes
de CRC y 70 individuos sanos y encontraron que miR-378 aumenta de manera significativa
en el plasma de pacientes con CRC una vez que el nivel de miR-378 se pone en particular
despus de la ciruga. Adems, tambin se encontr que la expresin de miR-378
disminuye en pacientes que no tienen ninguna recada dentro de los 4-6 meses despus de
la ciruga, lo que explica, adems, que los niveles plasmticos de miR-378 se pueden
utilizar para discriminar pacientes con CRC de individuos normales [ 102 ].
Sin embargo, en otro estudio, Zhang et al [ 103 ] seal la regulacin a la baja de miR-378
en 84 pares emparejados CRC muestras y lneas celulares. MiR-378 se consider un
inhibidor de tumor, ya que puede suprimir el crecimiento de clulas tumorales en un
modelo de ratones desnudos [ 103 , 104 ].Adems, existe una fuerte asociacin entre la
reduccin de miR-378 y un aumento de volumen del tumor, metstasis y OS corto de
pacientes con CRC. En consonancia, el miR-378 como un supresor de tumores tambin fue
observada por Wang et al [ 105 ] despus de analizar la expresin de miR-378 en 47 pares
de muestras de CRC. Todo lo anterior sugiere que el miR-378 juega un papel vital en la
carcinognesis y podra servir como un biomarcador para predecir el resultado de la CRC.
En una palabra, el miR-378 puede predecir la presencia de CRC y servir como un
biomarcador potencial y razonable para el diagnstico precoz del CCR.
CONCLUSIN
Mirna podra ser una herramienta poderosa en el diagnstico y tratamiento de la CRC a
travs de la modulacin de diversas crosstalks de vas de sealizacin
oncognicas. MiRNAs hemos discutido aqu son, hasta la fecha, el estudio ms exhaustivo
miRNAs supresores / potenciador de tumores en el CCR.A travs in vivo e in
vitro experimentos, los miRNAs relacionados han demostrado que estn alteradas en el
CCR y de ser posible, las herramientas de diagnstico, pronstico y teraputico ideal
(tabla (Tabla 1).1 ).Sin embargo, algunos obstculos en las terapias basadas en genes
miARN es necesario superar, tales como la degradacin por nucleasas, la ineficiencia de las
MEYERHOLZ et al., 2002; Geddes et al., 2007). En reciente aos, nuestra visin de la
interaccin clula de Salmonella-anfitrin tiene considerablemente evolucionado.
Siempre se ha supuesto que la Salmonella entra en la clula husped a travs de la
denominada mecanismo de disparo, que requiere un sistema de secrecin de tipo tres,
llamada SST3-1 y que era el centro de atencin desde hace ms de diez aos (y
Marlovits Stebbins, 2010). Sin embargo, estudios in vitro han demostrado que La
salmonela puede utilizar varias formas de invadir nonphagocytic la clula husped
(Rosselin et al., 2010). La caracterizacin de una de la va de invasin SST3-1independiente ha demostrado la capacidad de Salmonella para invadir las clulas a
travs de un mecanismo de cremallera mediada por una protena de membrana
externa invasina llamado Rck.
Por lo tanto , Salmonella es la primera bacteria demostrado ser capaz para invadir las clulas
hospedadoras por tanto los mecanismos de disparo y la cremallera ( Rosselin et al . , 2010) .
Despus de la invasin en eucariotas clulas , la mayora de las bacterias permanecen en un
fagosoma modificado llama la vacuola que contiene Salmonella - ( SCV ) . A pesar de que el SCV
ha sido considerado como el lugar principal para intracelular Salmonella, esta bacteria parece tener
un distinto estilo de vida bimodal replicarse en SCV , as como en el citosol de las clulas
epiteliales ( Steele - Mortimer , 2008; Malik - Kale et al , . 2012) ( Figura 1 ) . Sin embargo, poco se
sabe acerca de los mltiples mecanismos de entrada y la proliferacin en clulas husped y su
papel en la enfermedad de Salmonella y la especificidad del hospedador. Por lo tanto, esta revisin
se centra en cmo nuestra comprensin de Salmonella patogenicidad ha evolucionado con el
tiempo, mostrando cmo esta bacteria manipula la clula husped utilizando diferentes estrategias
para la invasin y el establecimiento de un nicho intracelular.
Diversidad de entrada I- Salmonella estrategias: la cremallera vs. Gatillo
Bacterias intracelulares han evolucionado dos estrategias diferentes para invadir las
clulas no fagocticas mediante la modulacin del citoesqueleto de actina: la
cremallera y los mecanismos de activacin. Las bacterias, tales como Shigella flexneri,
entran en las clulas husped a travs de una mecanismo de activacin y el uso de un
T3SS efectores bacterianos protenas (Schroeder y Hilbi , 2008) . Otras bacterias tales
como Listeria monocytogenes y Yersinia pseudotuberculosis utilizar el mecanismo de
cremallera para invadir anfitrin nonphagocytic Clulas. Estas bacterias expresan una
protena de superficie capaz de unirse receptores de la superficie eucariotas. Esta
interaccin conduce a la la activacin de vas de sealizacin clula husped que
inducen la actina polimerizacin y la captacin de bacteria ( Cossart y Sansonetti ,
2004 ) . Sin embargo, en contra de Salmonella, ninguno de estas bacterias se ha
demostrado que es capaz de invadir anfitrin clulas utilizando ambos mecanismos de
cierre y de disparo.
El estudio del mecanismo de Salmonella invasin de clulas husped ha sido iniciado
por Takeuchi en 1967 (Takeuchi, 1967). Hasta hace poco, se ha supuesto que la
Salmonella invade las clulas husped slo a travs de un mecanismo de entrada de
disparador, lo que requiere la T3SS-1, codificado por la isla de patogenicidad
Salmonella (SPI-1). El T3SS es una complejo de la aguja se encuentra en muchos
patgenos Gram-negativos, y un alto grado de homologa se ha encontrado entre la
aparatos SST3 de Salmonella y Shigella (Groisman y
Ochman, 1993; Galn & Wolf-Watz, 2006). Para muchos aos, la mayora de las
investigaciones se han centrado en la comprensin y la descripcin de este sistema
sofisticado invasin, tanto en los niveles bacterianos y moleculares (McGhie et al.,
2009; Moest y Meresse, 2013). Sin embargo, evidencias recientes han demostrado que
las estrategias de entrada de Salmonella serovares demostraron ser ms diversificada.
Contrario a lo que se ha pensado, la T3SS-1 no es el nico estrategia de entrada de
Salmonella (Coombes et al, 2005; Desin et al., 2009; Rosselin et al., 2010). De hecho,
varios estudios han demostrado que las cepas de Salmonella que carecen de SPI-1 son
capaces de invadir in vitro numerosas clulas e inducir en vivo patologas intestinales
tanto en seres humanos y diferente modelos animales (Hu et al, 2008;.. Aiastui et al,
2010). Por ejemplo los estudios in vitro han demostrado que la Salmonella no requera
su T3SS-1 para entrar en un 3 dimensiones epitelio intestinal.
Murray et al. Tambin han demostrado que en un modelo murino, S. Typhimurium ADSPI-1
mutante no fue afectada en la infeccin del bazo de los ratones infectados, lo que sugiere que
T3SS-1 de S. typhimurium no est involucrado en el paso a travs de la barrera intestinal y la
infeccin de rganos sistmicos (Murray y Lee, 2000). Adems, se ha observado que S.
Typhimurium con un no funcional T3SS-1 todava tiene la capacidad de infectar a los ratones
despus de la inoculacin intraperitoneal, sino tambin los pollitos despus de la inoculacin oral
(Galn y Curtiss, 1989;. Morgan et al, 2004). En general, estos datos sugieren que otra invasin
vas participan en la infeccin por Salmonella. Entre estos mecanismos, una investigacin reciente
ha demostrado que la Salmonella tambin puede invadir las clulas no fagocticas por una
cremallera mecanismo a travs del invasina Rck, una protena codificada por el gen rck situado en
el plsmido de virulencia grande (Rosselin et al., 2010). Esta protena no se expresa en todos los
serotipos de Salmonella. Est altamente conservada en nonhost serotipos especficos tales como
S. enteritidis y S. typhimurium, que podra ser encontrado en S. Dublin, pero nunca ha ha
detectado en los otros serotipos de Salmonella (Rychlik et al., 2006; Futagawa-Saito et al., 2010).
En Salmonella, la internalizacin bacteriana mediada por Gatillo o mecanismos de
cremallera implica la remodelacin de la actina probablemente a travs de la
estimulacin de los receptores vas de sealizacin celular. El mecanismo de disparo
invasin est mediada por la inyeccin de un cctel de protenas efectoras en clulas
husped inducir directa o indirectamente importantes reordenamientos del
citoesqueleto conocida como "membrana volantes '(Schlumberger Y Hardt, 2006).
Estos eventos estn mediados por un subconjunto de T3SS efectores-1 (SIPA, SIPC,
SopB, Sope, SopE2). Los protenas SIPA y SIPC se unen directamente actina impidiendo
su despolimerizacin (McGhie et al., 2001). El SopB, Sope, y protenas SopE2
indirectamente modulan la actividad de actina por estimulantes Rho GTPasas de la
familia (Rac1 y Cdc42) requerido para la iniciacin de la polimerizacin de actina del
citoesqueleto a travs del complejo Arp2 / 3, un factor eucaritico implicada en el
control de redes de actina (Zhou y Galn, 2001; Patel y Galn, 2006). Una vez dentro
de la clula husped, otra protena efectora de los espectculos SptP T3SS-1denominado una actividad contrarrestar los de SopE y SopE2. Este efector inactiva Rho
GTPasas que permiten la restauracin de la actina y el regreso de la clula husped a
la normal estado (Murli et al., 2001). Los otros efectores T3SS-1 contribuyen a una
variedad de procesos tales postinternalization como la supervivencia de la clula
husped y la modulacin de la inflamacin espuesta. A diferencia del mecanismo de
entrada de disparador, la entrada de la cremallera mecanismo est mediada por una
interaccin de una bacteriana ligando con un receptor de la clula husped, lo que
induce una sealizacin cascada y una acumulacin local de actina, que slo lleva a
reordenamientos del citoesqueleto de actina y menores membrana estanca
extensiones (COSSART, 2004;. Rosselin et al, 2010). Hasta ahora, no est claro por qu
esta diferencia de membrana se observa reordenamiento y la polimerizacin de actina
entre estos dos mecanismos.
En el caso de Rck, su receptor celular no ha sido identificado todava, pero como se observa para
el mecanismo de activacin, la entrada mediada por rck involucrado socios de la clula husped
similares al igual que la pequea Rho GTPasas Rac1 y Cdc42, que conducen a la activacin de la
3 complejo Arp2 / y la movilizacin de actina reordenamientos, conduciendo a la absorcin de
bacteria (Unsworth et al., 2004, Rosselin et al, 2010;. Mijouin et al., 2012). Sin embargo,
contrariamente al mecanismo de disparo, la activacin de los socios Rho GTPasas parece
especfico para el proceso de entrada mediada por Rck. Este proceso es especialmente
dependiente de la activacin de la tirosina quinasa y PI3 quinasa de clase I que activa Akt (Mijouin
et al, 2012.; Wiedemann et al., 2012). El papel de Rck en Salmonella invasin ha sido claramente
demostrado y se encontr que depender de las lneas celulares y tipos de clulas (Rosselin et al.,
2011). Adems, el Rck opern parece estar controlada por la protena SdiA, una regulador
transcripcional de la deteccin de qurum (Ahmer et al., 1998; Abed et al., 2014). Sin embargo, su
contribucin en la patognesis de Salmonella sigue sin estar claro como el mecanismo de
induccin de la expresin Rck in vivo no est bien entendido.
Adems de Rck y T3SS-1, es un pagn otro invasina identificado ampliamente conserva
en la Salmonella gnero (Lambert y Smith, 2008). Se ha demostrado que la unin de
pagn a proteoglicanos de sulfato de heparina extracelular induce la invasin de
Salmonella. Esta membrana externa protenas (OMP) proceso de entrada mediada
requiere polimerizacin de actina, pero sigue siendo poco caracteriza (Lambert y
Smith, 2008). HlyE una hemolisina de formacin de poros codificada por SPI-18
tambin fue identificado como nueva virulencia determinante que parece mejorar la
invasin de Salmonella algunos tipos de clulas, pero el mecanismo exacto de la
invasin sigue siendo desconocido (Fuentes et al., 2008). En Salmonella, otra invasin
desconocida y no identificada factores parecen estar involucrados durante la entrada
de la clula. En efecto, se ha demostrado que una cepa de Salmonella no expresando
Rck, pagn, y T3SS-1 todava tiene la capacidad de introducir diferentes tipos de clulas
(Rosselin et al., 2011). Microscpico observaciones dentro de los diferentes tipos de
clulas tienen tambin mostraron que estos factores desconocidos inducen
citoesqueleto y reordenamientos de membrana similares a las mediadas por cualquiera
de los mecanismos de activacin de la cremallera o (Rosselin et al., 2011). La cascada
de sealizacin inducida por estos desconocido factores parece especfico porque
Aiastui et al. (2010) tienen se muestra que la entrada de Salmonella en inmortalizada
humana fibroblastos de prepucio no se requiere ningn tipo de Rho GTPasas (Rac1,
Cdc42, RhoA, o RhoG) y participa en Rck vas SST3-1 invasin. Adems, para S.
typhimurium, una nueva va de invasin fruncido-independiente que pudiera operar
independientemente de Arp2 / 3 complejo tiene recientemente ha descrito. Este
mecanismo de entrada se basa en la formacin de miosina II estructuras ricas en fibra
como el estrs en la invasin sitios a travs de la activacin de la sealizacin de
quinasa RhoA / Rho va (Steffen et al, 2004;.. Hanisch y col, 2012). En general, estas
observaciones abren nuevas perspectivas para identificacin de nuevos factores de
invasin. Hasta ahora, no es serotipos de Salmonella claro por qu utilizan mltiples
estrategias para invadir clulas husped. Una posible explicacin es que el desarrollo
de mecanismos de entrada alternativos mediada por diferentes invasinas ha ampliado
el espectro de las clulas husped, que puede ser invadido por este patgeno
intracelular.
II- Salmonella estilo de vida intracelular: Citoslica frente a la replicacin vacuolar
En general, despus de la invasin de clulas eucariticas, las bacterias son
interiorizado dentro de un compartimiento unido a la membrana. Muchos patgenos
bacterianos se han desarrollado diferentes estrategias para contrarrestar la respuesta
inmune de la clula husped, ya sea por la prevencin de la fusin vacuola-lisosoma,
modificando su vacuola o por escapar en citosol. Por ejemplo, Escherichia coli modula
el proceso de maduracin de su vacuola a evitar la fusin con lisosomas (Kim et al.,
2003), mientras que Listeria onocytogenes, Shigella flexneri, Francisella tularensis, y
algunas especies de Mycobacterium tienen la capacidad de escapar pronto de la
vacuola naciente para entrar en el citoplasma y explotarla como hbitat para el
crecimiento y la replicacin (Ray et al., 2009). Histricamente, la Salmonella se ha
clasificado como un patgeno vacuolar. Tras la invasin de acogida clulas, esta
bacteria reside y se multiplica dentro de la SCV, una vacuola especializado que ha sido
considerado, para una mucho tiempo, como el nico nicho intracelular de Salmonella
(Bakowski et al., 2008). Sin embargo, la evidencia reciente tiene demostrado que una
proporcin de Salmonella intracelular puede escapar de la SCV y replica de manera
eficiente en el citosol de las clulas epiteliales, lo que indica que esta bacteria tiene un
estilo de vida intracelular bimodal (Malik-Kale et al., 2012). Este fenmeno es, sin
embargo, no se observa en algunos celular tipos, tales como macrfagos, donde las
bacterias son citoslicas incapaces de sobrevivir o crecer debido al ambiente letal del
citosol (Beuzon et al, 2002;. Kndler et al., 2010).
Despus de la internalizacin en las clulas epiteliales, el SCV se somete a diferentes
etapas de maduracin similar a la de macrfagos. El SCV recin formado se enriquece
en marcadores de endosoma temprano como Rab5, EEA1 (principios antgeno
endosoma 1), y TfR (receptor de transferrina), los cuales son sustituidos
posteriormente por el endosoma tardo y marcadores lisosomas, como Rab7, LAMP-1
(lysosomalassociated protena de membrana 1), y V-ATPasa que permite la acidificacin
de los VCS (pH 4-5). Algunos marcadores tales como manosa-6-fosfato Receptor
(M6PR) que participan en la entrega de hidrolasas lisosomales a la endosomal sistema
no se presentan por el VCS para evitar la fusin con lisosomas (Steele-Mortimer et al.,
1999. Bakowski et al, 2008). A medida que el SCV madura y est rodeado de actina, se
migra hacia una posicin perinuclear e inicia la formacin de filamentos de Salmonella
inducida (SIF), el cual asegurar la entrega de nutrientes al SCV, facilitando de esta
manera la replicacin bacteriana (KNDLER y Steele-Mortimer, 2003; Salcedo y Holden,
2003).
En las clulas epiteliales, un defecto en la maduracin vacuola conduce a veces a la
liberacin de Salmonella en la celda en nutrientes rica citosol que puede soportar una
alta replicacin bacteriana tasa (Brumell et al., 2002,. KNDLER et al, 2014). Ahora
est bien documentado que, la red intracelular el crecimiento de Salmonella es el
producto de ambos vacuolar y replicacin citoslicas y de la destruccin de bacterias
intracelulares. La cuantificacin de la contribucin Salmonella citoslica de la poblacin
total en diferentes clulas epiteliales lneas y en condiciones de alteracin de escape
tiene vacuolar muestra que la Salmonella citoslica replicar a mayor velocidad que las
bacterias vacuolar, que ha sido denominado hyperreplication (Se estima que 100
bacterias por clula) (KNDLER et al., 2014). Adems, se ha informado de que
citoslica
hiper-replicacin se produce en una minora (<20%) de las clulas epiteliales
infectadas (Malik-Kale et al., 2012). Sin embargo, dentro de las clulas de fibroblastos,
muy limitado proliferacin de Salmonella se ha descrito. Se ha demostrado que en s
Salmonella contribuye a atenuar la intracelular tasa de crecimiento como reguladores
de virulencia bacterianas, tales como sistema de PhoP / PhoQ, estn involucrados en la
prevencin bacteriana crecimiento excesivo en el entorno intracelular de primaria
fibroblastos (Cano et al., 2001). La fuga de Salmonella a partir de la VCS y su hiperreplicacin en el citosol de las clulas epiteliales se considera como un paso de
transicin que precede a la salida de las bacterias en el extracelular ambiente.
Salmonella citoslica es detectado por el anfitrin clulas epiteliales, lo que lleva a una
respuesta inflamatoria caracterizada por la activacin de la caspasa 1 y caspasas 3/7, y
la liberacin apical de IL-18, una citocina importante regulador de la inflamacin
intestinal (Monack et al., 2001). Las clulas muertas se, por lo tanto, se extruye fuera
de la monocapa, la liberacin de SPI-1 inducida y flagelado Salmonella (Invasin
cebado Salmonella) en el lumen intestinal de las vas, lo que facilita la infeccin de
Salmonella a la vecina las clulas y su difusin en el cuerpo del anfitrin o para un
nuevo husped (Cliffe et al, 2005;.. KNDLER et al, 2010).
Los estudios que evalan la funcin de la virulencia de Salmonella factores en el
establecimiento de la vacuola y citoslica poblaciones intracelulares han demostrado
que T3SS-1 efectores, Adems de su papel en la invasin, estn involucrados en
principios etapas de la biognesis SCV (Steele-Mortimer et al., 2002). Por el contrario,
los efectores inyectaron por otro SST3, codificada por el SPI-2 y llamado SST3-2,
contribuir a ms tarde SCV incluyendo la biognesis vacuolar maduracin, bacteriana
moleculares entre Salmonella y las clulas husped se han dilucidado, pero muchas
preguntas todava sin respuesta. Por qu alternativa Salmonella ha desarrollado
mecanismos de invasin celular? Cmo esta bacteria podra modificar el nicho SCV y
adaptarse a la vida citoslica estilo? Cul es el papel de este nuevo fenotipo en
Salmonella patogenicidad? Los mecanismos de entrada afectan a la intracelular indujo
estilo de vida de Salmonella y la respuesta del husped? Puede ser, de hecho, la
hiptesis de que la va de entrada utilizado por Salmonella cepas son diferentes de
acuerdo con el serovar y la clula husped, lo que podra modificar la gama de
huspedes y / o la patogenicidad de esta bacteria. Adems, el existencia de sinergia
entre las diferentes vas de invasin utilizado por Salmonella no deben ser excluidos.
Por lo tanto, ms estudios deben llevarse a cabo en T3SS-1 mecanismos
independientes para identificar los receptores de acogida las vas de sealizacin
implicadas y el inducido. Promover Tambin se requiere investigacin para identificar
los factores bacterianos involucrados en la determinacin de Salmonella localizacin
intracelular y el papel jugado por cualquiera citoslicos o vacuolar proliferacin en
Salmonella patognesis
Figura . 1. Diferentes estrategias utilizadas por Salmonella para la invasin y
proliferacin en eucariotas
Clulas. Salmonella es capaz de invadir la clula husped a travs tanto un disparador
y un mecanismo de cremallera. El proceso de entrada de disparo est mediada por el
T3SS- 1 protenas efectoras y es morfolgicamente caracterizado por importante
citoesqueleto reordenamientos. Tras la entrada mecanismo dependiente de la T3SS-1,
Salmonella reside y se multiplica en el SCV que se somete a diferentes etapas de
maduracin, que es en parte debido a los efectores SST3-1. Replicacin de Salmonella
se acompaa de la formacin de FIS, que se extiende desde la superficie de la SCV,
facilitar la entrega de nutrientes al SCV. En el caso de la SCV ao, las bacterias pueden
ser destruidas ya sea despus de la fusin SCV-lisosoma o la respuesta autofagia. Por
ltimo, una porcin de bacteria es capaz de escapar de la SCV y multiplicar de manera
eficiente en el citosol de las epitelial Clulas. El mecanismo de cremallera mediada por
Rck induce un citoesqueleto de actina menor reordenamiento, lo que lleva a la
internalizacin de las bacterias en una vacuola, cuyo biognesis en estas condiciones
no tiene ha estudiado bien. La entrada pagN-mediada proceso requiere la
polimerizacin de actina, pero sigue siendo mal caracterizado.